Agilent1200高效液相色谱仪培训材料PPT课件
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高效液相色谱法培训课件
一、高压输液系统
8
第二节 高效液相色谱仪
高压输液系统由 溶剂贮存器、高压泵、梯度洗脱装置 和压力表 等组成。
1.溶剂贮存器 溶剂贮存器一般由玻璃、不锈钢或氟塑 料制成，容量为1到2 L，用来贮存足够数量、符合要求的流 动相。
2.高压输液泵 高压输液泵是高效液相色谱仪中关键部 件之一，其功能是 将溶剂贮存器中的流动相以高压形式连 续不断地送入液路系统，使样品在色谱柱中完成分离过程。 由于液相色谱仪所用色谱柱径较细，所填固定相粒度很小， 因此，对流动相的阻力较大，为了使流动相能较快地流过
送，所用的固定相柱效低，分析周期长。而现代液相色谱法 引用了气相色谱的理论，流动相改为高压输送（最高输送压 力可达4.9107Pa）;色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料 填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱（每米塔板数 可达几万或几十万）；同时柱后连有高灵敏度的检测器，可 对流
1
第一节 概 述
11
第二节 高效液相色谱仪
合，再输至柱系统。 梯度洗脱的实质是通过不断地变化流动相的强度，来调
整混合样品中各组分的k值，使所有谱带都以最佳平均k值通 过色谱柱。它在液相色谱中所起的作用相当于气相色谱中的 程序升温，所不同的是，在梯度洗脱中溶质k值的变化是通 过溶质的极性、pH值和离子强度来实现的，而不是借改变温 度（温度程序）来达到。
9
第二节 高效液相色谱仪
色谱柱，就需要高压泵注入流动相。 对泵的要求：输出压力高、流量范围大、流量恒定、无
脉动，流量精度和重复性为0.5%左右。此外，还应耐腐蚀， 密封性好。
高压输液泵，按其性质可分为恒压泵和恒流泵两大类。 恒流泵是能给出恒定流量的泵，其流量与流动相粘度和 柱渗透无关。 恒压泵是保持输出压力恒定，而流量随外界阻力变化而 变化，如果系统阻力不发生变化，恒压泵就能提供恒定的流 量。
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第二节 高效液相色谱仪
高压输液系统由 溶剂贮存器、高压泵、梯度洗脱装置 和压力表 等组成。
1.溶剂贮存器 溶剂贮存器一般由玻璃、不锈钢或氟塑 料制成，容量为1到2 L，用来贮存足够数量、符合要求的流 动相。
2.高压输液泵 高压输液泵是高效液相色谱仪中关键部 件之一，其功能是 将溶剂贮存器中的流动相以高压形式连 续不断地送入液路系统，使样品在色谱柱中完成分离过程。 由于液相色谱仪所用色谱柱径较细，所填固定相粒度很小， 因此，对流动相的阻力较大，为了使流动相能较快地流过
送，所用的固定相柱效低，分析周期长。而现代液相色谱法 引用了气相色谱的理论，流动相改为高压输送（最高输送压 力可达4.9107Pa）;色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料 填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱（每米塔板数 可达几万或几十万）；同时柱后连有高灵敏度的检测器，可 对流
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第一节 概 述
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第二节 高效液相色谱仪
合，再输至柱系统。 梯度洗脱的实质是通过不断地变化流动相的强度，来调
整混合样品中各组分的k值，使所有谱带都以最佳平均k值通 过色谱柱。它在液相色谱中所起的作用相当于气相色谱中的 程序升温，所不同的是，在梯度洗脱中溶质k值的变化是通 过溶质的极性、pH值和离子强度来实现的，而不是借改变温 度（温度程序）来达到。
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第二节 高效液相色谱仪
色谱柱，就需要高压泵注入流动相。 对泵的要求：输出压力高、流量范围大、流量恒定、无
脉动，流量精度和重复性为0.5%左右。此外，还应耐腐蚀， 密封性好。
高压输液泵，按其性质可分为恒压泵和恒流泵两大类。 恒流泵是能给出恒定流量的泵，其流量与流动相粘度和 柱渗透无关。 恒压泵是保持输出压力恒定，而流量随外界阻力变化而 变化，如果系统阻力不发生变化，恒压泵就能提供恒定的流 量。
Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明-2ppt.
Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明
Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明第二章
Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明
4.2.3 进样序列的保存
在命令栏“Sequence”下，单击“Save Sequence”或单击快捷操作的 “Save Current Sequence”图标（左边一软盘，右边三个小瓶）；在 path下选择保存路径，在此路径下选择subdiectory输入新文件名，单击 “OK”，即完成。
8.5.1 流动相使用前请必须脱气、过滤。
8.5.2 使用缓冲盐时，要加在线Seal-wash选项。
*
Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明
8.5.3 关机前，用 100%的乙腈冲洗系统20分钟，然后关泵，（适于反 相色谱柱，正相色谱柱用适当的溶剂冲洗）。 8.5.4 及时更换Purge Valve内的过滤芯。（当打开Purge Valve时，压 力高于10bar，表明过滤芯已堵）。 8.5.5 使用合适的密封圈。 8.6 使用梯度比例时要注意事项：
8.6.2 当使用缓冲盐溶液和有机溶剂时，推荐将缓冲盐通道接在A通道上， 有机溶剂通道直接接在A通道的上方D通道上；定期用水冲洗所有的通道， 以除去阀口上可能出现的盐沉淀。
*
Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明
8.7 在线真空脱气机使用注意事项： 8.7.1 第一次使用，要用随仪器附带的注射器抽满脱气机腔体；更换不 同类型的溶剂时，要先抽空，再抽满。 8.7.2 不用的通道要充满溶剂或密闭起来。 8.8 更换色谱柱时要注意事项：
*
Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明
仪器的流动相管路连接非常重要，一般Agilent 1200LC 在第 一次安装时，均有受过专业培训的安装工程师负责安装，各 种接头会处理的非常完美。客户只需在更换色谱柱时注意接 头处理就可以了，一般柱子入口接头为不锈钢卡套接头，柱 子出口为不锈钢卡套接头或PEEK管线手拧街头，当完成第 一次安装后，不锈钢卡套已固定死，当接不同的柱子时，要 注意柱子接头处的形状和长度，否则会产生一个非常大的死 体积。
Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明第二章
Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明
4.2.3 进样序列的保存
在命令栏“Sequence”下，单击“Save Sequence”或单击快捷操作的 “Save Current Sequence”图标（左边一软盘，右边三个小瓶）；在 path下选择保存路径，在此路径下选择subdiectory输入新文件名，单击 “OK”，即完成。
8.5.1 流动相使用前请必须脱气、过滤。
8.5.2 使用缓冲盐时，要加在线Seal-wash选项。
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Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明
8.5.3 关机前，用 100%的乙腈冲洗系统20分钟，然后关泵，（适于反 相色谱柱，正相色谱柱用适当的溶剂冲洗）。 8.5.4 及时更换Purge Valve内的过滤芯。（当打开Purge Valve时，压 力高于10bar，表明过滤芯已堵）。 8.5.5 使用合适的密封圈。 8.6 使用梯度比例时要注意事项：
8.6.2 当使用缓冲盐溶液和有机溶剂时，推荐将缓冲盐通道接在A通道上， 有机溶剂通道直接接在A通道的上方D通道上；定期用水冲洗所有的通道， 以除去阀口上可能出现的盐沉淀。
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Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明
8.7 在线真空脱气机使用注意事项： 8.7.1 第一次使用，要用随仪器附带的注射器抽满脱气机腔体；更换不 同类型的溶剂时，要先抽空，再抽满。 8.7.2 不用的通道要充满溶剂或密闭起来。 8.8 更换色谱柱时要注意事项：
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Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明
仪器的流动相管路连接非常重要，一般Agilent 1200LC 在第 一次安装时，均有受过专业培训的安装工程师负责安装，各 种接头会处理的非常完美。客户只需在更换色谱柱时注意接 头处理就可以了，一般柱子入口接头为不锈钢卡套接头，柱 子出口为不锈钢卡套接头或PEEK管线手拧街头，当完成第 一次安装后，不锈钢卡套已固定死，当接不同的柱子时，要 注意柱子接头处的形状和长度，否则会产生一个非常大的死 体积。
最新安捷伦高效液相色谱工作站高级操作培训ppt课件
• 从 Integration 菜单选择积分或自动积分 • 选择积分工具。 • 运行一个包括数据分析的完整方法。
Slide 54
自动积分
•检查开始和结束区域，确定噪音。 •赋予初始Slope Sensitivity和Height Reject值. •对第一次积分赋予一个临时峰宽值。 •设置Area Reject为0。 •执行测试性积分，有可能重复几次。 •基于较早洗脱出的色谱峰宽计算峰宽值。 •优化Slope Sensitivity和Height Reject。 •从初始的峰宽和噪音水平计算Area Reject。
Slide 34
泵的辅助功能
选择Instrument More Pump Auxiliary…菜单，即 可弹出下图窗口。
在该窗口可以设置泵 的最大升流速率、泵 冲程大小以及设置溶 剂的压缩补偿因子。
Slide 35
自动进样器的扩展功能
Slide 36
色谱柱信息的输入
Slide 37
VWD停泵扫描采集光谱
Slide 59
Peak width: (半峰宽)
如果没有设置半峰宽的时间积分表，半峰宽在整个积分过程中自动变化，变化 遵从0.75×exiting peak + 0.25×current peak。
Timed Events :(时间性积分事件)
•Area Sum ON or OFF:设定某一时间段内进行峰面积加和，加和后保 留时间被分配到第一个峰的保留时间上。
使用VWD停泵扫描的功能，可以采集样品的吸收光谱， 主要操作步骤如下： 1.在Online工作站界面的View菜单下打开VWD Scans窗口； 2.按照正常的进样方式采集样品色谱数据，并保证能够在
Online Signal窗口中观测到色谱信号； 3.进样后，色谱图上出现基线时，扫描空白吸收光谱
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自动积分
•检查开始和结束区域，确定噪音。 •赋予初始Slope Sensitivity和Height Reject值. •对第一次积分赋予一个临时峰宽值。 •设置Area Reject为0。 •执行测试性积分，有可能重复几次。 •基于较早洗脱出的色谱峰宽计算峰宽值。 •优化Slope Sensitivity和Height Reject。 •从初始的峰宽和噪音水平计算Area Reject。
Slide 34
泵的辅助功能
选择Instrument More Pump Auxiliary…菜单，即 可弹出下图窗口。
在该窗口可以设置泵 的最大升流速率、泵 冲程大小以及设置溶 剂的压缩补偿因子。
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自动进样器的扩展功能
Slide 36
色谱柱信息的输入
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VWD停泵扫描采集光谱
Slide 59
Peak width: (半峰宽)
如果没有设置半峰宽的时间积分表，半峰宽在整个积分过程中自动变化，变化 遵从0.75×exiting peak + 0.25×current peak。
Timed Events :(时间性积分事件)
•Area Sum ON or OFF:设定某一时间段内进行峰面积加和，加和后保 留时间被分配到第一个峰的保留时间上。
使用VWD停泵扫描的功能，可以采集样品的吸收光谱， 主要操作步骤如下： 1.在Online工作站界面的View菜单下打开VWD Scans窗口； 2.按照正常的进样方式采集样品色谱数据，并保证能够在
Online Signal窗口中观测到色谱信号； 3.进样后，色谱图上出现基线时，扫描空白吸收光谱
高效液相色谱法PPT课件
12
13
开机前的准备工作
1、将试验中要求的流动相配制好。 2、流动相要抽滤除气。 3、安装好试验要求的色谱柱。
14
15
正相色谱法
采用极性固定相(如聚乙二醇、氨基与 腈基键合相)；流动相为相对非极性的疏 水性溶剂(烷烃类如正已烷、环已烷）， 常加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃、三氯 甲烷等以调节组分的保留时间。常用于 分离中等极性和极性较强的化合物(如酚 类、胺类、羰基类及氨基酸类等）。
3、关上排液（或灌注）旋钮，逐渐将流 速升高。平衡至少30分钟后准备进样。
23
进样前准备——样品过滤
一次性注射器
样品瓶
针式（头）过滤器
24
仪器：手动进样器-六通阀/定量环
25
手动进样器工作原理
装填状态
样品注入
26
手动进样器
27
28
仪器：检测器
29
仪器：检测器-紫外
ＤＡＤ检测器 流路
UV/Vis双灯，全波长检测
6
色素 玻璃柱
石油醚
碳酸钙颗粒
俄国植物学家茨维特（Tswett）在1906 年研究用碳酸钙分离植物色素时发现 的，色谱法(Chromatography)因之得 名。
7
色谱法的分离原理是：
溶于流动相中的各组分经过固定相时， 由于与固定相发生作用（吸附、分配、 离子吸引、排阻、亲和）的大小、强 弱不同，在固定相中滞留时间不同， 从而先后从固定相中流出。又称为色 层法、层析法。
8
色谱分离过程
流动相 Temporal
course
9
液相色谱理论发展简况
液相色谱法开始阶段是用大直径的玻璃 管柱在室温和常压下用液位差输送流动 相，称为经典液相色谱法，此方法柱效 低、时间长（常有几个小时）。高效液 相色谱法(High performance Liquid Chromatography，HPLC)是在经典液相 色谱法的基础上，于60年代后期引入了 气相色谱理论而迅速发展起来的。
13
开机前的准备工作
1、将试验中要求的流动相配制好。 2、流动相要抽滤除气。 3、安装好试验要求的色谱柱。
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15
正相色谱法
采用极性固定相(如聚乙二醇、氨基与 腈基键合相)；流动相为相对非极性的疏 水性溶剂(烷烃类如正已烷、环已烷）， 常加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃、三氯 甲烷等以调节组分的保留时间。常用于 分离中等极性和极性较强的化合物(如酚 类、胺类、羰基类及氨基酸类等）。
3、关上排液（或灌注）旋钮，逐渐将流 速升高。平衡至少30分钟后准备进样。
23
进样前准备——样品过滤
一次性注射器
样品瓶
针式（头）过滤器
24
仪器：手动进样器-六通阀/定量环
25
手动进样器工作原理
装填状态
样品注入
26
手动进样器
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28
仪器：检测器
29
仪器：检测器-紫外
ＤＡＤ检测器 流路
UV/Vis双灯，全波长检测
6
色素 玻璃柱
石油醚
碳酸钙颗粒
俄国植物学家茨维特（Tswett）在1906 年研究用碳酸钙分离植物色素时发现 的，色谱法(Chromatography)因之得 名。
7
色谱法的分离原理是：
溶于流动相中的各组分经过固定相时， 由于与固定相发生作用（吸附、分配、 离子吸引、排阻、亲和）的大小、强 弱不同，在固定相中滞留时间不同， 从而先后从固定相中流出。又称为色 层法、层析法。
8
色谱分离过程
流动相 Temporal
course
9
液相色谱理论发展简况
液相色谱法开始阶段是用大直径的玻璃 管柱在室温和常压下用液位差输送流动 相，称为经典液相色谱法，此方法柱效 低、时间长（常有几个小时）。高效液 相色谱法(High performance Liquid Chromatography，HPLC)是在经典液相 色谱法的基础上，于60年代后期引入了 气相色谱理论而迅速发展起来的。
高效液相色谱法教学精【全】ppt课件
§1-3 色谱柱的分离效率
一、塔板理论 塔板理论认为: 一根柱子可以分为n
段，每段内组分在两相间迅速达到平衡， 把每一段称为一块理论塔板。
设柱长为L，理论塔板高度为H，则
H=L/Ｎ
Ｎ为理论塔板数。
理论塔板数一N
①色谱峰对称 ： N 16(tR )2
说明：
tW
a. 在给定的操作条件下，N几乎相同
三、高效液相色谱法的特点
高压: 以液体作为流动相，液体流经色谱柱时，
受到阻力较大 必须对流动相施加高压。 一般可达到150～300kg／cm2， 甚至可达700kg／cm2以上。
高速:
分析时间较经典液相色谱少得多（交 换速度快），一个复杂样品的分析仅需几 分钟到几十分钟。
高效:
气相色谱的分离效能很高，高效液相 色谱的柱效则更高（化学键合相），一般 约可达 6000理论塔板／米
②一定色谱条件下，对k’有差异的组
分，则柱效愈高，分离效果愈好。
塔板理论的特点和不足：
(1)当L一定时，N 越大(H 越小)，被测组
分在柱内被分配的次数越多，柱效越 高，所得色谱峰越窄。 (2)柱效不能表示被分离组分的实际分离
效果：如两组分的分配系数K 相同，
无论该色谱柱的柱效多大，都无法 分离。
① 柱效较高，ΔK(分配系数)较大，完全分离。 ② ΔK 不是很大，柱效较高，峰较窄，基本分离。 ③ 柱效较低，ΔK 较大，但分离的不好。 ④ ΔK 小，柱效低，分离效果更差。
一．分离度的数学表达式：
Rs
2(tR 2 tR1 ) W2 W1
2(tR 2 tR1 )
1.699 [Y1/ 2(2) Y1/ 2(1) ]
于世林编著)
第一章 高效液相色谱法基本原理 §1－1 概述 一、色谱法
安捷伦液相色谱培训教材
第32页/共81页
第33页/共81页
意味着本次对该部分内容不进行编辑，使用原方法中设置的参数。还有，仪器参数 设置——四元泵的参数设置。1、停止时间：是仪器停止采集数据的时间，并不是 泵停止工作的时间。本例中工作站仅采集0～10分钟的色谱图，10分钟后，不再采 集数据，但泵仍然继续工作，向系统提供流动相。使用自动进样器
第46页/共81页
特别是在VWD设置中更不可选特殊设置中勾选“当关灯时可进行分析”，不然我们 的实验操作就没有意义了。这是为什么，大家一想就知道啦。 还有，在运行时选项表中要注意的问题是，除非有特殊要求，一般不建议选择“保 存GLP数据”、“将方法和数据保存在一起”选项，GLP
第47页/共81页
数据是最原始的数据，不允许改动。一般情 况下选择这两种选项只是浪费硬盘空间而已。 泵的设置方面，特别是梯度洗脱设置中建议 先预览一下，看看是不是我们想要的突变或 浙变效果。 数据分析中重点在于图谱的处理，以及如何 建立校正表。 有时我们得到的色谱图并不很理想，
第12页/共81页
溶剂切换阀，则两个泵头可分别控制两种溶剂，类似四元比例阀，但并不完全一样， 只能同时混合两种溶剂，不可实现四种溶剂的同时使用。
二元泵为高压泵，为后混合式，精度更高，而且由于为高压混合，产生的气泡 也更少，所以价格也比四元泵贵得多。四元泵为低压泵，流速稳定性相对较差，低压 混合容易产生气泡，在实验中常会遇到这样的问题，多元
第25页/共81页
这里还有一点得注意的是流通池的后压力非常重要，一定要使用适当出口连接管， 出口管线要使用专用废液管为系统提供适当的后压，不得私自将废液管截短，以防 气泡进入流通池。但如果压力过高，流通池的石英窗片可能破裂。
在这里我要说的是，对安捷伦1200高效液相色谱仪正确的操作方法和定期的维 护保养的是很重要的。
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意味着本次对该部分内容不进行编辑，使用原方法中设置的参数。还有，仪器参数 设置——四元泵的参数设置。1、停止时间：是仪器停止采集数据的时间，并不是 泵停止工作的时间。本例中工作站仅采集0～10分钟的色谱图，10分钟后，不再采 集数据，但泵仍然继续工作，向系统提供流动相。使用自动进样器
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特别是在VWD设置中更不可选特殊设置中勾选“当关灯时可进行分析”，不然我们 的实验操作就没有意义了。这是为什么，大家一想就知道啦。 还有，在运行时选项表中要注意的问题是，除非有特殊要求，一般不建议选择“保 存GLP数据”、“将方法和数据保存在一起”选项，GLP
第47页/共81页
数据是最原始的数据，不允许改动。一般情 况下选择这两种选项只是浪费硬盘空间而已。 泵的设置方面，特别是梯度洗脱设置中建议 先预览一下，看看是不是我们想要的突变或 浙变效果。 数据分析中重点在于图谱的处理，以及如何 建立校正表。 有时我们得到的色谱图并不很理想，
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溶剂切换阀，则两个泵头可分别控制两种溶剂，类似四元比例阀，但并不完全一样， 只能同时混合两种溶剂，不可实现四种溶剂的同时使用。
二元泵为高压泵，为后混合式，精度更高，而且由于为高压混合，产生的气泡 也更少，所以价格也比四元泵贵得多。四元泵为低压泵，流速稳定性相对较差，低压 混合容易产生气泡，在实验中常会遇到这样的问题，多元
第25页/共81页
这里还有一点得注意的是流通池的后压力非常重要，一定要使用适当出口连接管， 出口管线要使用专用废液管为系统提供适当的后压，不得私自将废液管截短，以防 气泡进入流通池。但如果压力过高，流通池的石英窗片可能破裂。
在这里我要说的是，对安捷伦1200高效液相色谱仪正确的操作方法和定期的维 护保养的是很重要的。
Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明-1ppt.
● 指定样品进样：在命令栏“Sequence”下，选择“Partial Sequence”， 选中要进的样品瓶号，单击“Run Sequence”，单击“Yes”即可。
*
● 进入时间编辑，在data acquisition 和standard data analy。。
*
Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明
● 在method and run control 状态下，单击method，选择save method as 选项，编辑方法名存储。 4.2 进样操作 4.2.1 调用方法 进入method and run control 状态下，单击选择method 选项，单击 load method 选择所要使用的方法。此时系统将根据所选择的方法进行 相应的设置。开始前请根据方法对相应的参数例如：泵参数、自动进样 器参数、自动进样器恒温器参数设定、柱温箱参数设定、检测波长设定 等进行验证是否与方法设置中的一致。
*
Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明
● 进入column thermostatted method 编辑状态，选择柱温箱温度， 设置完毕单击OK。 ● 进入VWD编辑状态，选择方法中所需波长、峰宽、响应时间等， 参数设置好单击OK。 ● 进入signal details 编辑画面，选择下拉菜单中的VWDIA 进行参 数设定，点击“DAD”图标，点击“Setup DAD Signals”，在 “Signals”下方的空白处输入所需的检测波长，并在前面的方框里 画“√”设置完毕单击OK。
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Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明
画面如下所示。
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Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明
4 色谱条件的设定 4.1 方法的编辑
*
● 进入时间编辑，在data acquisition 和standard data analy。。
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Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明
● 在method and run control 状态下，单击method，选择save method as 选项，编辑方法名存储。 4.2 进样操作 4.2.1 调用方法 进入method and run control 状态下，单击选择method 选项，单击 load method 选择所要使用的方法。此时系统将根据所选择的方法进行 相应的设置。开始前请根据方法对相应的参数例如：泵参数、自动进样 器参数、自动进样器恒温器参数设定、柱温箱参数设定、检测波长设定 等进行验证是否与方法设置中的一致。
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Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明
● 进入column thermostatted method 编辑状态，选择柱温箱温度， 设置完毕单击OK。 ● 进入VWD编辑状态，选择方法中所需波长、峰宽、响应时间等， 参数设置好单击OK。 ● 进入signal details 编辑画面，选择下拉菜单中的VWDIA 进行参 数设定，点击“DAD”图标，点击“Setup DAD Signals”，在 “Signals”下方的空白处输入所需的检测波长，并在前面的方框里 画“√”设置完毕单击OK。
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Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明
画面如下所示。
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Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明
4 色谱条件的设定 4.1 方法的编辑
Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明-2ppt.
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Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明
参数表，右侧为积分结果，在积分参数表中按实际的要求输入修改的 参数，在命令栏“Integration”下，选择“Integrate”或单击快捷操作的 “Integrate Current Chromatogram”图标（左边有∫，右边两个峰），仪 器即按照新设定的积分参数重新积分，完成后，单击积分参数表上方 “Exit and save events to method”的快捷图标（右下角带勾），保存所 作的参数修改并退出。
6 打印报告
在命令栏“Report”下，选择“specify Report”或单击最右侧快捷操作的 “Specify Report Calculation and Print Style” 图标（右下角带叉的报告），根 据实际要求选择报告的格式和输出形式等，单击“OK”，即完成。
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Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明
8.5.1 流动相使用前请必须脱气、过滤。
8.5.2 使用缓冲盐时，要加在线Seal-wash选项。
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Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明
8.5.3 关机前，用 100%的乙腈冲洗系统20分钟，然后关泵，（适于反 相色谱柱，正相色谱柱用适当的溶剂冲洗）。 8.5.4 及时更换Purge Valve内的过滤芯。（当打开Purge Valve时，压 力高于10bar，表明过滤芯已堵）。 8.5.5 使用合适的密封圈。 8.6 使用梯度比例时要注意事项：
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7. 关机 关机前，先关灯，用相应的溶剂充分冲洗系统。 退出化学工作站，依提示关泵，及其它窗口，关闭计算机。 关闭Agilent 1200各模块电源开关。 8 . Agilent 1200 LC维护保养
Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明
参数表，右侧为积分结果，在积分参数表中按实际的要求输入修改的 参数，在命令栏“Integration”下，选择“Integrate”或单击快捷操作的 “Integrate Current Chromatogram”图标（左边有∫，右边两个峰），仪 器即按照新设定的积分参数重新积分，完成后，单击积分参数表上方 “Exit and save events to method”的快捷图标（右下角带勾），保存所 作的参数修改并退出。
6 打印报告
在命令栏“Report”下，选择“specify Report”或单击最右侧快捷操作的 “Specify Report Calculation and Print Style” 图标（右下角带叉的报告），根 据实际要求选择报告的格式和输出形式等，单击“OK”，即完成。
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Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明
8.5.1 流动相使用前请必须脱气、过滤。
8.5.2 使用缓冲盐时，要加在线Seal-wash选项。
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Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明
8.5.3 关机前，用 100%的乙腈冲洗系统20分钟，然后关泵，（适于反 相色谱柱，正相色谱柱用适当的溶剂冲洗）。 8.5.4 及时更换Purge Valve内的过滤芯。（当打开Purge Valve时，压 力高于10bar，表明过滤芯已堵）。 8.5.5 使用合适的密封圈。 8.6 使用梯度比例时要注意事项：
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7. 关机 关机前，先关灯，用相应的溶剂充分冲洗系统。 退出化学工作站，依提示关泵，及其它窗口，关闭计算机。 关闭Agilent 1200各模块电源开关。 8 . Agilent 1200 LC维护保养
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