体外诊断试剂生产工艺及质量控制局

3、形式包括：试剂、试剂盒、校准品（物）、质控品 （物）。
4、由于特异性或各种干扰因素的影响，检测结果一般作为 临床诊断的辅助手段，多数不是金标准（组织病理学检查、手 术发现、影像诊断、病原体的分离培养以及长期随访所得的结 论 ）。
5、结果一般会存在偏差（假阳性、假阴性），但应该可控。
体外诊断试剂检测的物质
与对照比较
肉眼或仪器检测信号 检测结果
校准、质控、标准 品（物）的朔源
关键控制点
? 原材料质量：纯度、生物活性（效价、亲和力、 位点等）、多肽核酸序列准确性、含量、浓度 （前滞反应、后滞反应）、污染（化学物质污染、 微生物污染）
? 工艺：分离、纯化、配制、包被、点样、封闭、 干燥、真空度、标记、灭活、醛化致敏、浸润、 切割、包装等等。
◆工艺过程： 胶体金标记物的制备；抗原（抗体）、标记物使用浓 度确定；膜条的制备、干燥、分装。
◆关键质控点： 主要生物原料的质量控制；标记物的制备浓度确定； 点膜、封闭和干燥；切膜(需防尘措施)；其中温度湿 度等的控制尤为关键：
胶体金免疫层析反应示意图
核酸扩增类试剂
◆原理：PCR技术是利用体内DNA复制原理和DNA变性与 复性等性质，使目的基因在体外大规模扩增技术。 PCR技术是在模板、dNTP、Mg2+等条件下，用耐热的 Taq酶代替DNA聚合酶，用合成的DNA引物代替RNA引物， 经过DNA变性、引物与模板结合(复性)和延伸3个步骤 的循环过程(25-30个循环)，使目的基因成100万倍扩 增。
典型的酶联免疫反应
胶体金(硒)试剂
◆原理：层析加抗原抗体免疫学反应。将抗原(或抗体) 以固定在膜上，胶体金标记试剂吸附在结合垫上；当 待检样本加到样本垫上后，通过毛细作用向前移动， 使结合垫上的胶体金标记物溶解后相互反应，再在膜 上层析，移动至固定的抗体(或抗原)的区域时，待检 物与金标试剂的结合物与之发生特异性结合而被截留， 聚集在检测带上，可通过肉眼观察到显色结果。
荧光PCR；PCR-ELISA；PCR-毛
9 ★核酸扩增类试剂 细管电泳；PCR-电泳；转录介
导扩增（TMA）
10
基因芯片（微阵列） 基因芯片（微阵列）；PCR-杂
类试剂
交；
十六个体系考核类型分类表3
序号
分类
产品型别
11 探类针试放剂大（原位杂交）bDNA类。
12
★普通生化类试剂 （十万级要求）
包括酶类化学试剂、凝血试剂 类等试剂。
? 抗原、抗体（包括血型、组织配型）、核酸等 －－一般为直接指标；
? 其它类型蛋白质、多肽、糖类、激素、酶类、 酯类、维生素、无机离子等－－一般为辅助指 标；
? 微生物； ? 麻醉、精神、毒性药品。
体外诊断试剂分类（ 按照学科）
1、临床血液学检验试剂； 2、临床体液学检验试剂； 3、临床化学检验试剂； 4、临床免疫学检验试剂； 5、临床微生物学检验试剂； 6、组织细胞学检验试剂； 7、变态反应、自身免疫诊断检验试剂； 8、遗传性疾病检验试剂； 9、分子生物学检验试剂。
概念解读
1、检验的标的物是体液、细胞、组织样本；要检验的物质 是蛋白质、核酸、离子等等；目的是检查或测定样本中被检测 物质的多少（有或无、多或少），从而对健康状态进行评价。
2、总的原则就是使不可见的物质经过生物（如细菌生长）、 化学（如显色反应）、生物化学（如酶催化）、免疫（如免疫 复合物）、分子生物（如核酸扩增）等反应转化为可观察（肉 眼观察）或测量（光、电、磁等物理信号）。
2
★胶体金（硒、乳 胶）类试剂
胶体金法；胶体硒法；
3 免疫印迹试剂
免疫印迹试剂盒；
4
蛋白芯片（微阵列） 类试剂
蛋白芯片（微阵列）；
十六个体系考核类型分类表2
序号
分类
5 单抗类试剂
6 多抗类试剂
产品型别
血型定型类试剂；免疫组化Biblioteka Baidu 免疫比浊；乳胶凝集。
同上
7 诊断血清（菌液） 诊断血清；诊断菌液。
8 血球凝集类试剂 抗体致敏血球。
? 标准物质（是指供体外诊断试剂试验用，且具有 确定特性量值，用于评价测定方法的物质，包括 标准品、参考品）。试剂盒评价、仪器校验、定 值。
十六个体系考核类型分类表1
（注：带★的类别为我省有或即将有生产的类别）
序号
分类
产品型别
1
★酶联免疫（酶标 板、磁珠、微粒子） 类试剂
酶联免疫法；化学发光法； 增强化学发光免疫分析法； 时间分辨荧光法；电化学发 光法；微粒子酶免法。
13
★普通生化类试剂 （清洁环境）
包括一般化学试剂、血气电解 质类、血液分析仪用试剂类等
14 ★干化学类试剂 干化学试剂（条、卡或盒）；
15 药敏类试剂 16 ★培养基类
药敏纸片（卡）； 培养基。
体外诊断试剂的分析性能评估
? 分析性能主要包括： ●分析灵敏度； ●分析特异性； ●测定范围； ●测定准确性； ●批内不精密度； ●批间不精密度。
★出厂检验时上述性能要求一般都应该检 验！
酶联免疫(酶标板、磁珠、微粒子等)类试剂
◆原理：酶联免疫吸附测定 (ELISA)是以免疫学反应为基础，
将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用结 合起来的一种敏感性很高的新型免疫检测技术。以酶标板、 磁珠 (微粒子 )等为载体，将抗原（或抗体）包被于载体， 与样本中相对应的抗体（或抗原）反应形成免疫复合物， 再与不同位点抗原（或抗体）的标记物 (包括标记酶、发光 物、稀土元素等 )反应，最后与底物反应，产生可检测的物 理信号，实现对抗体或抗原的检测。 ◆工艺过程： 抗原(或抗体)的包被(包被、封闭、干燥、抽真空 ) ；标 记物、底物的制备，浓度确定（滴定），配制分装；缓冲 液、其他液体组分的配制分装。 ◆关键质控点： ? 主要生物原料的质量控制；标记过程；滴定；包被工艺； 含有蛋白质的组分需要抑菌措施。
体外诊断试剂形式是多种多样，含盖的学科广泛， 每一次生物学、化学、生物化学、分子生物学，特 别是物理学领域有新技术的诞生或突破，都将伴随 产生一类新的体外诊断试剂。
☆了解原理☆
体外诊断试剂典型的应用模式
固相或液相
样本中的被检测物质
试剂中的化学物质、生物活性 物质（含标记物）作用
对应关键控制点
放大
产生物理信号（光、电、磁） 凝集现象是为看见
体外诊断试剂 原理工艺及质量控制
概念
体外诊断试剂： 是指按医疗器械管理的，包括可单独使
用或与仪器、器具、设备或系统组合使用， 在疾病的预防、诊断、治疗监测、预后观察、 健康状态评价以及遗传性疾病的预测过程中， 用于对人体样本（各种体液、细胞、组织样 本等）进行体外检测的试剂、试剂盒、校准 品（物）、质控品（物）等。