第一章抗原抗体反应

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图解抗原抗体反应类型和原理课件

形成的沉淀物少，上清液中可测出游离的抗体或抗
原的现象。
➢带现象包前括带(prozone)抗体过量时称为。
后代(postzone）抗原过量时称为。
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四、阶段性
第一阶段：抗原与抗体发生特异性结合阶段
特点：反应快第二阶段：反应可见阶段
特点：反应时间较长
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第三节抗原抗体反应影响因素
注意：解离后的抗原或抗体仍然保持其原有生物活性
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三、比例性（proportionality）
1、比例性是指抗原与抗体发生可见反应遵循一定的量比关系。 2、以絮状沉淀实验为例，受抗原抗体比例性的影响非常明显。
3、根据所形成的沉淀物及抗原抗体比例关系绘制反应曲线。
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3
教学内容：
第一节抗原抗体反应的原理第二节抗原抗体反应的特点第三节影响抗原抗体反应的因素第四节免疫学检测技术的类型
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第一节抗原抗体反应的原理
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一、抗原抗体的亲和力和亲合力
* 亲和力（affinity）：是抗体分子上一个抗原结合点与相应的抗原决定簇之间的相适应而结合的强度，是抗原与抗体间固有的结合力。
2、原因：抗原抗体的结合是分子表面的非共价键结合，因此形成的复合物不牢固。
3、抗原抗体反应动态平衡式如下：
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4、决定抗原抗体解离的因素
（1）抗体与相应抗原的亲合力。亲合力低的抗体与抗原形成的复合物较易解离。
（2）环境因素对复合物的影响。 PH过高或过低、增加离子强度均可破坏

免疫学中的抗原抗体反应

免疫学中的抗原抗体反应免疫学是研究机体对抗病原微生物和其他异物的防御机制及其调节的学科。

而抗原抗体反应则是免疫学领域中最为基础和重要的理论之一。

本文将探讨免疫学中的抗原抗体反应，对抗原抗体反应的组成、结构和功能进行详细的讲解，以期让读者对这一免疫学理论有更加深入的认识。

一、抗原抗体反应的组成抗原是指能够诱导机体免疫应答的物质，包括病原微生物的分子、细胞成分、内源性物质和外源性物质（如药物、化学物质等）。

抗体则是机体免疫系统产生的一类可溶性免疫蛋白，能够结合特定抗原并诱导一系列效应。

抗原抗体反应指的是抗原与其特异性抗体相互作用的过程，进而形成不同形态的复合物或者涉及到特定效应细胞的激活。

抗原与抗体结合的过程通常是一个高度特异性的过程，只有抗体能够识别并与抗原相互结合。

而抗原抗体反应也就是由这种特异性的物理化学互作用而诱导的。

二、抗原抗体反应的结构抗原抗体反应的产生与复杂的抗体分子的结构密切相关。

一般来说，抗体是一类Y型的结构，具有两个相同的轻链和两个相同的重链组成。

这种基本的结构通过具有不同类别的结构域和伸长段的重构和变形而形成了不同的抗体类别和亚类别，从而使得它们在特定抗原分子结构的识别和结合上具有多样性和复杂性。

除此之外，抗体还可以通过分子间交联形成更大的复合物，包括不仅是单分子的聚合体（如二聚体、六聚体等），还可能是跨分子的聚合体（如IgM天然免疫球蛋白等）。

三、抗原抗体反应的功能抗原抗体反应在机体免疫防御中发挥了多种功能。

其中最为显著的是导致抗原被清除的作用。

在体内，免疫攻击的目标通常是病原微生物和其他异物，这些病原体和异物表面都有一些特定的抗原分子，这些抗原分子能够与机体免疫系统中的抗体特异结合并诱导特定的细胞和分子效应。

当抗体与病原体或异物表面的抗原结合时，抗体就会形成一个复合物，这个复合物能够承载胆固醇、细胞因子、补体成分等。

通过这些载体，抗体就能够引起运输到肝脏和脾脏的粒细胞被激活从而清除病原体和异物。

抗原抗体反应

抗原抗体反应
第2页
• 4、前带现象:抗原抗体反应该抗体量过时,不出现可见反应。
• 5、后带现象:抗原抗体反应该抗原量过剩时,不出现可见反应。
• 1929年Heidelberger利用等量抗体检测浓度递增抗原，当抗原浓度较低，抗体浓度相对较高时，沉淀反应不显著；当抗原浓度增加到与抗体浓度百分比适当时，沉淀反应显著；继续增加浓度时，沉淀反应反而减弱。据此绘出双对应答曲线，曲线高峰区域，抗体、抗原浓度呈最适比，沉淀反应显著，称等价带。高峰区域左侧，因为抗体浓度过高，沉淀反应不显著，称前带；高峰区域右侧，因为抗原浓度过高，沉淀反应也不显著，称后带。抗体浓度过高所致结果称前带现象，抗原浓度过高所致结果称后带现象，统称为带现象。1977年Green把此现象称为钩状效应（hook effect），包含前后带现象。
抗原抗体反应
第11页
抗原抗体特异性是指抗原分子上抗原决
定簇和抗体分子超变区结合特异性，由二者之间查问结构互补决定。抗体分子VH 区和 VL 区上各自含有三个高变区共同组成抗原结合部位，该部位形成一个与抗原决定簇互补槽沟，决定了抗体特异性。所以，在抗原抗体反应免疫学试验中，能够用已知抗原或抗体来检测对应抗体或抗原。但较大分子蛋白质常含有各种抗原表位。假如两种不一样抗原分子上有相同抗原表位，或抗原、抗体间构型个别相同，皆可出现交叉反应。
抗原抗体反应
第10页
二、抗原抗体反应特点
• 抗原抗体反应特点主要有三性：即特异性、
百分比性、可逆性。
（一）特异性：
是抗原抗体反应最主要特征，这种特异性是由抗原决定簇和抗体分子超变区之间空间结构互补性确定。这种高度特异性在传染病诊疗与防治方面得到有效应用。伴随免疫学技术发展进步，还将在医学和生物学领域得到愈加深入和广泛应用，比如肿瘤诊疗和特异性治疗等。

第一章抗原抗体反应讲解学习

三、亲水胶体转化为疏水胶体
抗体和大多数抗原同属蛋白质。在通常的血清学反应条件下均带有负电荷，使极化的水分子在其周围形成水化层，成为亲水胶体，因此蛋白质不会自行凝集出现沉淀。当Ag与Ab结合后，表面电荷减少，水化层变薄；而且由于Ag-Ab复合物形成后，与水接触的表面积减少，由亲水胶体转化为疏水胶体。此时在电解质(如NaCl)的作用下，使各疏水胶体之间进一步靠拢、沉淀，形成可见的Ag-Ab复合物。
抗原抗体结合力示意图
l. 静电引力
➢ 抗原和抗体分子带有相反电荷的氨基和羧基基团之间相互的引力，称为静电引力，又称库伦引力。
➢例如，抗体分子上带电荷的碱性氨基酸的游离氨基(-NH3+)和酸性氨基酸的游离羧基 (-COO-)可与抗原分子上带相反电荷的对应基团相互吸引。这种引力的大小与两个相互作用基团间的距离平方成反比。
2.范德华引力
➢ 抗原和抗体相互接近时，由于分子的极化作用而出现的引力，称范德华引力。
➢结合力的大小与两个相互作用基团的极化程度的乘积成正比、与它们之间距离的 7 次方成反比，键能约为4.2-12.5kJ/moL。这种引力的能量小于静电引力。
3.氢键结合力
➢ 供氢体上的氢原子与受氢体原子间的引力。在抗原抗体反应中，羧基、氨基和羟基是主要供氢体，而羧基氧、羧基碳和肽键氧等原子是主要受氢体。
➢氢键结合力与供氢体和受氢体之间距离的6次方成反比，键能约20.9kJ/mol。
4.疏水作用力
➢ 两个疏水基团在水溶液中相互接触时，由于对水分子排斥而趋向聚集的力称为疏水作用力，或称为疏水键。
➢当抗原抗体反应时，抗原决定簇与抗体上的结合点靠近，互相间正、负极性消失，由静电作用形成的亲水层立即失去，从而促进抗原与抗体的相互吸引而结合。疏水作用力在抗原抗体反应中的结合是很重要的。提供的作用力最大，约占总结合力的 50%。

抗原抗体反应 PPT精品课程课件讲义

浓度才易出现可见的反应结果，故试验前应预先滴定抗原抗体最佳反应浓度。３.特异性与亲和力特异性与亲和力是影响抗原抗体反应
的关键因素，它们共同影响试验结果的准确程度。
二、反应环境条件
（一）电解质抗原抗体结合后，由亲水性向疏水性转换过程中必须要有电解质参与才能进一步使抗原抗体复合物表面失去电荷，破坏水化层，使复合物相互靠拢聚集，形成大块凝集、沉
决定的。
特异结合阶段
抗原抗体反应两个阶段
此阶段仅需数秒至数分钟，但并不出现可见的反应这一阶段抗原抗体复合物在适当的电解质、 PH、温度和补体等的影响下，进一步交联聚集，出现凝集、沉淀、溶解和补体结合介导的生物现象等肉眼可见的反应。
可见反应阶段
一、抗原抗体结合力抗原和抗体的结合为分子间结构互补的特异
二、比例性
比例性（proportionality)是指抗原
与抗体特异性结合反应
时，生成肉眼可见结合物的量与反应物浓度的关系，只有当二者浓度比例适当时，才出现可见反应。
从图2－l中可见，曲线的高峰部分是抗原
抗体分子比例合适的范围，称为抗原抗体反应
的等价带（zone of equivalence）。当抗体过量时，称为前带（prezone）；抗原过量时称为后带（postzone）。
三、亲水胶体转化为疏水胶体大多数抗原为蛋白质，抗体是球蛋白，它们在水中均溶解为胶体溶液，不会发生自然沉淀。
第二节抗原抗体反应的特点
一、特异性
抗原抗体反应的特异性（specificity）是指抗原分
子上的抗原决定簇和抗体分子超变区结合的特异性，由这两个分子之间空间结构的互补性决定的。多数天然抗原物质的构成十分复杂，其物质表面往往不止一种抗原决定簇，而两种不同抗原物质可具有部分相同或类似结构的抗原决定簇，称为共同抗原（common antigen）。

医学免疫学实验一(抗原抗体反应)

火箭免疫电泳
火箭免疫电泳
对流免疫电泳
对流免疫电泳实质上是由电泳定向加速的双向扩散
抗原在电泳时从负极向正极移动抗体由正极向负极移动
实验器材
1：载玻片、打孔器、三角烧瓶、移液管、洗耳球、10%的琼脂、记号笔
2：酒精灯、火柴、电炉、电泳仪、电泳槽
3：微量加样器、抗原及抗体样品
操作步骤
实验操作录像
实验操作录像
实验报告
实验原理实验方法实验结果及分析思考题
参考书籍及网站
谢谢你的阅读
知识就是财富丰富你的人生
现凝集、沉淀、细胞溶解和补体结合等反应。
抗原抗体反应的特点
1. 特异性
Ab 1 Ab2 Ab3
抗原抗体反应的特点
2.比例性
抗体过剩
抗原抗体比例合适
抗原过剩
抗原抗体反应的特点
3.可逆性
体外抗原抗体反应的影响因素
电解质温度酸碱度作用时间
抗原抗体反应类型
可溶性抗原与相应抗体结合所产生的沉淀反应颗粒性抗原与相应抗体结合所发生的凝集反应抗原抗体结合后激活补体所致的细胞溶解反应细菌外毒素或病毒与相应抗体结合所致的中和反应免疫标记的抗原抗体反应。
类型：环状沉淀反应
沉
淀絮状反应
反应
单向扩散
琼脂扩散
＋电泳
双向扩散
火箭电泳对流免疫电泳
单向扩散
Ab in gel
Ag
Ag
Ag
Ag
Diameter2
Ag Concentration
单向扩散
双向扩散
即将抗原和抗体分别加入琼脂对应的孔中，二者会向四周扩散，二者比例合适处在形成白色沉淀线。

第一章抗原抗体反应

亲和力(affinity)
抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原决定簇之间相适应而存在着的引力，是抗原抗体间固有的结合力
抗原抗体亲和力示意图
第一章抗原抗体反应
亲合力(avidity)
Avidity
• The overall strength of binding between an Ag with many determinants and multivalent Abs
第一章抗原抗体反应抗原抗体结合力示意图
l. 静电引力
➢ 抗原和抗体分子带有相反电荷的氨基和羧基基团之间相互的引力，称为静电引力，又称库伦引力。
➢ 例如，抗体分子上带电荷的碱性氨基酸的游离氨基(-NH3+)和酸性氨基酸的游离羧基 (-COO-)可与抗原分子上带相反电荷的对应基团相互吸引。这种引力的大小与两个相互作用基团间的距离平方成反比。
免疫学诊断技术概述 (4学时)
第一章抗原抗体反应
检测抗原制备技术
第一章抗原抗体反应
第一节抗原抗体反应的原理第二节抗原抗体反应的特点第三节影响抗原抗体反应的因素第四节免疫学检测技术的类型
第一章抗原抗体反应
第一节抗原抗体反应的原理
抗原抗体反应，主要是指抗原和抗体在体外结合所表现的反应。由于抗体主要存在于血清中，并且临床上多用血清做试验，所以体外实验中的抗原抗体反应曾称作血清学反应（serological reaction)。但是随着免疫学的发展，血清学的含义已不能概括目前的研究内容，现在多以抗原抗体反应代替血清学反应一词。 Ag:Antigen Ab:Antibody
第一章抗原抗体反应
三、亲水胶体转化为疏水胶体
抗体和大多数抗原同属蛋白质。在通常的血清学反应条件下均带有负电荷，使极化的水分子在其周围形成水化层，成为亲水胶体，因此蛋白质不会自行凝集出现沉淀。当Ag与 Ab结合后，表面电荷减少，水化层变薄；而且由于Ag-Ab复合物形成后，与水接触的表面积减少，由亲水胶体转化为疏水胶体。此时在电解质(如NaCl)的作用下，使各疏水胶体之间进一步靠拢、沉淀，形成可见的Ag-Ab复合物。

《抗原抗体反应》课件

夹心反应
总结词
指抗原和抗体结合后，其复合物可与其他物质结合，形成夹心结构所引发的反应。
VS
详细描述
在夹心反应中，抗原和抗体结合后，其复合物可以与另一种物质结合，形成一种夹心的结构。这种反应可以显著增加反应的灵敏度，常用于检测低浓度的抗原。例如在酶联免疫吸附试验（ELISA）中，酶标板上的抗体与抗原结合后，再与酶标记的抗体结合，形成夹心结构。
抗体
指由抗原刺激机体免疫系统产生的，能与相应抗原特异性结合的球蛋白。
抗原抗体的特性
特异性
抗原和抗体之间的结合具有高度的特异性，即一种抗原只能与相应的抗体发生结合反应。
亲和力
抗原和抗体之间的结合力称为亲和力，亲和力的大小决定了抗原抗体反应的强弱。
可逆性
抗原抗体结合后形成的复合物在一定条件下可以解离，即抗原抗体反应具有可逆性。
凝集反应
观察抗原抗体结合后颗粒物的凝集情况，判断反应结果。
荧光免疫技术
利用荧光物质标记抗体或抗原，通过荧光信号的强弱判断反应结果。
06
抗原抗体反应的注意事项
实验前的准备
实验材料准备
确保抗原和抗体溶液的浓度和纯度，选择适当的标记物如荧光染料、酶等。
实验设备检查
检查实验所需仪器设备，如离心机、显微镜、酶标仪等，确保其正常运行。
02
抗原抗体反应的原理
抗原抗体的结合力
02
01
03
静电吸引
抗原和抗体带有相反的电荷，通过静电吸引相互结合。
氢键
抗原和抗体中的极性基团形成氢键，增强结合力。
疏水相互作用
抗原和抗体的非极性基团相互靠近，形成疏水键。
抗原抗体的亲和力

抗原抗体反应本科

抗原抗体反应本科
目录
• 抗原抗体反应概述 • 抗原抗体反应的原理 • 抗原抗体反应的类型 • 抗原抗体反应的应用 • 抗原抗体反应的实验技术 • 抗原抗体反应的未来发展
01 抗原抗体反应概述
抗原抗体的定义
抗原
指能够刺激机体免疫系统产生特异性免疫应答，并能够与相应免疫应答产物在体内外发生特异性结合的物质。
抗体
指机体在抗原刺激下，由B淋巴细胞或记忆细胞分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。
抗原抗体的特性
专一性
抗原和抗体结合具有高度的专一性，只能与特定结构的抗原发生结合。
亲和力
抗原和抗体结合的强度和速度，取决于二者的亲和力。亲和力可受多种因素影响，如抗原抗体比例、空间构象等。
夹心反应
夹心反应是指抗原和抗体结合后，通过夹心的方式形成较大的免疫复合物。这种反应通常发生在抗原和抗体具有较低特异性的情况下，如某些肿瘤细胞与相应的抗体结合。
夹心反应的特点是可形成较大的免疫复合物，易于被吞噬细胞等效应细胞所识别和清除。
夹心反应在肿瘤免疫和自身免疫疾病的研究中具有一定的应用价值，有助于开发新的诊断和治疗方法。
04 抗原抗体反应的应用
在医学诊断中的应用
免疫组化技术
用于检测组织或细胞中的抗原，如肿瘤标志物、激素等，对疾病的诊断和预后评估具有重要意义。
酶联免疫吸附试验（ELISA）
用于检测体液中的抗原或抗体，如HIV、肝炎病毒等，广泛应用于临床检验和流行病学调查。
放射免疫分析
利用放射性标记的抗原或抗体进行检测，具有高灵敏度和特异性，常用于激素、肿瘤标志物等的定量检测。
着重要的作用，有助于快速清除病原体，

《抗原抗体反应》课件

免疫测定技术
酶联免疫吸附试验（ELISA）
01
利用抗原抗体反应的原理，通过酶标记技术检测样本中微量抗
原或抗体的方法。
免疫荧光技术
02
利用抗原抗体反应标记荧光物质，通过荧光显微镜观察荧光信
号，对细胞或组织中的抗原进行定位和定性分析。
免疫印迹技术
03
将抗原抗体反应与电泳技术结合，分离并检测复杂样本中的抗
免疫学领域的发展趋势
免疫疗法
随着免疫疗法的发展，抗原抗体反应在肿瘤、感染等疾病的治疗中具有广阔的应用前景。
免疫预防
利用抗原抗体反应，研发新型疫苗，提高预防传染病的效果。
THANKS
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亲和力定义
抗原和抗体结合时，它们之间的亲和力是指它们相互吸引的强度和稳定性。
亲和力常数
亲和力常数是用来描述抗原和抗体结合强度的物理量，其值越大表示结合越稳定。
亲和力影响因素
亲和力受到多种因素的影响，如抗原抗体的结构、电荷分布、溶剂环境等。
抗原抗体反应的动力学
反应速率
抗原抗体反应的动力学特征包括反应速率和反应机制。
等。
05
抗原抗体反应的实验操作
抗原抗体的制备
抗原的制备
选择适当的抗原物质，经过适当的处理和纯化，确保抗原的纯度和特异性。
抗体的制备
免疫动物以产生特异性抗体，通过细胞培养或杂交瘤技术制备单克隆抗体。
抗原抗体的纯化
亲和层析
利用抗原抗体特异性结合的特性，通过亲和层析介质分离纯化抗体。
凝胶过滤层析
利用分子大小差异进行分离，排除杂质，纯化抗原抗体。
详细描述
当抗原和抗体结合后，由于分子量增大，可形成肉眼可见的沉淀物。这种沉淀反应可用于检测抗原或抗体的存在，如免疫比浊法测定抗原的浓度。

抗原抗体反应简介

抗原抗体反应简介目录•1拼音•2英文参考•3概述•4抗原抗体反应的原理o 4.1亲水胶体转化为疏水胶体o 4.2抗原抗体结合力•5抗原抗体反应的特点o 5.1特异性o 5.2按比例o 5.3可逆性•6影响抗原抗体反应的因素o 6.1电解质o 6.2酸堿度o 6.3温度•7抗原抗体反应的类型1拼音kàng yuán kàng tǐ fǎn yìng2英文参考antigenantibodyreaction3概述抗原抗体反应（antigenantibodyreaction）是指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。

可发生于体内（invivo），也可发生于体外（invitro）。

体内反应可介导吞噬、溶菌、杀菌、中和毒素等作用；体外反应则根据抗原的物理性状、抗体的类型及参与反应的介质（例如电解质、补体、固相载体等）不同，可出现凝集反应、沉淀反应、补体参与的反应及中和反应等各种不同的反应类型。

因抗体主要存在于血清中，在抗原或抗体的检测中多采用血清作试验，所以体外抗原抗体反应亦称为血清反应（serologicreaction）。

4抗原抗体反应的原理抗原与抗体能够特异性结合是基于两中分子间的结构互补性与亲和性，这两种特性是由抗原与抗体分子的一级结构决定的。

抗原抗体反应可分为两个阶段。

第一为抗原与抗体发生特异性结合的阶段，此阶段反应快，仅需几秒至几分钟，但不出现可见反应。

第二为可见反应阶段，抗原抗体复合物在环境因素（如电解质、pH、温度、补体）的影响下，进一步交联和聚集，表现为凝集、沉淀、溶解、补体结合介导的生物现象等肉眼可见的反应。

此阶段反应慢，往往需要数分钟至数小时。

实际上这两个阶段以严格区分，而且两阶段的反应所需时间亦受多种因素和反应条件的影响，若反应开始时抗原抗体浓度较大且两者比较适合，则很快能形成可见反应。

4.1亲水胶体转化为疏水胶体抗体是球蛋白，大多数抗原亦为蛋白质，它们溶解在水中皆为胶体溶液，不会发生自然沉淀。

抗原抗体反应

是主要供氢体，而羧基氧、羧基碳和肽键氧等
原子是主要受氢体，能的大小取决于方向即氢
键具有高度的方向性，因此范德华力更具有特
异性。氢键结合力与供氢体和受氢体之间距离
的6次方成反比，键能约20·9kJ/mol。
4.疏水作用力
❖
两个疏水基团在水溶液中相互接触时，
由于对水分子排斥而趋向聚集的力称为疏水作
用力，或称为疏水键。当抗原抗体反应时，抗
抗原决定簇与抗体超变区必须紧密接触，才能有
足够的结合力，使抗原抗体分子结合在一起。
一、抗原抗体结合力
❖
抗原和抗体的结合虽然是互补性的特异性
结合，但并不形成牢固的共价键，只是通过非共价
键结合，结合方式类似蛋白质和细胞受体或酶与底
物之间的结合。抗原与抗体这种弱的结合力涉及下
列几种分子间的作用力。
l. 静电引力
❖ ×游离抗体浓度
❖
K代表抗体结合抗原的亲和力。K值
大的抗体与抗原牢固结合，不易解离，称该抗
体有高亲和力。
三、亲水胶体转化为疏水胶体
❖
抗体和大多数抗原同属蛋白质。在通
常的血清学反应条件下均带有负电荷，使极化
的水分子在其周围形成水化层，成为亲水胶体，
因此蛋白质不会自行凝集出现沉淀。当抗原与
❖
实验证明，在同一抗原抗体反应系统
中，不管抗原和抗体浓度如何变化，其沉淀反
❖ 比例性是指抗原与抗体发生可见反应需遵循一定的量比关系，只有当二者浓度比例适当时，才出现可见反应。以沉淀反应为例，在加入固定量抗体的一排试管中再依次加入一定体积的递增浓度的抗原进行反应时，发现随着抗原浓度的增加，沉淀很快大量出现，但超过一定范围之后，沉淀速度和沉淀量随抗原浓度增加反而迅速降低，甚至到最后不出现沉淀。沉淀反应的速度反映了参加反应的抗原和抗体浓度的适合程度，适合程度高反应快，反之则慢。通常把最迅速出现沉淀时的抗原抗体的浓度比或量比称为抗原抗体反应的最适比。

临床免疫学：抗原抗体反应

• 带现象(zone phenomenon)：在等价带前后分别由于抗体或抗原过剩，形成的沉淀物少，上清液中可测出游离的抗体或抗原。
• 前带(prezone)：抗体过量
• 后带(postzone)：抗原过量
三、可逆性（reversibility）
• 是指抗原与抗体结合成复合物后，在一定条件下可解离为游离抗原与抗体的特性
第二节抗原抗体反应的原理
一、空间互补关系: • 抗原表位与抗体超变区分子间的结构互补
性与亲和性 • 抗原表位与抗体超变区密切接触 • 高度互补使抗原抗体之间有足够的结合力 • 亲水胶体转化为疏水胶体
二、抗原抗体结合力：抗原抗体是非共价键结合，弱结合力
●静电引力(eletrostatic forces):是抗原抗体分子中带有相反电荷的氨基和羧基基团之间相互的引力 ,两个电荷距离越近,静电引力越大.
• 抗原大都是多价，抗体多为二价，等价带结合时，抗体的两个Fab段可分别与两个抗原分子表面的抗原表位结合，相互交叉连接成具有立体结构的巨大网格状聚集体，形成肉眼可见的反应物。
• 等价带（equivalence zone)：抗原抗体比例合适的范围
• 最适比(optimal ratio):抗原抗体复合物形成最多，上清液中几乎无游离的抗原与抗体存在
●范德华引力(vander Waals forces):抗原和抗体相互接近时,由于分子的极化作用而出现的引力 .
●氢键结合力(hydrogen bonding forces)：供氢体上的氢原子与受氢体原子间的引力
●疏水作用力(hydrophobic forces)：两个疏水基团在水溶液中相互接触时,由于对水分子排斥而趋向聚集的力.
第四节抗原抗体反应的影响因素

图解抗原抗体反应类型和原理ppt

• 作用力最小
精选课件
14
三、氢键结合力
• 概念：供氢体上的氢原子与受氢体原子间的引力。 • 供氢体：－COOH、－NH2和－OH • 受氢体：氧、氮
➢ 氢键结合力与供氢体和受氢体之间距离的6次方成反比。
➢ 最具特异性（必须供氢体和受氢体互补才能实现氢键的结
合）
精选课件
15
四、疏水作用力（疏水键）
静电引力的大小与两个相互作用基团间的距
离的平方成反比。
精选课件
13
二、范德华引力
概念：抗原和抗体相互接近时，各自所携带的原子与原子、分子与分子由于分子极化作用而出现的引力。
• 结合力的大小与两个相互作用基团的极化程度的乘积成正比、与它们之间距离的7次方成反比。
• 作用大小取决于二者分子空间构型的互补性
精选课件
6
精选课件
7
抗体与抗原结合是可逆的反应，在平衡时其
亲和常数（K）：
K值越大⇨抗体的亲和力越高⇨与抗原结合越牢固
精选课件
8
亲合力（avidity）：是指一个抗体分子与整个抗原表位之间结合的强度，与抗体结合价直接相关。另外也与亲和力强弱有关。
精选课件
9
精选课件
10
Avidity
• The overall strength of binding between an Ag with many determinants and multivalent Abs
概念：两种不同的抗原分子具有部分相同或类似结构的抗原表位，可与彼此相应的抗血清发生反应。
B
抗原抗体交叉反应示意图
精选课件
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二、可逆性（reversibility)

抗原抗体反应

之则慢。通常把最迅速出现可见反应时的抗原抗体的浓度比或量比称为抗原抗体反应的最适
比（optimal ratio）或称等价点（equivalence point）。抗原与抗体比例最合适的范围称等价
带（equivalencezone）。在最适比反应条件下，抗原抗体几乎全部结合成复合物，上清液中
基本无游离的抗原和抗体。当抗原和抗体浓度比超过此范围时，可见反应的速度和复合物的
(2)特异性与亲和力
特异性和亲和力是影响血清学反应的两个关键因素，它们共同影响试验结果的准确程度。免疫动物早期获得的抗血清特异性较好，但亲和力低;后期获得的抗血清一般亲和力较高，但长期免疫易使免疫血清中抗体的类型和反应性变得更为复杂。因此，用于诊断的试剂必须尽量选用特异性高、亲和力强的抗体，才能保证和提高试验结果的可靠性。
1、絮状沉淀反应
一系列试管中加入等量的抗体和递增量的抗原，在中性条件下37度保温1-2h，便可见到絮状的沉淀。可用于寻找抗原抗体反应的合适比例，检测抗原抗体的分子比。
寻找抗原抗体反应的合适比例
2、环状沉淀反应
在试管中加入抗体后，小心加入相应抗原，使抗原抗体步混合，37度保温10-20min，在二者界面上出现环状沉淀。不能用于定量测定。
（3）浓度:
抗体的浓度往往是与抗原相对而言。合适的浓度才出现明显的反应现象。因此许多试验应进行抗体预滴定，找出最适反应浓度。
二、环境因素
电解质: 生理盐水或缓冲液酸碱度: pH6～pH9 温度: 15℃～40℃，37℃最适
1.电解质
抗原抗体结合后由亲水性变为疏水性，此时易受电解质影响，如有适当浓度电解质存在，就会使抗原抗体失去一部分电荷而相互凝集或沉淀，出现可见反应;若无电解质存在，则不出现可见反应。通常在血清学试验中，以8·5g/LNaCl溶液作为抗原抗体的稀释液及反应液，其中 Na+和Cl-可分别中和胶体颗粒上的电荷，使胶体颗粒的电势下降，形成可见的沉淀物或凝集物。但如果电解质浓度过高，则会出现非特异性蛋白质沉淀，即盐析。补体参与的溶细胞反应，除需要等渗的NaCl 溶液外，还需适虽的Mg2+和Ca2+离子参与。

抗原抗体反应

理化性状：颗粒性Ag、可溶性Ag、 R型细菌Ag等出现不同的Ag-Ab reaction.
AD的种类与数目：单价Ag
（二）Ab
R型Ab ：等价带宽，易出现可见反应。来源 H型Ab ：等价带窄，易出现前带或后带现象
McAb:不宜用于凝集和沉淀反应。
浓度：相对Ag而言，比例要和适，故实验前需滴定，以求最适Ag与Ab比例。
抗原抗体结合力
• 大小都与两分子间的距离密切相关 • 只有两分子表面密切接触时，才能
产生足够的力使其结合 • 抗原与抗体之间高度的空间互补结
构恰好为这些结合力的发挥提供了条件
结合力的大小
表示
亲和力（affinity）
亲合力（avidity）
亲和力（affinity）：
一个抗体结合点与一个抗原表位间的结合强度。 “（single point－－－ single
网格学说（图）
切记！！！！
确定 Ag/Ab 的浓度非常重要，即在实验中需对Ag/Ab进行适当的稀释，调整二者的比例，产生可见反应。
一般原则：固定低含量（ Ag/Ab ）的浓度，稀释高含量的 (Ab / Ag)。
一般可溶性Ag稀释 Ag ，颗粒性Ag，稀释 Ab 。
三、可逆性（reversibility）或表面性
补体结合试验
观察测定溶血现象 +++
中和反应
病毒中和试验病毒感染性丧失
+
毒素中和试验
外毒素毒性丢失
++
免疫标记技术荧光免疫技术
检测荧光现象
++++
放射免疫技术
检测放射性
++++

第一章 抗原抗体反应

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免疫学中的抗原抗体反应

抗原抗体反应

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第一章抗原抗体反应

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抗原抗体反应本科

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抗原抗体反应简介

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