和蒸腾速率的测定原理一光合测定1`测干重改良半叶法

三、测定及设置： 6、按F4（New MSMNTS）,按2，按F2 （FLOW）设置100-500能合适控制叶室内相 对湿度的值，<enter>，按F5（Lamp off）选 Quantum flux<enter><enter>, 根据植物类型 选择饱和光强（500-1500）， <enter>, 按1。 7、碱石灰管到“by pass”，夹好叶片，关紧 叶室，干燥剂管旋至控制到所要的RH（如 50%），立即按F5（Match） ，待仪器完成 计算后，按F1（exit）。
从取出的数据可以获得下列值。
Ftime——持续时间(s) Photo——光合速率（μmol.m-2s-1） Cond——气孔导度（mol H2Om-2s-1） Ci——胞间CO2浓度（μl.L-1） Trmmol——蒸腾速率（mmol.m-2s-1） VpdL——水气压差（mg/L） Area——叶面积（cm2） BLCond——界面层导度 Tleaf——叶温（℃） StmRat——气孔比率 Tair——气温（℃） TBlk——参比室（℃） CO2S——叶室CO2（μl.L-1）
五、光强（ＣＯ ２ ）光合作用曲线测定（自动） 在 上 述 测 量 菜 单 下 按 ５ ， 按 F1 （AUTOPROG）,找Light curve(CO2 curve), 名 命 及 做 标 记 <enter>, 根 据 提 示 设 置 相 应 参 数 <enter>….Y, 开始自动测量。按四法提取数据。
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CO2R——参比室CO2（μl.L-1） H2OR——参比室水含量
H2OS——叶室水含量
RH_R——参比室相对湿度（%） RH_S——叶室相对湿度（%） Flow——流量（ml/s） PARi——叶室内光强（μmol.m-2s-1）
PARo——叶室外光强（μmol.m-2s-1） Press——大气压（Mpa） CsMch ——CO2S匹配 HsMch——H2OS匹配
Is the chamber/IRGA connected?
4、已连接，按“Y”，CO2分析仪有“噗……” 声，仪器进入开机状态。没有连接，按 “NO”。关机或在“Sleep”状态下再连接。 5、校正。把碱石灰管和干燥剂管旋至 “Scrub”,按F3（Calibration），关闭叶室， 选择‘IRGA zero’, 按<enter>,“Y”。校正到 |CO2|< μmol, |H2O|<0.1 mmol, (约20 分)，（CO2,每天应较正，H2O可以1周一 次）。按F5(Quit)和escape返回测定界面。
参比室
入口
• 原理二：蒸腾速率和气孔导度测定 • 蒸腾产生水气，使叶室中湿度提高，安 装在叶室中的湿度感应器可测出湿度的 变化，经主机电脑计算出蒸腾速率，和 气孔导度（或阻力）。由于H2O和CO2之 间的扩散存在着线性关系，从而根据蒸 腾速率、气孔导度和外部CO2(Ca)浓度 等，求得内部CO2(Ci)浓度。
实验5-6、植物光合和呼吸作用、气孔导度 和蒸腾速率的测定 原理一：光合测定 6CO2+6H2O
1、测干重——改良半叶法 2、测放O2 ——氧电极法 3、测CO2 ——红外线CO2分析仪法
(CH2O)6+6O2
1、测干重——改良半叶法：同面积光暗叶片重量差。
三氯乙酸 TCA
暗 中
2、测放O2 ——氧电极法。气相和液相
• 表1、光合、呼吸和蒸腾速率、气孔导度及水分利用效率
• Table 1 The rates of photosynthesis(Pn), respiration(R) and transpiration(Tr)， stomatal conductance(SC)，and water utilization efficiency(WUE) Group Pn (μmol.m-2s-1) R (μmol.m-2s-1) Tr (mmol.m-2s-1) SC(molH2Om-2s-1) WUE 1 6.28 2 4.41 3 8.34 Average 6.34± 1.98
• • • • •
30 25
12 10 8
1 2 3
Photosynthetic rate (μmol.m-2s-1)
20 15 10 5 0 0 -5 500 1000 1500 2000 2500
Tea 01-2
6 4 2 0 -2
7 6 5 4 1 2
7 8 9 10 0 500 1000 1500
LI-6400操作指南(ver.5)
红兰光源叶室和CO2红外分析器
连接光源和控制器的地缆
LI-6400控制系统
一、仪器安装： 1、选择叶室。根据测定对象选择不同叶室进 行安装,本实验选用仪器自备的红兰光源（一 般测定选择红兰光源或自然光源不透明叶 室，荧光测定选择荧光叶室，详见说明书）。
2、连接仪器各部件 电源连线与控制器正确匹配（管道和线路 切不可接错）， 多孔插线和分析器对准 （红点）插入；硬塑料管带黑圈套的端与 分析器相接并使另一端与控制器“sample” 相接。接上带“buffer”的进气管，接上电源 （切记，除“Sleep”状态外，在电源开情况 下，不可接或卸管道和线路，否则会烧毁 仪器）。
LI-6400控制系统接线侧
LI-6400控制系统干燥管和碱石灰管侧
LI-6400控制系统侧电缆连接
LI-6400控制系统侧气管连接
LI-6400分析器电缆连接
LI-6400分析器气管连接
LI-6400分析器分析电缆连接
二、开机与校正： 3、插上电池，打开电源开关后。 （仪器自动进行状态检测，并进入 Dir:/user/configs/Userprefs菜单）。在该菜 单下，选择一与叶室、光源相匹配的内容 （如“red blue source”表示用红兰光源不透 明底叶室） <enter>，仪器显示：
六、本次实验测定内容： 1、每组测一叶（3-5次）光合速率,气孔导度和 蒸腾速率。计算水分利用效率。
光合速率 水分利用效率= （μ mol/mmol) 蒸腾速率
2、每大组测一条(植物：仙客来？)光-合曲线。 3、分析本次实验结果： （1）本次实验测定光合的光强是否符合该植物 光合要求？ （2）作出光-光合响应曲线图，确定呼吸率,确 定光补偿点、饱和点，计算量子效率。 （3）分析光对蒸腾速率和气孔导度的影响。
图2 氧电极装置示意图
1、光源 2、反应杯 3、电极 4、超级恒温水浴 8、记录仪
5、触点式温度计
6、泵
7、控制器
1.氧电极
氧电极是由嵌在有 机玻璃上的铂和银所构 成，以0.5mol/L KCl为 电解质，电极头外覆盖 一层聚乙烯或聚四氟乙 烯薄膜，其厚度在15～ 25μm之间，用“〇”形套 膜环固定，使电极与被 测溶液隔离，而溶解在 溶液中的氧仍能透过薄 膜，进入电极内。较薄 的膜易透过氧，因而对 氧浓度变化的响应时间 短。
图3氧电级的构造 1.Pt极 2.Ag-AgCl极 3.填充物 (环氧树脂) 4.电极柄 5.电极 头 6.薄膜 7.套膜环 8.KCl溶 液
3、红外线CO2分析仪法： CO2吸收4260nm红外线 封闭式：
单位时间内CO2下降量
叶室
分析器
叶室
开放式： 分析器 气体
出口 参比室和叶室CO2差值
CO2
8、按F1“Open Logfile”，命名如“Zhan”及做 好标记<enter>。 9、调节叶面积，按3，按F1（Area）,输入面 积。按1返回。 10、采样。ΔCO2稳定时，按采样键（F1或 测定器黑钮）3-5次。即为同一叶片3-5次测 定值。
四、数据存取： 11、保存。采样完后按<escape>返回到主菜 单，按Close file,按F5，end进入SLEEP。（同 一班只需一个file，不同的组可以用<add mark>区分。 12、数据取出。与电脑连接，解除SLEEP， 上下选择到File exchange mode,打开电脑 winPX for 6400,在LI-6400/User下把自己要的 测定文件拖入专设目录。在EXCEL下选择所 有文件在文本导向下，选择“，”打开。
Biotec 01-2
2000
2500
12 10 8 6 4 2 0 0 -2 500 1000 1500 2000 2500 5 6 7
AgroS 01-2
3 2 1 0 -1 0 500
Hotcul 01-1
1000
1500
2000
2500
PPFD (μmol.m-2s-1)
Fig 1. Response curves of photosynthesis to PPFD