实验1 光学讲义显微镜的使用及显微绘图
显微镜的使用和生物绘图-SJTU
5、调节瞳距拉板,至合适瞳距(双目 图像完全重合),用粗调缓缓降低载物 台(注意方向不可相反),至可以看见 玻片上的标本。
6、改用微调,调节至图像清晰。如不能 找到图像,请重复以上操作。
7、前后左右移动玻片,至找到合适的图 像。
8、转到高倍镜(40倍),或滴加香柏油, 转到油镜(100倍),使镜头浸入油中。
9、调节微调钮和底部右侧光亮度调节手 轮,至图像清晰,可以绘图或计数。
10、用完显微镜,降下载物台,用擦镜 纸蘸洗镜液,擦洗油镜头。最后用干擦 镜纸再次擦拭镜头(在操作过程中,其 他镜头若沾到香柏油,需立即擦洗)。
11、取掉玻片,光源调至最弱后关闭电 源。
实验原理三 生物绘图法的学习
生物绘图的要求
视度调节圈
载物台 焦距粗\微调螺旋 光源亮度调节手轮
Motic B1显微镜使用简介
1、 旋动粗调螺旋,将载物台降至最低。 2、 将玻片放在载物台上,练习前后左右 推进螺旋。 3、 转动物镜转换器(不要直接扳动镜 头),选择10倍镜头,将载物台升至最高。 4、 打开后部电源,调节底部右侧光亮度 旋钮。
生物绘图的方法
生物绘图的方法有多种,最常见的是点点衬 阴法和线条衬阴法。点点衬阴法是将图形画出 后,用铅笔点出圆点,表示明暗和深浅,给予立 体感。暗处点要密,明处疏,点要过渡均匀自 然。线条衬阴法又称涂抹阴影法,是依靠线条的 疏密来表示明暗和深浅,给予立体感。但点点衬 阴法不能与涂抹阴影的方法同时使用。
1、生物绘图要有高度的科学性,不得有科学性 错误。形态结构准确,比例正确,要有真实感, 立体感,精细而美观。 2、图面力求整洁,铅笔保持尖锐,少用橡皮。
3、绘图大小适宜,留有注图空间。 4、绘图线条光滑、匀称,点大小一致。
最新实验一光学显微镜的构造使用和临时装片制作PPT课件
离析液中(95%酒精:浓HCL=1:1)5~10分钟。
3 材料漂洗和染色:将固定离析好的材料用清水漂 洗3~5次,取1个置载玻片上染色2分钟。
4 压片:用镊子尖轻轻捣碎材料,盖片,用镊子背 轻轻垂直敲盖玻片,再覆上一层吸水纸,用双手 拇指垂直下压盖玻片。
(五)植物绘图方法
1 生物绘图的要求:
科学性、真实感、精细而美观、文字标注清晰。
2 生物绘图的基本步骤:
构图:位置、结构特点、大小、比例等 勾画轮廓 用清晰的线条和圆点完成全图 文字标注:引线、结构名称、图的名称
特别注意:必须使用铅笔进行绘图和文字标注
四 实验作业
➢ 进行第一次植物学实验的感想
➢ 绘图:洋葱鳞叶几个表皮细胞, 示植物细胞的基本结构
3 白色体:取大葱叶鞘表皮细胞制作临时 装片观察。
(三)初生纹孔场
取一小块红辣椒,用镊子固定一侧,用刀片将果 肉刮去,直到半透明,观察表皮细胞的初生纹孔场。
(三)胞间连丝
观察柿胚乳永久装片或枣胚乳装片。
(四)后含物
取马铃薯块茎汁液少许制作临时装片,可用稀碘液 染色。
取花生子叶薄片,置载玻片中央,加1滴苏丹Ⅲ染 液染色10分钟,盖片后观察。
三 实验作业 1 绘制你所观察到的表皮细胞和气孔。 2 绘制你所观察到的有色体。 3 绘制你所观察到的初生纹孔场。 4 绘制你所观察到的胞间连丝。
实验三 顶端分生组织和植物细胞 的有丝分裂
一 目的与要求
1 观察掌握顶端分生组织的细胞特征,了解其生 理功能及在植物体上的分布位置。 2 学会根尖压片技术,观察植物细胞有丝分裂全 过程。
实验七 茎的形态结构及其发育
实验一 普通光学显微镜的使用与生物绘图
实验一普通光学显微镜的使用与生物绘图【目的要求】1. 了解显微镜的构造和各部分的性能,学习并掌握正确的使用技术和保养措施;2. 学会制作临时装片、徒手切片的方法。
3.学会绘制生物图。
【材料和用品】显微镜、微藻培养液【实验内容与方法】(一)普通光学显微镜的基本构造、使用方法及保护1、显微镜的基本结构显微镜构造很复杂,种类很多,但基本结构是由机械和光学两大部分构成,现分述如下:1.1 机械部分它是为光学部分服务的部件,包括以下六部分:(1) 镜座:显微镜最下面呈马蹄形或圆形的部分,起稳定和支持显微镜作用。
(2) 镜柱:直立于镜座上的短柱,支持显微镜的其它部分。
(3) 镜臂:弯曲成马蹄形的部分,便于手持,下端与镜柱相连接的地方有一个倾斜关节,可使镜臂倾斜,便于观察。
(4) 载物台:自镜臂下端向前伸出,放置标本用的平台,其中央有一个园孔,叫通光孔。
台上有一移动器(老式的左右各有一个压片夹),用以固定和移动标本。
(5) 镜筒:和镜臂上方连接的园筒部分。
有的显微镜镜筒内有一抽管,可适当抽长,一般长度是160-170mm。
镜筒上端装有目镜,下端有一个可转动的园盘,叫物镜转换器(或叫物镜旋转盘),其上装有2-4 个物镜。
(6) 调焦器:为镜壁上两种可转动的螺旋,一大一小,能使镜筒上下移动,调节焦距。
大的叫粗调焦器,升降镜筒较快,用于低倍镜对焦;小的叫细调焦器,升降镜筒较慢。
1.2 光学部分由接目镜、接物镜、反光镜、聚光器等四部件组成。
(1) 接目镜:装于镜筒上方,由两组透镜构成,接目镜的作用是把接物镜所形成的倒立实像再放大成为一个虚像。
接目镜上刻有5×,8×,10×,15×,25×等符号,表示放大倍数。
我们所观察到的标本的物像,其放大倍数是接物镜和接目镜放大倍数的乘积。
如接物镜是10×,接目镜是8×,其物像的放大倍数是10×8=80 倍。
光学显微镜的使用和显微绘图
2020/4/1
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资料仅供参考,不当之处,请联系改正。
二、仪器设备及材料
• 1. 光学显微镜/显微照相系统(带油浸物镜) • 2. 目镜测微尺及镜台测微尺 • 3. 香柏油、二甲苯 • 4. 永久装片、擦镜纸
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资料仅供参考,不当之处,请联系改正。
普通生物显微镜
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易出现这种现象,应将光线调暗一些后,再观察。
资料仅供参考,不当之处,请联系改正。
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高倍镜的使用
(1)依照低倍镜操作步骤,先用低倍镜找到清晰物像。 (2)将需要观察的部分移到视野的中央。 (3)眼睛从侧面注视物镜,用手移动转换器,换高倍镜40X。 (4)眼睛向目镜内观察,同时微微上下转动细调节钮,直至视野内看到清晰 的物像为止。此时应把聚光器的孔径光阑适当调大,使之与物镜的镜口率相匹 配。光源的强度也应调高。
如按上述操作仍看不到物像时,可能由下列原因造 成: ①观察的部分不在视野内,应在低倍镜下寻找到后 ,移到视野中央,再换高倍镜观察。 ②标本片放反了,应把标本片放正之后,再按上述 步骤操作。 ③焦距没调好,应仔细调节焦距。 如需要更换标本片时,应该先把载物台下降,然后 把标本片移到载物台前方,再取下。
10 0.28 1μm
4供参考,不当之处,请联系改正。
科勒照明
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优点:视场照明均匀,样品不受热,不产生耀眼眩光,影像清晰。
1893年德国杰出的学者August Kohler提出柯勒照明法。其具体做法:在光源与聚光器之 间,加放一光源聚光镜和视场光阑,光源聚光镜把光线集成光锥,使光源灯成像于聚光器的 孔径光阑平面处。同时,聚光器又使视场光阑成像在样品平面处。由此充分地利用了照明光 源,使点状的光源达到较大的照明,从而使样品得到均匀的照明,并防止了高温。这对显微 摄影和镜检观察至关重要。
细胞实验讲义
细胞实验讲义实验一光学显微镜的使用及显微绘图(3课时)实验目的在普通光学显微镜下辨识细胞和细胞器的形态结构,掌控生物绘图的方法。
实验原理细胞在形态上是多种多样的,有球形、椭圆形、扁平形、立方形、梭形、星形等。
虽然细胞的形状各异,但是它们却有共同的基本结构特点,都由细胞膜(动物)、细胞壁(植物)、细胞质和细胞核组成。
细胞中的各种细胞器,如线粒体、高尔基体、中心体、核仁、染色体等,一般经过一定固定染色处理后,大多数在光学显微镜下是可以看见的(图3-1)。
细胞器的形态结构在普通光学显微镜下与电子显微镜下所看到的结构有很大的差别。
图3-1细胞形态结构a.柿胚乳细胞示胞间连丝;b.马蛔虫受精卵分裂中期示中心粒;c.兔的神经细胞中高尔基体;d.小鼠肝细胞线粒体实验仪器、材料和试剂1.仪器:复式显微镜、擦镜纸2.材料:洋葱食道切片、柿胚乳细胞、小白鼠肝切片、动物细胞中的dna、马蛔虫受精卵切片3.香柏油或石蜡油、二甲苯方法与步骤一、洋葱食道切片细胞的观测先用低倍镜观察根尖的纵切面,注意分生区、伸长区、成熟区细胞的异同,然后再仔细观察细胞的形态结构,特别注意细胞的形状、大小,以及细胞壁、细胞核、核仁、细胞质、液泡的形态结构。
二、柿胚乳细胞而立胞间连丝的观测先在低倍镜下找到柿胚乳细胞,然后转用高倍镜观察,可看到细胞间丝状的联系。
三、小白鼠肝细胞切片糖原的观察先用低倍镜后用高倍镜观测,可以看见许多肝小叶,每小叶存有许多密切排成索状的多角形的肝细胞,细胞中央存有大而圆的细胞核。
这时,转回用油镜观测,可以看见细胞质内原产着许多被涂成深色的糖原颗粒。
四、马蛔虫受精卵切片中心体的观察取马蛔虫受精卵切片,在显微镜下找出充满著子宫腔的受精卵,每个马蛔虫受精卵外围存有一层较薄的卵膜,膜内有宽敞的围卵腔,各围站卵腔内有处于相同对立期的卵细胞。
找出对立中期的细胞,在细胞中央被涂成蓝色条状或棒状的结构,这就是染色体。
在染色体两侧可知各存有一个1较小的,亦被涂成蓝色的小粒,表示中心粒。
显微镜的使用及绘图
3、先用HB铅笔轻轻将图轮廓画出草图,要掌握好比例、位置。
4、在草图的基础上用2H或3H铅笔绘详图,线条要流畅,点要 均匀,点线不要重复描绘。
5、按注图要求注图并注明图名、及放大倍数。
实验报告
首先写好姓名、班级学好 一、实验目的 二、绘制三个图 1、动物上皮组织的细胞结构图; 2、动物肌肉组织的细胞结构图。
动旋钮。 3、转动镜头转换器(不要直接扳动镜头),选择
10倍镜头,将载物台升至最高。 4、打开后部电源,调节底部右侧光亮度旋钮。
10倍镜下镜检
玻片夹
注意玻片的正确放置!
5、调节瞳距拉板,至合适瞳距(双目图像完全重合),用 粗调缓缓降低载物台(注意方向不可相反),至可以看 见玻片上的标本。
6、改用微调,调节至图像清晰。如不能找到图象,请重复 以上操作。
均匀,图注接近时可用折线,但注图线之间不能交叉,图注 尽量排列整齐。 6、绘图完成后在图下方注明图名、及放大倍数。
生物绘图的方法
1、生物绘图的方法有多种,最常见的是点点衬阴法和线条衬阴 法。点点衬阴法是将图形画出后,用铅笔点出圆点,表示明 暗和深浅,给予立体感。暗处点要 密,明处疏,点要过渡
均匀自然。线条衬阴法又称涂抹阴影法,是依靠线条的疏密来 表示明暗和深浅,给予立体感。但点衬阴法不能与涂抹阴影 的方法同时使用。
11、取掉玻片,光源调至最弱后关闭电源。
实验原理三
生物绘图法的学习
生物绘图的要求
1、生物绘图要有高度的科学性,不得有科学性错误。形态结构 准确,比例正确,要有真实感,立体感,精细而美观。
2、图面力求整洁,铅笔要保持尖锐,尽量少用橡皮。
3、绘图大小适宜,留有注图空间。
显微镜结构图及使用方法
2、根据光线强弱,调整反光镜和遮光器(光圈)
பைடு நூலகம்
三)放置标本:
玻片标本放置要正对通光孔旳中央,用 压片夹固定
四)调焦观察 调焦、调整玻片(要点注意事项)
1、将显微镜外表擦拭洁净
五)善后整顿
2、转动转换器,把两物镜偏到旁边,并 下调镜筒至最低,送回镜箱。
3.显微镜旳使用 注意事项:先低后高(换高后只能用细准焦螺
试验一 显微镜旳构造和使用
(用眼观察旳镜头)
(使物像清楚) (使物像更清楚)
(握镜旳部位)
(支持镜柱以 上旳部件)
(连接目镜和物镜)
(安装物镜)
(接近物体旳镜头)
(放置玻片标本)
(调整光线强弱) (固定标本) (使光线经过通 光孔反射上来)
(稳定镜身)
一)取 镜安放:
二)对光
1、右手握住镜臂,左手托住镜座; 2、轻拿轻放,并略偏左; 3、装好目镜和物镜。 1、扭动转换器,使镜头(低倍镜)、镜筒和通 光孔成一直线;
旋!)先放低镜筒,再向上调整 成像规律:上下、左右颠倒(怎样移动玻片) 变化规律:图像变大、数量降低、视野变暗 放大倍数:物x目 指旳是长度上旳放大倍数 高放大倍数旳体现: 目镜越短,物镜越长,物镜距离玻片越近 (目短物长距离近) 想要看到旳数量多呢?
显微镜结构图及使用方法课件
率和更广泛的适用范围。
扫描隧道显微镜
扫描隧道显微镜是一种用于观 察表面结构的显微镜,常用于 材料科学、生物学等领域。
共聚焦显微镜
共聚焦显微镜是一种用于观察 活细胞和组织的显微镜,可以 观察细胞内部的动态过程。
02
显微镜结构
显微镜的基本结构
01
载物台移动不顺畅
可能是载物台上的标本放置不当或标本夹过 紧,需要重新调整标本或更换标本夹。
照明不均匀
可能是光源部分出现问题,需要对光源进行 检查和调整。
06
显微镜应用实例
在生物学中的应用
观察细胞结构
显微镜可以放大并清晰地显示细胞的结构,使得生物学家能够更 深入地研究细胞的功能和形态。
鉴定微生物种类
正确操作
严格按照操作规程使用显微镜,避免粗暴操作导致显微镜 损坏。在使用过程中如出现异常情况,应立即停止操作并 联系专业人员维修。
05
显微镜维护与保养
显微镜的清洁与保养
清洁镜头
使用专用的镜头纸或镜头清洁 液,擦拭显微镜的镜头,以保
持其清晰度。
清洁载物台
定期使用消毒液清洁载物台, 以防止细菌滋生。
显微镜使用的注意事项
保护光学系统
避免用手触摸透镜和反光镜,以免污染光学表面。禁止将 样品直接放在载物台上,以免对载物台和样品造成污染。
避免强烈震动
强烈震动可能会影响显微镜的精度和使用效果。应避免在 运输和使用过程中受到强烈的震动。
保持清洁
使用干净的擦镜纸擦拭镜头,以保持镜头清晰。定期清洁 显微镜的各个部件,特别是载物台、粗调焦轮、微调焦轮 等。
03
镜筒
容纳目镜和物镜的管状结构,方便观察者通 过目镜观察样品。
基础生物学实验1.1--显微镜的使用和生物绘图(双)
显微镜低倍镜、高倍镜和油镜使用
注意事项: 1、正确取、还
实验目的
2、正确使用 3、各种镜头的正确使用
掌握显微镜的使用技术和保养措施 生物绘图的注意事项
基础生物பைடு நூலகம்实验
基础生物学实验
仪器、药品和用具 显微镜、擦镜纸、玻片
基础生物学实验
显微镜的使用方法 1 、取镜 拿显微镜时,必须一手握紧镜臂,一手平 托镜座,然后轻轻放在实验台上。检查镜的各部分是否 完好,并用纱布或绸巾揩抹干净。擦镜头要用擦镜纸或 软绸巾,千万不要用手去摸镜头的透镜部分。 2 .对光 使用时,先用低倍接物镜,把低倍接物镜 头转到载物台中央,对正圆孔,用左眼贴近接目镜向内 观察,同时用手调节反光镜和集光器,或选用光圈盘合 适的孔,使镜内光亮适宜。 3 .放片 把切片放在载物台上,使要观察的部分对准 接物镜镜头,用压夹夹住切片
基础生物学实验
4 .低倍接物镜的使用 转动粗调节轮,使镜筒下降, 至接近切片时为止。转动时要从侧面看着接物镜下降, 防止碰着切片。
再用左眼靠近接目镜进行观察,并转动粗调节轮,使 镜筒缓慢上升,直至看到物象为止(在显微镜下的物象 是倒象),再转动细调节轮,直到物象最清楚为止。 5 .高倍接物镜的使用 使用高倍接物镜时,首先要用 低倍接物镜按上法对好,然后将要放大观察的部分移至 视野的中央,再把高倍接物镜头转至中央,一般便可粗 略看到映像,再转动细调节轮,直至物象清晰为止。如 光线不亮,要增强亮度。如看不见物象,可使镜头下降, 至几乎贴近切片为止,然后再转动粗调节轮,使镜头上 升,至看到物象为止。
线、点 画法
画图时先用轻淡小点或轻线 条画出轮廓,再依照轮廓一 笔画出与物象相符的线条。 线条要清晰,比例要准确。 较长的线条要向顺手的方向 运笔,或把纸转动再画。同
实验一光学显微镜的使用及植物绘图法
实验一光学显微镜的使用及植物绘图法一、目的与要求1、了解光学显微镜的结构和成像原理2、掌握光学显微镜的使用和保养方法3、学习植物绘图法二、材料和用品绘图用品(绘图纸、橡皮、HB或2H铅笔)显微镜、擦镜纸、纱布、二甲苯、蒸馏水、洋葱鳞叶表皮永久装片三、实验内容1、显微镜的结构与成像原理2、显微镜的使用与保养方法3、植物绘图方法四、实验方法与步骤1、显微镜的结构与成像原理显微镜的结构复式显微镜的结构较复杂,由两组以上的透镜所组成,其类型虽然很多,但基本结构和原理是相同的,在结构上分为机械部分和光学部分。
机械部分:显微镜的金属部分即为其机械部分,用于装置光学部分及其它用途,包括以下几部分:(1)镜座:镜座位于显微镜的最下方,是显微镜的底座,与桌面相接触,支持显微镜的全部重量,并使之平稳。
(2)镜臂:镜臂是搬取显微镜的执手,与镜筒、载物台及镜座相连接,分固定式和可倾斜式两种类型。
(3)镜筒:镜筒是镜臂前方的中空圆筒,呈倾斜状态,上端放置目镜,下端连接物镜转换器。
有的显微镜的镜筒与镜臂连接处有齿刻,通过调焦螺旋可以上下升降镜筒,也就是通过镜筒的升降来调焦的。
(4)物镜转换器:物镜转换器固定在镜筒下端的圆盘状结构,有3—4个物镜螺口,装置不同放大倍数的物镜。
旋转物镜转换器时,物镜可以一个换一个地转到正确的位置使用,转动时当听到一声轻微的响声,表示位置已对好。
(5)载物台:载物台又叫镜台或工作台,是位于镜臂前方的一个方形装置,为安放玻片标本用,其中心有一个通光孔,台上还装有安装玻片的夹。
(6)调焦装置:在镜臂上装有粗调焦螺旋(大的一对齿轮)和细调焦螺旋(小的一对齿轮),转动调焦螺旋可使镜筒或载物台上升或下降,从而调节物镜与标本间的距离,达到调焦的目的,使物像清晰。
粗调焦螺旋调节幅度大,用于低倍镜下调焦,细调焦螺旋调节幅度小,用于高倍镜下调焦。
光学部分:是由几组透镜彼此相隔一定的距离,由机械装置把它们连成一个整体,作用是利用光线使实验物体造成放大像。
光学显微镜的使用及植物绘图法教案
光学显微镜的使用及植物绘图法一、目的与要求1、了解光学显微镜的结构和成像原理2、掌握光学显微镜的使用和保养方法3、学习植物绘图法二、材料和用品1、自备材料:绘图用品(绘图纸、橡皮、HB或2H铅笔)2、其它材料和用品:显微镜、擦镜纸、纱布、二甲苯、蒸馏水、洋葱鳞叶表皮永久装片。
三、实验内容1、显微镜的结构与成像原理2、显微镜的使用与保养方法3、植物绘图方法四、实验方法1、显微镜的结构与成像原理显微镜的结构复式显微镜的结构较复杂,由两组以上的透镜所组成,其类型虽然很多,但基本结构和原理是相同的,在结构上分为机械部分和光学部分。
机械部分:显微镜的金属部分即为其机械部分,用于装置光学部分及其它用途,包括以下几部分:(1)镜座:镜座位于显微镜的最下方,是显微镜的底座,与桌面相接触,支持显微镜的全部重量,并使之平稳。
(2)镜臂:镜臂是搬取显微镜的执手,与镜筒、载物台及镜座相连接,分固定式和可倾斜式两种类型。
(3)镜筒:镜筒是镜臂前方的中空圆筒,呈倾斜状态,上端放置目镜,下端连接物镜转换器。
有的显微镜的镜筒与镜臂连接处有齿刻,通过调焦螺旋可以上下升降镜筒,也就是通过镜筒的升降来调焦的。
(4)物镜转换器:物镜转换器固定在镜筒下端的圆盘状结构,有3—4个物镜螺口,装置不同放大倍数的物镜。
旋转物镜转换器时,物镜可以一个换一个地转到正确的位置使用,转动时当听到一声轻微的响声,表示位置已对好。
(5)载物台:载物台又叫镜台或工作台,是位于镜臂前方的一个方形装置,为安放玻片标本用,其中心有一个通光孔,台上还装有安装玻片的夹。
(6)调焦装置:在镜臂上装有粗调焦螺旋(大的一对齿轮)和细调焦螺旋(小的一对齿轮),转动调焦螺旋可使镜筒或载物台上升或下降,从而调节物镜与标本间的距离,达到调焦的目的,使物像清晰。
粗调焦螺旋调节幅度大,用于低倍镜下调焦,细调焦螺旋调节幅度小,用于高倍镜下调焦。
光学部分:是由几组透镜彼此相隔一定的距离,由机械装置把它们连成一个整体,作用是利用光线使实验物体造成放大像。
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表1 几种物质的折射率
介质
空气
水
折射率(n) 1.003
1.33
石蜡油 1.47
香柏油 1.515
加拿大树胶 1.515
光学玻璃 1.54
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五、显微镜的使用方法
•使用显微镜的要领就是从低倍物镜开始观 察,先粗调后细调。
在低倍物镜下找到要观察的东西后, 再逐步加大物镜倍数,仔细观察。
四、油镜的原理
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• 油镜(油浸系物镜,通常有黑圈或Oil的标志),以香 柏油或石蜡油为介质。这类油的折射率与玻璃的折射率 大致相同。光线从被检物体直接射入物镜,其间因折射 或反射而引起的光线损失很小,所以可以充分利用镜口 角,显著提高物镜的分辨率。
• 油镜(镜口率一般在1.25左右)的分辨率在0.2m左右,这就是 光学显微镜的分辨极限。
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三、显微镜的构造
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• 2.光学系统
三、显微镜的构造
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• 3.显微镜的能力 显微镜的能力是质量和性能的标志。
能力包括分辨率、放大率、焦点深度和视 场宽度等,其中最重要的是分辨率。
R 0.61
N.A.
R:分辨率(分辨的两个点的最短距离), R值愈小,分辨率越大。
精品
实验1 光学显微镜的使用及显 微绘图
2
实验 1 光学显微镜的使用
及显微绘图
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一、目的要求
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• (1)熟悉显微镜的结构和各部件性能。
• (2)掌握低倍镜/高倍镜的正确使用方法,掌 握油镜的使用方法。
• (3)掌握显微绘图的基本方法
• (4)了解细胞的基本结构,动物、植物和微 生物细胞的基本共性和特性
如按上述操作仍看不到物像时,可能由下列原因造 成: ①观察的部分不在视野内,应在低倍镜下寻找到后 ,移到视野中央,再换高倍镜观察。 ②标本片放反了,应把标本片放正之后,再按上述 步骤操作。 ③焦距没调好,应仔细调节焦距。 如需要更换标本片时,应该先把载物台下降,然后 把标本片移到载物台前方,再取下。
λ:照明光线的波长(可见光平均波长 约550nm)。
N.A. nsin
2
N.A.:物镜的镜口率 n:物镜和被检物体之间介质的折射率 α:物镜的镜口角(从物镜光轴上的物点所发出 的光线与物镜前透镜有效直径边缘所张的角度)。
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表1 在550nm光波下不同物镜的分辨距离
放大倍数(×) 镜口率(N.A.) 分辨距离(d)
(5)换10 X 物镜观察。此时,只须稍稍调节ห้องสมุดไป่ตู้调节旋钮即可。
低倍镜的使用
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低倍镜的使用
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如果按上述操作步骤仍看不到物像时,可能由以下原因造成: ① 转动调节钮太快,超过焦点。应按上述步骤重新调节焦距。 ② 物镜没有对正,应对正后再观察。 ③ 标本没有放到视野内,应移动标本片寻找观察对象。 ④ 光线太强,尤其观察比较透明的标本片或没有染色的标本时,
油镜的使用
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应先调低倍镜、高倍镜找到要观察的物像,然后再用油镜观察,操作如下: (1)先用低倍镜观察标本,然后更换高倍镜,把待观察的部分移到视野中央。 (2)把载物台下降约1.5厘米,再把油镜转到工作位置。 (3)在盖玻片上所要观察的位置滴一小滴香柏油。 (4)细心拧动粗调焦螺旋,使载物台慢慢上升。这时要仔细观察物镜前端与标 本之间的距离,先使物镜前端与油滴接触,然后再慢慢使载物台上升,至物镜前 端接近而没有碰到盖玻片为止。这步操作要特别小心,防止油镜压碎标本或损坏 油镜(油镜的工作距离约0.2mm)。 (5)眼睛要看目镜中,拧动细调焦螺旋,使载物台慢慢下降到能看清标本。这 步操作要特别注意不要把细调焦螺旋的方向拧错,以防压碎标本。 (6)看清标本后,把聚光器下的孔径光阑开到它的口径与视场的直径恰好一样 大,使聚光器的镜口率与物镜的镜口率相配合。如果聚光器的镜口率小于物镜的 镜口率,则物镜的镜口率就不能充分发挥。 (7)观察完毕后,下降载物台,把油镜转离光轴,立即作清洁工作。先用干的 擦镜纸擦一、二次,把大部分油去掉,再用二甲苯滴湿的擦镜纸擦两次,最后再 用干擦镜纸擦一次。擦拭时要顺镜头的直径方向,不要沿镜头的圆周擦。擦拭要 细心,动作要轻,不可用力擦。如果聚光器上有滴油也要同样清洁。载玻片上的 油可用“拉纸法”擦净,即把一小张擦镜纸盖在载玻片油滴上,在纸上滴一些二 甲苯,趁湿把纸往外拉,这样连续作3—4次,即可干净。
二、仪器设备及材料
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• 1. 光学显微镜/显微照相系统(带油浸物镜) • 2. 目镜测微尺及镜台测微尺 • 3. 香柏油、二甲苯 • 4. 永久装片、擦镜纸
普通生物显微镜
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显微照相系统
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三、显微镜的构造
• 1.机械部分
支持和调节光学系统
Charge-coupled Device
易出现这种现象,应将光线调暗一些后,再观察。
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高倍镜的使用
(1)依照低倍镜操作步骤,先用低倍镜找到清晰物像。 (2)将需要观察的部分移到视野的中央。 (3)眼睛从侧面注视物镜,用手移动转换器,换高倍镜40X。 (4)眼睛向目镜内观察,同时微微上下转动细调节钮,直至视野内看到清晰 的物像为止。此时应把聚光器的孔径光阑适当调大,使之与物镜的镜口率相匹 配。光源的强度也应调高。
低倍镜的使用
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(1)检查:各部件有无损坏,如发现问题,立即报告教师请求处理。 (2)准备:将显微镜放于前方略偏左侧以便观察。打开电源开关,观察 底座的光路中是否有光亮。慢慢调节同一旋钮,光线应逐步增强。转动粗调 节钮,将载物台下降使物镜与载物台距离略拉开。再旋转物镜转换器,将低 倍镜4 X对准载物台中央的通光孔(可听到“咔哒”声)。 (3)放标本片:标本片标签面向上,用标本夹夹好,把要观察的部分移 到通光孔的正中央。 (4)调节焦距:边从目镜中观察,边调节粗聚焦旋钮,使载物台缓慢上 升,直至视野中出现物像为止。如物像不太清晰,可转动细调节钮,使物像 更加清晰。
10 0.28 1μm
40 0.65 0.42μm
100 1.25 0.22μm
科勒照明
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优点:视场照明均匀,样品不受热,不产生耀眼眩光,影像清晰。
1893年德国杰出的学者August Kohler提出柯勒照明法。其具体做法:在光源与聚光器之 间,加放一光源聚光镜和视场光阑,光源聚光镜把光线集成光锥,使光源灯成像于聚光器的 孔径光阑平面处。同时,聚光器又使视场光阑成像在样品平面处。由此充分地利用了照明光 源,使点状的光源达到较大的照明,从而使样品得到均匀的照明,并防止了高温。这对显微 摄影和镜检观察至关重要。