乙酰氨基葡萄糖苷酶是什么

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凡纳滨对虾壳膜N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶性质及活力调控的开题报告

凡纳滨对虾壳膜N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶性质及活力调控的开题报告

凡纳滨对虾壳膜N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶性质及活力调控的开题报告一、研究背景虾是全球重要的经济水产品之一,其中凡纳滨对虾是虾类中的一种。

凡纳滨对虾干重70%~80%是外骨骼(虾壳),而虾壳中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖(NAG)是重要的组分。

NAG除了在虾壳的结构中起着重要作用外,还可能通过生物转化为虾干、虾粉等产品。

因此,对于虾壳中NAG降解酶的研究显得很重要。

虾壳膜N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG酶)是一种水解NAG糖链的酶,属于酶家族18。

NAG酶具有广泛的应用价值,可用于制药、食品、农业等领域。

因此,研究虾壳膜NAG酶的性质及其活力调控具有很大的应用潜力。

二、研究目的本项目旨在研究凡纳滨对虾壳膜NAG酶的性质及其活力调控,包括以下几个方面:1. 确定凡纳滨对虾壳膜中NAG酶的主要结构特征。

2. 研究pH、温度等条件对NAG酶的影响。

3. 研究几种常见离子对NAG酶活力的影响。

4. 探究不同浓度的底物对NAG酶活性的影响。

5. 研究几种常见抑制剂对NAG酶的抑制作用。

三、研究方法(1)提取虾壳膜NAG酶采用碱解法提取凡纳滨对虾壳膜NAG酶,经SDS-PAGE分析其纯度。

(2)测定NAG酶的活力和动力学参数通过测定NAG酶催化NAG的反应速率计算酶活力,确定NAG酶的动力学参数。

(3)研究不同条件下NAG酶活力的变化通过改变NAG酶反应的pH、温度,或添加不同浓度的离子、底物以及抑制剂,研究其对NAG酶的活力产生的影响。

(4)分析NAG酶的结构特征采用基因克隆技术获取NAG酶基因,进行蛋白表达和纯化,通过X射线晶体学分析NAG酶的结构特征。

四、研究意义本项目的研究可利用提高虾壳资源的综合利用效率,从而促进水产品产业的可持续发展。

同时,通过研究虾壳膜NAG酶的性质和活力调节机制,可以为NAG酶的产业应用提供科学依据,为制定高效的NAG酶应用策略提供基础数据。

此外,研究NAG 酶的结构特征,可为设计新型NAG酶提供理论指导,推动其在工业生产中的应用。

N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)试剂盒使用说明书.

N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)试剂盒使用说明书.

N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)试剂盒使用说明书(酶法·液体双试剂)用途本试剂盒用以测定尿液中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)的活力。

原理在第一反应中用己糖激酶(HK)消去血清中内源性葡萄糖的影响,在第二反应中,NAG作用于基质P-硝基苯酚-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(PNP-NAG),生成N-乙酰氨基葡萄糖,此N-乙酰氨基葡萄糖在N-乙酰氨基葡萄糖氧化酶(NAGOD)的作用下生成H2O2。

此H2O2在过氧化物酶(POD)的作用下与高灵敏的发色剂双〔3-双(4-氯酚)甲基-4-•二甲氨苯基〕胺(BCMA)反应,生成绿色色素。

通过测定此色素可求得NAG的活力。

第一反应:HK葡萄糖+ A TP ─────────→葡萄糖-6-磷酸+ ADP第二反应:NAGPNP-NAG + H2O ──────→N-乙酰氨基葡萄糖+ p-硝基苯酚NAGODN-乙酰氨基葡萄糖+ O2 + H2O ───→N-乙酰氨基葡萄糖酸+ H2O2PODH2O2 + BCMA + H+────→绿色色素+ 2H2O试剂━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━试剂成份含量──────────────────────────────────R-1A1(冻干) NAGOD ≥3000U/LPOD ≥12500U/LHK ≥8000U/LA TP·2Na ≥5mg/mlR-1A2(冻干) PNP-NAG 10.5mmol/LR-1B 2-吗啉乙烷磺酸(MES) 30mmol/L──────────────────────────────────R-2A(冻干) BCMA 0.17mmol/LR-2B MES 30mmol/L──────────────────────────────────标准酶NAG 约为50U/L标准酶溶解液MES 30mmol/L ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━标本尿液试剂配制R-1:以一瓶R-1B溶解一瓶R-1A2,再以此溶液溶解一瓶R-1A1。

人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)酶联免疫试剂盒使用说明书

人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)酶联免疫试剂盒使用说明书

氨基葡萄糖苷酶(NAG)酶联免疫试剂盒【试剂配制】洗液工作液:洗液需提前配制,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制。

取出洗液浓缩液,浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。

浓洗涤液按1:20倍进行稀释。

例如用量筒量取285ml去离子水,倒入烧杯或其他洁净容器中,再量取15ml浓洗涤液,均匀加入,搅拌混匀。

【注意事项】1.实验开始前,请提前配置好所有试剂。

试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。

2.用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。

3.如样品浓度过高时,用合适的溶液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。

【操作步骤】1.将各种试剂移至室温(18-25℃)平衡至少30分钟,按前述方法配制试剂,备用。

2.将酶标板取出,设一个空白对照孔、不加任何液体;每个标准点依次各设两孔,每孔加入相应标准品50μl;其余每个检测孔直接加待测标本50μl。

3.每孔加入酶结合物50μl(空白对照孔除外),充分混匀,贴上不干胶封片,置37℃温育1小时。

4.手工洗板,弃去孔内液体。

洗涤液注满各孔,静置10秒甩干,重复三次后拍干;洗板机洗板,选择洗涤三次程序,洗板后拍干。

5.每孔加显色剂A液50μl,显色剂B液50μl,振荡混匀后,37℃避光显色15分钟,每孔加终止液50μl。

6.用酶标仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。

在反应终止后10分钟内进行检测。

【操作要点】1.为保证检测结果的准确性,建议标准品及样品均设双孔测定。

每次检测均需做标准曲线。

2.如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时再乘以相应的稀释倍数。

3.加样时,请使用一次性的洁净吸头,避免交叉污染。

加样时应尽量轻缓,避免起泡,将样品加于酶标板孔底部,切勿沿孔壁加样。

4.为防止样品蒸发,温育过程中酶标板必须覆上板贴,任何时候都应避免酶标板处于干燥的状态。

5.洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性,在每次洗涤过程中,需要将孔内液体完全甩干,并在吸水纸上拍干,切勿将吸水纸直接放入反应孔中吸水,或用枪在孔中吸取液体。

土壤乙酰氨基葡萄糖苷酶

土壤乙酰氨基葡萄糖苷酶

土壤乙酰氨基葡萄糖苷酶
土壤乙酰氨基葡萄糖苷酶是一种重要的土壤酶类,它可以水解土壤中的乙酰氨基葡萄糖苷,进而释放出葡萄糖和氨基酸等营养物质。

土壤乙酰氨基葡萄糖苷酶能够影响土壤有机质分解过程,对维持土壤生态系统功能具有重要意义。

土壤乙酰氨基葡萄糖苷酶的活性受到多种因素的影响,如pH值、温度、土壤类型、土壤湿度、养分状况等。

在一定的环境条件下,土壤乙酰氨基葡萄糖苷酶的活性会随着土壤有机质含量的增加而增加,但当土壤有机质含量过高时,土壤乙酰氨基葡萄糖苷酶的活性反而会降低。

研究表明,土壤乙酰氨基葡萄糖苷酶在农业生产中发挥着重要作用。

通过调节土壤乙酰氨基葡萄糖苷酶的活性,可以提高土壤有机质分解效率,促进植物生长和发育,同时减少土壤中的碳排放。

因此,在生态农业中,注重土壤有机质的积累和土壤酶的调控,对维护土壤健康和提高农业生产效益具有重要意义。

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尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶在检测早期肾损害中的应用

尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶在检测早期肾损害中的应用

尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶在检测早期肾损害中的应用赵洁;贾玫;吴俊【摘要】目的探讨N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG)对早期肾小管损伤的诊断价值.方法分别检测对照组100例,高血压患者24例,Ⅱ型糖尿病患者53例,肾炎综合征20例,肾病综合征15例,紫癜性肾炎患者2例,慢性肾功能不全患者16例,分别检测晨尿NAG水平,与传统24小时尿蛋白定量,尿微量白蛋白水平比较.结果肾炎组及肾病组患者尿NAG水平最高,慢性肾功能不全组、糖尿病组及高血压组尿NAG较健康对照组升高,P<0.01.尿NAG与尿微量白蛋白相关性良好,r=0.717,P<0.001.以血肌酐升高为因变量,尿微量白蛋白、24hr尿蛋白、尿NAG的似然比(OddRatio,OR)分别为91.31(P=0.002),106.55(P=0.002),135.10(P=0.004).结论尿NAG是早期肾损害的敏感指标,其敏感性高于24小时尿蛋白定量,且NAG与尿微量白蛋白正相关.【期刊名称】《中国实验诊断学》【年(卷),期】2012(000)011【总页数】3页(P2066-2068)【关键词】N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶;24小时尿蛋白定量;尿微量白蛋白;肾脏损伤【作者】赵洁;贾玫;吴俊【作者单位】北京大学人民医院检验科,北京100044;北京大学人民医院检验科,北京100044;北京大学人民医院检验科,北京100044【正文语种】中文【中图分类】R692.6N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶是一种高分子量糖蛋白,属细胞内溶酶体酶之一。

它主要存在于肾近曲小管上皮细胞溶酶体中,不能通过正常的肾小球滤膜,此酶在尿中稳定。

肾小管损害时,它在尿中的含量增加[1]。

临床上肾脏常见疾病包括原发性肾小球疾病、继发性肾小球疾病及肾小管疾病。

由于肾单位结构上由入球动脉形成血管袢营养肾小管,故肾小球疾病往往涉及肾小管功能,最终造成肾单位坏死,过度肾单位坏死必然导致肾功能不全。

N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶测定标准操作程序

N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶测定标准操作程序

N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶测定标准操作程序1.摘要N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶检测主要用于肾脏疾病、肝硬化和慢性活动性肝炎的诊断。

2.适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测尿液中NAG的浓度。

3.职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定NAG浓度的工作人员要严格按照本SOP程序进行,室负责人监督管理;本SOP的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。

4.检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)试剂盒采用的是速率法。

5.原理26N---O---β−+−→−DN NAG-H-氨基葡萄糖苷乙酰硫代吡啶甲基巯基吡啶氨基葡萄糖-甲基-乙酰62--2--N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)催化底物6-甲基-2-硫代吡啶-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(MPT-NAG)水解产生6-甲基-2-巯基吡啶(MPT)和N-乙酰-氨基葡萄糖,MPT在340nm附近有吸收峰,所以,可以通过监测340nm附近的吸光度变化值计算样本中的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活力。

6.仪器日立7600自动生化分析仪7.试剂7.1试剂来源:上海科华生物工程股份有限公司提供7.2试剂瓶内主要成分:柠檬酸缓冲液、Tris6-甲基-2-硫代吡啶-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷、防腐剂7.3试剂稳定性:试剂避光保存于2-8℃,若无污染,可稳定至失效期,本试剂有效期为12个月。

试剂不可冰冻。

7.4试剂准备:试剂为即用式。

8.标准品和质量控制8.1校准程序:使用上海科华公司提供的K校准因子对自动分析仪进行校准。

按照公司标准品使用要求,并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白,经校准测定,仪器自动对标准品响应量通过合适的数学模型绘制校准曲线。

8.2质控品:上海科华公司提供的生化质控血清做为室内质控品。

每日在测定前做一次质控。

该质控品为干粉包装,在2-8℃冰箱可稳定到失效期,使用前用5ml去离子水复溶,待质控物充分溶解(大约30分钟)后使用。

乙酰氨基葡萄糖苷酶,富氨酸氨基肽酶

乙酰氨基葡萄糖苷酶,富氨酸氨基肽酶

乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG酶)和富氨酸氨基肽酶(PAP酶)是两种在生物学和医学研究中广泛应用的酶。

它们分别在不同的生物过程中发挥作用,具有重要的生物学意义。

本文将分别介绍这两种酶的结构、功能和应用。

一、乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG酶)1. 结构:NAG酶是一种醣苷酶,在多种生物体和组织中都有分布。

其主要结构特征是由四个亚基组成的四聚体,每个亚基都含有一个活性中心。

2. 功能:NAG酶主要作用于水解乙酰氨基葡萄糖苷,是细胞壁合成中的重要酶。

在细胞分裂和生长过程中,NAG酶也起着重要作用。

NAG 酶还参与炎症反应和免疫调节。

3. 应用:NAG酶在医学诊断和疾病治疗中有重要应用价值。

它可以作为肾脏疾病的生物标志物,用于评估肾功能。

NAG酶还可以作为药物靶点,在药物研发中具有潜在的应用前景。

二、富氨酸氨基肽酶(PAP酶)1. 结构:PAP酶是一种蛋白酶,具有复杂的结构。

它在多种生物体中都有表达,在细胞内外都有活性。

2. 功能:PAP酶在蛋白质降解和代谢过程中扮演着重要角色。

它能够水解富氨酸肽,促进蛋白质降解和代谢产物的释放。

PAP酶还参与一些重要的细胞信号传导通路,对细胞生长和分化具有调控作用。

3. 应用:PAP酶在医学和生物技术领域有广泛应用。

它可用于蛋白质合成和降解的研究,有助于解析细胞内蛋白质代谢的机制。

PAP酶还可以作为肿瘤标志物,在肿瘤诊断和治疗中具有潜在的应用价值。

乙酰氨基葡萄糖苷酶和富氨酸氨基肽酶是两种具有重要生物学功能和应用价值的酶。

对它们的深入研究不仅有助于揭示生物体内重要的生物过程和生理功能,还有助于为医学诊断和疾病治疗提供新的思路和方法。

希望本文能够帮助读者更深入地了解这两种酶的特点和应用前景。

乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG酶)和富氨酸氨基肽酶(PAP酶)是两种在生物学和医学研究中广泛应用的酶。

它们分别在不同的生物过程中发挥作用,具有重要的生物学意义。

本文将深入探讨这两种酶的结构与功能,并探索它们在医学和生物技术领域的应用前景。

n-乙酰氨基 葡萄糖-6-硫酸酶,-n-乙酰氨基葡萄糖苷酶

n-乙酰氨基 葡萄糖-6-硫酸酶,-n-乙酰氨基葡萄糖苷酶

n-乙酰氨基葡萄糖-6-硫酸酶,-n-乙酰氨基葡萄糖苷酶1. 引言1.1 概述本文旨在探讨n-乙酰氨基葡萄糖-6-硫酸酶和n-乙酰氨基葡萄糖苷酶这两种重要的生物分子。

这两种酶在生物体中起着关键的作用,参与了一系列重要的生化反应和代谢过程。

通过对它们的结构、功能以及联系与区别的分析,我们可以更好地理解它们在细胞活动中的作用机制,进而为人类健康提供新的研究路径和治疗方法。

1.2 文章结构本文将从以下几个方面来进行论述:首先是对n-乙酰氨基葡萄糖-6-硫酸酶进行介绍,包括其定义、作用、结构特点以及生理功能。

然后是对n-乙酰氨基葡萄糖苷酶进行详细阐述,包括其功能、反应机制以及应用领域。

接下来将比较分析这两种酶在结构和生物学功能上的差异与联系,并探讨它们对人体健康的影响与意义。

最后,文章将总结当前研究成果和重要发现,并展望未来的研究方向与挑战,并提出相关建议或启示。

1.3 目的本文的主要目的是通过对n-乙酰氨基葡萄糖-6-硫酸酶和n-乙酰氨基葡萄糖苷酶的全面介绍和分析,加深对这两种关键生物分子的认识。

同时,探讨它们在细胞活动中的作用机制以及其对人体健康的影响与意义。

希望通过本文的阐述,能够为今后相关领域的深入研究提供一定的指导,并为相关治疗方法和药物开发提供新思路。

2. n-乙酰氨基葡萄糖-6-硫酸酶2.1 定义和作用n-乙酰氨基葡萄糖-6-硫酸酶(N-acetylglucosamine-6-sulfatase)是一种重要的酶类,在生物体内发挥着关键的功能。

它属于硫酸酶家族,在细胞质或溶酶体中起着催化反应的作用。

该酶在早期被认为仅存在于哺乳动物中,但随后被发现在许多其他生物群体中也广泛存在。

其作用是将n-乙酰氨基葡萄糖分子上的位置6上的硫酸基团水解掉,从而形成未被硫酸化的产物。

该反应参与了特定底物的代谢途径,并调控着多种生理过程。

2.2 结构特点n-乙酰氨基葡萄糖-6-硫酸酶是由一个单一聚合物组成,具有特定的空间结构。

菜青虫N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的性质研究

菜青虫N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的性质研究

菜青虫N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的性质研究比较菜青虫不同部位及不同生长期的菜青虫N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase,EC3.2.1.52)的比活力,发现五龄幼虫表皮来源的NAGase比活力最高。

通过解剖获得五龄菜青虫表皮,用0.05 mol/L PBS含0.1 mol/L NaCl缓冲液(pH=6.8)抽提、硫酸铵分级分离获得粗酶,并进一步通过Sephadex G-200凝胶过滤柱层析和羟基磷灰石柱层析(CHT II柱)纯化获得比活力为8715 U/mg的聚丙烯酰胺凝胶电泳单一纯NAGase酶制剂。

采用凝胶过滤柱层析法测定该酶的分子量约为106 kD。

通过SDS- PAGE方法测定NAGase含两个异型亚基,分子量分别为59.5和57.2 kD。

该酶不含寡糖。

以对-硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(pNP-NAG)为底物,测得该酶在0.1 mol/L PBS缓冲液中催化水解底物pNP-NAG的最适pH为6.2,最适温度为42℃;在37℃、pH 6.2 PBS中,该酶催化pNP-NAG水解的米氏常数Km 为0.326 mmol/L,反应的活化能为83.86 KJ/mol。

该酶在45℃以下,pH 4-9范围内稳定。

以动力学方法测定酶活性功能基团的解离性质,39℃下测得菜青虫NAGase酶活性中心可解离基团解离常数pK<sub>e</sub>值为5.20,标准解离热焓ΔH<sup>o</sup>为2.18 kcal/mol,表明该酶的活性中心的可解离基团是谷氨酸或天冬氨酸的侧链羧基。

化学修饰法研究进一步证明侧链羧基是酶的必需基团,并测定出酶活性必需的羧基数为一个。

修饰剂对该酶的化学修饰研究还表明半胱氨酸巯基、色氨酸的吲哚基、组氨酸的咪唑基、二硫键也是酶活性的必需基团。

而精氨酸残基及赖氨酸ε-氨基被修饰后对酶活力没有影响,不是酶的必需基团。

尿N—乙酰—β—D—氨基葡萄糖苷酶在诊断肾脏早期损伤中的作用

尿N—乙酰—β—D—氨基葡萄糖苷酶在诊断肾脏早期损伤中的作用

尿N—乙酰—β—D—氨基葡萄糖苷酶在诊断肾脏早期损伤中的作用庞庆丰;刘凯【期刊名称】《徐州医学院学报》【年(卷),期】2000(020)006【摘要】目的探讨诊断肾脏早期损伤的方法。

方法采用琼脂免疫扩散法检测尿C3、α2-巨球蛋白;硝基酚比色法测定尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)。

结果正常对照组尿C3阴性、α2-巨球蛋白阴性,NAG为(4.75±2.73)U/gCr;尿C3、α2-巨球蛋白均为阴性的糖尿病、肾炎、高血压患者尿NAG较正常对照组显著增高(P〈0.01);尿C3阳性、α2-巨球蛋白阴性的患者尿NAG较正常对照组显著增高(P〈0.01);尿C3阳性、α2-巨球蛋白阳性的患者尿NAG较正常对照组显著增高(P〈0.01)。

提示测定尿NAG对诊断患者肾脏早期损伤有重要意义。

结论尿NAG是诊断肾脏早期损伤较灵敏、可靠的实验室指标。

【总页数】2页(P454-455)【作者】庞庆丰;刘凯【作者单位】徐州医学院病理生理学教研室,江苏徐州;徐州医学院病理生理学教研室,江苏徐州【正文语种】中文【中图分类】R692.04【相关文献】1.尿N-乙酰β.D氨基葡萄糖苷酶(NAG)监测顺铂对肾脏早期损伤的临床意义 [J], 于丽红;孙胜菲2.尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶联合尿微量蛋白检测诊断高血压患者早期肾损伤[J], 朱晴;程训民;李朋3.血清β2-微球蛋白、尿微量白蛋白、尿N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶联合检测在高血压早期肾损伤诊断中的临床价值 [J], 王海峰;东淳;李春梦4.尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶尿视黄醇结合蛋白尿β2微球蛋白联合检测对乙肝肝硬化患者早期肾损伤诊断的临床价值 [J], 王钰琛;王勤英5.尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶对汞作业者肾脏损害的早期诊断意义 [J], 赵立强;陈俊华;伏代刚;顾华强;游全程;李晓莉因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

牛副性腺N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶性质的测定

牛副性腺N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶性质的测定

【1 Y , ugeC K Sh t C B e a A sc tn f 6 6 u T P T gl , c mi , t 1 s i oso z . o a
PI p l m o phs sw ih g o t d c r astat n pis T1 o y r im t r w h a ac s risi g n
的应用 价值
精子 和精浆 两部 分组成 , 中牛精 液 中精 浆 占 9 其 0% 左右 , 精浆不 仅是 精子输 送 的介质 . 含有 各种生 化成
分和 无机元 素 .为精 子存 活提供 了适宜 的理化 环境
和所 需 的能量 ,而且 有些成分 还 对精子 的运 动功 能 产生 一定 的影 响 。来 自附睾 的精 子活力 较低 ,且 大
部分 都 为非 前 向运动 精子 . 只有 在接触 精浆后 , 子 精
精 囊腺 、 前列 腺及 尿道球 腺统称 为副 性腺 。 射精
时它们 的分 泌物加 上输 精管壶 腹 的分泌 物混合 在一
才具 有前 向运动 能力 。基 于精 浆对 精子 活力 的重 要 影 响且精 浆 中 N G s 精 卵结合 过 程可 能起 的重 A ae在
卟 J nm c 1 9 , 31 8 — 2 8 i Si 95 7 : 2 18 . A , 2
【 S ne oaK, ackD, ekvcv E et f e ec 7 t ck v V se P so i a 】 a i o D. fc o nt g i

福 建 畜牧 兽 医
第3 2卷
第1 期
21 00年
牛 副性腺 N一 乙酰一 一 一 I D 氨基葡萄糖苷 酶性质 的测定 3

摘 要

土壤乙酰氨基葡萄糖苷酶的测定方法

土壤乙酰氨基葡萄糖苷酶的测定方法

土壤乙酰氨基葡萄糖苷酶的测定方法土壤乙酰氨基葡萄糖苷酶(soil N-acetylglucosaminidase, NAG)是一种关键的土壤酶,可用于评估土壤中的有机质分解、有机氮矿化和微生物活性。

下面是关于土壤乙酰氨基葡萄糖苷酶测定的十种常见方法:1. 荧光底物法:此方法使用4-甲基-7-甲氧基香豆素(MUF)为底物,该底物在酶的作用下产生荧光。

测定时将土壤悬浮液与底物反应,通过荧光仪测定荧光强度来确定酶活性。

2. 4-硝基苯醚法:此方法使用4-硝基苯醚作为底物,底物在酶的作用下产生黄色产物。

测定时将土壤悬浮液与底物反应,通过比色法测定产物的吸光度来确定酶活性。

3. 二硝基醋酸红法:此方法使用二硝基醋酸红作为底物,底物在酶的作用下产生红色产物。

测定时将土壤悬浮液与底物反应,通过比色法测定产物的吸光度来确定酶活性。

4. 超微量化学发光法:此方法使用4-甲基-7-甲氧基香豆素(MUF)为底物,底物在酶的作用下产生光信号。

测定时将土壤悬浮液与底物反应,通过化学发光仪测定发光强度来确定酶活性。

5. 比色法:此方法使用4-硝基醚硫酸盐作为底物,底物在酶的作用下产生黄色产物。

测定时将土壤悬浮液与底物反应,通过比色法测定产物的吸光度来确定酶活性。

6. 薄板法:此方法将固定体积的土壤悬浮液均匀涂在薄板上,然后浸泡在含有底物的培养基中。

经过一定时间后,通过观察底板上的酶活性形成的产物浸染的程度或者产物形成的区域的直径大小来确定酶活性。

7. 微量流动注射技术:此方法将土壤悬浮液逐渐注入流动注射仪中,然后通过底物的流动反应来测定底物的降解速率,从而确定酶活性。

8. 薄层层析法:此方法使用硅胶薄层层析技术,在层析板上涂布土壤样品,然后通过底物的层析反应来测定底物的迁移率,从而确定酶活性。

9. 微孔板法:此方法将土壤悬浮液和底物通过微孔板中的微孔间接接触反应,底物在酶的作用下产生产物,通过测定产物的吸光度来确定酶活性。

N-乙酰-β—D-氨基葡萄糖苷酶的研究现状

N-乙酰-β—D-氨基葡萄糖苷酶的研究现状

c h i t i n i nj a c k e t t y p e o f a n i ma l s a n d t h e d e v e l o p me n t o f b i o d e ra g d a b l e p o l y me i r c ma t e ia r l s h a v e h i g h e r u s e v a l u e ; NAGa s e p l a n t r e s e a r c h i s
学 术 研 究
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N一 乙酰 一 — D 一 氨基葡萄糖苷酶的研究现状
成 娟歌 王森
;2 . 上海财经大学 上海 2 0 0 0 8 2 )
Ab s t r a c t : N— A c e t y l —D— D~ g l u c o s a mi n i d a s e( N AG a s e , E C 3 2 . 1 . 5 2 ) . i s o n e o f t h e c h i t i n me t a b o l i c e n z y me s , N AG a s e i n c h i t i n
NAGa s e a s s o c i a t e d wi t h t h e f o r ma t i o n o f t h e c e l l wa l l s o f f u n g i a n d b a c t e r i a p o l y s a c c h a r i d e s s h e l l , b i o l o g i c a l c o n t r o l o f p a t h o g e n i c f u n g i p l a y

肾脏检查——什么是肾损八项

肾脏检查——什么是肾损八项

肾脏检查——什么是肾损八项文章来源:/Article/89251.html什么是肾损八项,肾损八项的检查一般都包括哪些方面?肾损八项需要用第二天早晨的晨尿进行检查,以避免运动对于检查结果的影响。

主要包括以下几个项目。

(1)尿肌酐(U-cr):给某一物质做比值用。

由于一些检查指标容易受到尿量的影响,而尿肌酐相对来说比较恒定,所以常常将尿肌酐作为某一物质的比值,以校正尿量对其他项目结果的影响,但是儿童或者身体比较瘦弱者不适合用肌酐进行校正,因为肌酐会受到肌肉含量的影响。

(2)①尿总蛋白(U-tt) (这里需要注意的我们平时所说的尿常规里的尿蛋白多指的是白蛋白)②U-tt/U-cr:临床意义等同于24小时蛋白定量,可以大概反应24小时尿蛋白丢失量,二者相关性较好。

(3) ①尿微量白蛋白(mAlb):分子量较小,可以发现潜在的蛋白尿,也就是说在尿常规蛋白正常或者24小时定量正常情况下尿微量白蛋白仍有其检查意义,对于糖尿病肾病、高血压肾病、药物性肾损伤、妊娠引起的肾病早期都有诊断意义。

②mAlb/ U-cr:(4)尿IG-G:即免疫球蛋白G,其分子量较大,所以此项指标升高表明肾脏滤过膜受损严重。

如果只是尿微量白蛋白升高的话,说明愈后较好,但是如果尿IG-G有了升高,则多表明预后不良。

(5)①尿a1-微球蛋白(a1-MG)②a1-MG/ U-cr反应肾小管重吸收功能的良好指标。

(6)①尿NAG酶(N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶):是肾小管上皮细胞受损的指标,存在于肾小管上皮细胞的溶酶体内,多表明为炎症损伤。

②尿NAG酶/ U-cr:(7)①尿GDT酶(γ-谷氨酰转移酶):也是肾小管上皮细胞损伤的指标,存在于肾小管上皮细胞刷状缘上,多表明免疫损伤。

②尿GDT酶/ U-cr(8)尿渗透压:反应肾小管浓缩稀释功能,是目前检查远端肾单位功能的最佳指标。

udp-n-乙酰-d-氨基葡萄糖

udp-n-乙酰-d-氨基葡萄糖

udp-n-乙酰-d-氨基葡萄糖(UDP-N-acetyl-D-glucosamine)是一种重要的生物分子,它在生物体内起着多种关键作用。

作为一种辅酶,它参与了糖基转移酶催化的糖基转移反应,是糖蛋白、糖脂、和多糖合成的底物。

UDP-N-乙酰-D-氨基葡萄糖也在细胞信号转导、蛋白糖基化和细胞壁合成等多个重要生物过程中发挥作用。

在细胞生物学领域,UDP-N-乙酰-D-氨基葡萄糖扮演着至关重要的角色,它是由葡萄糖-6-磷酸和乙酰辅酶A经过一系列酶催化反应合成的。

在多糖合成中,UDP-N-乙酰-D-氨基葡萄糖是糖基转移酶所依赖的底物之一,通过将其底物上的N-乙酰葡萄糖胺基团转移给特定的受体分子,从而合成糖链结构,同时也参与了糖蛋白和糖脂的生物合成。

在细胞信号转导过程中,UDP-N-乙酰-D-氨基葡萄糖的水解产物UDP-N-乙酰葡萄糖氨酸(UDP-N-acetylglucosamine)是N-乙酰葡萄糖胺基化的重要底物,直接参与了细胞分化、增殖和凋亡等过程。

UDP-N-乙酰-D-氨基葡萄糖还在细胞壁合成中扮演着极为重要的角色。

在真核生物细胞中,UDP-N-乙酰-D-氨基葡萄糖是合成N-壁氨基糖多糖的重要底物,而在细菌细胞中则是合成N-乙酰葡聚糖的重要底物。

这些糖多糖和聚糖是构成生物细胞壁和细胞外支架的重要成分,对于保护细胞、维持细胞形态和细胞间相互作用起着关键的作用。

对于UDP-N-乙酰-D-氨基葡萄糖,我们不仅应该了解它的结构和合成途径,还应该深入探讨其在生物体内的功能和生物学意义。

了解UDP-N-乙酰-D-氨基葡萄糖的多样功能不仅有助于我们更好地理解细胞代谢和生物合成过程,也有助于我们在医学和生物技术领域的应用和研究,比如制药工业中对于糖蛋白、糖脂等生物制剂的生产和改良,以及对于细胞信号转导和细胞壁合成等相关领域的医学研究。

UDP-N-乙酰-D-氨基葡萄糖作为一种重要的生物分子,在生物体内扮演着多种关键作用,其功能的深入研究对于我们更好地理解细胞生物学过程、开展生物技术研究和推动医学领域的发展具有重要意义。

血清N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶在肝病诊断中的应用

血清N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶在肝病诊断中的应用

血清N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶在肝病诊断中的应用贾莉;乔文涛【期刊名称】《中日友好医院学报》【年(卷),期】1999(13)3【摘要】目的:观察血清N乙酰βD氨基葡萄糖苷酶(NAG)活性对临床上几种肝病诊断的价值。

方法:对103例肝病患者进行血清NAG活性和血清总胆汁酸(TBA)水平测定,并与传统肝功能试验做比较;选取130例健康体检者做血清NAG活性参考值统计。

所有项目均采用日立7150型自动生化分析仪测定。

结果:健康人血清NAG测值呈正偏态分布,以P95作参考值上限为215U/L。

血清NAG在肝癌和酒精性肝病中阳性率分别为800%和700%,TBA在肝硬变和急性肝炎中阳性率分别为916%和688%。

结论:血清NAG活性测定不仅对临床各种肝病的诊断有价值,而且其与血清TBA同时检测能更有效地对急性酒精中毒和肝硬变进行早期鉴别诊断。

【总页数】3页(P167-169)【关键词】肝疾病;氨基葡糖苷酶;胆汁酸类和盐类【作者】贾莉;乔文涛【作者单位】天津公安医院【正文语种】中文【中图分类】R575.104【相关文献】1.血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白、胱抑素C及尿白蛋白肌酐比值、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶检测在早期糖尿病肾脏疾病中的应用价值 [J], 张会芬;杨宏秀;刘丽;袁宝军2.N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶新型底物的合成及在肾小管疾病诊断中的应用 [J], 徐蕾;姚莉韵;刘慧中;张建华;杨婉花3.血清胱抑素C、β2-微球蛋白、视黄醇结合蛋白、尿微量白蛋白及N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶在诊断糖尿病早期肾损伤中的临床意义 [J], 王晓燕4.N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶检测在早期诊断中的应用 [J], 王爱萍5.血清和尿液N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶检测在震波碎石治疗肾结石中的应用[J], 魏善建;李建新;魏尧梅;郑家富;张汉升;郝武英因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

N_乙酰葡萄糖胺的性质_制备及用途.

N_乙酰葡萄糖胺的性质_制备及用途.
3 N乙酰葡萄糖胺的用途
N乙酰葡萄糖胺(NGA是一种具有较高甜
度的特殊单糖,是具有消炎、抗肿瘤及抗氧化作用及治疗骨关节炎、风湿性关节炎的有效药物。另外,在食品、化工及化妆品行业中均有重要的应用,可作为食品抗氧化剂及婴幼儿食品添加剂,糖
尿病患者甜味剂[1]

参考文献
[1] N乙酰葡萄糖胺,CAS:7512 17 6 http://ch inab aik e
666
[5]董素才,李建新,杨志铭化学试剂,1989,11(1:44
45
%听中学&更重要。
3结论与启发
对调查的结果进行小结,不仅可以总结得出相关结论,更可获取和梳理出基层区域教研工作的重点内容和一般思路:
(1与有经验的化学教师相比,新手型的化学教师实践性知识相对较少,且明显表现出对处理课堂教学过程出现问题的自信心不足。专门针对新手型化学教师组织的教研活动应更注重于化学教学技能提高的实践性知识。
分离方法如下[5]:将上述滤液以130mL/h的流速上活性炭层析柱(3 5cm #47cm,流出液再
(下转第49页
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河北省科技厅2009年资助项目(No K091009;河北省2009年度优秀教学团队建设项目;河北师范大学2009年度人才培养模式创新实验区项目
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较低。而县级教研因其区域的优势教师参与次数较多,几乎与校级教研平分秋色(39%与43%,且效果认同度高于校级。通过访谈分析,究其主要原因在于校级教研活动的方式目前还比较单一,பைடு நூலகம்多地集中在集体备课形式,且备课的内容以教案设计为主,另外,初级中学由于平行班级较少,且仅有九年级开设化学课程,教师人数有限,故教研活动开展甚少,效果也不够明显,尤其面对课改,不少初中化学教师反映了多参加校外教研的强烈心声。因此,在一定程度上,对县级区域教研提出了更高的要求,县级区域教研需要在丰富教师实践性知识、促进教师专业成长方面承担更多责任。2 3何种教研方式更有利于实践性知识的发展

2023年检验类之临床医学检验技术(士)通关提分题库及完整答案

2023年检验类之临床医学检验技术(士)通关提分题库及完整答案

2023年检验类之临床医学检验技术(士)通关提分题库及完整答案单选题(共40题)1、正常成人新鲜尿液呈()。

A.淡黄色B.深黄色C.黄绿色D.茶色E.褐色【答案】 A2、急性心肌梗死发作9h后血清LD同工酶电泳结果为A.LDB.LDC.LDD.LDE.LD【答案】 B3、可显示尿液有形成分中盐类结晶的精细结构,常用的检查方法为A.光学显微镜法B.相差显微镜法C.偏振光显微镜法D.透射电镜法E.尿沉渣分析仪【答案】 C4、红细胞管型常见于A.急性肾小球肾炎B.急性肾盂肾炎C.间质性肾炎D.膀胱炎E.尿道炎【答案】 A5、单向免疫扩散属于A.沉淀反应B.凝集反应C.补体结合试验D.中和试验E.ELISA【答案】 A6、脑脊液标本采集后通常留于3个无菌试管中,每个试管1~2ml。

第一管用于A.免疫学检验B.化学检验C.病原生物学检验D.理学检验E.细胞学检验【答案】 C7、关于N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)错误的是A.NAG不通过肾小球滤过,因而尿中排出量不受血中其来源的影响B.其为溶酶体酶的一种C.分子量为140kD,在肾皮质含量最高D.在肾单位远曲小管细胞内含量最丰富E.其活性对肾小管活动性损伤有灵敏反应【答案】 D8、患者,女性,26岁,经常感到头晕,面色苍白,检查血常规,示小细胞低色素性贫血血红蛋白91g/L,初诊为缺铁性贫血,可测定哪个血清蛋白等指标以明确诊断A.AATB.AAGC.TRFD.HDE.AMG【答案】 C9、溶血标本不会影响检验结果的是()A.红细胞计数B.白细胞计数D.血清钾测定E.血细胞比容测定【答案】 B10、下列哪种免疫作用不需抗体参加()A.ADCC作用B.免疫调理作用C.对毒素的中和作用D.NK细胞对靶细胞的直接杀伤作用E.补体经典途径对靶细胞的溶解【答案】 D11、临床中进行交叉配血试验最常采用的方法为A.正向间接凝集反应B.反向间接凝集反应C.玻片凝集法D.试管凝集法E.间接凝集抑制反应【答案】 D12、临床开展最早、应用最多、效果最好的一种器官移植是A.肾脏移植B.肝脏移植D.心肺联合移植E.脾脏移植【答案】 A13、ELISA不用于下列哪种检测A.血型鉴定B.病原体及抗体的检测C.免疫球蛋白、补体、肿瘤标志物等蛋白质的检测D.毒品的检测E.药物的检测【答案】 A14、珠蛋白生成障碍性贫血( )A.遗传性膜缺陷B.血红蛋白病C.获得性膜缺陷D.免疫因素E.物理因素【答案】 B15、新生霉素敏感性试验适用于鉴定A.大肠埃希菌B.腐生葡萄球菌C.伤寒沙门菌D.淋病奈瑟菌E.流感嗜血杆菌【答案】 B16、能使核酸分子生物素化的是A.BNHS和BHZB.生物素酰肼(BHZ)和肼化生物胞素(BGHZ)C.光生物素D.3-(N-马来酰亚胺-丙酰)-生物胞素(MPB)E.生物素脱氧核苷三磷酸【答案】 A17、传播流行性斑疹伤寒的媒介是()。

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乙酰氨基葡萄糖苷酶是什么
乙酰氨基葡萄糖苷酶是一种用来检测肾损伤和肾小管的敏
感指标。

也可以用来检查尿路感染和糖尿病肾痛早期诊断,它的临床意义通常在病理情况下出现,如果其他检查正常,单靠乙酰氨基葡萄糖苷酶偏高,建议低盐低脂高维生素饮食,戒烟戒酒。

接下来我们就详细的了解一下乙酰氨基葡萄糖苷酶的作用,应该注意什么以及它的检查方法。

β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶检查的正常值
★1、对硝基酚比色法:血清NAG21.54±6.4U/L,尿液NAG 呈正态分布,中位数为9.13U/g肌酐,第95百分位数上限为16.10U/g肌酐。

★2、荧光光度法:
成人血清:9.94±2.O7U/L。

成人尿液:6.39±3.19U/LCre。

β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶检查的作用
血、尿NAG活性测定对反映肾实质病变,尤其是急性损伤和活动期病变更敏感,主要用于早期肾损伤的监测和病情观察。

★1、肾小管疾病重金属(汞、铅、镉等)及药物性肾损伤、缺血、缺氧、失血、休克等均可引起NAG活性增加。

★2、肾病综合征尿NAG常明显增加,缓解期下降,复发时迅速回升,故可作为临床观察指征。

肾小球肾炎急性期变化较大,但与肾小管损伤相比,变化幅度较小。

★3、尿路感染的定位诊断急、慢性肾盂肾炎尿NAG上升,能与单纯性膀胱炎区别。

可用于早期上尿路感染的诊断。

★4、肾移植排斥反应的监测肾移植排斥反应早期NAG即可升高,比尿蛋白、血肌酐、肌酐清除率更敏感。

★5、糖尿病肾痛早期诊断糖尿病肾病尿NAG升高,用于本病的早期诊断优于尿白蛋白及β2-微球蛋白。

β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶结果偏高可能有的疾病:肾病综
合征、尿路感染
β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶检查需要注意哪些
★(1)★对硝基酚比色法:
①基质对硝基酚应纯化,配制前置50℃烘24h。

用10mmol/L NaOH配成0.04mmol/L浓度,用窄带宽分光光度计扫描吸收曲线,λmax=401nm,根据IFCC标准,Aλmax=0.7316~0.7388,Eλmax=18380±90(25℃)。

②底物溶解度小,配制时应先用适量pH 4.6缓冲液调成糊状,再逐渐加缓冲液至所需量。

③测定结果超线性范围时,应将标本用生理盐水稀释后重测,结果乘以稀释倍数。

④尿酶浓度受尿量影响较大,应留取24h尿量。

若以NAG/g 肌酐比值计算酶排出率,即不受尿浓缩或稀释的影响,又不需留24h尿。

★(2)★荧光光度法:
★①荧光法测NAG已有国产试剂盒,其敏感度高,不受尿色干扰。

★②也可用上海第三分析仪器厂产930荧光光度计,激发滤光片360,发射滤光片用(400+450)复合,效果满意。

★③本法酶反应液中各成分浓度为:底物1.33mmol/L,枸橼酸20mmol/L,Na2HPO432mmol/L。

★④配试剂所用溶剂应用重蒸馏水,底物应无游离4-MU,BSA中应无该酶或用50℃加热2h灭活。

★⑤血清中NAG于4℃稳定数小时至数天,-20℃可稳定数月。

尿标本4℃稳定1周,也可用枸橼酸盐抗凝血浆。

★⑥β-N-乙酰氨基葡萄糖苷可被二种酶催化水解,一种是β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(EC 3.2.1.30),另一种是β-N-乙酰已糖苷酶(EC 3.2.1.52),只有对提纯的酶才能限定EC 3.2.1.30或EC 3.2.1.52。

目前国内文献中常称的NAG,严格地说是按所用底物命名的,而不是指酶对底物的特异性。

所以目前国外文献常泛称β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶。

β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶检查的方法
★(1)对硝基酚比色法混合,在405nm波长,1cm光径,蒸馏水调零,读取各管吸光度,用(AU-AC)之差查标准曲线。

①基质对硝基酚应纯化,配制前置50℃烘24h。

用10mmol/L NaOH配成0.04mmol/L浓度,用窄带宽分光光度计扫描吸收曲线,λmax=401nm,根据IFCC标准,Aλmax=0.7316~0.7388,Eλmax=18380±90(25℃)。

根据对硝基酚的摩尔吸光系数
★②底物溶解度小,配制时应先用适量pH 4.6缓冲液调成糊状,再逐渐加缓冲液至所需量。

★③测定结果超线性范围时,应将标本用生理盐水稀释后重测,结果乘以稀释倍数。

★④尿酶浓度受尿量影响较大,应留取24h尿量。

若以NAG/g 肌酐比值计算酶排出率,即不受尿浓缩或稀释的影响,又不需留24h尿。

★(2)荧光光度法:先将血清或尿用不含牛血清白蛋白(BSA)
的缓冲液作20倍稀释,
混匀,激发波长364nm,发射波长448nm,以终止液调零,6μmol/L 4-MU管调荧光强度至100后,分别测空白管及测定管的荧光强度。

★①荧光法测NAG已有国产试剂盒,其敏感度高,不受尿色干扰。

★②也可用上海第三分析仪器厂产930荧光光度计,激发滤光片360,发射滤光片用(400+450)复合,效果满意。

★③本法酶反应液中各成分浓度为:底物1.33mmol/L,枸橼酸20mmol/L,Na2HPO432mmol/L。

★④配试剂所用溶剂应用重蒸馏水,底物应无游离4-MU,BSA中应无该酶或用50℃加热2h灭活。

★⑤血清中NAG于4℃稳定数小时至数天,-20℃可稳定数月。

尿标本4℃稳定1周,也可用枸橼酸盐抗凝血浆。

★⑥β-N-乙酰氨基葡萄糖苷可被二种酶催化水解,一种是β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(EC 3.2.1.30),另一种是β-N-乙酰已糖苷酶(EC 3.2.1.52),只有对提纯的酶才能限定EC 3.2.1.30或EC 3.2.1.52。

目前国内文献中常称的NAG,严格地说是按所用底物命名的,而不是指酶对底物的特异性。

所以目前国外文献常泛称β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶。

β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶检查多少钱
专科分类:泌尿 &nbsp; &nbsp; &nbsp;检查分类:生化检查
适用性别:男女均适用 &nbsp; &nbsp; &nbsp;是否空腹:空腹
β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶检查参考价格:10-60元。

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