稳定表达Caveolin-3基因突变型P104L和P47L的C2C12骨骼肌细胞株的构建
构建稳定表达小鼠RAE1ε的B16F10细胞株
Dis,2016,26(4)：553-560.[28]Chang T1,Streja E,Moradi H.Could high-density lipoproteincholesterol predict increased cardiovascular risk?[J]Curr OpinEndocrinol Diabetes Obes,2017,24(2):140-147.[29]Woudberg NJ,Goedecke JH,Blackhurst D,et al.Associationbetween ethnicity and obesity with high—density lipoprotein (HDL)function and subclass distribution[J].Lipids Health Dis, 2016,15：92-103.(收稿日期:2019-01-22)(本文编辑：卜明)构建稳定表达小鼠RAEI e的B16F10细胞株陈敏华宁晓敏李冬馄钱莉【摘要】目的通过转染及流式细胞术筛选获得稳定表达小鼠RAEIe分子的B16F10细胞株。
方法将本研究团队前期构建的含有小鼠RAEIe基因的真核表达载体通过脂质体法转染B16F10细胞，经流式细胞仪(flow cytometry,FCM)筛选后，建立稳定高表达的B16F10细胞株，将该细胞株与NK细胞共培养后，检测IFN-7的分泌情况。
结果建立了稳定表达RAEIe基因的B16F10细胞株，该细胞株上的RAEIe具有刺激NK细胞高分泌IFN-丫的功能「结论获得了稳定表达RAEIe分子的BI6F10细胞株，为后续研究奠定了物质基础。
【关键词】RAEIe；转染；B16F10细胞［中图分类号JR392.2［文献标识码］A DOl：10.3969/j.issn.1002-1256.2019.07.002Construction of stable B16F10cell line expressing mouse RAEIe CHEN Min-hua.Medical school of Yangzhou University,Yangzhou,Jiangsu,225001,China.[Abstract]Objective To establish a stable B16F10cell line expressing mouse RAEIe by using transfect and flow cytometry.Methods The plasmid pVITR02-mcs/RAE1e containing RAEIe cDNA was constructed in the previous study.Bl6F10cells were transfected with pVITRO2-mcs/RAEle plasmid(RAEIe transfectant). Stable B16F10-RAE1W transfectants were sorted for high expression of RAEIe by flow cytometry.NK cells were co -cultured with B16F10-mock or B16F10-RAE18cells and then the IFN-*y in cell culture supernatants were assayed using ELISA kits.Results Stable transfected B16F10cell line expressing RAEIe gene was established and NK cells stimulated with B16F10-RAEIe cells expressed high levels of IFN-y compared to NK cells stimulated with B16F10—mock cells.Conclusions The establishment of stable transfected B16F10cell line has provided solid experimental foundation for further studies.[Key words]RAEIe；Transfection；B16F10cell line视黄酸早期转录因子(retinoic acid early transcript1e,RAEIe)是RAE1家族的成员之一，RAE1家族为GP1偶联的细胞膜蛋白，由a、B、Y、6和£五个成员组成⑷。
Caveolin-1蛋白的表达纯化及其与肿瘤的关系研究
Caveolin-1蛋⽩的表达纯化及其与肿瘤的关系研究细胞窖存在于成纤维细胞、内⽪细胞、I型肺泡上⽪等多种终末分化细胞中，是细胞质膜上直径为50~100nm的烧瓶状微内陷结构，其中Caveolin-1蛋⽩是细胞窖的重要的结构蛋⽩。
有研究认为Caveolin-1参与调控了与肿瘤发⽣、发展、侵袭和转移以及⾎管形成相关因⼦的活性。
进⾏Caveolin-1蛋⽩表达纯化，有利于获得较⾼纯度的蛋⽩，为进⼀步研究其⽣物学活性奠定了基础。
1、Caveolin-1蛋⽩表达纯化研究作为⾃然界⽣命活动的重要参与部分的蛋⽩质，⼏乎都是以复杂的混合形式存在于细胞的各个结构中的。
在不破坏蛋⽩质的空间结构及⼀级结构⽽不影响其⽣理功能的情况下，完全把蛋⽩质分离、纯化出来，均有很⼤的难度。
为了增加蛋⽩样品的纯度和保持样品的活性，需要进⾏蛋⽩分离和蛋⽩纯化，采⽤基因⼯程技术可以进⾏蛋⽩表达纯化研究。
美迪西提供蛋⽩纯化服务，其拥有多种蛋⽩表达协同，包括原核蛋⽩表达系统、酵母蛋⽩表达系统、昆⾍细胞蛋⽩表达系统（杆状病毒）哺乳动物细胞蛋⽩表达系统，具备多种融合技术，可以为客户在蛋⽩表达与纯化⽅⾯提供多种选择。
从⽅案设计、基因优化、表达条件优化到纯化的技术体系，以提⾼⽬的蛋⽩表达⽔平。
有研究者运⽤基因⼯程⽅法制备Caveolin-1重组蛋⽩及其抗体，为研究Caveolin-1的功能奠定基础[1]。
⽅法构建原核表达载体pGEX-5X-1-Caveolin-1，酶切鉴定后，转化⼤肠杆菌BL21(DE3)，IPTG诱导表达。
表达产物经SDS-PAGE及Western blot⽅法鉴定基因⽚段的正确性及表达蛋⽩的特异性后，进⾏纯化。
纯化的重组蛋⽩免疫Balb/c⼩⿏3次后，ELISA法测定兔多克隆抗体滴度。
结果克隆得到的⽬的基因⽚段⼤⼩与预期相符。
重组Caveolin-1蛋⽩相对分⼦质量约为48000，以包涵体形式存在Caveolin-1蛋⽩N端融合GST标签便于纯化及鉴定。
人肺鳞癌组织中Caveolin-1的表达及预后意义
人肺鳞癌组织中Caveolin-1的表达及预后意义马华玲;陈洪雷;朱润庆;郑明军;刘毓玲;范克非;杨为贵【摘要】目的：研究Caveolin-1在人肺鳞癌中的表达,探讨Caveolin-1的表达与人肺鳞癌临床病理特征以及预后的关系.方法：运用免疫组织化学法检测人肺鳞癌组织中Caveolin-1、PCNA的表达,并结合患者的临床病理特征和生存情况进行分析.结果：Caveolin-1在人肺鳞癌中阳性率显著低于正常肺组织(P<0.001)；Caveolin-1的表达与肺鳞癌的TNM分期(P=0.018)及淋巴结状态(P=0.006)有关.在人肺鳞癌组织中Caveolin-1与PCNA表达呈正相关(r=0.360,P=0.018).生存分析显示肺鳞癌中Caveolin-1阳性组的生存时间显著低于阴性组(P=0.007),在24例淋巴结未转移组中Caveolin-1阳性组的生存时间显著低于阴性组(P=0.002).多因素Cox分析显示Caveolin-1阳性表达、高临床分期、支气管残端有癌残留的肺鳞癌患者术后生存时间较短.结论：Caveolin-1的表达与肺鳞癌的恶性演进呈正相关；其可促进肺癌细胞的增殖.Caveolin-1可作为评估肺鳞癌患者的不良预后指标.%Objective: This study aims to examine caveolin-1 expression in lung squamous cell carcinoma (LSCC), to investigate the relationship of caveolin-1 expression with clinicopathological features, and to estimate the prognostic value of caveolin-1. Methods:Immunohistochemical staining was used to determine caveolin-1 and PCNA expression in LSCC. The correlation among caveolin-1 ex-pression, pathological features, and clinical outcomes were investigated. Results: The positive rate of caveolin-1 protein was significantly lower in LSCC than in normal lung tissues(P<0.001). Caveolin-1 expression was statistically correlated with the TNM stage (P=0.018) and lymph node metastasis (P=0.006). Caveolin-1expression was also positively correlated with PCNA expression in LSCC (r=0.360; P=0.018). The Kaplan–Meier survival curve showed that patients with positive caveolin-1 expression had a significantly shorter survival time compared with the patients with negative expression (P=0.007). The caveolin-1-positive group had a significantly shorter survival time in 24 patients without lymph node metastasis compared with the negative group (P=0.002). Cox multivariate analysis revealed that patients with caveolin-1 positive expression, high TNM stage, and positive surgical margin had a significantly unfavorable prognosis. Conclusion: Caveolin-1 expression is positively correlated with LSSC development as well as progression, and may promote tumor cell proliferation. Caveolin-1 may be used as a poor prognosis marker of LSCC.【期刊名称】《中国肿瘤临床》【年(卷),期】2013(000)002【总页数】4页(P93-96)【关键词】肺鳞癌;Caveolin-1;预后【作者】马华玲;陈洪雷;朱润庆;郑明军;刘毓玲;范克非;杨为贵【作者单位】武钢总医院病理科武汉市430080;武汉大学医学院病理学教研室;武汉大学医学院病理学教研室;武钢总医院病理科武汉市430080;武钢总医院病理科武汉市430080;武钢总医院病理科武汉市430080;武钢总医院心胸外科【正文语种】中文肺鳞癌占原发性肺癌1/3且有较差的预后，寻找与肺鳞癌预后有关的生物学指标成为研究的热点。
人血脑屏障通透性相关基因Caveolin-1的克隆及其蛋白表达、纯化
人血脑屏障通透性相关基因Caveolin-1的克隆及其蛋白表达、纯化招树涛;徐永健;陈浩云【摘要】目的克隆与人血脑屏障通透性相关基因Caveolin-1,并在大肠埃希菌中表达,最后进行蛋白纯化、鉴定.方法根据基因库中收录的Caveolin-1基因序列,设计其上下游引物,经过PCR反应合成Caveolin-1双链,然后与pET28a(+)载体重组,筛选阳性克隆并对DNA序列分析鉴定.将已构建好的重组质粒pET28a-Caveolin-1转入化大肠埃希菌BL21 (DE3),异丙基硫代半乳糖苷诱导融合蛋白表达,表达产物经镍离子亲和层析(Ni2+-NTA)纯化,SDS-PAGE检测和Western blot鉴定.结果PCR扩增的Caveolin-1 DNA片段经鉴定确认为人Caveolin-1基因.经异丙基硫代半乳糖苷诱导的含有pET28a-Caveolin-1重组质粒的DE3菌表达出重组人Caveolin-1融合蛋白.重组蛋白经Ni2+-NTA亲和层析纯化,获得了较高纯度的融合蛋白.结论本研究成功克隆了人血脑屏障通透性相关基因Caveolin-1,并对其进行蛋白表达、纯化,获得了较高纯度融合蛋白,为进一步的相关临床研究奠定了基础.【期刊名称】《中国医药导报》【年(卷),期】2018(015)032【总页数】4页(P13-15,23)【关键词】血脑屏障;通透性相关基因;Caveolin-1;克隆;表达;纯化【作者】招树涛;徐永健;陈浩云【作者单位】广州中医药大学金沙洲医院重症医学部,广东广州510168;广州中医药大学金沙洲医院重症医学部,广东广州510168;广州中医药大学金沙洲医院重症医学部,广东广州510168【正文语种】中文【中图分类】R543.5脑梗死患者多死于脑水肿及出血性转化，这与脑缺血组织中血脑屏障的受损密切相关[1]。
Caveolins蛋白是小窝的主要结构成份，与小窝的形态构成及相关功能相关，其家族中包括Caveolin-1、Caveolin-2、Caveolin-3，其中Caveolin-1分布最为广泛，且在不同的组织中表达水平不同[2]。
Caveolin
Caveolin—3基因在疾病中的初步研究作者：马静黄娟娟陈睿来源：《维吾尔医药》2013年第04期摘要：caveolin-3是微囊蛋白（Caveolin，cln）是Caveolae的表面标记蛋白之一，越来越多的发现证明其突变可以引起多种疾病的发生。
关键词：caveolin-3；突变；疾病目前人们对Caveolae的研究越来越热门，不断发现其与疾病的发生有重要联系。
质膜微囊（Caveolae，cle），是细胞表面特异性内陷结构（直径约50～100um），它广泛存在于各种类型的细胞中，比如在内皮细胞、上皮细胞、成纤维细胞、脂肪细胞、平滑肌细胞等细胞中表达丰富[1]。
微囊蛋白（Caveolin，cln）是Caveolae的表面标记蛋白，主要有Caveolin-1，Caveolin-2和Caveolin-3三种类型组成，其中Caveolin-3（CAV3）是在1996年首次被鉴定的，它主要在骨骼肌、心肌以及平滑肌上大量表达，所以又称为肌质膜微囊蛋白（muscular caveolin） [2]。
1.Caveolin-3（CAV3）蛋白及基因的相关介绍CAV3是由l51个氨基酸组成的蛋白质，其跨膜部分位于中央的33个氨基酸构成，其N 端和C端均游离于胞浆面，其N端有41个氨基酸（61～101）构成Caveolin脚手架区（caveolin scaffolding domain，CSD）部分，它能够与多种信号蛋白上存在的共同特异序列结合。
CAV3和Caveolin-1具有极高的同源性，两者的氨基酸序列有85%相同，CAV3上CDS的氨基酸（55～74）与caveolin-1的CDS相似，主要参与调节质膜微囊G蛋白（G protein guanylate diphosphate，Ga–GDP），Src–酪氨酸激和原癌基因中的H-Ras等多种信号分子[3]。
2.目前Caveolin-3（CAV3）基因突变引起疾病近年来发现CAV3基因变异可能与肌营养不良症、骨骼疾病、心血管疾病等有密切的关系，已经发现的包括：肢带型肌营养不良（limb-girdle muscular dystrophy-1c，LGMD-1c），波纹肌肉瘤（Ripping muscule disease，RMD），远端疾病（distal myopathy，DM），特发性和家族性高CK血症（hyperCKemia ，HCK）和肥厚型心肌病（hypertrophic cardiomyopathy，HCM）。
Caveolin—3对骨骼肌、心肌伤病的调控机制
Caveolin—3对骨骼肌、心肌伤病的调控机制作者：苏艳红袁乾坤来源：《中国学校体育》2014年第08期摘要：通过介绍Caveolin-3的结构组成以及其对骨骼肌、心肌伤病的调控机制，探讨Caveolin-3的变化所引起的相关信号通路的变化，分析讨论Caveolin-3对骨骼肌萎缩、肥大和心肌伤病的作用机制，从而为运动引起的骨骼肌和心肌改变提供Caveolin-3的作用机制。
结果表明：Caveolin-3的缺失会导致Akt蛋白和p38信号网络的同时衰减从而导致骨骼肌萎缩，通过检测其变化，使得临床中使用TβRI激酶抑制剂（Ki26894）来对抗骨骼肌萎缩成为可能；Caveolin-3的适当上调会激活PI3-kinase/AKT/mTOR通路从而导致肌肉的再生与肥大；通过构建Caveolin-3敲除模型，使得采用siRNA介导基因表达的分子治疗方法治疗骨骼肌病变成为可能；通过重建Caveolin-3表达和激活Akt/eNOS/NO信号，可以减轻心脏舒张期障碍。
结论：Caveolin-3的缺失或上调可导致骨骼肌的萎缩或肥大以及心肌的功能障碍，通过siRNA介导基因表达的分子治疗方法可以治疗运动引起的骨骼肌、心肌的伤病；通过检测Caveolin-3的变化，可以为如何防治运动性骨骼肌、心肌伤病提供依据。
关键词：Caveolin-3；骨骼肌；萎缩；肥大；心肌中图分类号：G804.7 文献标志码：A 文章编号：1004-7662（2014 ）08-0072-06Abstract：Through introduction of Caveolin-3 structure and its regulation mechanism on skeletal muscle and myocardial injury， this thesis discusses change of related signal pathways caused by change of Caveolin-3， analyses action mechanism of Caveolin-3 on skeletal muscle atrophy，hypertrophy and myocardial injury， so as to provide action mechanism of Caveolin-3 on skeletal muscle and cardiac muscle change caused by movement. Results show： lack of Caveolin-3 leads to Akt protein and p38 lightning signal network attenuation resulting in skeletal muscle atrophy， by detecting its change made clinical u se of TβRI kinase inhibitors （Ki26894） against skeletal muscle atrophy possible. Appropriate increase of Caveolin-3 will activate PI3-kinase/AKT/mTOR pathway，thus leading to muscle regeneration and hypertrophy. Through construction of Caveolin-3 knockout and activation of Akt/eNOS/NO signal， cardiac diastolic dysfunction can be reduced. Conclusion：lack or higher of Caveolin-3 can lead to skeletal muscle atrophy or hypertrophy and myocardial dysfunction， mediated by siRNA gene expression in molecular therapy can treat movement of skeletal muscle and myocardial injury. Detecting change of Caveolin-3 can provide basis for prevention and treatment of exercise-induced skeletal muscle and cardiac muscle injury.Key words： Caveolin-3； skeletal muscle； atrophy； hypertrophy； cardiac muscle细胞膜上存在一些细胞膜微囊（Caveolae），Caveolin-3是构成微囊的主要成分，是细胞膜上信号传导的枢纽，它的变化会直接影响信号的传导以及骨骼肌和心肌的结构功能。
稳定表达野生型p53基因人骨肉瘤细胞株的建立与鉴定
基 因 ｅＮ Ｄ Ａ片段插入到表达载体 ｐＲ ＳＥ Ｆ Ｉ Ｅ —Ｇ Ｐ中， 得到重组 质粒 ｐＲ ＳＥ Ｆ —５ ， Ｉ Ｅ —Ｇ Ｐｐ ３ 并通过 Ｐ Ｒ、 Ｃ 酶切 电泳等 方法进 行质 粒鉴 定； 然后用该重组质粒转化大肠杆菌 Ｂ２１ Ｉ 细胞 ， 转化菌落经 Ｐ Ｒ扩增后 ， 提取 的质粒 Ｄ Ａ用 脂质体介导 的转染方法 导入 Ｃ 将 Ｎ Ｕ２Ｏ 细胞 中 ， － Ｓ 经荧光显微镜下人工筛选得到稳定转染的骨 肉瘤细胞 系。 结果 成功地构建出包含有野生型 ｐ３ｃ Ｎ ５ Ｄ Ａ片 段 的重组质粒 ｐＲ ＳＥ Ｆ —５ ， Ｉ Ｅ — Ｇ Ｐｐ ３ 通过 Ｐ Ｒ、 Ｃ 酶切 电泳等方法鉴定质粒大小和位点 均符合实验设 计 ； 将该重组 质粒成 功导人 并 人骨 肉瘤细胞株 Ｕ ２Ｏ － Ｓ细胞 中， 经荧光显微镜下人工筛选得到稳定转染的骨肉瘤细胞 系， 名为 Ｕ２ｐ３０ 。转染后 的骨 肉 命 一一５ ｓ 瘤 细胞 出现散在 的凋 亡现象 。 结论 利用基因转染技 术 ， 立 了稳定 表达外 源性 野生型 ｐ３基因 的人 骨 肉瘤 ｕ２ ｐ３０ 建 ５ 一一５ ｓ
ｔｐ ３ ｅ ｏ ｕ ｔ ｅ ｔ ｄ ｉ ｈ ｏｅ ｏ ｌ ｔ ｐ ｐ ３ ｅ ｉ ｓｅ ｓ ｒｏ ａ ｓ ｉｉ ｅ ｅ ｅ ｈ ｒ ｐ ｙ ｅ ｐ５ ｇ ｎｅｆ ｒ ｆｒｈ ｒ ｓｕ ｙｎｇ ｔ ｅ ｒ ｌ ｆ ｗｉｄ—ｙ ｅ ５ ｇ ｎｅ ｎ ｏ ｔ ｏ ａ ｃ ｍ ｕ ｃｄ ｇ ｎ ｔｅ ａ ｙ． Ｍ ｅｈ ｄ Ｔｈ ｌｃｕａ ｔｏ ｓ ｅ ｍｏ ｅ ｌｒ ｂｏ ｏ ｙ ｔｃ ｎ ｌ ｇ ｓｕｓ ｄ ｔ ｎ ｅ ｔｔ ｅ ｈ ｍ ａ ｌ —ｙ ５３ ｃ ｉｌ ｇ ｅ ｈ ｏ ｏ ｙ ｗａ ｅ ｏｉ ｓ ｒ ｈ ｕ ｎｗｉｄ ｐｅｐ ＤＮＡ ｒｇ ｎ ｎ ｏｔ ｅ ｅ ｐｒ ｓｉ ｎ ｖ ｅ ｏ ＲＥＳ－ ｔ ｆａ ｍｅ ｔｉｔ ｈ ｘ ｅ ｓｏ ｅ ｔｒｐＩ ・ ＥＧＦＰ ｏ ｂｔｉ ｉ ｈ ｆｒｏ ａ ｎｎｇｔ ｅ
Caveolaecaveolin-1与Wntβ-catenin通路-精选文档
Caveolaecaveolin-1与Wntβ-catenin通路Caveolae（小凹）是一种细胞膜表面特异性的凹陷结构，直径约为50-100nm，外观似囊泡或烧瓶状[1]。
caveolin-1（小凹蛋白）是Caveolae的主要功能蛋白，参与了Caveolae的形成，以及细胞增殖、分化和凋亡的调控，与肿瘤的发生发展有着密切关系。
最近的研究指明Wnt通路的核心分子β-catenin可结合于细胞膜上的Caveolin-1分子，两者相互作用参与体内多种生物学过程，现将其综述如下。
1Caveolae/caveolin-11.1Caveolae/caveolin-1的结构特性Caveolae的构成包括胆固醇、鞘磷脂、糖基鞘磷脂和其主要功能蛋白caveolin等。
caveolin家族至少包括三种亚型：caveolin-1，caveolin-2，caveolin-3。
其中caveolin-1、caveolin-2广泛存在于各种类型的细胞中，而caveolin-3仅在肌肉组织中表达。
Caveolae结构中含有大量受体及信号分子如酪氨酸激酶受体、eNOS、TGF/BMP、FGF和最近研究的热点Wnt 信号系统等。
1.2Caveolae/caveolin-1的生理作用Caveolin-1通过其骨架结构域（CSD）可与Caveolae内许多与细胞增殖分化相关的信号分子结合，使其保持非活性状态，从而抑制多种信号途径的下游激活和转导。
故caveolin-1被认为是信号通道的广泛抑制物，从而抑制细胞的增殖、促进细胞的成熟、分化，影响细胞的凋亡等，维持细胞的稳定。
2Wnt/β-catenin通路2.1WntWnt是一类分泌型糖蛋白，通过自分泌或旁分泌发挥作用。
Wnt作为调控细胞生长、分化和凋亡等各方面的分泌蛋白家族，亦是调节如胚胎发生，形态形成等必需的生物学过程的生长因子大家族。
2.2β-cateninβ-catenin是一种多功能的蛋白质，其主要位于细胞膜，而胞浆中游离量较少。
Caveolin1在乳腺癌中的表达
研究方法
CaveolinCaveolin-1的免疫染色 抗体：用单克隆和多克隆兔、鼠Caveolin-1抗
体，用纯化的兔免疫血清和非特异鼠IgG1抗体 做同型对照
染色强度：Caveolin-1染色在肿瘤中按照染
色强度计分，记为0（阴性表达），1（弱阳性 表达），2（强阳性表达）
实验结果
取自对429例乳腺癌样本肿瘤上皮中 取自对429例乳腺癌样本肿瘤上皮中 429 CaveolinCaveolin-1表达的研究
T1、T2、T3/4的阳性表达率分别为64%、 57.4%、28.6% 肿瘤分化程度高、中、低的阳性表达率分别为 77.1%、56.4%、41.5% 其它单变量如淋巴结受累（N0-N3）、临床分 期（I期-IV期）、ER、PR、年龄等，均不具 显著性差异（P>0.05）
CaveolinCaveolin-1在乳腺癌中表达的单变量分析
研究材料和方法
研究材料
正常人乳腺样本 429例乳腺癌样本的患者组一 173例乳腺癌样本的患者组二 转基因鼠
研究方法
Caveolin-1的免疫染色
研究材料
对429例乳腺癌组织样本芯片的研究 429例乳腺癌组织样本芯片的研究
在最初的612例样本中（取材自美国），有 429 429个样本可以分析，其余样本由于一些原因 而不可用，比如样本没有在载玻片上或在染色 过程中丢失，在样本中没有肿瘤组织，或样本 的质量不够好 患者平均年龄61岁（33-97岁），肿瘤直径平 均23毫米（4-130毫米）
CaveolinCaveolin-1 在小鼠正常 乳腺和乳腺 癌中的表达
CaveolinCaveolin-1三种不同基因型的小鼠
讨论
肿瘤肿块越小、肿瘤分化程度越高， CaveolinCaveolin-1的阳性表达率越高 在越严重的乳腺癌中Caveolin-1阳性表 Caveolin达率越低，说明Caveolin-1在肿瘤发生 Caveolin发展中作为一种抑癌因子存在
灵芝孢子粉对非小细胞肺癌小鼠CD44和突变型P53蛋白表达的影响及抑瘤作用
灵芝孢子粉对非小细胞肺癌小鼠CD44和突变型P53蛋白表达的影响及抑瘤作用陈艳;李风雷【摘要】Objective To explore the effect of ganoderma spores on the expression of CD44 and P53 proteins and tumor suppression in mouse with non small cell lung cancer ( NSCLC) . Methods Mice with NSCLC were ga-vaged by 0. 4 ml ganoderma lucidum spores for 13 days with 80% and 40% concentrations respectively, and then they were killed after drug withdrawal. Tumor weight and anti-tumor ratio were detected. The levels of CD44 and P53 proteins were tested by western blotting. Results After the treatment, the anti-tumor ratio was 49. 5% and 40. 2%in the high and low dose groups respectively ( P<0. 01 ) . The levels of CD44 and P53 proteins were lower in the study group than in the model group ( P<0.01 ) . Conclusion Ganoderma spores can decrease the expression of CD44 and P53 proteins, and the change may be related with anti-tumor effect.%目的：探讨灵芝孢子粉对LA795非小细胞肺癌小鼠CD44和突变型P53蛋白表达的影响及抑瘤作用。
Caveolin-1在肿瘤疾病中的研究进展
Caveolin-1在肿瘤疾病中的研究进展作者：马静刘晨卢娴庞丽敏陆冠怡王红磊来源：《科教导刊·电子版》2020年第12期摘要 Caveolin-1是Caveolin家族成员中之一，其作为重要的支架蛋白不仅可以进行信号传递，还可在胆固醇稳态、脂质转运和贮存、细胞周期、增殖、凋亡、癌细胞侵袭、迁移和转移等活动中执行多种生理功能。
Caveolin-1的表达在一般疾病中发挥生物学功能，在肿瘤相关疾病的发生发展中也具有重要作用。
本文就Caveolin-1在各种常见肿瘤细胞中调控的信号通路做具体阐述。
关键词 Caveolin-1 肿瘤研究进展中图分类号：R730.2 文献标识码：A小窝蛋白家族成员中Caveolin-1是由Clenney等于1989年首次报道的，分子量为21～24 kDa的小窝蛋白家族的成员，其广泛分布于上皮细胞、内皮细胞、成纤维细胞和平滑肌细胞中，并在多种疾病中发挥重要作用，包括心血管疾病、癌症、糖尿病等，近年来Caveolin-1作为与肿瘤关系密切的小窝蛋白家族成员之一，其在肿瘤细胞的发生、发展及转移中发挥重要作用。
因此受到广泛关注，使得Caveolin-1的功能及其与癌症的关系成为当前研究热点，本文主要对Caveolin-1在几种肿瘤疾病中的影响进行综合叙述。
1 Caveolin-1生物学功能小窝也称为陷窝（caveolae）是细胞膜表面存在的一些瓶状凹陷，在胆固醇的转运、内吞、胞吐等信号转导中起到关键作用。
Caveolin家族成员主要由三种蛋白质组成：Caveolin-1、Caveolin-2和Caveolin-3，分布具有一定的差异，Caveolin-1和Caveolin-2已确定存在于大多数组织和器官中，二者可以共同表达，以维持Caveolin-1的稳定性及其在膜上的定位，使得Caveolin-1在细胞转化、肿瘤发生、细胞转移和血管生成又起着重要的调节作用;Caveolin-2的定位与表达可被Caveolin-1影响，之后被相关膜区所需要;Caveolin-3可特异性存在于肌肉中，在神经胶质细胞中也偶有表达，可在组织中的胞膜窖的生物起源中起到重要作用。
《2024年Caveolin-1调控EGFR活化对恶性黑色素瘤细胞生物学行为的影响》范文
《Caveolin-1调控EGFR活化对恶性黑色素瘤细胞生物学行为的影响》篇一一、引言恶性黑色素瘤是一种高度侵袭性的皮肤肿瘤，其发展迅速且预后较差。
近年来，对黑色素瘤的研究主要集中在细胞信号传导通路及其调控机制上。
其中，表皮生长因子受体（EGFR）信号通路在黑色素瘤的发生、发展中起到了关键作用。
而caveolin-1作为细胞膜上的重要蛋白，对EGFR的活化及下游信号传导具有重要影响。
本文旨在探讨caveolin-1调控EGFR活化对恶性黑色素瘤细胞生物学行为的影响。
二、Caveolin-1与EGFR的关系Caveolin-1是一种跨膜蛋白，主要存在于细胞膜的凹陷结构中，对维持细胞膜的稳定性和信号传导具有重要作用。
EGFR是一种酪氨酸激酶受体，其活化与多种肿瘤的发生、发展密切相关。
研究表明，caveolin-1与EGFR之间存在相互作用，caveolin-1可以通过调控EGFR的内部化、降解及再利用等过程，影响EGFR 的活化状态。
三、Caveolin-1调控EGFR活化的机制Caveolin-1通过多种机制调控EGFR的活化。
首先，caveolin-1可以与EGFR形成复合物，影响EGFR的内部化过程，从而调节其活化程度。
其次，caveolin-1还可以通过影响EGFR的降解过程，进一步调控其活化状态。
此外，caveolin-1还可以通过与其他信号分子的相互作用，影响EGFR下游信号的传导。
四、Caveolin-1对恶性黑色素瘤细胞生物学行为的影响恶性黑色素瘤细胞的增殖、迁移和侵袭等生物学行为受到多种信号通路的调控。
其中，EGFR信号通路在黑色素瘤的发生、发展中起到了关键作用。
而caveolin-1作为EGFR的重要调控因子，对黑色素瘤细胞的生物学行为具有重要影响。
研究表明，caveolin-1的表达水平与黑色素瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力呈正相关。
当caveolin-1表达升高时，黑色素瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力增强；反之，当caveolin-1表达降低时，这些能力则受到抑制。
Caveolin—3基因在疾病中的初步研究
Caveolin—3基因在疾病中的初步研究caveolin-3是微囊蛋白（Caveolin，cln）是Caveolae的表面标记蛋白之一，越来越多的发现证明其突变可以引起多种疾病的发生。
标签：caveolin-3；突变；疾病目前人们对Caveolae的研究越来越热门，不断发现其与疾病的发生有重要联系。
质膜微囊（Caveolae，cle），是细胞表面特异性内陷结构（直径约50～100um），它广泛存在于各种类型的细胞中，比如在内皮细胞、上皮细胞、成纤维细胞、脂肪细胞、平滑肌细胞等细胞中表达丰富[1]。
微囊蛋白（Caveolin，cln）是Caveolae的表面标记蛋白，主要有Caveolin-1，Caveolin-2和Caveolin-3三种类型组成，其中Caveolin-3（CA V3）是在1996年首次被鉴定的，它主要在骨骼肌、心肌以及平滑肌上大量表达，所以又称为肌质膜微囊蛋白（muscular caveolin）[2]。
1.Caveolin-3（CA V3）蛋白及基因的相关介绍CA V3是由l51个氨基酸组成的蛋白质，其跨膜部分位于中央的33个氨基酸构成，其N端和C端均游离于胞浆面，其N端有41个氨基酸（61～101）构成Caveolin脚手架区（caveolin scaffolding domain，CSD）部分，它能够与多种信号蛋白上存在的共同特异序列结合。
CA V3和Caveolin-1具有极高的同源性，两者的氨基酸序列有85%相同，CA V3上CDS的氨基酸（55～74）与caveolin-1的CDS相似，主要参与调节质膜微囊G蛋白（G protein guanylate diphosphate，Ga–GDP），Src–酪氨酸激和原癌基因中的H-Ras等多种信号分子[3]。
2.目前Caveolin-3（CA V3）基因突变引起疾病近年来发现CA V3基因变异可能与肌营养不良症、骨骼疾病、心血管疾病等有密切的关系，已经发现的包括：肢带型肌营养不良（limb-girdle muscular dystrophy-1c，LGMD-1c），波纹肌肉瘤（Ripping muscule disease，RMD），远端疾病（distal myopathy，DM），特发性和家族性高CK血症（hyperCKemia ，HCK）和肥厚型心肌病（hypertrophic cardiomyopathy，HCM）。
稳定表达Caveolin-3基因突变型P104L和P47L的C2C12骨骼肌细胞株的构建
稳定表达Caveolin-3基因突变型P104L和P47L的C2C12骨骼肌细胞株的构建邓玉风;黄亿元;尚丽娜;杨立会;黄勤【摘要】目的构建稳定表达Caveolin-3(CAV3)基因突变型P104L和P47L的C2C12骨骼肌细胞株.方法将野生型CAV3(CAV3-WT)、CAV3-P104L、CAV3-P47L装在带有GFP标签的质粒中,构建目的基因与GFP基因融合的表达质粒,以只含GFP的载体为对照.将C2C12细胞随机分为A、B、C、D组,分别转染对照空载体(NC)、CAV3-WT、CAV3-P47L及CAV3-P104L.以遗传霉素(G418)进行阳性克隆筛选,荧光显微镜下挑选稳定转染的细胞系,Western blotting法检测各组细胞中的CAV3-GFP融合蛋白,免疫荧光法检测各组细胞中的CAV3蛋白,以荧光强度代表目的蛋白相对表达量.结果经酶切和测序验证,证实4种表达质粒构建成功.B、C、D组细胞中测得CAV3-GFP融合蛋白,A组未测得融合蛋白.A、B、C、D组CAV3蛋白相对表达量分别为23.0 ±2.25、32.3 ±0.35、25.6±0.92、24.3±1.42,B组CAV3蛋白表达增强,与A组相比,P＜0.01;A、C、D组CAV3蛋白表达下调,与B组相比,P均＜0.01.结论成功构建了稳定表达CAV3-P47L和CAV3-P104L的C2C12细胞,两种细胞中CAV3蛋白表达下调.【期刊名称】《山东医药》【年(卷),期】2016(056)031【总页数】4页(P12-15)【关键词】Caveolin-3;基因突变;2型糖尿病;肢带型肌营养不良【作者】邓玉风;黄亿元;尚丽娜;杨立会;黄勤【作者单位】右江民族医学院,广西百色533000;右江民族医学院,广西百色533000;广西医科大学;广西医科大学;广西医科大学【正文语种】中文【中图分类】R34CAV3蛋白在1996年首次得到克隆和鉴定，它由151个氨基酸组成，是肌肉特有的微囊蛋白，仅在骨骼肌和心肌中大量表达，参与许多细胞生理过程，包括钙离子、钠离子和钾离子通道调节，囊泡转运，胆固醇水平调节及信号转导的调控。
抗心律失常肽10对柯萨奇B3病毒感染小鼠原代心肌细胞缝隙连接蛋白43的影响
抗心律失常肽10对柯萨奇B3病毒感染小鼠原代心肌细胞缝隙连接蛋白43的影响伍琼;杨波【摘要】Objective: To observe the effect of anti-arrhythmic peptide 10 (AAP10) on connexin 43 (Cx43) expression in mice primary myocardial cell infected with coxsackie virus B3 (CVB3) by establishing mice viral myocarditis model. n<br> Methods: A total of 10 BALB/C mice at the age of 1-3 days were used for primary myocardial cell culture, the cells were infected by 100 times of TCID50 CVB3 and then, cultured with different doses of AAP10. The cells were divided into 4 groups:Cell control group, Virus control group, Low dose APP10 group and High dose APP 10 group. The protein expression of Cx43 was examined by Western blot analysis.n<br> Results: The protein expression of Cx43 in Low dose APP10 group (71.46 ± 2.69)%and High dose APP 10 group (83.56 ± 3.74)%were obviously higher than that in Virus control group (44.92 ± 4.49)%, and with the higher APP 10 intervention, the protein expression of Cx43 increased accordingly, all P<0.01. n<br> Conclusion: The anti-arrhythmic peptide 10 may protect myocardial cells, increase Cx43 expression and reduce myocardial injury from viral myocarditis in experimental mice.%目的：建立原代心肌细胞柯萨奇B3病毒（CVB3）感染性病毒性心肌炎的模型，使用抗心律失常肽10(AAP10)对该疾病模型进行干预，观察其对小鼠原代心肌细胞及缝隙连接蛋白43（Cx43）的影响。
Caveolin-3基因多态性的筛查及其在中国汉族糖尿病患者中的特点
Caveolin-3基因多态性的筛查及其在中国汉族糖尿病患者中的特点黄勤;黄亿元;邓玉风;冼晶;路文盛;韦红巧【期刊名称】《实用医学杂志》【年(卷),期】2014(000)011【摘要】Objective To observe the difference of caveolin-3(CAV3) gene polymorphism between normal people and diabetic patients in Chinese Han population. Methods Exon gene polymorphism in 50 normal people and 50 T2DM patients were detected by PCR-SSCP. Results The cumulative incidence rate of electrophoretic variation in T2DM patients was 48%,while cumulative incidence rate of normal people was 7%(P<0.001). It was proved that in the variant bands, there were base variant. Conclusions The variant base number of CAV3 gene in human T2DM samples are significantly more than the normal which can be preliminary detected by PCR-SSCP. It indicates that CAV3 gene polymorphism may be one of the genetic backgrounds for the occurence of Chinese T2DM.%目的：观察我国汉族正常人和2型糖尿病（T2DM）患者Caveolin-3（CAV3）基因的多态性差异，并介绍一种研究CAV3相关遗传病的实用方法。
病毒负性调节因子在内皮细胞稳定表达细胞株的建立
病毒负性调节因子在内皮细胞稳定表达细胞株的建立杨凡;刘朝奇;覃晓琳;李斌;韩钰【期刊名称】《生物技术通报》【年(卷),期】2010(000)004【摘要】建立HIV-1的调节基因Nef基因在内皮细胞稳定表达的细胞株ECV304-Nef,为研究Nef对血管内皮细胞生物学活性的影响奠定试验基础.构建真核表达载体pcDNA 3.1(+)-Nef,将其质粒和pcDNA 3.1(+)质粒(阴性对照)分别转染血管内皮细胞ECV304,G418筛选.通过RT-PCR检测Nef mRNA在细胞中的表达;细胞免疫荧光法检测Nef蛋白的表达及定位;Western blotting检测Nef蛋白的特异性表达,获得稳定表达的细胞株.构建的重组质粒pcDNA3.1(+)-Nef经BamH I和EcoR I双酶切鉴定,得到的片段大小与理论值相符,分别为载体的5 400 bp和目的基因的621 bp.测序结果显示碱基序列与GenBank(登录号:K03455)序列相同.转染细胞经G418筛选后获得稳定表达Nef的ECV304细胞株,RT-PCR显示转染pcDNA 3.1(+)-Nef质粒的ECV304细胞出现621 bp条带,对照组无目的条带出现;荧光显微镜下观察转染pcDNA 3.1(+)-Nef质粒的ECV304细胞表达的Nef蛋白主要定位于细胞质中.Western blotting结果显示,转染pcDNA 3.1(+)- Nef质粒的ECV304细胞约27 kD处检测到目的条带,表明pcDNA3.1(+)-Nef表达正确.【总页数】5页(P161-164,197)【作者】杨凡;刘朝奇;覃晓琳;李斌;韩钰【作者单位】宜昌市第二人民医院,宜昌443000;三峡大学分子生物学研究所,宜昌443002;三峡大学分子生物学研究所,宜昌443002;三峡大学分子生物学研究所,宜昌443002;三峡大学分子生物学研究所,宜昌443002;三峡大学分子生物学研究所,宜昌443002【正文语种】中文【相关文献】1.慢病毒介导KSHV vIL-6基因稳定表达的血管内皮细胞株的建立 [J], 许雨乔;徐建;潘世扬;孙瑞红;黄蕾;彭珊珊2.稳定表达猪干扰素调节因子7的ST细胞株的建立 [J], 陈恒;徐磊;宁蓬勃;郭抗抗;何雷;林鸷;吕亚辉;林青;张彦明3.逆转录病毒介导的稳定表达E40rf1和绿色荧光蛋白的胎肝窦内皮细胞株的建立[J], 李慧琳;岳文;裴雪涛;谢小燕;王思涵;韩毅;范增;白云;何丽娟;南雪;裴海云4.稳定过表达人源SAMHD1基因细胞株的建立及其抗病毒活性的研究 [J], 武晋英;张洲;李子威;王昊然;操孙润;李宇恒;宋晓宇;曹流5.稳定表达组织型纤溶酶原激活因子基因的人脐静脉内皮细胞株的建立 [J], 刘小斌;张凯伦;蒋雄刚;王家宁;黄永章因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
Caveolin-1和胰岛素信号通路的研究
Caveolin-1和胰岛素信号通路的研究
黄浦
【期刊名称】《现代医药卫生》
【年(卷),期】2011(027)004
【摘要】细胞表面小凹蛋白能够影响多种信号受体蛋白的定位、表达和激酶的活性.近年发现小凹蛋白能维持胰岛素受体稳定性或直接激活胰岛素受体,能介导GLUT-4参与葡萄糖的摄取转运,在维持葡萄糖内稳态的胰岛素信号通路中发挥了重要作用.
【总页数】3页(P552-554)
【作者】黄浦
【作者单位】南华大学附属第一医院内分泌科,湖南,衡阳,421001
【正文语种】中文
【中图分类】R5
【相关文献】
1.胰岛素抵抗与胰岛素信号通路的相关关系研究进展 [J], 王廷伟;陈秋
2.胰岛素/胰岛素样生长因子1信号通路在线虫寿命和发育中的研究进展 [J], 林宇沛;周满红
3.基于AMPK/GLUT4/GSK3β/PPARα信号通路研究地骨皮水提物改善2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的实验研究 [J], 姚欢欢; 陈吉; 陈思思; 周迪夷
4.胰岛素抵抗与胰岛素信号通路异常研究进展 [J], 肖娟
5.SREBP—Caveolin-1信号通路介导的烟酸姜黄素酯抗动脉粥样硬化研究 [J], 廖端芳;李亚梅;阳巍;郑兴;庹勤慧;郑熙隆
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稳定表达Caveolin-3基因突变型P104L和P47L的C2C12
骨骼肌细胞株的构建
邓玉风;黄亿元;尚丽娜;杨立会;黄勤
【期刊名称】《山东医药》
【年(卷),期】2016(56)31
【摘要】目的构建稳定表达Caveolin-3(CAV3)基因突变型P104L和P47L的
C2C12骨骼肌细胞株.方法将野生型CAV3(CAV3-WT)、CAV3-P104L、CAV3-P47L装在带有GFP标签的质粒中,构建目的基因与GFP基因融合的表达质粒,以只含GFP的载体为对照.将C2C12细胞随机分为A、B、C、D组,分别转染对照空载体(NC)、CAV3-WT、CAV3-P47L及CAV3-P104L.以遗传霉素(G418)进行阳性克隆筛选,荧光显微镜下挑选稳定转染的细胞系,Western blotting法检测各组细胞中的CAV3-GFP融合蛋白,免疫荧光法检测各组细胞中的CAV3蛋白,以荧光强度代表目的蛋白相对表达量.结果经酶切和测序验证,证实4种表达质粒构建成功.B、C、D组细胞中测得CAV3-GFP融合蛋白,A组未测得融合蛋白.A、B、C、D组CAV3蛋白相对表达量分别为23.0 ±2.25、32.3 ±0.35、25.6±0.92、
24.3±1.42,B组CAV3蛋白表达增强,与A组相比,P＜0.01;A、C、D组CAV3蛋白表达下调,与B组相比,P均＜0.01.结论成功构建了稳定表达CAV3-P47L和CAV3-P104L的C2C12细胞,两种细胞中CAV3蛋白表达下调.
【总页数】4页(P12-15)
【作者】邓玉风;黄亿元;尚丽娜;杨立会;黄勤
【作者单位】右江民族医学院,广西百色533000;右江民族医学院,广西百色533000;广西医科大学;广西医科大学;广西医科大学
【正文语种】中文
【中图分类】R34
【相关文献】
1.野生型与L10P突变型DJ-1蛋白稳定表达单克隆细胞株的基因表达谱分析 [J], 刘振华;唐北沙;严新翔;郭纪锋
2.过表达N-cadherin基因慢病毒表达载体的构建及稳定细胞株的建立 [J], 李想;秦雪柳;丁梅;曲德伟
3.凋亡蛋白融合基因与报告基因pECFP-C1的构建及其稳定表达细胞株的建立 [J], 李士泽;张忠芳;张玉静
4.利用Tet-on诱导基因表达系统构建EID3基因真核表达载体及稳定转染细胞株的建立 [J], 王燕;王宇暄;刘亚敏;张桂强;苏文洲;郭奇峰
5.小鼠PKM1基因慢病毒过表达载体的构建和稳定转染C2C12细胞株的筛选及其对糖酵解的影响 [J], 姜声旺; 沈清武
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