棒状杆菌属
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体外法： 琼脂平板毒力试验（Elek平板毒力测定） SPA协同凝集试验 对流电泳
对流免疫电泳
琼脂平板毒力试验-Elek平板
•体内法 ： 用豚鼠作毒素-抗毒素中和试验
第二节 类白喉棒状杆菌
（一）假白喉棒状杆菌（C. pseudodiphtheriticum） （二）结膜干燥棒状杆菌（C. xerosis） （三）化脓棒状杆菌（C. pyogenes） （四）溃疡棒状杆菌(C. ulcerans) （五）假结核棒状杆菌（C. pseudotuberculosis） （六）溶血棒状杆菌（C. haemolyticum） （七）杰克群棒状杆菌（C. jeikeium-CDC group JK）
测定血清中抗毒素水平
0.1ml血清，倍比稀释+外毒素致敏红细胞 37℃、1h
敏感度可达10-4单位，简便快速
•防治原则：
--人工主动免疫——白喉类毒素
DPT混合疫苗：白喉类毒素、百日咳菌苗、破伤风 类毒素
--人工被动免疫——白喉抗毒素+白喉类毒素
--治疗：抗毒素+抗生素
早期足量注射白喉抗毒素，使毒素在与细胞 结合以前被抗毒素中和
编码外毒素的tox基因——β-棒状杆菌噬
菌体
作用机制：
A亚单位可使细胞延伸 因子-2（EF-2）灭活， 影响蛋白质的合成 作用特点：
毒性作用大，1分子能 杀一个细胞
作用于多种细胞，心肌、 神经细胞均有毒素受体
肿瘤细胞对此毒素敏感
（二）索状因子
细菌表面的一种糖脂，能破坏细胞的线 粒体，影响细胞的呼吸与磷酸化
G+杆菌、一端或两端膨大成棒状 染色不均匀，两端浓染或有异染颗粒 无鞭毛、无芽胞 排列不规则，呈栅栏状 白喉棒状杆菌——致病菌 类白喉棒状杆菌——条件致病菌
第一节 白喉棒状杆菌 C.diphtheriae
一、临床意义
致病物质 (一)白喉外毒素
毒力强，130ng/kg可使人死亡 抗原性强
第十四章 棒状杆菌属
夏佩莹 陈登宇
棒状杆菌属概述
棒状杆菌属是一群革兰染色阳性杆菌，菌体形态 特征是在其一端或两端常呈棒状膨大，故名，归属 放线菌科。
棒状杆菌属种类繁多，
主要有：
白喉棒状杆菌（C.diphtheriae） 假白喉棒状杆菌（C.pseudodiphtheriticum） 干燥棒状杆菌（C.xerosis） 化脓棒状杆菌（C.pyogenes） 溃疡棒状杆菌（C.ulcerans） 假结核棒状杆菌（C.pseudotuberculosis） 溶血棒状杆菌（C.haemolyticum） J-K群棒状杆菌（C.jeikeium-CDC group JK）
毒素→→血液→→全身中毒症状
外周N---N炎：膈肌麻痹---呼吸困难 声带麻痹---声音嘶哑 软颌麻痹---吞咽困难
心肌---心肌炎
白喉假膜
免疫性：
抗毒素免疫 感染后机体可获得牢固的免疫力
机体还可通过其它方式获得免疫力： 六月以下婴儿---------母亲 成人---------------------隐性感染、人工主动免疫
观察菌落 特点
吕氏血清斜面
涂片染色 生化反应 镜检
毒力试验
直接涂片染色镜检：
-- 2～3张涂片→G染色、异染颗粒染色 镜检——初报“直接涂片检出形似白喉 杆菌”——早期诊断
--用无菌棉拭子浸以动物血清，采集标本， 37℃10h，涂片染色镜检——提高阳性率
•分离培养：
吕氏血清斜面： 37℃、8～12h →→涂片染色镜检
•抵抗力：
对干燥、寒冷和日光抵抗力较其他无 芽胞细菌强，在干燥的假膜中可生存3 个月
对湿热和消毒剂敏感，5%石炭酸、1： 1000升汞1min，100℃1min、60℃10min 均可灭菌
对青霉素、红霉素等敏感，对磺胺不 敏感
三、微生物学检验
分离出白喉杆菌，并证明其毒力 标本采集：
态和产毒性能不变
•BAP：
•菌落灰白色、光滑型、 直径1～2mm、有狭窄 β溶血环（轻型） •多次传代后菌体变为球 型
BAP中菌落
•亚碲酸钾BAP：选择鉴别培养基
•黑色菌落——鉴别依据 •不同菌型还原能力不同，呈现黑色或灰黑色 菌落 •根据菌落特征及生化反应特点可将本菌分为： 重型、中间型、轻型
二、生物学特性
形态与染色:
G +细长微弯的杆菌
一端或两端膨大呈棒状
白喉棒状杆菌异染颗粒 1000×
常排列呈V、L、X等文字形
异染颗粒——形态上的鉴别特征
无荚膜、无芽胞、无鞭毛
•培养特性：
需氧或兼性厌氧，最适温度35～37℃ 营养要求高，在含血液、血清、鸡蛋的培养基上生
长良好
• 吕氏（Loeffler)血清斜面或鸡蛋斜面： 生长最快，6h即生长，10～12h长出灰白色、 湿润、有光泽的光滑型菌苔/菌落，菌体形 态典型、异染颗粒明显，连续传代可保持形
白喉棒状杆菌 在亚碲酸钾BAP中菌落
•液体培养基： 生长较好，但菌型不同其生长特点也不相同
•生化反应：
分解葡萄糖、半乳糖、麦芽糖、果糖产酸 不产气，不分解乳糖、甘露糖，一般不分 解蔗糖，吲哚 （-）、硝酸盐还原（+）、 触酶（+）、氧化酶（-）、明胶液化（-） 尿素（-）
重型能分解淀粉、糖原、糊精，迟缓分解 蔗糖
分泌物 取双份 如不能及时检验，标本浸于无菌生理盐水或 15%甘油生理盐水保存
检验程 序
直接涂片 染色镜检 （单染或 G 染色+ 异染颗粒 染色）
患者或带菌者咽喉、鼻咽拭子等
吕氏血清斜 面35℃12～ 18h
涂片染色 镜检(G染 色和异染 颗粒染色）
亚碲酸钾BAP、 BAP35℃ 35℃24～48h 16-18h
共同特点：
--大多不产生外毒素 --菌体较粗短，着色较均匀，很少有异染颗粒 --大多寄生在人或动物的鼻腔、咽喉、外耳道、
外阴、泌尿道和皮肤等处
--条件致病菌，可引起心内膜炎、菌血症、肺 炎、泌尿生殖道感染等
--鉴别——生化反应
易感者： 1~5岁儿童 成人---也有可能
锡克试验（Schick test） （白喉外毒素皮内试验）
调查人群在感染或预防接种后对白喉是否 产生免疫力
根据外毒素与抗毒素中和的原理，以少量 白喉外毒素测定机体有无相应抗毒素
缺点—观察时间长、操作繁琐，不易进行 广泛测试
《致敏红细胞凝集试验》
--检出率要比直接涂片高，有助于快速诊断 亚碲酸钾BAP：
37℃、24～48h，黑色菌落 BAP：
轻型有β溶血环，应注意与溶血性链球菌鉴别
•鉴源自文库：
形态染色、菌落特点、生化反应 糖发酵试验、尿素酶、硝酸盐还原
—鉴别棒状杆菌属不同的种 白喉：葡萄糖 （+）、麦芽糖 （+）
蔗糖 （-）
•毒力试验（鉴定致病菌株的重要依据）
（三）K抗原
--细胞壁外面的一种不耐热糖蛋白 --抗吞噬
--有利于细菌在黏膜表面的定植
所致疾病：白喉--急性呼吸道传染病
传染源：患者及带菌者 传播途径：飞沫或污染 临床表现
细菌------上呼吸道粘膜， 生长繁殖，产生毒素
细菌与毒素共同作用引起局部炎症： 炎性渗出，坏死，纤维蛋白 →→假膜→→窒息
对流免疫电泳
琼脂平板毒力试验-Elek平板
•体内法 ： 用豚鼠作毒素-抗毒素中和试验
第二节 类白喉棒状杆菌
（一）假白喉棒状杆菌（C. pseudodiphtheriticum） （二）结膜干燥棒状杆菌（C. xerosis） （三）化脓棒状杆菌（C. pyogenes） （四）溃疡棒状杆菌(C. ulcerans) （五）假结核棒状杆菌（C. pseudotuberculosis） （六）溶血棒状杆菌（C. haemolyticum） （七）杰克群棒状杆菌（C. jeikeium-CDC group JK）
测定血清中抗毒素水平
0.1ml血清，倍比稀释+外毒素致敏红细胞 37℃、1h
敏感度可达10-4单位，简便快速
•防治原则：
--人工主动免疫——白喉类毒素
DPT混合疫苗：白喉类毒素、百日咳菌苗、破伤风 类毒素
--人工被动免疫——白喉抗毒素+白喉类毒素
--治疗：抗毒素+抗生素
早期足量注射白喉抗毒素，使毒素在与细胞 结合以前被抗毒素中和
编码外毒素的tox基因——β-棒状杆菌噬
菌体
作用机制：
A亚单位可使细胞延伸 因子-2（EF-2）灭活， 影响蛋白质的合成 作用特点：
毒性作用大，1分子能 杀一个细胞
作用于多种细胞，心肌、 神经细胞均有毒素受体
肿瘤细胞对此毒素敏感
（二）索状因子
细菌表面的一种糖脂，能破坏细胞的线 粒体，影响细胞的呼吸与磷酸化
G+杆菌、一端或两端膨大成棒状 染色不均匀，两端浓染或有异染颗粒 无鞭毛、无芽胞 排列不规则，呈栅栏状 白喉棒状杆菌——致病菌 类白喉棒状杆菌——条件致病菌
第一节 白喉棒状杆菌 C.diphtheriae
一、临床意义
致病物质 (一)白喉外毒素
毒力强，130ng/kg可使人死亡 抗原性强
第十四章 棒状杆菌属
夏佩莹 陈登宇
棒状杆菌属概述
棒状杆菌属是一群革兰染色阳性杆菌，菌体形态 特征是在其一端或两端常呈棒状膨大，故名，归属 放线菌科。
棒状杆菌属种类繁多，
主要有：
白喉棒状杆菌（C.diphtheriae） 假白喉棒状杆菌（C.pseudodiphtheriticum） 干燥棒状杆菌（C.xerosis） 化脓棒状杆菌（C.pyogenes） 溃疡棒状杆菌（C.ulcerans） 假结核棒状杆菌（C.pseudotuberculosis） 溶血棒状杆菌（C.haemolyticum） J-K群棒状杆菌（C.jeikeium-CDC group JK）
毒素→→血液→→全身中毒症状
外周N---N炎：膈肌麻痹---呼吸困难 声带麻痹---声音嘶哑 软颌麻痹---吞咽困难
心肌---心肌炎
白喉假膜
免疫性：
抗毒素免疫 感染后机体可获得牢固的免疫力
机体还可通过其它方式获得免疫力： 六月以下婴儿---------母亲 成人---------------------隐性感染、人工主动免疫
观察菌落 特点
吕氏血清斜面
涂片染色 生化反应 镜检
毒力试验
直接涂片染色镜检：
-- 2～3张涂片→G染色、异染颗粒染色 镜检——初报“直接涂片检出形似白喉 杆菌”——早期诊断
--用无菌棉拭子浸以动物血清，采集标本， 37℃10h，涂片染色镜检——提高阳性率
•分离培养：
吕氏血清斜面： 37℃、8～12h →→涂片染色镜检
•抵抗力：
对干燥、寒冷和日光抵抗力较其他无 芽胞细菌强，在干燥的假膜中可生存3 个月
对湿热和消毒剂敏感，5%石炭酸、1： 1000升汞1min，100℃1min、60℃10min 均可灭菌
对青霉素、红霉素等敏感，对磺胺不 敏感
三、微生物学检验
分离出白喉杆菌，并证明其毒力 标本采集：
态和产毒性能不变
•BAP：
•菌落灰白色、光滑型、 直径1～2mm、有狭窄 β溶血环（轻型） •多次传代后菌体变为球 型
BAP中菌落
•亚碲酸钾BAP：选择鉴别培养基
•黑色菌落——鉴别依据 •不同菌型还原能力不同，呈现黑色或灰黑色 菌落 •根据菌落特征及生化反应特点可将本菌分为： 重型、中间型、轻型
二、生物学特性
形态与染色:
G +细长微弯的杆菌
一端或两端膨大呈棒状
白喉棒状杆菌异染颗粒 1000×
常排列呈V、L、X等文字形
异染颗粒——形态上的鉴别特征
无荚膜、无芽胞、无鞭毛
•培养特性：
需氧或兼性厌氧，最适温度35～37℃ 营养要求高，在含血液、血清、鸡蛋的培养基上生
长良好
• 吕氏（Loeffler)血清斜面或鸡蛋斜面： 生长最快，6h即生长，10～12h长出灰白色、 湿润、有光泽的光滑型菌苔/菌落，菌体形 态典型、异染颗粒明显，连续传代可保持形
白喉棒状杆菌 在亚碲酸钾BAP中菌落
•液体培养基： 生长较好，但菌型不同其生长特点也不相同
•生化反应：
分解葡萄糖、半乳糖、麦芽糖、果糖产酸 不产气，不分解乳糖、甘露糖，一般不分 解蔗糖，吲哚 （-）、硝酸盐还原（+）、 触酶（+）、氧化酶（-）、明胶液化（-） 尿素（-）
重型能分解淀粉、糖原、糊精，迟缓分解 蔗糖
分泌物 取双份 如不能及时检验，标本浸于无菌生理盐水或 15%甘油生理盐水保存
检验程 序
直接涂片 染色镜检 （单染或 G 染色+ 异染颗粒 染色）
患者或带菌者咽喉、鼻咽拭子等
吕氏血清斜 面35℃12～ 18h
涂片染色 镜检(G染 色和异染 颗粒染色）
亚碲酸钾BAP、 BAP35℃ 35℃24～48h 16-18h
共同特点：
--大多不产生外毒素 --菌体较粗短，着色较均匀，很少有异染颗粒 --大多寄生在人或动物的鼻腔、咽喉、外耳道、
外阴、泌尿道和皮肤等处
--条件致病菌，可引起心内膜炎、菌血症、肺 炎、泌尿生殖道感染等
--鉴别——生化反应
易感者： 1~5岁儿童 成人---也有可能
锡克试验（Schick test） （白喉外毒素皮内试验）
调查人群在感染或预防接种后对白喉是否 产生免疫力
根据外毒素与抗毒素中和的原理，以少量 白喉外毒素测定机体有无相应抗毒素
缺点—观察时间长、操作繁琐，不易进行 广泛测试
《致敏红细胞凝集试验》
--检出率要比直接涂片高，有助于快速诊断 亚碲酸钾BAP：
37℃、24～48h，黑色菌落 BAP：
轻型有β溶血环，应注意与溶血性链球菌鉴别
•鉴源自文库：
形态染色、菌落特点、生化反应 糖发酵试验、尿素酶、硝酸盐还原
—鉴别棒状杆菌属不同的种 白喉：葡萄糖 （+）、麦芽糖 （+）
蔗糖 （-）
•毒力试验（鉴定致病菌株的重要依据）
（三）K抗原
--细胞壁外面的一种不耐热糖蛋白 --抗吞噬
--有利于细菌在黏膜表面的定植
所致疾病：白喉--急性呼吸道传染病
传染源：患者及带菌者 传播途径：飞沫或污染 临床表现
细菌------上呼吸道粘膜， 生长繁殖，产生毒素
细菌与毒素共同作用引起局部炎症： 炎性渗出，坏死，纤维蛋白 →→假膜→→窒息