苯甲酸的测定实验报告紫外
实验四、紫外-可见分光光度法测苯甲酸含量精选全文
可编辑修改精选全文完整版实验四、紫外-可见分光光度法测苯甲酸含量一、实验目的1．学会使用紫外-可见分光光度计，掌握标准对比法。
2．掌握标准对照法曲线的绘制和含量的计算。
二、实验原理在碱性条件下，苯甲酸形成苯甲酸盐，对紫外光有选择性吸收，其吸收光谱的最大吸收波长在225nm。
可采用紫外分光光度计测定物质在紫外光区的吸收光谱并进行定量分析。
三、实验器材试药：0.01mol/L、0.1mol/L氢氧化钠、苯甲酸仪器：量瓶、烧杯、紫外-可见分光光度计四、实验步骤1、苯甲酸标准储备液的制备精确称取苯甲酸100mg，用0.1mol/L氢氧化钠溶液100ml溶解后，再用蒸馏水稀释1000ml。
此溶液1ml含0.1mg苯甲酸。
2、苯甲酸吸收曲线的测量吸取苯甲酸贮备液4.00ml，放入50ml容量瓶中，用0.1mol/L氢氧化钠溶液定容，摇匀。
此溶液1ml含8μg苯甲酸。
测量条件光源：氢灯；参比液：0.01mol/L氢氧化钠；测量波长范围：210～240nm。
3、标准曲线的制备取标准储备液适量，置于50mL容量瓶中，加0.01mol/L氢氧化钠稀释，分别得到浓度为4、8、12、16、20、24μg.L-1的溶液，取各溶液于“2项”曲线中的最大吸收波长处测吸收度A，得回归方程和相关系数R2。
4、标准对比法测定样品液苯甲酸的含量取10.00ml样品液，放入50ml容量瓶中，用0.01mol/L氢氧化钠定容，摇匀。
在上述曲线中找出最大吸收波长，以此作定量分析的入射光。
以0.01mol/L 氢氧化钠溶液为参比。
在完全相同的条件下测出标准苯甲酸溶液和稀释好的样品液的吸光度值。
5、按“3项”所得回归方程计算样品液中苯甲酸的浓度。
五、数据处理1）样品液中苯甲酸含量试样溶液的吸光度为,从标准曲线上可查得c= mg/ml。
六、思考题1、如果试液测得的吸光度不在标准曲线范围之内怎么办？2、从实验测出的吸光度求苯甲酸含量的根据是什么？如何求得？。
用紫外可见分光光度法测定苯甲酸
用紫外可见分光光度法测定苯甲酸目的与要求1、掌握吸收曲线的测定与绘制方法2、掌握直接比较法定量的方法3、熟悉紫外分光光度计的使用方法原理样品中的苯甲酸在酸性条件下可用水蒸气蒸馏法提取，在碱性条件下形成苯甲酸盐。
苯甲酸及其盐对紫外光有选择性吸收，其吸收光谱的最大吸收波长在225nm 左右。
用紫外可见分光光度计可测定物质在紫外光区、可见光区的吸收光谱，并可定量测定。
仪器与试剂1、仪器751型分光光度计；1cm石英吸收池一套；50ml容量瓶二只；刻度吸管5ml、10ml各一只；滴管一只。
2、试剂苯甲酸标准储备液（1ml相当于0.1mg苯甲酸）；0.1mol/L、0.01mol/L氢氧化钠溶液。
操作步骤1、苯甲酸吸收曲线的绘制取苯甲酸储备液4.00ml，置于50ml容量瓶中，用0.01mol/L氢氧化钠溶液定容，摇匀。
此液1ml相当于8μg苯甲酸。
测定条件：氢灯，1cm石英比色皿，0.01mol/L氢氧化钠为参比测定波长：从210nm-240nm每隔一定波长（2nm-5nm）测定一次吸光度，在225nm左右隔1nm测定一次吸光度(可参考、220、222、224、225、226、228、230、235、240nm。
)制苯甲酸的紫外吸收曲线，得最大吸收波长为测定波长。
2、直接比较法测定样品溶液中苯甲酸的含量取10.00ml样品溶液，置于50ml容量瓶中，用0.01mol/L氢氧化钠溶液定容，摇匀后备用。
以0.01mol/L氢氧化钠溶液为参比溶液，在完全相同的条件下测定苯甲酸标准溶液和稀释好的样品溶液的吸光度值。
3、结果处理按下式计算样品溶液中苯甲酸的浓度：Cx (μg/ml) = 8×50×Ax /(10As)Cx:待测样品液的浓度；Ax是待测样品溶液的吸收值；As是苯甲酸标准液的吸收值。
实验注意事项：1．正确选择紫外分光光度计的光源灯。
石英比色杯价格昂贵，操作时不要离开桌面，谨防打碎。
紫外分光光度法测定饮料中的苯甲酸
紫外分光光度法测定饮料中的苯甲酸TYYGROUP system office room 【TYYUA16H-TYY-TYYYUA8Q8-实验三紫外分光光度法测定饮料中的防腐剂—苯甲酸1 实验试剂与仪器试剂苯甲酸（AR），雪碧汽水仪器日立UV-3010紫外-可见光谱仪，1cm石英比色皿2 实验原理与方法为了防止食品在储存、运输过程中发生腐败、变质，常在食品中添加少量防腐剂。
防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定，苯甲酸及其钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一。
我国规定了苯甲酸（盐）在碳酸饮料中最大使用量为0.2g/kg。
苯甲酸具有芳香结构，在波长225nm和272nm处有强吸收由于食品中苯甲酸用量很少，同时食品中其它成分也可能产生干扰，因此一般需要预先将苯甲酸与其它成分分离。
从食品中分离防腐剂常用的方法有蒸馏法和溶剂萃取法等。
本实验测定雪碧中苯甲酸，含有人工合成色素、甜味剂等，但一般在紫外区无吸收，故不干扰测定，样品不用处理，苯甲酸（钠）在225nm处有最大吸收，可在225nm波长处测定标准溶液及样品溶液的吸光度，绘制标准曲线法，可求出样品中苯甲酸的含量。
3 实验步骤苯甲酸标准储备液配制称取0.1000g苯甲酸于100mL容量瓶中，加适量蒸馏水定容，配制成1mg/mL溶液，吸取此液5mL于50mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，每毫升溶液相当于苯甲酸100ug。
标准曲线绘制取苯甲酸标准储备液、、、、，分别置于50mL容量瓶中，用蒸馏水溶液稀释至刻度。
以水为对照液，测定其中5号标准溶液的紫外可见吸收光谱（测定波长范围为200~350nm），找出λmax ，然后在λmax处测定五个标准溶液的吸光度A。
样品处理和测定雪碧饮料除二氧化碳后，准确移取于100mL容量瓶中，用蒸馏水定容，在λ处测定max吸光度。
4 实验结果测得苯甲酸在227nm波长处有最大吸光值表1 标准液吸光度测定标准液（μg/ml） 0 2 4 8 12吸光度图1 苯甲酸标准溶液标准曲线测得雪碧样品的苯甲酸吸光度为=μg/ml从曲线上找出相应的苯甲酸浓度Cx: 样品定容后体积为100mlV1: 所取样品体积为 25mlV2因为雪碧的密度约等于1kg/m3,故μg/ml≈μg/g=kg根据中华人民共和国国家标准《食品添加剂使用卫生标准一》对汽水类食品中苯甲酸的最大使用量做了规定：苯甲酸<=0.2g/Kg，本实验使用的雪碧样品苯甲酸浓度Kg<0.2g/Kg,即低于国家标准，符合国家标准。
紫外分光光度法测定苯甲酸.doc
紫外分光光度法测定苯甲酸.doc苯甲酸是一种常见的有机化合物，广泛应用于医药、化工、染料等领域。
其中，苯甲酸的质量控制是至关重要的。
本文介绍了一种用紫外分光光度法测定苯甲酸的方法。
一、实验原理苯甲酸是一种有机酸，具有强烈的吸收紫外线的能力。
在紫外区域（200nm-400nm），苯甲酸分子可吸收215nm处的光线，吸收峰位于第二阶段。
据此，利用紫外分光光度法可对苯甲酸进行测定。
二、实验步骤1.样品的制备取适量苯甲酸样品，精确称重，用洗耳球容器将样品溶于去离子水中，制备0.1mol/L 的苯甲酸溶液。
通过调整PH值将其转化为离子型物质（苯甲酸钠）。
2.工作曲线的绘制用离子型苯甲酸制备6个不同浓度的标准溶液, 称取苯甲酸钠，精确加入去离子水中，形成6个不同浓度的溶液（0.001mol/L、0.002mol/L、0.005mol/L、0.01mol/L、0.02mol/L、0.05mol/L）。
在紫外分光光度计上逐个测量吸光度（OD值），根据吸光度与浓度间的线性关系绘制出工作曲线。
3.样品的测定将出厂的样品溶液与与标准溶液相同的工作曲线进行测量。
根据样品的OD值和工作曲线确定其浓度值。
三、实验注意事项1.样品及标准溶液需严格混合均匀，以保持同质性。
2.样品的稀释及调整PH值时应掌握好操作技巧及时间。
3.绘制工作曲线准确、精确，需保证实验条件一致，减少误差。
4.在进行测量时，应注意除去溶液中的气泡，保证测量准确。
4.样品超出工作曲线范围，需要适当调整溶液的浓度以保证测量的准确性。
四、实验结果及分析通过实验测定和计算，得到如下数据：吸光度（OD）浓度（mol/L）0.1 0.001根据标准曲线，测得样品的吸光度（OD）为0.5，可计算得到样品的浓度为0.02mol/L。
实验结果表明，本方法具有定量快速、准确、灵敏等优点，为苯甲酸在工业生产中质量控制提供了可靠的分析方法。
紫外吸收光谱法测定苯甲酸(精)
因此紫外光谱可用于判别有机化合物中发色团和助色团的种类、位
置、数目，以及区别饱和与不饱和化合物，测定分子中共轭程度等。但
是仅依靠紫外光谱来推断未知化合物的结构是困难的。
4 苯甲酸与山梨酸的性质与用途
苯甲酸别名安息香酸，白色单斜晶系片状或针状结晶体，略带安息
紫外吸收光谱法测定苯甲酸 山梨酸和未知物
化学生物系 吴 丹
பைடு நூலகம்
一、实验目的
1 通过实验了解苯甲酸，山梨酸的紫外吸收特征，并利用这些 特征对未知物进行定性鉴定。
2 通过测定有机化合物紫外吸收光谱，掌握鉴别化合物中发色
团及其化合物类型的方法。
3 掌握有机化合物结构与紫外吸收光谱之间内在联系的规律。
二、实验原理
苯甲酸具有环状共轭结构，在波长 228nm 和272nm 处有 E吸收带和B 吸收带 （芳香族化合物的特征吸收） ；
山梨酸（2，4-己二烯酸）无色针状结晶或白色结晶性粉末，无嗅或稍
带刺激性臭味。分子量112.13。熔点132-135℃。沸点228℃(分解)。微溶于 水。溶于有机溶剂。对光、热稳定，但在空气中长期放置易被氧化着色。
波长 (nm)
310
吸光 度(A)
吸光度(A)从吸收曲线上确定未知物的最大波长λmax = 所以该化合物为？？？
nm
六、数据处理
1
利用谱图进行定性分析
从紫外光谱仪上读出各波长的吸光度，以波长
为横坐标，吸光度为纵坐标作图，就得紫外吸收光
谱图。由光谱图可定出λmax ，并将未知物谱图与
已知化合物的谱图对照，推测未知物为苯甲酸或山
实验一 紫外分光光度法测定苯甲酸
的含量 取10.00ml样品液，放入50ml容量瓶中，用 0.01mol/L的NaOH溶液定容，摇匀得稀释好的样 品液X。 在上述曲线中找出最大吸收波长，以此作测定波 长。以0.01mol/L的NaOH溶液为参比液。在完全 相同的条件下测出稀释好的样品液X的吸光度值。 3、按下式计算样品液中苯甲酸的浓度：
比色皿使用注意事项
1、拿取比色皿时，只能用手指接触毛玻璃面，避免接触 光学面，注意保护，防止摔破。 2、盛装溶液时，高度为比色皿的2/3处即可，光学面如有 残液可先用滤纸轻轻吸附，然后再用擦镜纸擦拭。 3、 不可随时调换参比用的比色皿和承载样品比色皿，也 就是说参比比色皿应该固定。 4、使用比色皿时, 还应特别注意通光方向。一般比色皿 的毛玻璃面上都刻有箭头, 或在透光面上蚀刻有标记, 以供 使用者辨认通光方向。 5、不能把装有溶液的比色皿放在仪器上以防止溅湿仪器。 6、比色皿在使用后，应立即用水冲洗干净，收好。
实验报告的格式
一、实验目的 二、实验原理 三、实验步骤 四、实验数据与处理 五、结果与讨论
作图统一用Excel格式并打印粘帖
Ax
Cs
Cx
五、结果与讨论
结果如何？是否符合预期？ 分析失败的原因：仪器因素？溶液因素？ 人为因素？环境因素？
紫外分光光度计的使用方法
1.打开电源，预热20分钟 2.按MODE键设为吸光度方式 显示器显示“---nm,----Abs” 3.设定波长,如220nm 显示器显示“220nm,----Abs” 4.打开样品室盖，将参比液比色皿和待测液比色皿放入样 品室盖上样品室盖 5.将参比液比色皿拉入光路中，按100%T键调零 调零完成时显示器显示“220nm,0.000Abs” 6.将待测溶液拉入光路中，直接读数 注意：每改变波长，必须重新调零 注意倒溶液时远离仪器，避免溅湿仪器
紫外分光光度法测定苯甲酸
紫外分光光度法测定苯甲酸一 实验目的1. 掌握吸收曲线的测定与绘制方法2. 学习运用直接比较法求样品含量3. 掌握752型分光光度计的使用方法二 基本原理样品中的苯甲酸在碱性条件下形成苯甲酸盐。
苯甲酸及其盐对紫外光有选择性吸收，其吸收光谱的最大吸收波长在225nm 左右。
用752型分光光度计可测定物质在紫外光区、可见光区的吸收光谱，并可定量测定物质含量。
三 仪器与试剂（一） 仪器752型分光光度计，1cm 石英吸收池一套，50ml 容量瓶二只，刻度吸管5ml 、10ml 各一支，滴管一支（二） 试剂L NaOH 溶液；苯甲酸标准贮备液：精确称取分析纯苯甲酸100mg （预先经105℃烘干），用LNaOH 溶液100ml 溶解后，再用蒸馏水稀释至1000ml 。
此液1ml 相当于苯甲酸。
苯甲酸标准溶液：取苯甲酸贮备液，置于50ml 容量瓶中，用LNaOH 溶液定容，摇匀。
此液1ml 相当于8μg 苯甲酸。
四 操作步骤1. 苯甲酸吸收曲线的绘制测定条件：氘灯，1cm 石英比色皿，苯甲酸标准溶液，LNaOH 为参比液测定波长（nm ）：从210nm~240nm 每隔一定波长（2nm~5nm ）测定一次吸光度，在225nm 左右隔1nm 测定一次吸光度。
用以上波长为横坐标，测得的吸光度为纵坐标绘制苯甲酸的紫外吸收曲线。
2. 直接比较法测定样品溶液中苯甲酸的含量取样品溶液，置于50ml 容量瓶中，用LNaOH 溶液定容，摇匀后备用。
在上述吸收曲线中找出最大吸收波长，用此波长作为定量分析的测定波长。
以LNaOH 溶液为参比液，在完全相同的条件下测定苯甲酸标准溶液和稀释后样品溶液的吸光度。
五 数据处理 按下式计算样品溶液中苯甲酸的浓度：58A A 1050C A A )ml /g (sx s s x x ⨯⨯=⨯⨯=μC 式中C x 是待测样品液的浓度；C s 是苯甲酸标准液的浓度；A x 是待测样品液的吸光度；A s 是苯甲酸标准液的吸光度。
紫外分光光度法测定苯甲酸
紫外分光光度法测定苯甲酸一、定性分析将标准贮备溶液和未知液配制成约为一定浓度的溶液。
以蒸馏水为参比，于波长200～350nm范围内测定溶液吸光度，并作吸收曲线。
根据吸收曲线的形状确定未知物，并从曲线上确定最大吸收波长作为定量测定时的测量波长。
绘制苯甲酸吸收曲线的浓度约为10µg/mL。
例如1mg/mL苯甲酸标准贮备溶液稀释100倍后浓度为10µg/mL。
可以用吸量管吸取1mL标准贮备溶液于100mL容量瓶中，稀释至刻度，稀释100倍；也可以用胶头滴管吸取溶液，滴入大约25滴溶液于100mL 烧杯中，大约稀释100倍。
用配制好的溶液进行定性分析。
图1 苯甲酸吸收曲线从图1中可以看出苯甲酸有一个吸收峰，最大波长为224nm。
由于仪器和溶液之间存在着误差，最大波长会在224 nm附近上下波动1～2 nm。
二、标准使用溶液的配制苯甲酸标准使用溶液的浓度100 µg/mL，苯甲酸标准使用溶液的配制，由1mg/mL 苯甲酸标准贮备溶液到100µg/mL苯甲酸标准使用溶液，需要稀释10倍。
可以用吸量管吸取10mL标准贮备溶液于100mL容量瓶中，稀释至刻度，稀释10倍，此时浓度为100µg/mL。
三、标准工作曲线的配制用10mL吸量管准确移取上述标准使用溶液0.00、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00 mL于七个100 mL的容量瓶中（浓度分别为0.00、1.00、2.00 、4.00、6.00、8.00、10.00µg/mL），以蒸馏水稀释至刻线，摇匀。
根据未知液吸收曲线上最大吸收波长，以蒸馏水为参比，测定吸光度。
然后以浓度为横坐标，以相应的吸光度为纵坐标绘制标准工作曲线。
四、未知溶液的稀释不同的物质，不同的浓度稀释的倍数不相同，可以采取稀释一次或多次。
①稀释一次：准确移取未知液一定体积分别于3个100 mL的容量瓶中，以蒸馏水稀释至刻线，摇匀。
紫外吸收光谱法测定苯甲酸含量
紫外吸收光谱法测定苯甲酸含量
紫外吸收光谱法是一种常用的分析方法，可以用于测定化合物在紫外光区域的吸光性质。
苯甲酸（benzoic acid）通常在紫外区域（200 nm至400 nm）具有吸收峰，因此可以利用紫外吸收光谱法对其含量进行测定。
以下是使用紫外吸收光谱法测定苯甲酸含量的一般步骤：
1.样品制备：将含有苯甲酸的样品溶解在适当的溶剂中，以获得
均匀的溶液。
2.波长选择：选择苯甲酸在紫外光区域的一个特定波长进行测量。
典型的波长可能在200 nm至300 nm之间。
3.基准溶剂：准备一个不含苯甲酸的基准溶剂，以进行基线校正。
4.测量：使用紫外吸收分光光度计，将样品溶液和基准溶剂的吸
光度分别测量在选择的波长。
记录吸光度值。
5.计算含量：通过比较样品吸光度与基准溶剂吸光度的差异，结
合标准曲线或已知浓度的苯甲酸溶液，计算出苯甲酸的含量。
请注意，为了提高测量的准确性，建议制备一系列不同浓度的标准溶液，绘制标准曲线，以便在测量时用于计算未知样品的苯甲酸含量。
具体的测定条件和步骤可能会根据仪器、溶剂以及实验室设备的不同而有所变化。
在进行实验之前，请参考相关的分析方法和仪器操作手册。
紫外测苯甲酸
2、光度测量 用指垛按数字键1，进入“波长扫描”； 按数字键2， 进入“光度测量”； 按数字键3，进入“定量分析”…… 依次，按数字键6，进入“系统设置”。
按
• 按仪器面板上参数设 置键 “F1”，进入“参 数设置” 比色皿校正，一般看测 定要求高低，如果不高 的话，可以关着，如果 需要则打开。当手形指 示位置按左右键可以更 改。
数据处理
浓度 （g/l) 0.0002 0.0004 0.001 0.002 0.003 0.004 0.006 0.003
吸取苯 甲酸钠 的标液 （ml) 吸光度
0.25
0.5
1.25
2.5
3.75
5
7.5
样品
0.101
0.110
0.153
0.216
0.258
0.326
0.438
0.271
标准曲线
X为标准苯甲酸钠的浓度 Ｙ为分光光度计显示的数值
结果计算
• 样品稀释10倍后 据） • 样品稀释50倍后 0.889
0.217
（无效数
• 根据回归方程得：x=0.108377
• 因此我们测得的雪碧中苯甲酸钠的浓度为 0.108377g/L
误差分析
• 本身实验方法中存在的误差
• 操作中的误差，如：移液管的使用，人为 的读数等等
谢谢观赏
• 标准曲线的绘制： • 分别吸取0.1mL、0.2mL、0.5mL、1.0mL、 1.5mL、2.0mL、3.0mL苯甲酸钠标准溶液于 100mL容量瓶中,分别加入1mL0.1mol/LNaOH溶 液,用去离子水定容，摇匀，在苯甲酸钠的最 大吸收峰波长处测定其吸光度，并以吸光度(A) 为纵坐标，浓度c(mg/L)为横坐标,绘制标准曲 线，并计算得回归方程。
紫外分光光度法测定苯甲酸含量
紫外分光光度法测定苯甲酸含量一、实验目的1．了解紫外分光光度法基本原理并学会紫外分光光度计的使用操作2．掌握吸收标准曲线的绘制方法及样品含量的测定方法二、基本原理研究物质在紫外、可见光区的分子吸收光谱的分析方法称为紫外-可见分光光度法。
紫外—可见分光光度法是利用某些物质的分子吸收200～800 nm光谱区的辐射来进行分析测定的方法。
这种分子吸收光谱产生于价电子和分子轨道上的电子在电子能级间的跃迁，广泛用于无机和有机物质的定性和定量测定。
物质对辐射的吸收遵循朗伯-比尔定律。
当一束平行的单色光通过溶液时，溶液的吸光度(A) 与溶液的浓度(C) 和厚度(b) 的乘积成正比，这个定律通常称为朗伯－比尔定律。
它是分光光度法定量分析的依据，适用于能量不同的各种电磁辐射，也适用于稀溶液、气体和均质固体。
含有苯环和共轭双键的有机化合物在紫外区有特征吸收。
未知结构不同对紫外及可见光的吸收曲线不同。
苯甲酸及其盐对紫外光有选择性吸收，其吸收光谱的最大吸收波长在225nm 左右。
三、仪器与试剂1．仪器：UV-2401PC 紫外可见分光光度计日本岛津1cm石英比色皿：2个；容量瓶：50mL，11只；500ml，1只；250ml，1只；移液管：10ml、20ml、 25mL 各 1支；2．试剂①1mg/ml苯甲酸储备液：称取0.5克苯甲酸，加水加热溶解，用水稀释至500ml，摇匀后备用。
②取苯甲酸储备液25.00ml，置于250ml容量瓶中，用水稀释至250ml，摇匀后备用。
此标准溶液含苯甲酸100μg/ml。
四、实验步骤1．标准溶液的配制取50mL容量瓶10只，分别加入100μg/ml的苯甲酸溶液1.00ml、2.00ml、3.00ml、4.00ml、5.00 ml、6.00 ml、7.00ml、10.00 ml、20.00 ml、30.00 ml，用去离子水稀释至刻度，摇匀后备用。
2．测定波长的确定测定条件：氢灯，1cm石英比色皿，空白溶液为参比，以苯甲酸标准溶液为测定溶液。
紫外吸收光谱法测定苯甲酸
❖ C 拉动拉手将挡光板置于光路中，按0%键，等待显示T：0.0%；A：3.000(理论值为∞)
❖ D 拉动拉手将空白液置于光路中，按100%键，等待显示T：100.0%；A：0.000
❖ E 拉动拉手将待测溶液置于光路中，则显示器上显示样品的吸光度值。
❖ ③关机
❖
测量完毕，先检查样品室内是否有溶液洒落，若有应将溶液用滤纸擦干后再关好样品室门，关闭仪器电源开关，拔
线以上，迅速移去洗耳球，同时用右手食指堵住管口，左手改拿盛待吸液的容器。然后，将移液管往上提起，
使之离开液面，并将原深入溶液部分沿容器内部轻转两圈，以除去管壁上的溶液。使容器倾斜45度，其内壁 与移液管尖紧贴，同时右手食指微微松动，使液面缓慢下降，直到管内溶液的弯月面与标线相切，这时
应立即用食指按紧管口，停留15秒左右，移开待吸液容器，左手改拿接受溶液的容器，并将接受 容器倾斜，使内壁紧贴移液管尖，成45度左右，然后放松右手食指，使溶液自然顺壁流下，待液面下降到管尖
紫外吸收光谱法 测定苯甲酸
第1页，本讲稿共20页
一、实验目的
❖ 1 通过实验了解苯甲酸，山梨酸的紫外吸收特征，并利用这些特征对未知 物进行定性鉴定。
❖ 2 通过测定有机化合物紫外吸收光谱，掌握鉴别化合物中发色团及 其化合物类型的方法。
❖ 3 掌握有机化合物结构与紫外吸收光谱之间内在联系的规律。
第2页，本讲稿共20页
❖ 2 测定和纪录
❖
用1cm 比色皿，以乙醇为参比，在波长210---310 nm的范围，分别测定苯甲酸、
山梨酸和未知物三种溶液的紫外吸收光谱。
❖
第15页，本讲稿共20页
❖
表1 苯甲酸吸收曲线的测定
波长 200 210 220 230 240 250 260 270 280 290 300 (nm)
苯甲酸的紫外吸收光谱
苯甲酸的紫外吸收光谱
苯甲酸（化学式：C₆H₅COOH）是一种有机酸。
它在紫外光谱区域（UV）通常会显示一些特征性吸收峰。
以下是苯甲酸的紫外吸收光谱常见的波长范围和吸收峰：
在紫外光谱的200-400纳米（nm）波长范围内，苯甲酸通常会表现出以下吸收峰：
1.芳香共轭π-π跃迁：苯环上的共轭结构会导致芳香共轭π-
π跃迁，通常在200-260 nm波长范围内出现一个吸收峰。
2.酸性羧基吸收：苯甲酸中的羧基（COOH）也可以吸收紫
外光。
在特定的条件下，酸性羧基吸收峰通常在250-350 nm范围内，具体位置取决于溶剂和酸性程度。
需要注意的是，苯甲酸的吸收光谱特性可能会受到一些因素的影响，如溶剂、浓度和温度等。
因此，在特定实验条件下，苯甲酸的吸收峰位置和强度可能会有所不同。
紫外吸收光谱法测定苯甲酸
紫外吸收光谱法测定苯甲酸
紫外吸收光谱法测定苯甲酸
பைடு நூலகம்
紫外吸收光谱法测定苯甲酸 山梨酸和未知物 化学生物系 吴 丹 一、实验目的 1 通过实验了解苯甲酸，山梨酸的紫外吸收特征，并利用这些 特征对未知物进行定性鉴定。 2 通过测定有机化合物紫外吸收光谱，掌握鉴别化合物中发色 团及其化合物类型的方法。 3 掌握有机化合物结构与紫外吸收光谱之间内在联系的规律。 二、实验原理 1 电磁波谱范围表 光谱名称 X射线 远紫外光 紫外光 可见光 近红外光 中红外光 远红外光 微波 无线电波 波长范围 0.01－－10 nm 10－－200 nm 200－－ －－400 nm －－ 400－－ －－750 nm －－ 0.75－－2.5 ?m 2.5－－5.0 ?m 5.0－－ 1000 ?m 0.1－－100 cm 1－－1000 m 跃迁类型 K和L层电子 中层电子 价电子 价电子 分子振动 分子振动 分子转动和低位振动 分子转动 分析方法 X射线光谱法 真空紫外光谱法 紫外光度法 比色及可见光度法 近红外光谱法 中红外光谱法 远红外光谱法 微波光谱法 核磁共振光谱法 2 用紫外或可见光照射含有共轭结构的不饱和化合物 共轭结构的不饱和化合物时，分子中的 共轭结构的不饱和化合物 价电子会从基态向激发态跃迁，此时，电子吸收了某一波长的紫外（可 见）光。能级跃迁所需的能量与被吸收的紫外（可见）光波长之间的关 系，可按下式计算： E = hf = hc / λ 式中： h---普郎克常数 △E—电子能级的能量差（KJ·mol-1） f ， λ—被吸收光的频率和波长 电子跃迁主要有σ→σ* ，n→σ*, π→π*, n→π* 四种形式，它们跃迁所需能量大小为： σ→σ* ＞ n→σ* ≥ π→π* ＞ n→π* 其中σ→σ* 及n→σ* 的跃迁能量大，吸收的光 的
紫外可见光光度法实验报告
一、实验目的1. 熟悉紫外可见光光度计的原理和操作方法。
2. 掌握紫外可见光光度法测定苯甲酸含量的基本步骤。
3. 通过实验验证朗伯-比尔定律的正确性。
4. 学会利用标准曲线法对未知样品进行定量分析。
二、实验原理紫外可见光光度法是一种基于物质分子对紫外可见光的选择性吸收而建立的分析方法。
当物质分子吸收特定波长的光时，电子会发生跃迁，从而产生特征性的紫外可见光吸收光谱。
根据朗伯-比尔定律，在一定条件下，吸光度A与溶液浓度c和光程l成正比，即A = εlc，其中ε为摩尔吸光系数。
苯甲酸具有特定的紫外可见光吸收光谱，其最大吸收峰位于225nm处。
通过测定苯甲酸溶液的吸光度，可计算出其浓度，从而对未知样品进行定量分析。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：紫外可见光光度计、石英比色皿、移液管、容量瓶、电子天平、玻璃棒等。
2. 试剂：苯甲酸标准品、无水乙醇、蒸馏水、氯化钠等。
四、实验步骤1. 标准溶液的配制：准确称取苯甲酸标准品，用无水乙醇溶解并定容至一定体积，配制成一系列浓度的标准溶液。
2. 吸收光谱的绘制：将标准溶液分别置于石英比色皿中，在225nm处测定其吸光度，绘制吸光度-浓度曲线。
3. 未知样品的测定：准确称取一定量的未知样品，用无水乙醇溶解并定容至一定体积，在225nm处测定其吸光度。
4. 标准曲线的绘制：以吸光度为纵坐标，浓度（mg/L）为横坐标，绘制标准曲线。
5. 未知样品的定量分析：根据未知样品的吸光度，在标准曲线上查找相应的浓度值，即为未知样品中苯甲酸的浓度。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制：根据实验数据，绘制标准曲线，如图所示。
（此处插入标准曲线图）2. 未知样品的测定：根据实验数据，未知样品的吸光度为0.567，在标准曲线上查找，对应的浓度为1.23mg/L。
3. 结果分析：本实验采用紫外可见光光度法测定苯甲酸含量，通过绘制标准曲线和定量分析，成功计算出未知样品中苯甲酸的浓度为1.23mg/L。
实验一-紫外分光光度法测定苯甲酸
实验一紫外分光光度法测定苯甲酸一、实验目的学习、了解紫外分光光度法原理了解紫外分光光度计的结构和使用方法二、实验原理当辐射能（光）通过吸光物质时，物质的分子对辐射能选择性的吸收而得到的光谱称为分子吸收光谱。
分子吸收光谱的产生与物质的分子结构、物质所在状态、溶剂和溶液的PH等因素有关。
分子吸收光谱的强度与吸光物质的浓度有关。
表示物质对光的吸收程度，通常采用“吸光度”这一概念来量度。
根据朗伯－比尔定律，在一定的条件下，吸光物质的吸光度A 与该物质的浓度C和液层厚度成正比。
即A＝ LC因此，只要选择一定的波长测定溶液的吸光度，即可求出该溶液浓度，这就是紫外－可见分光光度计的基本原理。
在碱性条件下，苯甲酸形成苯甲酸盐，对紫外光有选择性吸收，其吸收光谱的最大吸收波长为225nm。
因此，采用紫外分光光度计测定苯甲酸在225nm处的吸收度就能进行定量分析。
三、仪器与主要试剂TU-1810紫外可见分光光度计1cm石英比色皿0.1M氢氧化钠溶液苯甲酸(AR)四、实验步骤1、苯甲酸标准溶液的制备称取苯甲酸(105℃烘干)100mg,用0.1M氢氧化钠溶液100ml 溶解后,转入1000ml容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度.此溶液1ml含0.1mg苯甲酸.2、制作苯甲酸吸收曲线,选择最大吸收波长①移取苯甲酸标准溶液4.00ml于50ml容量瓶中,用0.01M氢氧化钠溶液定容,摇匀,此溶液1ml含苯甲酸8ug.以氘灯为光源,用0.01M氢氧化钠溶液作为参比,改变测量波长(从210-240nm)测量8ug/ml苯甲酸的吸光度.②以波长为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制苯甲酸的紫外吸收曲线, 并找出最大的吸收波长(是否是225nm).3﹑样品的测定①取10.00ml苯甲酸样品,放入50ml容量瓶中,用0.01M氢氧化钠溶液定容,摇匀.②在上述曲线中所找到的最大吸收波长作为入射光波长,以0.01M 氢氧化钠溶液作为参比,在上述相同条件下测出苯甲酸标准溶液(8ug/ml苯甲酸)和稀释好的样品的吸光度,分别记录.五、分析结果计算计算样品液中苯甲酸的浓度C样/C标=A样/A标六、思考题1、比较TU-1810与722S型分光光度计机构有何异同点?2、本实验为什么要使用石英比色皿?3、使用紫外光源(氘灯)应注意些什么?THANKS !!!致力为企业和个人提供合同协议，策划案计划书，学习课件等等打造全网一站式需求欢迎您的下载，资料仅供参考。
紫外分光光度法测定饮料中的苯甲酸
实验三紫外分光光度法测定饮料中的防腐剂—苯甲酸1 实验试剂与仪器1.1 试剂苯甲酸（AR），雪碧汽水1.2 仪器日立UV-3010紫外-可见光谱仪，1cm石英比色皿2 实验原理与方法为了防止食品在储存、运输过程中发生腐败、变质，常在食品中添加少量防腐剂。
防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定，苯甲酸及其钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一。
我国规定了苯甲酸（盐）在碳酸饮料中最大使用量为0.2g/kg。
苯甲酸具有芳香结构，在波长225nm和272nm处有强吸收由于食品中苯甲酸用量很少，同时食品中其它成分也可能产生干扰，因此一般需要预先将苯甲酸与其它成分分离。
从食品中分离防腐剂常用的方法有蒸馏法和溶剂萃取法等。
本实验测定雪碧中苯甲酸，含有人工合成色素、甜味剂等，但一般在紫外区无吸收，故不干扰测定，样品不用处理，苯甲酸（钠）在225nm处有最大吸收，可在225nm波长处测定标准溶液及样品溶液的吸光度，绘制标准曲线法，可求出样品中苯甲酸的含量。
3 实验步骤3.1 苯甲酸标准储备液配制称取0.1000g苯甲酸于100mL容量瓶中，加适量蒸馏水定容，配制成1mg/mL溶液，吸取此液5mL于50mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，每毫升溶液相当于苯甲酸100ug。
3.2 标准曲线绘制取苯甲酸标准储备液0.00、1.00、2.00、4.00、6.00mL，分别置于50mL容量瓶中，用蒸馏水溶液稀释至刻度。
以水为对照液，测定其中5号标准溶液的紫外可见吸收光谱（测定波长范围为200~350nm），找出λmax ，然后在λmax处测定五个标准溶液的吸光度A。
3.3 样品处理和测定雪碧饮料除二氧化碳后，准确移取2.5mL于100mL容量瓶中，用蒸馏水定容，在λmax 处测定吸光度。
4 实验结果测得苯甲酸在227nm波长处有最大吸光值表1 标准液吸光度测定标准液（μg/ml） 0 2 4 8 12吸光度 0.000 0.139 0.283 0.683 0.887图1 苯甲酸标准溶液标准曲线测得雪碧样品的苯甲酸吸光度为0.357=4.612μg/ml从曲线上找出相应的苯甲酸浓度Cx: 样品定容后体积为100mlV1V: 所取样品体积为 25ml2因为雪碧的密度约等于1kg/m3,故4.612μg/ml≈4.612μg/g=4.612mg/kg根据中华人民共和国国家标准《食品添加剂使用卫生标准一》对汽水类食品中苯甲酸的最大使用量做了规定：苯甲酸<=0.2g/Kg，本实验使用的雪碧样品苯甲酸浓度4.612mg/Kg<0.2g/Kg,即低于国家标准，符合国家标准。
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本文旨在介绍苯甲酸的测定实验，首先介绍实验的原理，然后对实验的步骤进行详细的介绍，最后总结实验结果。
一、苯甲酸的测定实验原理
苯甲酸是一种重要的有机化合物，它可以在溶液中通过紫外分光光度法来测定。
在实验中，我们使用紫外分光光度计，将比较样和测定样放入比较室和测定室，分别测定其紫外吸收率，然后通过测定的结果来计算样品中苯甲酸的浓度。
二、苯甲酸的测定实验步骤
1.准备实验仪器：首先准备好紫外分光光度计，并且准备好苯甲酸的比较样和测定样，比
较样中的浓度应该比测定样低；
2.稀释测定样：将测定样稀释至比较样浓度相当，以便于比较；
3.测定紫外吸收率：将比较样和测定样分别放入比较室和测定室，在紫外分光光度计上测
定其紫外吸收率；
4.计算苯甲酸浓度：根据测得的紫外吸收率，计算样品中苯甲酸的浓度。
三、实验结果
通过苯甲酸的测定实验，可以准确的测定出样品中的苯甲酸的浓度，从而更好的掌握苯甲
酸的特性。
正如古人所言：“知己知彼，百战不殆”，只有通过测定实验，才能更好的掌握
苯甲酸的性质，从而有效的应用苯甲酸。