微生物实验 07.微生物的接种及培养特征观察

利用微生物的培养特征，可以作 为 种类鉴定和识别纯培养是否被污染 的参考。
三、实验材料
菌种：枯草芽孢杆菌、大肠杆菌 培养基：牛肉膏蛋白胨的液体培养基、半固 体培养基和固体斜面培养基 器材：接种环、接种针、酒精灯等
四、操作步骤
（一）接种技术 1.斜面接种：从已长好微生物的菌种管移接到另 一斜面管的方法。此法用于好氧微生物的接种。 左手持菌种管和斜面管，使斜面向上，并尽量 放平。用右手先将棉塞拧转松动，灼烧接种环， 用右手的小指、无名指和手掌拨下棉塞并夹紧， 同时将管口在火焰上灼烧一圈，接种环灼烧灭菌 后插入管内，冷却、挑菌，立即转入斜面管底 部，沿斜面划线 曲线：用于培养菌种 直线：用于观察培养特征
3.穿刺接种（半固体培养基）： 用接种针挑取菌种后，从中间插入深层培养 基内，（不要刺到底部，3/4），再沿原路拔 出，此法用于厌氧细菌接种、检查细菌的运动 能力。 4.平板接斜面： 一般是将经平板分离培养得到的单菌落接 种到斜面，以便作鉴定或扩大培养、保存之用 。类似斜面接种。
பைடு நூலகம்
（二）在培养箱中培养 细菌36℃培养 真菌和放线菌在28℃培养 （三) 结果观察（细菌2d后看结果，放线菌 和真菌下周上课时观察）
淀粉培养基(g/L)
牛肉膏 5g 蛋白胨 10g NaCl 5g 淀粉 2g 琼脂 18g 水 1000ml pH 7.0-7.2 121℃灭菌20min 注：先用小烧杯称取 淀粉，加少量水调成 糊状，再加到沸水， 加热溶化，再加其它 成分。
明胶培养白基(g/L) 牛肉膏 3g 蛋白胨 10g NaCl 5g 明胶 120-180g 水 1000ml pH 7.0-7.2 121℃灭菌20min 注：先称取明胶，加适量水，加热溶 化后再加其它成分 乳糖蛋胨培养液 蛋白胨 10g 乳糖 5g NaCl 5g 1.6%溴甲酚紫乙醇溶液 1ml 蒸馏水 1000mlpH 7.2-7.4 注：最后加溴甲酚紫。 115℃灭菌20min
实验七 微生物的接种及培养特征观察
一、目的要求： 1、学习、掌握微生物的接种技术。 2、了解不同微生物在固体斜面、液体和半 固体培养基中的生长特征
二、实验原理 微生物的培养特征是指微生物培养在培养 基中所表现的群体形态和生长情况。 不同微生物在相同培养基上培养，群体形 态 和生长情况不同。
在斜面固体培养基上：呈丝绒状、刺毛 状、串珠状、舒展状、树枝状、假根状等 在液体培养基内：呈均匀混浊、絮状、粘 液状，液面形成菌膜，或上层清晰而底部呈 沉淀状等。 在半固体培养基内：可以沿接种线向四周 蔓延（有鞭毛）；仅沿线生长；或底部长的 好、上层不长；或上层生长而底部不生长等
2.液体接种： 由斜面菌接种到液体培养基（如试管或三 角瓶等）中的方法。 操作与上法基本一致，只是在将接种环送 入液体培养基中时使环在液体与管壁接触的 地方轻轻磨擦，使菌体分散，然后塞上棉 塞，再轻轻摇动均匀，即可培养。 如果菌种是在液体培养基培养时，一般用无 菌移液管、移液枪或滴管接种,也可用接种环。
注意事项
1、接种时严格无菌操作。 2、每次接种完毕要灼烧接种环（针） 3、斜面接种时，不要划破培养基，菌种不 要沾到管壁上。 4、液体培养基接种时培养基不要流出来或 沾染管口 5、穿刺时，手要稳，使穿刺线整齐。
作业
详细描述所用微生物在： 固体斜面培养基、 液体培养基 半固体培养基上的生长特征，并分析原因。