急性酒精性脂肪肝斑马鱼模型的建立戴文聪

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ＤＡＩＷｅｎｃｏｎｇ，ＬＩＵＬｉ，ＷＡＮＧＫｕｎｙｕａｎ，ｅｔａｌ．（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＨｅｐａｔｏｌｏｇｙ，ＮａｎｆａｎｇＨｏｓｐｉｔａｌ，ＳｏｕｔｈｅｒｎＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ，Ｃｈｉｎａ）５１０５１５
２８６
戴文聪，等．急性酒精性脂肪肝斑马鱼模型的建立
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戴文聪，刘莉，王坤元，侯金林１０５１５）（南方医科大学南方医院肝病中心，广州５
摘要：目的建立一种简单易行、重复性好的急性酒精性脂肪肝斑马鱼模型。方法选取野生型斑马鱼２８８条，随机均分为对照组和２％、２．５％、３％乙醇处理组，于胚胎受精后５ｄ给予相应体积浓度比乙醇处理。观察斑马鱼一般生存率和表型变化，用整体％、２．５％和３％乙醇处理组斑马鱼３２ｈ内生存率分别为油红染色评判脂肪肝发生率，石蜡切片观察肝组织病理形态。结果２１００％、（９１．２１± １．６１）％、０％。３％乙醇处理２４ｈ即出现畸形。整体油红染色显示２％乙醇处理组斑马鱼在处理３２ｈ后脂肪肝发生率显著高于对照组（Ｐ＝０．００２）。病理切片可见２％乙醇处理３２ｈ后斑马鱼肝细胞肿胀，肝内脂滴沉积增多，脂肪肝形成。结论利用２％乙醇处理胚胎受精后５ｄ的幼鱼３２ｈ成功地建立急性酒精性脂肪肝斑马鱼模型，为进一步开展急性酒精性脂肪肝的发病机制研究和药物筛选奠定实验基础。关键词：脂肪肝，酒精性；模型，动物；斑马鱼中图分类号：Ｒ５７５．５文献标志码：Ａ文章编号：１００１－５２５６（２０１３）０４－０２８６－０４
收稿日期：２０１２－１１－２２修回日期：２０１２－１２－１４作者简介：戴文聪（１９８７－），女，硕士，主要从事脂肪性肝病研究。通信作者：侯金林，电子信箱：ｊｌｈｏｕｓｍｕ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ。
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｆａｔｔｙｌｉｖｅｒ，ａｌｃｏｈｏｌｉｃ；ｍｏｄｅｌｓ，ａｎｉｍａｌ；ｚｅｂｒａｆｉｓｈ
目前，酒精性脂肪肝已成为国内外研究的一大热点。酒精性脂肪肝是过量酒精摄入后出现的一个早期的和可逆的临床阶段，可进展成为酒精性肝炎、肝硬化

Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａｚｅｂｒａｆｉｓｈｍｏｄｅｌｏｆｈｅｐａｔｉｃｓｔｅａｔｏｓｉｓｉｎｄｕｃｅｄｂｙａｃｕｔｅａｌｃｏｈｏｌｅｘｐｏｓｕｒｅａｓａｍｏｄｅｌｓｙｓｔｅｍｔｈａｔｗｉｌｌｂｅ
ＭｅｔｈｏｄｓＡｔ５ｄａｙｓｐｏｓｔｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ（ｄｐｆ），２８８ｊｕｖｅｎｉｌｅｕｓｅｆｕｌｆｏｒｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｓｏｆｄｉｓｅａｓｅｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓａｎｄｈｉｇｈ－ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔｓｃｒｅｅｎｉｎｇｓ．ｚｅｂｒａｆｉｓｈ（ｗｉｌｄ－ｔｙｐｅｓｔｒａｉｎＡＢ）ｗｉｔｈｎｏｒｍａｌｌｉｖｅｒｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｗｅｒｅｓｅｌｅｃｔｅｄａｎｄｒａｎｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｆｏｕｒｇｒｏｕｐｓ（ｎ＝７２ｅａｃｈ）ｆｏｒｃｕｌｔｕｒｉｎｇｉｎｗａｔｅｒａｎｄＨａｎｋ ′ ｓｂａｌａｎｃｅｄｓａｌｔｓｏｌｕｔｉｏｎａｌｏｎｅ（ｃｏｎｔｒｏｌｓ）ｏｒｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄｗｉｔｈｅｔｈａｎｏｌａｔ２．０％，２．５％ａｎｄ３．０％ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ．Ａｔ４，２４ａｎｄ３２ｈｏｆｃｕｌｔｕｒｉｎｇ，ｔｈｅｐｈｙｓｉｃａｌａｃｔｉｖｉｔｙ（ｓｗｉｍｍｉｎｇ，ｃｉｒｃｌｉｎｇ）ｗａｓｏｂｓｅｒｖｅｄ，ｔｈｅｓｕｒｖｉｖａｌｒａｔｅｗａｓｒｅｃｏｒｄｅｄ，ａｎｄｔｈｅｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙｗａｓａｓｓｅｓｓｅｄｂｙｗｈｏｌｅ－ｍｏｕｎｔａｎｄｌｉｖｅｒｓｅｃｔｉｏｎｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ．ＯｉｌＲｅｄＯｓｔａｉｎｉｎｇｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｐｅｒｃｅｎｔｏｆｓｔｅａｔｏｓｉｓａｎｄｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｆｅａｔｕｒｅｓｗｅｒｅａｓｓｅｓｓｅｄｂｙｈｅｍａｔｏｘｙｌｉｎ－ｅｏｓｉｎｓｔａｉｎｉｎｇ．Ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｂｅｔｗｅｅｎｔｗｏｇｒｏｕｐｓｗｅｒｅａｓｓｅｓｓｅｄｂｙｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔｓａｍｐｌｅｓｔ－ｔｅｓｔ．ＲｅｓｕｌｔｓＳｔａｒｔｉｎｇａｔ２４ｈｏｆｅｔｈａｎｏｌｅｘｐｏｓｕｒｅ，ｔｈｅｓｕｒｖｉｖａｌｒａｔｅｓｓｈｏｗｅｄａｄｅｃｒｅａｓｉｎｇｔｒｅｎｄｔｈａｔｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｅｄｔｏｉｎｃｒｅａｓｅｄａｌｃｏｈｏｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，ｓｏｔｈａｔｂｙ３２ｈｏｆｅｘｐｏｓｕｒｅｔｈｅｒｅｗｅｒｅｒｅｍａｒｋａｂｌｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓａｍｏｎｇｔｈｅｔｈｒｅｅａｌｃｏｈｏｌ－ｔｒｅａｔｅｄｇｒｏｕｐｓ：２．０％ｅｔｈａｎｏｌ：１００％ｓｕｒｖｉｖａｌ；２．５％ｅｔｈａｎｏｌ：（９１．２１± １．６１）％ｓｕｒｖｉｖａｌ；ａｎｄ３．０％ｅｔｈａｎｏｌ：０％ｓｕｒｖｉｖａｌ．Ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓｉｎｌｉｖｅｒｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙａｎｄｐｈｙｓｉｃａｌａｃｔｉｖｉｔｙｗｅｒｅａｌｓｏｏｂｓｅｒｖｅｄａｔｔｈｅ２４ｈｔｉｍｅｐｏｉｎｔａｎｄｓｈｏｗｅｄｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｃｅ：２．０％ｅｔｈａｎｏｌ：ｎｏｒｍａｌｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ，ｉｎｃｒｅａｓｅｄａｃｔｉｖｉｔｙ，ａｂｎｏｒｍａｌｃｉｒｃｌｉｎｇ；２．５％ｅｔｈａｎｏｌ：ｓｏｍｅｄｅｆｏｒｍｉｔｉｅｓ；ａｎｄ３．０％ｅｔｈａｎｏｌ：ｂｅｎｔｓｐｉｎａｌｃｏｒｄ，ｐｅｒｉｃａｒｄｉａｌａｎｄｙｏｌｋｓａｃｅｄｅｍａ，ｓｔａｔｉｏｎａｒｙｂｅｈａｖｉｏｒ．Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｓｔｅａｔｏｓｉｓｗａｓｏｂｓｅｒｖｅｄｉｎｔｈｅ２．０％ｅｔｈａｎｏｌｇｒｏｕｐａｔ３２ｈｏｆｅｘｐｏｓｕｒｅ，ｂｕｔｎｏｔａｔ２４ｈ，ａｓｅｖｉｄｅｎｃｅｄｂｙｔｈｅｐｅｒｃｅｎｔｏｆｓｔｅａｔｏｓｉｓ［（７１．２５± ０．１５）％ｖｓ．ｃｏｎｔｒｏｌｓ：（３１．２５± ０．０５）％，Ｐ＝０．００２］ａｎｄｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｆｅａｔｕｒｅｓ（ｓｗｏｌｌｅｎｓｉｚｅ，ｌｉｐｉｄｄｒｏｐｌｅｔ－ｉｎｄｕｃｅｄｎｕｃｌｅｕｓｄｉｓｐｌａｃｅｍｅｎｔ）．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＡｍｏｄｅｌｏｆａｃｕｔｅａｌｃｏｈｏｌ－ｉｎｄｕｃｅｄｈｅｐａｔｉｃｓｔｅａｔｏｓｉｓｗａｓｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｌｙｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｉｎ５ｄｐｆｚｅｂｒａｆｉｓｈｂｙｔｒｅａｔｉｎｇｗｉｔｈ２．０％ａｌｃｏｈｏｌｆｏｒ３２ｈ．Ｔｈｉｓｍｏｄｅｌｍａｙｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｕｓｅｆｕｌｔｏｏｌｆｏｒｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｎｇｔｈｅｄｉｓｅａｓｅｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓａｎｄｐｅｒｆｏｒｍｉｎｇｈｉｇｈ－ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔｓｃｒｅｅｎｉｎｇｓｏｆｐｏｔｅｎｔｉａｌｌｙｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｄｒｕｇｓ．

急性酒精性脂肪肝斑马鱼模型的建立 戴文聪

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