血凝仪原理概述
自动化凝血仪的检测
二、检测试剂的选择及使用
1使用仪器厂家推荐使用的配套试剂，校准品和质 控物。
2试剂应该严格按照厂家的说明书储存，并在有效 期内使用。
3根据检测目的选用敏感性和特异性高的试剂。
分析中的质量控制
㈠、严格按照操作规程进行规范化操作， 使用半自动血凝仪时，吸样管的排液端 贴在反应杯内壁加试剂，以避免产生气 泡。
常纤维蛋白原病，其中更多的见于获得性纤维蛋白原血症，如
肝脏疾病、DIC晚期等；② 应用肝素或肝素类物质存在３）
FDP增多等。
⑵ TT可作为溶栓治疗监视的指标
４、血浆纤维蛋白原的测定
血浆纤维蛋白原的测定
㈠原理：①clauss法（凝血酶法）在待检稀释的血浆中加 入足量的凝血酶，使血浆中的Fg转变成以Fg含量一定的国 际标准品为参比血浆测定其对应的凝固时间，制作标准曲 线，通过标准曲线可以得到待检血浆中Fg含量。 ②PT衍生法：基于PT反应曲线差值来确定Fg含量的方 法。
质量控制
分析前 的质量控制
分析中 的质量控制Fra bibliotek分析后 的质量控制
分析前的质量控制
一、 血液标本的采集、运送与处理 ㈠ 标本采集前：要求患者处于平静与空腹状态，避免凝血因子、血小 板和纤维成分的激活。采血前一周内不可服用对检查有影响的药物如 阿司匹林等。 ㈡ 采血工具：提倡使用真空采血管收集标本，以减少血小板和凝血因 子的活化。 ㈢ 标本采集： ①采血人员应技术娴熟，“一针见血”，以防组织损伤，外源性凝 血 因子进入针管。 ②止血带应尽可能扎得松些，时间不超过 1min。 ③取血时，回抽的速度要缓慢并且均匀，使用血液平稳的进入，防 止气泡产生。 ④采血量视检测项目需要而定，但必须保证血量与抗凝剂量比例合 适，然后迅速将血液与抗凝剂轻轻的颠倒混匀5——8次，避免用 力震荡而破坏凝血蛋白。 ⑤标本避免出现凝块及溶血。 ㈣ 标本的运送和保存：标本采集后应及时送检，在室温下运送，严防 剧烈震荡、日光直射和污染；标本应分离血浆置于-20度冰箱保存。 ㈤标本的分离：在室温下离心。
血凝仪的工作原理
血凝仪的工作原理血凝仪是一种用于检测血液凝固能力的仪器，它基于一系列化学反应，测定了血浆中凝血因子的活性和凝血时间，用于诊断各种血液疾病、手术前后的血液凝固情况以及药物治疗效果等方面。
本文将介绍血凝仪的工作原理，包括血液凝固的机制、血凝仪的主要部分和各部分的功能及工作原理。
一、血液凝固的机制血液凝固是机体的一种非常重要的防御机制，它能够防止血液在血管中流动过多，阻止出血，帮助伤口愈合。
血液凝固是由血中一系列蛋白质发生复杂的化学反应，最终形成血凝块的过程。
这个过程主要由三个步骤组成：血小板聚集、凝血酶生成和纤维蛋白形成。
以下将分别介绍每个步骤。
1. 血小板聚集血小板是血液中不可缺少的成分之一，它们的主要功能是在出血时聚集、黏附在伤口上，形成血小板栓，以阻止出血。
当血管受到损伤时，血小板上的受体会被激活，使它们能够相互黏附在一起，形成一个血小板聚集体。
2. 凝血酶生成凝血酶是一个由多种凝血因子参与的酶复合物，它的生成能够促使血液在伤口处凝结形成血凝块。
凝血酶的生成需要多种凝血因子，包括因子Ⅱ、因子Ⅴ、因子Ⅶ、因子Ⅹ等，它们在某些条件下被激活后会相互作用，形成一个由多种蛋白质组成的凝血酶复合物。
3. 纤维蛋白形成这是血液凝固的最后一个步骤，也是最重要的步骤。
它涉及到血浆中的另一种重要蛋白质——纤维蛋白。
一旦凝血酶形成，它会作用于纤维蛋白原，使其转变为可溶性的纤维蛋白单体。
逐渐有越来越多的纤维蛋白原被凝血酶分解，在此过程中，纤维蛋白单体会相互缠绕在一起，形成一条纤维蛋白长链，最终交织在一起形成坚韧的血凝块。
二、血凝仪的主要部分血凝仪是由多个部分组成的，这些部分分别负责不同的功能，共同完成血液凝固的检测任务。
以下是血凝仪的主要部分：1. 样本添加系统这是血凝仪最重要的部分之一，它负责将需要检测的血样加入到血凝仪中。
血凝仪多采用血浆进行检测。
在样本加入系统中，从血浆中提取出凝血时间检测所需的成分，然后将其加到试管中，加入试剂，开始触发化学反应。
血凝仪的工作原理
对第二代的传统的光学原理血凝仪容易 受到标本的黄疸、脂血、乳糜血等的影响。
对第三代的双磁路磁珠法原理的血凝仪 在现今社会血黏度增高的趋势下也非常容 易受到标本黏度变化的影响。
第四代光电磁原理由此出现。
第一代，电流法：
即是将待检样品作为电路的一部分，由 于纤维蛋白具有导电性，可利用电流的断 与否来判断纤维蛋白的形成与否，即判断 凝固终点。具体表现为：将两电极插入待 检样品，其中一个电极可以上下运动。当 两个电极都在血浆中的时候，电路是连通 的；当其中一个电极向上运动离开血浆时， 电路时断开的。往血浆中加入激活剂，血 浆中纤维蛋白形成，此时可运动电极向上 运动时，可勾起纤维蛋白丝。由于纤维蛋 白丝是导电的，故此电路仍可连通，此时
第二代，光学法：
光学法血凝仪是根据血浆凝固过程中浊度的变化来测定凝血 功能。根据仪器不同的光学测量原理，又可分为散射比浊法和透射 比浊法两类。（1）散射比浊法：根据待检样品在凝固过程中散射 光的变化来确定检测终点的。在该方法中检测通道的单色光源与光 探测器呈90度直角，当向样品中加入凝血激活剂后，随样品中纤维 蛋白凝块的形成过程，样品的散射光逐步增加，当样品完全凝固以 后，散射光的强度不在变化，通常是把凝固的起始点作为0%，凝固 终点作为100%,把50%作为凝固时间。光探测器接收这一光学的变 化，将其转化为电信号，经过放大再被传送到监测器上进行处理， 描出凝固曲线。
三、抗凝治疗的监测；
四、口服抗凝剂治疗（OAT）的监测：
PT实验是最常用的检测，用于监测由口服抗凝药物 （香豆素/华法令之类）引起的维生素K依赖性因子II、 VII和X功能性水平变化。
血浆凝血酶原时间比率（PTR）1.5-2.0
国际标准化比率（INR）2.0-3.0
床边试验型血液凝固分析仪原理及结构
床边试验型血液凝固分析仪原理及结构床旁血凝分析仪也称全血凝固分析仪，是自动化血凝分析取得的又一进展。
一、检测原理全自动检测方法一般时基于机械（STAGO）或光学（ACL、MLA、STAGO、Sysmex）检测来对凝结的形成进行监测。
而床旁检测（point of care test，POCT）多采用如下原理：用惰性顺磁铁氧化颗粒（paramagnetic Iron oxideparticles，PIOP）均匀分布并结合可产生凝固或纤溶反应的干试剂中，PIOP可在一固定垂直磁场作用下移动。
当血标本通过毛细管作用进入反应层中，可溶解干试剂，并发生相应的凝固和纤溶反应，同时与试剂结合的PIOP在反应过程中通过其移动或摆动幅度的大小而提供纤维蛋白形成或溶解的动力学特征。
PIOP摆动所产生的光量变化可通过光电检测器记录。
然后通过信号放大、转换、计算而得到检测结果。
具体而言，INRatio（英锐®）检测的是纤维蛋白原转化为纤维蛋白的凝血过程发生时血液样本电阻发生的变化情况。
CoaguChek则基于交变磁场下测试条上铁颗粒在样本中的移动由于血液的凝结而终止的原理。
ProTimeMicrocoagulation System将血液来回泵送直到血液凝结，当血液凝结形成时，血液的流动速度渐进变慢。
本节以InvernessMedical公司的HemoSens英锐®凝血分析仪介绍阻抗法原理，阻抗是对抗交流电电流的阻力（也称为电导），英锐监测仪测量的是血液阻抗的变化。
仪器中有一个加热器件，可使样品保持在37℃。
监测仪可将检测条加热到血液凝固的最佳温度。
监测仪通过复杂的数学运算可测算出3个不同通道中血凝曲线的拐点，这一点可用图-1 带X轴和Y轴的血凝曲线轮廓图进行阐释。
该曲线显示了检测条中血液凝固过程中阻抗的变化。
仪器运算所挑选的曲线中的点是血液凝固时间即PT的关键点。
在A点，检测条的小室中是干燥的，也无血液进入，因此阻抗非常之大，在B点，小室中注满了血液，因此导电性很高。
BE全自动血凝仪检测原理
BE全自动血凝仪检测原理检测方法：凝固法、发色底物法、免疫法等（具体可用方法数由仪器型号决定）检测原理：光电磁原理常规四项（PT、APTT、TT、FIB）检测方法：凝固法仪器开机步骤检查蒸馏水量、废液量。
依次打开稳压电源、打印机电源、仪器电源、主机电源、终端计算机电源。
仪器自检通过后，无异常提示，进入升温状态。
达到温度后仪器提示可以进行工作。
试剂准备步骤（Biopool试剂）PT：干品，用4ml蒸馏水溶解，室温放置10-15分钟。
APTT：CaCl2，液体，直接预温使用；APTT试剂，液体，直接预温使用。
TT：干品，用4ml蒸馏水溶解，室温放置10-15分钟。
FIB：Buffer（咪唑缓冲液），液体，用于血浆稀释。
FIB试剂，干品，用2ml蒸馏水溶解，室温放置10-15分钟。
Kaolin试剂，液体，使用前须充分摇匀。
注：以上必须严格按照试剂说明书的要求进行溶解或稀释。
将各种试剂放置于设置好的试剂盘相应位置。
病人标本准备步骤用血凝专用硅化真空管采集标本（枸缘酸钠与待测血液1:9混匀抗凝）。
1500转离心10分钟。
检测标本将离心好的标本试管编号，放于样本托架上。
在“Plasma Prep”菜单中，在“ID No.”栏手工输入标本名称或病人名称，在“Test”栏中输入要检测的项目，然后回车确认。
按“ESC”键退出，光标回到主菜单。
再次确认试剂位置及试剂量及标本位置。
按“F2”开始实验。
检测结果A．检测结果查看，在“Report”菜单中可以查找和处理数据，光标移到Report菜单回车确认，选择“R esult Data”进行历史结果查看。
B．检测结果处理1．设置好自动传输模式后，检测结果将自动传输到终端计算机上。
2．结果经审核确认后，打印报告单。
注意事项1．确保标本采集时抗凝比例正确及充分混匀。
2．血浆不要放置超过４小时，否则对结果有影响。
3．试剂杯注意定时清洁。
4．Kaolin试剂使用前注意摇匀。
FIB定标曲线绘制由于国际上没有标准品或者统一的标准试验方法的原因，并非所有的项目都能定标。
自动化血液凝固分析仪原理及结构
自动化血液凝固分析仪原理及结构随着基础医学、生物化学、免疫学、分子生物学以及临床医学研究的不断深入，血栓与止血这一门新兴的边缘学科飞速发展。
凝血检验方法和临床应用都发生了根本性变化，相关检验得到了广泛应用并在临床疾病诊治中发挥着越来越大的作用。
作为一门独立的检验诊断学科，血栓与止血检验常用于出血性疾病诊断与疗效观察、围术期、弥散性血管内凝血（DIC）、血栓前状态、器官移植排斥反应、抗凝和溶栓治疗等。
血液凝固分析仪（blood coaguLation analyzer），简称血凝仪，是血栓与止血检验中最基本的仪器。
目前，血栓与止血的检测从传统手工方法发展到半自动和全自动血凝仪，从单一凝固法发展到免疫法和生物化学法，操作简便，检测快速，结果准确可靠。
血凝仪发展简史：1910年，Kottman发明了世界上最早的血凝仪，以测定血液凝固时黏度的变化来反映血浆凝固时间。
1922年，Kugelmass用浊度计透射光的变化来反映血浆凝固时间。
1950年，Schnitger和Gross发明了电流法血凝仪。
20世纪60年代，机械法血凝仪得以开发。
20世纪70年代后，因机械、电子工业的发展，使各种类型的全自动血凝仪先后问世；20世纪80年代，因发色底物的出现并应用于血液凝固的检测，使全自动血凝仪除了可进行一般筛选试验以外，还可进行凝血、抗凝、纤维蛋白溶解系统单个因子检测。
20世纪80年代末，双磁路磁珠法发明给血栓与止血的检测带来了新概念，因其设计原理独特，免除了影响光学法检测的一些因素。
20世纪90年代，全自动血凝仪免疫通道开发又为血栓与止血的检测提供了新的手段。
一、检测原理早期的电流法利用纤维蛋白原无导电性而纤维蛋白具有导电性的特点，将待测标本作为电路的一部分，根据凝血过程中电路电流的变化来判断纤维蛋白的形成。
因电流法的不可靠性及单一性，很快被更灵敏、更易扩展的光学法所淘汰。
目前，常用血凝仪检测方法主要有凝固法、发色底物法、免疫法、胶乳凝集法等。
全自动血凝仪检测原理及临床应用
全自动血凝仪检测原理及临床应用随着医学科学的发展，及时诊断出血、血栓性疾病，观察疗效，分析抗凝药物剂量等显得越来越迫切，而传统的手工方法和单一的凝固定性检查已经远远不能满足临床要求，全自动血凝仪的出现和应用，使得止血和血栓项目检查变得简便、准确、可靠、极大地满足了临床诊疗的需要。
1 检测的基本方法目前血凝仪大多采用生物学方法，可分成三类：电流法、粘度法、光学法。
1.1 电流法：该法是利用血浆标本纤维蛋白具有的导电性，将电极插入标本中，利用两电极之间的电流的通、断来判断纤维蛋白是否形成，依此确定凝固终点。
1.2 粘度法：又称磁珠法，仪器的检测部分有独立的线圈产生所需的电磁场，检测时在待测标本中加入小磁珠，利用变化的磁场使小磁珠产生运动，随着血浆的凝固，血浆的粘稠度征集增加，小磁珠摆幅逐渐减少，仪器内的电磁传感器，测定小磁珠的不同震荡幅度，计算出血浆的凝固时间。
1.3 光学法：该法是目前血凝仪使用最多的一种检测方法。
当血浆在样品杯中逐渐凝固时，纤维蛋白原转变成纤维蛋白，其理学性状也随着变化；当一束光通过样品杯时，其透射光和散光的强度也会随之变化。
2 检测的基本原理\r比浊法以血浆中的被检测物质作为抗原，抗原与试剂中的抗体混合时会发生特异性结合反应，产生复合物颗粒，依此来测定被检测物质含量。
其原理是：抗原量同抗体特异性结合反应达到某一程度与所需的时间之间存在一定的数量关系，在检测过程中，随着待检物质与相应抗体结合，其复合物颗粒增多单色光通过时，透过的或反射的光强度就会发生一定的变化，仪器的电路部分自动算出单位时间内吸光度的变化量，再根据标准曲线推算出待检\r物质的含量。
使用光学法检测时，一般是将预温好的血浆标本和试剂快速混合，在混合瞬间吸光度非常弱，随着样品和试剂混合物中的纤维蛋白凝块的形成，反应杯内标本吸光度逐渐增强，当标本凝固完全后，吸光度值就稳定下来；仪器在血浆和试剂混合的瞬间，也就是吸光度最弱时，设定吸光度值A=0％，在血浆和样品凝固完全后，吸光度最强时，设定吸光度值A=100％；在0％-100％吸光度变化之间，仪器检测通道单位时间内分别采集多个数据，这样吸光度的变化值可做出一条曲线，仪器根据实验项目需要自动选取曲线上的一个点所对应的时间为凝血时间；仪器内的计算电路对做出的曲线求二次微分，二次微分为零的点，就是凝固终点；因为凝血是一个酶促的加速过程，到凝固终点时，反应速度和加速度都达到最大，此时凝固曲线的二次微分为零。
血凝仪简介
血凝仪简介血凝仪，即血液凝固分析仪，是对血栓和止血进行实验室检查的仪器。
止血与血栓分子标志物的检测指标与临床各种疾患有着密切联系，如动脉粥样硬化，心脑血管疾病、糖尿病、动静脉血栓形成，血栓闭塞性脉管炎、肺栓塞、妊娠高血压综合症、弥散性血管内凝血、溶血尿毒综合症、慢性阻塞性肺炎等。
中医药关于活血化瘀的理论与治疗工作研究也都涉及止血与血栓问题。
使用血凝仪对血栓和止血进行实验室检查成为必要。
血凝仪分为全自动与半自动两类。
一、简要：目前国内外各生产厂家生产的半自动血凝仪都是基于凝固法对血液凝固过程进行测量的。
血液凝固是一系列凝血因子连锁性酶反应的结果。
血液中的凝血因子以无活性酶原形式存在，当某一凝血因子被激活后，可使许多凝血因子按一定的次序先后被激活，彼此之间有复杂的催化作用，被称为“瀑布样学说”。
这种“瀑布样学说”产生的激变在血液的生物物理特性上表现为，电阻增大（电流法）粘度增强（磁珠法），浊度上升（光学法）。
由于电流法测量可靠性差，因此为磁珠法和光学法所替代。
利用血凝仪进行血栓与止血的实验室检查，可为出血性和血栓性疾病的诊断、溶栓以及抗凝治疗的监测及疗效观察提供了有价值的指标。
随着科学技术的日新月异，血栓与止血的检测从传统的手工方法发展到全自动血凝仪，从单一的凝固法发展到免疫法和生物化学法，血栓与止血的检测也因此变得简便、迅速、准确、可靠。
二、基本原理：目前可开展的血栓/止血成份检测方法主要有凝固法、底物显色法、免疫法、乳胶凝集法等。
在表中可注意到，在血栓/止血检验中最常用的凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、纤维蛋白原（FIB）、凝血酶时间（TT）、内源凝血因子、外源凝血因子、高分子量肝素、低分子量肝素、蛋白C、蛋白S等均可用凝固法测量。
所以目前半自动血凝仪基本上都是以凝固法测量为主，而在全自动血凝仪中也一定有凝固法测量。
凝固法中又可分为光学法和磁珠法两类。
由于光学法几乎可涵盖各种检测方法，为了降低仪器制造成本，全自动血凝仪以光学法居多。
ACL系列血凝仪检测原理介绍及血栓止血临床基础
Activator
Ellagic acid, silica etc. Phospholipid
PL
X IX VIII VII V IV
Blood Sampling Trisodium Citrate
CaCl2
XII XI IX VIII Ca2+, PL
IX VIII VII V
without
without
PT-INR 口服抗凝药监测的重要指标
据了解PT存在的主要问题在于INR! 由于： INR = PT Sample Time MNPT
ISI
所以INR不好可能原因有： 病人PT或PT质控时间不对（可以通过以上几点检查） 正常人PT时间（MNPT）不对 试剂对应仪器的ISI值不对
不适用INR的三种情况包括
③
血管収縮 XII因子 内因系 組織因子 纤维蛋白 凝固系 活性化 外因系
内皮細胞
血小板
血管収縮
血管収縮 ②
血小板
凝固因子激活二次血栓形成 ④
XII因子 ｔ－PA 纤维蛋白原 線溶系 活性化 外因系
粘着 凝集
一次血栓 放出
内因系
血小板激活一次血栓形成
線溶系统激活血栓溶解
血液中包含的凝血因子
血凝瀑布学说
免疫比浊法： （透射光比浊检测）
波长：405nm (ACL200以上仪器)
凝 固 法 发色底物和 免疫比浊法
ACL 00/10000检测原理
离心式液体分配 系统：加入样品和 试剂后，反应盘 1200rpm旋转，使 其在瞬间充分混匀 ，结果准确、精密 度高；
ACL 00/10000检测原理
外源性凝血途径与 PT
第三章——血凝仪检测原理
离心速度3000r/min 10min(获得乏血小板 血浆) 低温损伤血小板，并可导致7,11因子活化， 使PT/APTT缩短
血凝仪检测原理
检测方法
仪器连续记录凝血过程中光、电、机械运动的变化
凝固法（应用最多） 光学法
电流法
磁珠法 免疫化学法 生渐变成纤维蛋白时 ，入射光发生散射，测定散射光（ 散射比浊）或透射光（透射比浊） 发生变化，即可测定血浆凝固时间
受标本黄疸、乳糜、溶血、高脂 血症等因素干扰
粘度法（磁珠法）
血浆凝固时粘度增加，使在磁场 中运动的小磁珠运动强度减弱， 由此判定血浆凝固终点。
不受标本黄疸、乳糜、溶血、 高脂血症等因素干扰
电流法
纤维蛋白具有导电性能， 利用纤维蛋白形成瞬间电 路联通特点判断凝固终点 。
质量控制
抗凝管材质为硅化玻璃管或者塑料试管（以 减少血小板或凝血因子活化）
血凝仪的基本原理
血凝仪的基本原理
血凝仪是用来对血栓和止血进行实验室检查的医疗器械，国内血凝仪厂家纷繁，血凝仪市场也是欣欣向荣。
一般来说，血凝仪有半自动和全自动之分，但不管是半自动还是全自动，检测血凝的基本原理还是不会变的。
目前可开展的血栓/止血成份检测方法主要有凝固法、底物显色法、免疫法、乳胶凝集法等。
在表中可注意到，在血栓/止血检验中最常用的凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、纤维蛋白原（FIB）、凝血酶时间（TT）、内源凝血因子、外源凝血因子、高分子量肝素、低分子量肝素、蛋白C、蛋白S等均可用凝固法测量。
所以目前半自动血凝仪基本上都是以凝固法测量为主，而在全自动血凝仪中也一定有凝固法测量。
凝固法中又可分为光学法和磁珠法两类。
由于光学法几乎可涵盖各种检测方法，为了降低仪器制造成本，全自动血凝仪以光学法居多。
但也有少数高级全自动血凝仪中凝固法测量采用无样品干扰的双磁路磁珠法，而其它测量采用光学法，并可同时进行检测。
目前市售的半自动血凝仪主要由样品、试剂预温槽、加样器、检测系统（光学、磁场）及微机组成。
有的半自动仪器还配备了发色检测通道，使该类仪器同时具备了检测抗凝及纤维蛋白溶解系统活性的功能。
针对光学式半自动血凝仪受人为的因素影响多、重复性较差等缺陷，仪器中应有自动计时装置，以告知预温时间和最佳试剂添加时间；在测试位添加了试剂感应器，后者感应从移液器针头滴下的试剂后自动振动，使反应过程中血浆与试剂得以很好地混合；此外，该类仪器在测试杯顶部安装了移液器导板，在添加试剂时由导板来固定移液器针头，从而保证了每次均可以在固定的最佳的角度添加试剂并可以防止气泡产生。
这一系列改进，提高了光学式半自动血凝仪检测的准确性。
血凝仪检测原理及应用
38
PT、APTT、TT 联合分析一
39
PT、APTT、TT 联合分析二
OAT
40
PT、APTT、TT 联合分析三
凝血因子FVIII或IX或XI或XII缺陷
41
纤溶过程（纤溶系统）
FIB （纤维蛋白原）
纤维蛋白 (血栓）
激活剂 抑制物
纤溶酶
纤溶酶原
抑制物 (抗纤溶酶) FDPs FSPs (包括D-D)
6
凝子因子参与的凝血途径
内源性凝血途径：Ⅷ，Ⅸ，Ⅺ，Ⅻ 外源性凝血途径：Ⅲ，Ⅶ 共同凝血途径：Ⅰ，Ⅱ，Ⅴ，Ⅹ，ⅩⅢ
7
8
传统的凝血途径的修改
外源性的Ⅶ因子在组织因子的结合下既可激活Ⅹ因
子，又可激活内源性的第Ⅸ因子，从而打破了内源 与外源的界限。 Ⅻ因子缺乏时并不引起出血，这说明第Ⅺ因子并不 一定只被Ⅻ因子激活，现已证明Ⅺ本身具有自身激 活作用。 凝血酶（Ⅱ因子）也可激活Ⅺ因子，原来认为只有 Ⅻ因子才能激活Ⅺ因子。 TF被激活并与Ⅶ因子结合后会被一种组织因子途 径抑制物（TFPI）所抑制；后者已成为一种新型 抗凝剂。
2
（二） DIC筛选试验组合： PT、APTT、TT、Fib-C、D-二聚体、FDP、 AT-Ⅲ （三）血友病组合： PT、APTT、TT、Ⅷ:C、Ⅸ:C、Ⅷ抑制物检查 （四） 凝血因子全套检查： PT、APTT、TT、Fib-C、Ⅱ:C、Ⅶ:C、Ⅷ：C、 Ⅸ:C、Ⅹ:C、Ⅺ：C
3
（五）药物性出血的监测
1. 延长 （1）见于先天性外源凝血因子（Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、 Ⅹ）缺乏症和低/无FIB血症，凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、 Ⅹ轻微减少，PT的延长幅度也不大，Ⅱ因子减少病人，其 PT经常在正常范围； （2）口服抗凝药，如华法令等； （3）维生素K缺乏症； （4）DIC及原发性纤溶症； （5）肝脏疾病； （6）血中有抗凝物质（狼疮抗凝物、抗磷脂抗体、肝素、 FDP以及抗Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、 Ⅹ 的抗体）。
血凝仪与凝血弹性描记仪
纤 溶 期
参数写法与参考值
方法
自然 全血 全血 复钙 血浆 复钙 R(r) min K(k) min TMA(m) MA(ma) min 35～45 25～35 20～30 mm 45～55 45～55 50～65 80～130 80～135 105～180 EMX(mε)
二、凝血弹性图仪的历史：
1948年由德国人Harter发明 1980年代，开始广泛用于临床指导术中输血取得 了良好效果，现已成为当今围术期监测凝血功能 的最重要指标。
1995-1996年，开始在心脏外科使用。目前以TEG 为主要监测手段的体外循环术中凝血监测方案已 经在世界上40多个国家使用。
2004年，抗血小板药物疗效监测的血小板图试验— PlateletMapping上市，为临床带来了快速、准确 的监测血小板聚集功能的技术。
（过量）激活剂
3. 酶抑制物的检测： 酶抑制物 +（过量、定量）酶 ↓ 水解 （过量）产色物质-底物 +（剩余）酶→→产色物质（显色）
（三）免疫学方法
用于检测凝血因子、酶抑制物的含量。 1．透射比浊法 2．散射比浊法 3．胶乳比浊法
抗原 + 抗体 → 抗原抗体复合物 胶乳颗粒 浊度增加
散射光、吸光度增加
（三）α角度
1. 从血凝块形成点至描记图最大曲线弧度作切线与 水平线的夹角，正常为50°~ 60° 。
2. α角度与K时间密切相关，影响因素相同。
3. α角度不受极其低凝状态的影响，较K时间更全面
（四）A（A30）
1、是任一时刻曲线两点间的扫描宽度，是血凝块 强度或弹性函数，A值用单位mm来计量；
BE全自动血凝仪检测原理
BE全自动血凝仪检测原理检测方法：凝固法、发色底物法、免疫法等（具体可用方法数由仪器型号决定）检测原理：光电磁原理常规四项（PT、APTT、TT、FIB）检测方法：凝固法仪器开机步骤检查蒸馏水量、废液量。
依次打开稳压电源、打印机电源、仪器电源、主机电源、终端计算机电源。
仪器自检通过后，无异常提示，进入升温状态。
达到温度后仪器提示可以进行工作。
试剂准备步骤（Biopool试剂）PT：干品，用4ml蒸馏水溶解，室温放置10-15分钟。
APTT：CaCl2，液体，直接预温使用；APTT试剂，液体，直接预温使用。
TT：干品，用4ml蒸馏水溶解，室温放置10-15分钟。
FIB：Buffer（咪唑缓冲液），液体，用于血浆稀释。
FIB试剂，干品，用2ml蒸馏水溶解，室温放置10-15分钟。
Kaolin试剂，液体，使用前须充分摇匀。
注：以上必须严格按照试剂说明书的要求进行溶解或稀释。
将各种试剂放置于设置好的试剂盘相应位置。
病人标本准备步骤用血凝专用硅化真空管采集标本（枸缘酸钠与待测血液1:9混匀抗凝）。
1500转离心10分钟。
检测标本将离心好的标本试管编号，放于样本托架上。
在“PlasmaPrep”菜单中，在“ID No.”栏手工输入标本名称或病人名称，在“Test”栏中输入要检测的项目，然后回车确认。
按“ESC”键退出，光标回到主菜单。
再次确认试剂位置及试剂量及标本位置。
按“F2”开始实验。
检测结果A．检测结果查看，在“Report”菜单中可以查找和处理数据，光标移到Rep ort菜单回车确认，选择“R esultDa ta”进行历史结果查看。
B．检测结果处理1．设置好自动传输模式后，检测结果将自动传输到终端计算机上。
2．结果经审核确认后，打印报告单。
注意事项1．确保标本采集时抗凝比例正确及充分混匀。
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血凝仪原理概述
止血与血栓分子标志物的检测指标与临床各种疾患有着密切联系，如动脉粥样硬化，心脑血管疾病、糖尿病、弥散性血管内凝血、消息脉血栓形成，溶血尿毒综合症、血栓闭塞性脉管炎、肺栓塞、妊娠高血压综合症、慢性阻塞性肺炎等。
中医药关于活血化瘀的理论与治疗工作研究也都涉及止血与血栓题目。
为使临床正确运用这些指标进行诊断，卫生部印发了《关于出凝血时间检验方法操纵规程》，对活化部分凝血活酶时间（APTT）和血浆凝血活酶时间（PT）等操纵方法进行了具体规范。
因此使用血液凝固分析仪（以下简称血凝仪）对血栓和止血进行实验室检查成为必要。
血凝仪分为全自动与半自动两类。
为结合在省内大多数医院的实际需要，本文仅涉及半自动血凝仪工作原理并对德国BE公司的半自动血凝仪做扼要先容。
目前国内外各生产厂家生产的半自动血凝仪都是基于凝固法对血液凝固过程进行丈量的。
血液凝固是一系列凝血因子连锁性酶反应的结果。
血液中的凝血因子以无活性酶原形式存在，当某一凝血因子被激活后，可使很多凝血因子按一定的次序先后被激活，彼此之间有复杂的催化作用，被称为“瀑布样学说”。
这种“瀑布样学说”产生的激变在血液的生物物理特性上表现为，电阻增大（电流法）粘度增强（磁珠法），浊度上升（光学法）。
由于电流法丈量可靠性差，因此为磁珠法和光学法所替换。
1、光学法（比浊法）
光学法血凝仪是根据血浆凝固过程中浊度的变化来测定凝血功能。
根据仪器不同的光学丈量原理，又可分为散射比浊法和透射比浊法两类。
（1）散射比浊法：散射比浊法是根据待验样品在凝固过程中散射光的变化来确定检测终点的。
在该方法中检测通道的单色光源与光探测器呈90O直角，当向样品中加进凝血激活剂后，随样品中纤维蛋白凝块的形成过程，样品的散射光强度逐步增加。
当样品完全凝固以后，散射光的强度不再变化，通常是把凝固的起始点作为0%，凝固终点作为100%，把50%作为凝固时间。
光探测器接收这一光学的变化，将其转化为电信号，经过放大再被传送到监测器上进行处理，描出凝固曲线。
（2）透射比浊法：透射比浊法，是根据待测样品在凝固过程中吸光度变化来确定凝固终点的、与散射比浊法不同的是该方法的光路同一般的比色法一样呈直线安排：来自光源的光线经过处理后变成平行光，透过待测样品后照射到光电管变成电信号，经过放大后监测处理。
当向样品中加进凝血激活剂后，开始的吸光度非常弱，随着反应管中纤维蛋白凝块的形成，标本吸光度也逐渐增强，当凝块完全形成后，吸光度趋于恒定。
血凝仪可以自动描绘吸光度的变化曲线并设定其中某一点对应的时间为凝固时间。
2、磁珠法
磁珠法是根据血浆凝固过程中粘度的变化来丈量凝血功能的。
根据仪器对磁珠运动丈量原理的不同，又可分为光电探测法和电磁珠探测法。
（1）光电探测法：在磁珠法中光电探测器的作用与光学法中不同，它只丈量血浆凝固过程中磁珠的运动规律，与血浆的浊度无关。
在磁珠法中的一对电磁铁安放在测试杯的两端，它们产生恒定的交替磁场使磁珠在测试杯中摆动，在与磁珠摆动的垂直方向安放一对光电接收装置，当磁珠摆幅衰减到50%时确定凝固终点。
光电探测法中还有一种利用红外光反射监测器监测磁珠运动的，下面先容BE系列半自动血凝仪中将另加先容。
（2）电磁探测法：电磁探测法又可称为双磁路磁珠法，其中一对磁路用于吸引磁珠摆动，另一对磁路利用磁珠摆动过程中对磁力线的切割所产生的电信号，对磁珠摆动幅读度进
行监控，当磁珠摆动幅度衰减到50%确定凝固终点。
光学法和磁珠法用于血凝检测，就方法论而言各有千秋，光学法的优点在于结构简单、灵敏度高。
易于自动化等。
缺点在于易受特异血浆干扰，对此各厂家已采取不同措施予以弥补。
磁路法优点不受特异血浆的干扰，试剂量少，缺点，磁珠的质量、杯壁的光滑程度等，均会对丈量结果造成影响。
一些厂家为倾销自身产品在方法论上大做文章，片片面夸大某种方法的优越性是不足取的。
其一目前各国生产的血凝仪两类方法并存，且光学法占据主导地位，在全自动血凝仪中尤其如此。
其二判定仪器的优劣有多种方面包括方法、设计、工艺等。
南昌普朗孙勇
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