生物制品生产的基本技术
生物制品的制备3篇
生物制品的制备第一篇：细胞培养与生物制品制备生物制品指的是通过生物技术手段制备的药物、疫苗、生物诊断试剂等。
生物制品制备的关键是细胞培养技术，通过细胞培养可以得到大量纯化的蛋白质和其他生物分子。
1. 细胞培养技术细胞培养技术是指利用类似于生物体内的环境及培养基的条件，使动植物细胞在体外不断地生长、繁殖和分化的技术。
细胞培养可以按照培养的方式分为两类：悬浮培养和贴壁培养。
其中，悬浮培养以悬浮细胞为主要培养对象，如淋巴细胞、白血病细胞等；贴壁培养以附着细胞为主要培养对象，如肝细胞、肺细胞等。
2. 细胞培养的流程（1）选择细胞种类及培养条件。
不同类型的细胞需要不同的培养条件，如温度、氧气含量、培养基成分等。
选择合适的细胞种类及培养条件是细胞培养成功的第一步。
（2）种植细胞。
使用无菌的操作方法将细胞存储于试管或细胞培养瓶中的培养基内。
种植之前需要进行细胞计数，以确定种植的细胞数量。
（3）细胞培养。
细胞在培养基内不断地进行生长和分裂，在此过程中需要定期更换培养基、检测细胞数量和培养状况。
（4）细胞分离。
在细胞培养的过程中，需要定期进行细胞分离，以解决细胞密度过高而导致的缺氧和营养不足问题。
3. 利用细胞制备生物制品的技术（1）蛋白表达技术。
利用工程细胞表达外源蛋白，并通过纯化等步骤获得纯化的外源蛋白质。
（2）单克隆抗体技术。
利用合成单克隆抗体的技术来替代动物源性抗体。
这种技术通过制造合成抗体来避免使用动物来生产抗体。
（3）基因治疗技术。
通过治疗包含特定基因的疾病来治疗疾病。
这种技术基于对人类基因组的理解和在细胞生物学中的新发现。
细胞培养技术在各个领域都有广泛应用，尤其是在生物制品制备中的应用十分重要。
随着技术的不断进步，生物制品将在医药领域发挥更加重要的作用。
第二篇：生物制品纯化技术生物制品的制备和纯化技术是生物技术领域的重要内容。
其中，纯化技术是为了获得高纯度的生物制品而开发的技术，主要通过分离和纯化的方式来获得高纯度的生物制品。
生物制品生产技术—免疫血清生产的基本程序
（二）破伤风抗毒素 1 选择5～12岁营养良好的马匹，先用破伤风类毒素进行基础免疫。 2 第一次注射精制破伤风类毒素油佐剂抗原1 ml，第二次注射2ml。 3 1～3个月后进行高度免疫。 4 第一程高度免疫注射5～8针，最后一次免疫后6～7 d采血，隔l天再次采血，检 测效价。 5 抗毒素效价每毫升不低于1 200个单位(AE)。休息14～16d，进行第二程免疫， 一般免疫3次，间隔5～7 d，最后一次免疫后7～9 d采血。
一. 免疫血清的概念
又称高免血清，亦称为抗血清，为含有高效价特异性抗体的动物血清制剂，能用于治 疗或紧急预防相应病原体所致的疾病。此种血清凶含有特异性的免疫抗体，用作被动免疫。 根据免疫血清作用的对象不同，可分为抗病血清和抗毒素两类。
二. 高免血清的制备流程
动物的选择与管理 免疫原 免疫程序及制定的原则 血液采集与血清的提取
6 破伤风血清，用胃酶消化，按次序加入15％、20％硫酸铵进行沉淀， 7 加入10％的明矾使明矾含量为1％，静置使之沉淀。 8 取沉淀后的上清加38％的
硫酸铵沉淀，沉淀物经透析 即成精制破伤风抗毒素。
（三）卵黄抗体（IBD）： 1.健康产蛋鸡群，油佐剂灭活苗 肌注2ml/只7～10日后，重复注射一次； 2.再过7～10刚再注一次，油苗剂量适度递增; 3.定期检测卵黄抗体水平，琼扩效价达1：128时,收 集高免蛋大约一个月。
动物的选择与管理： 动物的品种 ：马、牛、山羊、绵羊、 猪、兔 等，马居多。 年龄及健康状况 ：青壮年 动物的管理
免疫原： 制备抗苗免疫血清，基础免疫用抗原多为疫苗或死菌，而高度免疫的抗原，一般选用毒 力较强的毒株。 制造抗病毒免疫血清 （如抗猪瘟血清） 基础免疫的抗原，可用猪瘟兔化弱毒疫苗；高 度免疫抗原，则用猪瘟血毒或脏器毒乳剂等强毒。
兽医生物制品基本生产技术—病毒培养技术
细胞的制备
2.单层细胞的传代 多采用EDTA(乙二胺四乙酸)-胰酶消化法，胰酶浓度为
0.025％，EDTA浓度为0.01％。 具体方法：单层细胞弃去营养液，加37℃预热的EDTA-胰
酶消化液（覆盖细胞表面），待细胞开始脱落时，弃去消 化液，加入少量生长液轻轻吹打使细胞分散，再用生长液 稀释，分装成2～3瓶培养。 某些半悬浮培养或悬浮培养的细胞如SP2/O瘤细胞，不需 消化液消化，采用机械吹打即可形成单细胞。
病毒的细胞接种增殖技术
3.病毒增殖的判断指标 • 细胞病变效应（CPE ）
细胞圆缩 细胞聚集 形成合胞体 轻微病变
倒置显微镜
病毒的细胞接种增殖技术
接种单纯疱疹病毒1型的人角膜上皮细胞（CPE） （A-正常细胞，B-感染后8h，C-感染后12h， D-感染24h ）
病毒的细胞接种增殖技术
4.病毒的收获 一般在CPE达80%左右时收获。 通过冻融、超声波等方式破碎细胞，使病毒充分释放，
病毒的增殖过程
4.生物合成
• 病毒利用宿主细胞作为生物合成机构，使病毒核酸表达和 复制,产生大量的病毒蛋白质和核酸。
mRNA的合 成
早期：特异性酶的合成 核酸复制 结构蛋白质合成
病毒的增殖过程
5.装配与释放 • 新合成的毒粒结构组分组装成完整的病毒颗粒，称做病毒
的装配,亦称成熟。
• 成熟的子代病毒颗粒以一定的途径释放到细胞外。
如，猪甲状腺细胞培养猪传染性胃肠炎病毒 ·非宿主动物细胞
如，鸭胚成纤维细胞培养马立克氏病病毒。
病毒的细胞接种增殖技术
2.影响病毒在细胞中增殖的因素 （1）血清
• 维持液中血清含量：一般不超过2% （2）温度
• 最适温度多为37℃。 • 有些病毒生长的最适温度高于或低于37℃。 如，狂犬病
医疗生物制品的技术开发
医疗生物制品的技术开发是近年来科技界快速发展的领域之一。
随着人们健康意识的增强以及社会老龄化的加剧，疾病治疗和预防的需求也日益增长。
医疗生物制品作为一种新型的疗法，在癌症、自身免疫性疾病、传染性疾病等领域已经发挥出了重要的作用，被认为是未来医疗领域的主要发展方向之一。
医疗生物制品的基础是基因工程技术。
通过基因工程技术，可以利用真菌、细菌、Escherichia coli等生物体，将人类、动物或植物的基因转移到生物体内，并表达产生有效的蛋白质。
这些蛋白质可以被用作药物、诊断试剂和疫苗等方面。
其中，最常见的医疗生物制品包括生物制剂、单克隆抗体、蛋白质药物等。
生物制剂是一种基于基因重组技术制备的药物，它是由人工合成的蛋白质等基因重组分子组成的。
生物制剂的制备方法通常分为两种，一种是表达系统，另一种是细胞培养系统。
表达系统主要是对蛋白质进行重组，通过纯化、加工制剂等过程制成药品；细胞培养系统则是将细胞进行培养，产生蛋白质，并经过对蛋白质的纯化和加工等过程制成药品。
生物制剂具有高效、低毒、低副作用等优点，对于自身免疫性疾病、肿瘤等疾病有一定的治疗作用。
以恩达利莫（Enbrel）和希素莫环（Humira）为例，它们都是临床上常用的生物制剂，对类风湿关节炎、银屑病和强直性脊柱炎等具有显著的治疗作用。
单克隆抗体是由单一细胞株产生的抗体，可以对特定目标物选择性结合，相对于传统化学药物具有更高的特异性和选择性。
单克隆抗体制备的核心技术是通过融合细胞的方法进行生产。
这种技术的优越性在于，它可以大规模地制备相对于传统药物更为安全和便捷的单克隆抗体药物。
以赫赛汀（Herceptin）为例，它是一种针对癌症治疗的单克隆抗体，可以选择性结合HER-2受体，从而抑制癌细胞的生长。
蛋白质药物则是利用基因重组技术进行制备的药物，与生物制剂不同的是，蛋白质药物具有更加复杂的分子结构，但是也因此具有更高的生物活性。
例如，格列卫（Glucagon-like peptide-1 receptoragonist）类药物可以减缓糖尿病的进程，这是因为它们可以降低人体内的血糖水平，并且具有很好的安全性，广受医生和患者的青睐。
生物制品生产基本技术—菌种、毒种、虫种
（一）、自然选育培养法
在测定时，还应设生理盐水或培养液阴性对照和同种菌(毒、虫)种的阴性对照，以 免得出错误结论。 如果阴性对照动物发病，则实验不能成立； 如果阴性对照不发病，则对结论应慎重。 免疫原性测定是使对菌(毒、虫)种免疫敏感的动物产生免疫力，然后再用强毒攻击， 如果动物不发病死亡则表明有一定的免疫原性。如果分离的菌(毒、虫)株有数种，可 分别免疫，然后交叉攻击感染以确定抗原谱。 作为菌(毒、虫)种应选用的免疫原性好，且抗原谱广，能提供交叉保护的菌(毒，虫) 株。
（二）、人工选育培养法
（2）通过细胞培养物 ➢将强毒力菌(毒、虫)株通过细胞培养物反复传代也可以使其毒力减弱或消失。 如马传染性贫血驴白细胞弱毒株，山羊痘细胞弱毒株，通过猪肾细胞继代的伪狂犬 病弱毒株等。 ➢通过上述方法人工选育培养的菌(毒、虫)种，其形态、生理生化特性可能也会随之改
变，但最重要的是要保证遗传上稳定的弱的毒力和有良好的免疫原性。
（二）、按菌(毒、虫)种的用途分类
1、生产用菌(毒、虫)种 是指用于生产生物制品的菌(毒、虫)种，即指生产疫苗、抗毒素、类毒素、 抗血清及诊断用品的菌、毒种。 2、检定用菌(毒、虫）种 是指用于检定生物制品效力等菌(毒、虫)种。 3、工具用菌（毒、虫）种 是指在生物制品生产中作为工具使用的菌（毒、虫）种。
（二）、人工选育培养法
1、物理学方法 主要包括以下几个方面。
（1）温 度 ➢各种微生物都有其最适宜的生长繁殖温度，如果改变温度可引起发生变异，以 适应环境。再通过选择生产性能比较稳定的变异株，如巴斯德将炭疽杆菌培养 于42℃育成减毒株，用于预防注射；猪肺疫内蒙古系弱毒株也是经高温培养选 育的。的条件
➢菌（毒、虫）种是决定生物制品质量的重要因素，悬于培养好的菌（毒、 虫）种也是生物制品工作中最重要的一环。好的菌（毒、虫）种应具备如 下条件。
第二章 生物制品生产基本技术
强毒株→含海鸥牌洗衣粉培养基上传630代
羊链球菌弱毒菌株（F60） 马流产弱毒菌株（C355） 禽霍乱弱毒菌株（G190E40） 布鲁氏菌羊5号弱毒菌株 牛肺疫兔化弱毒株 牛瘟兔化弱毒株、猪瘟兔化弱毒株 羊痘弱毒株、鸭瘟弱毒株 马传贫驴白细胞弱毒株 鸡痘弱毒株 口蹄疫A型鼠化弱毒株、O型鼠化弱毒 株、ZB型弱毒株
3、寄生虫在抗原变异，抗原摹拟和寄生虫摄入宿主DNA和获得 宿主蛋白或以宿主抗原伪装自己方面也表现出非常复杂而有效的 免疫逃避机制。但是，任何一种寄生虫在宿主体内长期存活的免 疫逃避机制均未能完全搞清楚。仍是一个值得深入研究和探讨的 课题。
二、寄生虫疫苗的分类（category of parasite vaccine）
• 消毒：以物理或化学等方法杀灭物体上或介质中的病原微生物。
• 防腐：用物理或化学方法防止和抑制微生物生长繁殖。
• 热原：微生物的代谢产物，是一种致热性物质，是发生在注射给药后病人高热反应的根源。 这种致热物质被认为是微生物的一种内毒素，存在于细菌的细胞膜和固体膜之间。内毒素是 由磷脂、脂多糖和蛋白质所组成的复合物。由于此物质具有热稳定性，甚至用高压灭菌器或 细菌过滤后仍存在于水中。
源，高温灭菌区平行流热空气是自动循环使用 的，加热时所产生的部分温热空气由下部排风 机排出，由另一台小风机补充新鲜空气。）
主要用于针剂联动生产线上，适用于2-20mL安瓿瓶、 西林瓶、口服液瓶和其他药用玻璃瓶的灭菌干燥。
湿热灭菌设备
一、原理
利用饱和水蒸汽或沸水来杀灭细菌。当被灭菌物品置于高温高压的蒸汽介质中时，蒸汽遇冷 物品放出潜热，把被灭菌物品加热，温度上升到某一温度时，就有一些沾染在被灭菌物品上 的菌体蛋白质和核酸等一部分由氢键连接而成的结构受到破坏，尤其是细菌所依靠、新陈代 谢岁必须的蛋白质结构-酶，在高温和湿热条件下失去活性，最后导致微生物灭亡。
生物工程与生物制品制造技术
自动化发酵设备
通过自动控制和优化发酵条件，提高发酵效率 和产品得率。
自动化灌装与包装设备
实现生物制品的快速、准确灌装和包装，提高生产线的整体效率。
智能化监控系统保障安全生产
智能化环境监测系统
实时监测生产环境中的温度、湿度、洁净度等关键参数，确保生 产环境符合要求。
智能化过程监控系统
对生物制品制造过程中的关键步骤进行实时监控和数据采集，确 保产品质量和安全。
03
血浆站建设与管理
血浆站是血液制品生产的重要源头，加强血浆站建设和管理是确保血液
制品质量和安全的关键环节。未来，将进一步加强血浆站监管力度，提
高采浆量和采浆质量。
诊断试剂市场需求预测
诊断试剂市场概述
诊断试剂是用于疾病诊断的生物制品，包括免疫诊断试剂 、生化诊断试剂等。随着医疗水平的提高和人们健康意识 的增强，诊断试剂市场需求不断增长。
未来政策走向预测
加强产业创新支持
未来政策将更加注重对产业创新 的支持，鼓励企业加大研发投入 ，推动新产品、新技术的研发和 应用。
严格监管保障安全
未来政策将继续加强对生物制品 产业的监管力度，严格把控产品 质量安全关，保障公众用药安全 。
推动国际合作与交流
未来政策将积极推动国际合作与 交流，加强与国际先进水平的对 接和互认，提升我国生物制品产 业的国际竞争力。
03
挑战与机遇并存
人工智能在生物工程中的应用仍面临 数据质量、算法可解释性等挑战，但 同时也为行业带来前所未有的机遇。
可持续发展理念引领产业未来
绿色生物制造技术兴起
以可持续发展为理念，绿色生物制造技术在降低能 耗、减少污染等方面取得显著成果。
生物资源保护与利用并重
生物制品生产基本技术—灭活剂
( 三 )、影响灭活剂灭活的因素
1、被灭活物质的种类和特性 • 不同种类的被灭活物质对各种灭活剂的敏感性是不完全一样的。 • 被灭液的浓度如含菌或含蛋白量高，应适当增加灭活剂剂量或适当稀释灭活
剂，否则易造成灭活不完全。
( 三 )、影响灭活剂灭活的因素
2、灭活剂的种类和特性
•
不同种类的灭活剂适用的灭活范围不同
（四）、常用的化学灭活剂
2、结晶紫
是一种碱性染料，为甲基紫的纯品。易溶于水和乙醇，溶液为紫色 其灭活作用机制是通过他的阳离子与微生物蛋白质带阴电的羧基形成弱电离化合物， 破坏了微生物的正常代谢，扰乱微生物的氧化还原而起灭活作用
（四）、常用的化学灭活剂
3、苯酚
又称石炭酸，其抗菌作用是通过它在细胞膜上的表面活性作用而损害细菌细胞膜， 使胞浆漏出，菌体溶解。
( 三 )、影响灭活剂灭活的因素
5、有机物质对灭活的影响 • 有机物质中主要是蛋白质对灭活有一定的影响，如果杂质蛋白质含量高则对
细菌、病毒以及毒素呈一定的保护作用，不利于灭活剂的灭活。 • 灭活前应采用适当方法如离心、过滤等除去杂蛋白，以提高灭活效果。
（四）、常用 用于制造菌类疫苗和类毒素的灭活，浓度一般为0.1%～0.8%；而用于病毒类疫苗 的灭活浓度常为0.05%～0.2%。 疫苗灭活结束时应加入过量的焦亚硫酸钠中止反应。
一、灭活与灭活剂
制备生物制品，在20世纪初Lowenstein和Eisler（1911）就开始用甲醛减毒制 备破伤风类毒素；
1924年Puntoni以0.1％甲醛或0.1％苯酚制成犬瘟热疫苗； 1925年CastaBoyer和Plaudi等用甲醛灭活制备猪丹毒菌苗等。 随后许多学者还试用氯仿、甲苯、胺叶油等灭活剂制牛瘟脏器苗。到了20世纪 的30年代，Dorset等用结晶紫制猪瘟疫苗成功。
生物工程实现新型生物制品开发的核心技术
生物工程实现新型生物制品开发的核心技术生物工程是一门利用生物材料和生物过程开发新型生物制品的学科，其核心技术在近年来得到了迅速发展。
生物工程技术的应用范围广泛，涵盖了医药、农业、环境保护等众多领域。
本文将重点探讨生物工程实现新型生物制品开发的核心技术。
一、基因工程技术基因工程是生物工程领域最重要的核心技术之一。
通过对生物体的基因进行编辑、改造，可以实现目标基因的高效表达与产物合成。
常用的基因工程技术包括基因克隆、基因敲除、基因编辑等。
例如，通过基因工程技术，科学家们成功将人类的胰岛素基因导入大肠杆菌中，使其能够合成胰岛素，从而实现了大规模的胰岛素产量。
二、细胞培养技术细胞培养技术是生物工程领域另一个重要的核心技术。
它通过在体外培养细胞，使其能够大量生产有用的生物制品。
细胞培养技术主要包括细胞的分离、培养基的优化、培养条件的控制等方面。
例如，在生物制药领域，细胞培养技术广泛应用于重组蛋白的生产，如重组人血红蛋白的生产利用了细胞培养技术。
三、酶工程技术酶工程技术是生物工程领域的重要组成部分。
通过对酶的基因进行改造和调控，可以提高酶的产量和活性，从而实现高效的生产。
酶工程技术可以利用天然酶进行催化反应，也可以通过基因工程手段合成新型酶。
例如，某些蛋白酶的催化效率很低，通过酶工程技术，可以通过改造酶的底物结合位点和催化位点，提高酶的催化效率，从而提高生产效率。
四、转基因技术转基因技术是一种通过人为方式向生物体中导入外源基因的技术。
通过转基因技术，可以在生物体中表达出目标基因的产物，实现对生物体性状的改良。
转基因技术在农业领域的应用较为广泛，如转基因作物的开发，通过导入抗虫基因，使作物具有较强的抗虫能力。
五、合成生物学技术合成生物学技术是近年来兴起的一门学科，其主要研究如何通过设计和构建新的生物系统，实现生物合成目标产物的高效生产。
合成生物学技术主要包括生物零件的设计与组装、基因序列的优化、生物系统的调控等方面。
生物制品的生产技术与质量标准控制
生物制品的生产技术与质量标准控制生物制品作为一种新兴的医疗产品，其应用范围不断扩大。
但是，生物制品的生产技术和质量标准控制是一项非常重要的工作。
生物制品的生产技术和质量标准控制要求生产企业满足一系列的规范和标准，以保障生物制品质量和安全，是保证生物制品质量安全的重要手段。
一、生物制品的定义和特点生物制品是一类由生物系统生产的复杂物质，它们的结构、性质和目的较为复杂。
生物制品包括生物制剂、生物制品及生物工程制品等。
生物制品与化学药品不同，其生产工艺和质量标准控制更为复杂，生产周期也更长。
与化学药品相比，生物制品具有较高的复杂性和多样性，生产过程中需要进行较为复杂的制备、提纯和分离。
同时，生物制品的制备过程受到影响的因素也更多，包括微生物、细胞及其培养基等。
此外，生物制品的制备和质量控制也受到环境和部件等因素的影响。
二、生物制品的生产技术生物制品生产的主要部分是生产工艺和质量标准控制。
生产工艺是指生物制品的制备过程，包括培养体系的选取、菌种的选取和培养、生产设备的选取和设计、生产工艺的优化和改进等。
生产工艺的构建是生产企业保障生物制品质量和安全的重要保证。
生产工艺的优化和改进对于生物制品的质量和安全至关重要。
在生产工艺中，有一些环节非常关键，如培养基的配制、微生物的培养和自发酵过程。
这些环节的优化和改进，可以提高生产效率，降低生产成本，同时也可以提高生物制品的质量和安全。
三、生物制品的质量标准控制生物制品质量标准控制是指对生物制品进行规范化生产和质量控制的过程。
质量标准控制是保证生物制品质量和安全的重要手段，也是药品上市许可的重要条件。
与化学药品相比，生物制品的质量控制更为复杂，因此需要建立更为完善的质量标准控制体系。
生物制品的质量标准控制要求生产企业制定完善的质量管理计划和监控方案，确定质量监控指标和检测方法，并进行监测和控制。
同时，要加强生产设备和人员管理，确保生产环境卫生和质量安全。
四、生物制品生产技术和质量标准控制的发展趋势随着生物制品在医疗领域的广泛应用，生物制品的生产技术和质量标准控制也在不断发展和完善。
生物发酵工艺研究与生物制品生产
生物发酵工艺研究与生物制品生产第一章引言生物制品是指通过生物发酵工艺和生物技术手段，利用微生物、动植物细胞等生物材料生产出来的具有医药、食品等特定功能的产品。
生物制品的生产是一项复杂而重要的工作，对于提高生物制品质量和产量具有重要意义。
本文将着重介绍生物发酵工艺研究以及其在生物制品生产中的应用。
第二章生物发酵工艺研究方法与原理2.1 微生物筛选与改良技术微生物是生物发酵工艺的核心。
在生物制品生产过程中，合适的微生物菌种的选择和改良技术的应用非常重要。
目前，通过高通量筛选技术和基因工程手段，科学家们能够筛选出具有高发酵产率和优良特性的微生物菌种，并进行基因改造以提高其生产能力。
2.2 发酵过程控制技术生物发酵过程中，合理控制发酵条件对于生产高品质生物制品非常关键。
发酵过程控制技术包括温度、pH值、氧气含量的控制，以及营养物质的添加等。
通过精确的控制策略，可以提高生物制品的产量和纯度，同时优化发酵过程的效能。
第三章工艺优化与产物提纯3.1 发酵产物分析与过程优化为了获得高产量和高效益的生物制品，需要对发酵过程进行细致分析和优化。
通过监测发酵产物的浓度、纯度、活性等指标，并结合统计建模和优化算法，可以找到最优的发酵条件，并实现工艺的高效运行。
3.2 产物提纯技术在生物发酵过程中，产物的提纯是一个关键环节。
常用的提纯技术包括超滤、层析、电泳、膜分离等。
这些技术能够有效去除杂质，提高产品的纯度和活性。
此外，还可以采用重组蛋白工程技术，通过基因重组手段将目标蛋白的表达和纯化效率提高到一个新的水平。
第四章生物制品生产中的应用4.1 生物制药品生产生物制药品是指利用生物发酵工艺生产的药品，如抗生素、血液制品、肿瘤治疗药物等。
生物制药品具有高效、低毒副作用等优点，已成为现代医学发展的关键组成部分。
生物发酵工艺的研究对于生物制药品产业的发展具有重要意义。
4.2 生物食品生产生物食品是指通过生物发酵工艺生产的食品，如酸奶、豆豉、酱油等。
《生物制药工艺技术》生物制品生产技术
二、病毒类疫苗的一般制造方法
（四）疫苗纯化
疫苗纯化的目的是去除存在的动物组织（如牛血清），降低疫苗接种后 可能引起的的不良反应。用细胞培养所得的疫苗，动物组织量少，在细胞培 养过程中，通过换液的方法可去除培养基中的牛血清。
二、病毒类疫苗的一般制造方法
（五）冻干
疫苗的稳定性较差，一般在2-8℃下能保存12个月，在37℃下， 很多疫苗只能稳定几天或几小时，为了提高疫苗的稳定性，可使用冻 干的方法将之干燥，冻干的疫苗在真空或充氮后密封保存，使残余水 分保持在3%以下，可使疫苗的稳定性提高1倍以上。
（一）毒株的选择和减毒
1.毒株必须具备特定的抗原性，能使机体诱发特定的免疫力，足以阻止有关病原体的入 侵或防止机体发生相应的疾病。
2.毒种应具有典型的形态和感染特定组织的性，并能在传代过程中长期保持其生物学 特性。
3.毒种易于在特定组织中大量繁殖。 4.毒种在人工繁殖过程中不产生神经毒素或能引起机体损害的其他毒素。 5.如生产活疫苗，毒种在人工繁殖过程中应无恢复原致病性的现象。 6.在分离时或形成毒种的全过程中，毒株未被其他病毒所污染，并需要保持历史记录。
一、细菌性疫苗及类毒素的一般制造方法
（三）培养条件的控制
1.气体 习惯上人们按着细菌对氧气的需要将细菌分为需氧菌、兼性厌氧菌和厌氧菌。各种细 菌在生长时对氧气的需求不同。培养过程中溶氧要与菌种的需要特性保持一致。培养需氧菌时， 需要有高氧分压的环境，培养厌氧菌时，需要降低并严格控制环境中的氧分压。
一、细菌性疫苗及类毒素的一般制造方法
（五）稀释、分装和冻干
经杀菌的菌液，一般用含有防腐剂的缓冲生理盐水稀释至所需的浓度，然 后在无菌条件下分装于适当的容器，封口后2-10℃保存，直至使用。有些菌苗 特别是活菌苗，亦可分装后冷冻干燥，以延长其有效期。
生物化学与酶工程生产生物制品的关键技术
生物化学与酶工程生产生物制品的关键技术生物制品的生产是现代生物技术领域的一个重要研究方向。
随着生物化学与酶工程的发展，人们对于生物制品的生产过程有了更深入的了解，并提出了一系列关键技术，以提高生物制品的生产效率和质量。
本文将着重介绍生物化学与酶工程在生物制品生产中的关键技术。
一、酶工程的应用酶是生物体内催化化学反应的生物催化剂，通过发挥酶的催化作用，可以大大加速反应速度并提高产物纯度。
在生物制品生产中，酶工程被广泛应用于原料的酶法转化、废水处理和废弃物的资源化利用等方面。
（1）酶法转化酶法转化是指利用酶对原料进行催化反应，通过转化产生的中间体或产物来制备生物制品。
例如，利用酶对蔗糖进行水解反应可以得到葡萄糖，通过进一步的发酵反应可以制备乳酸、酒精等生物制品。
酶法转化具有高效、环保、无需高温高压等优点，在生物制品生产中具有广阔的应用前景。
（2）废水处理在生物制品生产过程中，会产生大量的废水，其中含有各种有机物质和颗粒物，若直接排放到水体中会对环境造成严重污染。
酶工程技术在废水处理中可以通过酶的催化作用，将废水中的有机物质降解，将颗粒物质分解为无害物质，从而达到净化水质的目的。
（3）废弃物的资源化利用生物制品生产过程中还会产生大量的废弃物，如植物残渣、动物内脏等。
酶工程技术可以将这些废弃物转化为有机肥料、生物柴油等有用产品。
通过将废弃物进行资源化利用，不仅可以减少环境污染，还可以实现废弃物的经济价值。
二、基因工程的应用基因工程是一种利用现代生物技术手段对细胞基因进行修改和重组的方法，通过改变细胞的基因组，可以使细胞产生需要的蛋白质或其他产品。
在生物制品生产中，基因工程被广泛应用于基因定点修饰、重组蛋白质表达和转基因生物培养等方面。
（1）基因定点修饰基因定点修饰是指通过基因工程技术对细胞的特定基因进行修改，例如引入外源基因或突变基因。
通过基因定点修饰，可以使细胞产生特定的酶或代谢产物，从而实现对生物制品的生产。
生物制品生产技术
生物制品生产技术引言生物制品是指通过利用生物技术方法生产的各种产品，包括生物药品、生物饲料、生物肥料等。
随着生物技术的迅猛发展，生物制品的生产技术也得到了极大的提升。
本文将介绍生物制品生产技术的主要步骤、关键技术以及未来的发展趋势。
生物制品生产技术的主要步骤生物制品的生产过程可以大致分为以下几个步骤：1. 发酵生物制品的生产通常以发酵过程为基础。
发酵是利用微生物对有机物进行代谢，并产生所需的目标产物。
发酵过程中需要控制好发酵条件，如温度、酸碱度、氧气供应等，以保证产物的质量和产量。
2. 分离与纯化发酵结束后，需要对发酵液进行分离和纯化。
常用的分离方法包括离心、过滤、膜分离等。
然后，通过柱层析、电泳等技术对分离得到的物质进行纯化，以去除杂质和提高纯度。
3. 质量控制生物制品的生产过程中需要进行严格的质量控制，包括产品的质量指标、微生物污染、杂质检测等。
常用的质量控制方法包括高效液相色谱、质谱、聚合酶链式反应等。
4. 包装与储存生物制品生产完成后，需要进行适当的包装和储存。
包装要求符合相关的法规标准，能够保护产品免受外界污染和损害。
储存条件也需要根据产品的特性和稳定性进行合理设置，以延长产品的保质期。
生物制品生产技术的关键技术1. 基因工程技术基因工程技术是生物制品生产中的关键技术之一。
通过对目标基因的克隆、表达和调控，可以实现对生产菌株的改良，提高产量和纯度。
常用的基因工程技术包括基因克隆、基因测序、基因表达等。
2. 发酵工艺优化发酵工艺的优化对于提高生物制品的产量和质量至关重要。
通过调控生物反应条件、提高底物利用率、改良发酵菌株等手段，可以提高发酵过程的效率。
同时，借助计算机模拟和优化方法，可以在发酵过程中实现实时在线监测和控制。
3. 膜分离技术膜分离技术是目前生物制品分离与纯化中的重要方法之一。
通过膜的孔径、渗透性和选择性，可以实现对发酵液中的目标产物和杂质的分离。
与传统的分离方法相比，膜分离技术具有操作简便、无需大量溶剂和低能耗等优点。
生物医药和生物制品的研发和生产技术
生物医药和生物制品的研发和生产技术第一章：生物医药的研发技术生物医药是指利用生物技术研发和生产的药物或治疗方法。
随着生物技术的快速发展，生物医药在临床治疗中的作用日益重要。
在生物医药的研发过程中，常用的技术手段包括基因工程技术、细胞培养技术、蛋白质工程技术等。
基因工程技术是指通过改变目标生物体的基因组来产生特定的药物成分。
首先，研究人员需要采集目标生物体的DNA，并通过PCR扩增得到目标基因。
然后利用限制性内切酶切割DNA，在载体上插入目标基因。
接着将质粒转入宿主细胞中，通过电穿孔或热激转化等技术手段使宿主细胞吸收质粒，最后筛选出含有目标基因的宿主细胞。
细胞培养技术是为大规模生产生物医药产品提供细胞培养环境的一种技术手段。
在细胞培养过程中，研究人员需要选择合适的培养基、细胞培养容器和培养条件，以促进细胞的生长和分裂。
同时，还需要控制细胞培养的时间和温度，以确保产物的纯度和质量稳定。
蛋白质工程技术是指通过改变蛋白质的氨基酸序列来产生具有特定功能的蛋白质。
研究人员可以通过DNA重组技术构建目标蛋白质的表达载体，然后将其转入宿主细胞中进行表达。
在蛋白质表达的过程中，还可以通过融合标签或增加特定的培养条件来提高蛋白质的表达水平。
第二章：生物制品的生产技术生物制品是指通过生物技术手段生产的具有医疗或保健作用的产品。
常见的生物制品包括生物药物、生物肥料和生物饲料等。
生物药物是利用生物技术研发和生产的医药产品。
在生物药物的生产过程中，首先需要通过细胞培养技术培养目标细胞，然后收集目标细胞的培养液，利用超滤、离心等技术手段进行纯化。
接着，通过冻干或冷冻保存等方式进行制剂的加工，并进行最终的包装和质量控制。
生物肥料是利用生物技术研制和生产的用于改良和促进植物生长的肥料。
在生物肥料的生产过程中，研究人员需要利用微生物发酵技术或固氮细菌等手段生产特定菌种。
然后，将菌种与适宜的基质混合，通过发酵和降解等过程，使有机物质转化为可被植物吸收利用的肥料成分。
兽医生物制品基本生产技术—动物实验技术
实验结果的反应性差，故不适合进行科学研究。
实验动物的分类
2.清洁动物 指在普通级动物基础上，排除对实验研究干扰大的病原体的
动物。这类动物剖检时要求组织器官无肉眼及显微病变，但 允许检出一定滴度的血清抗体。 来自无特定病原体（SPF）动物或剖腹产动物，饲养在半屏 障系统中，一切物品必须经过无菌处理，严防野生动物窜入 ，工作人员必须严格遵守操作规程。 可用于一般科学实验。
广泛应用于血清、疫苗等生物制品的检定，生物效应试验 和各种药物效价的测定等。
常用实验动物及其特性
（2）大鼠 性情温顺，易捕捉。对外环境适应性强，成年鼠很少患病
。易于饲养，繁殖能力强。 广泛用于生物制品的安全性评价和毒性试验、药物的毒理
学以及其他各领域的研究。
常用实验动物及其特性
（3）豚鼠 性情温顺，胆小易惊，对刺激反应非常敏感，对抗生素及
实验动物的分类
清洁动物房
实验动物的分类
3.无特定病原体动物（SPF动物） 指体内外不带有特定的微生物和寄生虫的动物。除普通级、
清洁级动物应排除的病原外，还必须不携带主要潜在感染、 条件致病及对科学实验有较大干扰的病原体。 来自无菌动物或悉生动物，饲养于屏障系统中。 目前已有SPF鼠、SPF 兔、SPF鸡、 SPF犬、SPF猫、SPF猪等 供科研、特定生物制品和药品的生产与检验用。
实验动物的分类
4.无菌动物（GF动物） 指用现有技术手段从动物体内外检查不到任何活的微生物和
寄生虫的动物。 通过无菌条件下剖腹取仔，然后将其饲养在无菌环境中培育
而成，卵生动物只需在无菌条件下孵化即可育成。 饲养在隔离器内，不与人直接接触。 在微生物学、免疫学、营养代谢等方面的研究中应用广泛，
常制品研究、生产、检定等方面。
沉淀技术在生物制品中的应用
沉淀技术在生物制品中的应用近年来，随着生物技术的不断发展与应用，生物制品越来越成为人们日常生活中不可或缺的一部分。
这些生物制品既可以用于医疗领域，也可以用于食品行业和生物科研等领域。
然而在生物制品的制备过程中，常常需要利用沉淀技术来分离和提纯生物分子，这种技术在生物制品中的应用越来越广泛，对于改善产品的纯度和质量起着至关重要的作用。
一、沉淀技术的概述沉淀技术是指利用物质的不同密度差异进行分离的一种技术。
在化学和生物制品生产中，常用的沉淀技术包括：离心沉淀、超滤、层析和电泳等。
其中，离心沉淀是最常用的一种技术。
离心是指将混合样品在高速旋转的离心机中进行离心，使得悬浮在液体中的生物细胞或分子等物质通过密度差异形成沉淀和上清液。
这种技术不仅可以分离和提纯生物大分子，还可以用于分离蛋白质、酵母、细胞和病毒等微生物。
超滤和层析则是在离心沉淀基础上的升级版，通过调节不同的滤膜或载体，可以将更小的分子进行分离和提取。
二、沉淀技术在生物制品生产中的应用生物制品是一类生命科学领域中的高附加值产品，包括生物药物、植物提取物、酶制品、疫苗和抗体等。
生物制品具有高度的复杂性和灵敏性，制备过程中需要使用高精尖技术保证其纯度和质量。
而沉淀技术由于其分离效率高、操作简单易行等特点，被广泛应用于生物制品生产中。
1. 生物制品的纯化和分离在生物制品的制备过程中，往往需要利用沉淀技术从混合的物质中分离出纯的生物分子。
例如，利用离心技术可以分离出细胞和细胞碎片，层析技术可以将蛋白质进行分离和提纯。
超滤技术则可以将过滤孔径较小的物质分离出来，提高产品的纯度和质量。
2. 生物制品的浓缩和富集沉淀技术还可以将生物物质富集和浓缩，在实际生产中具有重要的应用价值。
例如，利用超滤技术可以将大分子物质富集到一定程度，避免了反复稀释和浓缩的过程，提高了操作效率。
同时，利用离心法也可以将液体系统中的大量溶质从溶液中浓缩出来，在过程中耗费的时间和能量比较低，是一种高效的处理方法。
生物制品的生产工艺及分析技术研究
生物制品的生产工艺及分析技术研究从古至今，医药领域一直是人类最关注的领域之一。
随着科学技术的飞速发展，生物制品成为了医药领域中的一支重要力量。
生物制品是利用现代生物技术生产的各种药品，例如抗生素、生物制剂等。
其生产工艺十分关键，对于提高产品质量和研发新药品都具有至关重要的作用。
本篇文章将重点分析生物制品的生产工艺及分析技术研究。
一、生物制品生产工艺生物制品生产工艺分为四大类：细菌发酵、真菌发酵、动物细胞培养和转基因技术。
其中，细菌发酵和真菌发酵是最为常见的生产工艺。
1. 细菌发酵细菌发酵生产是将微生物转化为有用的药品过程。
其生产工艺的主要步骤分为菌种培养、发酵、提取、分离、纯化和制剂。
其中，菌种培养是细菌发酵过程的第一步。
菌种培养水平的好坏直接影响到细菌发酵的成功率和生产成本。
发酵是细菌制药工艺的核心部分，其采用发酵罐进行，主要是通过调整反应体系的温度、气体浓度、pH值等参数以提高发酵效率。
2. 真菌发酵真菌发酵工艺是将真菌发酵的孢子进行培养并萃取活性成分产生的药品生产技术。
真菌发酵生产工艺过程也分为菌种培养、发酵、提取、分离、纯化和制剂几大环节。
其中，培养环节主要利用各种培养基营养条件，使真菌快速繁殖，为后期产生毒素打下基础；发酵环节主要控制培养液的温度、pH值、通气和摇动等参数，使孢子分泌出具有药理活性的毒素。
二、生物制品分析技术生物制品的分析技术是指用各种方法对生物制品质量和安全性进行定量、定性和筛查的技术手段。
生物制品的分析技术主要涵盖物理化学分析、生物学分析、免疫学分析等几大类型。
1. 物理化学分析物理化学分析主要是对药品的成分进行定性、定量的方法，包括质量控制方法、质量评价方法和质量趋势研究方法。
常用的技术包括色谱法、质谱法、核磁共振法和红外光谱法等。
2. 生物学分析生物学分析主要是对生物制品中的蛋白质、酶、基因、代谢物及细胞等进行分析的一种手段。
常见的技术包括电泳法、PCR技术、凝胶微滴方法和荧光测试等。
生物制品生产基本技术—基本设施及要求
制品企业总体布局图
大动物房 小动物房
主 厂房
质检楼
锅炉房
脾林苗
污水 处理站
仓储
办公区 生活区
大 门
疫苗生产工艺流程
菌（毒）种
Hale Waihona Puke 培养物（培养基、动 物、禽胚或
细胞等）
收获抗原（培养液、含毒组织、
胚液或细胞液等）
配苗
分装
冻干成活疫苗或灭活后制成灭活疫苗。
厂房、设施和仪器设备
《GMP》证书是疫苗生产的准入证， 疫苗生产必需拥有与生产工艺相符合的 生产线 GMP 生产车间设计要求
功能区：抗原制备区、成品生产区、洗涤区、办公区。各区域和功能间 以洁净走廊相连，严格按人流物流分开原则进行设计。 洁净度：按各功能间洁净度、压力、压差要求设计施工。有10万级区、 万级区和局部百级区。 六大系统：供电、供水、供汽、污水处理、净化、监控。
厂房、设施和仪器设备
检验设施 质检室 检验动物舍（应配备有符合各类实验动物级别饲养设施）
仓储设施 原辅材料库 半成品库 成品库
厂房、设施和仪器设备
灭菌设备：高压蒸气灭菌柜、干热箱、锅炉等； 净化设备：净化机组、无菌室、超净工作台等； 微生物培养设施设备：温室、孵化器、细胞培养转瓶机、各种罐体、生化培养箱等； 乳化设备：各种罐体、胶体摸、高压匀浆机等； 冻干设备：冻干机； 灌装设备：洗烘连动线、自动灌装加塞联动机； 包装设备：扎盖机、帖标机； 冷藏冷冻设施设备：冷库、冷柜、液氮罐等； 污水废弃物处理设施设备：灭菌柜、消毒罐、污水处理站； 检验仪器设施设备：各种显微镜、水分测定仪、二氧化碳培养箱、生物安全柜、动物房等。
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六大系统：供电、供水、供汽、污水处理、净化、监控。
厂房、设施和仪器设备
• 检验设施
质检室 检验动物舍（应配备有符合各类实验动物级别饲养设施）
• 仓储设施
原辅材料库 半成品库 成品库
厂房、设施和仪器设备
• 灭菌设备：高压蒸气灭菌柜、干热箱、锅炉等； • 净化设备：净化机组、无菌室、超净工作台等； • 微生物培养设施设备：温室、孵化器、细胞培养转瓶机、各种罐体、
➢一般来说，动物接种后产生80％以上的保护即为有良好的 免疫原性。因为机体的免疫反应是一个生物学过程，受到遗 传、环境等许多因素的影响，不论使用菌(毒、虫)种的免疫 原性多么好，都不可能一次使免疫动物获得100％的保护。
➢生物诊断用品的菌(毒、虫)种应以少量注入动物体内就能 产生强烈免疫反应，这样才能生产出既特异又灵敏的诊断用 品。
➢如生产猪瘟兔化弱毒疫苗用的猪瘟种毒，生产 破伤风类毒素的破伤风菌种，生产炭疽抗血清的 Ⅱ号炭疽杆菌C40～22菌种，制造牛型结核菌素 的牛型结核杆菌菌种等．
2、检定用菌(毒、虫）种
是指用于检定生物制品效力等菌(毒、虫)种。如效力 检验中攻毒用的新城疫强毒，猪丹毒强毒菌种等。另外， 还包括用于检定诊断血清交叉反应的菌（毒、虫）种。
➢自然选育培养法是对自然界中已存在的菌(毒、虫)株进行 分离，从中选择适于种用的菌(毒、虫)株。一般常以感染的 动物，媒介昆虫以及污染物等获得分离。
➢分离到菌 (毒、虫)株的毒力，抗原性往往都不同。
某些自然分离的菌(毒、虫)株毒力很强，如自然分离的多 杀性巴氏杆菌等。这些强毒株适于制造灭活菌、诊断抗原和 检定用。
生化培养箱等；
• 乳化设备：各种罐体、胶体摸、高压匀浆机等； • 冻干设备：冻干机； • 灌装设备：洗烘连动线、自动灌装加塞联动机； • 包装设备：扎盖机、帖标机； • 冷藏冷冻设施设备：冷库、冷柜、液氮罐等； • 污水废弃物处理设施设备：灭菌柜、消毒罐、污水处理站； • 检验仪器设施设备：各种显微镜、水分测定仪、二氧化碳培养箱、
在菌(毒、虫)种的选育培养过程中还要避免 污染强毒和其他病原体，尤其是用于活疫苗生 产的菌(毒、虫)种。 ➢因为在生产活疫苗时，不加任何灭活剂，使 污染的强毒和病原体得不到应有的处理。 ➢对于毒种来说，控制污染外源病原体是较难 的。因为用于病毒培养的细胞、鸡胚及动物不 易做到完全无污染。
选育培养的菌(毒、虫)种要有典型的生物学性状，如形 态、染色、培养特性、生化特性、抗原结构、致病性、宿 主适应范围、代谢产物、色素产生以及抵抗力等。 这些生物学性状是鉴别菌(毒、虫)种的重要标志，可用 以区分其他微生物，进而在生产和检定生物制品时依据这 些性状来控制质量。 如果发现某些性状改变就标志着菌(毒、虫)种发生了变 异或发生外源污染，应及时废弃或更换，如果是用弱毒或 无毒菌(毒、虫)种生产生物制品，这些性状也是区别强毒 株的标志，从而保证制品的安全性和免疫原性。
2、化学方法 主要包括以下几个方面。
（1）改变培养时的气体环境 ➢需氧菌培养在厌氧环境中，或厌氧菌培养在 有氧环境中，也能够逐渐适应，产生变异株。 如Stern在二氧化碳环境中选育出了无荚膜的 炭疽杆菌变异株，
（2）改变培养基的组成
➢在细菌培养基中加入或去掉其中物质可以引起变异， 并使毒力下降，成为弱毒株。 如马流产C355弱毒株是在培养基中加入了醋酸铊育 成的；猪肺疫630弱毒株是在含海欧牌洗涤剂培养基中 连续传代育成的；猪丹毒G4T10弱毒株是在含维黄素 的血琼脂上培养选育的；Williams应用亚硝酸和羟胺 诱变选育了腺病毒株。 ➢能够引起变异的化学物质种类很多，除上述外还包括 许多碱基化合物、烷基化合物以及吖啶类。
3、生物学方法 主要包括以Leabharlann 几个方面。（1）通过动物机体
➢将强毒菌(毒、虫)株通过非易感的动物机体，可以改 变强毒株的毒力，使其成为弱毒株。 如将猪瘟强毒通过兔体传代使其成为猪瘟兔化弱毒用 于疫苗生产，已在世界享有盛誉；通过鹌鹑成功地培育 了鸡痘鹌鹑化弱毒；通过豚鼠成功地培育了布氏杆菌羊 五号弱毒株；通过乳兔成功地培养了猪地方性肺炎乳兔 化弱毒株等。也可以通过鸡胚培育弱毒株，如鸡胚致弱 的羊痘鸡胚化弱毒。
生物制品使用的菌(毒、虫)种除具有良好的 免疫原性外还应安全。菌(毒、虫）种的安全性 主要与两方面的因素有关，一方面是菌(毒、虫) 种本身的残余毒力；另一方面是混有强毒或其 他病原体。 ➢残余毒力是指减毒后的弱毒菌(毒、虫)种仍 残存一定的毒力或致病力。如鸡新城疫Ⅰ系弱 毒疫苗种毒就保持较强的毒力，对雏鸡接种后 有致病性，而2个月龄以上的鸡接种才安全。
➢人工选育培养法就是分离的菌(毒、虫)株在培养和传 代过程中采用某些理化和生物学方法诱发其发生变异， 使毒力减弱或消失而仍保持一定的免疫原性。 ➢有的毒力致弱后毒力稳定，用于制苗的代数不受限制； 也有的在继代时免疫性亦随之丧失，制苗使用代数较窄。 ➢入选的微生物要经过毒力和免疫原性稳定性测定，在 培养基中连续传代后不改变的，说明稳定性良好且有使 用价值。 ➢人工选育培养菌(毒、虫)种可具体分以下几种方法。
微生物在传代和生产过程中，由于大量增殖时基因突 变而表现出某些特性变异。如形态、生化特性、毒力、 抗原性及药物敏感性的变异。 人工选育培养弱毒菌（毒、虫)株就是利用毒力变异的 特性在一定条件下经多次传代而使毒力减弱的。 然而，选育出的菌(毒、虫)种在用于生产时要注意具有 稳定的遗传特性和保持微生物群体的一致性，尤其是毒 力和免疫原性的遗传稳定性，以避免毒力返祖和免疫原 性下降，从而确保生物制品的质量。
※对于菌(毒、虫)种要有明确的来源，分 离时动物病情及流行情况，传代及生物 学和免疫学特性，生产工艺质量检定， 动物试验等各方面的研究资料和数据都 应完整。这样的菌(毒、虫)种方可用于 生物制品。
★生物制品用的菌(毒、虫)种还应该易于培养 和大量繁殖，并能稳定地达到和保持较高的 滴度。
★用于生产类毒素和抗毒素的菌种，应该能够 大量产生外毒素。对于某些生物制品还应考 虑提取、纯化手段等。
➢在菌(毒、虫)种的选育培养时，尽量降低毒力， 保持良好的抗原性，使动物接种后既能产生良好的 免疫，又不致于引起发病或损伤。 ➢而在实践中，一般免疫原性与毒力呈正相关，免 疫原性强毒力也强。如果采用某种方法使毒力降低， 免疫原性也随之降低。用于生产灭活疫苗的强毒都 有很好免疫原性，而用于生产活疫苗的弱毒，免疫 原性都有一定程度下降。这是选育培养菌(毒、虫) 种时需要注意和解决的一个矛盾，从某种意义上讲 安全更为重要。
一般采用限制菌(毒、虫)种的传代次数和培养条 件来控制变异幅度，并定期进行检定。发现有性 状变化时可通过育种、传代、蚀斑纯化等方法来 恢复性状；如果在微生物群体中发现性状不一致， 可采用传代和筛选等方法进行纯化，例如，细菌 可挑选典型的单个菌落，病毒可挑选蚀斑进行纯 化。 菌(毒、虫)种在遗传上的稳定性和一致性对生产 至关重要。
➢按着菌(毒、虫)种的标准选育培养 优良的菌(毒、虫)种是生物制品研究 和生产的关键。选育培养方法一般有 如下几种。
➢人们对生物制品菌(毒、虫)种的选育培养最先采用的方法 就属于自然选育培养法。
➢远在15世纪，我国民间就用良好的天花患者的干燥痂皮研 成粉末吹鼻免疫。100多年前，巴斯德就选用鸡霍乱巴氏杆 菌陈旧培养物制备疫苗，并获得免疫成功。此后又有学者采 用加热杀死鸡霍乱巴氏杆菌首次制成了死菌疫苗。
（2）通过细胞培养物
➢将强毒力菌(毒、虫)株通过细胞培养物反复传代也可 以使其毒力减弱或消失。 如马传染性贫血驴白细胞弱毒株，山羊痘细胞弱毒 株，通过猪肾细胞继代的伪狂犬病弱毒株等。 ➢通过上述方法人工选育培养的菌(毒、虫)种，其形态、
3、工具用菌（毒、虫）种
是指在生物制品生产中作为工具使用的菌（毒、虫） 种。如基因工程中表达某些异种抗原用的宿主大肠杆菌、 枯草杆菌、酵母菌等。
➢菌（毒、虫）种是决定生物制品质 量的重要因素，悬于培养好的菌（毒、 虫）种也是生物制品工作中最重要的 一环。好的菌（毒、虫）种应具备如 下条件。
➢由于生物制品主要是免疫制剂，故耍求菌(毒、虫)种应具 有良好的免疫原性，使用后能产生坚强的体液免疫和细胞免 疫，并持续较长时间，同时对某些菌(毒，虫)种而言还应是 抗原谱广。
作为菌(毒、虫)种应选用的免疫原性好，且抗原谱广， 能提供交叉保护的菌(毒，虫)株。
由于死疫苗免疫效果不理想，而且反应重， 这便促使人们研究和使用弱毒活疫苗免疫。 生产弱毒活疫苗所用的菌(毒、虫)种只靠自 然选育培养是远不能满足要求的，因而开始了 人工选育培养菌(毒、虫)种。目前，在生产中 用于制造疫苗菌(毒、虫)种多为人工选育培养 获得。 本法是生物制品菌(毒、虫)种选育培养的最 重要、最常用的方法。
1、物理学方法 主要包括以下几个方面。
（1）温 度 ➢各种微生物都有其最适宜的生长繁殖温度， 如果改变温度可引起发生变异，以适应环境。 再通过选择生产性能比较稳定的变异株，如巴 斯德将炭疽杆菌培养于42℃育成减毒株，用 于预防注射；猪肺疫内蒙古系弱毒株也是经高 温培养选育的。
（2）射 线 ➢将微生物暴露于紫外线或χ射线、γ射线下， 大大增强了微生物的突变频率，可从中选出变 异株。如制造乙型脑炎疫苗的2-8弱毒株就是 采用紫外线处理和小鼠皮下传代选育的。仔猪 副寒C500号菌株选育过程中就使用了钴γ 射 线处理。
自然选育培养菌(毒、虫)种时，首先从分离的菌(毒、 虫)株中选择形态特征、培养特性、理化特性典型的， 并与相应诊断血清出现明显血清学反应的菌(毒、虫)株， 然后再测定其毒力和免疫原性。
测定时首先用实验动物进行初选，然后再用原宿主动 物测定。
毒力测定一般是先选用敏感的实验动物，鸡胚或细胞 培养物等，测定菌(毒、虫)株的半数致死量（LD50）， 最小致死量（MLD），半数感染量（ID50）或者是半数 鸡胚致死量（ CELD50 ），半数鸡胚感染量 （CEID50 ）、半数细胞感染量（TCID50 ）等。