(完整版)OMEGAdna提取说明书
质粒中提中文版(Omega)
中提质粒步骤材料准备：灭菌250或500mL三角瓶，托盘天平，5mL移液枪及枪头，卫生纸，废液缸，记号笔，50mL 圆底离心管，15mL尖底离心管步骤：1.集菌将100mL菌液分批倒入50mL圆底离心管中，室温12000rpm离心1min，弃流出液体，打开盖倒置吸水纸上控干。
2.加入2.5mL solution I（提前加入RNase，4℃保存），重悬细菌沉淀（可使用5mL移液枪吹打）。
3.加入2.5mL solution II，轻柔混匀（颠倒离心管7-10次），以获得清亮的裂解物，室温静置3-5min。
（此步主要是碱裂解细菌，使其中的蛋白质和DNA变性，反应时间不能太长，否则容易使大肠杆菌的基因组DNA断裂成小片段，污染质粒DNA）4.加入1.25mL Buffer N3，轻柔混匀（颠倒离心管7-10次），直至形成白色沉淀，室温静置2-3min。
5.4℃12000rpm离心10min，使白色沉淀沉于底部。
6.取出一个Lysate Clearance Filter Syringe，抽出活塞，小心将5中液体全部转移至注射器中（注射器可不放活塞直接直立于4中的离心管中，液体不会出来），室温静置2min。
7.将6中注射器放置于一新的15mL离心管，轻推注射器活塞，使液体流入离心管中。
8.加入0.1倍体积的ETR（约600uL）至过滤后的液体中，混匀（颠倒离心管7-10次），冰浴20min，期间颠倒离心管几次。
（此期间准备一个Hind-Bind DNA midi Column加入2mL GPS Buffer，室温静置10min，4000rpm离心5min）9.42℃温浴5min，溶菌液变浑浊，室温4000rpm离心5min，则ETR沉入底部。
10.小心将上层液体转移至一新的15或10mL离心管中，加入0.5倍体积的EtOH（约2.5mL），轻柔混颠倒5-6次，室温静置2min。
11.将10中液体加入柱子中，室温4000rpm离心5min，弃液体，重新装好柱子，直至液体全部滤过。
Omega DNA提取操作规程
4 标准操作程序4.1实验前准备4.1.1 55-60°C水浴；70°C水浴。
4.1.2. OB蛋白酶加入1.5ml Protease Storage Buffer溶解后，分装保存于-20℃。
4.1.3. DNA Wash Buffer中加入80ml无水乙醇，并于室温保存。
4.2实验操作4.2.1 刮取切片上组织部分的样品至1.5ml离心管，加入1ml二甲苯，剧烈涡旋10s 混匀。
4.2.2 10,000×g离心2min，小心吸掉上清(不要吸到切片)。
4.2.3 加入1ml 无水乙醇涡旋混匀，10,000×g离心2min，小心吸掉上清(不要吸到切片)。
4.2.4 打开盖子放置15min或直到乙醇挥发。
4.2.5 加入200μL Buffer T1和20μL OB蛋白酶。
4.2.6 55℃水浴3h或至组织消化，每隔20-30min混匀一次。
如果有需要也可消化过夜。
4.2.7 90℃处理60min。
4.2.8 室温静置10-30min，室温10,000×g离心5min去除杂质，小心转移上清至一新1.5ml 离心管中。
4.2.9 加入220ul Buffer BL涡旋混匀。
4.2.10 加入250ul的无水乙醇，高速涡旋15秒混匀。
4.2.11 转移混合液至套有收集管HiBind DNA柱子中，室温下8,000×g离心1 min，弃去滤液。
4.2.12 把柱子装在收集管，加入500ul HB Buffer，室温下8,000×g 离心1min，弃去滤液。
4.2.13 把柱子装在新收集管，加入500ul DNA Wash Buffer，室温8,000×g离心1min。
注意：浓缩的DNA Wash Buffer在使用之前必须按标签的提示用乙醇稀释。
4.2.14 弃去滤液，重复步骤4.2.13一次。
倒弃滤液后将柱子重新套回收集管，10,000×g 离心3min。
DNA提取操作规程-石蜡切片Omega试剂盒方法
1 目的依据《EZAN.FFPE DNA KIT D3399-01》使用说明书及实际使用情况制定标准操作规程，确保正确、安全操作。
2 适用范围适用于石蜡切片中DNA提取的规范操作。
3 职责实验操作人员负责本程序的进行，实验室负责人负责该程序的监控。
4 标准操作程序4.1实验前准备4.1.1 55-60°C水浴；70°C水浴。
4.1.2. OB蛋白酶加入1.5ml Protease Storage Buffer溶解后，分装保存于-20℃。
4.1.3. DNA Wash Buffer中加入80ml无水乙醇，并于室温保存。
4.2实验操作4.2.1 刮取切片上组织部分的样品至1.5ml离心管，加入1ml二甲苯，剧烈涡旋10s 混匀。
4.2.2 10,000×g离心2min，小心吸掉上清(不要吸到切片)。
4.2.3 加入1ml 无水乙醇涡旋混匀，10,000×g离心2min，小心吸掉上清(不要吸到切片)。
4.2.4 打开盖子放置15min或直到乙醇挥发。
4.2.5 加入200μL Buffer T1和20μL OB蛋白酶。
4.2.6 55℃水浴3h或至组织消化，每隔20-30min混匀一次。
如果有需要也可消化过夜。
4.2.7 90℃处理60min。
4.2.8 室温静置10-30min，室温10,000×g离心5min去除杂质，小心转移上清至一新1.5ml 离心管中。
4.2.9 加入220ul Buffer BL涡旋混匀。
4.2.10 加入250ul的无水乙醇，高速涡旋15秒混匀。
4.2.11 转移混合液至套有收集管HiBind DNA柱子中，室温下8,000×g离心1 min，弃去滤液。
4.2.12 把柱子装在收集管，加入500ul HB Buffer，室温下8,000×g 离心1min，弃去滤液。
4.2.13 把柱子装在新收集管，加入500ul DNA Wash Buffer，室温8,000×g离心1min。
基因组DNA提取：Omega公司SQ Blood DNA Kitll ,
基因组DNA提取：Omega公司SQ Blood DNA Kitll ，
1)将1mL全血加入到15mL离心管中，加入2.5mL的Buffer NL（血样体积
的2.5倍），上下颠倒混匀；
2)室温下2000g/min离心5min；
3)倒去上层液体，将离心管倒置于干净的滤纸上静置；
4)将Buffer XL和OB蛋白酶以100：1的体积比混合；
5)每个离心管中加入1mL的混合液④,充分震荡；
6)65℃水浴中孵育15-30min，至溶液变为墨绿色，且沉淀完全溶解；
7)从水浴中取出离心管，待其恢复至室温，想每管中加入0.5ml的异丙醇
（血样体积的0.5倍），混合后有白色沉淀析出；
注：混合时要轻柔，避免DNA链断裂
8)室温下2000g/min离心5min，此时DNA为白色沉淀，倒去上清，将离
心管倒置于干净的滤纸上静置；
9)取15mL双纯水与35mL无水乙醇混合，配置70%的乙醇；
10)向每个离心管中加入1mL 70%的乙醇，充分震荡洗涤DNA；
11)室温下2000g/min离心3min，小心倒掉乙醇；
12)重复步骤10）和11）；
13)为便于除去残留乙醇，调到乙醇之后再次室温下2000g/min离心3min，
用200μL的移液器吸出残留乙醇，并将离心管倒置于干净的滤纸上静
置，直至乙醇完全挥发；
14)向每个离心管中加入EB Buffer 200μL(加入EB Buffer的量可视情况而
定)；
15)65℃温浴4-6h（或孵育过夜）；
16)待沉淀完全溶解后，将DNA溶液转移至1.5mL 的EP管中；
17)核酸分析仪测定DNA浓度，将DNA于-20℃保存。
omga质粒提取试剂盒_说明书_翻译
omgaE.Z.N.A.质粒试剂盒操作规程说明书（译版）1. 自新鲜划痕选择培养板中分离单菌落，接种含适当选择性抗生素的2-5ml的LB或YT培养基进行培养。
37℃强力摇动（~300rpm）孵育20-24h。
使用10-20ml培养管或容量至少4倍于培养容积的培养瓶。
强烈推荐使用endA阴性大肠杆菌菌株进行常规质粒分离。
此类菌株包括DH5α和JM109。
2. 将1.5-5.0ml细菌菌液室温13,000 g离心3min。
轻轻倒出或吸走培养基并丢弃。
3. 加入200μl 的溶液Buffer T 1/Rnase A重悬沉淀，涡旋或用移液器反复吹打。
充分重悬沉淀对于获得高质量的DNA非常重要。
4. 加入200μl溶液Buffer T 2，倒置、转动试管5-10次使之轻轻混匀，得到透明的裂解产物。
室温孵育5min。
不要用力混合，以免使染色体DNA断裂，减低质粒的纯度。
该步反应不要超过5min。
溶液II不用时要拧紧瓶盖，以免试剂被空气中的CO2酸化。
5. 加入200μl溶液Buffer T 3，立即倒置试管15-20次混匀，直至白色絮状沉淀物形成。
冰上孵育5min。
为避免形成局部沉淀，加入溶液III后应立即、充分混匀溶液。
6. 4℃13,000 g离心10分钟。
白色沉淀物形成，立即进行下一步操作。
7. 小心翼翼的吸取上清液，加入到新的1.5ml离心管（不是试剂盒提供的）中。
加入200ul 用异丙醇稀释的BAC 结合液（缓冲液），颠倒3-5次充分混匀。
BAC 结合液使用前必须用96%-100%的异丙醇稀释，详细的说明见瓶壁或第三页说明书8.加入样本DNA（HiBind DNA MicroElute）到提供的2ml收集管中。
9. 室温8000g离心30s，丢弃收集管，将离心柱放入新的收集管中。
10. 将收集柱放回收集管并加入750ul SPM buffer（用乙醇稀释），室温8000g离心30s，丢弃收集管，将离心柱放入新的收集管中。
omega DNA 提取试剂盒 说明书
Materials to Be Provided by User ! Tabletop microcentrifuge and nuclease-free 1.5 ml tubes ! Water bath set to 30oC ! Shaking water bath set to 55oC ! Incubator or waterbath set to 65oC ! Absolute ethanol (96%-100%) - Do not use other alcohols
Add 8 ml absolute (96%-100%) ethanol Add 80 ml absolute (96%-100%) ethanol Add 80 ml absolute (96%-100%) ethanol per bottle
Store the diluted DNA Wash Buffer at room temperature.
乙醇
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Before Starting
! Please read the entire booklet to become familiar with the E.Z.N.A.® Bacterial DNA Kit procedure.
! Prepare a lysozyme stock solution at 50 mg/ml and aliquot into adequate portions. Store each aliquot at -20oC and thaw before use. Each sample will require 20 ìl of this solution.
Kit Contents
Product Purification times HiBind® DNA Mini Columns 2 ml Collection Tubes Buffer BTL Buffer BDL Buffer HB DNA Wash Buffer concentrate Glass Powder Lysozyme Elution Buffer Proteinase K RNase A User Manual
无内毒素质粒大提取试剂盒中文操作指南
无内毒素质粒大提取试剂盒中文操作指南（omega）详细内容：E.Z.N.A. ® Fastfiler Endo-free Plasmid MaxiprepProtocol(无内毒素质粒大抽提)1. 在1-4升的培养瓶中加入200-500ml LB培养基,然后加入菌种于37℃摇床培养12-16小时；Tip:为获得最好的结果，请接种1ml培养过夜的菌种（12-16hr）。
并强烈推荐使用E.coli(endA-)品系用于常规的质粒提取，如DH5a和JM109。
注意：菌液的培养时间不能超过16小时；2. 收集200ml培养基至适当的离心管，室温下，3,500-5,000×g离心10分钟沉淀；3. 吸尽并去除培养基，用干净的吸水纸吸尽壁上多余的液体。
加12.0ml Solution I/RNase A到细菌培养物中，涡旋和枪头抽打细菌以重悬细胞；注：充分重悬细菌沉淀物对获得高产量的质粒是相当关键的。
充分重悬后溶液是均匀的，不存在小块物质；请尽量吸弃残余的培养基以防止稀释加入的溶液；4. 加入12.0ml SolutionII，轻轻颠倒旋转混匀7-10次至获得澄清的裂解液；室温放置3-5分钟可以有是必须的。
避免剧烈振荡混匀而打断染色体DNA，降低质粒的纯度。
（Solution II使用后请盖紧盖子且于室温保存）；5. 将取出Lysate Clearance Filter Syrine活塞，将其放置于架子上；6. 加入12 ml Neutralization Buffer，轻轻颠倒混匀几次至出现絮状沉淀。
这可能需要放置2-3分钟并间断颠倒混匀；7. 立即将裂解液转移到lysate Clearance Filter Syrine中，垂直放置5分钟。
这时白色的絮状沉淀物会漂上溶液的上层，裂解液可能开始流出过滤器，用新的50ml管子收集细菌裂解液，并将活塞轻轻插入过滤器中；8. 握住过滤器，轻轻推动活塞将裂解液打到收集管中；注意不要将任何杂质打到收集管中；9. 加入0.1体积的ETR Solution（蓝色）到收集液中，轻轻颠倒旋转混匀7-10次，冰浴放置20分钟；注意：加入ERT Solution后，溶液应变得浑浊，但冰浴静置后溶液应是澄清的。
Omega DNA提取操作规程
4 标准操作程序4.1实验前准备4.1.1 55-60°C水浴；70°C水浴。
4.1.2. OB蛋白酶加入1.5ml Protease Storage Buffer溶解后，分装保存于-20℃。
4.1.3. DNA Wash Buffer中加入80ml无水乙醇，并于室温保存。
4.2实验操作4.2.1 刮取切片上组织部分的样品至1.5ml离心管，加入1ml二甲苯，剧烈涡旋10s 混匀。
4.2.2 10,000×g离心2min，小心吸掉上清(不要吸到切片)。
4.2.3 加入1ml 无水乙醇涡旋混匀，10,000×g离心2min，小心吸掉上清(不要吸到切片)。
4.2.4 打开盖子放置15min或直到乙醇挥发。
4.2.5 加入200μL Buffer T1和20μL OB蛋白酶。
4.2.6 55℃水浴3h或至组织消化，每隔20-30min混匀一次。
如果有需要也可消化过夜。
4.2.7 90℃处理60min。
4.2.8 室温静置10-30min，室温10,000×g离心5min去除杂质，小心转移上清至一新1.5ml 离心管中。
4.2.9 加入220ul Buffer BL涡旋混匀。
4.2.10 加入250ul的无水乙醇，高速涡旋15秒混匀。
4.2.11 转移混合液至套有收集管HiBind DNA柱子中，室温下8,000×g离心1 min，弃去滤液。
4.2.12 把柱子装在收集管，加入500ul HB Buffer，室温下8,000×g 离心1min，弃去滤液。
4.2.13 把柱子装在新收集管，加入500ul DNA Wash Buffer，室温8,000×g离心1min。
注意：浓缩的DNA Wash Buffer在使用之前必须按标签的提示用乙醇稀释。
4.2.14 弃去滤液，重复步骤4.2.13一次。
倒弃滤液后将柱子重新套回收集管，10,000×g 离心3min。
OMEGA质粒提取试剂盒操作步骤
O M E G A质粒提取试剂盒操作步骤1．??在10-20ml试管中，将携带有所需质粒的E.coli接种到5mlLB培养基LB（含氨苄青霉素50μg/ml），37℃振荡培养12-16h。
需特别指出的是：endA阴性的E.coli菌株用于常规质粒提取，如DH5α和JM109.2．??取1.5~5ml菌液室温10000×g离心1min3．??去上清，加250μl溶液Ⅰ（含RNaseA），涡漩振荡器震荡至菌体完全悬浮。
4．??加入250μl溶液Ⅱ，温和颠倒离心管4~6次，获得澄清的裂解液。
最好室温孵育2min，剧烈混合会使剪切染色体DNA，降低质粒纯度。
(储存溶液Ⅱ应拧紧瓶盖)5．??加350μl溶液Ⅲ，温和颠倒数次混合，至出现白色絮状沉淀6.室温13000×g离心10min.7．??特别小心吸取上清，移至洁净的装配好容积2ml离心管的吸收柱中。
要保证没有吸入沉淀和细胞碎片。
室温10000×g离心1min，至裂解物完全通过吸收柱8．??弃滤过液，加500μlBufferHB，10000×g离心1min，清洗吸收柱，除去残余蛋白质保证DNA的纯度。
如果接下来的步骤对质粒纯度要求不高，如酶消化法等其它筛选方法，此步可省略9．??弃滤过液，再用100%乙醇稀释的700μlWashBuffer清洗吸收柱，10000×g离心1min.注意：WashBuffer浓缩液用前必须用纯乙醇稀释，方法见标签，如果经过冷冻，用前必须恢复室温10．??此步可选：再加700μlWashBuffer清洗吸收柱11.必须将吸收柱13000×g离心2min确保乙醇被去除，乙醇会影响下面的步骤。
12.将吸收柱放入干净1.5ml离心管，加30-50μl(取决于需要的终浓度)无菌去离子水或TE 缓冲液在滤膜上，13000×g离心1min，一次可洗脱75-80%附着DNA（可进行再洗脱，但会降低DNA浓度）。
DNA protocol(2016)
OMEGA Mollusc DNA Kit (DNA提取方法)OMEGA:D3396-02第一步：加omega裂解夜（ML1，buffer ML1，裂解组织）220微升，剪碎，再加钢珠到圆底离心管内，振荡器打碎/3次，每次30秒，6000转/分钟离心1分钟（如果用剪刀或匀浆器可以不用离心这个步骤）;第二步：加25微升Proteinase K(OB)，分解蛋白、55度孵育4-5小时，或过夜;答：OB是蛋白酶，降解蛋白质的OB是什么氯仿和异戊醇的混合溶液（24:1），这个步骤是不是没有写？？答：这个试剂盒没有加氯仿和异戊醇的混合溶液这一步。
第三步：加BL220u l,震荡混匀（使组蛋白同DNA分离），70度孵育10min，瞬时离心是不是buffer MBL??答：按照你的说明说做，如果不清楚，你可以把你的试剂盒的说明书扫描发给我，我看看再回你。
你的试剂盒好像和我们用的不完全一样。
第四步：加220ul无水乙醇，振荡器混匀，然后6000-9000转/分钟离心60秒。
（使DNA在溶液中析出）第五步：吸取700ul上清液至离心柱上。
10000转/分钟离心60秒第六步：加HBC 500ul，10000转/分离心30s，换至新的收集柱。
（清洗杂质）第七步：加wash buffer 700ul，10000转30秒，倒掉上清液，然后再加入wash buffer 700ul，10000转30秒，（清洗RNA，保证DNA纯度）。
第八步：清洗完后，倒掉上清液，空转2分钟，把离心柱放入1.5mlEP管中。
（甩掉残存溶液）第八步：把the elution buffer放在70℃水域锅内（把DNA溶解液加热到70℃），加70℃the elution buffer 80ul，静置2分钟，8000-9000转/分钟离心1min，1.5ml EP管内即为提取的总DNA.第九步：编号。
体系：Mix:15ul双蒸水：11ul 28ul(2ul模板加28ul的体系) Primer：各1ul模板2ul。
omega真菌DNA提取试剂盒说明书
D 3390-01 50 100 50 m L 10 m L 20 m L 7 mL 250
D 3390-02 200 400 180 m L 40 m L 80 m L 25 m L 1 mL 2 x 60 m L 50 m L 1
A. Dry Specim ens (Page 4) B . Fresh/Frozen Specim ens (Page 6) C. Short protocol (Page 9)
:L
:L
12 m L 1.5 m L 1
48 m L 15 m L 1
* Eq uilib ra tion B u ffe r co n ta in s S odium Hydroxide. W ear gloves and safety glasses when handling.
Before Starting
R apid protocol for dried or fresh sam ples. Yield is sufficient for P CR .
Fungal DNA Miniprep Protocol
A. Dry Specimens Materials to be provided by user ! Microcentrifuge capable of at least 10,000 x g ! ! ! ! ! ! Nuclease-free 1.5 mL or 2 mL microfuge tubes Water bath equilibrated to 65EC Equilibrate sterile dH2O water at 65EC Isopropyl alcohol (isopropanol) Absolute (96%-100%) ethanol Paper towels This is the most robust method for isolation of total cellular (mitochondrial, chloroplast, and genomic) DNA. Yields are usually sufficient for several tracks on a
无内毒素质粒大提取试剂盒中文操作指南
无内毒素质粒大提取试剂盒中文操作指南（omega）详细内容：E.Z.N.A. ® Fastfiler Endo-free Plasmid MaxiprepProtocol(无内毒素质粒大抽提)1. 在1-4升的培养瓶中加入200-500ml LB培养基,然后加入菌种于37℃摇床培养12-16小时；Tip:为获得最好的结果，请接种1ml培养过夜的菌种（12-16hr）。
并强烈推荐使用E.coli(endA-)品系用于常规的质粒提取，如DH5a和JM109。
注意：菌液的培养时间不能超过16小时；2. 收集200ml培养基至适当的离心管，室温下，3,500-5,000×g离心10分钟沉淀；3. 吸尽并去除培养基，用干净的吸水纸吸尽壁上多余的液体。
加12.0ml Solution I/RNase A到细菌培养物中，涡旋和枪头抽打细菌以重悬细胞；注：充分重悬细菌沉淀物对获得高产量的质粒是相当关键的。
充分重悬后溶液是均匀的，不存在小块物质；请尽量吸弃残余的培养基以防止稀释加入的溶液；4. 加入12.0ml SolutionII，轻轻颠倒旋转混匀7-10次至获得澄清的裂解液；室温放置3-5分钟可以有是必须的。
避免剧烈振荡混匀而打断染色体DNA，降低质粒的纯度。
（Solution II使用后请盖紧盖子且于室温保存）；5. 将取出Lysate Clearance Filter Syrine活塞，将其放置于架子上；6. 加入12 ml Neutralization Buffer，轻轻颠倒混匀几次至出现絮状沉淀。
这可能需要放置2-3分钟并间断颠倒混匀；7. 立即将裂解液转移到lysate Clearance Filter Syrine中，垂直放置5分钟。
这时白色的絮状沉淀物会漂上溶液的上层，裂解液可能开始流出过滤器，用新的50ml管子收集细菌裂解液，并将活塞轻轻插入过滤器中；8. 握住过滤器，轻轻推动活塞将裂解液打到收集管中；注意不要将任何杂质打到收集管中；9. 加入0.1体积的ETR Solution（蓝色）到收集液中，轻轻颠倒旋转混匀7-10次，冰浴放置20分钟；注意：加入ERT Solution后，溶液应变得浑浊，但冰浴静置后溶液应是澄清的。
Omega真菌DNA提取试剂盒说明书
Introduction
The E.Z.N.A.™ High Performance (HP) Plant DNA Kit is designed for efficient recovery of genomic DNA up to 60 kb in size from fresh and dried plant tissue samples rich in polysaccharides or lower DNA contents. Up to 100 mg of wet tissue (or 30 mg dry tissue) can be processed in less than 1 hour. The system combines the reversible nucleic acid-binding properties of the HiBind® matrix with the speed and versatility of spin column technology to eliminate polysaccharides, phenolic compounds, and enzyme inhibitors from plant tissue lysates. Purified DNA is suitable for PCR, restriction digestion, and hybridization techniques. There are no organic extractions thus reducing plastic waste and hands-on time to allow multiple samples to be processed in parallel.
质粒中提中文版(Omega)
中提质粒步骤材料准备：灭菌250或500mL三角瓶，托盘天平，5mL移液枪及枪头，卫生纸，废液缸，记号笔，50mL 圆底离心管，15mL尖底离心管步骤：1.集菌将100mL菌液分批倒入50mL圆底离心管中，室温12000rpm离心1min，弃流出液体，打开盖倒置吸水纸上控干。
2.加入2.5mL solution I（提前加入RNase，4℃保存），重悬细菌沉淀（可使用5mL移液枪吹打）。
3.加入2.5mL solution II，轻柔混匀（颠倒离心管7-10次），以获得清亮的裂解物，室温静置3-5min。
（此步主要是碱裂解细菌，使其中的蛋白质和DNA变性，反应时间不能太长，否则容易使大肠杆菌的基因组DNA断裂成小片段，污染质粒DNA）4.加入1.25mL Buffer N3，轻柔混匀（颠倒离心管7-10次），直至形成白色沉淀，室温静置2-3min。
5.4℃12000rpm离心10min，使白色沉淀沉于底部。
6.取出一个Lysate Clearance Filter Syringe，抽出活塞，小心将5中液体全部转移至注射器中（注射器可不放活塞直接直立于4中的离心管中，液体不会出来），室温静置2min。
7.将6中注射器放置于一新的15mL离心管，轻推注射器活塞，使液体流入离心管中。
8.加入0.1倍体积的ETR（约600uL）至过滤后的液体中，混匀（颠倒离心管7-10次），冰浴20min，期间颠倒离心管几次。
（此期间准备一个Hind-Bind DNA midi Column加入2mL GPS Buffer，室温静置10min，4000rpm离心5min）9.42℃温浴5min，溶菌液变浑浊，室温4000rpm离心5min，则ETR沉入底部。
10.小心将上层液体转移至一新的15或10mL离心管中，加入0.5倍体积的EtOH（约2.5mL），轻柔混颠倒5-6次，室温静置2min。
11.将10中液体加入柱子中，室温4000rpm离心5min，弃液体，重新装好柱子，直至液体全部滤过。
试剂盒提DNA步骤
OMEGA--D5525-01型水样中DNA提取试剂盒E．Z．N．A TM WaterDNA KitD5525-01试剂盒内含：Hinbind DNA结合柱50个，2mL收集管100个，玻璃珠27g，HTR试剂10mL，BufferSLX 180mL，SP2 Buffer 60mL,XP1 Buffer40mL,Elution Buffer 30mL,DNA Wash Buffer 20mL。
有关Buffer GPS硅胶柱（即Hinbind DNA结合柱）经Buffer GPS预处理后可大大减少柱子中硅胶膜的憎水基团，提高核酸的结合能力。
柱子在长期放置过程中会同空气中的电荷/尘埃发生反应而影响其核酸的结合能力。
Buffer GPS是强碱性溶液，若不小心碰到，请用大量自来水清洗。
用完后需盖紧瓶盖，以免接触空气。
室温保存Buffer GPS。
在保存过程中可能会有沉淀生成，请加热至37℃使沉淀完全消失。
需要准备的：预定工作台(9：00—16:00)超净台在开紫外前先用75%的酒精棉擦拭以使台面尽量无菌，预定4℃离心机(10:00-（至少定3h），采水样，清洗抽滤装置（擦洗灭菌），（95%乙醇泡烧）无菌镊子、剪刀，水浴锅（先设定为70℃，冰盒（70℃水浴时制即可）、试剂盒，异丙醇，无菌锡箔纸、吸水纸、1000μL移液器及枪头，黄枪头，计时器，灭菌勺，离心管架，转速约14000g的离心机，灭菌50mL离心管，灭菌1.5mL离心管，ddH2O，0.22μm微孔滤膜，75%酒精及灭菌脱脂棉（用来擦洗已提过水样的漏斗），放镊子剪刀大离心管等的试剂架。
Buffer GPS对硅胶柱的前处理：（在超净台中操作，可以在第10步时处理柱子）1.取一个新的Hinbind DNA结合柱装在收集管中，吸取合适体积的Buffer GPS平衡缓冲液（小柱提取用200μL，中柱提取用1mL，大量提取用3mL）至柱子中。
室温放置3~5min。
OMEGA质粒提取试剂盒操作步骤
OMEGA质粒提取试剂盒操作步骤1．在10-20ml试管中，将携带有所需质粒的接种到5ml LB培养基LB（含氨苄青霉素50μg/ml），37℃振荡培养12-16h。
需特别指出的是：endA阴性的菌株用于常规质粒提取，如DH5α和JM109.2．取~5ml菌液室温10000×g离心1min3．去上清，加250µl溶液Ⅰ（含RNase A），涡漩振荡器震荡至菌体完全悬浮。
4．加入250µl溶液Ⅱ，温和颠倒离心管4~6次，获得澄清的裂解液。
最好室温孵育2min，剧烈混合会使剪切染色体DNA，降低质粒纯度。
(储存溶液Ⅱ应拧紧瓶盖)5．加350µl溶液Ⅲ，温和颠倒数次混合，至出现白色絮状沉淀6. 室温13000×g离心10min.7．特别小心吸取上清，移至洁净的装配好容积2ml离心管的吸收柱中。
要保证没有吸入沉淀和细胞碎片。
室温10000×g离心1min，至裂解物完全通过吸收柱8．弃滤过液，加500µl Buffer HB，10000×g离心1min，清洗吸收柱，除去残余蛋白质保证DNA的纯度。
如果接下来的步骤对质粒纯度要求不高，如酶消化法等其它筛选方法，此步可省略9．弃滤过液，再用100%乙醇稀释的700µl Wash Buffer清洗吸收柱，10000×g离心1min.注意：Wash Buffer浓缩液用前必须用纯乙醇稀释，方法见标签，如果经过冷冻，用前必须恢复室温10．此步可选：再加700µl Wash Buffer清洗吸收柱11.必须将吸收柱13000×g离心2min确保乙醇被去除，乙醇会影响下面的步骤。
12.将吸收柱放入干净离心管，加30-50µl(取决于需要的终浓度)无菌去离子水或TE缓冲液在滤膜上，13000×g离心1min，一次可洗脱75-80%附着DNA（可进行再洗脱，但会降低DNA浓度）。
(完整版)OMEGAdna提取说明书
材料与仪器：离心机（至少14000g）、1.5ml或2ml无核酸酶离心管、水浴锅、无水乙醇、氯仿、异戊醇、无酶水。
试验之前：先用absolute ethanol稀释DNA Wash Buffer Concentrate,每瓶DNA Wash Buffer Concentrate加80ml（200份装）试验步骤：1.使用mortar和pestle在liquid nitrogen中研磨样品（不超过50毫克），放入1.5ml microcentrifuge tube。
2.加350ulBuffer ML1和25ul Proteinase K,涡旋混匀，60℃孵育（最少30分钟），大多数孵育不超过4小时或者37℃孵育1晚。
3.裂解产物加350ul氯仿和异戊醇的混合溶液（24:1），涡旋混匀。
10000g室温离心2min，转移上清液到1.5ml microcentrifuge tube，避免含有污染物和抑制剂的乳白色界面。
4.估计步骤3 supernatant体积，加等集体的Buffer MBL，涡旋15s混匀，70℃孵育10min。
5.加步骤3等体积的无水乙醇，涡旋15s混匀。
（tips:300ul上清液+300ul Buffer MBL+300ul absolute ethanol）6.把柱子和提供的2ml收集管装配好，加步骤5的溶液750ul，10000g 室内离心1min,倒掉被离心的液体，重复利用提供的2ml收集管。
7.把步骤5剩余的混合物按照步骤6的方法离心，但抛弃提供的2ml 收集管。
8.把柱子放在新的2ml收集管，加500ul HB Buffer,10000g，30s，第一次洗柱子。
9.重复利用2ml收集管，加700ul DNA Wash Buffer,10000g,1min,抛弃被离心的液体，重新利用2ml收集管。
10.重复步骤9，加700ul DNA Wash Buffer,室温15000g,2min（这一步关键是去除微量的乙醇，以防其感染下游的实验）。
Protocol：血液样品DNA的提取_OMEGA试剂盒 (1)
血液样品DNA的提取实验材料：OMEGA血样提取DNA试剂盒（货号D3494-04），无水乙醇;水浴锅（最好两个）采集的血样可在4℃下保存不超过一周；在-80℃下保存的血液，使用前37℃边摇动边融化。
一、实验前准备：1.向DNA wash buffer中加入100ml无水乙醇，颠倒混匀；2.向OB 蛋白酶中加入proteinase storage buffer 15ml，摇动混匀，分装-20℃冻存，用前微涡旋；3.10×Buffer ERL 用超纯水配成1×，4℃预冷；4.两个水浴锅分别调温度至55℃和65℃；5.RNase分装-20℃冻存。
二、实验步骤以下操作步骤适用于2ml以上体积的全血。
1.将所要提取的全血倒入50ml 离心管中，用1×Buffer ERL将血液收集管洗涤三遍，继续向50ml 离心管中加Buffer ERL至累计体积为全血体积的5倍；2.冰上孵育20min，每5min轻微涡旋混匀一次；3.4℃，450g，离心10min，弃上清；小心倾倒，避免沉积在管壁或管底的细胞脱落滑出。
倾斜离心管，卫生纸按住管口，吸附残液。
4.向50ml 离心管中加入2倍于全血体积的Buffer ERL，涡旋混匀；5.4℃，450g，离心10min，弃上清，留下约100μl残液；倾倒后残留在管壁上的液体已足够100μl，不必刻意操作。
6.涡旋至白细胞沉淀完全重悬；7.加入2ml TL Buffer，剧烈涡旋20s；8.加入150μl OB蛋白酶，涡旋混匀。
55℃水浴2h。
每30min取出轻微涡旋混匀一次；9.加入2.1ml Buffer BL，20μl RNase A，剧烈涡旋20s，65℃加热10min；10.加入2.2ml无水乙醇，剧烈涡旋30s，略离心，甩下管壁和管盖上沾的液体；11.将不超过3.5ml上述液体转移至吸附柱中，5000g离心5min，弃流出液；12.将步骤10剩余的液体继续加入吸附柱，5000g离心5min，弃流出液；13.向吸附柱中加入3ml Buffer HB，5000g离心5min，弃流出液；14.向吸附柱中加入3ml DNA Wash Buffer，5000g离心5min，弃流出液；15.重复步骤14一次；16.4000g空离心15min；空离心的同时，取900μl Elution Buffer/样品70℃水浴加热。
omega真菌DNA提取试剂盒说明书
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Pre-heat Elution Buffer to 65E C.
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Dilute Wash Buffer Concentrate with ethanol as follows and store at room temperature.
D3390-00 D3390-01
Add 18 mL absolute (96%-100%) ethanol. Add 72 mL absolute (96%-100%) ethanol to each bottle. Add 90 mL absolute (96%-100%) ethanol to each bottle.
E.Z.N.A . Fungal DNA Kit 1 1 /2 0 0 7
2
E.Z.N.A . Fungal DNA Kit 1 1 /2 0 0 7
Kit Contents
Product N um ber H iBind
®
D 3390-00 5 10 5 ml 2 mL 2 mL 1.5 m L 40
For processing #50 m g powdered tissue. Yield is sufficient for several tracks on Southern assay. For processing #200 m g fresh (or frozen) tissue. Yield is sim ilar to A .
Introduction Contents
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材料与仪器：离心机（至少14000g）、1.5ml或2ml无核酸酶离心管、水浴锅、无水乙醇、氯仿、异戊醇、无酶水。
试验之前：先用absolute ethanol稀释DNA Wash Buffer Concentrate,每瓶DNA Wash Buffer Concentrate加80ml（200份装）
试验步骤：
1.使用mortar和pestle在liquid nitrogen中研磨样品（不超过50毫克），放入1.5ml microcentrifuge tube。
2.加350ulBuffer ML1和25ul Proteinase K,涡旋混匀，60℃孵育（最少30分钟），大多数孵育不超过4小时或者37℃孵育1晚。
3.裂解产物加350ul氯仿和异戊醇的混合溶液（24:1），涡旋混匀。
10000g室温离心2min，转移上清液到1.5ml microcentrifuge tube，避免含有污染物和抑制剂的乳白色界面。
4.估计步骤3 supernatant体积，加等集体的Buffer MBL，涡旋15s混匀，70℃孵育10min。
5.加步骤3等体积的无水乙醇，涡旋15s混匀。
（tips:300ul上清液+300ul Buffer MBL+300ul absolute ethanol）
6.把柱子和提供的2ml收集管装配好，加步骤5的溶液750ul，10000g 室内离心1min,倒掉被离心的液体，重复利用提供的2ml收集管。
7.把步骤5剩余的混合物按照步骤6的方法离心，但抛弃提供的2ml 收集管。
8.把柱子放在新的2ml收集管，加500ul HB Buffer,10000g，30s，第一次洗柱子。
9.重复利用2ml收集管，加700ul DNA Wash Buffer,10000g,1min,抛弃被离心的液体，重新利用2ml收集管。
10.重复步骤9，加700ul DNA Wash Buffer,室温15000g,2min（这一步关键是去除微量的乙醇，以防其感染下游的实验）。
11.把柱子放入1.5ml离心管，预热Elution Buffer60-70℃,加50-100ul到柱子内，室温下浸泡2min，10000g，1min离心。
12.使用50-100ul Elution Buffer,重复洗脱步骤，再次收集DNA样品。