植物愈伤组织诱导培养基的配制
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植物愈伤组织诱导培养基的配制
植物愈伤组织诱导培养基(简称愈伤培养基)是一种含有特定激素和营养物质的培养基,其主要作用是诱导植物体组织形成愈伤组织,从而实现植物组织培养、育种等研究。
本文将介绍植物愈伤组织诱导培养基的配制。
一、基础盐溶液的配制
基础盐溶液是愈伤培养基的基础成分,其配方基本固定,主要成分包括无机盐和蔗糖等。基础盐溶液的配入量不同,会影响培养基的pH等指标。
基本的基础盐溶液配方:碳酸钾(K2CO3)2.5g、硝酸铵(NH4NO3)1.0g、硫酸镁(MgSO4·7H2O)1.0g、氯化钙(CaCl2·2H2O)0.15g、磷酸二氢钾(KH2PO4)0.25g、蔗
糖20g、亚硫酸氢钠(NaHSO3)0.25g、维生素B5(nicotinic acid amide)0.1mg、维生
素B1(thiamine·HCl)0.1mg,配入1L蒸馏水中。
注意:不同植物种类的愈伤培养基种类略有不同,需要根据实验需求和特性进行差异
化调整。
二、植物生长素的添加
植物生长素是愈伤组织诱导的必要因素之一,常用的生长素有IAA、IBA、NAA、2,4-D 等,其中2,4-D是最常用的生长素。植物生长素的添加量需要视植物种类、处理目的和生
长素种类而定。
一般情况下,2,4-D的添加量为1-2mg/L,但不同品种之间的生长素敏感性可能不一致,因此需要优化试验条件。如果使用IBA或NAA等生长素,其配入量一般为0.1-0.5mg/L。
三、其他添加物
除了基础盐溶液和植物生长素外,愈伤培养基还需要添加其他营养物质、激素等。下
面列举了一些常用的添加物及其配入量:
1、硫酸甘露醇(mannitol):2-3%。用于储存或早期培养。
2、水杨酸(Salicylic acid):10-500mg/L。用于抑制愈伤组织的黑化和坏死。
3、多种维生素:如维生素B1、B5、C,一般用于添加到培养基中的含量为5-10mg/L。
四、酸碱度的调整
酸碱度是愈伤培养基的关键指标,影响到愈伤组织形成及其生长发育。通常情况下,
愈伤培养基的pH值保持在5.5-5.8之间,可通过NaOH或盐酸来调节其酸碱度。
总之,植物愈伤组织诱导培养基的配制需要根据实验需求和植物特性进行优化和修改,以上仅为一般情况下的基础操作步骤及要点,实际应用时还需综合考虑各种因素,不断完
善培养基配方和诱导方式。