急性肾功能衰竭动物模型的复制
急性肾衰竭动物模型的复制及实验性治疗
ｉ ｎ ｆ ｕ ｓ ｅ ｄ ｔ ｈ ｒ ｏ ｕ ｇ ｈ ｔ ｈ ｅ ｅ ｘ ｔ ｅ ｒ ｎ ａ ｌ ｊ ｕ ｇ ｕ ｌ ａ ｒ ｖ ｅ ｉ ｎ ｔ ｏ ｔ ｈ ｅ ｒ ａ ｂ ｂ ｉ ｔ ｓ ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ ｔ ｒ ｅ ａ ｔ ｍ ｅ ｎ ｔ ｒｏ ｇ ｕ ｐ ． Ｓ ｅ ｒ ｕ ｍ ｕ ｒ ｅ ａ ｎ ｉ ￣ ｏ ｇ ｅ ｎ（ Ｂ Ｕ Ｎ） ，
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教学 中广泛应用．
肌肉注射 ５ ０ ％甘油复制急性 肾衰模型 的方法 可靠 ， 可作为综 合性实 验教学方 法在基础 实验
关键词 ： 急性 肾衰竭 ； 甘油 ； 综 合性 实验
中图分类号 ： Ｒ ５ ｔ ｅ Ｒｅ ｎ ａ ｌ Ｆａ ｉ ｌ ｕ ｒ ｅ ｉ ｎ Ｒａ ｂ ｂ ｉ ｔ ｓ ａ ｎ ｄ
急性肾功能损伤模型的建立及药物治疗
急性肾功能损伤模型的建立及药物治疗急性肾功能损伤（ARF）是一种常见的肾脏疾病，它是一种肾脏功能突然恶化的状况，通常是由于肾脏受到伤害引起的。
这种突然恶化的肾脏功能可能会对患者的生命带来严重的威胁。
因此，ARF的治疗至关重要。
目前，许多研究人员致力于探索ARF的模型建立和治疗方法。
建立ARF模型的意义建立ARF模型可以为研究人员提供理想的试验平台，以便模仿和研究ARF的生理和病理机制。
这有助于揭示ARF的发病机制，为ARF的早期诊断和治疗提供新的思路和方法。
目前，建立ARF模型已成为研究人员的一项重要研究工作。
ARF模型的建立通常采用动物实验，这种实验有利于模拟人体内的生理过程，并使研究人员可以检测肾脏的功能改变和病理学变化。
同时，ARF模型的建立还对剖析ARF的基本病理生理过程，如细胞凋亡、氧化应激、炎症反应等，提供了可靠的手段。
建立ARF模型的方法常见的ARF模型建立方法包括：肾脏缺血/再灌注（IR）模型、肾脏毒性模型、肾脏移植模型等。
肾脏缺血/再灌注（IR）模型是最常用的ARF模型之一，常用于研究组织缺血再灌注所引起的肾脏损伤。
通过切断供血，引起缺血，再经过缺血的肾脏部位重新供血，旨在模拟临床上肾脏血流严重不足（如休克、心力衰竭、手术等）后的再灌注现象。
在这一模型中，IR可由肾动脉夹层或肾切除实现。
缺血时间的选择通常会影响后续研究的有效性，而重新灌注时间长短的选择则会直接影响组织损伤的程度。
肾脏毒性模型是另一种常用的ARF模型，它通过注射有害物质来研究肾脏的损伤。
该模型可以使用多种有毒物质，如氨基糖苷类抗生素、非甾体抗炎药等，这些物质通过损伤肾小球滤过膜和肾小管细胞，而导致肾脏功能急剧恶化。
肾移植模型则主要用于研究肾移植后肾脏损伤和修复机制。
肾移植开展之后，信号分子、免疫分子、炎症和凋亡等都可能会协调起来导致肾脏损伤。
治疗ARF的药物目前，治疗ARF主要依赖于利尿剂等容积复苏和肾脏替代治疗（RRT）。
《机能学实验》实验教学大纲(临床等)
《机能学实验》实验教学大纲（供五年制本科临床医学、麻醉学等专业使用）Ⅰ前言机能实验学是以生理学、病理生理学、药理学为基础，通过对三学科实验教学的优化、融合、重组形成的一门独立的综合性实践课，是以动物实验和人体功能观察为手段，探讨人体机能活动规律及其在疾病状态或药物干预下的变化规律及其机制的综合性实验课程，是机能学教学的重要组成部分和重要的医学基础课程。
主要内容包括基本实验技能、基本的经典实验、综合性实验和设计性实验。
编写本大纲的目的是要求学生通过该课程的学习，掌握常用实验仪器的原理及使用方法；掌握常用实验动物的选择和局部手术操作；掌握常用实验溶液的配制方法：学会实验资料的收集、整理和数据处理；学会对实验结果的分析、整理和实验报告的正确书写，从而提高对功能学科知识的进一步理解，提高解决实际问题的综合能力、提高科学思维的能力，培养对科学工作严谨求实的作风，为今后从事实际工作和科学研究奠定基础。
本大纲适用于五年制本科临床医学、临床妇产、急救医学、眼耳鼻喉科学、医学美容、医学影像学、麻醉学、法医学专业（方向）医学生使用。
现将大纲使用中有关问题说明如下：一为了使教师和学生更好地掌握教材，大纲中每一实验均由教学目的、教学要求和教学内容三部分组成。
教学目的注明教学目标，教学要求分掌握、熟悉和了解三个级别，教学内容与教学要求级别对应，并统一标示（核心内容即知识点以下划实线，重点内容以下划虚线，一般内容不标示）便于学生重点学习。
二教师在保证大纲核心内容的前提下,可根据不同教学手段,讲授重点内容和介绍一般内容。
三总教学参考学时：68学时。
四使用教材：《机能学实验指导》，自编，石京山，4版，2006年。
Ⅱ正文实验一概述一教学目的（一）明确机能实验课的目的和要求，严格遵守实验室的规章制度，认真做好每一次实验，在实验中不断掌握动物实验的基本操作技术。
（二）掌握BL-410、BL-420E和ASB240U生物信号采集系统操作。
氯化汞与家兔急性肾功能不全
氯化汞与家兔急性肾功能不全摘要：【目的】复制急性中毒性肾衰动物模型，通过对肾功能指标的检测及肾脏形态学改变的观察，了解中毒家兔肾功能的改变。
判断、分析致病因素及导致急性肾衰的可能发病机制【方法】取家兔两只，分为实验组（急性肾功能不全）和对照组，分别对家兔行心脏采血和膀胱取尿，分别测定并比较两兔的血清肌酐和尿肌酐含量以及酚红排泄率，比较肾衰家兔和正常家兔的肾脏排泄功能，最后取两兔肾脏观察比较。
【结果】与正常家兔相比，急性肾衰家兔尿肌酐、尿/血肌酐比值（<10:1）、酚红排泄率均明显下降，血肌酐含量也有所下降，肾比重减小，肾脏外观苍白肿大，切面苍白，皮髓质分界不清。
【结论】氯化汞可直接损伤肾小球和肾小管引起器质性肾功能衰竭，引起肾小管上皮细胞变性坏死，肾血管收缩，肾血流减少，肾灌注压下降，肾小管排泌功能、肾小管上皮细胞重吸收功能障碍。
【关键词】氯化汞；急性肾功能不全；血肌酐；尿肌酐；尿肌酐/血肌酐；酚红排泄率【引言】肾脏是一个多功能器官，其主要功能之一是泌尿功能。
肾脏通过调节肾血流、肾小球滤过率、肾小管排泌与重吸收以及排泄体内代谢物质以维持机体内环境的稳定。
当肾血流量减少，肾小球滤过率下降或肾小管排泌重吸收功能障碍时，肾的泌尿功能受到影响，从而导致肾功能不全。
[1]1、实验材料和方法1.实验材料1.1实验对象：家兔1.2药品和试剂：氨基甲酸乙酯、生理盐水、葡萄糖、酚红、NaOH、醋酸、碱性苦味酸、肌酐标准应用液1.3实验器材：手术器械一套、试管、分光光度计、水浴锅、离心机2.实验方法2.1复制肾功能衰竭模型：于实验前一天，取两只家兔，称重，一只皮下或肌肉注射1％HgCl2(o．8～1．0ml／kg)造成急性肾功能衰竭，为实验组兔；另一只皮下或肌肉注射等量的生理盐水(1．0ml／kg)作为对照组兔。
2.2麻醉手术：家兔称重，按5 ml/kg体重剂量于耳缘静脉缓慢注射200 g/L氨基甲酸乙酯麻醉。
急性肾衰竭实验报告
一、实验背景急性肾衰竭（Acute Renal Failure，ARF）是指各种原因导致的肾功能在短时间内迅速下降，血肌酐和尿素氮水平急剧升高，尿量减少或无尿，严重时可危及生命。
本研究旨在通过建立急性肾衰竭动物模型，探讨急性肾衰竭的病理生理机制，为临床治疗提供理论依据。
二、实验目的1. 建立急性肾衰竭动物模型。
2. 观察急性肾衰竭动物模型的临床表现。
3. 分析急性肾衰竭动物模型的肾功能变化。
4. 探讨急性肾衰竭的治疗方法。
三、实验材料与方法1. 实验动物：健康成年大鼠30只，体重200-220g，雌雄不限。
2. 实验试剂与仪器：10%氯化钠溶液、10%葡萄糖溶液、生理盐水、尿液分析仪、血生化分析仪、电子天平等。
3. 实验方法：（1）动物分组：将大鼠随机分为三组，每组10只，分别为正常对照组、模型组、治疗组。
（2）模型建立：模型组大鼠给予10%氯化钠溶液腹腔注射，剂量为5ml/kg，建立急性肾衰竭模型。
治疗组在模型建立后，给予10%葡萄糖溶液腹腔注射，剂量为5ml/kg，作为治疗措施。
（3）观察指标：观察各组大鼠的生理指标、肾功能变化、尿量变化及死亡率。
（4）数据处理：采用SPSS 22.0统计软件对实验数据进行统计分析。
四、实验结果1. 生理指标：与对照组相比，模型组大鼠的血压、心率、呼吸频率等生理指标均无明显差异（P>0.05）。
2. 肾功能变化：与对照组相比，模型组大鼠的血肌酐、尿素氮水平显著升高（P<0.01），表明肾功能受损；治疗组大鼠的血肌酐、尿素氮水平较模型组显著降低（P<0.05），表明治疗效果显著。
3. 尿量变化：与对照组相比，模型组大鼠的尿量显著减少（P<0.01），表明尿量减少；治疗组大鼠的尿量较模型组显著增加（P<0.05），表明治疗效果显著。
4. 死亡率：模型组大鼠的死亡率为30%，治疗组大鼠的死亡率为10%，表明治疗组大鼠的死亡率明显降低。
急性肾衰竭动物模型研究进展
１ ． ３ 部分结扎腹主动脉模 型 叶志斌等 报 道腹腔注射
麻醉大 鼠， 右股动脉 内插 入 Ｐ Ｅ一５ ０导 管监测血 压 。做 腹部 正 中切 口， 切除右 肾。分离 、 暴露 出肠 系膜上 动脉及左 肾动脉 ， 在
故 目前实验研究应用较少 。 １ ． ２ 缺血／ 再灌 注肾损 伤模 型
治提供理论方 向。但模 型挤 压伤 后心 肌组 织亦继 发损 伤 ， 心 功 复制 的动物模型从病 因和对 肾脏 的损伤上更符合临床实际 。 能下降 ， 并可能导致死 亡 。同时 因其存 在个体 差异 ， 且作 用
力难以控制 ， 故而稳 定性 差 ， 难 以建立 典型 的 Ａ Ｒ Ｆ动物 模 型 ，
・
６ ５ ４・
中国中西医结合 肾病杂志 ２ ０ １ ３年 ７月第 ｌ ４卷第 ７期
Ｃ Ｊ １ Ｔ ＷＮ Ｊ ｕ ｌ ｖ ２ ０１ ３． Ｖｏ １ ． １ ４． Ｎ０ ． ７
．
急 性 肾衰 竭 动物 模 型研 究进 展
陶 琦① 姚 源璋②
急性肾衰竭 （ Ａ Ｒ ｔ ） 是一组 以肾小球 滤过 率迅速下 降 为特 采用雄性 ｓ Ｄ大 鼠， 戊 巴 比妥 钠腹 腔注 射麻 醉 ， 做 腹部 正 中切 点 的临床综合征 。其临床指标为肌酐 、 尿 素及 其他代谢 废物及 口， 暴露右 肾并切除 ， 钝 性分 离左 肾动脉 ， 靠近 。 肾门处 用无损 伤 体液 的潴 留， 重要 的临床表现与水钠潴 留 、 容 量超负荷 、 高血钾 血管夹夹闭肾动脉观察肾脏 由鲜红色逐渐 变为 暗红 ， ６ ０ ｍ ｉ ｎ后 及酸 中毒有 关 。运 用 动物 模 型有 助 于有 效地 认 识 Ａ Ｒ Ｆ的发 松开动脉夹 ， 恢 复灌 流， 逐层缝合关闭腹腔 。
急性肾功能衰竭动物模型的研究进展
２ 缺 血 性 Ａ Ｆ模 型 Ｒ
之 一 。操 作方 法 ： 鼠 禁 水 １ 大 ６ｈ后 ， ５ ％甘 油 １０ 以 ０ ０
ｋ
体重 分别 在 两 侧 后 肢 肌 肉 注射 Ｉ 。为 ＿ 于 多 次采 血 ， ｏ ＿ 厂便 也
可 使 用 家 兔 ； ５ ％ 甘 油 生 理 盐 水 按 １ ｒ／ 体 重 进 行 双 用 ０ ５ｒ ｋ 正 后 肢 大 腿 皮 下 注 射 。 一 般 在 ２ｈ后 出 现 血 红 蛋 白 尿 ，４ｈ即 ２ 有 尿 素 氮 升 高 ， 尿 或 无 尿 致 病 机 制 ： 射 甘 油 后 会 造 成 少 注
物模 型研 究方 面更取 得了许 多进 展。本 文将 就 Ａ Ｆ 型 的类 Ｒ 模
型 殳其 与 临 床 病 程 的 相 似 性 作 一 综 迂 。 ｌ Ａ Ｆ模 型 的 种 类 Ｒ
目 前 使 用 的 Ａ Ｆ模 型 种 类 很 多 ， 机 制 上 可 分 为 缺 血 性 Ｒ 从
和 中毒 性 Ａ Ｆ两 类 模型 ｕ 。制 备 缺皿 性 Ａ Ｒ Ｊ ＲＦ模 型 方 法
２ １ 一侧 肾缺 血／ ． 再灌 注 加 对 侧 肾切 除பைடு நூலகம்模 型
实验动物模型的制备
病理生理学实习指导一、缺氧模型的实验性复制㈠目的与原理通过给动物低氧环境，影响 Hb 的带氧能力及使组织不能利用氧等方法，复制不同类型 缺氧模型，经呼吸、机能状态、皮肤粘膜颜色等指标，显示了其不同症状与特征， 制模型的方法及原理又有大概的了解， 有利于深入和研究各缺氧症的发生、律。
低张性缺氧 一氧化碳中毒 氰化钾中毒1低氧性缺氧⑴将小白鼠至于250ml 广口瓶（内装钠石灰吸收二氧化碳）中观察上述指标。
⑵:将瓶塞紧，同时记录时间，每 5min 重复观察上述指标一次（如有变化则随时记录）直到动物死亡为止。
2•—氧化碳中毒性缺氧⑴如图8-3-1装好一氧化碳发生装置。
⑵）将小白鼠一只放入瓶中，观察上述指标。
⑶取甲酸3ml 放入试管内，加入浓硫酸2ml ,塞紧。
如气泡产生较少，可用酒精灯加热， 加速一氧化碳的产生（但不可过热以至液体连续沸腾， 因一氧化碳产生过快，动物迅速死亡， 血液颜色改变不明显）。
⑷在整个过程中，注意观察上述指标。
（注）：一氧化碳产生原理：H 2SO 4HCOOHCOT +H 2O△3•氰化钾中毒性缺氧⑴称小白鼠体重，观察上述指标，预先准备1%亚硝酸钠及10%硫代硫酸钠各10ml Kg -1, 以备急救用。
同时对复 发展和转归的规㈡实验对象 小白鼠。
㈢器材与药品缺氧瓶（装有管道瓶塞的和2ml 刻度吸管，粗天平（附砝码）钠石灰（氢氧化钠、氧化钙） 10%硫代硫酸钠溶液。
㈣步骤与观察250ml 广口瓶），酒精灯，一氧化碳发生器, ，剪刀，普通镊。
，甲酸，浓硫酸，0.125%氰化钾溶液, 1ml 注射器，5ml 1%亚硝酸钠溶液,表 8-3-1 观察指标呼吸（频率、幅度）机能状态 （活动度）皮肤粘膜颜色图8-3-1 一氧化碳发生装置⑵腹腔注射0.125%氰化钾9ml Kg-1，立即观察上述指标。
⑶待小白鼠出现共济失调或竖尾时，将准备好的急救药注入腹腔。
⑷重复步骤⑵，不予抢救。
⑸⑸将三种缺氧实验动物尸体打开腹腔，比较血液或肝脏颜色。
设计实验——两种家兔肾功能不全复制模型方法学的比较
两种家兔急性肾功能不全模型复制方法学比较设计者：###临床医学本科 2003级##班指导老师：###一、实验目的制备中毒性肾功能不全的家兔模型，比较高浓度甘油和氯化高汞两种方法复制动物模型的差异。
二、立题依据急性肾功能不全是由于肾小球滤过率急剧减少或肾小管发生变性坏死而引起的一种严重的急性病理过程，多数为少尿或者无尿型。
其中，肾性肾功能不全由肾实质器质性病变引起，临床上以肾缺血和肾毒物引发的急性肾小管坏死最多见。
常见的制备中毒性肾功能不全的动物模型有两种方法：肌注50％甘油和1％氯化高汞。
其中50％甘油由于能造成挤压综合症，产生大量坏死脱落的肌红蛋白，入血后形成肾小管腔内压、肾小球囊内压均升高，引发肾血流重布，肾皮质缺血，髓质淤血，造成肾小球滤过率降低而引起少尿。
1％氯化高汞在临床上可作为非金属器皿的消毒剂使用。
氯化高汞对人体组织有腐蚀作用，且其中的重金属Hg²+对各种动物均可造成“坏死性肾病”，故用来制备中毒性肾功能不全的动物模型，主要作用部位是肾脏近端小管。
临床上尿常规检验包括尿液的蛋白质定性检验和沉渣镜检两种。
正常情况下，尿液中蛋白质含量极微，不能用普通方法检出，在尿液沉渣中也只偶有少量白细胞，上皮细胞和个别红细胞。
如在尿液当中检出蛋白质，在尿液沉渣中发现有较多红细胞、白细胞、上皮细胞，特别是各种管型，即表示肾脏已有实质性损害。
肾功能发生障碍时，体内代谢产物尿素的排泄量减少，血浆中尿素氮含量升高。
因此，通过测定血浆中尿素氮的含量来反映肾的功能。
尿素与二乙酰肟在酸性溶液中经Fe³+的翠华发生缩合，并在氨基硫脲的存在下，生成3－羟基－5，6二甲基－1，2，4－三嗪，使溶液转为红色，利用比色法对血浆尿素氮进行定量测定。
参考文献[1] 赵自刚，牛春雨，侯亚利等. 甘油致家兔急性肾功能衰竭血黏度及凝血功能的变化.中国微循环，2004，8(3):146-148[2] 赵自刚，牛春雨，侯亚利等. 两种家兔急性肾功能衰竭模型复制方法的比较，河北北方学院学报，2004，21（5）三、实验方法及技术路线实验材料：家兔、兔手术台、手术器械、试管、试管夹、恒温水浴、注射器、玻璃分针、塑料插管、光学显微镜、载玻片、离心机、离心管、752型紫外分光光度计、50％甘油、1％Hgcl2 、生理盐水、1％普鲁卡因、50％葡萄糖溶液实验分组：甘油组：肌注50％甘油氯化高汞组：皮下注射1％HgCl2对照组：注射生理盐水观察指标：血浆尿素氮，尿液沉渣，尿蛋白实验方法与步骤：1、实验前24小时，分别为甘油组兔肌内注射50％甘油10.0ml/kg.bw，氯化高汞组兔皮下注射1％HgCl21.5ml/kg.bw，以制备急性中毒性肾功能不全模型。
家兔甘油中毒性急性肾功能衰竭模型的建立及病理学观察
l〇Chinese Journal of Rabbit Farming 6/2020武验研尧家兔甘油中毒性急性肾功能衰竭模型的建立及病理学观察田启会(甘肃畜牧工程职业技术学院，武威733006)摘要：为进一步明确贤功能衰竭的病理学特征，本试验采用家兔皮下注射甘油法成功建立了家兔甘油 中毒性肾功能衰竭病理模型，并对其血、尿的生化指标和肾脏的病理变化进行观察。
结果表明：在注射 甘油后48 h,试验组动物血清中肌酐、展素氮的含量明显升高；尿量明显减少、尿液來缩、尿蛋白、尿糖浓 度明显升高，尿中潜血呈阳性；肾脏呈现典型的中毒性腎病，肾小管内可见大量的蛋白管型。
关键词：家兔;甘油;肾功能衰竭;肌酐;尿蛋白中图分类号：S829.1 文献标识码:A文章编号=1005-6237(2020)06-0010-04Modeling Acute Renal Failure in Rabbits Subjected to Glycerinum andPathological ObservationTian Qi-hui(Gansu Polytechnic College of A nimal Husbandry and Engineering,Wuwei 733006j Abstract: In order to further clear and define the pathological features of Acute Renal Failure,this experiment adopts the method of injecting glycerol into subcutaneous rabbits successfully and established the model of Acute Renal Failure.lt is observed the biochemical indicator of blood and urine and renal pathological changes.The results showed that24 h after injection of glycerol,experimental animal serum creatinine,urea nitrogen content obviously increased,but the urine volume decreased significantly,the concentrated urine,the urine protein ,the urine sugar concentration significantly increased,the urine occult blood positive,kidney showed typical toxic nephropathy,renal tubules showed a large amount of protein tube.Key words: Rabbit;Glycerin;Renal Failure;Creatinine;Urine Protein急性肾功能衰竭(ARF)是一种以肾小球滤过率急 剧下降后引起氮质潴留及水、电解质、酸碱平衡紊乱为 特点的综合症因其发病原因非常广泛，且致死率 高，因此，严重危害着人和动物的健康。
急性肾衰
急性肾功能不全10级临床医学滨1班潘彬彬20102090127【实验目的】学习用氯化汞复制急性中毒性肾功能不全的动物模型；观察急性肾功能不全时蛋白尿、血肌酐、尿肌酐、酚红排泄率的变化及肾形态学的改变，并根据实验结果分析和讨论致病因素及导致急性肾功能不全的可能发病机制。
【实验材料】家兔；分光光度计，光学显微镜，离心机，恒温水浴锅；氯化汞，氨基甲酸乙酯，酚红，NaOH，醋酸，碱性苦味酸，肌酐标准应用液，生理盐水，葡萄糖。
【实验方法】1.急性肾功能不全模型复制：于实验前24h，取8只家兔，称重，一半作为实验兔，按0.8~1.0ml/kg体重剂量皮下或肌肉注射10g/L氯化汞造成急性肾功能不全备用（已经造好）；另一半皮下或肌肉注射等量生理盐水作为对照兔.2.动物手术（1）麻醉固定：按5ml/kg体重剂量经耳缘静脉注射200g/L氨基甲酸乙酯麻醉家兔。
兔麻醉后，仰卧固定。
（2）颈总动脉插管：颈部正中剪毛，切开皮肤分离一侧颈总动脉，结扎颈总动脉远心端，用眼科剪在动脉壁上剪一小口，向近心端方向插入动脉插管并结扎固定，以备采血。
（3）采集尿液：下腹部剪毛，从耻骨联合向上沿中线作约4cm的切口，沿腹白线打开腹腔，暴露膀胱，用注射器抽取膀胱内尿液2ml，作尿肌酐、尿常规检查用。
（4）膀胱插管，并结扎尿道。
手术完毕后，用温热的生理盐水纱布覆盖颈部和腹部的创口。
3.实验观察（1）血清和尿液肌酐含量测定（苦味酸沉定蛋白法）：静脉输液前打开动脉夹，经动脉导管放血3ml于干燥试管内，静置10min后，3000r/min离心15min，小心吸取血清置于另一干净试管中，测血肌酐用。
取硬质试管3支编号，分别为空白管、标准管及测定管。
按下表加样，混匀，37℃水浴30min，用分光光度计以波长510nm，空白管调零，读OD值。
然后，各管加50%乙酸溶液两滴，放置6min后，再测OD’值。
按（1）式计算血清肌酐（[Cr]p）：血清肌酐测定单位/ml 标准管测定管空白管肌酐标准应用液/(0.05mg/ml) 0.20 ——血清—0.20 —蒸馏水——0.20 碱性苦味酸 2.0 2.0 2.0[Cr]]p（mg%）=(OD测-OD’测)/(OD标-OD’标)*0.01*0.2*100 (1)按下表加样，混匀，放10min后加蒸馏水6.0ml，混匀，用分光光度计以波长530nm，空白调零，读OD值。
机能学设计性实验急性肾衰竭动物模型的建立讲解
【实验目的】
1.学习复制急性肾衰竭动物模型的方法 。 2.观察急性肾衰竭时机体的典型表现及血 酐水平的变化。 3.掌握急性肾衰竭的概念及发病机制 。
【实验原理】
急性肾功能衰竭 指各种原因在短期内引起肾脏泌尿功能
急剧障碍，以致机体内环境出现严重紊乱的 病理过程，临床表现有水中毒、氮质血症、 高钾血症和代谢性酸中毒等
S 0.01
内生肌酐清除率：血 尿中 中肌 肌酐 酐含 含量 量 尿量（ml/min） ml/min
肌酐(mg%)88.402 mol/L
【观察项目】
表2 处理前和处理后对照组家兔各指标变化
组 血压 呼吸 别 （mmHg)
处理前│处理后
尿量 心率 血肌酐 尿肌酐 内生肌酐清除率
（滴/分） （次/分） （ %）
（%）
（%）
处理前│处理后
处理前│处理后 处理前│处理后 处理前│处理后
1兔 2兔 3兔 4兔 5兔 6兔
表3 处理前和处理后实验组家兔各指标变化
组 血压 呼吸 尿量 心率 血肌酐
尿肌酐 内生肌酐清除率
别 （mmHg)
处理前│处理后
（滴/分） （次/分） （ %）
（%）
急性肾功能不全的分类 根据病因学，临床上将急性肾功能不全
分为肾前性、肾性、肾后性三种。
急性肾功能的发病机制
肾缺血
肾中毒
血流动力学异常
肾小管损伤
皮质缺氧
髓质充血 肾小管阻塞 外髓部供氧
原尿反漏
GRF
少尿
滤过膜受损 滤过系数
【实验动物】
健康家兔，雄性，体重1.5~1.8Kg
【实验器材和药品】
• 20%乌拉坦溶液、庆大霉素注射液（1ml:4万单位）、 150U/ml肝素、0.9%生理盐溶液、苦味酸
肾衰实验
肾脏的泌尿功能与急性肾功能不全一、实验目的1.观察神经体液等因素对尿生成的影响。
2.学习急性中毒性肾功能不全动物模型的复制。
3.了解中毒家兔肾功能的改变，并分析导致急性肾功能不全的发病机制。
4.观察利尿剂对急性肾功能不全的治疗效果，并分析药物作用机制。
二、实验原理㈠肾脏的功能正常的肾功能主要是泌尿，通过泌尿排出代谢废物，并维持水、电解质和酸碱平衡，保持机体内环境的稳定；红细胞生成素、1,25-二羟维生素D3等物质；并使某些激素，如胃泌素、甲状旁腺激素在肾内灭活，因而又与机体许多功能代谢活动密切相关。
㈡影响尿生成的因素尿生成的过程包括肾小球的滤过、肾小管和集合管的重吸收及分泌三个环节，凡能影响上述过程的因素，都可能影响尿的生成，从而引起尿量的变化。
1．影响肾小球滤过的因素⑴滤过分数即滤过膜的面积和通透性。
⑵有效滤过压其中肾小球毛细血管血压是经常变动的因素。
⑶肾血流量的变化受肾自身调节和神经体液调节，主要影响滤过平衡的位置。
2．肾小管和集合管的重吸收及分泌的调节⑴肾内自身调节①小管液中溶质的浓度临床上常用的利尿方式－渗透性利尿。
②球-管平衡近端小管定比重吸收Na＋、H2O约65％～70％，那么，尿中排出的溶质和水不致因肾小管滤过率的增减而出现大幅度的变动。
⑵神经因素当肾交感神经兴奋时，作用于入球小动脉、出球小动脉，入球小动脉口径缩小更为明显，肾小球毛细血管血流量减少，毛细血管血压下降，那么，有效滤过压降低，肾小球滤过率降低；还激活RAAS，增加肾小管重吸收NaCl、H2O；直接增加近端小管、髓袢上皮细胞重吸收Na＋、Cl－、H2O。
⑶体液因素①抗利尿激素提高远曲小管和集合管上皮细胞对水的通透性；也增加髓袢升支粗段对NaCl的主动重吸收和内髓部集合管对尿素的通透性。
由于抗利尿激素主要感受血浆晶体渗透压、循环血量和动脉血压，因此，水的利尿效果较生理盐水好。
②肾素-血管紧张素-醛固酮系统血管紧张素Ⅱ的作用为：刺激醛固酮的合成，调节远曲小管、集合管Na＋、K+的转运；刺激近端小管重吸收NaCl；刺激抗利尿激素的分泌。
肾疾病研究的常用动物模型
转基因的方法
融合法，包括细胞融合，微细胞介导融合 等； 化 学 法 ， 包 括 DNA- 磷 酸 钙 沉 淀 法 、 DEAE-葡聚糖法、染色体介导法等； 物理法，包括显微注射法、电脉冲法、细 胞冻存法等； 病毒感染法，包括重组DNA病毒感染、 重组RNA病毒感染等。
系膜增殖性肾炎模型的制备
将SD大鼠一次性尾静脉注射ATS 2 ml, 于注射后3h, 24h及3天～3个月不等时间取肾脏作病理检查。每 天检测尿肌酐和尿蛋白。
动物模型特点
受试大鼠仅有异体抗体相，而无自体抗体相， 即表现为注射异体抗Thy-1抗体后，产生系膜 细胞溶解及迅速修复过程，病变呈一过性； 系膜损伤过程为补体依赖性，用蛇毒消除补 体不影响抗Thy-1抗体与系膜细胞结合，但可 减轻和阻止系膜细胞损伤和溶解过程； 病变过程有白细胞、血小板积聚的炎症反应； 修复过程迅速，30～45天之内病变已几乎全 部修复，说明肾小球系膜细胞有较强的修复能 力及血管再生能力。
缺血性ARF(肾动脉钳闭法 肾动脉钳闭法) 缺血性 肾动脉钳闭法 制备方法
体重200～300g Wistar雄性大鼠, 30mg/kg的 硫喷妥钠腹腔注射麻醉后，固定于手术台上， 腹部正中切口，钝性分离双肾包膜，用无创 伤动脉夹钳夹双肾动脉或肾蒂60min后，松 夹恢复肾灌注，此时肾脏颜色先有深红转为 苍白或暗红色，再变成鲜红色，表明再灌注 成功。上述病变于再灌注24～48h达到高峰， 1周后基本恢复正常。另外，也可用钳夹一 侧肾蒂待再灌注成功后，再切除另一侧肾脏 的方法来制备此模型。
家兔急性缺血性肾功能衰竭实验的改进及应用
家兔急性缺血性肾功能衰竭实验的改进及应用崔艳秋;夏晓芳;赵海燕;王俊亚;张冬梅;王岩眉【期刊名称】《卫生职业教育》【年(卷),期】2006(24)17【摘要】急性肾功能衰竭是各种原因引起的肾的泌尿功能在短期内急剧降低。
因严重的肾缺血和肾中毒引起的急性肾小管坏死是急性肾功能衰竭的常见原因。
升汞中毒性肾病是一种比较容易复制的动物模型，其主要病变是肾小管的变形坏死，伴有严重的肾功能衰竭。
在基础医学教学中，急性肾功能衰竭多采用此模型。
但是，此模型需要实验前一天给家兔肌肉注射升汞溶液引起中毒性肾病，当实验时动物已处于病理状态，无法观察正常肾的泌尿功能，缺乏直观对比，有一定的局限性。
为此，经过长期的实践摸索，笔者探索出一种行之有效的家兔急性缺血性肾功能衰竭模型的制作方法，可广泛应用于基础医学肾功能综合实验以及缺血性肾功能损伤的临床研究，有一定的应用价值。
【总页数】1页(P78-78)【作者】崔艳秋;夏晓芳;赵海燕;王俊亚;张冬梅;王岩眉【作者单位】首都医科大学燕京医学院,北京,101300;首都医科大学燕京医学院,北京,101300;首都医科大学燕京医学院,北京,101300;首都医科大学燕京医学院,北京,101300;首都医科大学燕京医学院,北京,101300;首都医科大学燕京医学院,北京,101300【正文语种】中文【中图分类】G424.31【相关文献】1.山莨菪碱治疗兔缺血性急性肾功能衰竭的实验研究2.实验性急性肾功能衰竭家兔肾组织学损伤与血液流变学的关系3.冬虫夏草对大鼠缺血性急性肾功能衰竭治疗作用的初步实验观察4.内毒素介导家兔急性肾功能衰竭的实验研究5.实验性急性肾功能衰竭家兔血液流变学的变化因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
肾功能衰竭实验报告
肾功能衰竭实验报告肾功能衰竭是指由于肾脏不能正常执行其功能而导致的一系列生理和代谢异常。
肾脏是人体排泄系统的重要器官，其主要功能包括排尿、水电解质平衡的调节、酸碱平衡的调节以及代谢废物的排除等。
因此，肾功能衰竭对人体健康和生命是非常严重的威胁。
本次实验旨在研究和了解肾功能衰竭的发生原因以及可能的治疗方法。
实验方法：1. 建立肾功能衰竭模型：将实验动物分为实验组和对照组，实验组接受肾脏损伤诱导剂（例如氨基苯酚和甲醇等）的处理，对照组接受生理盐水的处理。
2. 检测肾功能指标：使用尿液分析仪检测尿液中的肌酐、尿素氮等指标；使用血液分析仪检测血清中的尿素氮、尿酸等指标。
3. 观察动物行为和外观变化：观察实验动物的饮食情况、体重变化、尿量以及皮毛的光泽度等。
实验结果：1. 肌酐和尿素氮的增加：肾功能衰竭模型组中，肌酐和尿素氮的水平显著高于对照组，表明肾功能受损。
2. 尿液变化：肾功能衰竭模型组中，尿液量显著减少，尿液中的尿酸等代谢废物含量明显增加。
3. 动物行为和外观变化：肾功能衰竭模型组中的实验动物出现食欲不振、体重下降、皮毛枯黄等症状。
讨论和结论：1. 肾功能衰竭的发生机制：肾脏损伤诱导剂可以引起肾小管坏死、肾小球损伤等，导致肾功能衰竭的发生。
2. 肾功能衰竭的治疗方法：目前，肾功能衰竭的主要治疗方法包括透析和肾移植。
透析通过人工方式替代肾脏的排泄功能，帮助患者维持生命；肾移植则是通过将健康的肾脏移植到患者体内来替代受损的肾脏。
3. 实验局限性：本次实验只是建立了肾功能衰竭模型，没有进行进一步的治疗措施实验。
此外，实验动物和人体之间存在一定的差异，因此实验结果还需要进行临床验证。
综上所述，肾功能衰竭是一种严重的疾病，对人体健康和生命构成极大威胁。
通过建立肾功能衰竭模型，可以研究该疾病的发生原因以及可能的治疗方法，为今后的临床治疗提供重要的参考依据。
甘油致大鼠肾衰竭的动态病理学观察
207摘 要：目的 了解大鼠实验性急性肾衰竭的病理学变化过程，为掌握急性肾衰竭的发病机制、临床治疗提供更多参考依据。
方法 肌注甘油复制ARF模型，观察模型大鼠的临床症状，随机处死大鼠观察肾脏病理变化并测定血清BUN、Cr水平。
结果 造模1 h，出现肾小管上皮细胞刷状缘丢失及肌红蛋白管型与透明管型，至造模4d刷状缘再生，管型减少。
造模6h开始出现肾小管坏死，12h 至3 d肾小管发生严重的凝固性坏死，4d后偶见或未见肾小管坏死。
BUN从12h开始上升，在18～24h段上升幅度较大，48h达到峰值，4～7d趋于平稳。
Cr在造模1h内急速上升至峰值，4～7d趋于平稳。
结论 肾脏病理变化过程、BUN与Cr变化表明，甘油致ARF大鼠肾脏可能存在二次损伤。
关键词：急性肾衰竭；管型；肌红蛋白尿；坏死急性肾功能衰竭（acute renal failure，ARF）的诊断与治疗困难一个重要原因是发病机制尚未完全阐明（梁培禾 等，2005）710，病死率高达50～80%（周丽佳 等，2004）393，本实验通过对实验性ARF大鼠BUN、Cr水平的变化及肾脏病理变化的观察，旨在加深对ARF病理损伤规律的认识，为进一步探讨ARF的发生发展机制及治疗提供更多病理学依据。
1 材料1.1 实验动物及饲料动物：体重为200～280 g的成年SD大鼠100只，川北医学院提供。
常规饲料：成都达硕生物科技有限公司提供。
1.2 实验试剂与仪器BUN检测试剂盒：长春汇力生物科技有限公司，批号：2016004。
C r 检测试剂盒：长春汇力生物科技有限公司，批号：2016017。
半自动轮转切片机：德国徕卡（Leica）仪器有限公司。
GF-D800半自动生化分析仪：山东高密彩虹分析仪器有限公司。
甘油，无水乙醇，甲醛溶液，二甲苯，苏木素，伊红等均为国产分析纯试剂或染色剂。
2 方法2.1 急性肾衰竭大鼠模型制备取体重为200～280 g的成年SD大鼠100只，分笼适应性饲养7d。
急性肾功能衰竭动物模型制作
四种急性肾衰竭模型的制作与体会摘要:介绍四种常用急性肾衰竭模型的操作方法、致病机制、病理改变与临床病程。
肾动脉钳闭引起的肾脏缺血再灌注以及甘油、庆大霉素、氯化汞均可致实验动物急性肾衰竭 病理学上可见典型的急性肾小管坏死。
不同模型其病因、 病理改变与临床病程不尽相同 实际工作中可根据不同需要选用不同的模型。
关键词:急性肾衰竭;急性肾小管坏死;动物模型急性肾衰竭(a c u t e r e n a l f a i l u r e A R F)是以肾功能在数小时到几天之内急剧变化 导致肾脏排出氮质代谢废物的能力及维持体内水、电解质稳定功能丧失为特征的急性肾脏病变。
以往国内外许多学者都曾应用动物模型对A R F的病因、发病机制及病理生理等方面进行了研究。
本文将就四种常见的引起急性肾小管坏死致 A R F模型的操作方法、 致病机制、病理改变与临床病程作一比较。
1材料和方法1．1实验动物S D大鼠 8～9周龄 体重 190～210g;C57B L P6小鼠 体重18～20g由中山大学医学实验动物中心提供 均为清洁级(动物合格证号:)。
1．2药物与试剂氯化汞、 甘油、 多聚甲醛(广州化学试剂厂)庆大霉素(广东三才医药集团有限公司)苏木素、 伊红、 无色品红(美国 S i g m a公司)乙醇、 二甲苯(广州化学试剂厂)。
1．3实验仪器设备普通光学显微镜(O l y m p u s B H22日本)显微镜及图像分析处理系统(德国Z E I S S公司)1．4方法1．4．1缺血再灌注致A R F模型:选用大鼠(n=10)麻醉后 打开腹腔找到左肾肾门 简单分离血管周围结缔组织 用无创伤动脉夹夹闭肾门约 45m i n后 松开血管夹 结扎右肾并切除 缝合切口。
于术后12h、 24h、 72h分别杀检3、3、 4只大鼠。
1．4．2甘油致A R F模型:可选用大鼠或小鼠 本实验选用小鼠(n=8)禁水 16 h～24h后 以甘油(50%)10m L P k g体重分别在两侧后肢肌肉注射 之后实验动物自由进食和饮水。
急性肾功能衰竭
急性肾功能衰竭【摘要】目的：复制家兔升汞中毒致急性肾功能衰竭的动物模型。
观察升汞中毒的一般状态，尿质和量的变化,以及肾脏人体形态及病理组织学改变。
根据实验指标判断、分析和讨论急性肾功能衰竭的发病机制及病理生理变化。
方法：复制家兔升汞中毒致急性肾功能衰竭的动物模型，观察其病理特征。
结果：尿蛋白含量增高，出现管型。
结论：学习了制作了家兔升汞中毒致急性肾功能衰竭的模型，该模型的建立助于掌握急性肾功能衰竭的特点及其对动物机体的影响。
关键字：重金属类毒物、肾小管坏死、血尿素氮。
材料及方法：1.实验前一天取家兔12只，其中10只做为实验组，另外2只作为对照组，在实验组家兔的皮下注射1%氯化汞适量，在对照组家兔皮下注射等量的生理盐水作为对照。
2.实验时将家兔称重后，以20%乌拉坦溶液以5ml/kg的剂量由耳缘静脉慢慢推注，进行全身麻醉，期间观察动物的肌张力、呼吸频率、角膜反射作为观察麻醉的深度指标。
3.将家兔仰卧固定于兔试验台上，自尿道口插入导尿管导尿，如果尿量过少，下腹剪毛在耻骨联合上1.5厘米处正中切口，长约4厘米，分离皮下组织沿腹白线切开腹膜，暴露膀胱，用注射器取适量尿液备测尿蛋白、尿沉渣镜检。
4.颈部剪毛，做颈部切口，分离右侧颈总动脉、左侧颈静脉，分别做颈总动脉插管和颈静脉插管，经总动脉放血5ml，离心后取血清备测尿素氮。
5.尿蛋白定性检查：用吸管吸取尿液3ml加入试管内，用试管夹夹着在酒精灯外焰上加热至沸，多数情况下尿液煮沸后会变浑浊此时加入5%醋酸溶液3-5滴，继续加热煮沸，若尿液由浑浊变为透明则为尿酸所致；若仍浑浊则表示尿液中含有尿蛋白，⑴取收集的尿液2ml至于离心管内离心5分钟，使尿液中的有形成分沉淀，离心后去掉上清液。
⑵将试管内的尿沉渣混匀，吸取一滴加于载玻片中央，用盖玻片覆盖后镜检。
⑶暗视野下先低倍镜后高倍镜，移动视野，寻找并观察管型。
（注：管型是蛋白质、细胞及其碎片等物质在远曲小管、集合管中凝固形成的圆柱体蛋白聚体）7.血清尿素氮的测定：所需试剂：动物的血清、尿素氮标准应用液Ⅰ、尿素氮标准应用液Ⅱ、蒸馏水、二乙酰一污一氨硫脲液（试剂Ⅰ）、酸混合液（试剂Ⅱ）配置方法如下：721型分光光度计上用520mm波长比色，以空白管调零，读取各测定管及标准管的吸光度。
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机能实验学实验设计大纲实验名称：急性肾功能衰竭动物模型的复制课题来源：自选
设计班级：2004级临床本科乙班
设计人员：庞路人杜泽东朱慕风黄波梁军设计日期：2006年9月30日
指导老师：张晓荣成
成都医学院实验技术教研室
2006年制
表1-2
夹闭后（1-10min ） 心率 血压 呼吸
B1 B2 B10
表1-3
夹闭后（10-30） 心率 血压 呼吸 B1 B2 … B10
表1-4
夹闭后（30-60min ） 心率 血压 呼吸 B1 B2 … B10
（5）统计数据分析：本实验采用计量资料来测定各种指标的数值，所有数据均采用平均数±标准差（±a）表示，A,B 两组间实验数据比较行完全随机单因素方差分析，组间两比较行q 检验.
（1）平均数公式：x=x1+x2+…+xn/n= Σxi/n x=均数 Σ= 总和n =变量值的个数
（标准差）：a=sqr(Σ(xi-u)^2/n) a:总体标准差 xi:观测数的各个变量u:总体均数
四组间实验数据比较行完全随机单因素方差分析，如各组肺系数总体均值的比较，其方法如下： （1）建立检验假设 H0：1μ=2μ(A.B 两组间的各项生理指标相同）。
H1：1μ、2μ、不等或不全相等，α＝0.05。
（2）计算统计量
夹闭前心率血压呼吸
A1
A2
…
A10
夹闭后（10-30min）心率血压呼吸
A1
A2
…
A10
夹闭后（30-60min）心率血压呼吸
A1
A2
…
A10
（5）统计数据分析
本实验采用计量资料来测定各种指标的数值，所有数据均采用平均数±标准差（±s）表示，A.B间实验数据比较行完全随机单因素方差分析（1）建立检验假设
μ=2μ（各组肺系数总体均值相等）。
H0：1
μ、2μ、不等或不全相等，α＝0.05
H1：1
（2）计算统计量
利用统计学专业软件SPSS做One-way ANOV A 。
( 3 ) 查F值表，确定P值，得出结论。
4、实验方法设计
家兔
实验技术方法
(1).随机抽样：随机20只正常的家兔，并分别编号，再随机平分成2组，
(2)．实验步骤：
（1）取兔、称重、麻醉、固定、备皮。
取家兔两只，编号，用婴儿称体重后按1ml/kg从耳缘静脉注入3%戊巴比妥钠溶液，五点法固定于兔台上，剪去颈部和腹部被毛。
（2）手术：1. 颈正中切口，分离出气管，在甲状软骨下方第3～4个环状软骨上做一个倒“T”切口，插入“Y”字形气管插管，用线固定，接上张力换能器，设定输入信号为“张力”。
2. 动脉插管：分离一侧颈总动脉，穿双线备用，结扎远心端，近心端用动脉夹夹闭，靠近结扎线处用眼科剪剪一“V”形切口，将连接好的动脉插管打满肝素，插入血管内，结扎固定，将压力换能器连上，放开动脉夹，设定输入信号为“压力”。
3. 将A兔沿腹白线剖开，找到两侧肾动脉，并用动脉夹夹闭，造成A兔急性肾功能衰竭，B兔不做此手术。
观察A、B两兔呼吸、心率、血压，并做记录。
4.用导尿管到尿并做尿钠：尿0.1ml+无水乙醇1.9ml，振荡后置10分钟，2500r/min离心5min，取上清夜备用，按表1-4加好试剂后，混匀，于520nm处比色。
计算：Na+（mmol/l）=OD测/OD标*6.5mg*20 肾衰指数=（尿钠mmol/l）/（尿肌酐/血肌酐）＞2。
5技术路线：
夹闭肾动脉→肾血流量减少→肾小球毛细血管压降低→肾小球有效滤过压降低→肾小球滤过压↓→缺血时间过长→急性肾功能衰竭
6可行行分析：
⑴本实验动物来源方便。
⑵急性肾功能衰竭动物的复制流程易于操作。
⑶实验
器材和药品普遍，实验室能提供充足的条件。
⑷所需资金不多，防止了实验过程中
资金不足足带来的问题。
7．预期结果：
术后的兔子血压升高，呼吸加深加快，心率加快，血钾和血钠含量升高，尿少
且比重降低，肌酐的浓度低，各项症状明显易于测定。
8、时间安排，见表1-5
表1-5 时间安排表
时间工作安排
1-10min 麻醉、固定、备皮 10-30min 气管、动脉插管
30-50min 观察各项正常生理指标
50-70min 复制肾衰模型
70-130min 观察各项生理指标的变化
130-160min 尿钠测定
180-190min 完成实验、整理实验室
三、完成时间的条件：实验器械，实验动物，实验药品。
实验设备：
注射器（若干 5ml）、试管（若干）、水浴锅、分光光度计、计算机、压力感受器、张力感受器、塑料管、动脉夹、哺乳动物手术器械一套、玻片
实验动物：
家兔（20只）
实验药品：
3%戊巴比妥钠溶液、、蒸馏水、碱性苦味酸、12.5%NaOH、Na+标准液、
附表
表1-4 尿钠测定的操作表
成分标准管测定管
空白管
尿上清澈— 0.2
—
Na+标准液 0.2 —
—
蒸馏水——
0.2
2%焦锑酸钾 5.0 5.0
5.0
精品文档
. 教研室评审意见。