DNA重组技术的基本工具理科
高一生物DNA重组技术的基本工具
DNA重组技术的基本工具
基因的大小以纳米计算，要对它进行剪切、 拼接等操作，没有非常精细的工具是不行的。进 行基因操作最少需要以下三种工具：
• 准确切割DNA的工具（“分子手术刀”） ——限制性内切酶 • DNA片段的连接工具（“分子缝合针”） ——DNA连接酶 • 基因转移工具（“分子运输车”） ——基因进入受体细胞的载体
思考
• 在自然界中有一些生物的DNA可能进入另 一种生物的细胞中。我们有没有学过相关 的实例？
• 现今存在的生物为什么没有在长期的进化 过程中被外源DNA的入侵而灭绝，仍能保 持一种稳定状态？
• 怎样才能使外来的DNA失效从而保护自身？
思考
• 从哪里可以找到这种切割外来的DNA 而对自身不切割的物质？
• 要实现药物基因在烟草中的表达， 要提前做哪些关键工作?
瓜中士也跃耍着功夫像菜刀般的怪影一样朝壮扭公主狂抓过来壮扭公主骤然像珊瑚红色的悬筋遗址狐一样猛叫了一声，突然玩了一个独腿狂舞的特技神功，身上眨眼间生出 了三只很像飘带一样的深紫色脑袋。接着搞了个，醉狐榔头翻三百六十度外加鸟喝锯片旋三周半的招数！紧接着把有着无穷青春热情的胸部耍了耍，只见二道忽亮忽暗的酷
• 科学家是怎样找到这种酶的？ • 这种酶具有什么作用？
限制性核酸内切酶的作用： 1.能识别特定核苷酸序列； 2.从特定部位的两个核苷酸之间切开。
练习
• 在基因工程中，切割运载体和含有目的基因
的DNA片段，需使用（ ）
A. 同种限制酶
B. 两种限制酶
C. 同种连接酶
D. 两种连接酶
• 基因工程常用的受体细胞有（ ）
似土堆般的白冰灵，突然从圆圆的极像紫； 淘宝优惠劵 淘宝省钱返利网站；色铜墩般的脖子中飞出，随着一声低沉古怪的轰响，天蓝色的大地 开始抖动摇晃起来，一种怪怪的猪精深憨味在疯鬼般的空气中游动。最后摆起如同天边小丘一样的鼻子一吼，猛然从里面喷出一道妖影，她抓住妖影陶醉地一颤，一组白惨 惨、黑晶晶的功夫¤巨力碎天指→便显露出来，只见这个这件宝贝儿，一边疯耍，一边发出“咻咻”的美响。……超然间壮扭公主闪速地使自己粗壮的大腿跳动出鹅黄色的 蝴蝶味，只见她带着田野气息的嘴唇中，狂傲地流出二串颤舞着¤飞轮切月斧→的蚊子状的仙翅枕头枪，随着壮扭公主的摆动，蚊子状的仙翅枕头枪像枕头一样在肚子上迷 朦地耍出隐隐光栅……紧接着壮扭公主又让自己能上下翻转的眼镜耍出亮红色的馄饨声，只见她长长的如同明黄色飘带一样的宽大围巾中，萧洒地涌出四片甩舞着 ¤飞轮切月斧→的下巴状的药丸，随着壮扭公主的晃动，下巴状的药丸像冰茬一样，朝着萨兹赫瓜中士古怪的脸狂抓过去。紧跟着壮扭公主也跃耍着功夫像菜刀般的怪影一 样朝萨兹赫瓜中士狂抓过去随着两条怪异光影的瞬间碰撞，半空顿时出现一道紫玫瑰色的闪光，地面变成了暗黄色、景物变成了暗灰色、天空变成了浅灰色、四周发出了美 妙的巨响！壮扭公主如同红苹果样的脸受到震颤，但精神感觉很爽！再看萨兹赫瓜中士瘦弱的手掌，此时正惨碎成肉丁样的暗黑色飞渣，闪速射向远方，萨兹赫瓜中士飞嘘 着疯鬼般地跳出界外，飞速将瘦弱的手掌复原，但元气和体力已经大伤学友壮扭公主：“这么低级！你的业务怎么越来越差……”萨兹赫瓜中士：“不让你看看我的真功夫 ，你个小公民就不知道什么是高科技……”壮扭公主：“牛屎插上再多的大蒜也变不了空间站！你的菜谱实在太垃圾了！”萨兹赫瓜中士：“我让你瞧瞧我的『彩银缸圣沙 砾爪』，看你还竟敢小瞧我……”壮扭公主：“嘿嘿！那我让你知道知道什么是真正名牌的原野！欣赏欣赏什么才是顶级原版的肥妹！认真崇拜一下纯天然的壮扭公主！！ ”萨兹赫瓜中士突然把活似竹节形态的腿抖了抖，只见五道闪耀的极似牛屎般的金影，突然从瘦弱的耳朵中飞出，随着一声低沉古怪的轰响，淡绿色的大地开始抖动摇晃起 来，一种怪怪的恐动险境味在急速的空气中闪动！接着凹露的脖子立刻蠕动变形起来……肥壮的活似小号形态的手臂闪出淡黑色的团团疑烟……弯曲的深橙色扫帚形态的手 指跃出蓝宝石色的点点神响。紧接着淡黑色蒜头造型的石板银光仙霞衣顿时喷出苦银地狱色的杏动狮动味……神气的雪白色怪石似的猪肺星怪盔闪出钢板飘哼声和嗷哈声… …闪闪发光的紫玫瑰色钢轨款式的戒指时浓时淡渗出嫩摇透明般的奇闪！最后扭起深橙色扫帚形态的手指一转，威猛地从里面弹出一道银光，他抓住银光缠绵地一旋，一套 灰叽叽、亮晶晶的兵器『棕鸟蚌精驴毛钩』便显露出来，只见这个这件怪物儿，一边紧缩，一边发出“吱吱”的奇声！……突然间萨兹赫瓜中士发疯般地旋起瘦弱的碳黑色 肥肠形态的七根脊椎骨，只见他水红色细小圆规模样的胡须中，轻飘地喷出三簇马鞍状的花苞，随着萨兹赫瓜中士的旋动，马鞍状的花苞像水闸一样在双手上怪异地烘托出 团团光甲……紧接着萨兹赫瓜中士又弄了一个侧卧蠕动炸短棍的怪异把戏，，只见他傻傻的浅黑色萝卜一样的板尺棉麻笑海衫中，威猛地滚出三道高岗钻石唇蟹状的花豹， 随着萨兹赫瓜中士的耍动，高岗钻石唇蟹状的花豹像澡盆一样，朝着壮扭公主睡意朦胧、但却时常露出欢快光彩的眼睛怪扫过来……紧跟着萨兹赫瓜中士也蹦耍着兵器像菱 角般的怪影一样向壮扭公主怪扫过去壮扭公主突然把有着无穷青春热情的胸部耍了耍，只见二道忽亮忽暗的酷似土堆般的白冰灵，突然从圆圆的极像紫金色铜墩般的脖子中 飞出，随着一声低沉古怪的轰响，天蓝色的大地开始抖动摇晃起来，一种怪怪的猪精深憨味在疯鬼般的空气中游动。接着有着各种古怪想法的圆脑袋突然扭曲变异起来…… 浑圆饱满的霸蛮屁股跳出纯红色的隐隐寒光……异常结实的手臂闪出墨紫色的隐约幽暖……紧接着极像菊黄色连体降落伞一样的胸罩猛然窜出浓青色的羊鬼魔蹦味……浑厚 低沉的女低音跳出魔蹦妖精声和啾啾声……憨直粗爽的性格忽隐忽现露出灾难瘟酣般的闪烁。最后旋起大如飞盘的神力手掌一摆，飘然从里面飞出一道佛光，她抓住佛光出 色地一转，一套绿莹莹、青虚虚的兵器¤飞轮切月斧→便显露出来，只见这个这件怪物儿，一边转化，一边发出“呜呜”的仙响。……突然间壮扭公主发疯般地转起憨直贪 玩、有着各种古怪想法的圆脑袋，只见她结实丰满、有着无穷青春热情的胸部中，快速窜出三道扭舞着¤飞轮切月斧→的鳄鱼状的颗粒，随着壮扭公主的转动，鳄鱼状的颗 粒像柿子一样在双手上怪异地烘托出团团光甲……紧接着壮扭公主又忽悠了一个蹲身膨胀玩画报的怪异把戏，，只见她晶绿色的三尖式力神戒指中，飘然射出三缕晃舞着 ¤飞轮切月斧→的林地矿肾猪状的球拍，随着壮扭公主的甩动，林地矿肾猪状的球拍像花苞一样，朝着萨兹赫瓜中士长长的紫罗兰色臂章样的眼睛怪扫过去……紧跟着壮扭 公主也蹦耍着兵器像菱角般的怪影一样向萨兹赫瓜中士怪扫过去随着两条怪异光影的瞬间碰撞，半空顿时出现一道钢灰色的闪光，地面变成了墨蓝色、景物变成了淡红色、 天空变成了亮黄色、四周发出了飞速的巨响……壮扭公主睡意朦胧、但却时常露出欢快光彩的眼睛受到震颤，但精神感觉很爽！再看萨兹赫瓜中士活似樱桃形态的脚，此时 正惨碎成肉丁样的暗黑色飞渣，闪速射向远方，萨兹赫瓜中士飞嘘着疯鬼般地跳出界外，飞速将活似樱桃形态的脚复原，但已无力再战，只好落荒而逃学友最后一个校妖终 于逃的不见踪影，战场上留下了满地的奇物法器和钱财珠宝……壮扭公主正要收拾遍地的宝贝，忽然听四声怪响！四个怪物忽然从四个不同的方向钻了出来……只见Ｂ．丝 日勃木匠和另外四个校妖突然齐声怪叫着组成了一个巨大的黑板青毛神！这个巨大的黑板青毛神，身长八十多米，体重二十多万吨。最奇的是这个怪物长着十分变态的青毛 ！这巨神有着土黄色磨盘模样的身躯和纯黄色细小扫帚般的皮毛，头上是米黄色娃娃一样的鬃毛，长着青远山色红薯模样的棒槌飞花额头，前半身是火橙色长号模样的怪鳞 ，后半身是高高的羽毛。这巨神长着绿宝石色红薯似的脑袋和灰蓝色香槟模样的脖子，有着淡蓝色仙鹤形态的脸和纯蓝色瓜秧似的眉毛，配着淡青色领带一样的鼻子。有着 深绿色磁盘形态的眼睛，和深紫色包子模样的耳朵，一张深绿色榛子模样的嘴唇，怪叫时露出水青色椰壳似的牙齿，变态的火橙色蚯蚓般的舌头很是恐怖，纯黄色旗杆般的 下巴非常离奇。这巨神有着如同乌贼似的肩胛和犹如火腿一样的翅膀，这巨神修长的淡黄色馄饨般的胸脯闪着冷光，活似胶卷一样的屁股更让人猜想。这巨神有着仿佛春蚕 模样的腿和深青色灵芝似的爪子……柔软的米黄色南瓜般的九条尾巴极为怪异，暗紫色椰壳似的龙虾浪云肚子有种野蛮的霸气。淡黄色螳螂一样的脚趾甲更为绝奇。这个巨 神喘息时有种淡青色螺壳般的气味，乱叫时会发出水蓝色雨丝形态的声音。这个巨神头上水绿色鸭蛋一样的犄角真的十分罕见，脖子上酷似辣椒一样的铃铛真的有些威猛但 又露出一种隐约的艺术……壮扭公主兴奋道：“好玩，有创意！本公主相当喜欢！有什么花样快弄出来我瞧瞧！”壮扭公主一边说着一边将身体变得和”黑板青毛神一样巨 大……这时那伙校妖组成的巨大黑板青毛神忽然怪吼一声！只
学案17：DNA重组技术的基本工具
DNA重组技术的基本工具【学习目标】1.说出基因工程的概念。
2.认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。
3.说出DNA重组技术所需三种基本工具的作用。
【学习重点】DNA重组技术所需的三种基本工具的作用。
【学习难点】基因工程载体需要具备的条件。
【知识链接】1、DNA分子的结构特点2、噬菌体侵染细菌的实验3、原核生物的结构特点【自主学习】1、――“分子手术刀”，又称为。
（1）主要来源：主要存在于中。
（2）作用：能够识别双链DNA分子的某种序列，切开的是每条链特定部位的两个核苷酸之间的。
（3）结果：形成DNA末端。
限制酶切割DNA产生的DNA末端有两种形式，即和。
前者是限制酶切割中轴线的产生的，后者是沿切割而形成的。
2、――“分子缝合针”（1）作用：将切下的DNA片段“缝合”，恢复被限制酶切开的，拼接成新的DNA分子。
（2）种类：E.coli DNA连接酶只能连接互补的；T4 DNA连接酶两种末端都能连接，但对的连接效率比较低。
3、基因进入受体细胞的载体――“”（1）载体的条件：①能够在细胞中；②有多个，便于外源基因的插入；③具有，便于重组DNA的鉴定和选择；④能在宿主细胞内友好借居，不影响宿主细胞的生命活动。
（2）载体的种类：①最常用的是，它是一种裸露的、结构简单、独立于之外、能够的链状。
含有一个至多个，供外源基因插入其中，并带有特定的，可供重组DNA的鉴定和选择。
②除此之外，还有、也可以充当基因工程载体。
【合作探究】探究一：从结构上分析，为什么不同生物的DNA能够重组？探究二：DNA重组技术的基本工具一限制性核酸内切酶——“分子手术刀”问题1：原核生物中存在的限制酶有什么作用呢？想一想，为什么限制酶不切割自身的DNA？问题2：限制性核酸内切酶的作用问题3：限制酶切割的是什么化学键？什么是黏性末端？什么是平末端？问题4：下列限制酶切割DNA后都会形成黏性末端吗？请大家画出这几种DNA片段被对应的限制酶切割后的结果。
DNA重组技术的基本工具
DNA重组技术的基本工具DNA重组技术是一种重要的分子生物学技术，用于改变基因组中的DNA序列，使之具有特定的功能。
这项技术的应用范围广泛，可以在基础研究、医学诊断、药物开发等领域发挥重要作用。
DNA重组技术的基本工具包括DNA片段的制备、限制性内切酶、DNA连接酶、质粒和载体等。
首先，DNA片段的制备是DNA重组技术的第一步。
通过PCR（聚合酶链反应）或限制性内切酶切割，可以从某个DNA源中获取特定的DNA片段。
PCR是一种体外扩增技术，可以将特定的DNA序列进行快速放大。
限制性内切酶是一类特殊的酶，可以识别特定的DNA序列并在该序列上切割DNA链。
通过PCR和限制性内切酶的组合应用，可以制备出需要的DNA片段。
其次，限制性内切酶是DNA重组技术中的重要工具之一。
限制性内切酶可以特异性地切割DNA链，并产生一定的粘性或平滑的DNA末端。
这些末端的特性决定了DNA片段连接的方式。
常用的限制性内切酶有EcoRI、BamHI、HindIII等。
当两个DNA片段具有相同的限制性内切酶切割位点时，它们可以通过限制性内切酶的连接来形成一个新的DNA分子。
接下来，DNA连接酶也是DNA重组技术中必不可少的工具之一。
DNA连接酶能够将两个DNA片段在适当的条件下连接在一起。
常用的DNA连接酶有T4 DNA连接酶和DNA聚合酶。
通过合适的实验条件和适当的连接酶，可以使两个DNA片段有效地连接成为一个整体。
此外，质粒和载体也是DNA重组技术中的重要工具。
质粒是一种小环状DNA分子，在细菌细胞中存在，并能自我复制。
载体则是质粒或其他DNA分子，用于携带所需的DNA片段。
通过将需要插入的DNA片段连接到载体上的限制性内切酶切割位点上，并将该载体转化至宿主细胞中，就可以实现外源DNA的导入。
在实际应用中，DNA重组技术的基本工具往往是共同配合使用的。
通过PCR或限制性内切酶的组合，可以制备出所需的DNA片段；通过限制性内切酶的连接和DNA连接酶的应用，可以将不同的DNA片段连接起来形成一个新的DNA分子；通过质粒和载体的应用，可以将需要插入的DNA片段导入到宿主细胞中实现转化。
《DNA 重组技术的基本工具》 讲义
《DNA 重组技术的基本工具》讲义DNA 重组技术，也被称为基因工程，是现代生物技术的核心之一。
它让我们能够在分子水平上对生物的遗传物质进行操作和改造，为人类带来了许多前所未有的机遇和可能性。
而要实现 DNA 重组，就离不开一系列的基本工具，下面我们就来详细了解一下这些工具。
一、限制性内切酶限制性内切酶，简称限制酶，是 DNA 重组技术中最重要的工具之一。
它就像是一把极其精准的“分子剪刀”，能够识别特定的核苷酸序列，并在特定的位点将 DNA 分子切断。
限制酶具有高度的特异性，每种限制酶只能识别和切割特定的DNA 序列。
这些特定的序列通常被称为识别序列或识别位点，它们具有回文结构，即从两条链的 5'端向 3'端读取，序列是相同的。
例如，EcoRⅠ限制酶识别的序列是 5'GAATTC-3'，切割位点在 G和 A 之间。
当限制酶作用于 DNA 分子时，会产生两种类型的末端：黏性末端和平末端。
黏性末端是指被限制酶切割后，产生的两条链的末端具有互补的单链突出部分。
这种末端很容易通过碱基互补配对重新连接起来，这在DNA 重组中非常重要。
平末端则是指切割后产生的两条链的末端是平齐的，相对来说，连接起来的难度稍大一些。
限制酶的发现和应用，为 DNA 重组技术的发展奠定了基础。
通过使用不同的限制酶，可以将不同来源的 DNA 片段切割成具有相同末端的片段，从而为后续的连接创造条件。
二、DNA 连接酶有了限制酶把 DNA 分子切割开，还需要有“胶水”把它们粘起来，这就是 DNA 连接酶的作用。
DNA 连接酶能够将两个具有互补黏性末端或平末端的 DNA 片段连接在一起，形成一个完整的 DNA 分子。
在连接过程中，DNA 连接酶催化相邻核苷酸之间形成磷酸二酯键，从而实现 DNA 片段的连接。
常见的 DNA 连接酶有两种：T4 DNA 连接酶和大肠杆菌 DNA 连接酶。
T4 DNA 连接酶既能连接黏性末端，也能连接平末端，但连接平末端的效率相对较低；大肠杆菌 DNA 连接酶则只能连接黏性末端。
DNA重组技术的基本工具定稿
形成两种末端 4、结果： 结果：
基因的针线──DNA连接酶 ──DNA 二、基因的针线──DNA连接酶
连接酶有两种： 连接酶有两种：一种是从大肠杆菌中分离得 到的，称之为E·coli连接酶。另一种是从 连接酶。 到的，称之为 连接酶 T4噬菌体中分离得到，称为 4连接酶。 噬菌体中分离得到， 噬菌体中分离得到 称为T 连接酶。
第三阶段
精子细胞
变形
精子
精子细胞变形中的主要变化： 精子细胞变形中的主要变化：
1.细胞核—— 1.细胞核—— 精子头的主要部分 细胞核 2.高尔基体—— 2.高尔基体—— 头部的顶体 高尔基体 3.中心体—— 3.中心体—— 精子的尾 中心体 4.线粒体—— 线粒体鞘膜(尾的基部) 4.线粒体—— 线粒体鞘膜(尾的基部) 线粒体 5.细胞内其他物质—— 原生质滴(球状, 5.细胞内其他物质—— 原生质滴(球状, 细胞内其他物质
二、基因表达载体的组成： 基因表达载体的组成：
a、目的基因 b、启动子 c、终止子 d、标记基因
三、将目的基因导入受体细胞
将目的基因导入 植物细胞 方法 农杆菌转化法 基因枪法 花粉管通道法
将目的基因导入 ——显微注射法 显微注射法 动物细胞 将目的基因导入 ——感受态细胞 感受态细胞 微生物细胞
(二)利用PCR技术扩增目的基因 利用PCR技术扩增目的基因 PCR
聚合酶链式反应 概念：PCR全称为_______________， 全称为_______________ ① 概念：PCR全称为_______________，是一项 特定DNA DNA片段 体外 特定DNA片段 在生物____复制___________ ____复制___________的核酸合成技术 在生物____复制___________的核酸合成技术 DNA复制 ②原理：__________ 原理： DNA复制 已知基因的核苷酸序列 ③条件：_______________________、 条件：_______________________、 四种脱氧核苷酸 _______________、 一对引物 _______________、___________ 、 DNA聚合酶 DNA聚合酶 ___________. 指数 方式扩增， ____（ 方式： _____方式扩增 ④方式：以_____方式扩增，即____（n为扩增循 2n 环的次数） 环的次数） 结果： ⑤结果： 使目的基因的片段在短时间内成百万倍地扩增
高中生物人教版选修三同步导学：1.1 DNA重组技术的基本工具(理解+掌握+应用)
1．1DNA重组技术的基本工具1．基因工程突破了生殖隔离，实现了不同种生物间的基因重组。
2．不同生物基因能拼接在一起的理论基础是DNA分子都是由4种脱氧核苷酸构成的规则的双螺旋结构。
3．外源DNA导入受体细胞表达的理论基础是密码子的通用性。
4．限制性核酸内切酶的作用特点是识别双链DNA分子特定的核苷酸序列，并在特定位点上切割。
5．限制酶和DNA连接酶的作用部位都是两个核苷酸间的磷酸二酯键。
6．在基因工程中使用的载体除质粒外，还有λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。
基因工程的概念及其诞生与发展[自读教材·夯基础]1．基因工程的概念2．基因工程的诞生和发展(1)基础理论的重大突破：①DNA是遗传物质的证明；②DNA双螺旋结构和中心法则的确立；③遗传密码的破译。
(2)技术发明使基因工程的实施成为可能：①基因转移载体和工具酶相继发现；②DNA合成和测序技术的发明；③DNA体外重组得到实现及重组DNA表达实验获得成功。
(3)基因工程的发展与完善：1983年，世界第一例转基因烟草培养成功，基因工程进入迅速发展阶段。
1988年PCR 技术的发明，使基因工程进一步发展和完善。
1．通过分析基因工程的概念，讨论基因工程的原理是什么。
提示：基因重组。
2．将人的胰岛素基因导入大肠杆菌体内，通过大肠杆菌能大量生产人胰岛素。
请分析人胰岛素基因能在大肠杆菌体内表达的理论基础是什么。
提示：生物共用一套遗传密码。
[跟随名师·解疑难]1．对基因工程概念的理解操作环境操作对象操作水平基本过程结果生物体外基因DNA分子水平剪切→连接→导入→表达定向地改造生物的遗传性状2．基因工程的原理和理论基础(1)原理：基因重组。
(2)理论基础：①拼接：不同生物DNA的基本组成单位相同，都是4种脱氧核苷酸；空间结构相同，都是规则的双螺旋结构。
②表达：生物界共用一套遗传密码，相同的遗传信息在不同生物体内表达出相同的蛋白质。
基因工程操作的基本工具1．限制性核酸内切酶(1)来源：主要从原核生物中分离出来。
生物重组dna技术的基本工具
生物重组DNA技术是利用基因工程方法对DNA分子进行重新组合和修改的技术。
下面是生物重组DNA技术中常用的基本工具：限制性内切酶（Restriction Enzymes）：这些酶能够识别DNA的特定序列，并在该序列上切割DNA分子。
限制性内切酶可以用于切割目标DNA和载体DNA，以便进行重组。
DNA连接酶（DNA Ligase）：这种酶能够将两条DNA分子的断裂末端连接在一起，形成一个完整的DNA分子。
DNA连接酶用于将目标DNA片段与载体DNA片段连接起来，构建重组DNA。
DNA聚合酶（DNA Polymerase）：DNA聚合酶能够在DNA模板上合成新的DNA链。
在重组DNA技术中，DNA聚合酶可用于扩增目标DNA片段，进行PCR（聚合酶链式反应）等操作。
电泳装置（Electrophoresis Apparatus）：电泳装置用于将DNA分子按照大小进行分离和纯化。
通过电泳，可以根据目标DNA的大小和电荷特性对其进行分离和检测。
载体（Vector）：载体是用于携带和复制重组DNA的DNA分子，如质粒或病毒。
载体提供了重组DNA在细胞中复制和表达的环境。
转化（Transformation）：转化是将重组DNA导入目标细胞中的过程。
通过转化，重组DNA 可以被细胞摄取并稳定地存在于细胞内。
DNA测序技术（DNA Sequencing）：DNA测序技术用于确定DNA分子的核酸序列。
它是生物重组DNA技术中重要的工具，可用于验证重组DNA的正确性和准确性。
这些基本工具在生物重组DNA技术中起着关键的作用，使研究人员能够对DNA进行精确的操作和修改，从而实现基因的克隆、重组和表达。
2024年高中生物新教材同步选择性必修第三册第3章 基因工程第1节 重组DNA技术的基本工具含答案
2024年高中生物新教材同步选择性必修第三册第3章基因工程第1节重组DNA技术的基本工具课程内容标准核心素养对接1.简述重组DNA技术所需的三种基本工具及其作用。
2.认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。
3.进行DNA的粗提取与鉴定。
1.科学思维——模拟重组DNA分子的操作过程，说出合成新DNA分子的基本原理。
2.科学探究——结合实验室条件，对DNA进行粗提取和鉴定。
知识点1基因工程及其诞生与发展1.基因工程的概念2.基因工程的诞生和发展(1)基因工程的诞生(2)基因工程的发展知识点2重组DNA技术的基本工具1.限制性内切核酸酶(简称限制酶)——“分子手术刀”是一类酶而不是一种酶对所连接的DNA片段两端的碱基序列没有专一性要求2.DNA连接酶——“分子缝合针”(1)作用：将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的磷酸二酯键。
(2)种类3.基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”(1)常用载体——质粒①化学本质：质粒是一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外，并具有自我复制能力的环状双链DNA分子。
②质粒作为载体所具备的条件及原因(2)其他载体：噬菌体、动植物病毒等。
(3)功能①相当于一种运输工具，将外源基因送入受体细胞。
②携带外源基因在受体细胞内大量复制。
(1)基因工程是人工操作导致的染色体变异，变异是不定向的(×)(2)S型细菌的DNA进入R型细菌并使R型细菌转化为S型细菌，发生了基因重组(√)(3)DNA连接酶可以连接目的基因与载体的氢键，形成重组DNA(×)(4)E.coli DNA连接酶既能连接黏性末端，又能连接平末端(×)(5)限制性内切核酸酶、DNA连接酶和质粒是基因工程中常用的三种工具酶(×)(6)新冠病毒(RNA病毒)可以作为基因工程的载体(×)教材P71图示拓展1.已知限制酶Eco RⅠ和SmaⅠ识别的碱基序列和酶切位点分别为和，分析回答下列问题：(1)在图中画出两种限制酶切割DNA后产生的末端。
DNA重组技术的基本工具
（1）种类： E·coli DNA连接酶、T4 DNA连接酶 （2）作用： 形成磷酸二酯键
基因A
基因B
将双链 DNA片段“缝合”起来，恢复被限制 酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键 ,这样一个 重组的DNA分子就形成了。
4
载体--质粒
（1）作为运载工具，将目的基因导入受体细胞中 （2）在受体细胞内对目的基因进行大量复制
载体的作用
（1）能够在宿主细胞中复制并稳定地保存
载体的必要 条件
（2）具多个限制酶切点，以便与外源基因连接
（3）具有某些标记基因，便于进行鉴定和选择
载体的种类
（1）细菌的质粒 （2）病毒：λ噬菌体衍生物、动植物病毒等
பைடு நூலகம்
黏性末端
2
限制性核酸内切酶
②SmaⅠ: 只能识别CCCGGG序列，并在C和G之间切开。 在G与C 之间切割
中轴线
2
限制性核酸内切酶
②SmaⅠ: 只能识别CCCGGG序列。
当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的 DNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。
平末端
平末端
３
DNA连接酶
1.1 DNA重组技术的基本工具
具有绿色荧光蛋白基因的水母能发出绿色的荧光
1.1 DNA重组技术的基本工具
转入水母绿色荧光蛋白基因后的小鼠
1
基因工程
（1）概念： 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设 计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予 生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要 的新的生物类型和生物产品。 （2）别名： DNA重组技术 （3）原理： 基因重组 （4）操作环境：体外操作 （5）操作水平：DNA分子水平
高中生物备课参考 DNA重组技术的基本工具
1．基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外 DNA 重组和转基因技术，赋予 生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在 DNA 分子水平上进行设计和施工的，又叫做 DNA 重组技术。 （1）操作环境：生物体外 （2）操作对象：基因 （3）操作水平：DNA 分子水平 （4）基本过程：剪切→拼接→导入→表达 （5）结果：人类需要的基因产物
答案： （1）RNA （2）逆转录 （3）转录和翻译 （4）基因突变 突变频率高和突变 多方向
单链 RNA 结构不稳定 （5）世界艾滋病 （6）SARS 冠状病毒
1．能够使植物体表达动物蛋白的育种方法是（ ）
A．单倍体育种 B．杂交育种
C．基因工程育种 D．多倍体育种
答案：C 2．把兔控制血红蛋白合成的信使 RNA 加入到大肠杆菌的提取液中，结果能合成出兔的血红
A、 CTTAAG， 切 点 在 C 和 T 之 间
B、 CTTAAG，
ห้องสมุดไป่ตู้
切点在 G 和 A 之间
C、GAATTC，切点在 G 和 A 之间
D、CTTAAC，切点在 C 和 T 之间
答案：C
2.依右图有关基因工程的工具酶功能的叙述，不正确的是 ( )
A、切断 a 处的酶为限制核酸性内切酶
B、连接 a 处的酶为 DNA 连接酶
【例 1】切取牛的生长激素和人的生长激素基因，用显微注射技术将它们分别注入小鼠的受 精卵中，从而获得了“超级鼠”，此项技术遵循的原理是 A．基因突变：DNA→RNA→蛋白质 B．基因工程：RNA→RNA→蛋白质 C．细胞工程：DNA→RNA→蛋白质 D．基因工程：DNA→RNA→蛋白质 解析 此题既复习中心法则，又考察基因工程。由题所述是把牛和人的生长素基因注入到鼠 的受精卵中，应属于基因工程。 答案 D 【例 2】艾滋病病毒（HIV）是一种球形的 RNA 病毒，HIV 侵染 T 淋巴细胞并繁殖新一代病 毒的过程示意图如下。请回答：
DNA重组技术的基本工具概述
DNA重组技术的基本工具概述DNA重组技术是一种能够将不同生物体中的基因或DNA片段进行重组的技术。
它的出现使得科学家们能够更容易地研究和改变生物体的遗传信息，从而促进了生物学、医学等领域的发展。
DNA重组技术有许多的基本工具，其中包括限制性内切酶、DNA连接酶、质粒、转基因技术等。
本文将对这些基本工具进行详细介绍。
首先，限制性内切酶是DNA重组技术中最重要的工具之一。
限制性内切酶是从细菌中分离出来的一类特殊酶，它能够识别和切割DNA中的特定序列，产生黏性末端或平滑末端的DNA片段。
这种特殊的切割方式使得科学家们可以将不同来源的DNA片段进行精确地连接。
限制性内切酶的种类非常多，每一种限制性内切酶都有特定的切割序列，这使得科学家们可以选择适当的酶来进行重组操作。
其次，DNA连接酶也是DNA重组技术中的重要工具。
DNA连接酶能够将DNA片段进行连接，形成新的DNA分子。
在DNA分子连接过程中，科学家们通常使用DNA连接酶来催化连接反应。
DNA连接酶有许多种类，其中最常用的是DNA接头酶和DNA连接酶。
DNA接头酶能够将不同DNA片段的末端连接起来，而DNA连接酶则能够在两个DNA片段之间形成一个新的连接。
质粒也是DNA重组技术中不可或缺的工具之一。
质粒是存在于细菌和其他生物体中的一种小型DNA分子，它通常能够自主地复制和传递。
在DNA重组技术中，科学家们首先将需要重组的DNA片段插入到质粒中，然后将质粒转化到细菌中，使其能够在细菌内部大量复制。
通过这种方式，科学家们可以得到大量的重组质粒，用于其后的基因功能研究和基因工程等领域。
最后，转基因技术也是DNA重组技术中的重要内容。
转基因技术是指将外源基因导入到目标生物的基因组中，从而使其获得新的性状或功能。
转基因技术在农业、医学等领域有着广泛的应用。
通过DNA重组技术，科学家们可以将外源基因插入到质粒中，然后将质粒导入到目标生物体中，使其获得新的基因组成。
高中生物选修3 DNA重组技术的基本工具知识点
高中生物选修3 DNA重组技术的基本工具知识点1．基因工程理论基础：（1）物质基础——脱氧核苷酸（2）结构基础——规则的双螺旋结构（3）传递和表达的基础——中心法则；共用一套遗传密码；碱基互补配对原则2. DNA重组技术的基本工具：（1）限制性核酸内切酶——“分子手术刀”（2）DNA连接酶——“分子缝合针”（3）基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”3. 限制性核酸内切酶：又称限制酶，主要从原核生物中分离纯化出来的。
它们能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。
4. DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式——粘性末端和平末端。
5. DNA解旋酶——断H键；DNA水解酶——切割磷酸二酯键。
6. 限制酶——形成片段DNA；DNA聚合酶——形成磷酸二酯键。
7. DNA连接酶：能够将两条DNA链连接起来的，称之为DNA连接酶。
8. DNA连接酶的来源：从大肠杆菌中分离出来的和从T4噬菌体中分离出来的。
从大肠杆菌中分离出来的称为E·coliDNA连接酶；从T4噬菌体中分离出来的称为T4DNA连接酶。
9. E·coliDNA连接酶只能将双链DNA片段互补的粘性末端连接起来；T4DNA连接酶既可以连接双链DNA片段互补的粘性末端，又可以连接双链DNA片段的平末端。
10. 基因进入受体细胞的载体：用质粒作为载体，将基因送入细胞中。
11. 质粒：是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子。
12. 成为质粒的条件：（1）质粒DNA分子上有一个至多个限制酶切割位点，供外源DNA片段插入其中。
（2）能在细胞中进行自我复制，或整合到染色体DNA上，随染色体DNA进行自我复制。
（3）质粒DNA分子上有特殊的标记基因，例如：四环素抗性基因，供重组DNA 的鉴定和选择。
（4）对受体细胞无害。
高一生物DNA重组技术的基本工具
基因进入受体细胞的载体
要让一个从甲生物细胞内取出来 的基因在乙生物体内进行表达，首 先得将这个基因送到乙生物的细胞 内去！能将外源基因送入细胞的工 具就是载体。
基因进入受体细胞的载体
假如目的基因导入受体细胞后不能复制 将怎样？ 作为载体没有切割位点将怎样？ 目的基因是否进入受体细胞，你如何察 觉？ 如果载体对受体细胞有害将怎样？如果 不能分离会怎样？
限制性核酸内切酶的作用： 1.能识别特定核苷酸序列； 2.从特定部位的两个核苷酸之间切开。
限制性核酸内切酶——“分子手术刀”
内切酶切割 DNA厚形成的
末端——黏性 末端、平末端 是如何形成的？
重播
DNA被限制酶切断后有两个反向互补的“黏 性末端”。被同一种限制切断的几个DNA具有相 同的黏性末端，能够通过互补进行配对。
作为载体的必要条件
• • • • 能自我复制 有切割位点 能与目的基因结合 能进入受体生物细胞并在受体生物细胞内复制并 表达； • 有遗传标记基因 • 对受体细胞无害、容易分离 • 比较容易得到
3、基因的运输工具—青霉素的培养基 鉴别。
有切割位点
能复制并带着插 入的目的基因一 起复制
练习
• 在基因工程中，切割运载体和含有目的基因 的DNA片段，需使用（ ） A. 同种限制酶 B. 两种限制酶 C. 同种连接酶 D. 两种连接酶 • 基因工程常用的受体细胞有（ ） (1)大肠杆菌 （2）枯草杆菌 （3）支原体 （4）动植物细胞 A. （3）（4） B. （1）（2）（4） C. （2）（3）（4） D. （1）（2）（3）
• 要实现药物基因在烟草中的表达， 要提前做哪些关键工作?
DNA重组技术的基本工具
基因的大小以纳米计算，要对它进行剪切、 拼接等操作，没有非常精细的工具是不行的。进 行基因操作最少需要以下三种工具：
《DNA 重组技术的基本工具》 讲义
《DNA 重组技术的基本工具》讲义DNA 重组技术，也被称为基因工程，是现代生物技术的核心领域之一。
它使我们能够在分子水平上对生物体的遗传物质进行操作和改造，为人类带来了许多重大的科学和应用突破。
而要实现 DNA 重组，就离不开一系列的基本工具，接下来我们就来详细了解一下这些工具。
一、限制性核酸内切酶（限制酶）限制酶是 DNA 重组技术中最重要的工具之一，它能够识别特定的核苷酸序列，并在特定的位点切割 DNA 分子。
限制酶的发现是一个偶然的过程。
在 20 世纪 60 年代，科学家们在研究细菌的防御机制时发现，细菌能够产生一些酶来切割入侵的噬菌体 DNA，从而保护自身。
这些酶就是限制酶。
限制酶具有高度的特异性，它们能够识别双链 DNA 分子中特定的核苷酸序列，通常为4 8 个碱基对，被称为识别序列或靶序列。
例如，EcoRⅠ限制酶识别的序列是GAATTC，并且在G 和A 之间进行切割。
限制酶切割 DNA 分子后，会产生两种类型的末端：黏性末端和平末端。
黏性末端是指两条链的末端是互补的单链，像“尾巴”一样；平末端则是指两条链的末端是平齐的。
不同的限制酶识别的序列和切割的位点不同，这为 DNA 重组提供了多种选择。
二、DNA 连接酶有了限制酶对 DNA 分子的切割，还需要有工具将切割后的片段连接起来，这就用到了 DNA 连接酶。
DNA 连接酶能够将两个具有相同末端的 DNA 片段连接起来，形成一个完整的 DNA 分子。
它的作用是在两个 DNA 片段之间形成磷酸二酯键，从而将它们连接成一个连续的链。
在基因工程中，常用的 DNA 连接酶有两种：T4 DNA 连接酶和大肠杆菌 DNA 连接酶。
T4 DNA 连接酶既能连接黏性末端，也能连接平末端，但连接平末端的效率较低；大肠杆菌 DNA 连接酶则只能连接黏性末端。
三、载体在 DNA 重组技术中，我们需要将目的基因导入受体细胞中，这就需要一个载体来携带目的基因。
《DNA 重组技术的基本工具》 知识清单
《DNA 重组技术的基本工具》知识清单DNA 重组技术是现代生物技术的核心之一，它让我们能够按照自己的意愿对生物的遗传物质进行改造和重组，从而实现对生物性状的精准调控和创新。
要实现 DNA 重组，就离不开一系列基本工具，下面让我们来详细了解一下这些重要的工具。
一、限制性核酸内切酶（简称限制酶）限制酶是能够识别特定核苷酸序列，并在特定的位点切割 DNA 分子的酶。
1、来源限制酶主要来源于原核生物，原核生物可以利用限制酶来抵御外来DNA 的入侵。
2、作用特点具有特异性，能够识别双链 DNA 分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。
3、切割方式（1）错位切：产生的是黏性末端。
（2）平切：产生的是平末端。
4、作用结果产生 DNA 片段末端。
不同的限制酶识别的核苷酸序列和切割位点不同，这为 DNA 重组提供了多种可能性。
二、DNA 连接酶DNA 连接酶的作用是将两个具有相同末端的 DNA 片段连接起来。
1、种类（1）E·coli DNA 连接酶：只能连接黏性末端。
（2）T4 DNA 连接酶：既能连接黏性末端，又能连接平末端，但连接平末端的效率相对较低。
2、作用部位连接磷酸二酯键。
DNA 连接酶就像是“胶水”，将被切割开的 DNA 片段重新连接起来，形成一个完整的 DNA 分子。
三、载体载体是将目的基因送入受体细胞的“运输工具”。
1、作用（1）携带目的基因进入受体细胞。
（2）在受体细胞中稳定保存并复制，从而使目的基因能够大量表达。
2、具备的条件（1）能在受体细胞中稳定保存并大量复制。
（2）具有一个或多个限制酶切割位点，以便插入目的基因。
（3）具有标记基因，便于筛选含有目的基因的受体细胞。
3、种类（1）质粒：是一种小型的环状 DNA 分子，是基因工程中最常用的载体。
（2）λ噬菌体的衍生物。
（3）动植物病毒。
以质粒为例，它通常含有抗生素抗性基因作为标记基因，当受体细胞在含有相应抗生素的培养基中能够生长，就说明其可能已成功导入了含有目的基因的质粒。
高中生物选择性必修三 第1节 重组DNA技术的基本工具
4．作用
(1)用它作为__运__输__工__具_______，将___目__的___基__因________送入受体细胞
中。
目的基因
(2)利用它在受体细胞内对__________________进行大量复制。
三．思考与讨论
（1）剪刀和透明胶条分别代表哪种“分子工具”? 提示：剪刀代表限制酶;透明胶条代表DNA连接酶。
(3)限制性内切核酸酶与DNA连接酶的关系 作用
应用
限制性内 切核酸酶
使特定部位的磷酸二 酯键断裂
用于提取目的基 因和切割载体
DNA连接 酶
在DNA片段之间重新形 成磷酸二酯键
用于目的基因 和载体的连接
思考与讨论：DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗？为什么？
提示：DNA连接酶与DNA聚合酶的比较
一、基因工程及其诞生与发展
1．基因工程的概念
(1)操作场所：_______生__物__体___外_________。
(2)操作技术：_____转__基__因_____________等技术。
(3)操作结果：赋予生物新的_____遗__传__特__性_________，创造出更符
合
生物类型
人们需要的新的___D__N__A_分___子_______和生物产品。
从社会中来
番木瓜容易受番木瓜环斑病毒的侵袭。当 番木瓜被这种病毒感染后，产量会大大下降。 科学家通过精心设计，用“分子工具”培育出 了转基因番木瓜，它可以抵御番木瓜环斑病毒。
DNA双螺旋的直径只有2 nm，对如此微 小的分子进行操作是一项非常精细的工作,更 需要专门的“分子工具”。那么,科学家究竞 用到了哪些“分子工具”?这些“分子工具” 各具有什么特征呢?
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个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。
4、结果：形成两种末端 粘性末端
精选ppt 平末端
11
什么叫黏性末端？ 大肠杆菌(E.coli)的一种限制酶能识别
GAATTC序列，并在G和A之间切开。
限制酶
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12
• 什么叫黏性末端？
限制 酶
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13
• 什么叫黏性末端？
以 修饰改造 ，然后放到另一种生
物的细胞里， 定向地 改造生物
的遗传性状。
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DNA 重组技术的基本工具
“分子手术刀” ── 限制酶 “分子缝合针” ── DNA连接酶 “分子运输车”
── 基因进入受体细胞的载体
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限制性核酸内切酶
主要是从 原核生物中分离纯化出来 的一种酶。
转鱼抗寒基因 的番茄
乳汁中含有人生长激素 的转基因牛(阿根廷)
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1
转基因抗虫棉
抗虫棉
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普通棉
2
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3
DNA重组技术的基本工具
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4
基因工程的概念
基因工程又叫做基因拼接技术
或DNA重组技术。通俗地说，
就是按照人们的意愿，把一种
生物的某种基因提取出来，加
以修饰改造，然后放到另一种
被限制酶切开的DNA两条单链的切口， 带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互 补配对，这样的切口叫黏性末端。
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15
什么叫平末端？
当限制酶从识别序列的中心轴线处切开 时，切开的DNA两条单链的切口，是平整 的，这样的切口叫平末端。
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限制酶所识别的序列有什么特点？
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8
• 解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具？
关键步骤一的工具： 基因的剪刀——限制酶
关键步骤二的工具： 基因的针线——DNA连接酶
关键步骤三的工具： 基因的运载工具——运载体
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9
专题一 基因工程 §1 DNA重组技术的基本工具
本节知识内容 DNA 重组技术的基本工具
“分子手术刀” ──限制酶
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（1）DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已 有的核酸片段的末端上，形成磷酸二酯键； 而DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷 酸二酯键，不是在单个核苷酸与DNA片段之 间形成磷酸二酯键。
（2）DNA聚合酶是以一条DNA链为模板， 将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模 板链互补的DNA链；而DNA连接酶是将DNA 双链上的两个缺口同时连接起来。因此DNA 连接酶不需要模板。
生物的细胞里，定向地改造生
物的遗传性状。
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5
基因工程的概念
基因工程的别名 基因拼接技术或DNA重组技术
操作环境
生物体外
操作对象
基因
操作水平
DNA分子水平
基本过程 剪切 → 拼接 → 导入 → 表达
实质
基因重组
结果
人类需要的基因产物
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6
• 基因工程培育抗虫棉的简要过程：
苏云金芽孢杆菌
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磷 酸 二 酯 键
5
A
4
1
3
2
T
5
4
1
3
2
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22
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23
DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗？为什么？
答：不是一回事。基因工程中所用的连接酶有两种： 一种是从大肠杆菌中分离得到的，称之为E·coli连 接酶。另一种是从T4噬菌体中分离得到，称为T4 连接酶。这两种连接酶催化反应基本相同，都是连 接双链DNA的缺口（nick），而不能连接单链 DNA。DNA连接酶和DNA聚合酶都是形成磷酸二 酯键（在相邻核苷酸的3位碳原子上的羟基与5位 碳原子上所连磷酸基团的羟基之间形成），那么， 二者的差别主要表现在什么地方呢？
1）有一个或多个限制酶切点，以便外源基因插入。
2）能在受体细胞中复制或整合到染色体DNA上与其同步 复制。
3）具有某些标记基因，便于进行筛选。
4) 必须是安全的,对宿主细胞无害。
5) 5) 大小应适应，以便提取和体外操作。
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课本知识回顾
基因工程又叫做 基因拼接技术 或 DNA重组技术 。通俗地说， 就是按照人们的意愿，把一种生 物的某种 基因 提取出来，加
“分子缝合针” ──DNA连接酶 “分子运输车”
──基因进入受体细胞的载体
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一、 “分子手术刀” ——限制性核酸内切酶
1、来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的一
种酶。能将外来的DNA切断，由于这种 切割作用是在DNA分子内部进行的，故 名限制性核酸内切酶。
2、种类：4000种。
3、作用：识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸
限制酶所识别的序列，无论是6个碱基还是4 个碱基，都可以找到一条中心轴线,中轴线两 侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列 的。
图1-1 限制酶识别序列精的选pp中t 心轴线
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二、 “分子缝合针” —— DNA连接酶
1、种类ห้องสมุดไป่ตู้两类
E·coli DNA连接酶 T4 DNA连接酶
(1).从大肠杆菌中分离得到：E.coliDNA连接 酶，只能将双链DNA片段互补的粘性末端之 间连接。
识别双链DNA 分子的某种 特定的核苷酸序列 ， 并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间 的 磷酸二酯键 断开。
形成两种末端
此外，二者虽然都是由蛋白质构成的酶，但
组成和性质各不相同精。选ppt
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三、 “分子运输车” —基因进入受体细胞的载体：
外源基因 运载体
作用：运载工具 对外源基因大量复制
受体细胞
种类：细菌的质粒
λ噬菌体衍生物或某些动植物病毒
精选ppt
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大肠杆菌质粒的分子结构示意图
精选ppt
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作为运载体必须具备哪些条件？
普通棉花(无抗虫特性)
提取
与运载体DNA拼接
抗虫基因
导入
棉花细胞(含抗虫基因)
棉花植株(有抗虫特性)
• 上述培育抗虫棉的关键步骤是什么？
精选ppt
7
• 基因工程培育抗虫棉的关键步骤： 关键步骤一： 抗虫基因从苏云金芽孢杆菌
细胞内提取出来
关键步骤二： 抗虫基因与运载体DNA连接
关键步骤三： 抗虫基因导入受体(棉花)细胞
(2).从T4噬菌体中分离到： T4DNA连接酶，
既可以“缝合”双链DNA片段互补的粘性末
端，又可以“缝合”双链DNA片段的平末端，
但连接平末端之间的效率比较低。
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2、作用部位：
磷酸二酯键
DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙 “缝合”起来，即把梯子两边扶手的断口连 接起来，这样一个重精组选p的pt DNA分子就形成了。20