抗环瓜氨酸肽抗体的应用PPT课件
抗环瓜氨酸肽(CCP)在类风湿关节炎诊断中的应用
抗环瓜氨酸肽（CCP）在类风湿关节炎诊断中的应用（1）天津华裕生物科技有限公司类风湿关节炎(RA)是一个以累及周围关节为主的多系统性炎症性的致畸性的自身免疫病，在我国的患病率为0.32%～0.36％，发病病因尚不清楚，其病理损害为关节的滑膜炎，许多患者在发病两年内即可出现不可逆的骨关节破坏，是造成我国人群丧失劳动力和致残的主要病因之一，因此RA的早期诊断和早期治疗就显得尤为重要。
RA的早期诊断，一直是国内外学者研究的热点，有国外学者报道，抗CCP抗体在疾病的早期就可出现阳性，甚至在临床症状出现前，且抗CCP抗体阳性的RA早期病人较阴性者更有可能发展为侵袭性疾病[1]。
现行的诊断标准主要依靠临床表现、x－线以及类风湿因子（RF）检测，符合此标准时病人常常已经出现骨关节破坏，不利于早期诊断。
RF用于检测时，由于在健康人群、各种感染性疾病及B细胞免疫缺陷的病人RF都有可能阳性，因此RF对RA是一个敏感但不是很特异的指标，当临床症状不典型时，很难为早期诊断提供可靠的依据，使得该指标在临床的应用有一定的局限[2，3]。
抗环瓜氨酸肽（CCP）在类风湿关节炎诊断中的应用（2）天津华裕生物科技有限公司自从1964年证实抗核周因子（APF）是RA的特异性抗体并可在疾病早期出现后，又陆续发现抗角蛋白抗体（AKA）、抗聚角蛋白微丝蛋白（cytokeratin fil ament aggre—gating protein，filaggrin）抗体（AFA）以及抗Sa抗体都对RA具有高度特异性，可在疾病早期出现，新近认为上述抗体在化学结构上具有相关性，APF、AKA、AFA的共同抗原决定簇都含有瓜氨酸，故称之为瓜氨酸相关自身免疫系统，此系统可能在R A的发病及发展中起作用。
2000年，国外首次报道，根据filaggrin的cDNA序列合成一条含瓜氨酸的环肽(cyclic citrullinated peptide，CCP)并用于ELISA检测，发现其对RA具有很好的敏感性和特异性，可视为R A新的血清标志物[4]。
血清抗环瓜氨酸肽抗体检测诊断类风湿关节炎的意义
１ ２ 方 法 ．
１ ２ １ 抗 Ｃ Ｐ抗 体 检 测 将 试 剂 盒 （ 德 国欧 盟 公 司 提 供 ） ．． Ｃ 由 平 衡 至 室 温 ， 待 检 血 清 按 １５ 将 ：０的 比例 稀 释 。整 个 实 验 过 程 严 格 按 照 说 明书 进 行 操 作 。 采 用 Ｅ ＩＡ 间 接 法 ， 稀 释 后 的 ＬＳ 将
患 者 进 行 血 清 探
注： 与 Ｒ ① Ａ组 比较 ， ＜ ． ｌ Ｐ ０Ｏ 。
２ ２ 不 同年 龄 Ｒ 患 者 抗 Ｃ Ｐ抗 体 检 测 结 果 各 年 龄 段 患 ． Ａ Ｃ 者 抗 Ｃ Ｐ抗 体 阳性 率 比较 无 显 著 性 差 异 ， 表 ２ Ｃ 见 。
抗 Ｃ Ｐ抗体 阳性 ５ Ｃ ０例 ， 断敏 感性 为 ７ ％ ， 异性 为 ９ ％ 。 类 风 湿 因子 （ Ｆ 阳性 ５ 例 ， 断 敏 感 性 为 ８ ％ ， 异 性 诊 ８ 特 ０ Ｒ ） １ 诊 ０ 特 为 ７ ％ 。抗 Ｃ Ｐ抗 体 和 Ｒ １ Ｃ Ｆ两 者敏 感性 比较 无 显 著 性 差 异 ， 异 性 比 较 有 显 著 性 差 异 （ ＜ ． ５ 。结 论 抗 Ｃ Ｐ抗 特 Ｐ ００ ） Ｃ
检 测 到 ， 至在 一 定 比例 的 正 常 人 中 也 可 被 检 出 ， 此 给 甚 因 临 床 诊 断 Ｒ 带 来 一 些 困 难 。 近 年 来 发 现 ，抗 环 瓜 氨 酸 肽 Ａ
表 １ ２组抗 Ｃ Ｐ抗 体 及 Ｒ Ｃ Ｆ的检 测 结果
例（ ） ％
（ Ｃ ） 体对 Ｒ 的 诊 断 有 较 高 特 异 性 ， Ｒ Ｃ Ｐ抗 Ａ 在 Ａ早 期 可 出现 阳 性， 断 Ｒ 诊 Ａ特 异 性 达 ９ ％ ， 敏感 性 较 Ｒ ０ 但 Ｆ低 。 笔 者 采 用 酶 联 免 疫 吸 附 法 （ ＬＳ 对 ６ Ｅ ＩＡ） ４例 Ｒ Ａ患 者 以 及 ４ ２例 非 Ｒ Ａ
Anti-CCP
类风湿关节炎流行病学
• 全球发病率1%左右，中国发病率为0.32-0.36%，约400万人 • RA 多发于女性，男女比例约为1:2~1:4 • RA 的女性高发年龄在35-44岁，男性高发年龄在55-64岁 • 早期类风湿关节炎症状不明显，临床确诊困难，患者丧失正确诊断和治
疗的机会
类风湿关节炎诊断挑战与机遇
2009 ACR/EULAR 联合推荐类风湿关节炎的诊断标准
每个范畴取最高值，总分超过6分即可诊断为 RA
• 受累关节 - 1个中到大的关节（0分） - 2-10中大关节（1分） - 1-3小关节（2分） - 4-10小关节（3分） -超过10个小关节（5分）
• 滑膜炎持续时间 - 少于6周（0分） - 6周或更长的时间（1分）
Elecsys Anti-CCP 临床应用
利于类风湿关节炎早期诊断及时干预
• 早期 RA 诊断的重要指标 – 10%的 RA 在首个临床症状出现前10年左右即可检测阳性 – 40%的 RA 发作和70%的 RA 首次就诊前1年出现阳性 – 可早期预测未分化关节炎向类风湿关节炎的的发展 • Anti-CCP（+）的患者93%进展为类风湿关节炎 • Anti-CCP（-）的患者25%进展为类风湿关节炎
15μ L 血清、肝素锂或 K3-EDTA 抗凝的血浆 7-500 U/ml 2-8度保存12个月/试剂盘与冰箱交替保存4周 批内检测精密度离散系数 CV 值<5% 多中心检测精密度离散系数CV值约为1% 17 U/ml 68% Non-RA：97% 健康人高达99%
Anti-CCP Training
抗环瓜氨酸肽抗体产品培训
目录
类风湿关节炎 Elecsys Anti-CCP 产品介绍
anti-ccp的临床意义
繁琐 繁琐 自动化 自动化 自动化 简单
时间
2h/15min 2h 18min 18min 10-15min 2h/15min/ 15min
结果
其它
上海科新 酶免、胶体金 欧盟 酶免 罗氏 化学发光 雅培 化学发光 鹏一（深圳） 生化 酶免、胶体金 热景 、上转发光
半定量/定性 单人份检测成本高、出结果慢 半定量 单人份检测成本高、出结果慢 定量 定量 定量 结果不准确 半定量/定性/ 可单人份检测、出结果快 定量
单一RA标志物的不足之处——特异 性低
类风湿因子（RF）：RF检测对于诊断RA非常重要(主要治疗
指南中都包括这个指标) 确诊的RA患者中，约80%可检出RF(即, 灵敏度比较好) 但是 … • 10 – 15%的健康人也可检出RF • RF检测阴性不能完全排除RA (如, 疾病早期, 可能是处于缓解期 等) • 导致RF升高的常见疾病有：
anti-CCP的临床应用
三、RA预后评估和疗效判断
• RA患者血清中抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体浓度越高，容易 出现微小关节损坏，预后越差； • 此外，治疗过程中，定期检测抗CCP抗体，通过对比治疗前 后的抗体浓度是否下降，来判断治疗是否有效。
小结
RA的鉴别诊断 RA早期诊断 RA预后评估和疗效判断
3
2 1
RF阴性的RA 患者 （血清阴性RA） 中有24-69% 的Anti-CCP阳性
1.Suzuki et al. Scan J Rheumatol 2003;32:197-204 2.Quinn et al. Rheumatology, 2005 3.Vallbracht et al. Ann Rheum Dis 2004;63:1079-84 4.Fernandez-Suarez et al. Clin Chem Lab Med 2005;43(11):1234-39 5.Choi et al. J Korean Med Sci 2005;20:473-84.
抗环瓜氨酸肽抗体检测在类风湿性关节炎中的运用
但 是在治疗期 的 Ｒ Ａ患者 中灵敏度却 很高【 ３ ］ ， 现在 只作 为辅助 指标 ， 所 以这给临床诊断带来一定 的困难 ， 因此 ， 早 期诊 断 Ｒ Ａ 非 常重要 。有 文献报 道 ， 在Ｒ Ａ疾 病早期检测到抗环瓜氨 酸肽 抗体， 并 对患者早期联合应 用改善病情药 物治疗 ， 或 许可 以延
师 确诊 、 符合 美 国风 湿病 学会 （ Ａ Ｃ Ｒ） １ ９ ８ ７年标 准…的类 风 湿 性 关 节炎 患 者 ８ ５例 ， 其中Ｒ Ａ早期 ４ ８例 ， 治疗 期 ３ ７例 ； 男 ５ ０例 ， 女３ ５ 例， 年龄 １ ９ 岁 ５ 岁， 平均年龄 ４ ２岁。 １ ． ２ 标本 的采 集和保存 早 期和治疗期 的类 风湿 性关节 炎患者 均于 ０ ８ ： ｏ ０空腹采 集静 脉血 ３ ｍＬ ，离心 机分离 血清 ， ０ — ５℃的血 清可保 存 ４ ８ ｈ ，如果不 能及 时检测 可置 一 ２ Ｏ℃保
【 关键 词 】类风湿性关节炎 抗环瓜氨酸肽抗体 类风 湿
因子 检 测
类风湿性关 节炎（ ｒ ｈ ｅ ｕ ｍ ａ ｔ ｏ ｉ ｄ ａ ｒ ｔ ｈ ｒ ｉ ｉ ｔ ｓ ， Ｒ Ａ） 是一种病 因到 目
前还 不是很清楚 的的慢性炎症 性全身性疾 病 ， 是 以慢性 、 对称
性、 多滑膜关节炎和关节外病变 为主要 临床 表现的 自身免疫性
说 明书进行操作。
２ 结果 见表 １ 。
表 １ 早期 Ｒ Ａ和治疗期 Ｒ Ａ患者抗 ＣＣＰ抗体和 ＲＦ的 阳性 检 测 结 果 例 （ ％）
Ｒ ． Ｆ采 用免疫 比浊法定量检测。结果
抗 Ｃ ＣＰ抗体在 ４ ８ 例早
期 ＲＡ患者 中， 检测 阳性率为 ７ ９ ． １ ７ ％， 远 高于 ＲＦ的 ２ ７ ． ０ ８ ％； 抗 ＣＣ Ｐ抗 体 在 治 疗期 的 ３ ７例 Ｒ Ａ 惠者 中 ，检 测 阳 性 率 为
抗环瓜氨酸肽抗体在类风湿关节炎诊断中的意义及对关节侵蚀预测的
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节侵 蚀的关系 ( 方法
者诊断 +9 的价值 ) 将 %& 例 +9 患者分为轻微关节侵蚀组 "’ 例 # 第 7 组 % 和严重关节侵蚀组 (" 例 # 第 ! 组 %" 分析与 +9 关节侵蚀相关 的因素 ) 结果
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抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体检测在诊断早期类风湿关节炎中的应用价值
《当代医药论丛》Contemporary Medical Symposium 2020 年 第 18 卷 第 18 期 ·检测与诊断·132·检测与诊断·抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体检测在诊断早期类风湿关节炎中的应用价值刘月皎，张宪波（江苏省中医院检验科，江苏 南京 210029）[摘要]目的：探讨抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体检测在诊断早期类风湿关节炎（RA）中的应用价值。
方法：选取2019年10月至12月期间江苏省中医院风湿病科收治的92例RA患者、92例非RA患者和同期在该院接受健康体检的92例体检者纳入本次研究。
将其中的92例RA患者作为试验组，将其中的92例非RA患者作为对照1组，将其中的92例体检者作为对照2组。
对三组研究对象均进行血清抗CCP抗体检测。
然后，比较三组研究对象的检测结果。
结果：试验组患者抗CCP抗体的阳性检出率高于对照1组患者和对照2组体检者，P＜0.05。
对这276受检者进行血清抗CCP抗体检测的灵敏度为85.87%，特异度为97.83%，准确率为93.84%，阴性预测值为95.18%，阳性预测值为93.26%。
结论：抗CCP抗体对RA具有高度的特异性和灵敏度，是早期筛查RA和鉴别诊断RA的有效自身抗体指标。
[关键词]早期；类风湿关节炎；抗环瓜氨酸肽抗体；诊断[中图分类号]R446.6 [文献标识码]B [文章编号]2095-7629-（2020）18-0132-02类风湿关节炎（RA）是一种病因尚未明确的以关节炎性病变为基本病理改变的慢性全身性疾病，属于自身免疫性疾病。
该病患者以手足多关节发生慢性、对称性、侵袭性、多滑膜关节炎和关节外病变为主要临床表现，病情严重时其可出现关节僵硬、畸形及功能丧失等临床表现[1]。
由于RA的病因、病机不明，无法彻底根治该病，故目前临床上治疗该病时主要以缓解患者的炎性症状、降低其骨质被破坏的程度、保护其关节肌肉的功能为主[2]。
抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体检测（ELISA法）
抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体检测（ELISA法）1 目的熟悉抗环瓜氨酸肽（CCP）检测（ELISA法）标准操作规程，以便于更加规范化的操作，提高免疫检验质量，保证结果的准确性。
2 适用范围适用于免疫室内抗环瓜氨酸肽（CCP）检测（ELISA法）3 职责检验科主任负责组织人员制定抗环瓜氨酸肽（CCP）检测（ELISA法）标准操作程序，免疫室组长负责组织人员具体实施。
4 该SOP变动程序本标准程序的变动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，，并报经下述人员批准签字：专业组长、科主任。
5.实验原理：本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人抗环瓜氨酸肽抗体(Anti-CCP)水平。
用纯化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被单抗的微孔中依次加入抗环瓜氨酸肽抗体(Anti-CCP)，再与HRP标记的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的抗环瓜氨酸肽抗体(Anti-CCP)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，通过标准曲线计算样品中人抗环瓜氨酸肽抗体(Anti-CCP)浓度。
3.试剂盒组成：6.样本处理及要求：6.1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
6.2血浆：应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
6.3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
6.4细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
抗环瓜氨酸肽抗体诊断类风湿关节炎的临床应用
样 ，ｍ 曲安奈德玻璃体腔 注射 ， ４ｇ 术后 眼压有显著 升高 ， 术前基础 眼压偏 高
者， 术后眼压升高更普遍。低年龄和静脉阻塞者术后眼压升高发病率高。
眼压于术后 Ｉ周开始升高 ， 大部 分眼压升高发生于 ３个 月内 ， 绝 ７个月时大 部分患者眼压恢复正常。这个结果对临床工作有一定指导意义 。
ａｔ ｒｉ ｔ ｖｔｅ ｌｔｉｍｃ ｎ ｌｎ ｅ ｔｎ ｄ ． ｃ ｐｈｙ ｌ ｌ ２ ０ １ ： ２ ｆ ｎ ｒ ｉ ａ ｒａ ｉ ｏｏ ｅ ａ ｅ ｏ ｉ ｅ Ａｒ ｈ Ｏ ｔ ａｍｏ ， ０ ３， ２１ ７ ９ ｅ ａ ｒ
—
道 ［］ １ 术后 １ ０ 年半 ， 在前房水和硅油中仍 可发现 曲安奈德 。这可能是某些患 者术后很久还会发生眼压升高 ， 且持续 １年多不降的原 因。Ｊｎｓ ｏａ 报道 ， 曲安 奈德注射后 ｌ 眼压开始升高 ， 周 ５个月开始恢复 ， 个月后恢 复基准水平。眼 ９ 压升高与曲安奈德颗 粒仍可见 相一致 ， 曲安奈德所 致眼压 升高 是可逆 的。 他还观察到 ， 使用不 同剂量曲安奈德 比较 ， ｒ 注射后眼压升高持续时间较 ２ａ ０ｇ 长 ， ７～９个月 ， 约 而小剂量（ ８ ｇ 注射后眼压升高持续 ３—５个月。 ２～ ｒ ） ａ ３ ３ 眼压升高的相关 因素 。本研 究显示 ， ． 年龄 ＜５ ０岁和 ≥５ Ｏ岁两组 中 ， 后眼压升高发生率有显著差异 ， 术 低年龄组术后眼压升高发生率 明显高 于 高年 龄 组 。Ｊｎｓ 现 低年 龄 是 术 后 眼压 升 高 的重 要 因 素 ， 龄越 轻 （ ｏａ 发 年 Ｐ＝ ０ ０ ９ 眼压升高越明显， ．２ ） 这与我们 的结果相似。我们的研究还发现 ， 术前高 眼压者 ， 术后眼压升高无显 著差异。Ｓ ｉ ｅ 道 ， ｍｔ ｎ报 ｈ 将病人分 成有无 青光眼 史两组 ， 有青光眼组 中， 基础眼压与眼压 升高量间无相互 关系 ， 与我们 的 这 结 果 一 致 。在无 青光 眼 史 组 ， 始 眼 压 ≥ １． ｍ ｇ 更 有 可 能 发 生 眼 压 升 初 ４ ９ ｍＨ ， 高 ， ０ ０ 。我们也发现术前 眼压 ≥１ ｍ Ｈｇ组术后眼压升 高的发生率 明 Ｐ＜ ． １ ５ｍ 显增加 。这些信息提示我们， 可据病人术前 基础眼压来 更加关注 随访 中眼 压情况 ， 尤其是年龄偏低者 。Ｊｎ ｓ ｏａ 报道 中发现发病 因素不同 ， 术后 眼压升高 无显著差异 ， 但在葡萄膜炎和静脉 阻塞组眼压有升 高趋势。我们 观察到静 脉阻塞组术后眼压升高发生率 明显增加。 本研究因部分病人随访期不够长 ， 对结果 的统计 ， 尤其是 眼压升高过程
抗环瓜氨酸肽抗体检测在类风湿关节炎诊断上的临床应用
风 险 是 发 病 日＜ ３ｄ者 的 ６ ９ ３倍 ， 高 体 温 ≥ ３ ． ．０ 最 ８ ５℃ 者 患
重 症 化 的风 险 是 最 高 体 温 ＜ ３ ． ℃ 者 的 ４ ４ ２倍 。 与 上 述 ８５ ．５
研 究 Ｏ 值 相 似 。提 示 首 诊 医 生 应 对 该 类 ＨＦ Ｄ患 儿 立 刻 Ｒ Ｍ
临床特征分 析 ［］ Ｊ ．中华 全 科 医 师 杂 志 ， ０ １ １ （ ） ２１ ，０ ５ ：
３ — ５ ４３ ３４ ．
通 过 病 毒 血 症 直 接 入 侵 心 肌 ， 起 循 环 系 统 损 害 ＿ ， 作 为 引 ７可 ］ ＨＦ ＭＤ患 儿 合 并 心 肌 损 伤 的诊 断 依 据 。本 研 究 结 果 显 示 ］ 就 诊时 Ｃ — Ｋ ＭＢ 升 高 者 患 重 症 化 风 险 是 Ｃ — Ｂ 阴 性 者 的 ＫＭ ３４ ７ ， 示 Ｃ — ．６ 倍 提 Ｋ ＭＢ可 以作 为 预 测 ＨＦ ＭＤ 重 症 化 的 有 效 指 标 。马 波 等 【 过 回顾 性 总 结 分 析 显 示 ＨＦ 通 ＭＤ 患 儿 初 次
ｔ ｎ ｈｌｒｎ ｗ ｔ ｎｅｏ ｉ ｓ７ ｎｅｔ ｎ Ｊ ． Ｎ ｉ ｓｉ ｃｉ ｅ ｉ ｅｔｒｖｒ ｉｆｃｉ ［ ］ ｏ ｎ ｄ ｈ ｕ １ ｏ
Ｅｎ ｌ ｄ， ９ ９ ３ １ １ ） ９ ６ ９ ２ ｇ Ｍｅ １ ９ ， ４ （ ３ ： ３ — ９ ． Ｊ
Ｏ ｏ Ｈ ， ｏｎｇ ｉＭ Ｗ ＳＣ ， ｏ ｎ Ａ ， ｔ １ ｄ ｎｔｆｃ ｔｏｎ ａ Ｍ ｈａ ｅ ａ．Ｉ ｅ ｉｉａ ｉ ｎｄ ｖａｉ ｔｏｎ ｏ ｌｎ ｃ ｌｐｒ ｄｉｔ ｓ ｆ ｈｅｒｓ ｕ ｏｏｇ — ｌ ｄａ ｉ ｆｃｉ ｉａ ｅ ｃ ｏｒ ｏｒｔ ｉｋ ｏｆｎｅ ｒ ｌ ｉ ｃ ｌｉｖｏ ｖ ｍ ｅ ｎ ｃ ｌ ｒ ｎ ｗ ｉｈ ｈａ ａ ｎ ｌ ｅ ｎｔｉ ｈｉｄ ｅ ｔ ｎｄ，ｆ ｔ ｎｄ ｍ ｏｕｔ ｏｏ ，ａ ｈ
抗环瓜氨酸肽抗体检测与类风湿性关节炎的诊断
抗环瓜氨酸肽抗体检测与类风湿性关节炎的诊断标签：类风湿性关节炎；环瓜氨酸肽；抗体检测类风湿性关节炎(RA)是一种常见的系统性自身免疫性疾病，全世界发病率约为1%[1]，发病两年内即可出现不可逆性的骨关节破坏。
现行的诊断标准中只有类风湿因子（rheumatois factor,RF）是实验室指标，而且缺乏特异性，不利于早期诊断和早期干预治疗。
因此，临床上迫切需要能用于RA早期诊断的实验室指标。
自1964年以来陆续证实抗核周因子抗体（APF）[2]、抗角蛋白抗体（AKA）[3]、抗丝集蛋白抗体（AFA）[4]以及抗Sa抗体[5]对RA具有高度特异性，可在疾病早期出现。
但是，检测上述抗体的抗原物质存在异质性及制备技术难度大等多方面因素，目前还不能在实验室广泛应用。
进一步研究发现，上述抗体在化学结构上具有相关性，他们识别表位的主要抗原决定簇都含有瓜氨酸，被称为瓜氨酸相关自身免疫系统[6]，并认为此系统可能在RA的发病及发展中起作用。
1 环瓜氨酸肽（cyclic citrullinated peptide,CCP）抗原2000年国外首次报道，APF、AKA、AFA的共同抗原决定簇环瓜氨酸肽可经人工合成。
Schellekens根据filaggrin的cDNA序列合成一条含瓜氨酸的环肽，用ELISA法检测发现其对RA具有很好的敏感性和特异性，并且较前述抗体的检测都具优越性，可视为RA新的血清标志物[7]，因此人们对RA的特异性自身抗体有了新的认识。
1.1 瓜氨酸肽（citrullinated peptide,CP）瓜氨酸是人体中的稀有氨基酸，通常由精氨酸在转录后经酶修饰而生成，仅存在于包括丝集蛋白在内的少数几种蛋白中。
人黏膜细胞角质颗粒中的丝集蛋白前体在细胞分化过程中被酶分解成10~12个丝集蛋白亚基，在此过程中，蛋白被去磷酸化，一些精氨酸残基在多肽精氨酸脱氢酶催化下脱氨基转化成瓜氨酸残基[7]。
现有资料显示，AFA、AKA、APF均可识别上皮丝集蛋白及其前体蛋白，可能的解释是这种蛋白富含瓜氨酸残基，可被RA血清中的这些自身抗体识别。
抗环瓜氨酸多肽抗体检测在类风湿性关节炎中的应用
Ａｐｐ ｌ ｉ ｃ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ Ｖａ ｌ ｕｅ ｓ ｏ ｆ Ａｎｔ ｉ － — ｃ ｙｃ ｌ ｉ ｃ Ｃｉ ｔ ｒ ｕ ｌ ｌ ｉ ｎ ａ ｔ ｅ ｄ Ｐｅ ｐ ｔ ｉ ｄｅ Ａｎｔ ｉ ｂｏ ｄ ｙ ｉ ｎ
ｔ ｈ ｅ Ｄｉ ａ ｇ ｎ ｏ ｓ ｉ ｓ ａ ｎ ｄ Ｃｏ ｎ ｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ Ｊ ｕ ｄ ｇ ｍｅ ｎ ｔ ｏ ｆ Ｒｈ ｅ ｕ ｍａ ｔ ｏ ｉ ｄ Ａｒ ｔ ｈ ｒ ｉ ｔ ｉ ｓ
２ ３ ． ３ ）ｍｎ １ ／ ｈ分别显著高于抗 Ｃ Ｃ Ｐ阴性的 Ｒ Ａ 患者 （ １ ５ ． ４±９ ． ２ 、１ ９ ． ９±１ ７ ． ４ ） ，差异 比较有 统计 学意 义 （ 均 Ｐ＜ ０ ． ０ １ ） 。结论
价值 。
抗Ｃ Ｃ Ｐ抗体 对 Ｒ Ａ有较好 的敏 感度及很 高的 特异性 ，作 为 Ｒ Ａ早 期诊 断指标 ，抗 Ｃ Ｃ Ｐ抗体优 于
人员４ ０名 ）进行抗 Ｃ Ｃ Ｐ抗体及 类风 湿因子 （ Ｒ Ｆ ）检 测 ；将 Ｒ Ａ患者按修正的 Ｓ Ｈ Ａ Ｒ Ｐ法评分 分为骨侵蚀组 与无
骨侵 蚀 组 ，分 析 抗 Ｃ Ｃ Ｐ抗 体 、Ｒ Ｆ与 骨侵 蚀 的相 关性 ； 并 结合 Ｃ反 应 蛋 白 （ Ｃ Ｒ Ｐ ）及红细胞沉降 率 （ Ｅ Ｓ Ｒ） 评 价 Ｒ Ａ病 情 。结 果 抗 Ｃ Ｃ Ｐ抗 体 诊 断 Ｒ Ａ 的敏 感 性 为 ６ ７ ． ４ ％ ，Ｒ Ｆ诊 断 Ｒ Ａ 的敏 感 度 为 ７ ３ ． ０ ％ ， 两者 比较 差 异 无 统
异 性 分 别 可提 高 至 ８ ４ ． ３ ％ 、９ ８ ． ９ ％ 。抗 Ｃ Ｃ Ｐ抗 体 阳性 与 Ｒ Ａ 患 者 骨侵 蚀 明 显 相 关 （ 骨
侵 蚀 无相 关 （ Ｐ ＞０ ． ０ ５ ） 。抗 Ｃ Ｃ Ｐ抗 体 阳性 的 Ｒ Ａ 患 者的 Ｃ Ｐ Ｒ水平 （ ２ ８ ． ７±２ ２ ． ８ ）ｍ ｇ ／ Ｌ 、Ｅ Ｓ Ｒ水 平 （ ４ ６ ． ５±
类风湿诊疗和抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP抗体)的检测课件
▪ 因此，对风湿性疾病患者的随访和定期检查显得尤为重要， 这也是验证我们早期的诊断是否正确的必由之路。正确的 早期诊断是采取规范化治疗、提高患者的生活质量、改善 预后的前提。
▪ 其他条件 ①血清学：抗环瓜氨酸肽抗体 （CCP）和类风湿因子（RF）;②受累关节 的种类（小或大关节）和数量;③滑膜炎的 病程;④急性血象反应：红细胞沉降率 （ESR）和C-反应蛋白（C请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
类风湿关节炎的诊断
▪ 诊断第一步 满足2项必要条件，并有常规 典型放射学RA骨破坏的改变，可明确诊断 为类风湿关节炎，
关节周围骨质疏松。 以上1～4项必须为医师所见，持续6周或以上，具
备上列7项标准中的4项，即可诊断类风湿关节炎。
ACR和欧洲抗风湿病联盟（EULAR） 文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。 2009年的RA分类标准和评分系统
▪ 类风湿关节炎的早期诊断和早期治疗已成为治疗 类风湿关节炎迫切需要，以往的分类标准不能达 到早期诊断的目的，分类标准不等于诊断标准。 临床工作更需要一个可靠的疾病缓解标准（包括 临床缓解与结构进展等问题）。但实际上制定一 个早期类风湿关节炎的分类标准很困难，有人提 出了炎性关节炎的概念，甚至提出了早期炎性关 节炎的概念，正是因为这部分患者炎性关节炎不 是全部，而是部分发展为类风湿关节炎，在新的 分类标准中如果判断有可能发展为持续炎性关节 炎或破坏性关节炎，这类关节炎就被认为是类风 湿关节炎。
美国风湿病学会（ACR）1987分类标 文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。 准
抗循环瓜氨酸肽抗体的临床意义
抗循环瓜氨酸肽抗体抗环瓜氨酸肽抗体是风湿自身抗体系统的一种，类风湿关节炎（RA）具有高特异性的瓜氨酸相关自身抗体系统包括AKA、APF、AFA、抗CCP抗体，这些抗体对早期RA诊断具有较好的特异性。
这些指标越高患风湿的可能性也越大。
抗环瓜氨酸肽抗体（CCP）是环状聚丝蛋白的多肽片段，是以IgG型为主的抗体，对类风湿性关节炎（RA）具有很好的敏感性和特异性，且抗CCP抗体阳性的RA病人骨破坏较抗CCP抗体阴性者严重。
类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis,RA）是一种常见的慢性自身免疫性疾病。
在全世界大约有1%的人罹患此病。
RA能引起关节的疼痛、僵直及肿胀。
在发病2年内即可能出现不可逆的骨关节损伤，并可引起多种并发症，如神经系统疾病、心包炎、淋巴腺炎等。
因此，及早诊断RA及给予缓解病情的药物治疗，对控制病情非常重要。
1998年，国外，首次报道的抗环瓜氨酸肽抗体（anti-cyclic cirullinated peptide antibodies,抗CCP抗体）的检测，对RA具有较高的敏感性和特异性，是RA新的血清标志物。
1998年Schellekens和Girbal Neuhause等根据filaggrin的cDNA序列合成的多肽证实瓜氨酸残基是类风湿关节炎特异的抗中间丝相关蛋白（filaggrin）抗体识别表位的必需组成。
通过对基因文库中各个序列号的filggrin氨基酸序列进行分析，合成了一条以瓜氨酸代替精氨酸的20个左右氨基酸残基的肽链。
并通过一定的试验显示了瓜氨酸是RA患者血清中抗filaggrin相关抗体识别的主要组成性抗原决定簇成分。
在2000年，Schellekens将一条由19个氨基酸残基组成的瓜氨酸肽链中的两个丝氨酸替换为半胱氨酸，形成与β-转角具有相似结构的二硫键，合成环瓜氨酸肽（cyclic citrullinated peptide,CCP）。
采用环瓜氨酸肽为抗原基质用ELISA法检测RA患者血清中的抗环瓜氨酸肽抗体，敏感性和特异性均有明显提高。
anti-ccp的临床意义
军医生要诊断(或排除)RA时，要做很多项不同的实验室检查
事
医
学
科传统“类风湿四项 ”
学
院 类风湿因子(RF) – –炎症的标志物
医院
C反应蛋白(CRP) – 炎症的标志物 这些检测项目对诊断 RA的特异性都不高，但可与
抗链球菌An溶ti血-C素CP“联O合”检（测AS诊O）断–类急风性湿炎性症关、节自炎身免疫疾病
属等
医
院
RF诊断RA的特异性比较低, 导致假阳性率高
抗CCP、RF、CRP、ASO 对类风湿关节炎的诊断意义论。临床和实验医学杂志 2011 年4 月第10 卷第8 期
Affiliated Hospital of the Academy of Military Medical Sciences
的标志物
Affiliated Hospital of the Academy of Military Medical Sciences
单一RA标志物的不足之处——特异性 低
军 类风湿因子（RF）：RF检测对于诊断RA非常重要(主要治疗指
事 南中都包括这个指标) 确诊的RA患者中，约80%可检出RF(即, 灵
事 医 学 科
20
0 4
5 6 7 8 9 10 11 12
Study
Anti-CCP2 Sensitivity IgM RF Sensitivity
20
0 4
5 6 7 8 9 10 11 12
Study
Anti-CCP2 Specificity IgM RF Specificity
学
院 附 平均敏感性 属 平均特异性
9. Dubucquoi et al, Ann Rheum Dis 2004, 63: 415-419 10.De Rycke et al, Ann Rheum Dis 2004, 63: 1587-93 11.Vallbracht et al, Ann Rheum Dis 2004, 63: 1079-84 12.Greiner et al, Ann.N.Y.Acad.Sci 2005,1050: 295-303
抗环瓜氨酸肽抗体检测的临床意义
检验科新开展项目
抗环瓜氨酸肽抗体（CCP）检测的临床意义异常结果临床意义：
①对类风湿关节炎诊断的特异性高(90.4%～98.0%)；
②有助于类风湿关节炎的早期诊断；
③可能与类风湿关节炎的活动性相关；
④已有多数研究提示，其阳性与骨侵蚀程度相关，提示类风湿关节炎预后不良。
⑤需要检查的人群：类风湿关节炎的患者一般要求检查。
结果阳性可能性疾病：
特发性关节痛综合征、指疔、滑膜炎。
⑥抗环瓜氨酸抗体检测可鉴别早期类风湿性关节炎和有类似关节表现的风湿疾病，可预测其对骨的侵蚀，与类风湿因子（RF）联合检测具有很好的灵敏度和特异性，尤其是对症状不典型的类风湿性关节炎患者更有意义。
抗环瓜氨酸肽抗体（CCP）检测: 项目编号S250402002 价格：102元
所属单元：生化检验项目→风湿全项也可单独检测。
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2020/12/10
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Sensitivity (%)
Specificity (%)
抗CCP抗体的敏感性及特异性
100 80 60 40 20 0 4
5 6 7 8 9 10 11 12
Study
Anti-CCP2 Sensitivity IgM RF Sensitivity
抗CCP、RF、CRP、ASO 对类风湿关节炎的诊断意义论 临床和实验医学杂志 2011 年4 月第10 卷第8 期
抗CCP抗体(anti-CCP)
抗CCP是针对含瓜氨酸的蛋白质 产生的一类自身抗体的名称。
对类风湿性关节炎（RA）具有 很好的敏感性和特异性。
抗CCP抗体阳性的RA病人骨破坏 较抗CCP抗体阴性者严重。
2010年《类风湿关节炎诊断和治疗指南》：关于RA的实验室检 查指出：抗CCP抗体对RA的诊断和预后评估有疾病的鉴别诊断
Anti-CCP抗体对于类风湿（RA）疾病的特异性 高达96%，可作为其他疾病导致的关节炎的鉴别诊断的 指标之一。
20%慢性丙型肝炎（HCV）有关节受累等类风湿疾 病症状， 50% HCV 和 HCV 相关性关节炎患者 RF 阳性 ，但这类患者 Anti-CCP 阴性。
抗CCP抗体诊断RA已获得国内外的认可
美国风湿病学会(ACR)：与其他RA诊断标准相比，未鉴别的关 节炎患者中检出抗CCP可准确预测将来患者发展为RA。
欧洲抗风湿联盟(EULAR) ：建议 有早期关节炎向风湿病科医 生就诊的每个患者，应当测定下列可预测持续和侵蚀性病变的 因子 ： •有触痛和肿胀的关节的数量 •ESR或CRP •类风湿因子和抗CCP抗体的水平 •放射线检查关节侵蚀情况
100 80 60 40 20 0 4
5 6 7 8 9 10 11 12
Study
Anti-CCP2 Specificity IgM RF Specificity
平均敏感性 平均特异性
CCP (%)
75 96
IgM-RF(%)
76 76
与RF相比，Anti-CCP具有的诊断价值更高
4. Van Venrooij et al., Neth J Med 2002, 60: 383-388 5. Vasishta, Am Clin Lab 2002, 21: 34-36 6. Pinheiro et al., Ann Intern Med 2003, 139: 234-235 7. Suzuki et al., Scand J Rheumatol 2003, 32: 197-204 8. Lee and Schur, Ann Rheum Dis 2003, 62: 870-874
2009年，美国风湿病学会/欧洲抗风湿病联盟 规定了RA的分级和评分系统。当分数超过6分 时，患者可能罹患类风湿性关节炎。
RA诊断中的实验室检查
红细胞沉降率(ESR) 与C反应蛋白(CRP) 增高有助于判断疾病活动性
ASO 类风湿因子(RF) ：
70%（+）滴度多与疾病活动性和严重 性相关 血常规：
9. Dubucquoi et al, Ann Rheum Dis 2004, 63: 415-419 10. De Rycke et al, Ann Rheum Dis 2004, 63: 1587-93 11. Vallbracht et al, Ann Rheum Dis 2004, 63: 1079-84 12. Greiner et al, Ann.N.Y.Acad.Sci 2005,1050: 295-303
RA的早期诊断和治疗至关重要
防治RA的主要目标是： •预防和控制关节损害 •防止功能丧失 •减轻疼痛
手RA的进展
早期检出和早期治疗是改善 预后结果的关键
需要一种比较好的方法及早诊断出RA患者, 明确哪 些人最有可能发生严重的侵蚀性病变
RA的诊断
目前，没有诊断RA的“金标准”
目前，RA的诊断主要依靠美国风湿病学会(ACR) 提出的临床指标 。
二、RA早期诊断指标
•抗环瓜氨
酸肽（CCP
CCP
）抗体先于
的 RA的临床表
阳 性
现1-10年出
率 现，适合健
（ 康人群体检
%
） 筛查。
首次出现症状的年数
Adapted from: Rantapää-Dahlqvist et al, Arth Rheum 2003,48:2741-4
Anti-CCP抗体减少RF阴性的RA的漏诊
关节痛： 首发症状，具有持续性和对称性，小关 节受累
关节肿胀：关节腔积液、关节周围软组织炎症、滑 膜慢性炎症后肥厚
晨僵：病变的关节在夜间静止不动后出现较长时间 的(至少一小时)的僵硬
关节畸形：掌指关节脱位、手指尺侧偏斜、手指 “天鹅颈”或“纽扣花样”畸形
类风湿性关节炎的分级
美国风湿病学会将RA影响生活的程度分为四级: I级：照常日常生活和各项工作 II级：进行一般的日常生活和某种职业，有些活动受限 Ⅲ级：重度限制，不能完成大部分的日常工作或活动 Ⅳ级：失去活动能力卧床，或仅能应用轮椅活动
研究组
Anti-CCP阳性，血清学阴性的RA患者
5
24%
4
26%
3
35%
2
60%
1
69%
0%
20%
40%
60%
80%
RF阴性的RA 患者 （血清阴性RA） 中有24-69% 的Anti-CCP阳性
1.Suzuki et al. Scan J Rheumatol 2003;32:197-204 2.Quinn et al. Rheumatology, 2005 3.Vallbracht et al. Ann Rheum Dis 2004;63:1079-84 4.Fernandez-Suarez et al. Clin Chem Lab Med 2005;43(11):1234-39 5.Choi et al. J Korean Med Sci 2005;20:473-84.
轻中度贫血、血小板增高
类风湿因子（RF）：最为常用的RA诊断指标，目前 常用的RF检测多为IgM型，特异性只有70%左右 --少部分的的健康人和老年人也可检出RF --RF检测阴性不能完全排除RA (如, 疾病早期, 可 能是处于缓解期等) --其他自身免疫疾病和肝病RF也有所升高
RF诊断RA的特异性比较低, 导致假阳性率高
抗环瓜氨酸肽抗体(Anti-CCP)在 诊断类风湿性关节炎中的应用
类风湿性关节炎(RA)
是一种以对称性多关节炎症 和骨质破坏为主要特征的自身 免疫性疾病
主要侵犯小关节 多见于中年女性 我国患病率约为 0.3%
50%以上的 RA患者在发病 后的10年内停止工作 。
手严重变形的RA
类风湿性关节炎的症状