【精品课件】细胞凋亡与肿瘤
肿瘤与细胞凋亡PPT课件
VS
机遇
随着基因组学、蛋白质组学和代谢组学等 技术的发展，我们可以更深入地了解肿瘤 细胞凋亡的机制，发现新的治疗靶点。同 时，随着免疫治疗和基因治疗等新型治疗 方法的出现，也为肿瘤细胞凋亡的研究提 供了新的思路和手段。
肿瘤细胞凋亡研究的前沿技术与方法
单细胞测序技术
可以对单个细胞进行基因组、转 录组和蛋白质组测序，从而更准 确地了解肿瘤细胞凋亡的机制和 过程。
肿瘤与细胞凋亡PPT 课件
contents
目录
• 肿瘤概述 • 细胞凋亡概述 • 肿瘤与细胞凋亡的关系 • 肿瘤细胞凋亡的研究进展 • 展望与未来研究方向
01
肿瘤概述
肿瘤的定义与分类
肿瘤的定义
肿瘤是机体在各种致癌因素作用下， 局部组织的某一个细胞在基因水平上 失去对其生长的正常调控，导致其克 隆性异常增生而形成的新生物。
肿瘤细胞凋亡的信号转导通路研究
肿瘤细胞凋亡的信号转导通路
研究肿瘤细胞凋亡的信号转导通路，包括死亡受体通路、线粒体通路等，有助于揭示肿 瘤细胞凋亡的调控机制。
肿瘤细胞凋亡信号转导通路的调控
研究肿瘤细胞凋亡信号转导通路的调控，包括各种激酶、磷酸酶等对凋亡过程的调控作 用，有助于发现新的治疗策略。
肿瘤细胞凋亡与其他生物过程的相互作用研究
肿瘤细胞凋亡与自噬的相 互作用
研究肿瘤细胞凋亡与自噬之间的相互作用， 有助于深入了解肿瘤细胞的生存与死亡平衡 。
肿瘤细胞凋亡与免疫系统 的相互作用
研究肿瘤细胞凋亡与免疫系统之间的相互作 用，有助于发现新的免疫治疗策略。
05
展望与未来研究方向
肿瘤细胞凋亡研究的挑战与机遇
挑战
肿瘤细胞凋亡的机制复杂，涉及多种基 因和信号通路的相互作用，研究难度较 大。同时，肿瘤细胞常常通过多种途径 抵抗细胞凋亡，导致治疗难度增加。
细胞凋亡与肿瘤
凝集呈半月状
完整 无 无 耗能 梯状条带形
凋亡的生理意义
对动物个体的正常发育，自稳态的维持，免疫 耐受的形成，肿瘤监控等多种生理及病理过程 具有重要意义 细胞凋亡还是一种生理性保护机制，能够清除 体内多余、受损或危险的细胞而不对周围的细 胞或组织产生损害
细胞凋亡与人类疾病
细胞凋亡受抑制有关的疾病
P53基因是研究最透彻，功能最强大的一种抑 癌基因。野生型p53对细胞周期和凋亡起关键 性作用，尤其是对受照射、细胞毒制剂、热疗 打击的癌细胞，起更大的杀伤作用
抑制并杀灭肿瘤细胞；与放、化疗手段协同，增强其 杀灭癌细胞的功效，达到1+1大于2的效果；
抑制肿瘤血管生成，有效防止肿瘤的复发、转移。提 高人体自身的免疫功能
细胞凋亡可以更有效的治疗肿瘤的切入 点，有效拮抗凋亡抑制因子的作用，最 大限度的选择性诱导肿瘤细胞凋亡，有 效利用诱导凋亡从根本上来抑制肿瘤
预防肿瘤
科学运动 合理饮食 戒烟戒酒 良好心态
恶性肿瘤：滤泡性淋巴瘤，白血病等 自身免疫性疾病：系统性红斑狼疮，肾炎 病毒感染性疾病：腺病毒病，疱疹病毒病
细胞凋亡增多有关的疾病
艾滋病 神经变性性疾病：早老性痴呆，帕金森病，小脑退化病 骨髓发育不全性疾病 缺铁性疾病 酒精中毒性肝炎
细胞凋亡的检测
DNA电泳
原理：凋亡细胞的基因组DNA常首先被剪切为 200-300kb和30-50kb的片断（“结构域式”剪 切），再进一步降解产生大小相当于核小体 (160-200bp)的倍数的寡核小体片断（“裂 解”/“梯子式”剪切）。因此，在琼脂糖凝 胶电泳图谱上凋亡细胞表现为特征性“梯子” 样外观。 DNA梯状条带是鉴定细胞凋亡最可靠的方法
细胞凋亡与肿瘤
肿瘤是细胞的异常增殖，通过遗传改变，不断 积累扩张获得生存优势 细胞积累=细胞增殖-细胞死亡
细胞凋亡与疾病ppt-病理学PPT课件
由体内外因素触发细胞内预存的死亡 程序而导致的细胞死亡过程。
也称为程序性细胞死亡
(programmed cell death，PCD)
2020年10月2日
3
apoptosis 概述
近年来细胞凋亡和 PCD常被做为同义词 使用，但有学者认为两者是不同的概念：
➢ 细胞凋亡是一个形态学概念，如染色质着 边及DNA梯状条带等；
➢ PCD是一个功能性概念，不一定有上述形 态学变化。Biblioteka 2020年10月2日4
细胞凋亡与坏死的区别
apoptosis 概述
➢ 细胞坏死通常由严重损伤因素所致，如毒物 中毒、严重缺血、缺氧、强酸、强碱、强大 电流等，正常组织细胞不发生坏死。
2020年10月2日
13
apoptosis
Sydney Brenner H. Robert Horvitz John E. Sulston
2002年10月7日英国人悉尼·布雷诺尔、美国人 罗伯特·霍维茨和英国人约翰·苏尔斯顿, 因在器官发 育的遗传调控和细胞程序性死亡方面的研究获诺贝 尔生理与医学奖。
溶酶体相对完整，局部 无炎症反应 有
有
2020年10月2日
6
apoptosis
Two Different Types of Cell Death
2020年10月2日
7
概述
在小鼠肌肉中生长的P815肿瘤细胞中因
缺血诱导的坏死, 示浓缩的染色质块的病
态的边缘、膨胀的线粒体和分解的膜。
2020年10月2日
脱接触
→胞膜空泡化(blebbing) →固缩(condensation) →出芽(budding) →染色质边集(margination)
肿瘤细胞与分化凋亡一课件
研究表明，染色质重塑在基因转录调控中有重要作用， 而组蛋白乙酰化、去乙酰化修饰是影响染色质重塑的重要因 素。我们前期研究的基础上，建立人胃癌MGC803细胞裸鼠 移植瘤模型，以被证实有显著诱导肿瘤细胞分化的药物丁酸 钠（Sodium butyrate, SB）为阳性对照，观察DADS（diallyl disulfide）在体内外诱导MGC803细胞分化时，对其核组蛋白 乙酰化表达的调控作用，以及二者之间的关系，进一步探讨 DADS对MGC803细胞抑制和诱导分化的作用机理。
D A D S (200m g/kg)
180
160
140
120
100
80
60
40
20
0
G roups
p21WAF1
β-actin
各处理因素 ： NS SB DADS DADS DADS 浓度(mg·kg-1) ： — 肿瘤细6胞6 与分化、50凋亡一1课00件 200
3. 对癌基因和抑癌基因的影响
SB(mM)
:─ ─ ─ ─ 5 5
DADS对体外培养M肿G瘤C细8胞0与3分细化、胞凋组亡一蛋课件白乙酰化的影响
DADS对MGC803细胞p21WAF1蛋白表达的影响
160 140
12h 24h
A v era g e d en sity (O D )
120
100
80
60
40
20
0
0
15
30
60
D A D S co n terta tio n s (m g /L )
p21WAF1 β-actin
处理时间 （h） : 12h 24h 12h 24h 12h 24h 12h 24h
细胞凋亡与肿瘤
细胞凋亡与肿瘤细胞凋亡是一种与肿瘤发生密切相关的细胞程序化死亡方式。
在正常细胞生命周期中，细胞凋亡是一个必要的过程，保持机体组织和器官的稳态。
然而，在肿瘤发展过程中，细胞凋亡的调控失衡常常会导致癌细胞的无限增殖以及肿瘤的形成。
本文将深入探讨细胞凋亡与肿瘤之间的关系，以及细胞凋亡的机制和调控。
一、细胞凋亡的概述细胞凋亡是一种高度有序的程序化死亡方式，具有细胞体积缩小、染色质凝聚、细胞核破裂等特征。
它是机体中维持组织稳态的重要机制之一。
细胞凋亡常由内源性或外源性信号激活相关的信号通路，通过激活半胱天冬酶家族中的半胱天冬酶-3（Caspase-3）以及其他Caspases酶，最终激活胞质和细胞核的分解酶，导致细胞死亡。
二、细胞凋亡与肿瘤肿瘤是一种细胞过度增殖的异常现象，肿瘤细胞往往具有逃避细胞凋亡的特征。
细胞凋亡功能的异常与肿瘤的形成密切相关。
当细胞凋亡调控机制失衡，肿瘤细胞可以逃避细胞凋亡的程序性死亡，导致肿瘤的增殖和扩散。
因此，研究细胞凋亡在肿瘤发生发展中的作用，对于防治肿瘤具有重要意义。
三、细胞凋亡的机制1. 细胞凋亡的内在通路细胞凋亡的内在通路包括线粒体途径和ER途径。
线粒体途径主要通过线粒体膜的通透性改变来释放线粒体内的激活因子，如细胞色素c 等，激活Caspases酶级联反应。
ER途径指的是内质网（ER）压力应激导致的细胞凋亡，通过释放Ca2+、活化Caspase-12等方式引发细胞凋亡。
2. 细胞凋亡的外在通路细胞凋亡的外在通路包括死亡受体途径和其他通路。
死亡受体途径主要包括TNF受体家族和Fas受体家族，它们与配体结合后引发的信号级联反应激活Caspase酶从而导致细胞凋亡。
除了死亡受体途径外，其他通路还包括DNA损伤、药物等引发的细胞凋亡。
四、细胞凋亡的调控细胞凋亡的调控涉及多个关键分子和途径，如Bcl-2家族、Caspases 家族等。
Bcl-2家族包括一系列的凋亡抑制蛋白和凋亡促进蛋白，它们通过调控线粒体途径的激活和抑制，发挥着重要的作用。
细胞生物学中的细胞凋亡和肿瘤发生
细胞生物学中的细胞凋亡和肿瘤发生细胞凋亡和肿瘤发生是细胞生物学领域中的两个重要研究方向。
细胞凋亡是一种在细胞内部控制的程序性细胞死亡过程，它在维持组织稳态、调控发育和保护机体免受肿瘤等疾病的发生中起着关键作用。
然而，当细胞凋亡发生异常时，可能导致肿瘤的发生和发展。
本文将重点探讨细胞凋亡和肿瘤发生的原理及相关机制。
一、细胞凋亡的原理细胞凋亡是一种高度有序的、主要由内源性信号分子驱动的细胞死亡过程。
在细胞凋亡中，细胞主动断裂其核和细胞质，最终形成凋亡体，被周围吞噬性细胞摄取并降解。
细胞凋亡是一种主要通过激活半胱氨酸天冬酶家族（caspase）酶级联反应来执行的程序性细胞死亡，分为内源性途径和外源性途径。
内源性途径主要包括线粒体通路（线粒体膜破裂）、内质网途径和DNA破裂途径。
线粒体通路中的Bcl-2家族蛋白在细胞生存与凋亡之间起着关键调控作用。
外源性途径主要由死亡受体家族（TNF受体家族）介导，通过受体激活协同其他蛋白酶级联反应来触发细胞凋亡。
二、细胞凋亡在肿瘤发生中的作用细胞凋亡在正常细胞中起着维持组织稳态和抑制肿瘤发生的关键作用。
正常情况下，细胞凋亡可以清除受损细胞并抑制突变细胞的扩散和增殖。
然而，在肿瘤发生和发展过程中，细胞凋亡的调控机制被破坏，导致凋亡抑制或过度凋亡，使肿瘤细胞得以存活和增殖。
许多肿瘤抑制基因和肿瘤抑制蛋白通过调节细胞凋亡来抑制肿瘤的发生。
例如，P53蛋白作为一个重要的抑癌基因，可以激活细胞凋亡途径，诱导损伤细胞死亡。
另外，Bcl-2家族蛋白的异常表达也与肿瘤的发生密切相关。
Bcl-2蛋白可以抑制线粒体通路，从而阻止细胞凋亡的发生，促进肿瘤细胞的存活。
三、肿瘤发生与细胞凋亡异常的关联细胞凋亡异常是肿瘤发生和发展的重要机制之一。
细胞凋亡异常可以通过多种方式导致肿瘤的形成。
首先，凋亡抑制可以使潜在的肿瘤细胞在损伤后逃脱死亡，从而形成肿瘤。
其次，过度凋亡也可能导致肿瘤的形成。
当细胞凋亡途径异常激活，或抑癌基因缺失，或调控蛋白异常表达时，细胞凋亡过度发生，引发组织损伤和肿瘤的形成。
细胞凋亡与肿瘤
六、pRb
• 野生型pRb抑制凋亡； pRb高表 达抑制p53诱导的凋亡；pRb、P107、 P130缺乏诱导凋亡。 • 突变型pRb对凋亡无影响。
30
● 细胞凋亡与肿瘤
一、凋亡与肿瘤发生发展及转移
• 在肿瘤中细胞凋亡小于增殖
• 细胞凋亡率 约为1%-9.5%，淋巴瘤最高,腺 癌次 之,肉瘤最低 • 细胞凋亡与肿瘤发生发展及转移都有关
●
生物学意义：选择性地清除多余、 无用、有害细胞、衰老细胞
●
4
表1
性质
细胞凋亡与细胞坏死的比较
凋亡 坏死
生理性或病理性,特异性
病理性,非特异性 强烈刺激，随机发生
诱因 较弱刺激，非随机发生 基因调控 有
形态变化
无
5
细胞凋亡的形态学改变:
•细胞皱缩 •染色质边集
•核固缩或核碎裂
•凋亡小体形成 (apoptosis body)
apoptosis body
无炎症反应
6
细胞凋亡与坏死形态学改变的差别
apoptosis
•细胞皱缩 •胞膜及细胞 器相对完整 •核固缩或碎裂 •凋亡小体形成 (apoptosis body) •细胞肿胀 •细胞结构 全面破坏
Apoptotic body
necrosis
Release of intracellular contents
DNA电泳 DNA片段化（180-200bp） DNA片状不规则，电泳多 电泳呈“梯”状条带 呈涂抹状
14
●细胞凋亡的生物学意义
确保机体正常发育、生长
清除多余的、失去功能的细胞
维持内环境稳定
清除受损的、突变的及衰老的细胞
发挥防御功能
高级病理学：细胞凋亡与肿瘤
③ 核隔裂（有核膜包裹）
（2）细胞变化：细胞体积变小，胞浆和细胞 器密度增高。
胞膜皱摺、卷曲、出泡、芽生形成膜包裹的 凋亡小体。
（3）凋亡小体内含完整的细胞器和核碎片， 胞浆内M正常或轻度肿胀
透射电子显微镜观察
结果评判：
凋亡细胞体积变小，细胞 质浓缩。
可见荧光染色的固缩核和凋亡小体
一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来 评判细胞凋亡的进展情况
凋亡的人类角化细胞被多聚甲醛固定，被荧光素标记的刀豆蛋白A染色。然后经丙酮 渗透处理，被pi染色后能被共聚焦显微镜观察。本片显示的绿色荧光（外源性凝集 素）勾勒出凋亡细胞表面的小泡，红色荧光（pi）被包被在其中。
（二）细胞凋亡的生化特征：
非随机的寡核小体连接区的 DNA断裂，即被认为是生化 标志，
即Ca2+、Mg2+依赖的内 源性核酸酶的激活将核染色 体从核小体间断裂，形成由 大约180-200 bp或其多聚 体组成的寡核苷酸片段（即 DNA断链）
琼脂糖凝胶电泳可见特征性 的“梯状”（ladder）带。
贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。
（2） 特殊染色细胞：常用姬姆萨（Giemsa） 染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、 边缘化，核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡 小体等典型的凋亡形态
2、荧光显微镜和 共聚焦激光扫描显微镜观察：
荧光染料：如丫啶橙、甲基绿-派若宁
DNA特异性染料：Hoechst 、DAPI
有些诱导分化的药物虽不能诱导细胞凋亡，但 可增加肿瘤对致凋亡药物的敏感性。
2、细胞因子的应用
（1）TNF
研究发现，肿瘤坏死因子（TNF）可诱 导多种癌细胞株凋亡。
《病理学课件-细胞凋亡与肿瘤》
欢迎大家来到《病理学课件——细胞凋亡与肿瘤》的演示。
病理学概述
病理学是研究人体疾病的科学，通过观察和分析细胞和组织的异常变化来诊断疾病。
细胞的基本结构和组成
细胞是生物体的基本结构单位，由细胞膜、细胞质和细胞核等组成。
细胞凋亡的定义和特点
细胞凋亡是一种正常的细胞死亡过程，具有细胞体积减小、核崩解和DNA裂解等特点。
细胞凋亡在肿瘤治疗中的应用
细胞凋亡在肿瘤治疗中被视为一种重要的途径，通过调节凋亡信号传导来抑制肿瘤的生长和扩散。
未来肿瘤治疗的发展方向
未来肿瘤治疗将继续深入研究细胞凋亡调节机制，发展更精准、个体化的治疗策略。
细胞凋亡的调节机制
细胞凋亡受到多个信号通路的调控，包括凋亡基因、抗凋亡基因和凋亡诱导 因子等因素。
细胞凋亡和肿瘤的关系
细胞凋亡在正常细胞中起到抑制肿瘤发生的作用，但在肿瘤细胞中常受到异常调节。
细胞凋亡的生物学意义
细胞凋亡在维持组织稳态、清除老化细胞和抵抗肿瘤等方面具有重要的生物学意义。
肿瘤ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ发生和发展
肿瘤是细胞异常增殖和分化的结果，常由多个基因的突变和功能异常导致。
肿瘤分类和分级
根据肿瘤的组织起源和病理特征，肿瘤可分为多种类型，并进行分级以评估 其恶性程度。
肿瘤的转移和预后
肿瘤转移是肿瘤细胞从原发部位到其他部位的扩散，对预后有重要影响。
肿瘤治疗的原则和方法
肿瘤治疗包括手术切除、放疗、化疗和靶向治疗等方法，根据肿瘤类型和患 者情况选择合适的治疗方案。
细胞凋亡与肿瘤07简.ppt
细胞死亡的两种方式
Apoptosis
Necrosis
Coagulative necrosis liquefaction necrosis caseation gangrene Fat necrosis Fibrinoid necrosis
DFF45=ICAD, PARP Gelsolin, LaminA, Bcl-2, other Caspases, BID,GATA-1, Acinus
• Misc genes
FADD, TRADD, DAD1
• Transcription Factors
p53, myc Forkhead, Nur77
细胞凋亡的机理
Caspase
(Cysteinyl aspartate-specific proteinases) （天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶）
Caspase Structure and Regulation (In general)
• caspases 家族成员拥有相 似的氨基酸序列、结构和底物 特异性。
➢ 凋亡诱导信号活化上游caspases活化下游 caspases.
细胞凋亡的机理
•死亡受体是一类通过与相应配体结合，传递细胞亡信
号的细胞膜蛋白。
•属于肿瘤坏死因子受体（TNFR)超家族， 包括：TNFR, Fas (APO-1/CD95), DR3 (APO-3), DR4(TRAIL-R1), DR5(APO-2, TRAIL-R2, KILLER)等。 •该家族成员结构特点：
细胞凋亡与肿瘤
细胞凋亡与肿瘤为了探寻生命的起因，我们必须溯求于死亡。
Mary Shelley,Frankenstein, 1831年毫无疑问，高等生物自身的构成中就蕴含着死亡。
August Weissmann, philosopher of biology, 1889 年2主要内容•细胞凋亡概述：什么是细胞凋亡？细胞凋亡的特点，与坏死的区别•细胞凋亡发生途径与调控机制主要理论基础：外部途径；内部途径•细胞凋亡的检测手段•细胞凋亡、疾病和肿瘤34细胞凋亡概述¾死亡是生命的普遍现象;¾细胞死亡并非与机体死亡同步;¾正常组织发生的细胞死亡，是维持组织机能和形态所必需的。
5“凋亡”名称的由来University of QueenslandJohn F Kerr 教授英国Aberdeen 大学病理系“1972年我和Wyllie在研究中观察到一种不同于坏死的细胞死亡方式，联想到秋日落叶，我们就把它称作Apoptosis。
”Apoptosis 源于古希腊语，是由apo （脱离）和ptosis （下降）二词组合而成，描写秋天树叶从树枝上脱落。
凋亡（Apoptosis ）强调这一过程是一种自然的生理过程。
Br J Cancer. 1972Apoptosis: A Basic Biological Phenomenon with Wide-ranging Implications in Tissue Kinetics J. F. R. Kerr, A. H. Wyllie, and A. R. Currie凋亡的概念与特点•概念：由内外源因素触发细胞内固有的死亡程序而导致细胞死亡的方式。
是一种主动有序的“细胞自杀”过程。
•特点：shrinkage necrosisz细胞皱缩(shrinkage)；z染色质固缩(condense)、碎裂，DNA片段化；z凋亡小体形成，被周围细胞吞噬；z膜结构保持完整，溶酶体活性不增加。
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细胞凋亡特点
➢ 概念意义 ➢ 形态变化 ➢ 基本特征 ➢ 与坏死区别
特点
发生原因 形态特征
受累范围 细胞膜 细胞体积 染色质 细胞核 细胞器 凋亡小体
周围组织 生化特征
调控 DNA降解 蛋白质合成 对ATP要求
细胞凋亡与细胞坏死的区别
细胞凋亡 生理性或病理性
细胞坏死 病理性
多为单个或散在细胞 仍保持完整 固缩变小 聚集在核膜下，呈半月形 先固缩后降解 仍保持完整 有，被临近细胞或巨噬细胞吞噬
无炎症反应
多为连续大片组织细胞 完整性破坏 肿胀增大 分散凝集，呈絮状 溶解 肿胀，内质网明显崩解 无，后期细胞破裂溶解， 残屑被巨噬细胞吞噬 有炎症反应
整个过程受基因调控主动进行 有规则，电泳呈梯状DNA谱带 有 必需
整个过程均被动进行 无规则，电泳多呈弥散状 无 无需
主讲内容
细胞凋亡特点 细胞凋亡检测 凋亡调控机制 细胞凋亡与肿瘤
➢1858年，Virchow开始研究细胞死亡 ➢1951年, Glucksman提出程序化细胞死 亡
(Programmed Cell Death, PCD) ➢1972年, Kerr提出细胞凋亡
（Cell Apoptosis）
Sydney Brenner H. Robert Horvitz John E. Sulston
细胞凋亡特点
➢ 概念意义
➢ 形态变化 ➢ 基本特征
3 常单个存在于组织中 4 周围组织无炎症反应
➢ 与坏死区别
细胞凋亡特点
➢ 概念意义 ➢ 形态变化 ➢ 基本特征 ➢ 与坏死区别
5 DNA片段化：琼脂凝胶 电泳可见特殊的阶梯状由 不同倍数的l80～200bp核 苷酸组成DNA梯带图 6 合成一些大分子物质
➢ 与坏死区别
老 化
细胞凋亡特点
➢ 概念意义 ➢ 形态变化 ➢ 基本特征
程序性死亡是功能上的概念， 而细胞凋亡是形态学上的概念， 不是所有的程序性死亡都表现 为凋亡，即不一定存在凋亡的 形态学改变
➢ 与坏死区别
细胞凋亡特点
➢ 概念意义 ➢ 形态变化 ➢ 基本特征
凋亡细胞形成多个大小不等有 膜包裹的 凋亡小体 （apoptotic bodies）内含形 态保存完好的细胞器和/或浓 缩的细胞核碎片，后期被吞噬 细胞清除
➢ 与坏
该“死”的细胞不死，如自身 免疫性疾病，恶性肿瘤等
不该死的细胞死了，可能与老 年性痴呆、帕金森症等有关
➢ 基本特征
➢ 与坏死区别
细胞凋亡特点
➢ 概念意义 ➢ 形态变化
细胞凋亡与衰老密切相关
细胞凋亡对维持机体的遗传稳 定性起着重要的作用
➢ 基本特征
细胞凋亡特点
➢ 概念意义 ➢ 形态变化
细胞凋亡是机体生长发育、 细胞分化和病理状态中细 胞自主性死亡的过程
➢ 基本特征
➢ 与坏死区别
(dropping off , falling off)
细胞凋亡特点
➢ 概念意义 ➢ 形态变化 ➢ 基本特征
细胞凋亡是高度有序的基因 控制的一系列活性酶参与的 过程，是多细胞动物生命现 象的重要属性
2002年英国人悉尼·布雷诺尔、美国人罗伯 特·霍维茨和英国人约翰·苏尔斯顿，
因在细胞凋亡研究工作中取得的杰出成就 获诺贝尔生理与医学奖
主讲内容
细胞凋亡特点 细胞凋亡检测 发生调控机制 细胞凋亡与肿瘤
主讲内容
细胞凋亡特点 细胞凋亡检测 发生调控机制 细胞凋亡与肿瘤
细胞凋亡特点
➢ 概念意义 ➢ 形态变化 ➢ 基本特征 ➢ 与坏死区别
细胞凋亡检测
➢ 形态学观察 ➢ 细胞膜完整性 ➢ DNA断裂 ➢ 凋亡定量检测 ➢ 凋亡定位检测
细胞凋亡检测
➢ 形态学观察 ➢ 细胞膜完整性 ➢ DNA断裂 ➢ 凋亡定量检测 ➢ 凋亡定位检测
细胞形态学的检测
1 光学显微镜观察 优点：光镜技术简单、快速，能短时间内 进行大样本分析 缺点：样本制备复杂、耗时 形态计数常受到主观因素干扰 重复性差
细胞膜完整性的检测
AO/EB双染法意义 可用于荧光显微镜或流式细胞仪区
分活细胞或早期凋亡细胞和坏死细胞 或继发性坏死细胞
较台盼兰染色精确、详细
细胞着色，而活细胞与早期凋亡细胞不着色 意义：
方法简单、便捷； 常常用于细胞死亡的初步评估
细胞膜完整性的检测
2 丫啶橙（acridine orange, AO）和溴化乙啶 （ethidium bromide, EB）双染法
AO和EB都能结合DNA的荧光染料，可 分别产生兰色和橙色荧光，其中 AO能透过 完整的细胞膜，而 EB 则只能染色胞膜受损 的细胞
➢ 与坏死区别
细胞凋亡特点
➢ 概念意义 ➢ 形态变化
细胞凋亡与胚胎发生发展、个 体形成、器官的细胞平衡稳定 等有密切的关系
➢ 基本特征
➢ 与坏死区别
蝌蚪尾 消失
脊椎动物 神经系统发育
发育过程 手足成形过程
细胞凋亡特点
➢ 概念意义 ➢ 形态变化 ➢ 基本特征
近年来研究表明，肿瘤的发生 与细胞凋亡的异常密切相关； 细胞凋亡受抑作为细胞增殖紊 乱的对应面在肿瘤发生发展和 转归方面均有重要作用。
细胞形态学的检测
2 电子显微镜观察 优点：可显示凋亡细胞的许多形态学特点 尤其是膜结构和细胞器的变化 主要用于获取细胞凋亡的定性资料 缺点：样本制备复杂、耗时
细胞凋亡检测
➢ 形态学观察 ➢ 细胞膜完整性 ➢ DNA断裂 ➢ 凋亡定量检测 ➢ 凋亡定位检测
细胞膜完整性的检测
1 台盼兰（Trypan blue）染色法 台盼兰为细胞膜非通透性活性染料，坏死
细胞凋亡与肿瘤
学习要求
1 掌握细胞凋亡的概念及与坏死的区别 2 掌握细胞凋亡的基因调控机制及其与肿瘤
发生的关系 3 了解细胞凋亡的常用检测方法及其特点
前言
对细胞死亡的 认识
Nature Reviews, Molecular cell biology. 2001; 2: 545
P C D — Apoptosis
➢ 与坏死区别
细胞凋亡特点
➢ 概念意义
➢ 形态变化 ➢ 基本特征 ➢ 与坏死区别
1 受基因调控，死亡过程 具有程序性，需要某些基因 的启动并合成新的RNA和 蛋白质
细胞凋亡特点
➢ 概念意义
➢ 形态变化 ➢ 基本特征 ➢ 与坏死区别
2 形态学上表现为细胞皱 缩、染色质沿核膜聚集、胞 体胞核裂解包裹形成凋亡小 体