平板计数法
平板计数法与纸片法检测食品微生物菌落总数的比较分析
FOODEXPERIMENT平板计数法与纸片法检测食品微生物菌落总数的比较分析■文丨张嬪夭津市工业微生物研究所有限公司、夭津量信检验认证技术有限公司品污染的微生物主要是细菌•通过对食品微生物菌落总数进行检测，能够掌握食品受污染程度。
而平板计数法与纸片法均能够对食品微生物菌落总数进行检测，对二者进行比较分析，能够为菌落计数标准方法的调整提供思路。
一、实验方法比较准备平板计数琼脂培养基和菌落总数测试片，并准备饼干、蛋糕以及两份质控样品。
具体实验如下：1•平板计数法。
（1）培养基的配制。
对培养基进行高压灭菌，再放入恒水温的浴锅中，并按照标准要求将水温保持在46°C O（2）样液的制备将准备好的待测样品原液与质控样品进行10倍稀释.充分混匀后制备为1:10的样品匀液。
（3）质控样品的制备。
吸取4mL的生理盐水水化西林，彻底溶解后将溶液移除，并反复清洗容器内壁，回收的清洗液即是质控样品。
使用微量移液器对其进行吸取，9mL的稀释液应吸取lmL的样品匀液，混合制备为1:100的样品匀液。
（4）使用平板计数法对食品微生物菌落总数进行检测时要保证环境的无菌性，主要步骤是：使用ImL灭菌吸管吸取菌液稀释液，放置在平皿内，加入ImL 的无菌生理盐水，注入平板计数琼脂，再将其摇匀，静置冷却凝固后，将平板翻转，在36°C±1°C的温度下静置培养48h±2h o2.纸片法。
在使用纸片法对食品微生物菌落总数进行检测时，同样需要制备培养基和样液’在对培养基进行制备时，主要将测试纸片静置，直到其恢复常温；在制备样液时，与平板计数法相同，故不作赘述。
使用纸片法对食品微生物菌落总数进行检测的主要步骤是：使用ImL灭菌吸管吸取菌液稀释液，分别放置在测试纸片上.将纸片进行覆盖，以同样的条件对其进行培养。
二、实验结果比较在分别使用平板计数法和纸片法对食品微生物菌落总数开展检测实验后，主要采取SPSS17.0对两种实验结果进行分析，“Z-比分数”对其进行评价。
平板计数法优缺点及应用
平板计数法优缺点及应用平板计数法是一种计数方法，其中数字和位置都以平板形式表示。
平板计数法有一些优点和缺点，并且在许多应用中使用。
优点：1. 简单易懂：平板计数法非常直观，易于理解。
每个位置上的数字代表该位置上的数量，而且在每个位置上只能有一个数字。
2. 易于计算：平板计数法在进行加法和减法运算时非常简单。
只需要将相应位置上的数字相加或相减即可。
乘法和除法也相对容易，只需要将两个或多个平板数字相乘或相除。
3. 易于扩展：平板计数法可以轻松地扩展到更高的位数。
只需要添加更多的平板数字即可。
这使得平板计数法非常适合用于大数字的表示和计算。
4. 经济高效：平板计数法可以有效地利用空间。
每个平板数字只占据一小部分空间，因此在纸张、屏幕或其他媒体上表示和存储数字时非常节省。
缺点：1. 位数限制：平板计数法对于表示较大或较小的数字存在位数限制。
每个平板数字只能表示一个数字，因此当数字过大或过小时，需要更多的位数来表示。
2. 运算复杂度：在进行乘法和除法运算时，平板计数法的运算复杂度会增加。
因为每个平板数字只能表示一个数字，因此需要进行多次运算才能得到最终的结果。
3. 可读性差：当数字较大时，平板计数法可能会变得难以阅读和理解。
每个位置上的数字需要一一对应，并且需要花费较长的时间来读取和计算。
应用：1. 教育领域：平板计数法可以用于教授儿童计数和基本运算。
平板计数法直观易懂，可以帮助儿童理解数字概念和进行简单的计算。
2. 科学研究：平板计数法在一些科学研究领域中有着重要的应用。
例如，在物理学中，平板计数法可以用于表示分子数量或物质的质量。
3. 金融和商业：平板计数法可以用于处理和计算金融和商业领域的数字。
例如，平板计数法可以用于计算货币交易、股票价格和商业利润。
4. 计算机科学：平板计数法可以用于计算机科学中的数字表示和计算。
例如，在计算机内部，可以使用平板计数法表示和处理数字。
总结：平板计数法是一种简单易懂、易于计算和经济高效的计数方法。
菌落总数计数方法
菌落总数计数方法菌落总数计数是一种常见且重要的实验方法，用于评估菌落的数量和密度。
菌落总数计数方法有多种，常见的包括平板计数法、薄层计数法、过滤膜计数法等。
下面将详细介绍这几种方法的原理和步骤。
平板计数法是最常见的菌落总数计数方法之一。
它的原理是将待测菌液均匀涂布在含有固体营养培养基的平板上，通过菌落的生长扩散形成可见的单个菌落，再通过对菌落进行计数并乘以稀释倍数，最后得到待测菌液的菌落总数。
具体步骤如下：1. 准备固体培养基。
根据所要检测菌落的要求，选择适当的培养基并准备好。
固体培养基一般含有琼脂或明胶等物质，可以提供营养物质和支持菌落的生长。
2. 制备合适浓度的菌液。
将待测菌种培养在含有适宜营养物质的液体培养基中，利用培养箱或摇床进行恒温、恒湿的培养，待菌液呈现合适浓度时即可使用。
3. 稀释菌液。
根据待测菌液的预估浓度，将适量的菌液和无菌生理盐水按一定比例进行稀释，以获得合适浓度的菌液。
4. 涂布菌落。
取一定数量的稀释后的菌液，利用灌注器或鱼鳞划线法将菌液均匀涂布在固体培养基的平板上。
为了保证菌液的均匀分布，可以采取旋转、摇动等方法。
5. 培养菌落。
将涂布好的平板置于恒温、恒湿的培养箱中进行培养。
根据菌种的不同，一般在30-37的温度下培养24-48小时。
6. 计数菌落。
在培养好的平板上，通过肉眼或借助显微镜仔细观察菌落的形态、大小、颜色等特征，并使用菌落计数器或放大镜进行计数。
根据菌落的密度和分布情况，可以选择在整个平板上计数，或者在特定区域计数后进行推算。
7. 乘以稀释倍数。
由于菌液在进行稀释时常用不同倍数的生理盐水进行稀释，所以在计算菌落总数时需要将计数结果乘以稀释倍数，以获得准确的结果。
薄层计数法是另一种常见的菌落总数计数方法。
它的原理是将含有待测菌液的液体培养基均匀地倒入培养基皿中，使其能够覆盖整个底面。
待液体凝固后，菌落会在培养基表面生长，并且可以通过视觉或显微镜观察和计数菌落。
平板菌落计数法名词解释
平板菌落计数法名词解释
平板菌落计数法是一种常用的微生物计数方法，用于测定样品中微生物的数量。
下面将对每个步骤进行详细的名词解释：
1. 样品处理：在进行平板菌落计数前，需要对样品进行处理。
样品处理包括对样品的粉碎、研磨、匀浆等操作，以使样品中的微生物充分分散。
2. 培养基制备：平板菌落计数需要使用特殊的培养基，以便为微生物提供适宜的生长环境。
培养基制备包括按照一定的配方和比例将各种成分混合在一起，制备出适合微生物生长的培养基。
3. 接种：将处理过的样品接种到培养基上，以便使样品中的微生物在培养基上生长繁殖。
接种时需要保证样品均匀地分布在培养基上，并确保无菌操作以避免污染。
4. 培养：将接种后的培养基放置在适宜的温度和湿度条件下进行培养。
在培养过程中，微生物会在培养基上生长繁殖，形成肉眼可见的菌落。
5. 计数：在培养一定时间后，对培养基上的菌落进行计数。
计数时需要注意区分不同种类的菌落，并根据菌落的形态、大小、颜色等因素进行分类和统计。
6. 计算：最后，根据统计的菌落数量和稀释倍数，计算出样品中微生物的数量。
通过以上步骤，可以准确地测定样品中微生物的数量。
平板菌落计数法广泛应用于食品、药品、环境等领域的质量控制和卫生检测等方面。
平板计数法
平板菌落计数法平板菌落计数法，是种统计物品含菌数的有效方法。
方法如下：将待测样品经适当稀释之后，其中的微生物充分分散成单个细胞，取一定量的稀释样液涂布到平板上，经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落，即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞；统计菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。
目录一、菌落总数介绍：二、检验方法三、说明一、菌落总数介绍：二、检验方法三、说明展开但是，由于待测样品往往不宜完全分散成单个细胞，所以，长成的一个单菌落也可能来自样品中的2～3或更多个细胞。
因此平板菌落计数的结果往往偏低。
为了清楚地阐述平板菌落计数的结果，现在已倾向使用菌落形成单位（cfu ：colony-forming units），而不以绝对菌落数来表示样品的活菌含量。
[1]编辑本段一、菌落总数介绍：菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物，它是由数以万计相同的细菌集合而成。
当样品被稀释到一定程度，与培养基混合，在一定培养条件下，每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落。
菌落总数就是指在一定条件下（如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等）每克（每毫升）检样所生长出来的细菌菌落总数。
按国家标准方法规定，即在需氧情况下，37℃培养48h，能在普通营养琼脂平板上生长的细菌菌落总数，所以厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌，由于现有条件不能满足其生理需求，故难以繁殖生长。
因此菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数，菌落总数并不能区分其中细菌的种类，所以有时被称为杂菌数，需氧菌数等。
菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量，它反映食品在生产过程中是否符合卫生要求，以便对被检样品做出适当的卫生学评价。
菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣。
编辑本段二、检验方法菌落总数的测定，一般将被检样品制成几个不同的10倍递增稀释液，然后从每个稀释液中分别取出1mL置于灭菌平皿中与营养琼脂培养基混合，在一定温度下，培养一定时间后（一般为48小时），记录每个平皿中形成的菌落数量，依据稀释倍数，计算出每克（或每ml）原始样品中所含细菌菌落总数。
平板计数法计算公式
平板计数法计算公式
平板计数法计算公式
1、基本原理
平板计数法是一种计算电磁场能量的简单方法，它是指在电磁场中，以某个特定的单位把电磁场的能量分割，以计算由一组点产生的电磁场能。
它可以把电磁场当作一个满是一维通量的空间，将空间中的电磁量按照固定的单位，把它拆分成许多小空间，然后统计每个小空间里的电磁量，并在这些小空间里加权，然后把总的电磁量累加起来，从而得出由该一组点产生电磁场的总能量。
2、计算公式
平板计数法计算的公式是：
P=Σdr^4*f(r)
其中，P表示由一组点产生电磁场的总能量，dr表示空间分解的小空间的大小，r表示从这组点到一个小空间的距离，f(r)表示小空间里的电磁量。
3、应用
平板计数法通常应用于电磁场测量，以计算电磁场能量的大小与分布。
它可以把电磁场当作一个满是一维通量的空间，将空间中的电磁量按照固定的单位，把它拆分成许多小空间，然后统计每个小空间里的电磁量，并在这些小空间里加权，然后把总的电磁量累加起来，从而得出由该一组点产生电磁场的总能量。
平板计数法也可以用于计算电磁辐射的总量，以实时监测电磁场能量的强弱，从而有效地分析
电磁辐射的空间分布与变化趋势。
大肠菌群检测中平板计数法主要操作要领
大肠菌裙检测是一项非常重要的微生物检测工作，它可以帮助我们了解环境和食品中是否存在大肠菌裙，从而保证人们的健康安全。
在大肠菌裙检测中，平板计数法是一种常用的检测方法。
下面将介绍大肠菌裙检测中平板计数法的主要操作要领。
1.准备工作在进行大肠菌裙检测之前，需要准备相应的实验器材和培养基。
实验器材包括平板计数仪、移液器、无菌培养皿等。
培养基一般选择大肠埃希氏菌（EC）培养基。
2.样品处理将待测样品取适量放入无菌容器中，进行适当的稀释。
这一步要确保样品的稀释倍数适中，以保证后续的计数结果准确。
3.接种和培养取一定量的处理过的样品，在无菌工作台上均匀涂抹于含有适量培养基的培养皿上，然后进行培养。
培养条件一般为37摄氏度，培养时间为24小时。
培养后会形成菌落，这些菌落代表了原始样品中的细菌数量。
4.计数和记录在培养后，利用平板计数仪对菌落进行计数。
计数的时候需要注意避免重复计数同一菌落，保证计数准确。
需要记录计数结果，包括菌落数量和相应的单位。
5.结果分析根据计数结果，可以对原始样品中的大肠菌裙数量进行估算。
可以通过对对照组和样品组的比较来判断样品中大肠菌裙的数量是否合格。
大肠菌裙检测中平板计数法的主要操作要领就是以上几点。
通过严格按照这些要领进行操作，可以确保检测结果的准确性和可靠性。
在进行操作过程中，还需要遵守无菌操作规范，确保实验过程中不受外界污染。
希望大家在进行大肠菌裙检测时能够严格按照操作要领进行，保证测试结果的准确性，从而更好地保障人们的健康安全。
大肠菌裙检测中的平板计数法是一种经典的微生物计数方法，它主要用于测定食品、饮用水、环境等样品中大肠菌裙的数量。
在这个过程中，我们需要注意几个关键的环节，来保证实验的准确性和结果的可靠性。
在准备工作环节，我们需要保证实验器材和培养基的质量。
实验器材一定要经过严格的消毒和清洁，以免外来细菌的污染影响实验结果。
培养基的选用也尤为重要，要选择与待测细菌的生长要求相适应的培养基，以保证细菌在培养基上的正常生长。
平板计数法
平板菌落计数法样品的稀释固体和半固体食品：以无菌操作取25g样品,放入装有225 mL生理盐水的无菌均质杯内,于8000 ～10000r/min均质1min～2min,制成1:10样品匀液，或放入225 mL生理盐水的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min～2min，制成1:10的样品匀液。
液体食品：以无菌吸管吸取样品25mL放入装有225mL生理盐水的无菌玻璃瓶(瓶内预置适当数量的玻璃珠)中,充分混匀，制成1:10的样品匀液。
用1 mL无菌吸管或微量移液器吸取1：10的样品匀液1 mL加到装有9 mL PBS的稀释管中，充分混匀制成1：100的样品匀液。
制备十倍递增系列稀释样品匀液。
每递增稀释1次，换用1支1mL无菌吸管或吸头。
根据对样品污染状况的估计，选择2～3个适宜的连续稀释度的样品匀液（液体样品可以选择原液），每个稀释度分别吸取1mL样品均匀加入两个无菌平皿内。
同时分别取1mL稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照。
及时将15~20ml冷却至46℃平板计数琼脂培养基（可放置于46℃±1℃恒温水浴箱内保温）倾注平板，并转动平皿使其混合均匀。
琼脂凝固后，将平板翻转，置36±1℃培养48±2h。
水产品30±1℃培养72±3h。
如果样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫生成的菌落时，可在凝固后的琼脂表面覆盖一薄层琼脂培养基（4mL），凝固后翻转平板，进行培养。
菌落计数可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，记录稀释倍数和相应的菌落数量。
菌落计数以菌落形成单位（（CFU）表示。
选取菌落数在30~300之间、无蔓延菌落生成的平板计数菌落总数。
低于30 CFU的平板记录具体菌落数，大于300的可记录为多不可计。
每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。
其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数；若片状菌落不到平板一半，而另一半又分布均匀，则可以半个平板的菌落数乘2代表一个平板的菌落数。
大肠菌群检测(平板计数法)
平板菌落数的选择
选择菌落数在15-150之间的平板，分别计数平板上出现的典型和可疑大肠菌群菌落。 典型菌落为紫红色，菌落周围有胆盐与酸形成的沉淀环，菌落直径为0.5mm或更大。
什么样的菌落必须要做证实试验
一是非典型菌落，如在颜色、直径与典型菌落不符合的菌落。 另一种情况是被检样品中含有乳糖以外的其他糖类，如牛奶、饮料等样品。本
36℃±1 ℃ 18h ~24h
挑选10个菌落分别 接种到BGLB
VRBA琼脂
配方(g/L): 蛋白胨:7.0; 酵母粉:3.0;乳糖:10.0;3号胆盐:1.5;中性红:0.03;结晶紫:0.002;氯化 钠:5.0; 琼脂:15.0;pH 7.4±0.1,25℃ 其中蛋白胨提供氮源；酵母粉提供生长促进因子和Ｂ族维生素；乳糖提供碳源， 大肠菌群发酵乳糖，产生酸性物质；３号胆盐是一种抑菌剂，主要是抑制革兰氏 阳性菌；结晶紫也是一种抑菌剂，主要是抑制革兰氏阳性菌和一部分革兰氏阴性 菌；中性红是一种指示剂，在酸性条件显红色，碱性条件下显无色。氯化钠维持 细菌生长时的渗透压。琼脂是一种凝固剂。
10倍系列稀释
选择2~3个适宜稀释度的样液，接种VRBA平板
36℃±1℃
18~24h
计数典型和可疑菌落
注：VRBA(结晶紫中性红胆盐 琼脂)又称为：VRB或VRBL
BGh
报告结果
平板计数法操作
菌落数在15-150之 间的平板,计数典型
和可疑菌落
典型菌落为紫红色周围有 红色胆盐沉淀环，0.5mm
来大肠菌群的定义是发酵乳糖，但由于样品含有的其他糖类混入了培养基，使 得不能分解乳糖但能分解其他糖类的细菌也能够长出红色菌落，所以需要进行 证实实验。
结果报告
经最后证实为大肠菌群阳性的BGLB管的百分比乘以计数的平板菌落数，再乘 以稀释倍数，即为每g (mL)样品中大肠菌群数 。
医学：实验土壤中细菌总数的测定-平板计数
本实验的应用前景
本实验所采用的平板计数法具有广泛的应用前景，可 用于研究不同环境条件下土壤中细菌总数的变化规律。
通过深入探究土壤中细菌总数与环境因素之间的关系， 可以为农业生产、土壤保护和土地资源可持续利用提 供科学依据。
实验误差分析
随机误差
由于随机因素引起的误差，如取样不均匀、计数 误差等。
系统误差
由于实验方法、仪器或操作不当引起的误差，如 培养基质量、培养条件等。
误差来源分析
分析误差的来源，提出相应的改进措施，以提高 实验的准确性和可靠性。
结果可靠性评价
重复性检验
通过重复实验，比较实验结果的一致性和稳定性。
可信度评估
03
CHAPTER
实验步骤
土壤样品的采集与处理
1
ห้องสมุดไป่ตู้
采集具有代表性的土壤样品，并记录采样点的环 境信息。
2
将采集的土壤样品进行筛选和研磨，去除其中的 石块和杂质。
3
将处理后的土壤样品进行称重，记录其质量。
土壤样品的稀释与接种
根据土壤样品的质量， 计算所需的稀释液量。
将稀释后的土壤样品 接种到培养基中，确 保均匀分布。
制备菌悬液
将处理后的土壤样品与无 菌水混合，制备成菌悬液。
稀释菌悬液
将菌悬液进行适当稀释， 使每个菌落来源于一个细 菌。
接种培养
将稀释后的菌悬液接种到 培养基上，放入恒温培养 箱中培养。
掌握平板计数法测定土壤中细菌总数的操作步骤
计数菌落
培养一定时间后，观察并计数培养基 上的菌落数。
结果计算
mpn法和平板计数法的原理及适用范围
mpn法和平板计数法的原理及适用范围
MPN法和平板计数法是微生物检测中常用的方法，用于对水样或
其他样品中的微生物数量进行估算。
这两种方法都是基于微生物在特
定条件下的繁殖规律而设计的。
MPN法（Most Probable Number）是一种间接计数法，适用于微
生物含量较低的样品。
它基于微生物在液体培养基中的繁殖规律，通
过观察培养液的变化来估算微生物的数量。
具体操作时，样品通过稀
释系列，分别接种到多个培养管中，并根据培养管内是否有微生物生
长来判断MPN。
平板计数法是一种直接计数法，适用于微生物含量较高的样品。
它通过将样品均匀地涂布在含有固体培养基的平板上，使其中的微生
物形成可见的菌落。
然后，通过数个平板上的菌落数量，可以估算样
品中微生物的数量。
这种方法的优点是操作简单，但对于微生物数量
较低的样品不太适用。
MPN法和平板计数法的适用范围略有不同。
MPN法通常用于对含
有微生物数量较低的样品进行估算，例如食品、饮用水等。
平板计数
法则常用于对微生物含量较高的样品进行计数，例如污水、土壤等。
选择合适的方法取决于待测试样品的特性以及所需的灵敏度和准确性。
综上所述，MPN法和平板计数法是常用的微生物检测方法，通过
对微生物繁殖规律的研究来估算样品中微生物的数量。
两种方法各有
优势，适用范围有所不同，应根据实际需要选择合适的方法进行微生
物检测。
平板计数法
平板菌落计数法平板菌落计数法，是种统计物品含菌数的有效方法。
方法如下：将待测样品经适当稀释之后，其中的微生物充分分散成单个细胞，取一定量的稀释样液涂布到平板上，经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落，即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞；统计菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。
目录一、菌落总数介绍：二、检验方法三、说明一、菌落总数介绍：二、检验方法三、说明展开但是，由于待测样品往往不宜完全分散成单个细胞，所以，长成的一个单菌落也可能来自样品中的2～3或更多个细胞。
因此平板菌落计数的结果往往偏低。
为了清楚地阐述平板菌落计数的结果，现在已倾向使用菌落形成单位（cfu ：colony-forming units），而不以绝对菌落数来表示样品的活菌含量。
[1]编辑本段一、菌落总数介绍：菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物，它是由数以万计相同的细菌集合而成。
当样品被稀释到一定程度，与培养基混合，在一定培养条件下，每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落。
菌落总数就是指在一定条件下（如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等）每克（每毫升）检样所生长出来的细菌菌落总数。
按国家标准方法规定，即在需氧情况下，37℃培养48h，能在普通营养琼脂平板上生长的细菌菌落总数，所以厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌，由于现有条件不能满足其生理需求，故难以繁殖生长。
因此菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数，菌落总数并不能区分其中细菌的种类，所以有时被称为杂菌数，需氧菌数等。
菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量，它反映食品在生产过程中是否符合卫生要求，以便对被检样品做出适当的卫生学评价。
菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣。
编辑本段二、检验方法菌落总数的测定，一般将被检样品制成几个不同的10倍递增稀释液，然后从每个稀释液中分别取出1mL置于灭菌平皿中与营养琼脂培养基混合，在一定温度下，培养一定时间后（一般为48小时），记录每个平皿中形成的菌落数量，依据稀释倍数，计算出每克（或每ml）原始样品中所含细菌菌落总数。
平板计数的实验原理
平板计数的实验原理
平板计数法是一种实验室中常用的微生物计数方法，其原理是将待测微生物悬液均匀地铺在已知面积的平板上，通过培养基培养和观察，计算出在平板上生长的微生物菌落的数量。
平板计数法的具体操作步骤如下：
1.准备好含有适当营养物质的培养基，如大肠杆菌专用营养琼脂（LB）培养基。
2.将待测微生物悬液通过适当的稀释方法，制备出不同浓度的悬液。
一般要制备出大约3个数量级的浓度，即10^-5、10^-6和10^-7等。
3.将每一个稀释液用吸管吸取一定量，滴在分别标号好的平板上。
然后用灭菌的玻璃棒将悬液铺平，使液体均匀分布在平板上，使得每个平板上菌落的大小和形态的变化均匀。
4.将培养皿倒置放在培养箱中，进行恰当的孵育，使其在适宜的环境中生长繁殖。
具体的条件由不同微生物的生长需求而定。
5.观察每个平板上的微生物的生长情况，计算出每个平板上菌落的数量。
6.利用平均数等方法，计算出每毫升原液中微生物的数量。
平板计数法的优点是简单易行，操作方便，能直接观察和计数微生物的数量，结果比较准确。
不过，平板计数法并不适用于细胞形态、大小、生长速度和密度不同的微生物。
此外，平板计数法所得到的是可生长的菌落形式和数量，不能反映微生物在液体中的真实数量。
平板菌落计数法操作方法
平板菌落计数法操作方法
平板菌落计数法是一种常用的微生物计数方法，可用于定量测定空气、水、食品、药品等样品中的微生物菌落数量。
下面是平板菌落计数法的操作方法：
1. 准备培养基：选择适合待测微生物培养的培养基，如琼脂培养基、营养琼脂等。
按照培养基说明书的方法制备好培养基，并进行无菌处理。
2. 样品处理：将待测样品进行适当的预处理，如对液体样品可进行稀释，对固体样品可进行悬浮、研磨等处理，以保证样品均匀分散。
3. 平板接种：取适量的样品处理液，将其均匀地倒入已经凝固的培养基平板上，并用无菌棉签进行均匀涂抹，使样品和培养基充分接触。
4. 培养条件：将接种好的平板在适当的温度和湿度条件下进行培养，一般为37下培养24-48小时。
5. 统计菌落：培养结束后，观察平板上的菌落形成情况，对于较多菌落的平板，可以选择在菌落较少的区域进行计数。
使用放大镜或更高倍数显微镜对菌落进行统计。
6. 计算菌落数：根据统计的菌落数，可以根据所用的稀释倍数和接种体积计算出样品中的微生物菌落数量。
需要注意的是，平板菌落计数法需要仔细控制培养条件和接种技术，以减少误差。
同时，对于存在过多重叠菌落的情况，可能需要进行进一步的稀释和计数。
平板菌落计数法的流程
平板菌落计数法的流程平板菌落计数法呀，这可是微生物实验里超有趣的一个部分呢。
一、准备工作。
咱得先把要用的东西都准备好。
培养基那是必不可少的啦，就像盖房子得有砖头一样。
这个培养基要按照配方精确地调配哦，多一点少一点可能都会影响后面的结果呢。
还有培养皿，要干净又卫生的那种，要是培养皿脏兮兮的，微生物们住着也不舒坦呀。
接种工具也不能少，像接种环之类的，就像是把微生物运送到新家的小车子。
另外呢，咱还得有样品，这个样品可以是从各种地方来的，可能是从土壤里采集的，也可能是从食物上取下来的，就看咱要研究啥微生物啦。
二、样品处理。
拿到样品之后呀，可不能直接就往培养基上放。
如果是固体样品呢，得先把它弄成均匀的溶液，就像把一块糖在水里搅化了一样。
要是液体样品呢，也得进行一些适当的稀释。
为啥要稀释呢？这就像是人太多住不下，得分开住一样。
微生物太多了，在培养基上就会长成一大片，咱就数不清了。
所以要稀释到合适的浓度，这样微生物们在培养基上就能一个一个地长成小菌落，就像小朋友们排排坐一样，方便我们数呢。
三、接种。
这一步就像是送微生物们入住新房啦。
用接种工具蘸取处理好的样品，然后轻轻地在培养基表面划几下。
要轻轻地哦，不然把培养基弄破了可就不好了。
这个过程就像是在画布上画画一样，不过我们画的不是漂亮的图案，而是把微生物种在培养基上。
微生物们就在培养基这个新家里开始生长繁殖啦。
四、培养。
接种完了之后，就得把培养皿放在合适的环境里去培养啦。
不同的微生物喜欢的环境不一样呢。
有些微生物喜欢暖和的地方，就像我们人喜欢在温暖的房间里一样，那就把它们放在恒温箱里，温度调好。
有些微生物可能还需要特殊的气体环境，就像有些小宠物需要特殊的小窝一样。
在培养的过程中呀，微生物们就开始疯狂地生长，它们吃着培养基里的营养，一点点地变大变多。
五、计数。
经过一段时间的培养之后，就到了最激动人心的计数环节啦。
我们就看着培养皿上那些一个一个的小菌落，就像数星星一样。
大肠菌群平板计数法计算公式
大肠菌群平板计数法计算公式
构建类肠杆菌群计数技术是衡量卫生水中大肠杆菌群的一个重要手段。
大肠杆菌群平板计数法是大肠杆菌群计数法中一种比较常见的技术，主要是利用培养基的抗血清特异性效能吸附技术，将水样中大肠杆菌群从环境介质中捕获、纯净、总数计算。
其计数法主要有以下几步：
（1）采样：从相应环境或样品中采集所需细菌样本；
（2）分离：用特定培养基培养，在合适的条件下，将沾染大肠杆菌群的样本分离出来；
（3）分析：采用抗血清特异性吸附技术，将纯化的大肠杆菌群模拟出来；
（4）计数：合理设置计数条件，将模拟出来的大肠杆菌群数目计算出来，得出大肠杆菌群数量。
大肠杆菌群平板计数法可以用于解决卫生水建筑中节水管道、游泳池和地下水渠等设备的安装的卫生检查问题，因为这类设备的渗漏可能会引起重要的公共卫生及环境污染问题。
由此可见，大肠杆菌群平板计数法也给建筑的正常使用 and 经营提供了较为准确的分析依据。
大肠杆菌群平板计数法是测定建筑环境中大肠杆菌群的一种有效手段，它为建筑安装和使用提供了较高精度的细菌数量测定结果，可以有效预防建筑环境传染疾病的发生。
这种技术可以广泛用于水处理厂、公共卫生毒理实验室、游泳池、室内健身中心、精湛的安装建筑市场以及大型建筑工程布置。
菌液计数方法学
菌液计数方法学为了准确计数菌液中的微生物数量，科学家们发展出了多种菌液计数方法。
本文将介绍几种常用的计数方法，以助于实验者们在实验中获得准确的结果。
1. 平板计数法平板计数法是最常用的菌液计数方法之一。
首先，将待测菌液取出一定体积，均匀地涂布在固体培养基表面。
接着，将培养皿在适宜的环境条件下培养一段时间，待菌落形成后，使用显微镜进行观察和计数。
最后，根据每个培养皿中的菌落数量和所取体积，计算出菌液的浓度。
2. 涂片计数法涂片计数法适用于检测菌液中微生物的活跃度和生长状态。
首先，将待测菌液均匀地涂布在玻璃涂片上。
接着，将涂片放置在适宜的培养条件下，使其进行培养。
在培养一段时间后，使用显微镜观察并计数菌落数量。
最后，根据所涂布菌液的体积和菌落数量，计算出菌液的浓度。
3. 浊度计数法浊度计数法是一种简便、快速的菌液计数方法。
浊度指的是菌液中微生物细胞的浓度，可以通过光的散射来测量。
使用专门的浊度计，将待测菌液放入测量装置中，根据测量结果可以直接得出菌液中微生物的浓度。
总结一下，菌液计数方法学涵盖了平板计数法、涂片计数法和浊度计数法。
这些方法各有优劣，根据实验的需要和具体情况选择合适的方法进行菌液计数。
通过这些方法，科学家们可以准确地了解菌液中微生物的数量和浓度，为进一步的研究提供可靠的基础数据。
最后，我们要强调的是，在进行菌液计数时，实验者们需要严格控制实验条件，确保实验的准确性和可重复性。
同时，还应注意文档的撰写规范，避免出现与主题无关的内容，以保持文档的高质量和专业性。
希望本文所介绍的菌液计数方法能对实验者们在科研工作中提供帮助和指导，使其能够准确、高效地进行菌液计数和相关实验。
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稀释平板计数法实验目的学习稀释平板菌落计数的基本原理和方法。
实验内容用稀释平板菌落计数法对菌悬液进行计数。
实验原理平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释之后，其中的微生物充分分散成单个细胞，取一定量的稀释样液接种到平板上，经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落，即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。
统计菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。
但是，由于待测样品往往不易完全分散成单个细胞，所以，长成的一个单菌落也可能来自样品中的2—3或更多个细胞。
因此平板菌落计数的结果往往偏低。
为了清楚地阐述平板菌落计数的结果，现在已倾向使用菌落形成单位(cfu)而不以绝对菌落数来表示样品的活菌含量。
平板菌落计数法虽然操作较繁，结果需要培养一段时间才能取得，而且测定结果易受多种因素的影响，但是，由于该计数方法的最大优点是可以获得活菌的信息，所以被广泛用于生物制品检验（如活菌制剂），以及食品、饮料和水〔包括水源水〕等的含菌指数或污染程度的检测。
实验器材酿酒酵母菌悬液马铃薯培养基1m1吸管，平皿，试管，试管架，恒温培养箱等。
实验步骤1．无菌器材的准备(1) 无菌培养皿：取培养皿9套，包扎、灭菌。
(2) 无菌移液管的准备：取1m1移液管，在后部管口处用铁丝塞入棉花少许（长约1~1.5cm ），以防将菌液吸出，同时也可避免将外面的微生物吹入。
棉花要塞得松紧适宜吹时能通气但不使棉花滑下为准。
然后将移液管尖端放在4~5cm宽的长纸条一端呈45º角折叠纸条包住尖端，用左手捏住管身，右手将吸管压紧，在桌面上向前滚动，以螺旋式包扎起来，上端剩余纸条折叠打结后干热灭菌。
(3) 无菌水：取6支试管，分别装入4.5m1蒸馏水，加棉塞，灭菌。
2．样品稀释液的制备(1) 编号取无菌平皿9套，分别用记号笔标明10-4、10-5、10-6(稀释度)各3套。
另取6支盛有4.5m1无菌水的试管，依次标是10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6。
(2) 稀释用1m1无菌吸管吸取1m1己充分混匀的菌悬液(待测样品)，精确地放0.5ml至10-1的试管中，此即为10倍稀释。
将多余的菌液放回原菌液中。
将10-1试管置试管振荡器上振荡，使菌液充分混匀。
另取一支1m1吸管插入10-1试管中来回吹吸菌悬液三次，进一步将菌体分散、混匀。
吹吸菌液时不要太猛太快，吸时吸管伸入管底，吹时离开液面，以免将吸管中的过滤棉花浸湿或使试管内液体外溢。
用此吸管吸取10-1菌液1ml，精确地放0.5ml至10-2试管中，此即为100倍稀释。
……其余依次类推，整个过程如图所示。
放菌液时吸管尖不要碰到液面，即每一支吸管只能接触一个稀释度的菌悬液，否则稀释不准确，结果误差较大。
3．平板接种培养平板接种培养有浇注平板培养法和涂布平板培养法两种方法。
(1) 浇注平板培养法1) 取样用三支1ml无菌吸管分别吸取10-4、10-5、和10-6的稀释菌悬液各1ml，对号放入编好号的无菌平皿中，每个平皿放0.2ml。
不要用1ml吸管每次只靠吸管尖部吸0.2ml稀释菌液放入平皿中，这样容易加大同一稀释度几个重复平板间的操作误差。
2) 倒平板尽快向上述盛有不同稀释度菌液的平皿中倒人融化后冷却至45℃左右的培养基约15毫升／平皿，置水平位置迅速旋动平皿，使培养基与菌液混合均匀，而又不使培养基荡出平皿或溅到平皿盖上。
待培养基凝固后，将平板倒置于37℃恒温培养箱中培养。
由于细菌易吸附到玻璃器皿表面，所以菌液加入到培养皿后，应尽快倒入融化并己冷却至45℃左右的培养基，立即摇匀，否则细菌将不易分散或长成的菌落连在一起，影响计数。
(2) 涂布平板计数法：平板菌落计数法的操作除上述倾注倒平板的方式以外，还可以用涂布平板的方式进行。
二者操作基本相同，所不同的是后者先将培养基融化后倒平板，待凝固后编号，并于37℃左右的温箱中烘烤30min，或在超静工作台上适当吹干，然后用无菌吸管吸取稀释好的菌液对号接种于不同稀释度编号的平板上，并尽快用无菌玻璃涂棒将菌液在平板上涂布均匀，平放于实验台上20—30 min，使菌液渗入培养基表层内，然后倒置于的恒温箱中培养24—48h。
涂布平板用的菌悬液量一般以0.1ml较为适宜，如果过少，菌液不易涂布开；过多则在涂布完后或在培养时菌液仍会在平板表面流动，不易形成单菌落。
4．计数培养48h后，取出培养平板，算出同一稀释度三个平板上的菌落平均数，并按下列公式进行计算：每毫升中菌落形成单位(cfu)＝同一稀释度三次重复的平均菌落数×稀释倍数×5 一般选择每个平板上长有30—300个菌落的稀释度计算每毫升的含菌量较为合适。
同一稀释度的三个重复对照的菌落数不应相差很大，否则表示试验不精确。
实际工作中同一稀释度重复对照平板不能少于三个，这样便于数据统计，减少误差。
由10-4、10-5、10-6三个稀释度计算出的每毫升菌液中菌落形成单位数也不应相差太大。
平板菌落计数法，所选择倒平板的稀释度是很重要的。
一般以三个连续稀释度中的第二个稀释度倒平板培养后所出现的平均菌落数在50个左右为好，否则要适当增加或减少稀释度加以调整。
下面是食品中微生物的计数，可能包含多种菌（二）倾注培养1．操作方法：根据标准要求或对污染情况的估计，选择2~3个适宜稀释度，分别在制10倍递增稀释的同时，以吸取该稀释度的吸管移取1ml稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做两个平皿。
将凉至46℃营养琼脂培养基注入平皿约15ml，并转动平皿，混合均匀。
同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释液（不含样品）的灭菌平皿内作空白对照。
待琼脂凝固后，翻转平板，置36±1℃温箱内培养48±2h，取出计算平板内菌落数目，乘以稀释倍数，即得每克（每毫升）样品所含菌落总数。
2．倾注用培养基应在46℃水浴内保温，温度过高会影响细菌生长，过低琼脂易于凝因而不能与菌液充分混匀。
如无水浴，应以皮肤感受较热而不烫为宜。
倾注培养基的量规定不一，从12~20ml不等，一般以15ml较为适宜，平板过厚可影响观察，太薄又易于干裂。
倾注时，培基底部如有沉淀物，应将底部弃去，以免与菌落混淆而影响计数观察。
3．为使菌落能在平板上均匀分布，检液加入平皿后，应尽快倾注培养基并旋转混匀，可正反两个方向旋转，检样从开始稀释到倾注最后一个平皿所用时间不宜超过20min，以防止细菌有所死亡或繁殖。
4．培养温度一般为37℃（水产品的培养温度，由于其生活环境水温较低，故多采用30℃）。
培养时间一般为48h，有些方法只要求24h的培养即可计数。
培养箱应保持一定的湿度，琼脂平板培养48h 后，培养基失重不应超过15％。
5．为了避免食品中的微小颗粒或培基中的杂质与细菌菌落发生混淆，不易分辨，可同时作一稀释液与琼脂培基混合的平板，不经培养，而于4℃环境中放置，以便计数时作对照观察。
在某些场合，为了防止食品颗粒与菌落混淆不清，可在营养琼脂中加入氯化三苯四氮唑（TTC），培养后菌落呈红色，易于分别。
（三）计数和报告1．操作方法：培养到时间后，计数每个平板上的菌落数。
可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏。
在记下各平板的菌落总数后，求出同稀释度的各平板平均菌落数，计算处原始样品中每克（或每ml）中的菌落数，进行报告。
2．到达规定培养时间，应立即计数。
如果不能立即计数，应将平板放置于0－4℃，但不得超过24h。
3．计数时应选取菌落数在30~300之间的平板（SN标准要求为25~250个菌落），若有二个稀释度均在30~300之间时，按国家标准方法要求应以二者比值决定，比值小于或等于2取平均数，比值大于2则其较小数字（有的规定不考虑其比值大小，均以平均数报告）。
4．若所有稀释度均不在计数区间。
如均大于300，则取最高稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。
如均小于30，则以最低稀释度的平均菌落数乘稀释倍数报告之。
如菌落数有的大于300，有的又小于30，但均不在30~300之间，则应以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。
如所有稀释度均无菌落生长，则应按小于1乘以最低稀释倍数报告之。
有的规定对上述几种情况计算出的菌落数按估算值报告。
5．不同稀释度的菌落数应与稀释倍数成反比（同一稀释度的二个平板的菌落数应基本接近），即稀释倍数愈高菌落数愈少，稀释倍数愈低菌落数愈多。
如出现逆反现象，则应视为检验中的差错（有的食品有时可能出现逆反现象，如酸性饮料等），不应作为检样计数报告的依据。
6．当平板上有链状菌落生长时，如呈链状生长的菌落之间无任何明显界限，则应作为一个菌落计，如存在有几条不同来源的链，则每条链均应按一个菌落计算，不要把链上生长的每一个菌落分开计数。
如有片状菌落生长，该平板一般不宜采用，如片状菌落不到平板一半，而另一半又分布均匀，则可以半个平板的菌落数乘2代表全平板的菌落数。
7．当计数平板内的菌落数过多（即所有稀释度均大于300时），但分布很均匀，可取平板的一半或1/4计数。
再乘以相应稀释倍数作为该平板的菌落数。
8．菌落数的报告，按国家标准方法规定菌落数在1~100时，按实有数字报告，如大于100时，则报告前面两位有效数字，第三位数按四舍五入计算，菌落数为37750时，即可写成3．8×105。
固体检样以克（g)为单位报告，液体检样以毫升（ml）为单位报告，表面涂擦则以平方厘米（cm）报告。