槐米中芦丁的提取、水解和鉴定

槐米中芦丁的提取、水解和鉴定

实验简介

槐米系豆科植物槐Sophora japonica L.的干燥花蕾。能凉血止血，清肝泻火。药理实验证明芦丁有调节毛细血管渗透作用，

临床上可作为毛细血管脆弱引起的出血症，常作为高血压症的辅助治疗药。其有效成分为芸香苷，又称芦丁(rutin)，含量可高达12～20％。芦丁为槲皮素-3-O-芸香糖苷，淡黄色粉末或细针状结晶，含3分子结晶水（C 27H 30O 16•3H2O ），mp.177~178℃，无水物mp.188~190℃。溶解度:冷水中的溶解度为1﹕10000，沸水中1﹕200，冷乙醇1﹕650，沸乙醇1﹕60，沸甲醇中1﹕7，可溶于丙酮、乙酸乙酯、吡啶及碱液中，不溶于三氯甲烷、乙醚、苯及石油醚。芦丁水解后得槲皮素，槲皮素为黄色针状结晶（稀乙醇），含2分子结晶水（C 15H 10O 7•3H2O ），mp.313~314℃（分解），无水物mp.316℃。溶解度:热乙醇中1﹕23,冷乙醇中1﹕300,可溶于甲醇、丙酮、乙酸乙酯、吡啶与冰醋酸等，不溶于水、三氯甲烷、乙醚、苯与石油醚等。本实验应用碱溶解酸沉淀法，重结晶法，酸水解法，纸色谱法，紫外光谱分析法对槐米中芦丁进行提取、水解和鉴定。 O O HO OH O OH

OH

O O OH OH

OH

H 2C

O OH OH CH 3OH 3H 2O 芦丁 O HO OH OH OH 槲皮素

实验原理

1、提取精制的原理：

芦丁分子中含有酚羟基，显弱酸性，能与碱成盐而溶于碱液中，加酸酸化后又可沉淀析出，因此可用碱溶酸沉法提取芸香

苷。芦丁的精制可根据其在冷、热水（或冷、热乙醇）中溶解度相差悬殊的性质进行。

2、鉴定的原理：

利用纸色谱的吸附分配原理，将样品和对照品在同一条件下展开显色，判断芦丁和槲皮素的R

f

值，达到鉴定的目的。利用紫外吸收光谱，测定黄酮化合物在加入各种电解质或络合剂后吸收峰的位移，根据位移的情况，以判断化合物羟基的位置。

色谱鉴定示意图 紫外吸收光谱特征

实验目的

掌握碱溶酸沉法、重结晶法提取精制黄酮类化合物的原理与操作；熟悉色谱鉴定黄酮类化合物的原理和方法；熟悉紫外－

可见光谱在黄酮类化合物结构鉴定中的应用。

实验仪器

提取操作示意图 紫外可见分光光度仪

大黄中大黄素的提取、分离和鉴定

实验简介

大黄系蓼科植物掌叶大黄Rheum palmatum L.，药用大黄Rheum officinale Baill 及唐古特大黄Rheum tanguticum Maxim ．ex

Balf.的根和根茎。具有泻热通便，凉血解毒，逐瘀通经的作用。大黄的主要化学成分属于蒽醌类成分。

大黄中的游离蒽醌成分

游离蒽醌名称 结晶及mp （℃） O O OH OH R 1

R 2

大黄酸（rhein ） R 1=H R 2=COOH 大黄素 （emodin ） R 1=CH 3 R 2=OH 大黄酚（chrysophanol ） R 1=H R 2= CH 3 大黄素甲醚（physcion ） R 1= OCH 3 R 2= CH 3 芦荟大黄素（aloe-emodin ） R 1=H R 2=CH 2OH

黄色针晶（升华法），321～322

橙黄色针晶（乙醇），256～257

橙黄色片状结晶（苯），198

砖红色针晶，203～207

橙黄色针晶（甲苯），223～224

大黄素（Emodin）：橙黄色长针晶（丙酮中结晶为橙色，甲醇中结晶为黄色），mp256-257℃。几不溶于水，对于下列溶剂的

溶介度分别为：四氯化碳0.01%，氯仿0.0718%，二硫化碳0.009%，乙醚0.14%，苯0.0415。易溶于乙醇，可溶于氨水，碳酸钠和氢氧化钠水溶液。本实验应用回流法、色谱法、高校液相色谱法，对大黄中的大黄素进行提取分离和鉴定。

实验原理

利用酸水解将蒽醌苷类水解成游离蒽醌类，再利用其具有亲脂性，用有机溶剂提取。利用酸性不同，采用pH 梯度萃取法

分离游离蒽醌类。根据极性不同采用硅胶柱色谱法分离大黄素。高校液相色谱法按照《中国药典》2015版大黄含量测定项：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-0.1%磷酸溶液（85：15）为流动相，检测波长为254nm。以对照品为对照进行成分鉴定。 实验目的

熟悉蒽醌类成分的提取分离方法；掌握pH 梯度提取法的原理和操作技术；掌握硅胶柱色谱法分离精制大黄素的原理和操

作技术；熟悉羟基蒽醌类化合物的高效液相测定方法。

实验仪器

回流提取装置 硅胶柱色谱法分离图

高效液相色谱仪