可溶性还原糖的鉴定原理
还原糖测定的原理
还原糖测定的原理
还原糖是指具有还原性的糖类物质，如葡萄糖、果糖等。
在还原糖测定中，常用的试剂是费林试剂，它是一种含有铜离子的碱性溶液。
在还原糖的存在下，费林试剂会发生蓝色沉淀的反应，通过测定沉淀的数量来确定样品中还原糖的含量。
还原糖测定的原理可以简单概括为，还原糖与费林试剂发生化学反应，生成蓝色沉淀，通过测定沉淀的数量来确定还原糖的含量。
具体来说，还原糖测定的步骤如下：
首先，将待测样品与费林试剂混合，在碱性条件下进行加热反应。
在反应过程中，还原糖与费林试剂发生氧化还原反应，生成蓝色沉淀。
接着，通过一定的方法将生成的蓝色沉淀沉淀下来，并进行定量分析。
一般常用的方法是通过滤纸或离心等手段将沉淀分离出来，然后对沉淀进行定量测定。
最后，根据生成的蓝色沉淀的数量，结合标准曲线或计算公式，可以准确地计算出样品中还原糖的含量。
通过这样的步骤，就可以完成对样品中还原糖含量的测定。
还原糖测定的原理简单明了，通过与费林试剂的化学反应，生成的蓝色沉淀可以用来定量分析还原糖的含量。
这种方法操作简便，结果准确可靠，因此在食品加工、医学诊断等领域得到了广泛的应用。
总的来说，还原糖测定的原理是基于还原糖与费林试剂的化学反应，通过生成的蓝色沉淀来定量分析还原糖的含量。
这种方法简单易行，结果准确可靠，适用于多种样品的测定。
希望本文对大家了解还原糖测定的原理有所帮助。
高中生物___检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
注意事项：
（1）如果用鸡蛋清作为材料，则必须进行充分稀释，否则反应 后的产物会粘固在试管内壁上，使反应不彻底，且试管不易洗 刷干净。 （2）【双缩脲试剂】：A液：0.1g/mL NaOH，B液：0.01g/mL CuSO4。先加A液后加B液，且B不能过量，不需要加热。 （3）过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应，使溶液呈蓝色，而 掩盖生成的紫色。 （4）先加入A液2ml，摇匀；再加入B液3-4滴，摇匀。
四﹑实验结果 示例
思考与讨论：
（1）9%Nacl溶液的作用？ 保持空腔上皮细胞的正常形态。 （2） 8%盐酸的作用？ 杀死细胞，改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞； 使染色体中的DNA与蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。 （3）吡罗红甲基绿染色剂要现用现配。该实验不宜选用绿色 植物叶肉细胞（有颜色）和其他有颜色的细胞（如鸡血细胞） 作为实验材料，因其会干扰颜色观察。
R—CHO+2Cu(OH)2→R—COOH+Cu2O↓+2H2O
注意事项；1、甲液乙液等量混合，现用现配。 2、需水浴加热
还原糖的检测结果
斐林试剂与可溶性还原糖在水浴热的条件下，生成砖红色的 Cu2O沉淀。 -CHO+Cu(OH)2悬浊液 -COOH+Cu2O↓（砖红色）
二、脂肪的检测 （1）选材：经浸泡去种皮的花生种子。 （2）检测过程：
（4）染色
在载玻片上滴加两滴2滴用吡罗红，甲基绿染色剂，染 色5分钟 吸去多余的染色剂，盖上盖玻片
（5）观察：先低倍镜：选染色均匀，色泽浅的区域，移到视野中央 。后
高倍镜：观察细胞核和细胞质的染色情况。
0.9%生理盐水？
人口腔上皮细胞
取材
8%盐酸？
30℃水浴
高中生物必修一可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定-人教版
8、下面是一组探究生物体内主要有机物存在与否的鉴别实验，按表中数字顺序
（2）__用__滴__管__向__试__管__中__滴___加__2_—__3_滴__5_%__的__N_a_O__H_溶__液__，__振__荡__。___ （3）_用__滴__管__向__试__管__中__滴__加__2_—__3_滴__3_%__的__C__u_S_O_4_溶___液__，__振__荡__ （4）结果观察：_静__置__一__会__儿__后__，__观__察__到__红__紫__色__，__说__明__唾液中含有蛋白质
②A组发育正常，B组和C组不正常，但B组比C组发育状况指标好，差异显著。说明“人造蛋白”比缺乏 蛋白质对儿童正常发育更有害（注：其他的合理答案均可）
参考答案：
2． （2） ①选取年龄相当、体重相当、发育良好的大白鼠若干，平均分为三组，标记为A、 B、C。分别饲养 ②每天分别给A、B、C三组大白鼠饲喂等量的真正的纯牛奶、不含任何蛋白质的假 牛奶、含有“人造蛋白”的假牛奶
【实验一】 生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
【实验一】生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
【实验原理】
1、可溶性还原糖的鉴定原理 ： （1）生物组织中普遍存在的可溶性还原糖种类较多，常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖， 分子内都含有游离的具有还原性的半缩醛羟基，因此叫做还原性糖； （2）用斐林试剂只能检验生物组织中可溶性的还原糖的存在与否。斐林试剂由质量浓 度为0．1g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0．05g／mL的硫酸铜溶液配制而成，二 者混合后，立即生成淡蓝色的Cu（OH）2沉淀。Cu（OH）2与加入的葡萄糖在加热的 条件下，能够生成砖红色的Cu2O沉淀 （3）用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色—棕色—砖红 色（沉淀）。
【课外阅读】可溶性还原糖鉴定的几种方法
可溶性还原糖鉴定的几种方法生物组织中普遍存在着各种糖类，其中葡萄糖、果糖、麦芽糖等分子内含有醛基，醛基具有还原性，可与弱氧化剂反应。
因此凡是与醛基有特定颜色反应的化学试剂都可以用来鉴定可溶性还原糖的存在。
在化学上常用新制的氢氧化铜和银氨溶液来鉴定可溶性还原糖，在生物学上常用斐林试剂、班氏试剂、本尼迪特试剂来鉴定可溶性还原糖。
1．利用银氨溶液（也叫托伦试剂）：银氨溶液是在2％的AgNO3溶液中逐滴滴入2％的稀氨水，至最初产生的沉淀恰好溶解为止，这时得到的溶液就是银氨溶液。
银氨溶液中含有Ag(NH3)2 OH（氢氧化二氨合银），这是一种弱氧化剂，能把可溶性还原糖中的醛基氧化成羧基，同时Ag＋被还原成金属银。
还原生成的银附着在试管壁上，形成银镜。
可见，银镜反应可用于鉴定可溶性还原糖，鉴定的结果是出现银镜。
2．利用新制的氢氧化铜：在试管里加入10％的NaOH溶液2mL，滴入2％的CuSO4溶液4～6滴，振荡后就会生成新制的Cu(OH)2，加入生物组织样液0.5 mL，加热至沸腾，若生物组织样液中含有可溶性还原糖，就会产生砖红色的Cu2O（沉淀）。
3．利用斐林试剂：斐林试剂由质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液和质量浓度为0.05g/mL C uSO4溶液配制而成。
使用时，先将NaOH溶液和CuSO4溶液混合（将4～5滴CuSO4溶液滴入2mL NaOH溶液中），生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀，然后向所要鉴定的生物组织样液加入该混合液进行水浴加热，若溶液的颜色变化过程为：浅蓝色→棕色→砖红色（沉淀），则说明生物组织样液中含有可溶性还原糖。
由于斐林试剂要现配现用，否则实验难以得到满意结果，因为此鉴定方法实际利用的是斐林试剂中的新制Cu(OH)2作为弱氧化剂，与可溶性还原糖的反应，而Cu(OH)2是一种沉淀物质，放置过久沉淀过多则不利于反应，因此人们对斐林试剂进行改良，配制出了班氏试剂和本尼迪特试剂。
4．利用班氏试剂（也叫班氏糖定性试剂）：班氏试剂是斐林溶液的改良试剂，由硫酸铜、柠檬酸钠和无水碳酸钠配制而成。
生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定1．实验原理可溶性糖中的还原糖（葡萄糖、果糖）与斐林试剂作用生成砖红色沉淀；脂肪被苏丹Ⅲ溶液或苏丹Ⅳ溶液染成橘黄色或红色；蛋白质与双缩脲试剂发生作用，能产生紫色反应。
2．材料用具做可溶性还原糖的鉴定实验，应选择含糖量高，颜色为白色或近于白色的植物组织，以苹果、梨为最好，使实验效果明显；做脂肪的鉴定实验，应该选择富含脂肪含量高的种子，以花生种子为最好，实验前需浸泡3~4 h；做蛋白质的鉴定实验，可用浸泡1~2 d的黄豆种子（或用豆浆），或用蛋清（必须稀释10倍后再使用）。
3．实验试剂由质量浓度为0.1 g/mL的NaOH溶液和质量浓度为0.05 g/mL的CuSO4溶液刚配制而成的斐林试剂；苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ溶液；双缩脲试剂。
4．实验过程可溶性糖的鉴定：注意：蛋白质的鉴定在试剂使用上与还原糖鉴定不同的是，先加入质量浓度为0.1 g/mL的NaOH溶液，造碱性环境，观察颜色变化后再加入3~4滴质量浓度为0.01 g/mL的CuSO4溶液，而不是混合使用。
讨论：（1）用斐林试剂鉴定可溶性糖（还原糖）时，溶液的颜色变化为什么是浅蓝色→棕色→砖红色（沉淀）？（提示：棕色为浅蓝色与砖红色的混合色）（2）鉴定可溶性还原糖试验中，苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜的颜色反应最明显的是哪一种？（提示：经试验比较，颜色反应的明显程度，依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜）在［实验1］生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中，斐林试剂与双缩脲试剂都由NaOH和CuSO4组成，但两者有如下三点不同：（1）溶液浓度不同。
斐林试剂中NaOH的浓度为0.1g/mL,CuSO4的浓度为0.05 g/mL;双缩脲试剂中NaOH的浓度为0.1 g/mL,CuSO4的浓度为0.01 g/mL。
（2）使用原理不同。
斐林试剂实质是新配制的Cu(OH)2溶液；双缩脲试剂实质是在碱性环境下的Cu2+。
（3）使用方法不同。
还原糖的鉴定(最全版)PTT文档
A液 质量浓度的NaOH溶液
B液 质量浓度的CuSO4溶液 3、苏丹III
苏丹III干粉，溶于100mL体积分数为95%的酒 精中，待全部溶解后再使用。
四、实验步骤 1、可溶性还原糖的鉴定
制备生物组织样液 取材、研磨、过滤 取样
取2ml组织样液注入试管
砖红色沉淀
4、观察。
2、脂肪＋苏丹III A液 质量浓度为的NaOH溶液
A液 质量浓度的NaOH溶液 取2ml组织样液注入试管
橘黄色
脂肪＋苏丹IV
红色
3、蛋白质＋双缩脲试剂
紫色反应
二、实验材料：
鉴定的有机物
滴入3~4滴双缩脲
适宜材料
选用的材料
某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。
还原糖的鉴定
显微镜的使用
1、安放； 3、调焦；
2、对光； 4、观察。
实验一: 生物组织中可溶性还原糖、脂肪、 蛋白质的鉴定
一、实验原理：
如用酒精灯直接加热，Cu2O沉淀颗粒较小，呈现黄色。
某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化 加热（煮沸2min），观察
可溶性还原糖的鉴定原理： 加热（煮沸2min），观察
花生种子
取一支试管注入
加热（煮沸2min），观察
如用酒精灯直接加热，Cu2O沉淀颗粒较小，呈现黄色。
B液 质量浓度的CuSO4溶液
Байду номын сангаас蛋白质
富含蛋白质的 生物组织
豆浆
• 深入原理
1.可溶性还原糖的鉴定原理：
生物组织中常见的可溶性糖有葡萄糖、果糖、 麦芽糖、蔗糖。前三种糖分子中都含有游离的 具有还原性的半缩醛羟基，因此叫还原性糖， 而蔗糖的分子中没有，因此叫非还原性糖。
高中生物实验 生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
实验原理
实验原理：化学试剂+有机化合物→特定的颜色 还原糖 + 斐林试剂 水浴加热 砖红色沉淀 蛋白质 + 双缩脲试剂 →紫色 脂 肪 +苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）→橘黄色（红色） 淀 粉 + 碘 →蓝色 还原糖：葡萄糖、果糖、麦芽糖
还原糖 + 斐林试剂 加 热→ 砖红色沉淀 先混合再加入糖中 （ NaOH +CuSO4）
• 第二步：分别向3支试管内加入相应的液体。一号加 2mL正常尿液；2号加_2m__l含__有__葡__萄__糖_的__尿_；液3号加 _2_m_l_待__测_尿__液_____________。
• 第三步：向3支试管内分别加入刚配好的斐林试剂1mL, 振荡试管，使溶液混合均匀，并将这3支试管放入盛有 50～60°C温水的大烧杯中，加热约2min。
先加NaOH 液于样液中， 再加CuSO4 液于样液中
蛋白质 + 双缩脲试剂 → 紫色
二、目的要求 三、材料用具
四、方法步骤
1、可溶性还原糖的鉴定
取材、研磨、过滤
制备生物组织样液
取样 取2mL组织样液
注入试管
注入试剂 向试管注入2mL斐林试剂
加热和观察
注意事项：1、若用斐林试剂要现配现用； 2、对试管加热时，试管口不要朝向实验者； 3、检测还原糖时应水浴50~60度加热。
去浮色 滴1~2滴50%的酒精溶液 制作临时装片
放在显微镜下观察
注意事项：花生种子要提前浸泡3~4小时；
六、探究试验
通常情况下，正常人的尿液中没有葡萄 糖。当一次食用大量糖时，尿液中是否有葡 萄糖存在？试运用对照的方法设计实验方案 进行鉴定。
实验一、生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定·实验指导（攻关不畏难）一．目的要求：1、初步掌握鉴定是生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质的基本方法；2、识记鉴定所用材料、试剂、仪器，懂得选材的要求；3、能熟练使用低倍镜，制作徒手切片、临时装片，了解规范使用显微镜的方法；4、理解实验的目的、原理和方法步骤，进一步归纳出生物组织中可溶性还原糖、脂肪和蛋白质的鉴定原理。
二．材料用具1、实验材料：1）做还原糖的鉴定，应该选择含糖量较高、颜色为白色的植物组织，以苹果、梨为最好。
2）做脂肪的鉴定实验，应该选择富含脂肪的种子，以花生种子为最好，实验前需浸泡3—4h。
3）做蛋白质的鉴定实验，可用浸泡1—2d的大豆种子（或用豆浆），或用鸡蛋蛋白。
2、仪器和试剂：1）仪器：剪刀，解剖刀，双面刀片，试管，试管架，试管夹，大小烧杯，小量筒，滴管，玻璃漏斗，酒精灯，三脚架，石棉网，火柴，研钵，石英砂，载玻片，盖玻片，毛笔，吸水纸，显微镜。
2）试剂：斐林试剂（主要由质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液和质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液配制而成，）苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液，双缩脲试剂，体积分数为50%的酒精溶液，蒸馏水。
三．实验原理：某些化学试剂能够使生物组织中的有机化合物产生特定颜色的反应。
1、可溶性还原糖的鉴定原理：可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖）与斐林试剂发生作用，可以生面碳红色沉淀，斐林试剂实际是Cu2+的碱性溶液，能使具有自由醛基或酮基的糖氧化，Cu2+则被还原成硕红色的Cu2O沉淀，反应式为：CH2OH—（CHOH）4—CHO+2Cu（OH）2CH2OH—（CHOH）4—COOH+Cu2O +2H2O 用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液颜色变化过程为：浅蓝色棕色2、脂肪鉴定原理：脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染成红色），苏丹Ⅲ在脂肪中的溶解度比在酒精中的溶解度大，当用苏丹Ⅲ的酒精溶液处理含有脂肪的生物组织时，酒精中的苏丹Ⅲ生进入脂肪中，将脂肪染成橘黄色。
还原糖测定的原理
还原糖测定的原理还原糖是指能够还原其他物质的糖类化合物，如葡萄糖、果糖等。
在食品加工、医药生产等领域，对还原糖含量进行测定具有重要意义。
本文将介绍还原糖测定的原理及其常用方法。
一、原理。
还原糖的测定原理是利用还原糖与氧化剂发生反应，氧化剂被还原为相应的还原产物，而还原糖则被氧化为酸。
常用的氧化剂有硝酸铜、费林试剂等。
以硝酸铜法为例，其反应方程式为：C6H12O6 + 2Cu2+ + 4OH→ Cu2O↓ + H2O + 2CH3COOH。
根据反应中生成的氧化铜沉淀的重量，可以计算出还原糖的含量。
二、硝酸铜法测定。
1. 样品处理，将待测样品加入硝酸铜溶液中，加热至沸腾，使还原糖与硝酸铜反应生成氧化铜沉淀。
2. 沉淀收集，将生成的氧化铜沉淀过滤、洗涤、干燥至恒定质量。
3. 计算含量，根据氧化铜沉淀的质量，通过计算公式计算出还原糖的含量。
三、费林试剂法测定。
费林试剂法是利用费林试剂与还原糖在酸性条件下发生显色反应，根据显色深浅来测定还原糖的含量。
其原理是还原糖在酸性条件下与费林试剂反应生成蓝色产物，显色深浅与还原糖的含量成正比。
四、光度法测定。
光度法是利用还原糖与氧化剂反应生成显色产物，通过测定产物的吸光度来测定还原糖的含量。
常用的显色产物有甲基橙、菲罗啉等，通过比色计或分光光度计测定吸光度，再根据标准曲线计算出还原糖的含量。
五、总结。
还原糖的测定方法多种多样，选择合适的方法需要根据样品特性、实验条件等因素综合考虑。
无论采用何种方法，都需要严格控制实验条件，准确操作，确保测定结果的准确性和可靠性。
通过本文对还原糖测定原理及常用方法的介绍，相信读者对还原糖的测定有了更深入的了解，能够在实际操作中更加灵活、准确地选择合适的测定方法，为相关领域的研究和生产提供有力支持。
高中生物实验所有染色剂及其性质详解
高中生物实验所有染色剂及其性质详解1斐林试剂检测可溶性还原糖原理：还原糖+斐林试剂→砖红色沉淀注意：斐林试剂的甲液和乙液要等量混合均匀后方可使用,而且是现用现配,条件需要水浴加热.应用：检验和检测某糖是否为还原糖；不同生物组织中含糖量高低的测定；在医学上进行疾病的诊断,如糖尿病、肾炎.2苏丹Ⅲ、苏丹Ⅲ检测脂肪原理：苏丹Ⅲ+脂肪→橘黄色；苏丹Ⅲ+脂肪→红色注意：脂肪的鉴定需要用显微镜观察.应用：检测食品中营养成分是否含有脂肪.3双缩脲试剂检测蛋白质原理：蛋白质+双缩脲试剂→紫色注意：双缩脲试剂在使用时,先加A液再加B液,反应条件为常温（不需要加热）.应用：鉴定某些消化液中含有蛋白质；用于劣质奶粉的鉴定.4碘液检测淀粉原理：淀粉+碘液→蓝色注意：这里的碘是单质碘,而不是离子碘.应用：检测食物中营养成分是不是含有淀粉5 DNA的染色与鉴定染色道理：DNA+甲基绿→绿色应用：能够显示DNA在细胞中的分布.鉴定道理：DNA+二苯胺→蓝色应用：用于DNA粗提取实验的鉴定试剂.6吡罗红使RNA呈现红色原理：RNA+吡罗红→红色应用：能够显示RNA在细胞中的分布.注意：在观察DNA和RNA在细胞中的分布时用的是甲基绿和吡罗红混合染色剂,而不是单独染色.7台盼蓝使死细胞染成蓝色原理：正常的活细胞,细胞膜结构完整具有选择透过性能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内；死细胞或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色.应用：区分活细胞和死细胞；检测细胞膜的完整性.8线粒体的染色道理：健那绿染液是埋头性染线粒体的活细胞染料,能够使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色.应用：能够用高倍镜观察细胞中线粒体的存在.9酒精的检测原理：橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应,变成灰绿色.应用：探究酵母菌细胞呼吸的方式；制作果酒时检验是否产生了酒精；检查司机是否酒后驾驶.10 CO2的检测原理：CO2可以使澄清的石灰水变混浊,也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿在变黄.应用：根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变黄的时间长短,能够检测酵母菌造就液中CO2的产生情况.11染色体（或染色质）的染色道理：染色体容易被碱性染料（如龙胆紫溶液或醋酸洋红溶液）染成深色.应用：用高倍镜观察细胞的有丝盘据.12吲哚酚试剂与维生素C溶液呈褪色反应道理：吲哚酚即2,6-二氯酚靛酚钠,其水溶液为蓝紫色,维生素C具有还原性,能将其褪色.应用：可用于检测食品营养成分中是否含有维生素C.13亚硝酸盐的检测出现玫瑰红原理：在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N-1-萘基乙胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料.应用：将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较,可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量.14脲酶的检测道理：细菌合成的脲酶能够将尿素分解成氨,氨会使造就基的碱性增强,使PH降低,从而使酚红唆使剂变红.应用：在以尿素为唯一氮源的培养基加入酚红指示剂,培养某种细菌后,看指示剂变红与否可以鉴定这种细菌能否分解尿素.15伊红美蓝检测大肠杆菌原理：在伊红美蓝培养基上,大肠杆菌的代谢产物（有机酸）与XXX结合使菌落呈现黑色.应用：用滤膜法测定水中大肠杆菌的含量.16刚果红检测纤维素分解菌道理：刚果红是一种染料,它能够与像纤维素这样的多糖物资形成白色复合物,但其实不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应.当在含有纤维素的造就基中插手刚果红时,刚果红能与造就基中的纤维素形成白色复合物.当纤维素被纤维素分解菌分解后,刚果红-纤维素的复合物就没法形成,造就基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈.应用：筛选纤维素分解菌.弥补(有局部重复)：1、斐林试剂配制：1）甲液质量浓度为0.1g/ml,取10gNaOH溶于蒸馏水,稀释至100ml2）乙液质量浓度为0.05g/ml,取5gCuSO4溶于蒸馏水,稀释至100ml临用时将甲、乙液等量混合作用：鉴定还原性糖：C6H12O6、果糖、麦芽糖、乳糖等.还原性糖与斐林试剂发生作用,生成砖红色沉淀.如用于鉴定组织液中有否还原性糖、糖尿病人尿成分分析、酶专一性探索等.2、班氏尿糖定性试剂配制：称取17.4克无水硫酸铜（CuSO4）溶解于100毫升热蒸馏水中,冷却后,稀释到150毫升.称取柠檬酸钠173克及无水碳酸钠（Na2CO3）100克,加蒸馏水600毫升,加热使之溶解,冷却后,稀释到850毫升.把硫酸铜溶液倾入柠檬酸钠及碳酸钠溶液中,搅匀后即为班氏尿糖定性试剂.用细口瓶贮存备用（为了防止氢氧化铜沉淀的生成,故加入柠檬酸钠.柠檬酸钠是一种亲水性掩蔽性络合物形成剂,它能与铜离子形成可溶性络盐）.利用方法同斐林试剂,所不同的是班氏试剂可长期利用.3、双缩脲试剂配制：A液：质量浓度为0.1g/ml,取10gNaOH溶于蒸馏水,稀释至100mlB液：质量浓度为0.01g/ml,取1gCuSO4溶于蒸馏水,稀释至100ml利用时,先加A液,后加B液作用：鉴定蛋白质,蛋白质与双缩脲试剂发生作用,可产生紫色反应.也可用于鉴定多肽.4、苏丹Ⅲ配制：取0.1g苏丹Ⅲ,溶解在20ml95%酒精中作用：鉴定脂肪,脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色（或被苏丹Ⅲ染成红色）.5、质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精溶液的混合液（1：1）.作用：用于洋葱根尖的解离,即使组织中的细胞相互分离开来.能杀死细胞固定.。
高中生物16个有颜色的实验原理
高中生物：16个有颜色的实验1斐林试剂检测可溶性还原糖原理：还原糖斐林试剂→砖红色沉淀注意：斐林试剂的甲液和乙液要等量混合均匀后方可使用，而且是现用现配，条件需要水浴加热。
应用：检验和检测某糖是否为还原糖；不同生物组织中含糖量高低的测定；在医学上进行疾病的诊断，如糖尿病、肾炎。
2苏丹Ⅲ、苏丹Ⅲ检测脂肪原理：苏丹Ⅲ脂肪→橘黄色；苏丹Ⅲ脂肪→红色注意：脂肪的鉴定需要用显微镜观察。
应用：检测食品中营养成分是否含有脂肪。
3双缩脲试剂检测蛋白质原理：蛋白质双缩脲试剂→紫色注意：双缩脲试剂在使用时，先加A液再加B液，反应条件为常温（不需要加热）。
应用：鉴定某些消化液中含有蛋白质；用于劣质奶粉的鉴定。
4碘液检测淀粉原理：淀粉碘液→蓝色注意：这里的碘是单质碘，而不是离子碘。
应用：检测食品中营养成分是否含有淀粉5DNA的染色与鉴定染色原理：DNA 甲基绿→绿色鉴定原理：DNA 二苯胺→蓝色应用：可以显示DNA在细胞中的分布6吡罗红使RNA呈现红色原理：RNA 吡罗红→红色应用：可以显示RNA在细胞中的分布。
注意：在观察DNA和RNA在细胞中的分布时用的是甲基绿和吡罗红混合染色剂，而不是单独染色7台盼蓝使死细胞染成蓝色原理：正常的活细胞，细胞膜结构完整具有选择透过性能够排斥台盼蓝，使之不能够进入胞内；死细胞或细胞膜不完整的细胞，胞膜的通透性增加，可被台盼蓝染成蓝色。
应用：区分活细胞和死细胞；检测细胞膜的完整性。
8线粒体的染色原理：健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料，可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色，而细胞质接近无色。
应用：可以用高倍镜观察细胞中线粒体的存在9酒精的检测原理：橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应，变成灰绿色。
应用：探究酵母菌细胞呼吸的方式；制作果酒时检验是否产生了酒精；检查司机是否酒后驾驶。
10CO2的检测原理：CO2可以使澄清的石灰水变混浊，也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿在变黄。
应用：根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变黄的时间长短，可以检测酵母菌培养液中CO2的产生情况。
可溶性还原糖的鉴定原理
《生物组织中还原糖与蛋白质的鉴定》学案陈臻一、可溶性还原糖的鉴定原理：生物组织中普遍存在的可溶性糖种类较多，常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。
前三种糖的分子内都含有游离的具有还原性的半缩醛基，因此叫还原性糖；蔗糖的分子内没有游离的半缩醛基，因此叫非还原性糖，不具有还原性。
实际上本实验中，用斐林试剂只能检验生物组织中可溶性的还原糖存在与否，而不能鉴定可溶性的非还原性糖。
可溶性还原糖与斐林试剂（质量浓度为0.1g/ml的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05g/ml的硫酸铜溶液配制而成）混合后,可以生成砖红色沉淀。
用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色到棕色再到砖红色二、蛋白质的鉴定原理：鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂。
双缩脲试剂的成分是质量浓度为0.1g/ml的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.01g/ml的硫酸铜溶液。
在碱性溶液NaOH中，双缩脲（H2NOC-NH-CONH2）能与Cu2+作用，形成紫色或紫色的络合物，这个反应叫双缩脲反应。
由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此，蛋白质都可与双缩脲试剂发生颜色反应，从而用来鉴定蛋白质的存在。
题例领悟例1：用斐林试剂鉴定可溶还原糖时，溶液的颜色变化过程为：A、浅蓝色棕色砖红色B、无色浅蓝色棕色C、砖红色浅蓝色棕色D、棕色绿色无色解析：斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后，立即生成浅蓝色的Cu（OH）2沉淀。
Cu（OH）2与加入的葡萄糖在加热的条件下，能够生成砖红色的Cu2O沉淀。
因此，答案为A例2：将面团包在纱布中在清水中搓洗，鉴定黏留在纱布上的黏稠物质和洗出的白浆用的试剂分别是：A、碘液、苏丹Ⅲ溶液B、双缩脲试剂、碘液C、双缩脲试剂、苏丹Ⅳ染液D、碘液、斐林试剂解析：白浆为淀粉，淀粉遇碘变蓝，黏稠物质为蛋白质与双缩脲试剂发生紫色反应。
因此，答案为B自我评价一、选择题：1、徒手切片时的刀口方向应是（）A、向前B、向内C、向左D、向右2、在鉴定蛋白质样品时，加双缩脲试剂的正确操作方法是（）A、先加A液，混合后再加B液B、先加B液，混合后再加A液C、A、B液混合后立即加入D、上述方法都可以采用3、在生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中，对实验材料的选择叙述中，错误的是（）A、甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根等，都含有较多的糖且近于白色，因此可以用于进行可溶性还原糖的鉴定B、花生种子含脂肪多且肥厚，是用于脂肪鉴定的理想材料C、大豆种子蛋白质含量高，是进行蛋白质鉴定的理想的植物组织材料D、鸡蛋清蛋白质多，是进行蛋白质鉴定的动物材料4、下列关于实验一操作步骤的叙述中，正确的是（）A、用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定B、脂肪的鉴定实验中需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴C、鉴定可溶性还原糖时，要加入斐林试剂甲液摇匀后，再加入乙液D、用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与B液要混合均匀后，再加入含样品的试管中，且必须现混现用5、某学生在显微镜下观察落花生子叶的切片，当转动细准焦螺旋时，有一部分细胞较清晰，另一部分较模糊，这是由于（）A、反光镜末调好B、标本切得厚薄不均C、细准焦螺旋末调好D、显微镜物镜损坏6、在可溶性还原糖及蛋白质鉴定时，事先留出一些组织样液的目的是（）A、与反应后混合液的颜色做对比B、失败后再重做一次C、下次实验再用D、组织样液过多颜色反应不明显。
可溶性还原糖的鉴定方法
可溶性还原糖的鉴定方法一、通过实验的结果分析上述鉴定实验的基本方法是运用某些化学试剂与生物组织中有关化合物的特定颜色反应来判断化合物的存在，这是这些实验的原理，同时也是考查的重点，在高考中多以选择题的方式出现。
二、各反应的过程可以简单表达1. 淀粉＋革兰氏碘液蓝色或蓝紫色。
2. 可溶性糖的还原性糖＋斐林试剂砖红色沉淀4.5.三、实验材料的选择实验材料的选择是实验成功的关键，使用好的材料能得到较好的实验效果。
上述实验中选材需要注意的地方如下：1. 可溶性还原性糖的鉴定：还原糖的含量和生物组织中有无色素是影响实验结果及其观察的最重要的因素。
因此要选用可溶性还原性糖含量高和白色或近于白色的植物组织，其中以苹果、梨最好，也可用白色的甘蓝叶、白萝卜替代。
经实验比较，颜色反应的明显程度依次为：苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。
2. 脂肪的鉴定：所用材料一要脂肪含量高，二要较大，这样才能做徒手切片，花生种子符合该实验的要求。
将花生种子浸泡3h~4h，使其变软，有利于切成薄片；浸泡时间不宜过长，否则组织太软，切下的薄片不易成形。
3. 蛋白质的鉴定：一般选用浸泡1d~2d的富含蛋白质的大豆种子（便于研磨）或用鸡蛋清。
4. DNA的鉴定：鸡血细胞液。
四、实验方法与步骤（以教材叙述为准，此处略）五、疑难聚集1. 在做还原性糖与蛋白质鉴定的实验时，在鉴定前，为什么要留出一部分样液？答：虽然是验证性实验，但也要注意对照。
在鉴定可溶性还原性糖和蛋白质时留出一部分样液，可以和鉴定后的样液的颜色变化作对照，增强说服力。
2. 蛋白质为什么要稀释？答：制备蛋白质稀释液，主要是为了防止蛋白质与双缩脲试剂反应后粘在试管壁上，使反应不彻底，也不易刷洗试管。
3. 斐林试剂与双缩脲试剂都由NaOH和CuSO4组成，两者有何不同？答：①溶液浓度不同：斐林试剂由质量浓度为0.1g/mL的NaOH 溶液和质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液配制而成，双缩脲试剂的成分是质量浓度的0.1g/mL的NaOH溶液与质量浓度为0.01g/mL的CuSO4溶液。
实验一--生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
实验一生物组中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定一、教材分析：1．该实验是高中阶段生物课程的第一个实验。
从此以后生物化学方面的内容增加。
本实验的操作技能的学习为以后该类型实验打好基础，一定要强调规范化操作方法。
2．低高倍镜的使用、徒手切片、临时装片等技能，学生经初三、高一两年的搁置，已显生疏。
实验时教师可考虑予复习，或通过演示提醒学生，注意规范操作要领。
3．本实验难度并不大，但由于内容较多、实验时间长，必须作周密安排才能完成。
如实验中教师应做好学生的分工合作可缩短实验时间。
同时又能培养学生的合作精神。
二、教学目标：知识目标：阐明实验原理—颜色反应，识记和区分用于可溶性还原糖、脂肪、蛋白质鉴定的试剂及产生的特定颜色，初步掌握鉴定上述化合物的基本方法，学会描述实验现象，掌握NaOH溶液和CuSO4溶液的使用方法。
能力目标：培养学生主动获取知识，应用知识分析现象，归纳总结的能力，培养学生实际操作的能力及从现象出发探求事物本质的能力。
情感与价值目标：通过亲手实验体验科学家严谨治学的科学态度，培养实事求是的世界观。
三、教学重点：掌握鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。
四、教学难点：实验内容较多，实验时间长，必须周密安排，才能按时完成。
学生要分工合作、教师指导演示。
五、材料用具：实验材料：葡萄糖液、苹果组织液，植物油滴、浸泡过的花生种子或新鲜的花生种子，鸡蛋蛋白稀释液、黄豆组织液。
仪器：徒手切片刀，试管架，试管夹，大小烧杯，小量筒，滴管，酒精灯，三脚架，石棉网，火柴，载玻片，盖玻片，毛笔，吸水纸，显微镜。
试剂：斐林试剂，苏丹Ⅲ染液或苏丹Ⅳ染液，双缩脲试剂A、双缩脲试剂B，体积分数为50％的酒精溶液，蒸馏水。
六、教学过程：（一）实验原理讲解：1．可溶性还原糖鉴定原理生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多，有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。
前三种糖的分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基，因此叫做还原糖；蔗糖分子内没有，为非还原糖。
还原糖鉴定原理
还原糖鉴定原理概述：还原糖是一类具有还原性的糖类化合物，其包括葡萄糖、果糖、半乳糖等。
还原糖鉴定是一种常用的化学分析方法，用于检测食品、药品和生物样品中是否存在还原糖。
本文将介绍还原糖鉴定的原理和常用的实验方法。
一、还原糖的定义和特性还原糖是具有还原性的糖类化合物，其分子结构中含有醛基或酮基。
在碱性条件下，还原糖能够与铜离子（Cu2+）发生氧化还原反应，将铜离子还原为铜离子（Cu+），同时自身被氧化为相应的酸。
这是还原糖鉴定的基本原理。
二、还原糖鉴定的原理还原糖鉴定的原理是利用还原糖与铜离子反应生成的氧化产物的特性，通过一系列的化学反应和分析方法来检测其存在。
1. 邮氏试剂法邮氏试剂是一种含有铜离子的溶液，可以与还原糖发生氧化还原反应。
当还原糖存在时，溶液的颜色由蓝色变为红色，这是因为还原糖将邮氏试剂中的铜离子还原为铜离子。
通过比色法或光度计测定溶液的颜色变化，可以确定样品中还原糖的含量。
2. 贝氏试剂法贝氏试剂是一种含有铜离子和碱性碘化钾的溶液，可以与还原糖发生氧化还原反应。
当还原糖存在时，溶液的颜色由蓝色变为黄色，这是因为还原糖将贝氏试剂中的铜离子还原为铜离子。
通过比色法或光度计测定溶液的颜色变化，可以确定样品中还原糖的含量。
3. 萘乙二胺法萘乙二胺是一种具有还原性的化合物，可以与还原糖发生氧化还原反应。
当还原糖存在时，萘乙二胺会被氧化为萘乙酸，同时还原糖也被氧化为相应的酸。
通过测定被氧化的萘乙二胺的生成量，可以确定样品中还原糖的含量。
4. 高效液相色谱法高效液相色谱法是一种常用的分析方法，可以用于分离和鉴定还原糖。
该方法利用色谱柱将样品中的还原糖分离，然后通过检测器对其进行定量分析。
高效液相色谱法具有分离效果好、灵敏度高和准确性高等优点，是还原糖鉴定中常用的方法之一。
三、还原糖鉴定的应用还原糖鉴定在食品、药品和生物样品的分析中有着广泛的应用。
1. 食品分析还原糖是许多食品中的重要成分，其含量的测定对于食品质量的控制和标签上营养成分的准确表示具有重要意义。
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《生物组织中还原糖与蛋白质的鉴定》学案
陈臻一、可溶性还原糖的鉴定原理：
生物组织中普遍存在的可溶性糖种类较多，常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。
前三种糖的分子内都含有游离的具有还原性的半缩醛基，因此叫还原性糖；蔗糖的分子内没有游离的半缩醛基，因此叫非还原性糖，不具有还原性。
实际上本实验中，用斐林试剂只能检验生物组织中可溶性的还原糖存在与否，而不能鉴定可溶性的非还原性糖。
可溶性还原糖与斐林试剂（质量浓度为0.1g/ml的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05g/ml的硫酸铜溶液配制而成）混合后,可以生成砖红色沉淀。
用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色到棕色再到砖红色
二、蛋白质的鉴定原理：
鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂。
双缩脲试剂的成分是质量浓度为0.1g/ml的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.01g/ml的硫酸铜溶液。
在碱性溶液NaOH中，双缩脲（H2NOC-NH-CONH2）能与Cu2+作用，形成紫色或紫色的络合物，这个反应叫双缩脲反应。
由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此，蛋白质都可与双缩脲试剂发生颜色反应，从而用来鉴定蛋白质的存在。
题例领悟
例1：用斐林试剂鉴定可溶还原糖时，溶液的颜色变化过程为：
A、浅蓝色棕色砖红色
B、无色浅蓝色棕色
C、砖红色浅蓝色棕色
D、棕色绿色无色
解析：斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后，立即生成浅蓝色的Cu（OH）2沉淀。
Cu（OH）2与加入的葡萄糖在加热的条件下，能够生成砖红色的Cu2O沉淀。
因此，答案为A
例2：将面团包在纱布中在清水中搓洗，鉴定黏留在纱布上的黏稠物质和洗出的白浆用的试剂分别是：
A、碘液、苏丹Ⅲ溶液
B、双缩脲试剂、碘液
C、双缩脲试剂、苏丹Ⅳ染液
D、碘液、斐林试剂
解析：白浆为淀粉，淀粉遇碘变蓝，黏稠物质为蛋白质与双缩脲试剂发生紫色反应。
因此，答案为B
自我评价
一、选择题：
1、徒手切片时的刀口方向应是（）
A、向前
B、向内
C、向左
D、向右
2、在鉴定蛋白质样品时，加双缩脲试剂的正确操作方法是（）
A、先加A液，混合后再加B液
B、先加B液，混合后再加A液
C、A、B液混合后立即加入
D、上述方法都可以采用
3、在生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中，对实验材料的选择叙述中，错误的是（）
A、甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根等，都含有较多的糖且近于白色，因此可以用于进行可溶性还原糖的鉴定
B、花生种子含脂肪多且肥厚，是用于脂肪鉴定的理想材料
C、大豆种子蛋白质含量高，是进行蛋白质鉴定的理想的植物组织材料
D、鸡蛋清蛋白质多，是进行蛋白质鉴定的动物材料
4、下列关于实验一操作步骤的叙述中，正确的是（）
A、用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定
B、脂肪的鉴定实验中需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴
C、鉴定可溶性还原糖时，要加入斐林试剂甲液摇匀后，再加入乙液
D、用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与B液要混合均匀后，再加入含样品的试管中，且必须现混现用
5、某学生在显微镜下观察落花生子叶的切片，当转动细准焦螺旋时，有一部分细胞较清晰，另一部分较模糊，这是由于（）
A、反光镜末调好
B、标本切得厚薄不均
C、细准焦螺旋末调好
D、显微镜物镜损坏
6、在可溶性还原糖及蛋白质鉴定时，事先留出一些组织样液的目的是（）
A、与反应后混合液的颜色做对比
B、失败后再重做一次
C、下次实验再用
D、组织样液过多颜色反应不明显。