苏州大学生化 试题

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苏州大学生物化学题库

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生物化学试卷1答案一、名词解释:1.α-螺旋为蛋白质的二级结构类型之一。

在α-螺旋中,多肽链围绕中心轴作顺时针方向的螺旋上升,即所谓右手螺旋。

每3.6个氨基酸残基上升一圈,氨基酸残基的侧链伸向螺旋的外侧,α-螺旋的稳定依靠上下肽之间所形成的氢键维系。

2.Glycolysis: Aanaerobic degradation is universal and ancient central pathway of glucose catabolism. In glycolysis a molecule of glucose is degraded in a series of enzymatic reactions to yield two molecules of pyruvate or lactate. The basic process of glycolysis can be divided into two phase: reactions from glucose to pyruvate and from pyruvate to lactate.3.one carbon unit 一碳单位指某些氨基酸分解代谢过程中产生含有一个碳原子的基团,包括甲基、亚甲基、甲烯基、甲炔基、甲酰基和亚氨甲基等。

4.机体在生命活动过程中不断摄入O2及营养物质,在细胞内进行中间代谢,同时不断排出CO2及代谢废物,这种机体和环境之间不断进行的物质交换即物质代谢。

5.Expression vector:A modified plasmid or virus that carries a gene or cDNA into a suitable host cell and there directs synthesis of the encoded protein. Some expression vectors are designed for screening DNA libraries for a gene of interest; others, for producing large amounts of a protein from its cloned gene.6.核糖体:核糖体由rRNA与核糖体蛋白共同构成,分为大、小两个亚基。

苏州大学生物化学试卷(6)

苏州大学生物化学试卷(6)

苏州大学生物化学试卷(6)一、名词解释(每题3分,共30分。

凡进行双语教学的章节,英文名词解释如用中文回答,答对者只得1分):1.oxidative phosphorylation2.基因表3.遗传密码的摆动性4.维生素5.核酶6.酮体7.甲硫氨酸循环8.编码链9.β-折叠10.cori cycle二、填空(每空1分,共20分):1.肝细胞参与合成尿素中两个氮原子的来源,第一个氮直接来源于,第二个氮直接来源于。

2.成熟红细胞所需能量主要来自,因为红细胞没有线粒体,不能进行。

3.通过自动获取或人为地共给外源____,使细胞或培养的受体细胞获得新的____,这就是转化作用。

4.可逆性抑制作用中,抑制剂与酶的活性中心相结合,抑制剂与酶的活性中心外的必需基团相结合。

5.呼吸链复合体III又可称为________,它除含有辅助成分Fe-S外,还含有辅基_________。

6.酶的化学修饰主要有磷酸化与脱磷酸,,,腺苷化与脱腺苷及SH与-S-S-互变等,其中磷酸化与脱磷酸化在代谢调节中最为多见。

7.DNA复制需要RNA起作用,在原核生物复制中,它是由催化合成的。

8.磷酸吡哆醛及磷酸吡哆胺是维生素B6在体内的活性型,它们分别是及的辅酶。

9.和核糖或脱氧核糖通过键形成核苷。

10.含胆固醇最多的人血浆脂蛋白是______________,含蛋白质最多的人血浆脂蛋白是______________。

三、问答(每题10分,共50分):1.试讨论各类核苷酸抗代谢物的作用原理。

2.为什么说真核生物基因是断裂基因?请讨论hnRNA的剪接过程。

3.什么是蛋白质的二级结构?它主要有哪几种?各有何结构特征?4.简述肝糖原合成代谢的直接途径与间接途径。

5.何谓目的基因?写出其主要来源或途径。

生物化学(四)试卷005

生物化学(四)试卷005

苏州大学生物化学(四)课程试卷( 5 )卷共9页考试形式闭卷年月院系年级专业学号姓名成绩一、名词解释(1.5×10=15分)1.肽平面:2.辅酶:3.增色效应:4.编码链:5.底物水平磷酸化:6.盐析作用:7.高能化合物:8.协同效应:9.糖酵解作用:10.化学渗透学说:二.判断题(每题1分,共20分。

正确的在括号内打“√”,错误的在括号内打“×”)()1.用透析法可解开蛋白质中的二硫键。

()2.原核细胞的每一条染色体只有一个复制起点,而真核细胞的每一条染色体有多个复制起点。

()3.糖酵解途径就是无氧发酵,只在厌氧生物的细胞内发生。

()4.对氨基苯磺酰胺作为磺胺类药物,是一类竞争性抑制剂。

()5.在真核细胞中,三种主要RNA的合成都是由一种RNA聚合酶催化。

()6.人体生理的pH值是体内各种酶的最适pH值。

()7.UAA、UAG、UGA除作为终止密码外,又分别代表三种氨基酸。

()8.酮体在肝脏内产生,在肝外组织分解,酮体是脂肪酸彻底氧化的产物。

()9.芳香氨基酸均为必需氨基酸。

()10.将遗传信息能一代一代传下去,主要依靠RNA的合成。

()11.天然葡萄糖分子多数以呋喃型结构存在。

()12.蛋白质的氨基酸排列顺序在很大程度上决定它的构象。

()13.自然界中只存在右手螺旋的DNA双螺旋。

()14.DNA聚合酶和RNA聚合酶的催化作用都需要引物。

()15.酶分子除活性中心部位和必需基团外,其它部位对酶的催化作用是不必需的。

()16.1/Km愈大,表明酶与底物的亲合力愈小。

()17.肽键合成的延长反应包括进位,转肽,移位等步骤。

()18.催化丙酮酸氧化脱羧的酶是一种多酶复合物。

其中包括三种酶是丙酮酸硫激酶,二氢硫辛酸脱氢酶,硫辛酸乙酰转移酶。

()19.cDNA又称互补DNA,它是利用逆转录酶以RNA为模板合成的。

()20.DNA复制时,滞后链只需一个引物,随从链则需多个引物。

三、选择题(为单选题,请将正确答案填写到下表中,每小题1分,共30分)1.下列关于真核mRNA 3'-尾巴形成的叙述哪一个是正确的?A.先合成多聚腺苷酸(polyA),然后由连接酶作用加到它的3'端B.是由多聚腺苷酸(polyA)聚合酶使用ATP底物形成的C.因模板链上有polyT序列,故转录后产生了PolyA尾巴D.是由RNA聚合酶Ⅱ使用A TP底物合成的2.下列关于cAMP的论述哪一个是错误的?A.是由腺苷酸环化酶催化A TP产生的B.是细胞第二信息物质C.是由鸟苷酸环化酶催化A TP产生的D.可被磷酸二酯酶水解为5 —AMP3.蛋白质空间构象的特征主要取决于:A.氨基酸的排列次序B.次级键的维持力C.温度, pH, 离子强度D.肽链内和肽链间的二硫键4.当用酸处理时,下述蛋白质中的哪种氨基酸可转变为另一种氨基酸?A.Arg B.Ser C.Gln D.Pro5.下列关于蛋白质结构域的叙述哪一个是正确的?A.结构域可单独行使特定的功能B.结构域一般由α螺旋肽段组成C.结构域一般由β折叠肽段组成D.是介于二级结构和三级结构之间的结构层次6.下列关于tRNA功能的叙述哪一个是正确的?A.它含有一个密码子B.在转录过程中,它与mRNA结合C.在酶的催化下它可与特定的氨基酸共价结合D.在转录过程中,它与核糖体结合7.蛋白质在280nm波长处有最大光吸收,这与下列哪个结构无关:A.组氨酸的咪唑基B.酪氨酸的酚基C.苯丙氨酸的苯环D.色氨酸的吲哚环8.下列哪种维生素与暗适应能力有关?A.维生素B1 C.维生素A B.维生素B3 D.维生素D9.一tRNA的反密码子是IGC,它可识别的密码子为:A.GCA B.GGG C.CCG D.ACG10.下列关于嘌呤核苷酸补救合成途径的论述哪一个是不正确的?A.利用体内自由存在的嘌呤碱和磷酸核糖合成B.需嘌呤磷酸核糖转移酶的催化C.先合成嘌呤碱或嘌呤核苷D.利用体内自由存在的嘌呤核苷合成11.有机磷农药的杀菌机理是:A.是酶的可逆性抑制作用B.可与酶的活性中心上组氨酸的咪唑基结合使酶失活C.可与酶活性中心上半胱氨酸的巯基结合使酶失活D.能抑制胆碱脂酶E.能抑制胆碱乙酰化酶12.如mRNA部分顺序和密码子编号为````CAG CUC UAA CGA UAG AAU```````,使142号密码子突变为CAA(即U变为C),经翻译生成的多肽链含有的氨基酸数应为:A.141 B.142 C.143 D.144 E.145 F.14613.下列有关酶概念正确的是:A.所有蛋白质都有酶活性B.其底物都是有机化合物C.对底物都有绝对专一性D.不一定都是蛋白质14.嘌呤环的形成既提供氮源又提供碳源的氨基酸是:A.Glu B.Gln C.Gly D.Asp E.Asn F.Arg 15.胞浆中每摩尔NADH+H+经苹果酸穿梭作用参加氧化磷酸化产生A TP的摩尔数是:A.0 B.1.5 C.2.5 D.116.紫线对DNA的损伤主要是:A.引起碱基转换B.导致碱基缺失C.发生碱基插入D.形成嘧啶二聚物E.使磷酸二脂键断裂17.糖酵解中,下列哪些酶催化的反应是可逆反应?A.丙酮酸激酶B.磷酸果糖激酶C.己糖激酶D.磷酸丙糖异构酶18.在三羧酸循环中,底物水平磷酸化发生在哪一步?A.柠檬酸α—酮戊二酸B.琥珀酰CoA 琥珀酸C.α—酮戊二酸琥珀酰CoA D.琥珀酸延胡索酸19.原核生物起始tRNA是:。

苏州大学生物化学内部考试试卷及答案20套 考研苏大必看

苏州大学生物化学内部考试试卷及答案20套 考研苏大必看

生物化学试卷1一、名词解释1.α-螺旋:2.Glycolysis3.一碳单位4.物质代谢5.Expression Vector6.核糖体7.ACAT(脂酰CoA胆固醇脂酰转移酶)8.核苷酸合成的抗代谢物9.转录空泡10.Gluconeogenesis二、填空(每空1分,共21分):1.双螺旋结构稳定的维系横向靠,纵向则靠维持。

2.LDL中的载脂蛋白主要是_______,脂质主要是_______。

3.体内常见的两种环核苷酸是和。

4.σ因子因分子量不同而有不同功能,σ70是辨认__________________的蛋白质,σ32是应答______________而诱导产生的。

5.维生素C可在谷胱甘肽还原酶的作用下使转变为,对维持细胞膜的正常功能十分重要。

6.α-螺旋的主链绕____作有规律的螺旋式上升,走向为____方向,即所谓的____螺旋。

7.1mol葡萄糖氧化生成CO2和H2O时,净生成或molATP。

8.肝细胞参与合成尿素的两个亚细胞部位是和。

9.化学修饰调节最常见的方式是磷酸化,磷酸化可使糖原合成酶活性,磷酸化酶活性。

10.冈崎片段的生成是因为DNA复制中方向和方向不一致。

三、问答(第一题9分,其余每题10分,共49分):1.简述酶的“诱导契合假说”。

2.受试大鼠注射DNP(二硝基苯酚)可能引起什么现象?其机理何在?3.复制中为什么会出现领头链和随从链?4.简述乳糖操纵子的结构及其调节机制。

5.何谓限制性核酸内切酶?写出大多数限制性核酸内切酶识别DNA序列的结构特点。

生物化学试卷1答案一、名词解释:1.α-螺旋为蛋白质的二级结构类型之一。

在α-螺旋中,多肽链围绕中心轴作顺时针方向的螺旋上升,即所谓右手螺旋。

每3.6个氨基酸残基上升一圈,氨基酸残基的侧链伸向螺旋的外侧,α-螺旋的稳定依靠上下肽之间所形成的氢键维系。

2.Glycolysis: Aanaerobic degradation is universal and ancient central pathway of glucose catabolism. In glycolysis a molecule of glucose is degraded in a series of enzymatic reactions to yield two molecules of pyruvate or lactate. The basic process of glycolysis can be divided into two phase: reactions from glucose to pyruvate and from pyruvate to lactate.3.one carbon unit 一碳单位指某些氨基酸分解代谢过程中产生含有一个碳原子的基团,包括甲基、亚甲基、甲烯基、甲炔基、甲酰基和亚氨甲基等。

苏州大学2022《生物化学》考研真题(1)

苏州大学2022《生物化学》考研真题(1)

2022年苏大621生化真题
一、选择题75分单项选择题
重点:DNA复制;RNA复制;RNA引物;反密码子;操纵子;启动子;蛋白质的二级结构/a-螺旋/变构/变性
稀有碱基;信号肽;核酶;磷酸果糖激酶;酶原合成;TCA的限制酶;PRPP;嘌呤环;
丙酮酸;色氨酸含量降低
二、简答题〔15×3〕
1.一研究生要配制IPTG溶液浓度为0.5M,用于诱导大肠杆菌重组蛋白的培养,大肠杆菌
重组蛋白的培养需要浓度为0.1mM~1mM的IPTG溶液,大肠杆菌培养液为500mL,他该如何配置和使用IPTG溶液。

2.在马拉松比赛中,存储在脂肪中的能量如何转化为ATP?
左栏〔代谢途径〕右栏〔中间产物〕
〔1〕淀粉合成 A. 7-磷酸景天糖
〔2〕脂肪酸合成 B. 氨酰-tRNA
〔3〕嘌呤核苷酸合成 C. 乳清酸
-(4) HMP途径 D. ADPG
(5) 多肽链合成 E. 草酰琥珀酸
〔6〕TCA循环 F. 乙酰乙酰ACP
(7) 嘧啶核苷酸合成G. 精氨琥珀酸
〔8〕鸟氨酸循环H. 乙醛
〔9〕生醇发哮I. IMP
三、问答两道〔共30分〕
1.在细胞中1-酰基甘油和1-酰基-3-磷酸甘油,分别合成3-脂酰甘油,在小肠、肝脏、脂
肪中分别合成该物质的途径
2.糖代谢中丙酮酸和乳酸的去路和作用。

苏州大学生物化学试卷(18)

苏州大学生物化学试卷(18)

苏州大学生物化学试卷(18)一、名词解释(每题3分,共30分,凡进行双语教学的章节,英文名词解释如用中文回答,全对者只得1分):1.TT二聚体2.切除修复3.ACP(脂酰载体蛋白)4.蛋白质等电点5. Zymogens(酶原)6. Homologous recombination7.核酸分子杂交8. Heterogeneous RNA (hnRNA)9.Salvage pathway10. LDL 受体二、填空(每空1分,共20分):1.当Km值近似 ES的解离常数Ks时,Km值可用来表示酶与底物的。

2.体内的维生素D3在肝及肾脏被羟化为,这也是维生素D3的型。

3. 核苷酸抗代谢物中,叶酸类似物竞争性抑制酶,从而抑制了的生成。

4.体内脱氧核苷酸是由直接还原而生成,催化此反应的酶是酶。

5.谷胱甘肽的第一个肽键由羧基与半胱氨酸的氨基组成,其主要功能基团为______。

6.端粒酶由三种组分组成,除了端粒酶协同蛋白外,还有和。

7.长链脂酰辅酶A进入线粒体由携带,限速酶是。

8.编码20种氨基酸的遗传密码有组,起始密码为,终止密码为。

8.一碳单位代谢的运载体是,其生成的重要酶是。

10.糖酵解途径中的两个底物水平磷酸化反应分别由和催化。

三、问答(每题10分,共50分):1.糖异生过程是否为糖酵解的逆反应?为什么?2.胞浆中的NADH如何参加氧化磷酸化过程?试述其具体机制。

3.金属离子作为酶的辅助因子有哪些作用?4.简述多肽链生物合成的延长过程。

5.一种DNA分子含40%的腺嘌呤核苷酸,另一种DNA分子含30%的胞嘧啶核苷酸,请问那一种DNA的Tm值高?为什么?。

苏州大学生物化学试卷

苏州大学生物化学试卷

苏州大学生物化学试卷
一、名词解释(每题3分,共30分,凡进行双语教学的章节,英文名词解释如
用中文回答,答对者只得1分):
1.结构域
2.同工酶
3.血脂
4.DNA Ligase
5.断裂基因
6.cDNA Library
7.水溶性维生素
8.Km值
9.σ亚基
10.操纵子
二、填空(每空1分,共20分):
1.大多数真核生物成熟的mRNA 的一级结构的5′端是,3′端是。

2.由于红细胞没有,其能量几乎全由提供。

3.心脏组织中含量最高的转氨酶是;肝组织中含量最高的转氨酶是。

4.Tm值与DNA 的和所含碱基中的成正比。

5.酶含量的调节主要通过改变酶或以调节细胞内酶的
含量,从而调节代谢的速度和强度。

6.肽链延长过程中,核蛋白体的P位结合,A位结合。

7.DNA分子的两条链呈反平行走向是由于
和。

8.对于结合酶来说,上的某一部分结构往往是
的组成成分。

9.细胞内游离胆固醇升高能抑制______________酶的活性,增加______________酶的活性。

10.LDL受体能识别和结合载脂蛋白_____和载脂蛋白____的脂蛋白。

三、问答(每题10分,共50分):
1.讨论复制保真性的机制。

2.什么是蛋白质的二级结构?它主要有哪几种?各有何结构特征?
3.简述乳酸循环形成的原因及其生理意义。

4.原核生物mRNA在小亚基上的定位涉及哪些机制?
5.比较脑、肝、骨骼肌在糖、脂代谢和能量代谢上的主要特点。

生物化学(四)试卷012

生物化学(四)试卷012

苏州大学生物化学(四)课程试卷(12 )卷共10 页考试形式闭卷年月院系年级专业学号姓名成绩一、名词解释(1.5×10=15分)1.Northern印迹法2.酶原激活3.信号肽4.减色效应5.葡萄糖—丙氨酸循环:6.自杀性底物:7.透析8.MWC模型9.糖蛋白:10.别构调节二、判断题(每题1分,共20分。

正确的在括号内打“√”,错误的在括号内打“×”)()1.大多数蛋白质的主要带电基团是它N-末端的氨基和C-末端的羧基组成。

()2.在水溶液中,蛋白质溶解度最小时的pH值通常就是它的等电点。

()3.己糖激酶对底物的专一性比葡萄糖激酶差。

()4.HMP途径主要的功能是用来为生物体提供能量来源。

()5.TCA途径中没有底物水平磷酸化作用。

()6.抗体酶既具有专一结合抗原的性质,又具有酶的催化功能。

()7.当dUNP转变为dTMP时,其甲基供体是N5,N10-亚甲基THFA。

()8.尿苷激酶催化胞嘧啶核苷生成胞嘧啶核苷酸。

()9.酶蛋白和蛋白酶虽然称呼不同,但基本功能相同。

()10.抗坏血酸是山梨醇的衍生物。

()11.底物与酶的活性中心靠共价键结合,以提高催化效率。

()12.构象改变涉及共价键的断裂。

()13.蛋白质二级结构主要靠氢键维持。

()14.人类缺乏维生素B1会产生脚气病。

()15.氰化物不对整个呼吸链的氧化磷酸化产生抑制作用。

()16.脂肪酸合成的直接前体是丙二酸单酰辅酶A。

()17.密码的简并性是指几种氨基酸可由同一密码子编码的现象。

()18.蛋白质生物合时,氨基酸进入肽链的位置由氨基酸本身决定。

()19.所有蛋白质生物合成的第一个氨基酸均为fMet。

()20.糖原合成时需要糖原起始合成酶及引发蛋白参与。

三、选择题(为单选题,请将正确答案填写到下表中,每小题1分,共30分)1.下列关于原核生物DNA复制原点的叙述哪一个是不正确的?A.是dnaA.dnaB及dnaC蛋白结合的位点B.是DNA的两条链分开的位点C.是RNA聚合酶识别的位点D.是滞后链合成停止的位点2.下列哪种酶是脂肪酸合成途径中的限速酶?A.缩合酶B.乙酰CoA羧化酶C.脱水酶D.烯脂酰—ACP还原酶3.肝细胞通过下列哪种转运系统将NADH从细胞质运至线粒体基质?A.磷酸甘油穿梭系统C.酰基肉碱转运系统B.苹果酸—天冬氨酸穿梭系统D.柠檬酸穿梭系统4.α-鹅膏簟碱如何影响转录?A.它抑制原核RNA聚合酶B.它主要抑制真核RNA聚合酶ⅡC.它主要抑制真核RNA聚合酶I D.既抑制原核又抑制真核的RNA合成5.下列哪种氨基酸侧链可解离基团的pK值接近生理pH值?A.色氨酸B.精氨酸C.组氨酸D.酪氨酸6.下列关于参与DNA复制起始的蛋白质的作用的叙述哪一个是不正确的?A.DnaA蛋白的复合物结合于原点的9bp重复顺序B.DnaA蛋白识别并变性原点的13bp重复顺序需要A TPC.DnaA蛋白是一个解螺旋酶,它创造两个潜在的复制叉D.DnaB蛋白能双向解开DNA链,创造两个潜在的复制叉7.一种蛋白质的营养价值高低主要决定于:A.是否好吃可口B.来源是否丰富C.所含必需氨基酸的种类是否完全和相对数量的多少D.市场价格的贵贱8.下列关于维生素的说法那项是不正确的A .维持正常生命所必须B.是体内的能量来源C.是小分子化合物D.体内需量少,但必须由食物供给E.它们的化学结构各不相同9.含B族维生素的辅酶在酶促反应中的作用是下列中的哪一个?A.稳定酶分子的构象C.起传递电子.原子和化学基团的作用B.决定酶的专一性D.起激活剂的作用10.下列哪一个是水溶性维生素?A.维生素A B.维生素C C.维生素E D.维生素K 11.在动物体内脂肪酸的去饱和作用发生在A.细胞核B.内质网C.线粒体D.微粒体12.人体内嘌呤核苷酸分解代谢的主要终产物是:A.尿素B.尿酸C.肌酐D.肌酸13.DNA连接酶在下列哪一个过程中是不需要的?A.DNA复制B.制备重组DNA C.DNA修复D.DNA重组E.DNA断裂和修饰14.下列哪种化合物不含高能磷酸键?A.磷酸肌酸B.6-磷酸葡萄糖C.磷酸烯醇或丙酮酸D.1,3—二磷酸甘油酸15.如果用14C标记G-6-P的第一位碳原子,经过酵解生成下列哪种丙酮酸?A.14CH3-C-COO-B.CH3-C-COO-‖ ‖O OC.CH3-C-14COO-D.CH3-14C-COO-‖ ‖O O16.不参加尿素循环的氨基酸是:A.赖氨酸B.精氨酸C.鸟氨酸D.天冬氨酸17.糖酵解途径中,催化不可逆反应的酶是:A.醛缩酶B.磷酸果糖激酶C.乳酸脱氢酶D.丙酮酸激酶18. –螺旋表示的通式是:A.3.010B.3.613C.2.27D.4.616 19.下列关于生物氧化的叙述正确的是:A.呼吸作用只有在有氧时才能发生。

苏州大学生物化学试卷(11)

苏州大学生物化学试卷(11)

苏州大学生物化学试卷(11)一、名词解释(每题3分,共30分,凡进行双语教学的章节,英文名词解释如用中文回答,答对者只得1分):1.核心酶2.脱氧核苷酸3.脂肪动员4.脂溶性维生素5.变构效6.Semi-conservative replication7.VLDL(极低密度脂蛋白)8.Hybridization9.领头链和随从链10.Heterogenerous RNA (hnRNA)二、填空(每空1分,共20分):1. 基因表达调控可发生在遗传信息传递的任何环节,但是基因表达的基本控制点。

2. tRNA 均具有二级结构和的共同三级结构。

3. L-氨基酸氧化酶只能催化L-氨基酸氧化,对D-氨基酸无作用,这是因为该酶具有的特异性。

4. 细胞内乙酰COA堆积的主要原因是和。

5. 寡酶素可抑制ATP的生成和_______。

6. 转氨酶的辅酶是;氨基酸脱羧酶的辅酶是。

7. 肠道氨吸收与肾分泌氨均受酸碱度影响。

肠道pH偏时,氨的吸收增加;尿液pH偏时,有利于氨的分泌与排泄。

8. DNA拓扑异构酶对DNA分子上的磷酸二酯键的作用是既能又能。

9. 原核生物非依赖Rho因子的转录终止,RNA产物3’端有_______________________和_________________________的结构特点。

10.根据基因类型和剪接方式,通常把内含子分为_____大类。

_______和______类内含子的剪接方式是自身剪接,______类内含子剪接是需酶及ATP的。

11.1mol葡萄糖氧化生成CO2和H2O时,净生成 molATP。

三、问答(每题10分,共50分):1. 何谓基因克隆?简述基因克隆的基本过程。

2. 为何蛋白质的含氮量能表示蛋白质相对量?实验中又是如何依此原理计算蛋白质含量的?3. 试列表比较糖酵解与有氧氧化进行的部位、反应条件、关键酶、产物、能量生成及生理意义。

4.简述各种RNA在肽链合成过程中的作用。

苏州大学生物化学试卷

苏州大学生物化学试卷

苏州大学生物化学试卷(2)
一、名词解释
1.脱氧核苷酸
2.核苷酸的负反馈调节作用
3.激素敏感脂肪酶
4.核心酶
5.DNA cloning
6.Km
7.Oxidative Phosphorylation
8.泛素化标记
9.逆转录酶
10.基因的不连续性
二、填空(每空1分,共20分):
1.在嘌呤核苷酸补救合成中HGPRT催化合成的核苷酸是
和。

2.原核生物转录终止分为________________ _与____________________两大类。

3.设法将众多的转化菌落和菌斑区分开来,并鉴定哪一菌落或噬菌斑所含重组DNA分子确实带有目的基因,这一过程即为_____或选择,有直接选择法和非直接选择法,直接选择法主要有______、_____、_____等。

4.在酶浓度不变的情况下,底物浓度对酶促反应速度的作图呈
双曲线,双倒数作图呈线。

5.甲硫氨酸循环中,产生的甲基供体是,甲硫氨酸合成酶的辅酶是。

6.蛋白质合成后其空间结构的修饰包括﹑和。

7.脑是机体耗能的主要器官之一,正常情况下,主要以作为供能物质,长期饥饿时,则主要以作为能源。

8.生物素是体内多种酶的辅酶,参与体内
的羧化过程。

9.调节血糖浓度最主要的激素是
和。

三、问答(每题10分,共50分):
1.酮体是如何产生和利用的?
2.为什么测定血清中转氨酶活性可以作为肝、心组织损伤的参考指标?
3.讨论复制保真性的机制。

4.试述乳酸异生为葡萄糖的主要反应过程及其酶。

5.举例说明蛋白质一级结构、空间构象与功能之间的关系。

苏州大学生化真题

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苏州大学生化真题一、名词解释(20*2.5):酵母双杂交HYPERCHRONCICITY (增色性)反义RNA融合表达糖异生作用乳酸循环蛋白质变性表达载体一碳单位半保留复制增强子模体启动子PS:名词解释一共20个,基本上都是英文,只能回忆部分,抱歉……二、简答题(10*10):1 一类内含子和二类内含子的剪切机理2 葡萄糖能否生成以下物质,用箭头表示合成步骤(1)脂肪酸(2)UMP3 为什么说乙酰辅酶A在生物体代谢中占据中心位置4 关于非竞争性抑制剂的抑制率计算,常规的那种题目,具体不记得了5 三种获取目的基因的方法与步骤6 关于聚丙烯酰胺凝胶电泳和SDS——PAGE7 怎样用2分子ALA合成尿素8 给出一条模板连,要求:(1)写出互补链(2)能合成几个氨基酸(3)写出氨基酸序列(秒杀了好多英雄豪杰啊!!!)(4)某一碱基突变对氨基酸序列的影响PS:只记得这么多了,欢迎更正补充细胞真题一、名词解释(10*3)动粒HAYLICK界限神经干细胞间接荧光免疫技术应力门控通道细胞决定层连粘蛋白非细胞体系核基质(细胞记得比较牢,呵呵)二、简答题(9*10)1 P53抑制癌症的机理2 核定位蛋白为什么会出核3 为什么说癌细胞是分化程序异常的细胞4 简述染色体的组装步骤5 分泌蛋白的合成机运输机制6 用三种方法证明M期细胞中含有MPF7 如何理解细胞全能性三、实验题:重复08年的论述题好吧,既然大家都说真没有,我勉为其难的帮大家回忆下吧@@~~生化:名解没啥好说的,10个名解9个是书后的,一个是从很恶心的角落里找出来的用来拉差距的,这个每年都如此。

去年那个很恶心的貌似是酶那章里的前馈反应。

当然是英文的。

恩可能大家都很熟悉,就我觉得这个有点恶心...前年的记得是反向重复序列。

这个无所谓了扣了就扣了...之后是2选1的2组简答,每组8题吧好像是。

1组是偏向分子生物学类的,一组是偏向代谢的。

这个挑自己把握大的选就是了,很简单,基本都是人卫版书上的。

苏州大学生物化学题库

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第一章蛋白质的结构和功能名词解释1、α-螺旋:α-螺旋为蛋白质的二级结构类型之一。

在α-螺旋中,多肽链围绕中心轴做顺时针方向的螺旋上升,即所谓右手螺旋。

每3.6个氨基酸残基上升一圈,氨基酸残基的侧链伸向螺旋的外侧。

α-螺旋的稳定依靠上下肽之间所形成的氢键维系。

2、β-折叠:β-折叠为蛋白质的二级结构类型之一。

在β-折叠中,每个肽单元以Cα为旋转点,依次折叠成锯齿状结构,氨基酸残基侧链交替的位于锯齿状结构的上下方。

两条以上肽链或一条肽链内的若干肽段的锯齿状结构可平行排列,其走向可相同,亦可相反。

3、结构域:分子量大的蛋白质常可折叠成多个结构较为紧密的区域,并各行其功能,称为结构域。

结构域是三级结构层次上的局部折叠区。

4、肽单元:在多肽分子中肽键的6个原子(Cα1、C、O、N、H、Cα2)位于同一平面上,被称为肽单元。

5、变构效应:蛋白质空间构象的改变伴随其功能的变化,称为变构效应。

具有变构效应的蛋白质称为变构蛋白,常有四级结构。

以血红蛋白为例,一个氧分子与一个血红素辅基结合,引起亚基构象变化,进而引进相邻亚基结构变化,更易于与氧结合。

6、glutathione(谷胱甘肽):(1)由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸组成的三肽。

(2)半胱氨酸的巯基是该三肽的功能基团,他是体内重要的还原剂,以保护体内蛋白质或酶分子等中的巯基免遭氧化。

7、肽键:一个氨基酸的α-羟基和另一个氨基酸的α-氨基进行脱水缩合反应,生成的酰胺键称为肽键。

肽键键长为0.132nm,具有一定程度的双键性质。

参与形成肽键的6个原子位于同一平面,即肽单元。

8、分子伴侣:分子伴侣是一类帮主新生多肽链正确折叠的蛋白质。

它可逆的与未折叠肽段的疏水部分结合后松开,如此重复进行可以防止发生错误的聚集,从而使肽链正确折叠。

分子伴侣对蛋白质分子中二硫键的正确形成起重要作用。

9、蛋白质的等电点:在某一pH值溶液中,蛋白质分子解离成的正电荷和负电荷数目相等,其静电荷为零,此时溶液的pH值称为该蛋白质的等电点。

苏州大学生物化学试卷(20)

苏州大学生物化学试卷(20)

苏州大学生物化学试卷(20)一、名词解释1.回文结构2.Respiratory chain3.中心法则4.磷脂酶A25.Vitamin (维生素)6.遗传密码的摆动性7.T C 环8.Heterogeneous RNA (hnRNA)9.LDL 受体10.核苷酸合成的反馈调节二、填空(每空1分,共20分):1.能导致框移突变的有和突变。

2.谷氨酸脱羧基后生成,是抑制性神经递质;组氨酸脱羧基后生成,具有舒张血管的作用。

3.体内某些氨基酸脱羧基后可生成多胺类物质。

例如鸟氨酸脱羧基生成的腐胺,可进一步转变成和,具有舒张血管的作用。

4.用凝胶过滤分离蛋白质,分子量较小的蛋白质在柱子中滞留的时间较____,因此最先流出凝胶柱的蛋白质,其分子量最____。

5.ATP与____反应生成CP(肌酸),催化该反应的酶是。

6.催化RH2+H2O2→R+2H2O反应的酶是______酶,催化ROOH+2GSH→G-S-S-G+H2O+ROH反应的酶是______。

7.肌糖原酵解的关键酶有、和丙酮酸激酶。

8.6—磷酸果糖激酶—2是一双功能酶,同时具有和两种活性。

9.一个完整的基因克隆过程包括:目的基因的获取,____的选择与改造,____的连接,重组DNA分子导入受体细胞,筛选出含感兴趣基因的重组DNA转化细胞。

10.真核生物转录调节因子DNA结合域最常见的形式有﹑三、问答(每题10分,共50分):1.酶的必需基团有哪几种,各有什么作用?2.什么是蛋白质变性?变性与沉淀的关系如何?3.试述复制和转录的异同点。

4.说明高氨血症导致昏迷的生化机制。

5.糖、脂、蛋白质在体内是否可以相互转变?简要说明可转变的途径及不能转变的原因。

苏州大学生物化学试卷(19)

苏州大学生物化学试卷(19)

苏州大学生物化学试卷(19)一、名词解释(每题3分,共30分,凡进行双语教学的章节,英文名词解释如用中文回答,全对者只得1分):1. genome(基因组)2.蛋白质合成后加工3. Okazaki Fragments4.酶促反应初速度5.Cori cycle6.低血糖7.水溶性维生素8.de novo synthesis of purine nucleotide9.呼吸链10.解偶联剂二、填空(每空1分,共22分):1.呼吸链抑制剂BAL的中文名称是________,它能阻断呼吸链的传递部位是__________。

2.线粒体内膜有多种物质的转运蛋白,常是两种物质反向交换,例如ATP和ADP、苹果酸和α-酮戊二酸。

除此之外,还有①_______与________、②________与________借转运蛋白反向交换。

3.丙酮酸脱氢酶复合体是有丙酮酸脱氢酶、和组成的。

4.复制的底物是;参入子链的是。

5.酶促反应的是指反应刚刚开始时,各种影响酶促反应的因素尚未发挥作用时的。

6.不可逆性抑制剂常与酶的以键相结合。

7.蛋白质二级结构是指____的相对空间位置,并____氨基酸残基侧链的构象8. 是脂肪酸生物合成的活性碳源,它是乙酰辅酶A经_____酶催化生成。

9.含apoAI最多的人血浆酯蛋白是______________,含apoB100最多的人血浆脂蛋白是______________。

10.催化氨与谷氨酸生成谷氨酰胺的酶是合成酶;催化谷氨酰胺分解成氨与谷氨酸的酶是酶。

三、问答(共48分):1.简述E. coli和真核表达体系各自的优、缺点。

(10分)2.你认为转录和复制哪一种保真性更高?请说明理由。

(10分)3.为何称三羧酸循环是物质代谢的中枢,有何生理意义?(10分)4.举例说明蛋白质的四级结构。

(10分)5.用两种不同的方式写出一段长8bp,含有四种碱基成分的DNA序列(任意排列)。

(8分)。

苏州大学生物化学试卷(17)

苏州大学生物化学试卷(17)

苏州大学生物化学试卷(17)一、名词解释(每题3分,共30分,凡进行双语教学的章节,英文名词解释如用中文回答,全对者只得1分):1.酶的特异性2.反竞争性抑制作用3.蛋白质的二聚化4. 蛋白质的靶向输送5. 呼吸链6. 酶的化学修饰7. DNA Semiconservative Replication8.分子伴侣9.蛋白质等电点10. Hyperchromicity二、填空(每空1分,共20分):1. 维生素PP在体内的活性型为及,它们是多种不需氧脱氢酶的辅酶。

2. 叶酸在体内的活性型为,它是体内的辅酶。

3. 当Km值近似 ES的解离常数Ks时,Km值可用来表示酶与底物的。

4. 脂酰CoA脱下的2H通过________氧化呼吸链氧化,β-羟丁酸脱下的2H通过_______氧化呼吸链氧化。

5. 酪氨酸代谢可生成儿茶酚胺,其包括、和肾上腺素。

6. 胆固醇生物合成在细胞的中进行,关键酶是。

7. 含甘油三酯最多的人血浆脂蛋白是______________和______________。

8. 从一个复制起始点可以生成2个移动方向相反的;两个复制起始点的距离可定为一个的长度。

9. 人体蛋白质的基本组成单位为____,共有____种。

10.外源DNA离开染色体是不能复制的。

将____与____连接,构建成重组DNA分子,外源DNA则可被复制。

三、问答(每题10分,共50分):1.简述真核生物mRNA的结构特点。

2. 简述三羧酸循环的要点及生理意义。

3. 概述体内氨基酸的来源和主要代谢去路。

4.试述体内草酰乙酸在物质代谢中的作用。

5.何谓限制性核酸内切酶?写出大多数限制性核酸内切酶识别DNA序列的结构特点。

苏州大学考研生化

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苏 州 大 学
二ΟΟ四年攻读硕士学位研究生入学考试试题
招生专业:遗传学、细胞生物学 考试科目:生物化学
一、填空
1、蛋白质的二几级结构主要包括————和——-的形式
2、DNA双螺旋 结构稳定的维系,横向由——-维系,纵向由—— 维系
3、Km值等于酶促反应速度为最大反应速度------时的——浓度
18同一种辅酶与酶蛋白之间可有共价和非共价两种 不同类型的结合方式
19Km数值仅由酶和底物相互关系决定, 不受其他因素影响
20由于DNA是双链而RNA是单链,因此两者相比DNA的磷酸脂键不容易被水解
三综合题
1.就你所知,写出生物体内与乙酰辅酶A的产生和利用有关的代谢途径
2.简述ATP合酶的结构特点及功能
C、Western blotting D、Eastern blotting
8、双链DNA Tm值比较高的失由于下列哪组核酸含量最高所致?
A、G+A B、C+G
C、A+T D、C+T
C、维生素A D、维生素B12
E、维生素D
11、在呼吸链中,用于传递电子的组分是:
A、烟酰胺脱氢酶 B、黄素脱氢酶
C、铁硫蛋白类
12、下列关于电子传递链的叙述正确的是:
A、电子传递的继续进行依赖于氧化磷酸钙
A、2个 B、3个 C、4个
苏 州 大 学
二零零五攻读硕士学位研究生入学考试试题
生物化学
一名词解释
1.构型 2.穿梭质粒 3.蛋白质的变性作用 4.ACP 5.冈琦片断 6.泛肽 7.解链温度 8.氧化磷酸化作用
9.超二级结构 10限制性内切酶

生物化学(四)期末复习试题及答案16.docx

生物化学(四)期末复习试题及答案16.docx

苏州大学生物化学(四)课程试卷(16 )卷共9页考试形式闭卷年月院系年级专业学号姓名成绩一、名词解释(1.5x10=15分)1.酮体2.生物氧化3.nucleosome(核小体)4.Tm 值5.蛋白质的变性作用复制子6.超二级结构7.P/0 值8.密码的简并性9.多顺反子二、判断题(每题1分,共20分。

正确的在括号内打"错误的在括号内打“X”) ( )1.多数蛋白质的主要带电基团是它N-末端的氨基和C一末端的段基组成。

( )2.天然氨基酸都具有一个不对称a一碳原子。

( )3.变性蛋白质溶解度降低是因为蛋白质分子的电荷被中和以及除去了蛋白质外面的水化层所引起的( )4.别构酶动力学曲线的特点都是呈S形曲线。

( )5.不可逆抑制作用中抑制剂通常以共价键与酶蛋白中的基团结合。

( )6. Tm值低的DNA分子中(A=T) %含量高。

( )7.由于RNA不是双链,因此所有的RNA分子中都没有双螺旋结构。

( )8.密码子和反密码子都是由AGCU四种碱基构成的。

( )9. tRNA转运氨基酸是特异的,故一种氨基酸只能由一种tRNA携带转运。

10.酮体在肝脏内产生,在肝外组织分解,酮体是脂肪酸不彻底氧化的产物。

( )11.在氧气充分的情况下丙酮酸不转变为乳酸。

( )12.在糖供应不足的情况下,脑可利用酮体作为燃料。

( )13.维持蛋白质三级结构最重要的作用力是氢键。

( )14.到目前为止,自然界发现的氨基酸为20种左右。

( )15. mRNA是细胞内种类最多,含量最丰富的RNA。

( )16.生物体内,天然存在的DNA分子多为负超螺旋。

( )17. Z型DNA与B型DNA可以相互转变。

( )18.酶的反应速度一般用单位时间内底物的减少量来表示。

()19. 一种酶有几种底物就有几种Km值。

( )20.参与尿素循环的酶都位于线粒体内。

三、选择题(为单选题,请将正确答案填写到下表中,每小题1分,共30分)1.关于脂肪酸的叙述不正确的是:A.不饱和脂肪酸的第一个双键均位于9〜10碳原子之间B.高等植物中的不饱和脂肪酸属顺式结构C.花生四烯酸在植物中不存在D.膜脂肪酸的过氧化作用破坏了膜的结构和功能E.细菌中只存在单不饱和脂肪酸2.下列哪组氨基酸只含有非必需氨基酸?A.赖氨酸和丙氨酸B.碱性氨基酸C.具分支的氨基酸D.酸性氨基酸3.下列哪种氨基酸可作为5-羟色胺这一神经递质的前体?A.TyrB. TrpC. PheD. His4.转氨酶的辅酶是:A.硫胺素B.核黄素C.毗哆醛D.磷酸毗哆醛E.尼克酸F.泛酸5.寡霉素属下列哪种抑制剂类型?A.电子传递抑制剂B.解偶联剂C.氧化磷酸化抑制剂D.离子载体抑制剂6.下列关于嚅0定核甘酸生物合成的论述哪一个是正确的?A.合成途径的最后一步是践化反应B.乳清酸核昔酸是中间产物之一C.需CoA的参加D.缩合反应不起作用7.下列关于E.coli DNA复制中复制叉的叙述哪一个是正确的?A.两个复制叉移动的方向相同B.是与dnaA. dnaB及dnaC结合的位点C.是DNA的两条链分开的位点D.是复制的起始点8.糖酵解途径中,催化不可逆反应的酶是A.己糖激酶B.磷酸果糖激酶C.醛缩酶D.乳酸脱氢酶9.由两分子乳酸经糖异生生成一分子葡萄糖净消耗的ATP数目是A. 4B. 5C. 6D. 710.关于DNA复制过程的错误叙述是A.亲代DNA双链分开,各自都可作为复制模板B.以dNTP为原料,在模板上合成复制链C.子代DNA的合成都是连续进行的D.子代DNA分子中有一条链来自亲代DNA分子E.子代与亲代的DNA分子核昔酸排列顺序完全相同11.具有四级结构的蛋白质是A. a-角蛋白B. p-角蛋白C.肌红蛋白D.细胞色素CE.血红蛋白12.在酰胺平面中具有部分双键性质的单键是A. Ca- C B . C -N C . N-H D . N- Ca13.自然界游离核昔酸中的磷酸最常连于戊糖的A. C-2'B. C-3'C. C-5'D. C-2'及C-3'C-2E.C-2'及C-5'14.下列关于酶蛋白和辅酶之间的关系哪种是错误的。

苏州大学生物化学试卷(7)

苏州大学生物化学试卷(7)

苏州大学生物化学试卷(7)
一、名词解释(每题3分,共30分,凡进行双语教学的章节,英文
名词解释如用中文回答,答对者只得1分):
1.高氨血症
2.Transformation
3.Genetic codon
4.感受态细
5.激活剂
6.食物蛋白质互补作用
7.HRE(激素反应元件)
8.内含子
9.转座
10.Z-DNA(左手DNA螺旋)
二、填空(每空1分,共20分):
1.以遗传信息传递而言,复制是从到;翻译是从到。

2.蛋白质可与某些试剂作用产生颜色反应,可用作蛋白质的____和____分析。

常用的颜色反应有____和____。

3.在典型的DNA双螺旋结构中,由磷酸戊糖构成的主链位于双螺旋的,碱基位于。

4.核苷酸合成代谢调节的主要方式是,其生理意义
是。

5.逆转录酶是多功能酶,有三种酶活性,即RNA作模板的dNTP聚合酶活性、活性和活性。

6.氨基酸参与合成肽链的活化形式为 ,催化活化过程的酶是。

7.体内由生物活性的蛋白质至少具备____结构,有的还有____结构。

8.同工酶指催化的化学反应,但酶蛋白的分子结构、理化性质乃至免疫学性质的一组酶。

三、问答(每题10分,共50分):
1.比较三种可逆性抑制作用的特点。

2.试述原核生物的转录终止。

3.概述肾上腺素对血糖水平调节的分子机制。

4.物质在体内氧化和体外氧化有哪些异同点?请加以说明。

5.1mol软脂酸彻底氧化分解净生成多少ATP?。

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1.写出大多数限制性内切酶识别DNA序列的结构特点?生物体内能识别并切割特异的双链DNA序列的一种内切核酸酶。

它是可以将外来的DNA切断的酶,即能够限制异源DNA的侵入并使之失去活力,但对自己的DNA却无损害作用,这样可以保护细胞原有的遗传信息。

由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的,故名限制性内切酶(简称限制酶.Ⅱ型(type Ⅱ)限制与修饰系统所占的比例最大,达93% 。

Ⅱ型酶相对来说最简单,它们识别回文对称序列,在回文序列内部或附近切割DNA ,产生带3'- 羟基和5'- 磷酸基团的DNA 产物,需Mg2+ 的存在才能发挥活性,相应的修饰酶只需SAM 。

识别序列主要为4-6bp ,或更长且呈二重对称的特殊序列,但有少数酶识别更长的序列或简并序列,切割位置因酶而异,有些是隔开的。

Ⅱs 型(type Ⅱs)限制与修饰系统,占5% ,与Ⅱ型具有相似的辅因子要求,但识别位点是非对称,也是非间断的,长度为4-7bp ,切割位点可能在识别位点一侧的20bp 范围内。

Ⅱ型限制酶一般是同源二聚体(homodimer),由两个彼此按相反方向结合在一起的相同亚单位组成,每个亚单位作用在DNA 链的两个互补位点上。

修饰酶是单体,修饰作用一般由两个甲基转移酶来完成,分别作用于其中一条链,但甲基化的碱基在两条链上是不同的。

在Ⅱ型限制酶中还有一类特殊的类型,该酶只切割双链DNA 中的一条链,造成一个切口,这类限制酶也称切口酶(nicking enzyme),如N.Bst NBI 。

2.PCR循环的参数是如何确定的?(1)变性时间是如何确定的?在选择的变性温度下,DNA分子越长,两条链完全分开所需的时间也越长。

如果变性温度过低或时间太短,模板DNA中往往只有富含AT的区域被变性。

在PCR的第一个循环中,有时常把变性时间设计为5 min,来增加大分子模板DNA彻底变性的概率,又称此为预变性。

当模板DNA的G+C含量超过55%时,需要更高的变性温度,来源于古细菌的DNA聚合酶比TaqDNA聚合酶更能耐受高温,因此更适合用来扩增富含GC的DNA 模板。

(2)复性温度的确定有什么考虑?复性过程(即退火)采用的温度至关重要。

如果复性温度太高,寡核苷酸引物不能与模板很好地复性,扩增效率将会非常低。

如果复性温度太低,引物将产生非特异性复性,从而导致非特异性的DNA片段的扩增。

(3)延伸的时间是如何确定的?Taq DNA聚合酶在最适反应温度(72~78 ℃)下聚合速率约为2 000 bp/min。

根据多数研究者的经验,确定了一个规则,即:靶基因的每1 000 bp的扩增产物的延伸时间被设计为1 min,以此类推。

对于PCR的最后一个循环,许多研究者常把延伸时间增加为以前循环的延伸时间的3倍以上,以使所有扩增产物完成延伸,这又称为后延伸。

(4)循环数目一般都为30,这个数值是怎么来的?PCR扩增所需的循环数目决定于反应体系中起始的模板拷贝数以及引物延伸和扩增的速率。

一旦PCR反应进入几何级数增长期,反应会一直持续下去,直至某一成分成为限制因素。

从这一点上来说,扩增产物中绝大多数应该是特异性的扩增产物,而非特异性的扩增产物低到难以检测的程度。

用TaqDNA聚合酶在一个含有105个拷贝的靶序列的反应体系中进行30个循环后往往可以做到上述的理想情况。

3.SDS-PAEG主要涉及那些试剂?下层胶:上层胶:4.在最适条件下,细菌繁殖一代仅需25分钟,解释为什么细胞能这么快分裂(a)在复制原点形成两个复制叉,复制叉以相反的方向移动直到它们在原点对面的某一点相遇为止,因而每个复制体复制基因组的一半(2.6*106碱基对),在每一个复制叉上,以1000个核苷酸/秒的速率合成两条新链(前导链和滞后链)(2000个核苷酸/秒等于1000个碱基对/秒).所以复制全部的染色体需要2.6*106/1000 =2600秒=43分20秒.(b)尽管仅仅只有一个原点(O),但在前一个复制叉到达终点位置之前复制可以反复起始.因而在每一个双链DNA分子上存在着2个以上的复制叉.虽然复制一个染色体仍旧需要大约43分钟,但是由于起始的速率加快,完全复制一个染色体显得间隔更短了.5.Pr合成体系的内容和各成分的作用pCR反应体系中包含特异性寡核昔酸引物.DNA模板、DNA聚合酶dNtP及含有必需离子的反应级冲液。

一、寡核普酸引物PCR反应中的寡核廿酸引物至少应含有玲个与DNA模板序列完全互补的核节酸.皿好长达20一24个核普酸,这样才能保证扩增反应的特异性。

低温冷却液循环泵寡核昔酸引物在NCR反应中的浓度通常是。

.t一1.OlumWL,这一浓度足以完成30个循环的扩增反应。

浓度过高会引起模板与引物的错配,影响咒R反应的待异性,同时使形成引物二聚体的概率增大,而且非特异产物和引物二聚体可与摸板竞争使用酶、引物和dN1'P等,从而导致产量的下降。

反之,若寡核普酸引物浓度过低,会导致PCR效率的降低。

二、DNA模板DNA摸板亦称为靶序列。

它既可以是单链DNA.也可以是双链DNA,闭环DNA校板的扩墩效率略低于线状DNA,因此用质毯做模板时最好先将其线状化。

DNA模板巾不能混有蛋白醉、核酸酶、DNA聚合醉抑制剂以及能与DNA结合的蛋白质等。

在一定范围内、PCR的产址随DNA模板浓度的升高而显著增加,但模板浓度过高会导致反应的非特异性增加。

为保证反应的特异性,荃因组DNA做棋板时可用l滩左右,质位DNA做模板时用10ng鸣左右三、缓冲用于PCR的标准级冲液的主要成分通常有川J血一l1Cl和3i9C眨,其中二价镁离子的存在与否至关重要。

镁离子浓度可直接关系DNA聚合敌的活性和DNA双链的解链温度,因此对反应的特异性及产证有显著影响。

镁离子浓度过低会使DNA聚合酶活性降低、PCR产皿下降;镁离子浓度过高则影响PCR反应的特异性。

钱离子的最佳作用浓度为1.5一2.0~,肠由于镁离子可与缓冲液中的鳌合剂(如EDTA)以及带负电荷的丛团(如磷酸根)结合.因此反应中游离的镁离子浓度取决于反应液中dN]P和EDTA的浓度。

四、DNA聚合酶最早的PCR是采用大肠杆菌DNA聚合酶.的Kl}片段催化退火的寡核昔酸引物。

在DNA模板上进行延仲反应。

由于该酶会在DNA变性的拟度下失活.所以在每一轮合成反应中都必须巫新加人一份酶。

这种反应在扩增小片段DN州《200bp)时效果尚可,但对于扩增更长的目的DNA则结果不够理想。

同时这种反应的产率通常较低,产物的大小也不均一。

耐热DNA聚合酶的应用使这些问题迎刃而解。

耐热DNA聚合酶在951C下持续温育仍能保持活性,因此寡核节酸引物的退火和延仲可以在更高的温度下进行,使引物与校板的误配大大减少,扩增反应的特异性和产率大大提高,而更长的扩增产物也得以生成。

现已发现多种耐热DNA聚合酶,其共同特点是在高温下仍保持一定的酶活性甲但其他性能有一定的差别。

6.保证DNA正确复制的机制是什么(DNA的损伤修复系统?)1、复制时以一条链为模板进行半保留复制,且复制时严格按照碱基配对原则。

2、DNA聚合酶具有反向校读机制,在复制中对错配碱基进行校正。

3、DNA聚合酶可以将DNA链弯曲,防止非合成点对合成点的干扰。

4、复制完成后若存在错误,DNA会启动修复机制,包括错配修复(DAM甲基化酶)、切除修复(DNA切割酶)、重组修复(DNA切割酶聚合酶)、DNA直接修复(dna光解酶)、SOS 系统等。

7.真核生物第Ⅱ类启动子的特点,与原核生物启动子的不同之处原核生物启动子:在基因或操纵子的终末往往具有特殊的终止顺序,它可使转录终止和RNA聚合酶从DNA 链上脱落。

例如大肠杆菌色氨酸操纵子后尾含有40bp的GC丰富区,其后紧跟AT丰富区,这就是转录终止子的结构。

终止子有强、弱之分,强终止子含有反向重复顺序,可形成茎环结构,其后面为polyT结构,这样的终止子无需终止蛋白参与即可以使转录终止。

而弱终止子尽管也有反向重复序列,但无polyT结构,需要有终止蛋白参与才能使转录终止。

典型转录终止子的特征:茎环结构,富含GC;含4个以上的U。

原核生物启动子序列包括:CAP序列,增强聚合酶的结合和转录的起始序列(-70~-40);识别区(-35);解旋区(-10);转录起始位(+1)真核生物启动子:启动子(promoter):真核基因启动子是在基因转录起始位点(+ 1)及其5’上游近端大约100~200bp以内(或下游100bp)的一组具有独立功能的DNA序列,每个元件长度约为7~20bp,是决定RNA聚合酶转录起始和转录频率的关键元件。

启动子包括:A。

核心启动子(core promoter):是指足以使RNA聚合酶Ⅱ转录正常起始所必需的、最少的DNA 序列。

其中包括转录起始位点或起始子(initiator)(+1):一般是A或G及转录起始位点上游-25/-30bp处富含TA的典型元件TATA框。

B。

上游启动子元件(upstream promoter element,UPE):包括通常-70bp附近的CAAT框:GGCCAATCT和GC框:GGGCGG等,能通过TFⅡ-D复合物调节转录起始的频率,提高转录效率。

8.简述正常胆色素的代谢途径胆色素是体内铁卟啉化合物的主要分解代谢产物,包括胆红素、胆绿素、胆素原和胆素等。

这些化合物主要随胆汁排出体外。

胆红素是人胆汁的主要色素,呈橙黄色。

(一)胆色素的生成与转运体内铁卟啉化合物包括血红蛋白、肌红蛋白、细胞色素、过氧化物酶等。

正常人每天可生成250~350mg胆红素,其中80%以上来自衰老红细胞在肝、脾、骨髓的单核-吞噬细胞系统破坏释放出血红蛋白。

单核-吞噬细胞系统细胞微粒体含有非常活跃的血红素加氧酶,在氧分子和NADPH存在下,血红素加氧酶将血红素转化为胆绿素。

胆绿素在胞液胆绿素还原酶的催化下,生成胆红素。

胆红素离开单核-吞噬细胞后,在血液中主要与清蛋白结合而运输。

这种紧密的结合不仅增高胆红素的水溶性,有利于运输,而且还限制胆红素通过细胞膜对组织的毒性作用。

(二)胆红素在肝中的转变胆红素在被肝细胞摄取前先与清蛋白分离。

肝细胞对胆红素有极强的亲和力,当胆红素随血液运输到肝后,可迅速被肝细胞摄取。

胆红素进入肝细胞后,与胞浆中两种载体蛋白——Y蛋白和Z蛋白相结合形成复合物。

Y蛋白是肝细胞内主要的胆红素载体蛋白。

胆红素-Y蛋白复合物被转运到滑面内质网。

在葡糖醛酸基转移酶的催化下,胆红素接受来自UDP-葡糖醛酸的葡糖醛酸基,生成葡糖醛酸胆红素。

每分子胆红素可结合2分子葡萄糖醛酸。

双葡糖醛酸胆红素是主要的结合产物少量为单葡糖醛酸胆红素。

与葡萄糖醛酸结合的胆红素称为结合胆红素。

结合胆红素水溶性强,随胆汁排入小肠。

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