光度测定法

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动力学分光光度法的基本原理及测定方法

动力学分光光度法的基本原理及测定方法
动力学分光光度法是利用反应速率与反应物，产物，催化剂浓度间的定量关系，通过测量吸光度对被测组分定量的一种方法。

下面测定反应体系中催化浓度为例，介绍动力学分光光度法的基本原理及测定方法。

设一个在催化剂（F）的作用下进行的显色反应：
若D为有色化合物，则D的生成速率（显色反应速率）可表示为：
在反应进行的初期，A,B的浓度较大，反应小号的A和B可忽略不计，则可视为常数：
由CF变化也很小，可视为常数，上式积分得：
将上式代入朗伯比尔定率，有：
此式即为动力学分光光度法的基本关系式。

测定催化剂（F）的方法通常有固定时间法，固定浓度法和斜率法三种，固定时间发是让反应进行一固定时间后终止，然后测量反应体系的吸光度（A）:
不同的催化剂浓度(cF)测得相应反应体系的A值，做出校准曲线，然后由加入试样的反应体系的A值求出试样中F的浓度。

固定浓度法是测量产物(D)达到一定浓度所需的时间，此时式中的CD为常数，则：
同样地可以作出校准曲线，由试样体系的t值求出催化剂（F）的含量。

斜率法是根据吸收光度(A)随反应时间的变化速率来测定CFO根据关系在不同的CD下测得A-t曲线，分别求出其斜率值。

作出KCF-CF校准曲线。

斜率法的校准曲线由更多的实验数据获得，因而其准确度较高。

动力学分光度法具有灵敏度高，选择性好，应用范围较广等等特点，主要缺点是影响因素多，不宜严格控制，测定的误差较大。

常用紫外分光光度法测定蛋白质含量

6种方法测定蛋白质含量一、微量凯氏（kjeldahl）定氮法样品与浓硫酸共热。

含氮有机物即分解产生氨（消化），氨又与硫酸作用，变成硫酸氨。

经强碱碱化使之分解放出氨，借蒸汽将氨蒸至酸液中，根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。

若以甘氨酸为例，其反应式如下：nh2ch2cooh+3h2so4——2co2+3so2+4h2o+nh3 (1)2nh3+h2so4——(nh4)2so4 (2)(nh4)2so4+2naoh——2h2o+na2so4+2nh3 (3)反应（1）、(2)在凯氏瓶内完成，反应（3）在凯氏蒸馏装置中进行。

为了加速消化，可以加入cuso4作催化剂，k2so4以提高溶液的沸点。

收集氨可用硼酸溶液，滴定则用强酸。

实验和计算方法这里从略。

计算所得结果为样品总氮量，如欲求得样品中蛋白含量，应将总氮量减去非蛋白氮即得。

如欲进一步求得样品中蛋白质的含量，即用样品中蛋白氮乘以6．25即得。

二、双缩脲法（biuret法）（一）实验原理双缩脲（nh3conhconh3）是两个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。

在强碱性溶液中，双缩脲与cuso4形成紫色络合物，称为双缩脲反应。

凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键，或能过一个中间碳原子相连的肽键，这类化合物都有双缩脲反应。

紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。

测定范围为1-10mg蛋白质。

干扰这一测定的物质主要有：硫酸铵、tris缓冲液和某些氨基酸等。

此法的优点是较快速，不同的蛋白质产生颜色的深浅相近，以及干扰物质少。

主要的缺点是灵敏度差。

因此双缩脲法常用于需要快速，但并不需要十分精确的蛋白质测定。

（二）试剂与器材1. 试剂：（1）标准蛋白质溶液：用标准的结晶牛血清清蛋白（bsa）或标准酪蛋白，配制成10mg/ml的标准蛋白溶液，可用bsa浓度1mg/ml的a280为0.66来校正其纯度。

紫外分光光度法测定盐酸伊托必利分散片的含量

【ｅｏｄ】ｈｐｉ；Ｖｓｃ。ｈｍｔ；ｅｒｉｔｎｏｃｎｎＫｙｒｓｗｏｒｅｕｅｔｐｔｅｙＤｔｍｎｉｔｔｄｐｒｏｒｅａｏｆｏｅｓ
盐酸伊托必利（ｏｒｅｈｄｏｈｏｄ，是新型增强消ｈｐｉｙｒｃｌｉｅＩｄｒＨ）
４１０Ｃｈｎ３００，ｉａ
【ｂｔｃ】０ｊｃｖＴｓｂｓＵｔｖｌｐｃｏｈｍｔｅｏｒｈｅｒｉｔｎｏＩ－Ａｓａｔｒｂｅｔｅｏｅａｌｈｌａｏｔｅｔｐｔｅｙｍｔｄｆｅｔｍｎｉｏｉｔｉｒｉｅｓｒｏｒｈｏｔｄｅａｏｆｔ
ｐｄｙｒｃｌｒｅｄｓｅｓｎｔｌｔ．ｅｈｄＴｅｃｎｅｔｏｏｒｄｒｅｅｍｉｅｔ５ｍｉａｅｉｒｅｈｄｏｈｏｉｉｐｒｉｅｓＭｔｏｓｄｏａｂｈｏｔｎｓｆｔｐｉｅｗｅｅｄｔｒｎｄａ８ｎｗｔｗｔｒＩ２ｈａｈｌｎｏｔｌｂｌａｉｌｔｐｃｒｐｏｏｔ．ｓｌＴｅｃｌｒｔｎｃｒｅｏｔｐｉｅｗａｎａｈｎｓｔｅｂａｋｃｎｒｙｕｔｖｏｅｅｔｏｈｔｍｅｒＲｅｕｔｏｒｓｙｓｈａｉａｉｕｖｆＩｒｄｓｌｅｒｅｂｏｏｉｗ
ｍ浓度范围内呈良好线性关系。ｌ
Ｉｂ，ｉ
制剂的双重作用．，２无锥体外系不良反应。目前国内外盐Ｊ酸伊托必利的主要剂型有片剂、囊、粒剂、胶颗分散片、释缓片，但其分散片的研究还少见报道。关于盐酸伊托必利的含量测定方法，国内一般采用ＨＬＰＣ法

光度测定法检查技术

适用范围广
光度测定法可以应用于多种不同类型的化合物，包括有机物、无机物和金属离子等。
操作简便
相对于其他分析方法，光度测定法操作相对简单，不需要过于复杂的样品预处理。
仪器普及
光度测定法使用的仪器较为普及，实验室中常见且易于维护。
缺点
干扰因素多
定量精度有限
光度测定法可能会受到多种因素的干扰，如共存离子的影响、光谱重叠等，导致测定结果不准确。
03
光度测定法的实验技术
样品制备
01
02
03
样品选择与采集
根据实验目的选择具有代表性的样品，确保样品新鲜、无污染，并按照实验要求进行采集。
样品处理
对采集的样品进行预处理，如破源自、研磨、溶解等，以便于后续的光度测定。
标准化样品
制备已知浓度的标准样品，用于校准光度计和验证实验的准确性。
详细描述
光度测定法在药物分析中广泛应用于各种药物的含量测定，如抗生素、维生素、激素等。通过特定的显色反应或荧光反应，能够快速准确地测定出药物中的有效成分或杂质含量，为药物的质量控制和临床用药提供了可靠的依据。同时，光度测定法还具有操作简
便、重现性好的优点，有利于提高药物分析的效率和准确性。
THANKS
光度测定法可以用于药物分析，研究药物的代谢和药效机制。
光度测定法可以用于检测生物分子间的相互作用，研究生物分子的结构和功能。
光度测定法可以用于临床诊断，如检测生物标记物、病毒、细菌等，为疾病的预防和治疗提供依据。
06
光度测定法的实际应用案例
食品中重金属含量的测定
总结词
光度测定法在食品中重金属含量测定中具有高灵敏度和高准确度的特点，是食品安全检测的重要手段。

紫外-可见分光光度法测定

紫外-可见分光光度法测定1. 引言1.1 引言紫外-可见分光光度法是一种常用的分析化学方法，通常用于测定物质的浓度或测定物质的吸光度。

该方法利用紫外-可见光谱仪测量样品对紫外和可见光的吸收情况，从而推断样品中所含物质的浓度或结构。

在化学分析实验中，紫外-可见分光光度法具有灵敏度高、准确性高和简便易行的优点，因此被广泛应用于药物分析、环境监测、食品检测等领域。

本实验旨在通过该方法测定样品中目标物质的浓度，并探讨影响测定结果的因素。

通过对仪器原理、操作步骤、实验结果、数据分析和影响因素的详细讨论，我们将深入了解紫外-可见分光光度法的原理和应用，并为今后在相关领域的研究提供参考和借鉴。

希望本实验能够为我们提供更多关于分光光度法的实际操作经验，提升我们的实验技能和分析能力。

1.2 背景介绍紫外-可见分光光度法是一种广泛应用于化学分析领域的分析方法，通过测定物质在紫外-可见光区域的吸收特性，从而确定物质的浓度或者进行定性分析。

紫外-可见分光光度法具有操作简单、灵敏度高、选择性强的特点，被广泛应用于环境监测、食品安全检测、药品质量控制等领域。

随着科学技术的不断发展，紫外-可见分光光度法在实验室分析中扮演着越来越重要的角色。

通过测定物质在特定波长范围内的光吸收情况，我们可以获得关于物质性质的重要信息，如浓度、溶解度、稳定性等。

掌握紫外-可见分光光度法的原理和操作方法，对于提高实验准确性和效率具有重要意义。

在本文中，我们将介绍紫外-可见分光光度法的仪器原理、操作步骤、实验结果、数据分析和影响因素，希望能够为读者提供一份系统全面的紫外-可见分光光度法测定指南。

通过总结和展望，我们也希望能够进一步探讨该方法在化学分析领域的应用前景。

1.3 研究目的紫外-可见分光光度法是一种常用的分析化学技术，可以用于测定物质的吸光度，从而推断物质的浓度。

本实验的研究目的主要分为以下几点：1. 研究紫外-可见分光光度法在测定物质浓度方面的应用。

红外分光光度法测定操作规程

红外分光光度法测定操作规程目的：为了规范红外分光光度法测定操作，保证检验结果的准确性，制定本规程。

范围：适用于物质的定性鉴别、物相分析和定量测定，并用于研究分子间和分子内部结构的相互作用。

依据：《中国药典》2020年版四部40页0402“红外分光光度法”《中国药典》2020年版四部375页4002“包装材料红外光谱测定法”《包装材料红外光谱测定法》YBB00262004-2015《中国药典分析检测技术指南》《药品红外图谱集》责任：检验员对本规程的实施负责内容：1. 简述：红外分光光度法是在4000～400cm-1波数范围内测定物质的吸收光谱，用于化合物的鉴别、检查或含量测定的方法。

除部分光学异构体及长链烷烃同系物外，几乎没有两个化合物具有相同的红外光谱，据此可以对化合物进行定性和结构分析；化合物对红外辐射的吸收程度与其浓度的关系符合朗伯-比尔定律，是红外分光光度法定量分析的依据。

2.仪器及其校正：可使用傅里叶变换红外光谱仪或色散型红外分光光度计。

用聚苯乙烯薄膜（厚度约为0.04mm)校正仪器,绘制其光谱图,用 3027cm—1,2851 cm—1，1601 cm—1，1028 cm—1，907 cm—11处的吸收峰对仪器的波数进行校正。

傅里叶变换红外光谱仪在 3000 cm—11附近的波数误差应不大于土5 cm—1，在1000cm—1附近的波数误差应不大于±lcm—1。

用聚苯乙烯薄膜校正时，仪器的分辨率要求在 3110〜 2850 cm—1范围内应能清晰地分辨出7个峰，峰2851 cm—1与谷 2870cm—1之间的分辨深度不小于18% 透光率，峰 1583cm—1与谷1589cm—1之间的分辨深度不小于12%透光率。

仪器的标称分辨率，除另有规定外，应不低于2cm—1。

3.供试品的制备及测定：通常采用压片法、糊法、膜法、溶液法和气体吸收法等进行测定。

对于吸收特别强烈或不透明表面上的覆盖物等供试品，可采用如衰减全反射、漫反射和发射等红外光谱方法。

紫外可见分光光度法测定总黄酮含量的方法学考察要点

紫外可见分光光度法测定总黄酮含量的方法学考察要点一、本文概述紫外可见分光光度法是一种基于物质对紫外和可见光的吸收特性进行定量分析的方法。

在生物化学和药物分析中，这种方法被广泛应用于测定各类化合物的含量，其中包括黄酮类化合物。

黄酮类化合物，也称为黄酮或黄碱素，是一类具有广泛生物活性的天然产物，它们广泛存在于植物中，并具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。

因此，对黄酮类化合物进行准确、快速的定量分析具有重要意义。

本文旨在探讨紫外可见分光光度法在测定总黄酮含量中的应用，并对其方法学进行考察。

我们将详细介绍紫外可见分光光度法的基本原理、实验操作步骤，以及影响测定结果的各种因素。

我们还将讨论该方法的优点和局限性，以及在实际应用中可能遇到的问题和解决方案。

通过对这些内容的全面探讨，我们希望能够为相关领域的研究人员和技术人员提供有益的参考和指导，推动紫外可见分光光度法在黄酮类化合物分析中的应用和发展。

二、紫外可见分光光度法的基本原理紫外可见分光光度法（UV-Vis spectrophotometry）是一种基于物质对紫外和可见光区域内特定波长光的吸收特性进行定量分析的方法。

该方法基于朗伯-比尔定律（Lambert-Beer Law），即溶液对光的吸收与溶液的浓度成正比，与光通过溶液的路径长度也成正比。

在紫外可见分光光度法中，当一束单色光通过被测溶液时，部分光能会被溶液中的吸光物质吸收，导致光强减弱。

吸光度（A）与吸光物质的浓度（c）和光程长度（l）之间的关系可以表示为 A = εlc，其中ε为摩尔吸光系数，它表示单位浓度、单位光程长度下的吸光度。

对于总黄酮含量的测定，黄酮类化合物在紫外可见光区域内有特定的吸收峰，通过测量这些吸收峰处的吸光度，并结合标准品的工作曲线，可以实现对总黄酮含量的定量分析。

紫外可见分光光度法还具有操作简便、灵敏度高、重现性好等优点，因此在黄酮类化合物含量测定中得到了广泛应用。

需要注意的是，紫外可见分光光度法只能测定那些具有吸光特性的物质，且受到溶液的颜色、浊度以及其它共存物质的影响。

光度测定法回归曲线

光度测定法回归曲线
光度测定法是一种常用的分析化学方法，用于测定物质的浓度或含量。

在光度测定法中，通常会绘制回归曲线来建立测定物质浓度与光吸收之间的关系。

回归曲线是通过一系列标准溶液浓度与其对应的光吸收值所绘制的曲线，用于后续测定待测样品浓度。

首先，建立回归曲线的步骤通常包括准备一系列标准溶液，浓度应覆盖待测物质可能存在的浓度范围。

然后，使用光度计测定每个标准溶液的光吸收值。

接着，将浓度与对应的光吸收值作图，通常是以浓度为自变量，光吸收值为因变量。

常见的回归曲线拟合方法包括线性回归、多项式回归等，选择合适的拟合方法能更准确地描述浓度与光吸收之间的关系。

回归曲线的斜率、截距以及相关系数等参数提供了对测定方法准确性和灵敏度的评估。

通过分析回归曲线的斜率，可以了解单位浓度变化对光吸收值的影响，而相关系数则可以评估回归曲线对数据的拟合程度。

在实际应用中，建立良好的回归曲线对准确测定待测样品的浓度至关重要。

因此，在进行光度测定法时，需要严格按照标准操作
程序进行，确保测定结果的准确性和可靠性。

同时，也需要注意选
择合适的光度计和光吸收峰，以及校正可能存在的干扰，以确保回
归曲线的准确性和可靠性。

总的来说，回归曲线在光度测定法中扮演着重要的角色，它是
建立浓度与光吸收之间关系的重要工具，对于准确测定物质浓度具
有重要意义。

建立合适的回归曲线需要严格的实验操作和数据处理，以确保测定结果的准确性和可靠性。

原子吸收分光光度法测定法罗培南钠中的钯

61CH INA FO REIGN MEDIC AL TRE ATMENT 中外医疗临床医学2008年2月21日EMEA/CHMP/SWP颁布了金属残留量限度的指导文件,并于2008年9月1日在欧盟实施,文件认为,在原辅料合成中用到的金属催化剂或金属试剂可能在原料药中残留并带入制剂中,这些残留金属通常无治疗作用,基于安全性需要进行严格控制。

EMA把金属催化剂按风险级别分类管理[1],钯作为第1类金属1A亚组,有显著安全担忧,规定注射用原料药中不得过1μg ·g -1。

本公司生产的法罗培南钠在合成工艺中使用钯/炭催化剂,如用ChP重金属检查法[2],测定的是总重金属,无法单控钯残留量,需采用专属性更强的原子吸收分光光度法[3]。

为此,对钯残留测定方法进行研究并制定标准,同时为其它种类原辅料中的钯残留测定提供技术参照。

1 仪器与试药岛津AA-6800型原子吸收分光光度计,ASC-6100型自动进样器。

钯标准液(上海市计量测试技术研究院,0.100g ·L -1,批号:1004)法罗培南钠原料药(正大天晴,批号090701、090702、090703)2 原子吸收分光光度法2.1 光谱参数和原子化条件钯空心阴极灯,检测波长:247.6nm;背景校正:D2灯;狭缝宽度:0.5nm;石墨炉原子化器;热解石墨管;高纯氩气,采用石墨炉升温程序。

2.2 专用溶剂配制1%盐酸并含0.2%ED TA 的溶液,即得。

2.3 供试品溶液取样品50mg,精密称定,置10mL量瓶中,溶解并稀释至刻度,摇匀,即得(含法罗培南钠5mg ·mL -1)。

2.4 标准品溶液精密量取钯标准液(0.100g ·L -1)1.0mL,置200mL量瓶中,稀释至刻度,摇匀,作为对照品储备溶液(500ng ·mL -1)。

精密量取标准品储备溶液适量,再稀释制成规定浓度的溶液,作为标准品溶液。

常用紫外分光光度法测定蛋白质含量

6种方法测定蛋白质含量一、微量凯氏（kjeldahl）定氮法样品与浓硫酸共热。

含氮有机物即分解产生氨（消化），氨又与硫酸作用，变成硫酸氨。

经强碱碱化使之分解放出氨，借蒸汽将氨蒸至酸液中，根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。

为了加速消化，可以加入cuso4作催化剂，k2so4以提高溶液的沸点。

收集氨可用硼酸溶液，滴定则用强酸。

实验和计算方法这里从略。

计算所得结果为样品总氮量，如欲求得样品中蛋白含量，应将总氮量减去非蛋白氮即得。

如欲进一步求得样品中蛋白质的含量，即用样品中蛋白氮乘以6．25即得。

二、双缩脲法（biuret法）（一）实验原理双缩脲（nh3conhconh3）是两个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。

在强碱性溶液中，双缩脲与cuso4形成紫色络合物，称为双缩脲反应。

凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键，或能过一个中间碳原子相连的肽键，这类化合物都有双缩脲反应。

紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。

测定范围为1-10mg蛋白质。

干扰这一测定的物质主要有：硫酸铵、tris缓冲液和某些氨基酸等。

此法的优点是较快速，不同的蛋白质产生颜色的深浅相近，以及干扰物质少。

主要的缺点是灵敏度差。

因此双缩脲法常用于需要快速，但并不需要十分精确的蛋白质测定。

hj670-2013分光光度法测定

hj670-2013分光光度法测定
HJ670-2013是中国环境监测标准中关于分光光度法测定的一个指南。

该标准主要适用于水和废水中某些特定物质的测定，如溶解性有机物、氨氮、总磷等。

分光光度法是一种常用的分析方法，基于物质对特定波长的光的吸收特性。

测定过程一般包括以下步骤：
1.准备样品：根据具体要测定的物质，按照标准方法准备样品。

可能需要进行预处理、稀释或提取等步骤，以获得适合测定的样品。

2.标准曲线制备：准备一系列已知浓度的标准溶液，覆盖所需测定范围。

根据标准物质对特定波长光的吸光度关系，测量各标准溶液的吸光度，绘制标准曲线。

3.样品测量：使用分光光度计，设置所需波长，根据标准曲线，测量样品的吸光度。

4.数据处理：根据标准曲线和样品吸光度的测量值，通过插值或计算，计算出样品中目标物质的浓度。

1/ 1。

紫外-可见分光光度法

紫外-可见分光光度法1 简述紫外-可见分光光度法是在190-800nm波长范围内测定物质的吸光度，用于鉴别、杂质检查和含量测定的方法。

定量分析通常选择物质的最大吸收波长处测出吸光度，然后用对照品或吸收系数求算出被测物质的含量，多用于制剂的含量测定；对已知物质定性可用吸收峰波长或吸光度比值作为鉴别方法；若该物质本身在紫外光区无吸收，而其杂质在紫外光区有相当强度的吸收，或杂质的吸收峰处该物质无吸收，则可用本法作杂质检查。

物质对紫外辐射的吸收是由于分子中原子的外层电子跃迁所产生，因此，紫外吸收主要决定于分子的电子结构，故紫外光谱又称电子光谱。

有机化合物分子结构中如含有共轭体系、芳香环等发色基团，均可在紫外区（200〜400nm）或可见光区（400〜850nm）产生吸收。

通常使用的紫外-可见分光光度计的工作波长范围为190~900nm。

紫外吸收光谱为物质对紫外区辐射的能量吸收图。

朗伯-比尔（Lambert-Beer）定律为光的吸收定律，它是紫外-可见分光光度法定量分析的依据，其数学表达式为:A=log -1=ECL式中A为吸光度；T为透光率；E为吸收系数；C为溶液浓度；L为光路长度。

如溶液的浓度（C）为1%（g/ml），光路长度（L）为lcm，相应的吸光度即为吸收系数以E1%表示。

如溶液的浓度（C）为摩尔浓度（mol/L），光路长度为lcm 1cm时，则相应有吸收系数为摩尔吸收系数，以表示。

2仪器紫外-可见分光光度计主要由光源、单色器、样品室、检测器、记录仪、显示系统和数据处理系统等部分组成。

为了满足紫外-可见光区全波长范围的测定，仪器备有二种光源，即氘灯和碘钨灯，前者用于紫外区，后者用于可见光区。

单色器通常由进光狭缝、出光狭缝、平行光装置、色散元件，聚焦透镜或反射镜等组成。

色散元件有棱镜和光栅二种，棱镜多用天然石英或熔融硅石制成，对200〜400nm波长光的色散能力很强，对600nm以上波长的光色散能力较差，棱镜色散所得的光谱为非匀排光谱。

水中色度的分光光度测定法

ｉｒｔａｕａｉｈｅｌｗａｄｓｎｏａｓｕｃｌｒｐａｉａｅｃｍｂｎｄｗｔｏａｔｃｌｒｄｌｏｎｔｒｌｇｔｙｌａｌｏｗｓｍａｅｕｉｇｐｔｓｉｍｈｏｏｌｔｔｏｉｅｉｃｂｌｈｏｅ；ｔｅａｓｒｅｃｓｄｔｒｉｅｎｈｉｈｏｂｎｙｗａｅｅｎｄｂｍ
３ｃｍ比色杯，以纯水作参比各进行６次测定，吸光度值的相对标
准偏差为０５％～．０，．５３８％平均相对标准偏差为１４，．％方法精密度较好。见表２。
水为参比测定吸光度值，绘制标准曲线。回归方程
表１铂钴标准溶液稳定性试验（Ａ值）
标）．
［］张宏陶．２水质分析大全．庆：学技术文献出版社重庆分社，重科
１８６．９９：３
［］魏复盛，３寇洪茹，洪水皆，水和废水监测分析方法．等．３版．北京：中国环境科学出版社，９８９．１９：２［］张世贤，４王兆英，鸿宵．汤水分析化学．京：北中国建筑工业出版社，
摘要目的建立一种同时测定日落黄和胭脂红的方法。方法
根据朗伯一比耳定律，ｎ个组分即可在ｎ个适当波长进对
对水中日落黄和胭脂红的含量进行误差分析，分该方法操作方便，本低廉，成适于大部分卫生机
行ｎ次吸光度测定，然后解ｎ元联立方程式求出各个组分的分量。结果光度计法同时测定饮料中的１３落黄和胭脂红的含量是相当精确的。结论

光度法测定吸蓝量方法(代替晕环法)

光度法测定吸蓝量方法（代替晕环法）试验原理：蒙脱石经磷酸缓冲溶液溶胀后，加入过量的标准浓度的亚甲基蓝，吸附一段时间后，离心分离，用分光光度计测定未吸附的亚甲基蓝的量，通过加入量减去未吸附的量计算吸蓝量。

操作步骤：（1）0.2 亚甲基蓝溶液的配制与标定配制质量分数为0.2%的亚甲基蓝溶液：取在93℃±2℃烘干4h亚甲基蓝2.00g用水溶解转移至1000ml棕色容量瓶内，加水稀释至刻度，摇匀，放置24h。

精密量取本液50ml,置水浴上加热75℃，精密加重铬酸钾（0.01667mol/L)25ml，摇匀，在75℃保温20分钟，放冷，在垂熔玻璃漏斗滤过，烧杯与漏斗用水洗涤4次，每次2.5ml，滤过，合并滤液和洗液，移置具塞锥形瓶，加水250ml，硫酸溶液（1→5）25ml与碘化钾试液10ml，摇匀，用硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L)滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml，继续滴定至蓝色消失。

并将滴定的结果用空白试验校正。

每1ml重络酸钾（0.01667mol/L)相当于10.66mg的C16H18ClN3S;（2）pH=6.8缓冲溶液的配制（取代1%焦磷酸钠溶液）配制磷酸盐缓冲液（pH6.8)：取0.1mol/L盐酸溶液和0.2mol/L磷酸钠溶液按3:1混合均匀，必要时用2mol/L盐酸溶液或2mol/L氢氧化钠调节pH 至6.8±0.05；（3）标准曲线的绘制量取标定后的的亚甲基蓝标准溶液2 mL置于100 mL容量瓶中，加磷酸缓冲溶液（pH=6.8）定容，摇匀，分别精密量取0.5、、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、5.0、6.0置于50 mL容量瓶中用磷酸缓冲溶液（pH=6.8）定容，在665nm波长测吸光率。

绘制工作曲线。

得回归方程：浓度ug/mL 0.8 1.6 2.4 3.2 4.0吸光度A 0.152 0.299 0.414 5,511 0.648吸光度A 浓度（ug/mL ）A=0.15X+0.044（4）试验操作方法（用分光光度法代替晕环法）测定：称取0.2000g 烘干的蒙脱石于250mL 碘量瓶中，精密加入10mL 缓冲溶液，摇匀（放置1h ），加50mL0.2 %亚甲基蓝溶液，于37℃水浴中震荡1小时（或磁力搅拌）。

分光光度法测定步骤

分光光度法测定步骤嘿，朋友们！今天咱来唠唠分光光度法测定的那些事儿。

分光光度法啊，就像是一个神奇的魔法盒子，能帮我们解开好多物质的秘密呢！咱先得准备好各种家伙什儿呀，比如果仪器设备啦，什么分光光度计、比色皿之类的，这可都是咱的得力助手。

就好像战士上战场得有趁手的兵器一样，咱搞分光光度法测定也得有这些好东西才行。

然后呢，就得制备标准溶液啦。

这就好比是给魔法盒子设定一个标准，让它知道啥样的才是对的。

要精确地称量溶质，再用合适的溶剂溶解，可不能马虎哟！不然这个魔法盒子可就不灵啦。

接下来，就是绘制标准曲线啦。

这就像是给我们的测定之路铺上一条轨道，让我们能沿着它稳稳地前进。

把不同浓度的标准溶液放进分光光度计里测一测吸光度，再把这些数据点连起来，嘿，一条漂亮的标准曲线就出来啦。

再之后呀，就是样品的处理啦。

这可不能瞎搞，得根据样品的特性来选择合适的方法，就像医生看病得对症下药一样。

把样品处理得妥妥当当的，才能让后面的测定更准确呀。

处理好样品，就该让它进入魔法盒子啦，也就是用分光光度计进行测定。

眼睛紧紧盯着那仪器，心里默默祈祷着一定要准呀！测出来吸光度，再对照着标准曲线，嘿嘿，样品中物质的含量不就出来啦。

你说这分光光度法神奇不神奇？就这么一步步操作下来，就能知道我们想知道的东西啦。

不过可别小瞧了这些步骤哦，每一步都得认真对待，不然结果可就不靠谱啦。

想象一下，如果在制备标准溶液的时候马马虎虎，那标准曲线还能准吗？如果样品处理得不好，那测定出来的结果能对吗？所以呀，每一个环节都得像对待宝贝一样小心翼翼。

分光光度法测定呀，就像是一场有趣的探险，我们带着好奇和认真，一步步去揭开物质的神秘面纱。

在这个过程中，我们得细心、耐心，还得有点小技巧。

只要我们认真去做，就一定能从这个魔法盒子里得到我们想要的答案。

反正我是觉得分光光度法测定特别有意思，特别有挑战性。

你们觉得呢？是不是也想来试试这个神奇的魔法盒子呀！。

3.紫外分光光度法测定苯酚

实验四紫外分光光度法测定苯酚1.目的要求⒈学会使用UV-2102PC型紫外可见分光光度计。

⒉掌握紫外光谱法定量分析方法与原理。

2．基本原理苯酚在220-380nm处具有特征吸收，因此其含量可用紫外分光光度计作测定，不需进行显色反应，方法简便，快速，且准确度高。

3. 仪器与试剂⒈仪器：UV-2102PC型紫外可见分光光度计； 10mL吸量管1只； 50mL容量瓶7个； 100mL容量瓶5个。

2.试剂：0.250g/L苯酚标准溶液准确称取25.0mg分析苯酚，溶于适量水中，全部转移至100mL 容量瓶中，用纯水稀释至刻度，摇匀。

4. 实验步骤⒈绘制吸收光谱图和选择测量波长用吸量管取4mL0.250g/L苯酚标准溶液于50ml容量瓶中，用纯水稀释至刻度，摇匀。

此溶液在UV-2102PC型紫外可见分光光度计上，用1cm石英液槽，以纯水为参比溶液，于波长220-380nm 范围内，分辨精度1nm，绘制吸收光谱图，并选择测量波长λmax.⒉绘制标准曲线取5只50mL容量瓶，由吸量管分别加入2.00、4.00、6.00、8.00、10.0mL0.250g/L苯酚标准溶液，以纯水稀释至刻度。

摇匀。

得一系列苯酚标准溶液。

用1cm石英液槽，以纯水为参比溶液，在选定波长处测上列各标准溶液的吸光度。

绘制标准曲线。

⒊试样溶液的测定用移液管取适量试样溶液于50mL容量瓶中,按上述步骤2配制溶液并测定吸光度。

平行测定二份。

（黑体字部分实验报告中请按自己实际操作撰写）5．数据处理⒈根据实验所苯酚吸收光谱曲线，运用理论知识根据吸收谱带的位置形状及吸收强度（摩尔吸光系数），对所做谱图进行解析，判断苯酚紫外光谱的吸收带与跃迁类型。

2绘制标准曲线，并由曲线求算试样溶液中苯酚量（mg/L）.6．问题讨论本实验测定时能否用玻璃液槽代替石英液槽盛放溶液，为什么？紫外光谱实验参考文献紫外及可见光谱包括有几个谱带系，不同的谱带系相当于不同电子能级的跃迁。

吸光光度测定法流程

吸光光度测定法流程
一。

吸光光度测定法，这可是个相当有用的法宝！它能帮咱在化学、生物等领域大展身手。

1.1 首先得准备好家伙什儿。

像光度计那是必不可少的，还有各种试剂、比色皿，都得精挑细选，保证质量杠杠的。

这就好比战士上战场，手里的武器得趁手。

1.2 样品处理也不能马虎。

得把样品弄干净、弄匀乎了，不能有杂质来捣乱，不然结果可就不准啦。

这就像做饭，食材处理不好，做出来的菜能好吃？
二。

准备工作就绪，接下来就是关键步骤啦。

2.1 选择合适的波长，这可太重要了。

就像找对象，得找对眼的，波长选对了，测定结果才能靠谱。

2.2 制作标准曲线，这可是个精细活。

把一系列已知浓度的标准溶液测一测，画出曲线，这就是咱的“参照系”。

2.3 然后就是测量样品啦。

把处理好的样品放进光度计里，读取数据。

这时候可得瞪大眼睛，别出错。

三。

3.1 数据处理也有讲究。

得把测得的数据好好分析分析，去除那些不靠谱的“捣蛋鬼”数据。

3.2 最后得出结果，大功告成！但也别高兴得太早，还得检查检查，看看结果合不合理。

要是不合理，就得回过头来找找问题出在哪儿。

吸光光度测定法就像一场精心策划的演出，每个环节都得严丝合缝，不能有半点差错。

只有这样，才能得出准确可靠的结果，为咱们的科学研究和实际应用提供有力的支持。

这可不是说着玩的，得下真功夫！。