常用培养基的配制

合集下载

实验室常用培养基的配制方法

实验室常用培养基的配制方法

实验室常用培养基的配制方法在实验室中,培养基是微生物生长和繁殖的重要物质基础,正确配制培养基对于实验结果的准确性和可靠性至关重要。

不同的微生物对营养物质的需求有所不同,因此需要根据实验目的和微生物的特性选择合适的培养基,并掌握正确的配制方法。

接下来,我将为大家详细介绍几种实验室常用培养基的配制方法。

一、LB 培养基(LuriaBertani 培养基)LB 培养基是一种常用于培养细菌的通用培养基,其成分包括胰蛋白胨、酵母提取物和氯化钠。

配制 1L 的 LB 培养基,所需材料如下:胰蛋白胨 10g酵母提取物 5g氯化钠 10g配制步骤:1、称取上述成分,将其放入一个干净的 1L 烧杯中。

2、加入约800ml 的去离子水,用玻璃棒搅拌,直至溶质完全溶解。

3、用去离子水将溶液定容至 1L。

4、调节 pH 值至 70(通常使用 1mol/L 的 NaOH 或 1mol/L 的 HCl 进行调节)。

5、将培养基分装到锥形瓶中,每瓶的装液量不要超过锥形瓶体积的三分之二。

6、盖上瓶塞,用报纸或牛皮纸包扎瓶口。

7、放入高压灭菌锅中,在 121℃下灭菌 20 分钟。

二、牛肉膏蛋白胨培养基牛肉膏蛋白胨培养基是一种常用的细菌培养基,适用于多种细菌的培养。

配制 1L 该培养基,需要准备以下材料:牛肉膏 3g蛋白胨 10g氯化钠 5g具体配制步骤如下:1、称取牛肉膏、蛋白胨和氯化钠,放入干净的烧杯中。

2、加入适量的去离子水,搅拌溶解。

3、定容至 1L,搅拌均匀。

4、用 1mol/L 的 NaOH 或 HCl 调节 pH 至 72 74 之间。

5、分装、包扎、灭菌,方法同上。

三、马铃薯葡萄糖培养基(PDA 培养基)PDA 培养基常用于培养真菌,尤其是霉菌。

配制 1L 的 PDA 培养基,材料如下:马铃薯 200g葡萄糖 20g琼脂 15 20g配制流程:1、将马铃薯去皮,切成小块,称取 200g,放入锅中,加入约1000ml 去离子水,煮沸 20 30 分钟,直到马铃薯块变软。

常用培养基的配制成分及方法

常用培养基的配制成分及方法

一、常用培养基1、LB培养基将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g如果需要用1NNaOH(~1ml)调整pH至7.0,再补足水至1L。

注:琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。

2、SOB培养基将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨20g酵母提取物5g氯化钠0.5g1mol/L氯化钾2.5ml用水补足体积到1L。

分成100ml的小份,高压灭菌。

培养基冷却到室温后,再在每100ml 的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁。

3、SOC培养基成分、方法同SOB培养基的配制,只是在培养基冷却到室温后,除了在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁外,再加2ml灭菌的1mol/L葡萄糖(18g葡萄糖溶于足够水中,再用水补足到100ml,用0.22um的滤膜过滤除菌)。

4、TB培养基将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨12g酵母提取物24g甘油4ml各组分溶解后高压灭菌。

冷却到60℃,再加100ml灭菌的170mmol/LKH2PO4/0.72mol/LK2HPO4的溶液(2.31g的KH2PO4和12.54gK2HPO4溶在足量的水中,使终体积为100ml。

高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌)。

5、2×YT培养基将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨16g酵母提取物10g氯化钠4ml如果需要用1NNaOH(~1ml)调整pH至7.0,再补足水至1L。

注:琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。

6、YPD培养基将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨20g酵母提取物10g葡萄糖20g用水补足体积为1L后,高压灭菌。

建议在高压灭菌之前,对色氨酸营养缺陷型每升培养基添加1.6g色氨酸,因为YPD培养基是色氨酸限制型培养基。

为了配制平板,需要在高压灭菌前加入20g琼脂粉。

二、常用抗生素氨苄青霉素(ampicillin)(100mg/ml)溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。

常用培养基配方范文

常用培养基配方范文

常用培养基配方范文培养基(Culture medium)是一种用于细菌、真菌、植物细胞、动物细胞和其他微生物的繁殖和生长的营养物质。

常用的培养基可分为发酵培养基、微生物培养基和细胞培养基。

下面列举了一些常用的培养基配方。

1. LB培养基(Luria-Bertani medium)成分:-牛肉提取物:10克-酵母提取物:5克-热可溶性淀粉:10克-氯化钠:10克-水:1升2. NB培养基(Nutrient broth)成分:-牛肉提取物或肉蔻精:8克-酵母提取物:4克-葡萄糖:4克-水:1升3. MacConkey培养基成分:-水解动物蛋白:17克-中和胆盐:1.5克-中性红:0.03克-水:1升4. TSB培养基(Tryptic soy broth)成分:-大豆胨:17克-酵母提取物:3克-水:1升5. BHIA培养基(Brain Heart Infusion Agar)成分:-脑心汤固体:37克-水:1升6.R2A培养基成分:-水解酵母提取物:0.5克-蛋白胨:0.5克-葡萄糖:0.5克-脱脂乳粉:0.5克-黄豆粉:0.5克-高氯酸钠:0.3克-多聚体1466:0.05克-水:1000毫升7.比尔斯氏培养基(BHI培养基)成分:-大豆胨:37克-脑心汤固体:2克-水:1升8. 培养基199(Medium 199)成分:-高锰酸钾:0.015克-硫酸:1.55克-磷酸一氢钠:0.184克-高氯酸钠:8.0克-溴酚蓝:0.4克-d-葡萄糖:5.55克-l-谷氨酸:40.525克-苏打粉:0.84克-水:1升9. DMEM培养基(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)成分:-苔藓胶原酸:1克-乳糖:1克- 谷氨酸:584mg- 水:1000ml这只是一小部分常见的培养基配方,实际上有很多种不同的培养基,它们根据不同的生物特性和培养需求来设计。

不同的培养基可以提供细菌、真菌、细胞等微生物生长需要的各种营养物质。

常用培养基配制方法

常用培养基配制方法

常用培养基配制方法:(1)基础盐培养基(MSM):(NH4)2SO42.0g,MgSO4·7H2O0.2g,CaCl2·2H2O 0.01g,FeSO4·7H2O0.001g,Na2HPO4·12H2O1.5g,KH2PO41.5g,蒸馏水1000 mL。

(2)LB培养基:蛋白胨10g,酵母提取物5g,氯化钠5g,蒸馏水1000 mL,pH7.5。

(3)高氏合成1号培养基:硝酸钾1g,磷酸氢二钾0.5g,硫酸镁0.5g,氯化钠0.5g,硫酸亚铁0.01g,可溶性淀粉20g,蒸馏水1000mL。

(4)查彼氏培养基:硝酸钠2g,氯化钾0.5g,硫酸镁0.5g,磷酸氢二钾1g,硫酸亚铁0.01g,蔗糖30g,蛋白胨0.5g,蒸馏水1000mL。

(5)马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA):马铃薯200g,葡萄糖20g,琼脂20 g,蒸馏水1000mL。

将无病马铃薯洗净去皮切碎,加蒸馏水1000mL,煮沸0.5 h,纱布过滤,滤液加蒸馏水补足1000mL,再加入葡萄糖,然后分装三角瓶灭菌备用。

(6)铵察氏琼脂培养基:氯化铵2g,氯化钾0.5g,硫酸镁0.5g,磷酸氢二钾1g,硫酸亚铁0.01g,蔗糖30g,蛋白胨0.5g,琼脂20g,蒸馏水1000 mL。

(7)克氏合成1号琼脂培养基:磷酸氢二钾1g,碳酸镁0.3g,氯化钠0.2 g,硝酸钾1g,硫酸亚铁0.01g,碳酸钙0.5g,葡萄糖20g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。

(8)葡萄糖天门冬素琼脂培养基:葡萄糖10g,天门冬素0.5g,磷酸氢二钾0.5g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。

(9)葡萄糖酵母膏琼脂培养基:葡萄糖10g,酵母膏10g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。

(10)瓦氏肉汁琼脂培养基:蛋白胨5g,葡萄糖10g,牛肉膏10g,氯化钠5g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。

(11)淀粉琼脂培养基:可溶性淀粉10g,碳酸镁1g,磷酸氢二钾0.3g,氯化钠0.5g,硝酸钠1g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。

各种培养基配方

各种培养基配方

146种培养基配方1、牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)牛肉膏3g蛋白胨5g氯化钠10g琼脂15~20gpH 7.0~7.2水1000mL2、2、高氏(Gause)1号培养基(培养放线菌用)可溶性淀粉20g硝酸钾1g氯化钠0.5g磷酸氢二钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g琼脂20g水1000mLpH 7.2~7.4配制时,先用少量冷水将淀粉调成糊状,倒入煮沸的水中,在火上加热,边搅拌边加入其他成分,溶化后,补足水分至1000mL。

121℃灭菌20min。

查氏(Czapek)培养基(培养霉菌用)硝酸钠2g磷酸氢二钾1g氯化钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂15~20g水1000mLpH自然121℃灭菌20min。

4、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)葡萄糖10g蛋白胨5g磷酸二氢钾1g七水合硫酸镁0.5g1/3000孟加拉红100mL(rose bengal,玫瑰红水溶液)琼脂15—20gpH自然蒸馏水800mL112℃灭菌30min。

临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL,使每毫升培养基中含链霉素30μg。

5、马铃薯培养基(简称PDA)(培养真菌用)马铃薯200g蔗糖(或葡萄糖)20g琼脂15—20gpH自然培养基的配制:马铃薯去皮,切成块煮沸30min,然后用纱布过滤,再加糖及琼脂,熔化后补足水至1000mL。

121℃灭菌30min。

6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制:(1)、取大麦或小麦若干,用水洗净,浸水6—12小时,至15℃阴暗处发芽,上面盖纱布一块,每日早、中、晚淋水一次,麦根伸长至麦粒的两倍时,即停止发芽,摊开晒干或烘干,贮存备用。

(2)、将干麦芽磨碎,一份麦芽加四份水,在65℃水浴中糖化3—4小时,糖化程度可用碘滴定之。

加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。

(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤,滤液如混浊不清,可用鸡蛋白澄清,方法是将一个鸡蛋白加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。

实验室常用培养基

实验室常用培养基

.常用培养基的制备(1)马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)和马铃薯蔗糖琼脂(PSA)培养基培养真菌最常用的培养基,成分如下:去皮马铃薯200 g 葡萄糖或蔗糖20g琼脂15-20g 水1000 ml配制方法:将马铃薯洗净去皮,称取200 g,切成小块(不必大小)放入锅中,加水1000ml,煮沸半小时,稍冷后用双层纱布过滤,在滤液中加蔗糖20g,加水补足到1000ml。

配成的培养基一般呈酸性,用于培养真菌,可以不必调pH。

如配制固体培养基,在加蔗糖前先加15-20g 琼胶加热熔化,最后加入蔗糖,混匀并加水补是至1000ml,趁热分装在试管或三角瓶中。

标准试管(15×150mm)分装量如下:一般用作斜面培养的每试管装培养基3-5ml,用作平面培养的每试管约10ml,加棉花塞后灭菌。

培养细菌用的培养基必须调节其酸度值到中性(pH7.0左右)。

(2)牛肉汁蛋白胨培养基(NA)是培养细菌最常用的培养基,又称营养琼脂或肉汤培养基。

成分如下:酵母浸膏1g 牛肉浸膏3g蛋白胨5-10g 蔗糖(或葡萄糖)l0g琼脂15-20g 水1000mlpH7.0配制方法:称取牛肉浸膏及蛋白胨溶于少量热水中备用,在其余水中加入琼脂,加热溶化后将牛肉浸膏和蛋白胨溶液加入混匀,然后加水补足到1000 ml,用NaOH或HCL调整至pH7.0,趁热分装,加棉花塞后灭菌。

(3)玉米叶培养基取一定数量的玉米叶片,洗净后剪成1㎝2左右的小块,放在250ml的三角瓶中,盛放量一般为三角瓶的1/3,然后加少量的水以保持湿润,加棉花塞后灭菌。

天然培养基一般不必调整pH。

(4)查氏(Czapek)培养基查氏培养基是一种组合培养基,其成分如下:NaNO3 2g K2HPO4 1 gMgSO4·7H2O 0.5g KCl 0.5gFeSO4 0.01g 蔗糖30g水1000ml(5)灭菌水的配制蒸馏水(或自来水)经过灭菌处理即成灭菌水,是实验室用量最大的必备品之一,常用于病原菌的分离、稀释、保湿等。

微生物学实验常用培养基的配制

微生物学实验常用培养基的配制

牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)牛肉膏3g蛋白胨5g氯化10g钠琼脂15~20gpH 7.0~7.2水1000mL 121℃灭菌20min。

2、高氏(Gause)1号培养基(培养放线菌用)可溶性淀20g粉硝酸钾1g氯化0.5g钠磷酸氢二钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g琼20g脂水1000mLpH7.2~7.4配制时,先用少量冷水将淀粉调成糊状,倒入煮沸的水中,在火上加热,边搅拌边加入其他成分,溶化后,补足水分至1000mL。

121℃灭菌20min。

3、查氏(Czapek)培养基(培养霉菌用)硝酸钠2g磷酸氢二钾1g氯化钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂15~20g水1000mLpH 自然121℃灭菌20min。

4、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)葡萄糖10g蛋白胨5g磷酸二氢钾1g七水合硫酸镁0.5g1/3000孟加拉红100mL(rose bengal,玫瑰红水溶液)琼脂15—20gpH 自然蒸馏水800mL112℃灭菌30min。

临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL,使每毫升培养基中含链霉素30μg。

5、马铃薯培养基(简称PDA)(培养真菌用)马铃薯200g蔗糖(或葡萄糖)20g琼脂15—20gpH 自然培养基的配制:马铃薯去皮,切成块煮沸30min,然后用纱布过滤,再加糖及琼脂,熔化后补足水至1000mL。

121℃灭菌30min。

6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制:(1)、取大麦或小麦若干,用水洗净,浸水6—12小时,至15℃阴暗处发芽,上面盖纱布一块,每日早、中、晚淋水一次,麦根伸长至麦粒的两倍时,即停止发芽,摊开晒干或烘干,贮存备用。

(2)、将干麦芽磨碎,一份麦芽加四份水,在65℃水浴中糖化3—4小时,糖化程度可用碘滴定之。

加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。

(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤,滤液如混浊不清,可用鸡蛋白澄清,方法是将一个鸡蛋白加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。

常用25种培养基详细配方

常用25种培养基详细配方

一、牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)牛肉膏3g蛋白胨10gNaCl 5g琼脂15—20g水1000mlpH 7.0—7.21.05kg/cm2,121.3℃灭菌20分钟。

二、淀粉琼脂培养基(高氏1号培养基,培养放线菌用)可溶性淀粉20gKNO31gNaCl 0.5gK2HPO40.5gMgSO40.5gFeSO40.01g琼脂20g水1000mlpH 7.2—7.4配制时,先用少量冷水,将淀粉调成糊状,在火上加热,边搅拌边加水及其他成分,溶化后,补足水分至1000ml。

1.05kg/cm2,121.3℃灭菌20分钟。

三、查氏培养基(培养霉菌用,实验16)NaNO32gK2HPO41gKCl 0.5gMgSO40.5gFeSO40.01g蔗糖30g琼脂15—20g水1000mlpH 自然1.05kg/cm2,121.3℃灭菌20分钟。

四、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)葡萄糖10g蛋白胨5gKH2PO41gMgSO4·7H2O 0.5g1/3000孟加拉红(rose bengal,玫瑰红水溶液)100ml琼脂15—20gpH 自然蒸馏水800ml0.56kg/cm2(8磅/英寸2),112.6℃灭菌30分钟。

临用前加入0.03%链霉素稀释液100ml,使每毫升培养基中含链霉素30μg。

五、马铃薯培养基(实验16)马铃薯200g蔗糖(或葡萄糖) 20g琼脂15—20g水1000mlpH 自然马铃薯去皮,切成块煮沸半小时,然后用纱布过滤,再加糖及琼脂,溶化后补足水至1000ml。

1.05kg/cm2,121.3℃灭菌20分钟。

六、麦芽汁琼脂培养基(实验15)1.取大麦或小麦若干,用水洗净,浸水6—12小时,置15℃阴暗处发芽,上盖纱布一块,每日早、中、晚淋水一次,麦根伸长至麦粒的两倍时,即停止发芽,摊开晒干或烘干,贮存备用。

2.将干麦芽磨碎,一份麦芽加四份水,在65℃水浴锅中糖化3—4小时,糖化程度可用碘滴定之。

各种培养基配方范文

各种培养基配方范文

各种培养基配方范文培养基是一种用于微生物培养的基础物质,能够为微生物提供所需的营养和环境条件。

不同的微生物在其生长过程中需要不同的养分和环境条件,因此培养基的配方需要根据微生物的需求来进行调整。

下面是几种常见的培养基配方。

1.大肠杆菌液体培养基配方:-蛋白胨或复合氮源:10g-酵母浸出物:5g-葡萄糖:1g-NaCl:5g-K2HPO4:2g-MgSO4:0.2g-pH调节至7.0后加水至1000mL2.牛心提取物琼脂糖培养基配方:-牛心提取物:3g-高级琼脂糖:15g-葡萄糖:10g-NaCl:5g-pH调节至7.0后加水至1000mL3.玉米浸出物琼脂糖培养基配方:-玉米浸出物:4g-高级琼脂糖:15g-酵母浸出物:1g-NaCl:5g-pH调节至7.0后加水至1000mL4.LB琼脂糖培养基配方:-液体LB培养基:10mL-高级琼脂糖:15g-NaCl:5g-pH调节至7.0后加水至1000mL 5.血寒养基配方:-羊血:50mL-肉浸出物:3g-酵母浸出物:3g-肉汤培养基:1L-红细胞素:5g-高级琼脂糖:3g-pH调节至7.0后加水至1000mL6.厌氧培养基配方:-肉浸出物:5g-酵母浸出物:5g-NaCl:5g-蒸馏水:900mL- 加入0.1%的L-cysteine:10mL-pH调节至7.0后用氮气替换空气注意事项:-培养基中的成分应严格按照配方比例加入,并保持无菌。

-配制好的培养基需要高温高压灭菌以保证无菌。

-不同的微生物可能对一些成分非常敏感,需要根据实际情况进行微调。

-培养基的pH值应根据微生物环境要求进行调整,一般在7.0左右。

-配好的培养基应存放在4℃的冰箱中,避免阳光直射以防止成分分解。

这只是一些常见的培养基配方,不同的微生物有不同的需求,可以根据具体的情况进行配方的调整。

在实际使用中,还需要根据微生物的特性和实验目的来选择合适的培养基。

培养基配方及配制方法

培养基配方及配制方法

培养基配方及配制方法培养基是一种用于寄养和培养细胞、微生物、组织等生物体的基质。

其配方的选择和配制方法对于不同的生物体和研究目的有很大的差异。

以下是一般常用的培养基配方及简单的配制方法:1. LB培养基(Luria-Bertani)LB培养基是常见的用于大肠杆菌等细菌的培养基,其配方包括:- 1% 蛋白胨(tryptone): 添加营养源和能量- 0.5% 酵母粉(yeast extract): 提供维生素和生长因子-1%NaCl(氯化钠):调节渗透压-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法:将蛋白胨、酵母粉和NaCl加入蒸馏水中,调整pH至7.0,将混合液体加热至溶解,过滤杂质,如需固化则加入1.5%的琼脂。

2. YPD培养基(Yeast extract-Peptone-Dextrose)YPD培养基常用于酵母菌的培养,其配方包括:- 1% 酵母提取物(yeast extract): 提供维生素和生长因子- 2% 蛋白胨(peptone): 为细菌提供碳源和能量- 2% 葡萄糖(dextrose): 为细菌提供碳源和能量-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法:将酵母提取物、蛋白胨和葡萄糖加入蒸馏水中,调整pH至7.0,将混合液体加热至溶解,过滤杂质,如需固化则加入2%的琼脂。

3. DMEM培养基(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)DMEM培养基是常用的哺乳动物细胞培养基,其配方包括:-10%胎牛血清(FBS):提供生长因子和营养物质- 1% 青霉素-链霉素溶液(Penicillin-Streptomycin Solution): 防止细菌污染- 1% L-谷氨酰胺(L-Glutamine): 提供细胞代谢所需的基础物质-DMEM基础培养液:包括氨基酸、维生素等成分-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法:将胎牛血清、青霉素-链霉素溶液、L-谷氨酰胺和DMEM基础培养液加入蒸馏水中,调整pH值至7.4,混合均匀即可。

常用培养基的配制

常用培养基的配制

常用培养基的配制常用培养基的配制〔一〕营养琼脂培养基【用途】供细菌总数测定、保存菌种、细菌纯化、一般细菌培养、血琼脂培养基根底之用。

【成分】牛肉膏 3gNaCl 5g 蛋白胨 10g 琼脂 20g±0.2℃ 30min高压灭菌备用。

〔二〕蛋白胨水培养基【用途】供细菌培养、吲哚试验之用。

【成分】蛋白胨 10g氯化钠 5g℃ 20min高压灭菌备用。

〔三〕半固体培养基【用途】供观察细菌动力、菌种保存、H抗原位相变异试验等。

【成分】蛋白胨 10g氯化钠 5g 琼脂 2.5~3g【pH值】7.6℃ 20min高压灭菌备用。

〔四〕营养肉汤培养基【用途】供一般细菌培养、转种、复苏、增菌等,也可用于消毒效果的测定。

【成分】蛋白胨 10g氯化钠 5g牛肉粉〔牛肉浸汁〕 3g±℃ 20min 高压灭菌备用。

〔五〕葡萄糖蛋白胨水培养基【用途】供甲基红试验及V-P试验之用。

【成分】蛋白胨 5g葡萄糖 5g K2HPO4 (K2HPO4·3H2O) 5g (0.65g)【pH值】7.0~7.2【制法】将上述成分溶于1000ml蒸馏水中,过滤,分装试管,每管2~3ml,经112.6 ℃ 20min高压灭菌备用。

〔六〕伊红美蓝培养基〔EMB培养基〕【用途】弱选择性培养基,用于别离肠道致病菌,特别是大肠杆菌。

【成分】蛋白胨 10g乳糖 10g 伊红 0.4g美兰 0.065g 琼脂 14g K2HPO4 2g±0.4℃ 15min高压灭菌,待冷却至60℃左右倾注灭菌平皿备用。

〔七〕S-S琼脂培养基【用途】供沙门氏菌、志贺氏菌的选择性别离培养之用。

【成分】蛋白胨 5g 乳糖 10g 牛肉粉 5g三号胆盐 3.5g 琼脂 17g 柠檬酸钠 8.5g 柠檬酸铁 1g 硫代硫酸钠 8.5g 中性红 0.025g 煌绿 0.00033g±0.1【制法】上述成分称取60g加蒸馏水1000ml,加热煮沸至完全溶解,待冷却至60℃左右倾注灭菌平皿备用。

实验室36种微生物培养基配制方法

实验室36种微生物培养基配制方法

实验室36种微生物培养基配制方法实验室养菌基是为微生物的培养和研究提供合适营养和条件的培养基质。

不同微生物对培养基的要求各不相同,因此实验室通常需要配制多种不同的培养基。

下面是36种常用的微生物培养基的配制方法。

一、通用培养基1. 营养琼脂培养基(Nutrient Agar)营养琼脂培养基是一种通用的培养基,适用于大多数微生物的培养。

其配方为:蛋白胨10克、葡萄糖5克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。

将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2,加入琼脂,高压灭菌,倒入平皿中,待凝固后用。

2. 营养肉膏培养基(Nutrient Broth)营养肉膏培养基是一种通用的液体培养基,适用于大多数微生物的培养。

其配方为:蛋白胨10克、牛肉提取物5克、葡萄糖5克、蒸馏水1000毫升。

将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2,高压灭菌,分装,即可使用。

3. 大肠杆菌选择性培养基(MacConkey Agar)大肠杆菌选择性培养基是一种常用的培养基,用于选择和鉴定大肠杆菌。

其配方为:蛋白胨17克、葡萄糖1.5克、恶瓜胆汁5克、硼酸紫0.5克、亮矾0.09克、蒸馏水1000毫升。

将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2,加入琼脂,高压灭菌,倒入平皿中,待凝固后用。

4. Sabouraud脱氧胆汁蔗糖琼脂培养基(Sabouraud Dextrose Agar)Sabouraud脱氧胆汁蔗糖琼脂培养基是用于真菌的培养和鉴定。

其配方为:脱氧胆汁10克、蔗糖40克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。

将以上成分溶解、调节pH至5.6-6.4,高压灭菌,倒入平皿中,待凝固后用。

二、选择性培养基1. VC菌属选择性平皿培养基(Vogel-Johnson Agar)VC菌属选择性平皿培养基是用于选择和鉴定Voges-Proskauer菌属(如克雷伯菌)的培养基。

其配方为:葡萄糖1克、琼脂15克、盐酸75克、蒸馏水1000毫升。

将以上成分溶解、加热煮沸,冷却至55-60°C,加入胆盐酯高压灭菌,倒入平皿中,待凝固后用。

常用培养基的配制

常用培养基的配制

附录三常用培养基的制备目录一、肉浸液肉汤二、营养琼脂三、鲜血琼脂四、半固体培养基五、明胶培养基六、乳糖胆盐发酵培养基七、乳糖发酵培养基八、缓冲蛋白胨水BP九、氯化镁孔雀绿增菌液MM十、四硫磺酸钠煌绿增菌液TTB十一、亚硒酸盐胱氨酸增菌液SC十二、GN增菌液十三、肠道菌增菌肉汤十四、HE琼脂十五、SS琼脂十六、麦康凯琼脂十七、伊红美蓝琼脂EMB十八、三糖铁琼脂TSI一、肉浸液肉汤十九、三糖铁琼脂换用方法二十、血消化汤二十一、克氏双糖铁琼脂KI二十二、克氏双糖铁琼脂换用方法二十三、动力硝酸盐增养基A法SPS 二十四、动力硝酸盐培养基B法二十五、马丁氏肉汤二十六、察氏培养基二十七、马铃薯萄萄糖琼脂PDA二十八、马铃薯琼脂二十九、Elek氏培养基毒索测定用三十、胰蛋白胨水三十一、%氯化钠三糖铁琼脂三十二、牛肉或中心消化汤三十三、%蛋白胨水稀释剂一、肉浸液肉汤绞碎牛肉500g蛋白胨10g磷酸氢二钾2g氯化钠5g蒸馏水1000 ml二制法将绞碎之去筋膜无油脂牛肉500g加蒸馏水1000ml,混合后放冰箱过夜,除去液面之浮油,隔水煮沸半小时,使肉渣完全凝结成块,用绒布过滤,并挤压收集全部滤液,加水补足原量;加入蛋白胨、氯化钠和磷酸盐,溶解后校正pH7.4~7.6煮沸并过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌30分;三用途一般细菌培养用;二、营养琼脂一成份肉水1000ml蛋白胨10g磷酸氢二钾1g氯化钠5g琼脂20~30g二制法先将琼脂剪碎,用冷水洗净后加入肉汤中,划线补充水分,加热溶化;校正~,用纱布夹棉花过滤至透明;分装中试管或三角瓶;高压灭菌121℃20分,灭菌后中试管摆成斜面;三用途一般细菌的分离培养,纯培养,观察菌落性状及保存菌种用;为特殊培养基的基础;三、鲜血琼脂营养琼脂脱纤维鲜血马、绵羊、牛、家兔5~8%;二制法将灭菌的营养琼脂加热溶化,冷至45~50℃时,加入无菌脱纤维鲜血5~8%,分装试管,即摆成斜面或倾注平皿,待凝固后,置37℃培养1日,有污染者废弃,无菌者保存于冰箱备用;无菌脱纤维鲜血:以无菌手术采取健康动物马、绵羊、牛用颈静脉采血、家兔用心脏采血血液,加到盛有玻璃殊的三角瓶内,摇匀5~10分钟,置冰箱中备用;三用途用于分离培养和保存菌种;四、半固体培养基一成份肉汤培养基~pH7.6 100 ml琼脂二制法将琼脂加入肉汤培养基中加热溶化,校正pH至7.6,滤过后分接于试管内,以15磅高压灭菌20~30分钟,作成高层,经无菌检查合格后,置冰箱中保存备用;三用途菌种保存,观察细菌的运动性;五、明胶培养基一成分普通肉汤100 ml 明胶12~15g冬天少用,夏天多用二制法将上述成分加热溶化,校正pH至7.6,趁热过滤,分装试管,用8磅15分钟灭菌或流通蒸气100℃,30分钟间歇,灭菌,经无菌检验合格的保存于冰箱内备用;六、乳糖胆盐发酵培养基一成份蛋白胨20g猪胆盐或牛、羊肠盐5g乳糖10g%溴甲酚紫水溶液25ml蒸馏水1000ml二制法将蛋白胨、胆盐及乳糖溶于水中,校正pH7.4,加入指示剂,分装每管10ml,并先放入一个小例立的管,115℃高压灭菌15分钟;注:双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外,其他成分加倍;七、乳糖发酵培养基一成份蛋白胨20g乳糖10g%溴甲酚紫水溶液25ml蒸馏水1000ml二制法:将蛋白胨及乳糖溶于水中,校正pH7.4,加入指示剂,按检验要求分装30ml、10ml 或3ml,并放入一个倒立的小管,115℃高压灭菌15分钟;注:1、双料乳糖发酵除蒸馏水外,其他成分加倍;2、30ml和10ml乳糖发酵管专供酱油及酱类检验用,3ml乳糖发酵管供大肠菌群证实试验用;八、缓冲蛋白胨水BP一成份蛋白胨10g磷酸二氢钾1.5g磷酸氢二钠Na2HPO4·12H2O 9g氯化钠5g蒸馏水1000ml二制法按上述成分称好后,装入大烧瓶,121℃高压灭菌15分钟;用时无菌分装,每瓶225ml;注:本培养基供沙门氏菌前增菌用;九、氯化镁孔雀绿增菌液MM一成份1.甲液:胰蛋白胨5g氯化钠8g磷酸二氢钾蒸馏水1000ml2.乙液:氯化镁化学纯40g蒸馏水100ml3.丙液: %孔雀绿水溶液二制法分别按上述成分配好后,121℃高压,灭菌15分钟备用;临用时取甲液90ml、乙液9ml、丙液,以灭菌操作混合即可;注:本培养基亦称Rappaprt10R10增菌液;十、四硫磺酸钠煌绿增菌液TTB一成份1.基础培养基肠胨5g胆盐1g碳酸钙10g硫代硫酸钠30g蒸馏水1000 ml2.碘溶液碘6g碘化钾5g蒸馏水20ml二制法将基础培养基的各成分加入蒸馏水中,加热溶解,分装每瓶100ml;分装时应随时振摇,使其中的碳酸钙混匀;121℃高压灭菌15分钟临用时每100ml基础培养基中加入碘溶液2ml、0.1%煌绿溶液1ml;十一、亚硒酸盐胱氨酸增菌液SC一成份蛋白胨5g乳糖4g亚硒酸氢钠4g磷酸二氢钾g磷酸二氢钾L—胱氨酸蒸馏水1000ml1%L—胱氨酸—氢氨化钠溶液的配法:称取L—胱氨酸0.1g或DL—胱氨酸0.2g,加1N氢氧化钠1.5ml,使溶解,再加入蒸馏水8.5ml即成;二制法将除亚硒酸氢钠和L—胱氨酸以外的各成份溶解于900ml蒸馏水中,加热煮沸,冷却后备用;另将亚硒酸氢钠溶解于100ml蒸馏水中,加热煮沸,冷却后以无菌操作与上液混合;再加入1%L—胱氨酸—氢氧化钠溶液1ml;分装于灭菌瓶中,每瓶100ml,pH应为7.0±0.1;十二、GN增菌液一成份胰蛋白胨20g葡萄糖1g甘露醇2g柠檬酸钠5g去氧胆酸钠磷酸氢二钾4g磷酸二氢钾氯化钠5g蒸馏水1000ml二制法按上述成分配好,加热使溶解,校正;分装每瓶225ml,115℃高压灭菌15分钟;十三、肠道菌增菌肉汤一成份蛋白胨10g葡萄糖5g牛胆盐20g磷酸氢二钠8g磷酸二氢钾2g煌绿蒸馏水1000ml二制法按上述成分配好,加热使溶解,校正pH7.2;分装每瓶30ml,115℃高压灭菌15分钟;十四、HE琼脂一成份1. 基础液:肘胨12g牛肉膏3g乳糖12g蔗糖12g水杨苷2g胆盐20g氯化钠5g琼脂10g~20g%溴香酚蓝溶液16ml蒸馏水1000ml2.Andrade指示剂:酸性复红1N氢氧化钢溶液16ml蒸馏水100ml将复红溶解于蒸馏水中,加入氢氧化钠溶液,数小时后如复红褪色不全,再加氢氧化钠溶液1~2ml;3. 甲液:硫代硫酸钠34g柠檬酸铁铵4g蒸馏水100ml4. 乙液:去氧胆酸钠10g蒸馏水100ml二制法将前面八种成分溶解于400ml蒸馏水内作为基础液,将琼脂加入于600ml蒸馏水内,加热溶解;加入甲液20ml和乙液20ml于基础液内,校正;再加入Andrade指示剂20ml,并与琼脂液合并,待冷至50~55℃,倾注平板;注:此培养基不可高压灭菌十五、SS琼脂一成份1.基础培养基牛肉膏5g肘胨5g三号胆盐琼脂17g蒸馏水1000ml制法:将牛肉膏、肘胨和胆盐溶解于400ml蒸馏水中,将琼脂加入于600ml蒸馏水中,煮沸使其溶解,再将二液混合,121℃高压灭菌15分钟,保存备用;2.完全培养基基础培养基1000ml乳糖10g柠檬酸钠硫代硫酸钠10%柠檬酸铁溶液10ml1%中性红溶液0.1%煌绿溶液制法:加热溶化培养基,按比例加入上述染料以外之各成分,充分混合均匀,校正pH7.0,加入中性红和煌绿溶液,倾注平板;注:①制好的培养基宜当日使用,或保存于冰箱内于48小时内使用;②煌绿溶液配好后应在10天以内使用;③可以购用SS琼脂的干燥培养基;十六、麦康凯琼脂一成份蛋白胨17g肘胨3g猪胆盐或牛、羊胆盐5g氯化钠5g琼脂17g乳糖10g0.01%结晶紫水溶液10ml0.5%中性红水溶液5ml蒸馏水1000ml二制法1.将蛋白胨、肘胨、胆盐和氯化钠溶解于400ml蒸馏水中,校正至;将琼脂加入于600ml 蒸馏水中,加热溶解;将两液合并,分装于烧瓶内,121℃高灭菌15分钟备用;2.临用时加热溶化琼脂,趁热加入乳糖;冷至50~55℃时,加入结晶紫和中性红水溶液,摇匀后倾注平板;注:结晶紫及中性红水溶液配好后须经高压灭菌;十七、伊红美蓝琼脂EMB一成份蛋白胨10g乳糖10g磷酸氢二钾2g琼脂17g2%伊红y溶液20ml0.65%美蓝溶液10ml蒸馏水1000ml二制法将蛋白胨、磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中,校正pH7.1,分装于烧瓶内,121℃高压灭菌15分钟备用;临用时加入乳糖并加热溶化琼脂,冷却至50~55℃,加入伊红和美蓝溶液,摇匀,倾注平板;十八、三糖铁琼脂一成份蛋白胨20g牛肉膏5g乳糖10g蔗糖10g葡萄糖1g氯化钠5g硫酸亚铁铵FeNH42SO42·6H2O硫代硫酸钠酚红琼脂12g蒸馏水1000ml二制法将除琼脂和酚红以外的各成份溶解于蒸馏水中,pH7.4;加入琼脂,加热煮沸,以融化琼脂;加入0.2%酚红水溶液12.5ml,摇匀;分装试管,装量宜多些,以便得到较高的底层;121℃高压灭菌15分钟;放置高层斜面备用;十九、三糖铁琼脂换用方法一成份蛋白胨15g肘胨5g牛肉膏3g酵母膏3g乳糖10g蔗糖10g葡萄糖1g氯化钠5g硫酸亚铁疏代硫酸钠琼脂12g酚红蒸馏水1000ml二制法将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中校正pH7.4;加入琼脂,加热煮沸,以融化琼脂;加入0.2%酚红水溶液12.5ml,摇匀;分装试管,装量宜多些,以便得到较高的底层;121℃高压灭菌15分钟,放置高层斜面备用;二十、血消化汤一成份绞碎猪胃100g绞碎猪血块100g磷酸二氢钾1g2N碳酸钠溶液50ml浓盐酸10ml蒸馏水1000ml二制法1.洗涤猪胃,除去油脂,保留胃粘膜,用绞肉机续碎;2.用绞肉机将猪血块绞碎;3.将蒸馏水加热至55℃,加入猪胃、猪血块和盐酸,置55℃水浴中24小时,常加以摇动;4.从水浴锅内取出,加入2N碳酸钠液5ml,煮沸10分钟,置于冰箱内一夜;5.吸取上层清液,加磷酸氢二钾1g,加热至75℃,加入2N碳酸钠溶液45ml,煮沸,校正pH7.2~7.4;6.用滤纸过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌20分钟;注:①本培养基不含糖可供作鉴别培养基的基础,不需加蛋白胨和氯化钠;②2N碳酸钠溶液的配法:无水碳酸钠10.6g,溶于1000ml蒸馏水中;二十一、克氏双糖铁琼脂KI一成份下层:血消化汤pH7.6 500ml琼脂2g葡萄糖1g0.2%酚红溶液5ml上层:血消化汤pH7.6 500ml琼脂硫代硫酸钠硫酸亚铁按乳糖5g0.2%酚红溶液5ml二制法1.取血消化汤按上层和下层的琼脂用量,分别装入琼脂,加热溶解;2.分别加入其他各种成分;将上层培养基分装于烧瓶内;将下层培养基分装于灭菌试管内,12×100mm,每管约2ml;10磅高压灭菌15分钟;3.将上层培养基放在56℃水浴箱内保温;将下层培养基直立放在室温内,使其凝固;4.俟下层培养基凝固后,以无菌手续将上层培养基分装于下层培养基的上面,每管约,放成斜面;二十二、克氏双糖铁琼脂换用方法一成份蛋白胨20g牛肉膏3g酵母膏3g乳糖10g葡萄糖1g氯化钠5g柠檬酸铁铵疏代硫酸钠琼脂12g酚红蒸馏水1000ml二制法将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH7.4;加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂;加入0.2%酚红水溶液12.5ml,摇匀;分装试管,装量宜多些,以便得到比较高的底层;121℃高压灭菌15分钟;放置高层斜面备用;二十三、动力—硝酸盐培养基A法一成份蛋白胨5g牛肉膏3g硝酸钾1g琼脂3g蒸馏水1000ml二制法加热溶解,校正pH7.0;分装试管,每管10ml,121℃高压灭菌15分钟;二十四、动力—硝酸盐培养基B法一成份蛋白胨5g牛肉膏3g硝酸钾5g磷酸氢二钠半乳糖5g甘油5g琼脂3g蒸馏水1000ml二制法将上各成份混合,加热溶解,校正pH7.4;分别装试管,121℃高压灭菌15分钟;二十五、马丁氏肉汤一成份猪胃数个过滤清水普通水150ml纯盐酸15ml二制法取猪胃去掉筋膜及脂肪,以绞肉机绞碎,每300g猪胃加盐酸15ml,过滤水150ml,于50℃消化24小时每小时搅拌1~2次,取出后加热至80℃,使消化作用停止,并用NaOH中和,调PH 至7.2,用滤纸过滤,分装试管或小三角烧瓶,15磅高压15分钟灭菌;二十六、察氏培养基一成份硝酸钠3g磷酸氢二押1g梳酸镁MgSO4·7H2O氯化钾硫酸亚铁蔗糖30g琼脂20g蒸馏水1000ml二制法加热溶解,分装后121℃灭菌20分钟;三用途青霉、曲霉鉴定及保存菌种用;二十七、马铃薯葡萄糖琼脂PDA一成份马铃薯去皮切块300g葡萄糖20g琼脂20g蒸馏水1000ml二制法将马铃薯去皮切块,加1000ml蒸馏水,煮沸10~20分钟;用纱布过滤加蒸馏水至1000ml;加入葡萄糖和琼脂,加热溶化,分装,121℃高压灭菌20分钟;三用途:分离培养霉菌;二十八、马铃薯琼脂一成份马铃薯去皮切块200g琼脂20g蒸馏水1000ml二制法同马铃薯葡萄糖琼脂;三用途鉴定霉菌用;二十九、Elek氏培养基毒素测定用一成份肘胨20g麦芽糖3g乳糖氯化钠5g琼脂15g40%氢氧化钠溶液蒸馏水1000ml二制法用500ml蒸馏水溶解除琼脂外的成份,煮沸,并用滤纸过滤;用1N氢氧化钠校正pH7.8;用另外500ml蒸馏水加热溶解琼脂;将两液混合,分装试管10ml或20ml;121℃高压灭菌15分钟;临用时加热溶化琼脂倾注平板;三十、胰蛋白胨水一成份胰蛋白胨10g蒸馏水1000ml二制法将上述成份溶解,校正pH7.0;分装试管,121℃高压灭菌15分钟;三十一、3.5%氯化钠三糖铁琼脂一成份三糖铁琼脂1000ml氯化钠30g二制法按本附录十八或十九配制三糖铁琼脂,再加入氯化钠30g,分装试管,121℃高压灭菌15分钟;放置高层斜面备用;三十二、牛肉或牛心消化汤一成份绞碎牛肉或牛心1000g15%氢氧化钠溶液27ml胰蛋白酶40ml氯仿1ml氯化钠10g蒸馏水200ml二制法1.称取碎牛肉,加蒸馏水,隔水加热到80℃,维持15分钟;2.加氢氧化钠溶液,对pH试纸呈弱碱性,冷却至40℃;3.加胰蛋白酶、氯仿,在36±1℃放置4~5小时,每小时摇动一、二次;4.4小时后,吸取上层液5ml于试管中,加1%硫酸铜溶液、4%氢氧化钠溶液5ml,混合之;若呈红色,则不须再消化,可由温箱取出;5.加入15%乙酸溶液45ml,对pH试纸呈酸性;6.煮沸15分钟,使胰蛋白酶破坏,冷后,放冰箱内一夜;7.次日吸取上层清液,加氯化钠10g,并加水补足原量,煮沸;8.校正~加15%氢氧化钠液约10ml加热,用滤纸过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌20分钟;注:①此培养基可作为琼脂培养基的基础,不需要加蛋白胨;②胰蛋白酶之配制:称取去脂绞碎的猪胰500g,加入乙醇500ml,蒸馏水1500ml,混合之,装入玻塞瓶内;每日摇匀三次,三天后,用绒布过滤挤出其汁,加盐酸至0.05%,放冰箱内保存备用;三十三、%蛋白胨水稀释剂一成份蛋白胨1g蒸馏水1000ml二制法溶解蛋白胨于蒸馏水中,校正pH至,121℃灭菌15分钟;Yeast extract 3 酵母膏Malt extract 3Peptone from soybeans 5Glucose 10Agar 15Distilled water 1000MA medium Ichimura,1979Working solutiong/l NaNO3KNO3CaNO32·4H2ONa2SO4Β-SodiumglycerophosphateNa2EDTAZnCl2CoCl2 .6H2OH3BO3BicineDistilled water 1000mlpHF/2培养基对于藻体的高密度培养,将F/2培养基的A改为乙酸铵:L,B改为NaH2PO4:LSE MediumWorking solution g/lNaNO3K2HPO4 . 3H2OMgSO4 . 7H2OCaCl2 . 2H2OKH2PO4NaClSoil extract 40mlFeCl3·6H2OFe—EDTA 1mlA5solution 1distilled water 958Soil Extract土壤提取液配置方法取花园土未施过肥0;5kg置于烧杯或三角瓶中,加入蒸馏水1000毫升,瓶口用透气塞封口,在水浴中沸水加热2小时,冷却数小时,在无菌条件下过滤,取上清液,将灭菌蒸馏水加入上清液至总体积1000毫升;土壤提取液保存在4ºC备用; Composition of the A5 solutionAdd to 100 ml of distilled water:H3BO3286 mg MnCl2 . 4H2O 181 mg ZnSO4 . 7H2O 22 mgCuSO4 . 5 H2O Na2MoO4·2H2Omg 39mgNH46Mo7O24 .4H2OmgEDTA-Fe的配置方法:将EDTA和FeCl3·6H2O分别溶于水和HCl,混匀即可;Na2EDTA 1gdistilled water 50mlFeCl3·6H2O 81 mgHCl 50ml微量元素溶液 A5 是BG-11培养基微量元素的重要组成部分;BG-11是培养蓝藻使用最广泛的培养基,除了极少数蓝藻,大部分都可以用BG-11培养基; A5微量溶液组成成分Add to 1000 ml of distilled water:将以下物质称量并定容至1000mlH3BO3 …………………………………………MnCl2 ·H2O …………………………………ZnSO4 ·7H2O ………………………………CuSO4 ·5 H2O ………………………………Na2MoO4 ·2H2O……………………………CoNO32 ·6H2O …………………………BBM培养基BBM Medium雨生红球藻生长最好的培养基若要用于虾青素积累要加L的乙酸钠Component Amount Stock Solution1 NaNO3 1 mL/L 25 g/100mldH2O2 K2HPO4 1 mL/L g/100 mL dH2O3 MgSO4·7H2O 1 mL/L g/100 mL dH2O4 CaCl2·2H2O 1 mL/L g/100 mL dH2O5 KH2PO4 1 mL/L g/100 mL dH2O6 NaCl 1mL/L 100ml dH2O7 B1 1mg/L8 biotin L9 B12 L10 PIV Trace mental solution 1ml/LNa2EDTA L dH2OMnCl2·4H2O L dH2OZnCl2·7H2O L dH2ONa2MoO4·2H2O L dH2OFeCl3·6 H2O L dH2OH2O L dH2OBG11 Blue-Green MediumComponent Amount Stock Solution1 NaNO3 100 mL/L g/L dH2O2 K2HPO4 10 mL/L 2 g/500 mL dH2O3 MgSO4·7H2O 10 mL/L g/500 mLdH2O4 CaCl2·2H2O 10 mL/L g/500 mL dH2O5 Citric acid 10 mL/L g/500 mL dH2O6 Ferric ammonium citrate 10 mL/L 500ml dH2O7 EDTANa2 10 mL/L 500ml dH2O8 Na2CO3 10 mL/L 500ml dH2O9 A5 Trace mental solution 1ml/LH3BO3 L dH2OMnCl2·4H2O L dH2OZnSO4·7H2O L dH2OL dH2OCuSO4. 5 H2O L dH2OCoNO3 H2O L dH2OAdjust PH to with 1M NaOH or HClJM培养基Component Amountmg/L1 NaNO3 15002CaNO32·4H2O 203 KH2PO44 Na2HPO4 ·12 H2O 365 Na2HCO36 MgSO4·7H2O 507 H3B038Na2一EDTA9 NaFeEDTA10 NH46MoO24·4H2O11Cyanocobalami12ThiamineHCI13Biotin。

常用培养基配方范文

常用培养基配方范文

常用培养基配方范文培养基配方是微生物学研究的基础,它们提供了养分和条件,促进微生物的生长和繁殖。

常用培养基配方有多种,以下是几个常用的配方范文。

一、莱文斯坦-鲍德尔培养基(Luria-Bertani agar)配方:成分:1.蛋白胨:10克2.酵母提取物:5克3.食盐:10克4.琼脂:15克5.蒸馏水:1000毫升6.高氯酸钠(0.1M):2毫升(pH7.2)制备方法:1.将蛋白胨、酵母提取物和食盐加入蒸馏水中,加热至溶解。

2.加入琼脂并搅拌均匀,再加入高氯酸钠调节pH值。

3.煮沸1~2分钟,然后分装入培养皿中。

注意事项:1.注意消毒操作,以防止污染。

2.琼脂的煮沸时间通常为15~20分钟。

二、营养琼脂培养基(Nutrient agar)配方:成分:1.蛋白胨:5克2.细胞色素:1克3.维生素B1:0.1克4.卵黄:10克5.食盐:5克6.琼脂:15克7.蒸馏水:1000毫升制备方法:1.将蛋白胨、细胞色素、维生素B1、卵黄和食盐加入蒸馏水中并加热溶解。

2.加入琼脂并搅拌均匀。

3.煮沸1~2分钟,然后分装入培养皿中。

注意事项:1.注意消毒操作,以防止污染。

2.煮沸时间可根据需要适当延长,但不要超过20分钟。

三、马尿素琼脂培养基(MacConkey agar)配方:成分:1.蛋白胨:17克2.硼砂:1.5克3.细胞色素:2.5克4.氯化钠:5克5.水合甲基红:0.03克6.钴绿:0.015克7.红绿二色砂:0.15克8.琼脂:13.5克9.蒸馏水:1000毫升制备方法:1.将蛋白胨、硼砂、细胞色素、氯化钠、水合甲基红、钴绿和红绿二色砂加入蒸馏水中并加热溶解。

2.加入琼脂并搅拌均匀。

3.煮沸1~2分钟,然后分装入培养皿中。

注意事项:1.注意消毒操作,以防止污染。

2.此培养基适用于选择肠道革兰氏阴性杆菌。

以上是常用的几个培养基配方范文,供参考使用。

在制备培养基时,需要注意消毒操作,以防止污染。

另外,不同微生物对培养基的要求也有所不同,可以根据实际需要进行配方的修改和优化。

实验室常用培养基的配制方法

实验室常用培养基的配制方法

实验室常用培养基的配制方法实验室中常用的培养基种类繁多,每一种培养基的配方也各有不同。

下面将介绍几种常见的培养基的配制方法。

1. Luria-Bertani (LB) 培养基:LB培养基通常用于大肠杆菌等细菌的培养。

其主要成分包括蛋白胨、酵母浸膏和食盐。

下面是LB培养基的配制方法:-将10克蛋白胨、10克酵母浸膏和10克食盐加入到1升蒸馏水中。

-用玻璃棒搅拌溶解,然后倒入培养瓶中。

-使用自动压力灭菌器或高压灭菌锅将培养基置于121摄氏度下高压下灭菌20分钟。

-灭菌后,培养基冷却至室温后即可使用。

2.孟德尔培养基:孟德尔培养基常用于植物细胞培养。

其主要成分包括盐类、碳源和维生素。

下面是孟德尔培养基的配制方法:-将所需的盐类(例如硫酸镁、硝酸钾)按照指定比例称量,并加入到1升蒸馏水中。

-添加适量的碳源(例如葡萄糖或蔗糖)以提供能量。

-加入维生素溶液,通常可以购买到已配制好的维生素混合液。

-搅拌溶解后,用自动压力灭菌器或高压灭菌锅将培养基置于121摄氏度下高压下灭菌20分钟。

-灭菌后,培养基冷却至室温后即可使用。

3.YPD培养基:YPD培养基可以用于酵母菌的培养。

其主要成分包括酵母提取物、葡萄糖和酵母浸膏。

下面是YPD培养基的配制方法:-将10克酵母提取物、20克葡萄糖和20克酵母浸膏加入到1升蒸馏水中。

-使用玻璃棒搅拌溶解,然后倒入培养瓶中。

-使用自动压力灭菌器或高压灭菌锅将培养基置于121摄氏度下高压下灭菌20分钟。

-灭菌后,培养基冷却至室温后即可使用。

4. Brain Heart Infusion (BHI) 培养基:BHI培养基可以用于细菌和真菌的培养。

其主要成分包括脑提取物、心脏提取物、肉浸膏和葡萄糖。

-将37克BHI粉末加入到1升蒸馏水中。

-使用玻璃棒搅拌溶解,然后倒入培养瓶中。

-使用自动压力灭菌器或高压灭菌锅将培养基置于121摄氏度下高压下灭菌20分钟。

-灭菌后,培养基冷却至室温后即可使用。

36种常用微生物培养基配制汇总

36种常用微生物培养基配制汇总

36种常用微生物培养基配制汇总微生物培养基是一种用于培养和繁殖微生物的营养介质,通常包含碳源、氮源、无机盐、维生素和辅助物质。

不同微生物对培养基的要求不同,因此配制不同的培养基可以满足不同微生物的需求。

下面是常用的36种微生物培养基的配制方法。

1. Luria-Bertani培养基:取1L蒸馏水,加入10g蛋白胨、5g酵母粉、10g海藻糖,调pH至7.0,加入蒸馏水补足至1L。

2. 马铃薯葡萄糖培养基:取马铃薯50g,洗净去皮切块,加入1000ml蒸馏水中,煮沸15分钟,过滤得到1000ml的马铃薯汁液,加入20g葡萄糖,调pH至7.0,加入蒸馏水补足至1L。

3.BHIA培养基:取1L蒸馏水,加入37gBHIA粉,调pH至7.2-7.4,加入蒸馏水补足至1L。

4. 番茄汁琼脂培养基:取200ml番茄汁、20g琼脂,加入800ml蒸馏水中,煮沸溶解琼脂,过滤得到1L的番茄汁琼脂培养基。

5. Sabouraud培养基:取1L蒸馏水,加入20g葡萄糖、10g蛋白胨、40g沙门氏糖,调pH至5.6-5.8,加入蒸馏水补足至1L。

6.TSB培养基:取1L蒸馏水,加入17gTSB粉,调pH至7.3-7.5,加入蒸馏水补足至1L。

7.LB培养基:取1L蒸馏水,加入10g蛋白胨、5g酵母提取物、10g氯化钠,调pH至7.0,加入蒸馏水补足至1L。

8.爱德华培养基:取1L蒸馏水,加入20g牛肉精、10g酵母提取物、5g胆汁、10g胆石脂、5g葡萄糖,调pH至7.4-7.6,加入蒸馏水补足至1L。

9.VC培养基:取1L蒸馏水,加入10g蔗糖、10g大豆蛋白酸水解物、2g柠檬酸钠、0.1g亚铁氯化物、0.1g亚铜硫酸盐、0.1g亚锰酸盐、0.02g硼酸、0.1g维生素B1、0.02g抗坏血酸,调pH至7.0,加入蒸馏水补足至1L。

10. 铁琼脂培养基:取200ml铁琼脂粉,加入800ml蒸馏水中,煮沸溶解琼脂,过滤得到1L的铁琼脂培养基。

培养基配方及配制方法

培养基配方及配制方法

培养基配方及配制方法一、培养基配方常用的培养基是复合培养基,包含有机成分和无机成分两部分。

其中,有机成分提供微生物所需的碳源、氮源和能源等,无机成分提供微生物所需的无机盐和微量元素等。

以下是一个典型的复合培养基配方:有机成分:1.蛋白胨:提供氮源和碳源;2.葡萄糖:提供碳源和能源;3.酵母提取物:提供维生素和微量元素。

无机成分:1.磷酸盐缓冲液:提供pH缓冲效果;2.硝酸盐:提供氮源和无机盐;3.氯化钠:提供无机盐;4.磷酸氢二钾:提供缓冲效果和无机盐;5.硫酸镁:提供镁离子。

二、培养基配制方法1.准备容器:使用无菌烧瓶、试管、培养皿等容器,并用高压蒸汽灭菌器进行灭菌处理。

2.称量成分:按照配方中的比例,准确称量有机成分和无机成分。

3.溶解有机成分:将蛋白胨、葡萄糖和酵母提取物分别加入适量的蒸馏水中,通过搅拌或加热溶解均匀。

4.准备无机成分溶液:将磷酸盐缓冲液、硝酸盐、氯化钠、磷酸氢二钾和硫酸镁按照配方中的比例加入适量的蒸馏水中,通过搅拌溶解均匀。

5.校正pH值:使用pH计测定培养基的pH值,如有需要,可以用盐酸或氢氧化钠调节pH值至合适的范围。

6.加入蛋白胨溶液:将溶解好的蛋白胨溶液加入无机成分溶液中,并通过搅拌均匀。

7.加入葡萄糖溶液:将溶解好的葡萄糖溶液加入已配制好的培养基中,并通过搅拌均匀。

8.加入酵母提取物:将酵母提取物溶液加入培养基中,并通过搅拌均匀。

9.调节体积:根据实验需要,可以添加蒸馏水或其他添加剂来调节培养基的体积和浓度。

10.灭菌处理:将配制好的培养基进行高压蒸汽灭菌处理,保证培养基的无菌状态。

以上就是一个典型的培养基配方及配制方法的示例,只是其中的一个例子,不同的微生物可能需要不同的培养基配方和配制方法。

在实验中,根据具体的需求调整培养基的配方,确保能满足微生物的生长需求,并通过灭菌处理保证培养基的无菌状态。

146种常见培养基的配方

146种常见培养基的配方

146种常见培养基的配方培养基是微生物学实验中常用的一种重要实验工具,通过调配合适的培养基,可以提供微生物生长所需的营养物质,从而促进微生物菌落的繁殖和生长。

下面将介绍一些常见的培养基配方,涵盖了常用的总结培养基、选择性培养基和不同微生物类群的专用培养基。

1.琼脂肉汤培养基(NB)-牛肉脱脂粉5g-酵母提取物2.5g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml2.大肠杆菌复合培养基(LB)-液体培养基-蛋白胨10g-酵母提取物5g-NaCl5g- 蒸馏水 1000ml-琼脂板-蛋白胨10g-酵母提取物5g-NaCl5g-琼脂15g- 蒸馏水 1000ml3. 肠杆菌选择性琼脂培养基(MacConkey琼脂培养基)-蛋白胨17g-紫胆汁盐1.5g-普鲁士蓝盐1.5g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml4. 脱氧胆盐琼脂培养基(Deoxycholate Agar)-脱氧胆酸钠20g-普鲁士蓝盐0.8g-蛋白胨7.5g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml5.阿米巴选择性琼脂培养基(KV培养基)- 鸡蛋清 20ml- 中性红溶液 12ml-NaCl0.5g-纤维素0.25g- 盐酸 1ml-琼脂15g- 蒸馏水 1000ml6. 革兰氏阳性菌选择性琼脂培养基(Mannitol Salt Agar)-蔗糖10g-氯化钠75g-酵母提取物5g-麦芽提取物1g-琼脂15g- 蒸馏水 1000ml7. 维生素富集琼脂培养基(Burkholder's Basal Salt Medium)-NaNO31g-KCl0.5g-MgSO4·7H2O0.2g-CaCl2·2H2O0.02g-FeSO4·7H2O0.01g-琼脂14g- 蒸馏水 1000ml8. 三氯化铁琼脂培养基(Cetrimide Agar)-硫酸镁0.8g-氯化钴0.05g-氯化锌0.01g-氯化亚铁0.03g-三氯化铁0.03g-比色琼脂糖15g- 过滤蒸馏水 1000ml9. 库氏四甲基铵琼脂培养基(Chapman Agar)-高氯酸钠5g-脲7.5g-酵母提取物2g-海藻酸钠20g-紫胆汁盐0.25g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml10. 还原格兰氏琼脂培养基(Reduced Gram-negative Broth)-蛋氨酸0.5g-异亮氨酸0.5g-半胱氨酸0.5g-菜碱0.5g-胀氨酸0.5g-琼脂7g- 蒸馏水 1000ml这些是其中的一部分常见的培养基配方,涵盖了常用的总结培养基、选择性培养基和不同微生物类群的专用培养基。

常用培养基的配制方法

常用培养基的配制方法

实验室常用培养基的配制方法LB培养基组份浓度:1% (W/V) Tryptone, 0.5% (W/V) Yeast Extract, 1% (W/V) NaCl配制量:1 L配制方法1. 称取(10 g Tryptone, 5 g Yeast Extract, 10 g NaCl)置于1 L的烧杯中。

2. 加入800 ml的去离子水,充分溶解。

3. 用1 M 的NaOH 调节PH 值至7.0。

4. 用去离子水定容至1 L。

5. 高温高压灭菌后,4℃保存SOB培养基组份浓度:2% (W/V) Tryptone,0.5% (W/V) Yeast Extract,0.05% (W/V) NaCl 2,5 mM KCl,10 mM MgCl2配制量:1 L配制方法1. 配制250 mM KCl溶液:将1.86 gKCl溶解在90 ml的去离子水中,定容至100 ml。

2. 配制2 M MgCl 2溶液:将19 g MgCl2溶解在90 ml的去离子水中,定容至,100 ml,高温高压灭菌。

3. 称取20 g Tryptone,5 g Yeast Extract 0.5 g NaCl 置于1 L烧杯中。

4. 加入800 ml的去离子水,充分溶解。

5. 取10 ml 250 mM KCl溶液,加入烧杯中。

6. 用1 M 的NaOH 调节PH7.0值至。

7. 用去离子水定容至1 L。

8. 高温高压灭菌后,4℃保存。

9. 使用前加入5 ml灭菌的2 M MgCl2溶液。

SOC培养基组份浓度:2% (W/V) Tryptone ,0.5% (W/V) Yeast Extract ,0.05% (W/V) NaCl ,2.5 mM KCl 10 mM MgCl 2,20 mM glucose。

配制量:100 ml配制方法1. 配制1 M 的glucose溶液:将18 g的glucose溶解在90 ml的去离子水中,定容至100 ml,用0.22 μm滤膜过滤除菌。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

常用培养基的配制
(一)营养琼脂培养基
【用途】供细菌总数测定、保存菌种、细菌纯化、一般细菌培养、血琼脂培养基基础之用。

【成分】牛肉膏 3g
NaCl 5g
蛋白胨 10g
琼脂 20g
【pH值】7.2±0.2
【制法】上述成分称取38g加蒸馏水1000ml,经121.3℃ 30min高压灭菌备用。

(二)蛋白胨水培养基
【用途】供细菌培养、吲哚试验之用。

【成分】蛋白胨 10g
氯化钠 5g
【pH值】7.6
【制法】将上述成分溶于1000ml蒸馏水中,过滤,分装于试管,每管2~3ml,经121.3℃20min高压灭菌备用。

(三)半固体培养基
【用途】供观察细菌动力、菌种保存、H抗原位相变异试验等。

【成分】蛋白胨 10g
氯化钠 5g
琼脂 2.5~3g
【pH值】7.6
【制法】上述成分加入1000ml蒸馏水中,加热溶解,分装于试管,每管3~4ml,经121.3℃ 20min高压灭菌备用。

(四)营养肉汤培养基
【用途】供一般细菌培养、转种、复苏、增菌等,也可用于消毒效果的测定。

【成分】蛋白胨 10g
氯化钠 5g
牛肉粉(牛肉浸汁) 3g
【pH值】7.2±0.2
【制法】将上述成分溶于1000ml蒸馏水中,分装小试管,每管2~3ml,经121.3℃ 20min 高压灭菌备用。

(五)葡萄糖蛋白胨水培养基
【用途】供甲基红试验及V-P试验之用。

【成分】蛋白胨5g
葡萄糖5g
K2HPO4 (K2HPO4·3H2O) 5g (0.65g)
【pH值】7.0~7.2
【制法】将上述成分溶于1000ml蒸馏水中,过滤,分装试管,每管2~3ml,经112.6 ℃ 20min高压灭菌备用。

(六)伊红美蓝培养基(EMB培养基)
【用途】弱选择性培养基,用于分离肠道致病菌,特别是大肠杆菌。

【成分】蛋白胨10g
乳糖10g
伊红 0.4g
美兰 0.065g
琼脂14g
K2HPO4 2g
【pH值】7.2±0.4
【制法】上述成分称取36g加蒸馏水1000ml摇匀,经121.3℃ 15min高压灭菌,待冷
却至60℃左右倾注灭菌平皿备用。

(七)S-S琼脂培养基
【用途】供沙门氏菌、志贺氏菌的选择性分离培养之用。

【成分】蛋白胨 5g
乳糖10g
牛肉粉 5g
三号胆盐 3.5g
琼脂 17g
柠檬酸钠 8.5g
柠檬酸铁 1g
硫代硫酸钠 8.5g
中性红 0.025g
煌绿 0.00033g
【pH值】7.0±0.1
【制法】上述成分称取60g加蒸馏水1000ml,加热煮沸至完全溶解,待冷却至60℃左
右倾注灭菌平皿备用。

(八)中国蓝蔷薇酸琼脂培养基
【用途】供肠道致病菌的分离鉴别之用。

【成分】蛋白胨10g
乳糖10g
牛肉粉 3g
琼脂13g
氯化钠 5g
中国蓝 0.05g
玫红酸 0.1g
【pH值】7.0±0.2
【制法】称取本品40g加蒸馏水1000ml,煮沸溶解后,112.6℃ 30min高压灭菌,待
冷却至60℃左右时倾注灭菌平皿备用。

(九)沙保弱氏琼脂培养基
【用途】供真菌的分离培养,菌种保存之用。

【成分】蛋白胨10g
麦芽糖(葡萄糖)40g
琼脂20g
【pH值】5.5~6.0(一般不调节) 【制法】上述成分加蒸馏水1000ml,煮沸溶解后,112.6℃ 15min灭菌,待冷至60℃
左右时倾注灭菌平皿备用。

(十)血琼脂培养基
【用途】供观察某些细菌的溶血作用,分离培养营养要求较高的细菌之用。

【成分】普通营养琼脂培养基 100 ml
脱纤维羊血(或兔血) 5~10ml
【pH值】7.6
【制法】将普通营养琼脂培养基121.3℃ 20min高压灭菌,待冷却至50℃左右时,加入无菌脱纤维羊血(或兔血)轻轻摇匀,不要发生气泡,倾注灭菌平皿或制成斜面备用。

(十一)0.1%石炭酸琼脂平板培养基
【用途】供分离变形杆菌和被变形杆菌污染的其他细菌之用。

【成分】普通营养琼脂培养基 100ml
石炭酸1g
【pH值】7.6
【制法】上述成分121.3℃ 15min高压灭菌,倾注灭菌平皿备用。

(十二)液体硫乙酸盐培养基(FT)(需氧菌、厌氧菌培养基)
【用途】用于药品和生物制品的无菌检验,检测好氧菌、厌氧菌。

【成分】胰酪胨15g
L—胱氨酸 0.5g
葡萄糖 5g
酵母膏粉 5g
氯化钠 2.5g
硫乙醇酸钠 0.5g
刃天青 0.001g
琼脂 0.75g
【pH值】7.1±0.2
【制法】称取本品29.3g加入1000ml蒸馏水中,搅拌加热至完全溶解,分装于试管,121.3℃ 15min高压灭菌备用。

(十三)庖肉培养基
【用途】用于一般厌氧培养,肉毒梭菌及厌氧梭状芽孢杆菌的检验(GB标准)。

【成分】牛肉渣、牛肉浸液。

【pH值】7.4~7.6
【制法】肉浸汤剩余的肉渣装入中试管内,约1~1.5cm高。

加入肉汤培养基5ml,再加入1:3液体石蜡(或凡士林),高0.2~0.3cm。

经112.6℃ 15min 高压灭菌,保存于4℃冰箱备用。

相关文档
最新文档