天然药物活性成分的研究(1)

天然药物活性成分的研究

班级：生化制药3092

姓名：刘香燕

前言：

迄今为止，临床应用的药物三分之一以上源自天然药物。它们直接来自天然药物或是以天然药物活性成分为先导进一步发展的衍生物、类似物或全合成产物。如阿司匹林，是从植物中广泛存在的水杨酸衍生而制成的乙酰水杨酸。局部麻醉药普鲁卡因是根据植物可卡因的结构研究得到的。我们的祖先早在17世纪初就从无头中发现结晶体，但对它的系统研究还是欧洲化学家从19世纪开始的。19世纪初，化学家对鸦片进行了研究，分离得到了止痛成分吗啡与止咳成分可待因等多种生物碱。20世纪50年代，治疗高血压药利血平与抗癌药长春新碱的发明又一次掀起天然药物化学研究的热潮，从而促进了抗癌新药紫杉醇，喜树碱，依托泊苷及其类似物的问世。20世纪70年代，我国科学家从中药黄花蒿中发现抗疟新药青蒿素又引起了国际对中药研究的重视。

天然药物防治疾病的物质基础是其所含的具有防治疾病作用或生物活性的化学成分即有效成分，只有明确了天然药物的有效成分，才能为天然药物的成产，加工，质量控制，合理用药，扩大天然药物资源、进行化学合成和结构修饰、探索天然药物防治疾病的原理提供依据。

关键字：

研究的途径和方法：

1、确定目标

世界各国长期以来在使用天然药物防治疾病的过程中所积累的丰富经验是寻找新药的极为重要的源泉和基础。因此，研究药物的活性成分，首先要注意文献的调研和现有临床使用药物的效果，如历代医书上记载中药青蒿对“截虐”有效。

2、活性筛选

研究天然药物活性成分时，首先应选择一种简便、快速、能反映天然药物治疗作用的药理活性测试方法，在分离的每一阶段对所得的各个组分进行活性评价。

3、成分预试

a:单向预试

即针对某一类成分而进行的检测，例如确证某一天然药物中是否含有黄酮类化学成分，采用适合于黄酮类化合物的提取溶剂提取，然后用黄酮类化合物的专属性试剂进行定性；

b：系统预试

即先用几种不同极性的溶剂分别对天然药物进行提取，再对各提取部位进行定性推测。

4、提取分离

a：极性分离

此方法是利用由小到大的各种有机溶剂对天然药物进行连续提取，把天然药物中的成分分成不同的极性部位。实际操作时，常先用甲醇（或不同浓度乙醇）提取。

b：单体分离

在部位分离的基础上，可将性质相近的成分再进行细分，并利用各种色谱技术结合溶剂结晶法进行单体分离。

5、结构测定

a：纯度检查

在结构研究之前首先确定化合物的纯度。若纯度不合格，会给结构测定工作带来很大的难度，甚至导致结构测定工作的失败。

b：分子式确定

确定一个化合物的分子式，经典的方法是先进行元素的定性分析，检查含有哪几种元素，再测定各元素在化合物中的百分含量，从而求出化合物的实验式，然后根据测出的分子量，计算出该化合物的分子式。

c：推测结构

化合物的分子式被确定之后，就需要进行官能团和分子结构股价的确定。结构测定中常用波谱简介

1、紫外吸收光谱

是用不同的波长的紫外光为光源（波长范围200~400nm），依次照射一定浓度的试样溶液，化合物分子因紫外线照射吸收能量而产生电子跃进，在不同波长下测定物质的吸收度，并用波长对吸收度或摩尔吸收系数作图而得到的吸收光谱图。

2、红外吸收光谱

是化合物分子结构的客观反映，图谱中的吸收峰都对应着分子中化学键或基团的各种振动形式。

3、核磁共振谱

氢谱

a：化学位移

化合物分子中不同类型H核，由于在分子中所处的化学环境（核外电子云和周围其他核的分布情况）不同，而引起的共振谱线位移。

b：信号的裂分及偶合常数

磁环境不同的两个或两组`H核，在一定距离内会因相互自旋偶合干扰而使共振峰发生裂分。

c:峰面积

峰面积以积分曲线高度表示。

碳谱

4、质谱

是化合物分子受一定能量冲击，失去电子，生成阳离子，而后在稳定的磁场中按质荷比（m/z）顺序进行分离，通过检测器记录而得的图谱。是确定化合物分子量，分子式及结构信息的重要手段。

材料与方法：

材料：

仪器：烧杯、三角烧瓶、回流装置、抽滤装置、分液漏斗、表面皿。

试药：天然药物原料（粗粉）、蒸馏水、乙醇、乙酸乙酯、石油醚、滤纸、PH试纸、碘化铋钾、硅钨酸、鞣酸、苦味酸、HCI、H2SO4、NAOH、KOH、NH4OH、AICI3、FECI3、醋酐、氨基安替比林、铁氰化钾、盐酸羟氨、溴钾氛绿、3,5-二硝基苯甲酸、a-萘酚、镁粉、乙酸镁、硫酸铜、茚三酮、明胶。

方法：

天然药物所含的成分是十分复杂的，为了减少预实验中各类成分的相互干扰，常常用不同溶剂，按照极性由低到高顺次提取，分别对各部分进行处理，然后进行各种成分的鉴别反应，列如取药材适量，用石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、水甚至

再用1%HCI溶液，1%NAOH溶液顺次抽提（即系统溶剂法），然后做鉴别反应。此方法手续较繁，更换溶剂前必须将上一次药材中溶剂挥干。为了简化手续，本实验采用数种溶剂，分别同时提取，然后检查其可能含有的成分。

药材粗粉

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5g 10g 1g

| |乙醇提取|

提取液| 提取液

（检查糖苷、氨基酸、蛋白质、提取液（检查挥发油、萜类、甾体及脂肪

有机酸、鞣质等水溶性成分）|浓缩类成分）

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浓缩液取2ml提取液

|分两部分（检查酚类化合物，有机酸类成分）

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部分浸膏部分浸膏

|加2%HCI溶解|EtOAc溶解

|--------------------| EtOAc液

酸液残渣|加5%NaOH （检查生物碱类成分）|乙醇溶解|------------------------------|

乙醇液碱水层EtOAc层

（检查黄酮、蒽醌等类成分）（酚类化合物、有机酸类成分）|水洗至中性，蒸干

残渣

|乙醇溶解

乙醇液

（检查香豆素、萜类、内酯类成分）

1.水提液取药材粗粉5克，加10倍量的水，在50~60摄氏度的水浴上加热一小

时过滤，滤液供检查氨基酸、多肽、蛋白质、糖、多糖、皂苷、苷类、鞣质、有机酸及水溶性生物碱。

（1）Molisch反应：试样1ml置于小试管中，滴加10%α-萘酚乙醇溶液1~2滴，振摇，倾斜试管，沿管壁加入浓H2SO4 0.5ml，试样中若有糖、苷存在，则两液交界处出现紫色环。