尿血红蛋白测定干化学法作业指导书

尿血红蛋白测定干化学法作业指导书

1. 实验原理

血红蛋白中的亚铁血红素与过氧化物酶的结构和功能相似，具有弱过氧化物酶活性，能催化过氧化氢释放新生态氧，氧化色原物而呈蓝色，借以检出微量的血红蛋白。

2. 标本采集

2.1 标本采集前病人准备：以清晨第一次尿为宜，急诊患者可随时留取。

2.2 标本种类：新鲜尿液

2.3 标本要求：采集患者尿液标本时，盛尿液的容器必须清洁干燥，要求留取中段尿。

3. 标本储存：从排出到检测应在2小时内完成。如不能及时送检或分析，应置4℃下冷藏保存，但冷藏时间不得超过6小时。

4. 标本运输：室温运输。

5. 标本拒收标准：细菌，经血，白带，精液，粪便污染标本不能作测定。

6. 试剂

6.1 试剂名称Combur10Test R M

6.2 试剂厂家德国Roche 诊断试剂公司

6.3 包装规格：100Test/kit

6.4 试剂盒组成：试纸条：100条

6.5 试剂储存条件及有效期：试剂盒贮存于2-30℃条件下，可使用至试剂盒所标示有效期。

7. 仪器设备

7.1 仪器名称：罗氏尿液分析仪

7.2 仪器厂家：Roche

7.3 仪器型号：Miditron R Junior II

7.4 仪器校准程序：在使用过程中，一般是两周校准一次，如超过此期限，仪器会提示“Please Calibrate”（请校准）。通过测定内部参比块，环境温度和光学系统的改变都可被补偿。当条件改变很大时，比如参比块腐蚀或发光二极管的亮度变暗，仪器将打印出一个错误信息；校准条是有稳定特征的灰白色试条，这些校准条只能使用一次。校准前，应先清洁试纸托盘与运输臂。步骤为：在“READY—”显示时，按键，放上校准条。再按键，

校准条被送入机器内，屏幕显示“Calibrating”（正在校准），约一分钟后，标准结果将被打印出。“Calibrating O.K”，表示校准成功。

8. 操作步骤：

8.1 按键，显示“Prepare Strip”，此时试条筒中拿出试条。

8.2 约4秒钟后，显示“Dip Strip 1”，同时绿灯闪烁，将试条浸入尿样中。

8.3 当显示“Insert Strip 1”，把试条放在试条托盘上，此时绿灯亮，若要人工输入颜色，按键，再按键，选择相近的颜色，最后按键确认，同样也可人工输入浊度。

8.4 约20秒后，显示“Dip Strip 2”，然后重复以上过程。

8.5 每一个测量完成后将自动打印出结果。

9. 结果判断：浅棕色为（—），浅蓝绿色为（＋），蓝绿色为（＋＋），蓝色为（＋＋＋），深蓝色为（＋＋＋＋）

10. 质量控制：质控尿液的应用：用人工质控尿液进行空内质控，低浓度质控液应为（＋），高浓度质控液应为（＋＋＋）。

11. 参考范围：阴性

12.临床意义：正常人尿液中无游离血红蛋白。当体内大量溶血，尤其是血管内溶血，血液中游离血红蛋白可大量增加，当超过1.0-1.35g/L时，即出现血红蛋白尿。此种情况常见于血型不合输血，阵发性睡眠性血红蛋白尿，寒冷性血红蛋白尿，急性溶血性疾病等。还可见于各种病毒感染，链球菌败血症，疟疾，大面积烧伤，体外循环，肾透析，手术后所致的红细胞大量破坏等。

13.操作性能：快速简便，特异性强，灵敏度高，重复性好。

14. 方法局限性

14.1 试带应妥善保存，注意有效期并避免污染。

14.2 尿液必须新鲜，以免因红细胞破坏，导致干化学试带法与显微镜检查的人为误差。

14.3 各种原因导致尿中出现红细胞，可致假阳性。

14.4 VitC对本实验有抑制作用，可致假阴性。

14.5 尿路感染时，由于细菌产生过氧化物酶而引起假阳性。某些氧化物如漂白粉也可致假阳性。

14.6 浓缩尿，高蛋白尿可降低试带反应的灵敏度。

14.7 试带上出现绿色斑点提示为完整红细胞所致。

15.当检验系统（仪器）不能工作时，所采取的补救措施

当检验系统（仪器）不能工作时，可联系仪器厂家，进行紧急修理，如一时不能修好，如别的实验室有同类仪器可到别的仪器上先测，如别的实验室无同类仪器，申请厂家送一台能正常工作的仪器代替。

16. 参考文献

16.1 叶应妩王毓三主编.全国临床检验操作规程.中华人民共和国卫生部医政司，1997，北京：124

16.2 刘成玉主编.临床检验基础实验指导.人民卫生出版社，2002，北京：122-123