β2微球蛋白的检测及临床意义

【关键词】蛋白β2微球蛋白（β2-microglobulin，β2-M）是一种相对分子量为11 800的蛋白质。β2-M存在于除红细胞和胎盘滋养层细胞以外的所有有核细胞表面，特别是淋巴细胞和肿瘤细胞，在免疫应答中起重要作用。 1 生理与生化β2-M是人类白细胞抗原（HLA）Ⅰ类分子的β链（轻链部分），因电泳时出现于β2区带而得名。β2-M是由100个氨基酸组成的单链多肽，它以非共价键与HLAⅠ类分子中的重链结合，并参与维持三级结构。β2-M 分子内含有一对二硫键，不含糖基，等电点（pI）为5.7，半衰期约为107 min。在健康人中β2-M以相对稳定的速率合成，约为150～200 mg/d，随HLA的更新、代谢、降解释放入体液。因其相对分子量小且不与血浆蛋白结合，可自由地经肾小球滤入原尿，滤过的β2-M在近端小管几乎全部被重吸收，吸收率达 99.9%，重吸收的β2-M在肾小管上皮细胞中被分解破坏，因此，正常情况下仅有微量β2-M向尿中排出。血清中β2-M浓度与排泄率和合成两者相关，健康人群其血清浓度相对稳定。尿液中β2-M排出量取决于肾小管的重吸收能力和血中β2-M 浓度。 2 标本采集与分析前变异 2.1 血液标本血清、血浆标本皆可，以血清标本为佳。在抽取血液标本后，应尽快分离血清或血浆，在室温不宜超过3 h，分离后的标本4 ℃可保存1周，-20 ℃下可较长时间稳定。 2.2 尿液标本分子量尿液标本中β2-M在pH＜6.0时很不稳定，2 h内发生变性，即使在膀胱内也是同样的。故尿液标本不宜采集清晨第一次尿（晨尿往往pH＜6.0），而通常收集在白天任意时间的尿样本。排尿后必须检测pH，必要时可以在盛器内加几滴2 mol/L NaOH使其碱化。如收集24 h尿液标本，宜在采集尿液标本的前1天，给患者服用NaHCO3等碱性药物，使尿液pH＞6.0，按要求收集的尿液标本放4 ℃可保存4周，-70 ℃可稳定2年，但应避免反复冻融。 3 检测方法主要采用免疫测定法，目前已报道的测定血清（血浆）及尿液中β2-M的方法有多种：包括放射免疫分析法（RIA）、酶联免疫吸附法（ELISA）、时间分辨荧光免疫分析法、免疫透射比浊法、免疫散射比浊法、胶乳免疫散射比浊法、胶乳增强免疫比浊法等。以上方法国内外不少公司推出了商品化试剂盒，具体操作方法详见试剂盒使用说明。 4 检测法举例胶乳增强免疫比浊法。 4.1 原理β2-M 与包被在乳胶颗粒上的抗人β2-M抗体结合产生浊度，其浊度与β2-M浓度成正比。 4.2 试剂盒组成（1）R1：Tris缓冲液（pH 8.2）。（2）R2：胶乳包被抗人β2-M抗体。（3）标准液1瓶。 4.3 标本来源与保存（1）血清：在2 ℃～8 ℃可稳定7天，-20 ℃可稳定3个月。（2）尿液：用K2HPO4调整pH至7～8，在2 ℃～8 ℃可稳定2天，在-20 ℃可稳定2个月。

4.4 注意事项（1）试剂中含有叠氮钠作保存剂，不要吞入，避免接触皮肤和黏膜。（2）高溶血及脂血样品不适于测定。（3）可适用于自动分析仪。[!--empirenews.page--] 4.5 参考值范围（1）血清（血浆）: 1.0～3.0 mg/L。（2）随机尿: ≤300 mg/L。（3）24 h尿：33～363 mg/L。 4.6 临床意义 4.6.1 血清β2-M浓度增高的意义血清β2-M浓度受体内合成速度与尿液排泄率的影响。一些导致β2-M合成增加的疾病会使血清β2-M浓度升高。肾功能异常导致β2-M滤过减少时，血清β2-M浓度也会增高。（1）肾功能是影响血清β2-M浓度的主要因素。β2-M可自由经肾小球滤入原尿，滤过的β2-M在近端小管几乎全部被重吸收。在急性肾炎、慢性肾炎及慢性肾功能不全等疾病时，因肾小球滤过率（GFR）及肾血流量降低，导致β2-M滤过减少，血清β2-M浓度升高，β2-M与GFR呈负相关。测定β2-M血清能了解肾小球滤过功能。但由于其他疾病也可引起血清β2-M升高，为此，血清β2-M评价GFR的应用有一定局限性。肾衰竭患者血清β2-M显著升高。肾移植时如有排斥反应，一方面β2-M 合成增多，另一方面肾功能受影响，β2-M滤过减少，血清β2-M常升高，上升可先于临床诊断移植排斥2～7天，也较血清肌酐的增高早1～3天。对于同种骨髓移植的急、慢性排斥反应，监测β2-M浓度是一项很好的指标。此外，高血压糖尿病等引起肾损伤亦可使血清β2-M 增高，具有早期诊断意义。（2）一些恶性肿瘤，如恶性淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病、非霍奇金淋巴瘤、霍奇金病、多发性骨髓瘤、肝癌、肺癌及胃癌病人血清β2-M浓度可明显升高。血清β2-M浓度还可用于评价骨髓瘤的预后及治疗效果。（3）病毒感染如巨细胞病毒、EB病

毒、乙肝或丙肝病毒及HIV感染时，血清β2-M可増高。血清β2-M可用来监测HIV感染者的发病过程。（4）自身免疫疾病时，尤其是系统性红斑狼疮（SLE）活动期，血清β2-M往往升高。 4.6.2 尿液β2-M增高的意义尿β2-M测定是反映近端肾小管重吸收功能受损的灵敏而特异的指标。由于肾小管重吸收β2-M的阈值为6 mg/L，大量β2-M从尿中排泄。因此，应同时检查血清β2-M，只有血清β2-M小于6 mg/L时，尿β2-M增高才反映肾小管损伤。（1）肾移植后，如有排斥反应影响肾小管功能时，尿中β2-M可升高。测定尿β2-M可早期检测与肾移植相关的病毒感染。（2）急性肾小管肾炎、坏死、药物及毒物（如庆大霉素、丁胺卡那霉素、汞、镉、铬、金制剂等的肾毒性）引起肾小管损害，使得肾小管重吸收不良，尿中β2-M升高。尿中β2-M与白蛋白的比值，有助于区别肾小球与肾小管性蛋白尿。（3）自身免疫病如红斑狼疮活动期，某些恶性肿瘤时因β2-M合成加快，尿中β2-M可升高。 4.6.3 脑脊液（CSF）中β2-M升高的意义在急性白血病和淋巴瘤有神经系统浸润时，CSF中β2-M可升高。