脑保护策略

• 本课题研究的目的 本研究拟采用SD大鼠窒息性脑缺 氧复苏模型， 探讨NMDAR阻断剂— — 氯胺酮结合亚低温技术对脑缺血后再 灌注损伤的保护作用。
大脑是高度分化的高氧耗组织，对缺 氧极敏感。因此，缺氧所致脑损害的脑复 苏一直是复苏过程中的难点之一。采用药 物干预方法能否阻断损伤后的级联反应？ 亚低温与NMDAR 阻断剂间是否存在相互 影响？影响机制如何等是本研究所要重点 解决的核心问题。
• 损伤过程的药物干预 • 选用药物——氯胺酮（ketamine） 氯胺酮是为数不多的 NMDAR 阻 断剂，理论上，可通过抑制 CNS内兴 奋性氨基酸（ EEA ）的合成与释放， 从而阻断脑缺血/缺氧性损伤后续的级 联反应过程，发挥脑保护作用。
•亚低温的脑保护意义 亚低温指通过物理或药物的手段 将动物或人体温降至30~35℃的状态。 已知低温能降低脑细胞代谢率， 减少脑组织耗氧，对缺血/缺氧性脑损 伤有良好的保护作用。 但亚低温与氯 胺酮联合应用的脑保护作用尚属未知。
• 损伤过程演化 脑缺氧——兴奋性氨基酸（EEA）合 成/释放增加——激活N-甲基-D天门冬氨酸 受体（NMDAR）——启动受体依赖Ca2+ 通道——细胞外Ca 2+大量进入细胞内—— 细胞内Ca2+超载——即早基因表达——细 胞凋亡/能量耗竭——加重缺氧性损害。 ***此为恶性循环，最终导致细胞坏死。
• 经费预算
序号 1 科目 小型仪器设备 经费（千元） 4.0 依据或说明 购置小动物呼吸机 购置动物、生化与 分子生物学检测试 剂、ELISA试剂盒 文章版面费、会务 费等
Fra Baidu bibliotek
2
3 4
实验材料费
科研业务费 协作费
22.0
2.5 1.5
亚低温下氯胺酮对大鼠窒息性脑 缺氧保护作用的研究
前
言
• CNS缺血性损伤的病生理基础 脑保护在现代麻醉复苏与缺血性 脑损伤的防治方面占有重要地位。随 着对脑组织缺血缺氧后病理还僧里改 变和细胞损伤机制研究的深入，有希 望找到更有效的方法，以达到更好的 治疗和预防效果。
• 脑缺血/缺氧损伤机制 动物实验表明脑缺血/缺氧后损伤 是一个“级联反应（cascade）”过程 包括（1）兴奋性毒性反应 （2）损伤周围组织去极化 （3）炎症细胞因子表达 （4）“程序”性细胞死亡等
3 检测指标：
（1）脑脊液中谷氨酸/天冬氨酸含量 （2）神经细胞内Ca2+浓度 （3）脑组织含水量 （4）SOD活性 （5）丙二醛含量 （6）c-fos基因表达 4 实验数据分析整理： 使用SPSS11.0软件包进行统计学分析。
• 进度安排
2003,8~2004,1 准备与调试实验设备 2004,2~2004,7 动物模型建立 2004,8~2005,1 预实验并酌情改进实验 与观察手段 2005,2~2006,2 动物实验与资料收集 2006,3~2006,6 资料整理与论文撰写
• 研究成果提交 本课题研究成果以科研论文的形 式提交。
• 技术路线
1 动物模型制作：选取成龄健康SD大鼠，腹腔 注射水合氯醛麻醉后气管切开，插入气管导管。 吸入空/氧混合气体：空气：O2 =1:1，控制呼吸。 待各项生理指标平稳后，夹闭气管导管一定时间， 经血气分析证实，制成脑缺氧模型。 2 实验分组：共分成四组。假手术组、单纯氯胺 酮组、单纯亚低温组与氯胺酮+亚低温组。每组 各15只SD大鼠。
• 本研究的意义
氯胺酮及亚低温技术的脑保护作用虽 分别已有报告，但亚低温条件下氯胺酮的 脑保护作用如何目前尚无报道。 本研究拟通过上述两项措施在模拟临 床麻醉时发生的脑缺血/缺氧条件下，研究 其脑保护作用机制，研究结果在于为临床 脑复苏工作提供具指导意义的理论依据及 相关证据，获得最佳脑复苏效果。
• 相关研究工作基础与条件
已进行过体外培养人胚胎神经原细胞氧损伤 时纳络酮的保护作用及其相关研究，相关课题得 到天津医科大学青年科研基金及跨世纪人才基金 资助。已完成该方向研究论文待发表。目前对氯 胺酮在体与离体缺血性脑损伤保护作用的研究正 在进行中。已建立了相当完善的实验研究体系和 人员队伍，具备较雄厚的实验工作基础。 有关动物模型成熟，各项生化及分子生物学 指标检测一起均已具备。