种子生活力快速测定

种子生活力快速测定

实验人员：候勇 2012年度国培班果蔬花卉专业

试验目的：种子生活力是指种子的发芽潜力，即发芽力，是判断种子质量的重要指标；要了解种子生活力的大小，最可靠的方法是测定种子的发芽率。种子的发芽率是指在适宜条件下种子发芽的百分数，它是鉴定种子质量的主要依据，在确定播种量以及种子生理研究中具有重要意义。

本实验的目的就是快速测定种子生活力的方法。

实验仪器及材料：

1、仪器：电热恒温培养箱、培养皿、烧杯、镊子、单面刀

2、试剂：3%TTC溶液、0.1%BTB溶液、1%BTB琼脂凝胶、红墨水5%

3、材料：玉米、小麦吸胀种子

方法一：红墨水染色法

实验原理：

红墨水染色法是根据活种子细胞的原生质膜具有选择性吸收物质

的透性，而死种子的胚细胞原生质膜则丧失此性质，于是染料进入死细胞而染色。

操作步骤：

1、浸种：取不同种子一部分用沸水煮5-10min，作为死种子；一部分用凉水浸泡一昼夜，吸

涨备用。

2、染色：取已吸涨种子100粒，玉米种子可在中间阔面将胚纵切为两半将其中一半放入培养

皿中，用5%红墨水染色。

3、结果观察：经过5-8min，倒出红墨水，多次用清水清洗后观察胚的颜色，凡是胚部不着

色的为生活良好的种子，有略带红色的说明生活力较弱，都染红的说明无生活力。

结果：活种子%=胚不着色的种子数/供试种子*100 50%=5/10*100

方法二：BTB变色法

实验原理：

活种子进行呼吸作用呼吸空气中的O2，放出CO2。CO2溶于水成为H2CO3，H2CO3解离为H+和HCO3-，使得种子周围环境的酸度增加。BTB法通过测定酸度的变化来判断种子活性。BTB 变色范围为PH6.0—7.6,酸性呈黄色，碱性呈蓝色，中间经过绿色（变色点为PH7.1）。色泽差异显著，易于观察。

操作步骤：

1%BTB染色将吸胀的小麦种子分别整齐地埋于1%BTB琼脂凝胶两个培养皿中，胚向下，间距约1cm。培养皿置于30C培养箱中培养0.5h，在光亮处下观察，种子附近呈现深黄色晕圈的是活种子，用沸水中杀死的种子分别进行对照。

实验结果：

种子活力（%）=（出现黄色晕圈的种子粒数/总种子数）*100

玉米种子活力（%）=(10/20) *100=50%

方法三、TTC染色法

实验原理：

活种子的胚在呼吸作用过程中能进行氧化还原反应，而死种子则无此反应。当TTC渗入活种子胚细胞内作为氢受体而被脱氢辅酶(NADH2或NADPH2)上的氢还原时，无色的TTC 转变为红色的三苯基甲（TTF）。

操作步骤：

1. 将玉米、小麦种子用温水(30~35℃)浸泡3~6h，使种子充分吸胀。

2. 随机取种子10粒，沿种胚中央准确切开，其中一半置于培养皿中，加入0.3%TTC，以覆盖种子为宜，置于30 ℃观察培养箱中培养30min ；另10个半粒作为对比放入红墨水中。

3. 倒出TTC溶液，再用清水将种子冲洗2次，观察种胚被染色的情况。

4.观察：种胚为红色为活种子，而不能染色或染色较浅的为死种子。

实验结果：100.5%TTC显色实验

活种子百分率（%）=（染成红色的种子粒数/实验种子的总粒数）*100

小麦活种子百分率（%）=(5/10)*100=50%