ANA谱化验单解读ppt课件
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ana谱检查报告怎么看
ana谱检查报告怎么看ANA谱检查是自身免疫性疾病诊断的重要手段之一，通过检测人体内的抗核抗体水平，可以帮助医生判断是否存在自身免疫反应。
然而，对于大部分患者来说，ANA谱检查报告中的各项指标和所代表的意义往往让人感到困惑。
本文将尝试以通俗易懂的方式解读ANA谱检查报告，以帮助患者更好地理解自己的检查结果。
首先，我们需要了解ANA是什么。
ANA是抗核抗体的简称，是一种体内产生的抗体，特异性地与细胞核内的抗原结合。
正常情况下，人体会产生一定量的ANA，但如果其水平异常升高，就可能意味着存在某种自身免疫性疾病的可能。
在ANA谱检查报告中，最常见的指标是滴度和类型。
滴度指的是ANA阳性的程度，一般以1:40、1:80、1:160等表示，数值越高代表阳性程度越高。
而类型则表示抗核抗体对不同抗原的特异性。
常见的ANA类型包括抗dsDNA、抗Sm、抗RNP等等。
不同类型的抗体与不同的自身免疫性疾病相关联，因此对类型的分析有助于获取更具体的病情信息。
除了滴度和类型，ANA谱检查报告中还会标示抗体的荧光显示模式。
荧光显示技术是一种常用于ANA检测的方法，它通过荧光探针与抗体结合来展示抗体-抗原反应。
常见的荧光显示模式包括均质型、片块型、核膜型等等，不同的模式可以提供对不同自身免疫性疾病的提示。
在阅读ANA谱检查报告时，我们还需要关注一些辅助指标。
其中，补体水平是一项重要的指标。
正常情况下，补体是一种对细胞免疫反应具有重要作用的蛋白质。
而在自身免疫性疾病中，补体水平可能会降低。
因此，通过检测补体水平的变化，可以帮助确定自身免疫性疾病的可能性。
此外，还有一些其他指标如C反应蛋白（CRP）、沉积物等等也值得关注。
CRP是一种常见的急性炎症指标，它的升高可能与自身免疫性疾病的活动程度有关。
沉积物则是指通过离心沉淀后在尿液中的可见物，它与肾脏损伤等因素相关。
通过对这些辅助指标的观察，我们可以获取更多关于病情的线索。
需要注意的是，ANA谱检查结果仅仅是一个初步的筛查工具，不能单凭此结果作出诊断。
ANA谱化验单解读全解
40% - 95% 干燥综合征 13.3% SLE
SSB(La)
ANA:核仁型
EUROIMMUN
ANA核仁型常见抗体
靶抗原 PM-Scl 相关疾病 2% - 5% 硬皮病 8%肌炎 24% 重叠综合征 25-75%硬皮病
Scl-70
ANA:着丝点型
ANA 着丝点型常见抗体
靶抗原
染色体动力区蛋 白
• 1）局限性硬皮病：包括硬斑病、带状硬皮病、点
滴状硬皮病。 • 2）系统性硬化症 包括肢端硬皮病、弥漫性硬皮 病、CREST综合征（包括肢端硬化和毛细血管扩 张，钙质沿积，雷诺氏现象，食管蠕动异常症状， 此为系统性硬化的一个类型，予后较好。）
硬皮病诊断标准
• 局限性硬皮病根据典型皮肤改变即可诊断。 • 系统硬化症：美国风湿病学会（ARA）1998年标准： • A主要标准：掌指关节近端的硬皮变化，可累及整个肢体、 面部、全身及驱干。 • B次要标准： • ①手指硬皮病：上述皮肤改变仅限于手指； • ②手指尖有凹陷性瘢痕和指垫消失； • ③双肺基底纤维化。 • 凡是1项主要标准或2项次要标准可诊断，其他有助于诊断 的表现：雷诺现象，多发性关节炎或关节痛，食管蠕动异 常，皮肤病理学胶原纤维肿胀和纤维化，免疫检查ANA， 抗Scl-70抗体、和着丝点抗体（ACA）阳性。 • CREST综合征，具体其中5条症状的3条，或3条以上加着 丝点抗体阳性可诊断。
核浆点型（着丝点型）：着丝点（CENP） 、核点……
胞浆颗粒型：线粒体、Jo-1、核糖体……
细胞浆
胞浆纤维型：波形蛋白、原肌球蛋白和肌动蛋白…..
分裂期细胞阳性：纺垂体、中间体、中心粒……
ANA:核均质型
EUROIMMUN
ANA核均质型常见抗体
SSB(La)
ANA:核仁型
EUROIMMUN
ANA核仁型常见抗体
靶抗原 PM-Scl 相关疾病 2% - 5% 硬皮病 8%肌炎 24% 重叠综合征 25-75%硬皮病
Scl-70
ANA:着丝点型
ANA 着丝点型常见抗体
靶抗原
染色体动力区蛋 白
• 1）局限性硬皮病：包括硬斑病、带状硬皮病、点
滴状硬皮病。 • 2）系统性硬化症 包括肢端硬皮病、弥漫性硬皮 病、CREST综合征（包括肢端硬化和毛细血管扩 张，钙质沿积，雷诺氏现象，食管蠕动异常症状， 此为系统性硬化的一个类型，予后较好。）
硬皮病诊断标准
• 局限性硬皮病根据典型皮肤改变即可诊断。 • 系统硬化症：美国风湿病学会（ARA）1998年标准： • A主要标准：掌指关节近端的硬皮变化，可累及整个肢体、 面部、全身及驱干。 • B次要标准： • ①手指硬皮病：上述皮肤改变仅限于手指； • ②手指尖有凹陷性瘢痕和指垫消失； • ③双肺基底纤维化。 • 凡是1项主要标准或2项次要标准可诊断，其他有助于诊断 的表现：雷诺现象，多发性关节炎或关节痛，食管蠕动异 常，皮肤病理学胶原纤维肿胀和纤维化，免疫检查ANA， 抗Scl-70抗体、和着丝点抗体（ACA）阳性。 • CREST综合征，具体其中5条症状的3条，或3条以上加着 丝点抗体阳性可诊断。
核浆点型（着丝点型）：着丝点（CENP） 、核点……
胞浆颗粒型：线粒体、Jo-1、核糖体……
细胞浆
胞浆纤维型：波形蛋白、原肌球蛋白和肌动蛋白…..
分裂期细胞阳性：纺垂体、中间体、中心粒……
ANA:核均质型
EUROIMMUN
ANA核均质型常见抗体
抗核抗体检测与临床应用PPT【42页】
52KD, 60KD。
健康人
17%
抗SSA抗体阳性SLE和SS一级亲属 25%
• 抗SSB抗体： 常与抗 SSA抗体伴随出现
• Ro-52 为线性结构 ，可以非特异的与血 清中蛋白结合
(3)抗核糖体P蛋白抗体
抗原: 核糖体60S 亚基中的3种蛋白质
SLE
10%～40%
SLE的高特异性血清标志抗体，特异性为100％
抗nRNP/Sm和Sm抗体的结果解释
抗nRNP/Sm抗 体
73KD RNP
阴性
60KD
55KD
52KD
阳性 5 2 K D
D
32KD RNP
RNP
sm 2 9 K D
28KD
阳性
RNP 1 7 .5 K D
13.5KD
阴性 CO
阳性
Sm、 U1R N P、 RA、
SSA抗 体 阳 性
SSA抗 体 阳 性
Stinton et al., Lupus 15: 394-400, 2007
(3)抗组蛋白抗体
抗原: 组蛋白H1, H2A, H2B, H3, H4 (主要的靶抗原为H1和H2B)
功能: 核小体的组成结构
临床意义: 药物诱导性LE: 100%
(抗组蛋白抗体是该病唯一的标志性抗体)
SLE:
40% - 80%
抗原：动粒中的4种蛋白：A (17 kDa), B(80 kDa), C(140 kDa), D蛋白(50 kDa)。 着丝点蛋白B为主要的靶抗原
功能: 分裂期纺锤体的附着点
相关疾病: 硬化症: 局限型: (CREST综合征) 原发性胆汁性肝硬化
18% 80% - 95%
10%～20%
自身抗体 ppt课件
PPT课件
17
ANA检测的临床意义
PPT课件
18
• ANA在各种自身免疫性疾病中的阳性率
自身免疫性疾病
系统性红斑狼疮(SLE) 活动期
非活动期 药物诱导性红斑狼疮(DLE) 混合结缔组织病 (MCTD) 类风湿性关节炎(RA) 进行性系统性硬化症(PSS) 多发性肌炎及皮肌炎(PM/DM) 干燥综合症(SS) 慢性活动性肝炎(CAH) 溃疡性结肠炎(UC)
PPT课件
6
ANA
间接免疫荧 光法（IFA Indirect Fluorescen t Assay ）
ENA
免疫印迹法 （IB）
Westernblot LIA
PPT课件
7
2、ANA的检测方法 间接免疫荧光法
• 用核质丰富的培养细胞Hp-2细胞和灵长类 肝冰冻破片作为抗原基质。
• 用荧光显微镜观察ANA荧光着染强度和免疫 荧光图形。
PPT课件
5
ANA分类
根据细胞内靶抗原的理化特性和分布： • 抗DNA（dsDNA,ssDNA) • 抗组蛋白（Histone) • 抗非组蛋白（抗可溶性核抗原抗体anti-extractable
nuclear antigen antibodies,ENA和抗着丝点抗体ACA） • 抗核仁（Nucleolus）
PPT课件
4
ANA分类
根据细胞内靶抗原的理化特性和分布： • 抗DNA（dsDNA,ssDNA) • 抗组蛋白（Histone) • 抗非组蛋白（抗可溶性核抗原抗体anti-extractable
nuclear antigen antibodies,ENA和抗着丝点抗体ACA） • 抗核仁（Nucleolus）
看懂化验单PPT参考幻灯片
– 表现为便秘和多尿，4-5mmol/L可危及生命 – 治疗以处理原发病和促进肾脏排泄为原则
31
项目
肌酸磷酸激酶 （CK）
参考值
25-195U/L
乳酸脱氢酶（LDH） 115--220 U/L
碱性磷酸酶（AKP） 42--140 U/L
淀粉酶（AMS） 0--103 U/L
意义
骨胳肌疾病、甲状腺功能减退、急性心肌 梗塞时显著升高。
看懂化验单
王莉
血液科
1
内容提要
31 看懂化验单的重要性化验 单的作用
2 各检查项目的参考值，临 床意义及与护理的关系
2
化验单的作用
1、协助疾病诊断，推测疾病的预后 2、指导护士观察、判断病情和治疗护理的效果 3、帮助护士做出护理诊断及针对性的进行健康教育。
3
4
内容
尿常规
大便常规
血常规
肝功能
乙肝全套
4~10 X109/L
增高常见各种细菌感染、炎症等，降低常 见于血液病、自身免疫性疾病、化疗药物， 脾功能亢进等
20%-40%
增高常见于某些病毒或细菌所致的传染病， 降低常见于接触放射线，免疫缺陷等
中性百分比
50%-70%
增高常见于细菌感染、炎症，降低常见于 病毒性感染
10
11
wbc
显著增高>20*10^9/L Wbc淤滞>200*10^9/L
肾功能
5
尿常规
6
尿常规
肾病类
糖尿病类
泌尿感染类
酸碱度（4.6——8.0） 比重（1.005—1.030）
蛋白质（阴性） 隐血和红细胞（阴性） 颜色（黄色或深黄色） 指标改变提示肾功能损害
31
项目
肌酸磷酸激酶 （CK）
参考值
25-195U/L
乳酸脱氢酶（LDH） 115--220 U/L
碱性磷酸酶（AKP） 42--140 U/L
淀粉酶（AMS） 0--103 U/L
意义
骨胳肌疾病、甲状腺功能减退、急性心肌 梗塞时显著升高。
看懂化验单
王莉
血液科
1
内容提要
31 看懂化验单的重要性化验 单的作用
2 各检查项目的参考值，临 床意义及与护理的关系
2
化验单的作用
1、协助疾病诊断，推测疾病的预后 2、指导护士观察、判断病情和治疗护理的效果 3、帮助护士做出护理诊断及针对性的进行健康教育。
3
4
内容
尿常规
大便常规
血常规
肝功能
乙肝全套
4~10 X109/L
增高常见各种细菌感染、炎症等，降低常 见于血液病、自身免疫性疾病、化疗药物， 脾功能亢进等
20%-40%
增高常见于某些病毒或细菌所致的传染病， 降低常见于接触放射线，免疫缺陷等
中性百分比
50%-70%
增高常见于细菌感染、炎症，降低常见于 病毒性感染
10
11
wbc
显著增高>20*10^9/L Wbc淤滞>200*10^9/L
肾功能
5
尿常规
6
尿常规
肾病类
糖尿病类
泌尿感染类
酸碱度（4.6——8.0） 比重（1.005—1.030）
蛋白质（阴性） 隐血和红细胞（阴性） 颜色（黄色或深黄色） 指标改变提示肾功能损害
课件：抗核抗体(ANA)荧光模型判读解析及举例说明
• 靶抗原：着丝点蛋 白
核点型
• HEp-2：间期细胞 核内出现大小、数 目、强度不均的点 状荧光；分裂期细 胞浓缩染色体阴性， 周围可见点状荧光
• 肝片：肝细胞核内 出现大小、数目不 均一的点状荧光； 荧光强度与HEp-2 基本一致
• 靶抗原：Sp100
核膜型
• HEp-2：间期细胞 核呈现均匀荧光， 核周增强；分裂期 细胞浓缩染色体阴 性
• HEp-2：细胞浆内 粗颗粒样荧光
• 肝片： 肝细胞呈颗 粒样荧光，整个视 野呈细沙状荧光
• 靶抗原：线粒体
胞浆颗粒型：抗Jo-1抗体
• HEp-2：间期细胞浆 中出现颗粒到细块状 荧光，细胞核有时也 出现细颗粒荧光；分 裂期细胞浓缩染色体 阴性，染色体周围区 域呈致密的细颗粒荧 光
• 肝片： 荧光模式不 典型
靶抗原：IMPDH2 临床意义：出现在丙肝患者中，特别是经过病毒唑或干扰素治疗的， 此抗 体不是自免病特异性的抗体。
• 肝片：肝细胞核呈 现特征性环状荧光
• 靶抗原：板层素、 gp210
核仁型
• HEp-2：间期细胞 核仁阳性；分裂期 细胞浓缩染色体阴 性。
• 肝片：肝细胞核仁 阳性；荧光强度与 HEp-2基本一致
• 靶抗原：Scl-70、 PM-Scl、RNA多 聚酶、原纤维蛋白
核
PM-Scl
仁
型
的
多பைடு நூலகம்
种
模
型
• HEp-2：分裂中期 细胞中间水平方向 产生带状细颗粒荧 光，半数间期细胞 含有大量粗荧光点， 其余细胞为阴性。
• 肝片：荧光模式不 典型
疑难片讨论
均质+核点
胞浆颗粒型
核膜型+核均质型
核点型
• HEp-2：间期细胞 核内出现大小、数 目、强度不均的点 状荧光；分裂期细 胞浓缩染色体阴性， 周围可见点状荧光
• 肝片：肝细胞核内 出现大小、数目不 均一的点状荧光； 荧光强度与HEp-2 基本一致
• 靶抗原：Sp100
核膜型
• HEp-2：间期细胞 核呈现均匀荧光， 核周增强；分裂期 细胞浓缩染色体阴 性
• HEp-2：细胞浆内 粗颗粒样荧光
• 肝片： 肝细胞呈颗 粒样荧光，整个视 野呈细沙状荧光
• 靶抗原：线粒体
胞浆颗粒型：抗Jo-1抗体
• HEp-2：间期细胞浆 中出现颗粒到细块状 荧光，细胞核有时也 出现细颗粒荧光；分 裂期细胞浓缩染色体 阴性，染色体周围区 域呈致密的细颗粒荧 光
• 肝片： 荧光模式不 典型
靶抗原：IMPDH2 临床意义：出现在丙肝患者中，特别是经过病毒唑或干扰素治疗的， 此抗 体不是自免病特异性的抗体。
• 肝片：肝细胞核呈 现特征性环状荧光
• 靶抗原：板层素、 gp210
核仁型
• HEp-2：间期细胞 核仁阳性；分裂期 细胞浓缩染色体阴 性。
• 肝片：肝细胞核仁 阳性；荧光强度与 HEp-2基本一致
• 靶抗原：Scl-70、 PM-Scl、RNA多 聚酶、原纤维蛋白
核
PM-Scl
仁
型
的
多பைடு நூலகம்
种
模
型
• HEp-2：分裂中期 细胞中间水平方向 产生带状细颗粒荧 光，半数间期细胞 含有大量粗荧光点， 其余细胞为阴性。
• 肝片：荧光模式不 典型
疑难片讨论
均质+核点
胞浆颗粒型
核膜型+核均质型
ANA的检测及临床应用ppt课件
动性相关。在30-40%的系统性红斑狼疮患者中也可检出抗U1-rRNP抗体，但几乎总伴有抗Sm抗体。 抗Sm抗体： 系统性红斑狼疮的特异性抗体，与抗dsDNA抗体一起，是系统性红斑狼疮的诊断性指标，但阳性率为30%左右。 抗SS-A抗体： 与各类自身免疫性疾病相关，最常见于干燥综合征（40-80%）、也见于系统性红斑狼疮（30-40%）和原发性胆汁性
ppt课件.
2
抗核抗体的检测方法
间接荧光免疫法
➢ 具有完整的抗原谱（细胞核和细胞浆） ➢ 检测ANA的金标准，具有很高的特异性跟敏感性 ➢ 基质组合：HEp-2细胞+组织切片
免疫印迹法
➢ 先将混合性抗原做凝胶电泳，分离开不同的区带，然后把区带转印到硝酸纤维膜上，加入待检血清，最后用相应的酶标抗体使 相应的抗原带显色
症中不出现。
抗PM-Scl抗体： 常见于多肌炎与硬化症的重叠综合征中，50%的该抗体阳性患者为肌炎与硬化症的重叠综合征，抗PM-Scl抗体也可见
于单独的多肌炎患者中，阳性率为8%，在弥散型硬化症中的阳性率为2-5%。 抗Jo-1抗体： 见于多肌炎，阳性率为25-35%。常与合并肺间质纤维化相关。
3. ANA阳性的意义需结合临床资料综合分析，ANA阳 性并不能确立某种临床诊断，反ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ，ANA阴性也不 能排除自身免疫性病。
ppt课件.
13
4. IFANA作为总抗体筛查实验，应该结合抗体确认试 验为临床诊断起到更好的指导作用，必要时还应提 供抗体效价。
ppt课件.
14
抗核抗体的应用
抗U1-rRNP抗体： 高滴度的抗U1-rRNP抗体是混合性结缔组织病（MCTD，夏普综合征）的标志，阳性率95-100%，抗体滴度与疾病活
ppt课件.
2
抗核抗体的检测方法
间接荧光免疫法
➢ 具有完整的抗原谱（细胞核和细胞浆） ➢ 检测ANA的金标准，具有很高的特异性跟敏感性 ➢ 基质组合：HEp-2细胞+组织切片
免疫印迹法
➢ 先将混合性抗原做凝胶电泳，分离开不同的区带，然后把区带转印到硝酸纤维膜上，加入待检血清，最后用相应的酶标抗体使 相应的抗原带显色
症中不出现。
抗PM-Scl抗体： 常见于多肌炎与硬化症的重叠综合征中，50%的该抗体阳性患者为肌炎与硬化症的重叠综合征，抗PM-Scl抗体也可见
于单独的多肌炎患者中，阳性率为8%，在弥散型硬化症中的阳性率为2-5%。 抗Jo-1抗体： 见于多肌炎，阳性率为25-35%。常与合并肺间质纤维化相关。
3. ANA阳性的意义需结合临床资料综合分析，ANA阳 性并不能确立某种临床诊断，反ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ，ANA阴性也不 能排除自身免疫性病。
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4. IFANA作为总抗体筛查实验，应该结合抗体确认试 验为临床诊断起到更好的指导作用，必要时还应提 供抗体效价。
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抗核抗体的应用
抗U1-rRNP抗体： 高滴度的抗U1-rRNP抗体是混合性结缔组织病（MCTD，夏普综合征）的标志，阳性率95-100%，抗体滴度与疾病活
抗核抗体(ANA)报告解读及核型判读PPT课件
ANA的临床意义
ANA阳性
常见于系统性红斑狼疮、混合性结缔组织病、干燥综合征、 硬皮病、类风湿性关节炎等自身免疫性疾病。在这些疾病中 ，ANA的滴度往往与疾病活动性相关。
ANA阴性
正常人血清中ANA一般为阴性。但是需要注意的是，ANA阴 性并不能完全排除自身免疫性疾病的可能，因为一些自身免 疫性疾病患者的ANA可能为阴性。因此，需要结合其他临床 表现和实验室检查结果进行综合判断。
表示抗体在血清中的浓度，通常以1:40、1:80、1:160等比例呈现。滴度越高 ，抗体浓度越大，提示自身免疫性疾病的可能性增加。
核型
指ANA与细胞核内不同成分结合形成的特定荧光染色模式。常见核型包括均质 型、斑点型、核膜型、着丝点型等。不同核型与特定疾病相关联。
ANA与疾病关联性的解读
ANA阳性与多种自身免疫性疾病相关，如系统性红斑狼疮（SLE）、混 合性结缔组织病（MCTD）、干燥综合征（SS）等。
ANA核型的变化与疾病活动性
某些ANA核型的变化也与疾病活动性密切相关。例如，在SLE患者中，随着病情的好转 ，均质型ANA可能转变为斑点型或核仁型。因此，观察ANA核型的变化有助于评估疾
病的活动性。
在治疗选择和预后评估中的价值
指导治疗选择
ANA检测和核型判读可以为临床医生提 供治疗选择的依据。例如，对于ANA阳 性且滴度较高的患者，可能需要采用更 积极的治疗措施，如使用免疫抑制剂等 。
ANA核型的特异性
不同ANA核型与不同自身免疫性疾病的关联程度不同，如均质型ANA与SLE密切相关，而斑点型ANA则与混合性 结缔组织病（MCTD）等相关。因此，ANA核型的判读有助于自身免疫性疾病的精确诊断。
在疾病活动性评估中的价值
自身抗体的检测演示幻灯片
ANA检测的临床意义
ANA可见于多种自身免疫性疾病， 特别是结缔组织疾病，常作为结缔 组织疾病的诊断，病情判断和疗效 观察的指标
已证实ANA对很多自身免疫性疾病有 诊断价值。ANA的靶抗原为细胞核内的不 同生化成份，包括核酸、细胞核蛋白和核 糖体蛋白。在不同疾病中，特别是风湿性 疾病，其抗体谱有一定的特意性。在炎症 性风湿病中ANA阳性率在20%-100%之间， 其中类风湿性关节炎中ANA阳性率最低， 为20%-40%。所以，检测ANA对于不同类 型风湿病意义重大。
临床意义：cANCA可见于多种系统性血管炎。 主要见于Wengener’s肉芽肿，约占ANCA阳性 率的80~95%。cANCA被认为是活动性 Wengener’s肉芽肿和微多动脉炎的特异和敏 感的标志性抗体。还见于Churg-Strauss综合 征。
抗中性粒细胞胞浆抗体（核周型）
pANCA
荧光模式：
正常的健康人
女性＞男性，出现率 随年龄而增加
风湿性疾病患者亲属 ？孕妇
SLE患者使用IIF法测定ANA阴性的一些解释
技术方面
临床方面
经皮质激素或免疫抑制剂治疗。
终末期肾病。
隐蔽ANA：与循环中免疫复合物结合，沉积于组 织。
由于大量蛋白尿而从肾脏丢失。
ANA的荧光染色型别
根据产生的荧光模型、靶抗原的分布部位分类如下：
抗SSA／SSB抗体
自身抗原：SSA抗原是一个小核糖核蛋白，由 一个RNA分子和两种不同的蛋白质组成。蛋白 质的分子量为52KD和60KD。抗体直接针对蛋 白质的抗原决定簇。SSB抗原是分子量为48kD 的磷酸化蛋白。
临床意义；最常见于干燥综合征（SS）,也见 于SLE、原发性胆汁性肝硬化（PBC），偶见 于慢活肝。抗SSA抗体在新生儿红斑狼疮的发 生率几乎为100%。
ANA谱化验单解读ppt课件
30-50％
70-80％ 30-40％ 26％ 20-50％
4
ANA的命名
化学结构（如ds-DNA） 相关疾病（如干燥综合征的SS-A、SS-B） 首次发现的人（如Ro、La、Sm
）
细胞学定位（如：核仁、着丝点）
发现抗原时其所在的颗粒（如U1-nRNP）-核糖体蛋
白
5
抗核抗体的检测
筛查实验 间接免疫荧光法 总ANA 分型实验 免疫印迹法
1
抗核抗体
(antinuclear antibodies，ANAs)
传统定义：针对细胞核成分的自身抗体的总称。 广义定义：针对细胞内所有抗原成分的自身抗体的总称。
主要是IgG，无器官特异性和种属特异性，可以与不同来源的
细胞核起反应。
主要存在于血清中，也可存在于其它体液如滑膜液、胸腹水和 尿液中。
2
SSB(La)
12
EUROIMMUN 13
靶抗原 PM-Scl
相关疾病 2% - 5% 硬皮病 8%肌炎 24% 重叠综合征 25-75%硬皮病
Scl-70
14
15
靶抗原
染色体动力区蛋 白
相关疾病
80-95% 局限型硬皮病（SSc）
25% 雷诺现象
20％ 原发性胆汁性肝硬化（PBC）
16
EUROIMMUN 17
临床常见的自身免疫性疾病
类别 疾病 非器官特异性 系统性红斑狼疮 类风湿关节炎 干燥综合征 混合性结缔组织病 器官特异性 桥本甲状腺炎 Grave病 Addison病 I型糖尿病 萎缩性胃炎 溃疡性结肠炎 原发性胆汁性肝硬化 重症肌无力 自身免疫性溶血性贫血 特发性血小板减少性紫癜 自身抗原 细胞核成分（ DNA 、 RNP 、 Sm ） 变性IgG，丝集蛋白 细胞核（SSA、SSB） 细胞核（RNP） 甲状腺球蛋白、微粒体 甲状腺细胞表面TSH受体 肾上腺皮质细胞 胰岛细胞 胃壁细胞 结肠上皮细胞 胆小管细胞、线粒体 乙酰胆碱受体 红细胞 血小板
ANA谱化验单解读PPT课件
• 3、滤纸试验< 或=5mm/min或角膜染色指数>或=4为阳性。
• 4、下唇黏膜活检的单核细胞浸润灶>或=1/4mm2为阳性。
• 5、腮腺造影、腮腺同位素扫描、唾液流率中有任一项阳性。
• 6、血清抗SSA，抗SSB抗体阳性。
.
31
干燥综合征诊断标准
凡具备上述6项中的至少4项，并除外另一结蹄组 织病，如淋巴瘤、爱滋病、结节病、移植物抗宿 主病，则可确诊为原发性干燥综合征。已有某一 肯定结蹄组织病，同时有上述第1或第2，另又有 第3、4、5项中的2项阳性，可确诊为继发性干燥 综合征。
• CREST综合征，具体其中5条症状的3条，或3条以上加着 丝点抗体阳性可诊断。
.
30
干燥综合征诊断标准
• 1、有3个月以上的眼干涩感，或眼有沙子感，或每日需用3次 以上的人工泪液。凡有其中任一者为阳性。
• 2、有3个月以上的口干症，或进干食时须用水送下，或有反 复出现或持续不退的腮腺肿大。凡有其中任一者为阳性。
.
33
原发性胆汁性肝硬化
(1)有胆汁淤积的生化指标，主要是碱性磷酸酶升高；
(2) AMA阳性；
(3) 组织学上有非化脓性胆管炎和小叶间胆管损伤的表现。
• 符合以上三条中的两条即可确诊PBC。
• 关于PBC诊断的建议：
• （1）对于PBC特异性抗体阴性的患者，需肝穿刺活检以 明确诊断。此外，对于转氨酶水平异常升高和/或IgG升高 的患者，肝穿刺活检可以发现是否为其他疾病或合并其他 疾病。
ANA
核仁型：Scl-70、RNA多聚酶、PM-Scl和原纤维蛋白….. 核浆点型（着丝点型）：着丝点（CENP） 、核点……
胞浆颗粒型：线粒体、Jo-1、核糖体……
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100％ 100％ 20-40％ 85-95％ 30-50％ 70-80％ 30-40％ 26％ 20-50％
ppt课件.
4
ANA的命名
❖化学结构（如ds-DNA） ❖相关疾病（如干燥综合征的SS-A、SS-B） ❖首次发现的人（如Ro、La、Sm ） ❖细胞学定位（如：核仁、着丝点） ❖发现抗原时其所在的颗粒（如U1-nRNP）-核糖体蛋 白
ANA
核仁型：Scl-70、RNA多聚酶、PM-Scl和原纤维蛋白….. 核浆点型（着丝点型）：着丝点（CENP） 、核点……
胞浆颗粒型：线粒体、Jo-1、核糖体……
细胞浆 胞浆纤维型：波形蛋白、原肌球蛋白和肌动蛋白…..
分裂期细胞阳性：纺垂体、中间体、中心粒……
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7
ANA:核均质型
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抗核抗体谱的意义
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1
抗核抗体
(antinuclear antibodies，ANAs)
传统定义：针对细胞核成分的自身抗体的总称。
广义定义：针对细胞内所有抗原成分的自身抗体的总称。
主要是IgG，无器官特异性和种属特异性，可以与不同来源的 细胞核起反应。 主要存在于血清中，也可存在于其它体液如滑膜液、胸腹水和 尿液中。
(100％ )
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21
ANA谱 抗 SS-B抗 体 抗 Scl-70抗 体 抗 Jo-1抗 体
干 燥 综 合 征 （ 40-80％ ） 系 统 性 红 斑 狼 疮 （ 10-20％ ）
抗 SS-A和 SS-B抗 体 常 同时出现
见 于 25-75％ 的 进 行 性 系 统 性 硬 化 症 多 肌 炎 (25-35％ ) 常与合并肺间质纤维化相关
Sm
6.3% SLE
SSA(Ro)
40% - 95% 干燥综合征 34.7% SLE
SSB(La)
40% - 95% 干燥综合征 13.3% SLE
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12
ANA:核仁型
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EUROIMMUN 13
ANA核仁型常见抗体
PM-Scl
靶抗原
Scl-70
相关疾病
2% - 5% 硬皮病 8%肌炎 24% 重叠综合征
EUROIMMUN 8
ANA核均质型常见抗体
靶抗原 组蛋白
相关疾病
100% 药物诱导性SLE（唯一的标志抗体） 56.4% SLE 其它风湿性疾病少见
核小体 SLE（特异性99－100％，敏感性58％） dsDNA SLE（特异性99－100％，敏感性30－90％）
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9
抗核小体抗体
联合检测抗核小体抗体和抗dsDNA抗体， 增加SLE诊断的血清学命中率。
抗体 抗dsDNA抗体 抗核小体抗体 抗dsDNA抗体+抗核小体抗体
敏感性 40-65% 57-68%
75%
特异性 90-95%
95% 95%
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10
ANA:核颗粒型
HEp-2 细胞
灵长类肝
ppt课件.
EUROIMMUN 11
ANA核颗粒型常见抗体
靶抗原 U1-nRNP
相关疾病 95% - 100%混合性结缔组织病 (MCTD) 17.5% SLE
25-75%硬皮病
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14
ANA:着丝点型
ppt课件.
15
ANA 着丝点型常见抗体
靶抗原
染色体动力区蛋 白
相关疾病 80-95% 局限型硬皮病（SSc）
25% 雷诺现象
20％ 原发性胆汁性肝硬化（PBC）
ppt课件.
16
ANA：胞浆颗粒型
ppt课件.
EUROIMMUN 17
ANA胞浆颗粒型常见抗体
ppt课件.
5
抗核抗体的检测
筛查实验 间接免疫荧光法
总ANA
分型实验
免疫印迹法
RNP、ds-DNA Sm、SSA、Jo-1....
pp荧光模型、靶抗原的分布部位分类如下：
细胞核
核均质型：DNA、组蛋白和核小体…… 核膜型：板层素、gp210…….
核颗粒型
ENA：Sm、nRNP、SS-A、SS-B 细胞周期蛋白：I型（PCNA）和II型
乙酰胆碱受体 红细胞
血小板
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3
抗核抗体在常见自身免疫性疾病中的阳性率
自身免疫性疾病 系统性红斑狼疮
活动期 非活动期 药物诱导的红斑狼疮 混合性结缔组织病 类风湿性关节炎 进行性系统性硬化症 多肌炎及皮肌炎 干燥综合征 慢性活动性肝炎 溃疡性结肠炎 其它风湿病
ANA阳性率
95-100％ 40-80％
ENA（extractable nuclear antigens）是可提取性核抗原的总称
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19
ppt课件.
20
ANA谱
抗 U1-nRNP抗 体
阳 性 率 为 95-100％
高滴度是混合性结缔组 织 病 (M CTD) 的 标 志
抗 dsDNA 抗 Sm抗 体
SLE高 度 特 异 性 抗 体 ， 阳 性 率 70%-90%
靶抗原
tRNA合成酶： Jo-1，PL-7，PL12，OJ，EJ
抗线粒体抗体 （AMA）
相关疾病 25-35%多肌炎、皮肌炎 70%伴有肺间质纤维化的多肌炎
原发性胆汁性肝硬化（PBC）： 85% - 95%
核糖体P蛋白
SLE: 9.4%
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18
间接免疫荧光法法检测ANA时应注 意的问题
如果临床高度怀疑自身免疫性疾病，应同时 做ANA和抗ENA抗体，即使ANA(-)，也要进行 抗ENA抗体的检测，否则会漏检一些ANA如： 抗SSA/Ro、SSB/La或抗Jo-1抗体。
与疾病活动度相关，判断病情
对 SLE具 有 很 高的特异性
抗 dsDNA抗 体 同 时 检 测 可 提 高 SLE的 诊 断
阳性率仅 为 20-40％
抗 SS-A抗 体
与多种自身免疫病相关
干燥综合征 (40-80％ )
系统性红斑狼疮 (30-40％ )
原发性胆汁性肝硬化 新 生 儿 红 斑 狼 疮 (20％ )
ppt课件.
2
临床常见的自身免疫性疾病
类别 非器官特异性
器官特异性
疾病 系统性红斑狼疮 类风湿关节炎 干燥综合征 混合性结缔组织病
桥本甲状腺炎 Grave病 Addison病 I型糖尿病 萎缩性胃炎 溃疡性结肠炎 原发性胆汁性肝硬化
重症肌无力 自身免疫性溶血性贫血
特发性血小板减少性紫癜
自身抗原 细 胞 核 成 分 （ DNA 、 RNP 、 Sm ） 变性IgG，丝集蛋白 细胞核（SSA、SSB） 细胞核（RNP） 甲状腺球蛋白、微粒体 甲状腺细胞表面TSH受体 肾上腺皮质细胞 胰岛细胞 胃壁细胞 结肠上皮细胞 胆小管细胞、线粒体
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ANA的命名
❖化学结构（如ds-DNA） ❖相关疾病（如干燥综合征的SS-A、SS-B） ❖首次发现的人（如Ro、La、Sm ） ❖细胞学定位（如：核仁、着丝点） ❖发现抗原时其所在的颗粒（如U1-nRNP）-核糖体蛋 白
ANA
核仁型：Scl-70、RNA多聚酶、PM-Scl和原纤维蛋白….. 核浆点型（着丝点型）：着丝点（CENP） 、核点……
胞浆颗粒型：线粒体、Jo-1、核糖体……
细胞浆 胞浆纤维型：波形蛋白、原肌球蛋白和肌动蛋白…..
分裂期细胞阳性：纺垂体、中间体、中心粒……
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ANA:核均质型
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抗核抗体谱的意义
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1
抗核抗体
(antinuclear antibodies，ANAs)
传统定义：针对细胞核成分的自身抗体的总称。
广义定义：针对细胞内所有抗原成分的自身抗体的总称。
主要是IgG，无器官特异性和种属特异性，可以与不同来源的 细胞核起反应。 主要存在于血清中，也可存在于其它体液如滑膜液、胸腹水和 尿液中。
(100％ )
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ANA谱 抗 SS-B抗 体 抗 Scl-70抗 体 抗 Jo-1抗 体
干 燥 综 合 征 （ 40-80％ ） 系 统 性 红 斑 狼 疮 （ 10-20％ ）
抗 SS-A和 SS-B抗 体 常 同时出现
见 于 25-75％ 的 进 行 性 系 统 性 硬 化 症 多 肌 炎 (25-35％ ) 常与合并肺间质纤维化相关
Sm
6.3% SLE
SSA(Ro)
40% - 95% 干燥综合征 34.7% SLE
SSB(La)
40% - 95% 干燥综合征 13.3% SLE
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ANA:核仁型
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EUROIMMUN 13
ANA核仁型常见抗体
PM-Scl
靶抗原
Scl-70
相关疾病
2% - 5% 硬皮病 8%肌炎 24% 重叠综合征
EUROIMMUN 8
ANA核均质型常见抗体
靶抗原 组蛋白
相关疾病
100% 药物诱导性SLE（唯一的标志抗体） 56.4% SLE 其它风湿性疾病少见
核小体 SLE（特异性99－100％，敏感性58％） dsDNA SLE（特异性99－100％，敏感性30－90％）
ppt课件.
9
抗核小体抗体
联合检测抗核小体抗体和抗dsDNA抗体， 增加SLE诊断的血清学命中率。
抗体 抗dsDNA抗体 抗核小体抗体 抗dsDNA抗体+抗核小体抗体
敏感性 40-65% 57-68%
75%
特异性 90-95%
95% 95%
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ANA:核颗粒型
HEp-2 细胞
灵长类肝
ppt课件.
EUROIMMUN 11
ANA核颗粒型常见抗体
靶抗原 U1-nRNP
相关疾病 95% - 100%混合性结缔组织病 (MCTD) 17.5% SLE
25-75%硬皮病
ppt课件.
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ANA:着丝点型
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15
ANA 着丝点型常见抗体
靶抗原
染色体动力区蛋 白
相关疾病 80-95% 局限型硬皮病（SSc）
25% 雷诺现象
20％ 原发性胆汁性肝硬化（PBC）
ppt课件.
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ANA：胞浆颗粒型
ppt课件.
EUROIMMUN 17
ANA胞浆颗粒型常见抗体
ppt课件.
5
抗核抗体的检测
筛查实验 间接免疫荧光法
总ANA
分型实验
免疫印迹法
RNP、ds-DNA Sm、SSA、Jo-1....
pp荧光模型、靶抗原的分布部位分类如下：
细胞核
核均质型：DNA、组蛋白和核小体…… 核膜型：板层素、gp210…….
核颗粒型
ENA：Sm、nRNP、SS-A、SS-B 细胞周期蛋白：I型（PCNA）和II型
乙酰胆碱受体 红细胞
血小板
ppt课件.
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抗核抗体在常见自身免疫性疾病中的阳性率
自身免疫性疾病 系统性红斑狼疮
活动期 非活动期 药物诱导的红斑狼疮 混合性结缔组织病 类风湿性关节炎 进行性系统性硬化症 多肌炎及皮肌炎 干燥综合征 慢性活动性肝炎 溃疡性结肠炎 其它风湿病
ANA阳性率
95-100％ 40-80％
ENA（extractable nuclear antigens）是可提取性核抗原的总称
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ANA谱
抗 U1-nRNP抗 体
阳 性 率 为 95-100％
高滴度是混合性结缔组 织 病 (M CTD) 的 标 志
抗 dsDNA 抗 Sm抗 体
SLE高 度 特 异 性 抗 体 ， 阳 性 率 70%-90%
靶抗原
tRNA合成酶： Jo-1，PL-7，PL12，OJ，EJ
抗线粒体抗体 （AMA）
相关疾病 25-35%多肌炎、皮肌炎 70%伴有肺间质纤维化的多肌炎
原发性胆汁性肝硬化（PBC）： 85% - 95%
核糖体P蛋白
SLE: 9.4%
ppt课件.
18
间接免疫荧光法法检测ANA时应注 意的问题
如果临床高度怀疑自身免疫性疾病，应同时 做ANA和抗ENA抗体，即使ANA(-)，也要进行 抗ENA抗体的检测，否则会漏检一些ANA如： 抗SSA/Ro、SSB/La或抗Jo-1抗体。
与疾病活动度相关，判断病情
对 SLE具 有 很 高的特异性
抗 dsDNA抗 体 同 时 检 测 可 提 高 SLE的 诊 断
阳性率仅 为 20-40％
抗 SS-A抗 体
与多种自身免疫病相关
干燥综合征 (40-80％ )
系统性红斑狼疮 (30-40％ )
原发性胆汁性肝硬化 新 生 儿 红 斑 狼 疮 (20％ )
ppt课件.
2
临床常见的自身免疫性疾病
类别 非器官特异性
器官特异性
疾病 系统性红斑狼疮 类风湿关节炎 干燥综合征 混合性结缔组织病
桥本甲状腺炎 Grave病 Addison病 I型糖尿病 萎缩性胃炎 溃疡性结肠炎 原发性胆汁性肝硬化
重症肌无力 自身免疫性溶血性贫血
特发性血小板减少性紫癜
自身抗原 细 胞 核 成 分 （ DNA 、 RNP 、 Sm ） 变性IgG，丝集蛋白 细胞核（SSA、SSB） 细胞核（RNP） 甲状腺球蛋白、微粒体 甲状腺细胞表面TSH受体 肾上腺皮质细胞 胰岛细胞 胃壁细胞 结肠上皮细胞 胆小管细胞、线粒体