第三章 药物的杂质检查

供试液杂质斑点不多于3个;杂质斑点与对照(2)的主斑点比
较,不得更深;如有一点超过,应不深于对照液(1)的主斑点.
2.高效液相色谱法(HPLC)
（1）外标法测定供试品中杂质的含量
比较准确，须使用杂质对照品。 例：卡托普利中检查二硫化物 供试品浓度：2mg/ml；二硫化物外标浓度：30ug/ml 规定：如含二硫化物，其含量不得过1.5%
白色
∴ ChP规定：本品0.5g+10mlH2O+2d稀醋酸+0.5ml Pb(Ac)2
1份+数滴K2Cr2O7试液 ，均不得发生浑浊。
盐酸肼屈嗪中游离肼的检查:
CHO H2NNH2· H 2O CN HCl
盐酸肼屈嗪 N N ． HCl
NHNH2 CHO H2NNH2 + 杂质：游离肼 OH HC NNH2 OH + H 2O
（3）加校正因子主成分对照法
进行杂质检查时，可以不用杂质对照品；但在建立方法时，需 利用杂质对照品。 供试品液进样测校正后Ai 其Ai＜ A主即为合格. 例如:红霉素中检查红霉素B、C组分及有关物质:
对照品液(0.2mg/ml)进样20μl,样品液(4mg/ml)进样20μl,红 霉素A、B、C校正因子分别为1.0、0.7、1.0，各杂质峰面积校正后 不得过主峰面积（5.0%）
+ O2N Cl 杂质：2-氯-4-硝基苯胺 O2N Cl N N NHCH2CH2NH2 NH2
+
NaNO2
+
2HCl
O2N Cl
N2Cl + NaCl + 2H O 2
2.产生沉淀
例一、间苯二酚中邻苯二酚检查：后者+Pb(Ac)2
不得发生浑浊，即为合格。 例二、硝酸毛果芸香碱其他生物碱的检查：后者+氨水+K2Cr2O7 ∴ChP规定：本品0.2g+20mlH2O两份；1份+数滴氨试液；另
H3C N COOC2H5
.HCl
(I)
H3C N
.HCl COOCH3 (II)
C2H5
N COOC2H5
.HCl
(III)
3．药物纯度的评价：
应把药物的性状、理化常数、杂质检查、含量测定等 作为一个有联系的整体来评价药物的纯度。
4．临床用药纯度与化学试剂纯度的区别：
药 物：对生物体引起的生理和毒副作用加 以考虑。药物只有两个等级：合格 或不合格。
茶苯拉明中氯化物检查
取本品0.30g 臵200 ml量瓶中，加水50ml、氨试液3ml和10%硝酸铵 溶液6ml，臵水浴上加热5min，加硝酸银试液25ml，摇匀，再臵水 浴上加热15min，并时时振摇，放冷，加水稀释至刻度，摇匀，放 臵15min，滤过，取续滤液25ml臵50ml纳氏比色管中，加稀硝酸 10ml，加水稀释至50ml，摇匀，在暗处放臵5min，与标准氯化钠溶 液(10μg Cl-/ml)1.5 ml制成的对照液比较，求氯化物的限量。
CH3 N N 重排 SCOOC2H5
COOC2H5 N N S CH3
三 、药物杂质的分类
四、杂质的限量
1．杂质限量的概念
药物中所含杂质的最大允许量，叫做杂质限量。通常
用百分之几或百万分之几（ppm）来表示。
2．杂质限量的计算 杂质限量的计算公式：
杂质最大允许量 杂质限量(%) 100% 供试品量 标准溶液的浓度 标准溶液的体积 100% 供试品量 CV 100% S
得多于2个，其颜色
与对照品主斑点相 比较，不得更深。
地塞米松磷酸钠 20mg/ml
地塞米松 0.20mg/ml
例如:盐酸异丙嗪中有关物质的检查 有多个杂质而且结构不清
样品10mg/ml;对照品(1)0.15mg/ml
(2)0.05mg/ml
..
.
.
. . . .
.
硅胶G
.. .
己烷:丙酮:乙胺
样品液 对(1) (2)
化学试剂：对化学使用的目的考虑，对生物体 引起的生理和毒副作用不考虑。化 学试剂有很多等级：基准试剂、优 化学试剂 级纯、分析纯、化学纯、色谱纯、 不能代替 药品！ 光谱纯。
二、杂质的来源
杂质的概念 药物中存在的无治疗作用，影响药物的疗效和稳 定性，甚至对人体健康有害的物质，称为药物的 杂质。
合成过程中，原料不纯或反应不完全，中间体、 副产物在精制中未除尽
C酮体=? V样品=100 ml S样品=0.2 g
磷酸可待因中吗啡的检查： 取本品 0.1g ，加盐酸 … 与吗啡溶液 (0.02mg/ml)5.0ml 用同一方法制成的对照液比较，不得更深。求吗啡限 量。 已知：V = 5.0ml；C = 0.02 mg/ml；S = 0.1g 求： L = ？ 解： L = C×V / S = 5.0×0.02/0.1×1000 ×100% = 0.1%
H2N COOCH2CH2N(C2H5)2 H2N COOH
-CO2 [O]
O
O
H2N
生产过程中所用试剂、溶剂、还原剂等可能残留成为杂质。
药物中无效、低效异构体或晶型的检查
例如：无味氯霉素存在A、B晶型，其中B为有效，A为低效。
甲苯达唑有A，B，C三种晶型；驱虫率20%；40%～60%；90%
2.贮藏过程引入的杂质
（4）峰面积归一化法：
L% = ∑Ai /(∑Ai + A主）×100%
使用限制：本法通常只能用于粗略考察供试品中的 杂质含量。除另有规定外，一般不宜用 于微量杂质的检查。
(1)杂质对照品法
例如:盐酸左旋咪唑中检查
2,3-二氢-6-苯基咪唑[2,1-b]噻唑盐
样品
· ·· 。 · · 对招品
硅胶G
苯:甲醇:冰HAC
枸橼酸乙胺嗪 I2蒸气显色
CON N N CH3
C2H5 C2H5
供试品10µl N-甲基哌嗪 10µl 50mg/ml 50µg/ml
规定： 如显杂质斑点，不
注意点 ①单位一致 ②稀释倍数 ③表示方法（%，ppm）
返 回
计算题 1.取乙酰唑胺2g，加水100ml加热溶解后，迅 速放冷，滤过，取滤液25ml，依法检查氯 化物，规定含氯化物不得超过0.014%，应 取标准氯化钠溶液（每1ml相当于0.01mgCl） 多少ml？ 2.溴化钠中检查砷盐杂质，规定含砷量不得 超过百万分之四，取标准砷溶液（每1ml相 当于0.001mgAs）2ml，依法检查，应取供 试品多少克。
谷氨酸钠中重金属的检查：取本品1.0g，加水23ml溶解 后，加醋酸盐缓冲溶液（pH3.5)2ml，依法检查，与标准 铅溶液（10μgPb/ml）所呈的颜色相比不得更深，已知 重金属的限量为百万分之十，求算应取标准铅溶液（V） 多少毫升？ CV LS L= S ×100% V = C ×100%
10 ×10-6×1.0 LS V= ×100% = = 1.0(ml) -6 C 10 ×10
葡萄糖中重金属的检查： 取本品4.0g，加水23ml溶解后，加醋酸盐缓冲液（pH3.5) 2ml,依法检查（第一法），含重金属不得过百万分之五。求 应取标准氯化钠溶液（10μgCl/ml）的体积。 已知：S = 4.0g；C = 10μg/ml；L = 5×10-6
求： V = ？
解：V = L×S / C = 5×10-6×4.0/10×10-6 = 2.0(ml)
生产 制剂过程 杂 过程 试剂、溶剂、还原剂残留 质 异构体、多晶体 的 使用的金属器皿、装臵、工具引入的金属杂质 来 源 储藏 在温度、湿度、日光、空气等外界条件影响下，或 过程 因微生物的作用，引起药物发生水解、氧化、分解、
异构化、晶型转变、聚合、潮解和发霉等变化
1. 生产过程中引入的杂质 主要指药物在合成过程中，未反应的原料、中间体和副产物
主要指外界条件的变化或微生物的作用可能使药物发生的 水解、氧化、异构化、晶型转化、聚合等变化而产生的有关杂 OC2H5 OC2H5 胺化 质。 环合
ClCH2 CH CH NH ，CH OH H3CHN 3 2 3 OC2H5 CH2 CH OC2H5 KSCN
CH3 N N SH 缩合 ClCOOC2H5,C5H5N （甲巯咪唑）
比较法：测定特定待测杂质的参数（如吸光度）， 与规定的限量比较，不得更大。 特点：准确测定杂质的量，不需要对照品
第二节

杂质的检查方法
一般有化学方法、色谱方法、光谱方法、物理方法
一、化学方法： 显色反应
盐酸普萘洛尔中游离α-萘酚检查：利用后者可与重氮盐
发生重氮化-偶合反应，生成偶氮染料。 ChP规定：供试品20mg+乙醇与10%NaOH液各2ml+重氮苯
（2）不加校正因子主成分对照法
对照品液为供试品的稀释液进样测得A主 供试品液进样测得∑Ai 其∑Ai＜ A主即为合格. 例如:甲硝唑中2-甲基-5-硝基咪唑: 对照品液(0.001mg/ml)进样20μl,调灵敏度，主峰达10%～30% 样品液(0.1mg/ml)进样20μl,杂质∑Ai＜A主（限量1.0%.）
磺酸试液1ml,放臵3min；如显色，与0.3ml α-萘
酚对照液（20μg/ml)比较不得更深。
药物：氯硝柳胺 Cl CO NH OH 杂质：5-氯水杨酸 O Cl OH
+
NO2 Cl
杂质：2-氯-4-硝基苯胺 O Cl
FeCl3 O
O Fe/3
OH 杂质：5-氯水杨酸
紫色配合0 μg/ml V=1.5 ml S=?
（标准溶液浓度）（标准溶液体积） 10 ×10-6 × 1.5 CV L= × 100% = × 100% = 0.04% S 25 — 0.30 ×200 （供试品量）
茶苯海明中氯化物的检查： 已知：S = 0.30g×25/200；C = 10μg/ml；V = 1.5ml 求： L = ？ 解： L = C×V/S×100% = 10×1.5/（0.30×106×25/200）×100% = 0.04%