动物细胞工程(1)

第三节动物细胞工程

动物细胞与组织培养、细胞核移植与动物体细胞克隆

学习目标：

1.简述动物细胞培养的过程、条件及其应用；

2.简述克隆动物的概念含义和基本原理；

3.简述体细胞核移植技术和动物克隆技术，以及应用前景；

课前导学：

一、动物细胞工程包括的主要技术

动物细胞工程的主要技术包括____ 、_____ 、___ ___、_______________、________________等技术。其中_________________________是其他动物细胞工程技术的基础。

二、动物细胞与组织培养

1．概念：动物细胞与组织培养是指在体模拟____ _ __，将动物细胞或组织在无菌、温度适宜和营养充足的条件下培养，使其、并维持原有和的技术。

2. 材料：动物或出生不久的的器官或组织。

3. 过程：

（1）动物细胞培养：

（2）动物组织培养：

（3）动物细胞培养和动物组织培养的区别：动物细胞培养过程中需要用

__________________等使________________________________________________。

4.培养条件：

（1）温度：最适温度是°C左右。

（2）PH：最适PH范围是_______。

（3）气体：主要是和，气体的含量不仅影响培养环境的，还直接影响。

（4）营养物质：如、无机盐、氨基酸、维生素、核酸、嘌呤、嘧啶、和生长因子等。

5.培养基的种类：

天然培养基：主要取自动物血清、动物组织提取液和鸡胚汁等，具有营养价值高、成分复杂的特点。

合成培养基：人工配制的，具有成分明确、便于控制实验条件的特点。缺点是缺乏天然培养

基中的某些无法代替的成分，因此需要加入。

6.培养类型：

⑴原代培养：直接从动物体内取出的组织块，用胰蛋白酶使其分散成单个细胞，然后用培养基配成一定浓度的细胞悬浮液，转入培养瓶中进行培养的过程。即初次培养。

⑵传代培养：原代培养到一定程度，细胞会出现，将原代细胞_________后转入新的培养瓶中继续培养的过程。

7．细胞株和细胞系：10～50代的传代细胞为细胞株。细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。

细胞株和细胞系的区别：细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。

8.应用：疫苗生产、药物研制、肿瘤防治等。

三、细胞核移植与动物体细胞克隆：

1. 动物体细胞克隆概念：将供体体细胞的细胞核与受体去核卵细胞的细胞质进行人工组合后，借助的发育能力，经过培养发育成胚胎进而形成个体的技术。

2.过程：以克隆羊“多利”为例说明

3.克隆技术的应用：（1）利用克隆技术大量复制实验动物，减少实验误差；（2）利用异种动物借腹妊娠挽救珍稀动物；（3）利用患者自身的细胞培育新的组织或器官以治疗疾病。

4.克隆技术引发的伦理问题

⑴克隆人严重违反了人类伦理道德；

⑵克隆人冲击了现有的婚姻、家庭和两性关系等传统的伦理道德观念；

⑶克隆人是在人为地制造在心理上和社会地位上都不健全的人；

5.中国政府的态度：

禁止生殖克隆人，原则是：不赞成、不允许、不支持、不接受任何克隆人的实验，但不反对治疗性克隆。

质疑讨论：

1．为什么要取动物胚胎或幼龄动物的器官或组织作为细胞培养的材料？

2．进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？

3．动物细胞培养的原理是什么？

4．动物细胞培养与植物组织培养的比较。

1.关于动物细胞培养叙述错误的是（）

A.用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织

B.将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞

C.在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液

D.动物细胞培养只能传50代左右，所培育的细胞会衰老死去

2.如果用动物的细胞进行克隆实验应该选择的细胞核不能是（）

A.乳腺细胞的

B.卵细胞的

C.胃腺细胞的

D.囊胚时期的胚胎细胞的

反馈矫正：

1.一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件（）

①无毒的环境②无菌的环境③合成培养基需加血浆

④温度与动物体温相近⑤需要O2，不需要CO2 ⑥CO2能调培养液pH

A.①②③④⑤⑥

B.①②③④

C.①③④⑤⑥

D.①②③④⑥

2. 下列有关植物组织培养和动物组织培养的比较中，叙述错误的是 ( )

A.所用培养基的成分基本相同

B.植物组织培养的结果是培育成植株，动物细胞培养的结果是培育成细胞系或细胞株

C.植物组织培养的主要目的是为了快速繁殖和获得无病毒植株，动物细胞培养的主要目的是

为了获得细胞的产物或细胞

D.植物组织培养的原理是细胞的全能性，动物细胞培养的原理是细胞的增殖

3.(多选题）培育克隆牛的过程中，如果供体细胞来自同一头牛，培育出的这些个体在性状上也

不完全相同，分析其原因，下列说法正确的是（）A．性状变异可由环境条件引起 B.基因可能会发生突变

C.受体细胞的细胞质基因不同

D.细胞核基因发生了重组

4. 如图所示是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答。

(1) 动物细胞培养的原理是。

(2)容器A中放置的是动物器官或组织。它一般取

自。

(3)容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是剪碎，然后用

酶处理，这是为了使细胞分散开来。这样做的目的

是。

(4)培养先在B瓶中进行。瓶中的培养基成分有葡萄糖、氨基酸、无机盐、

维生素和等。在此瓶中培养一段时间后，一般传到第代，有许多细胞衰老死亡，到这时的培养称为。

(5）为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中，用处理，然后配置成，再分装。

(6）在C瓶中正常培养了一段时间后，发现大部分细胞衰老死亡。但极少数细胞存活并传代，这种细胞叫做，能无限传代的原因是。