凝固酶试验

《医学微生物学》血浆凝固酶实验与肥达氏反应实验

《医学微生物学》血浆凝固酶实验与肥达氏反应实验[目的]1．掌握肥达试验的原理，操作方法及结果判断。

2．熟悉血浆凝固酶试验的意义。

3．熟悉其临床意义。

[材料]1．菌种金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌和柠檬色葡萄球菌。

2．其他新鲜兔血浆(或人血浆)、NS等3．菌种感染伤寒沙门菌或副伤寒沙门菌的模拟血清标本（稀释度1：10）。

4．试剂伤寒沙门菌菌体抗原及鞭毛抗原、甲型副伤寒沙门菌鞭毛抗原及乙型副伤寒沙门菌鞭毛抗原。

5．微孔反应板、50μl移液枪、移液咀、37℃或52℃水浴箱等。

[内容]（一）血浆凝固酶试验：[原理]：血浆凝固酶是能使含有枸橼酸钠或肝素抗凝剂的人或兔的血浆发生凝固的蛋白质。

金黄色葡萄球菌能产生两种类型的血浆凝固酶，一种可使血浆中纤维蛋白原变为不溶性纤维蛋白，附着于细菌表面，使细菌在玻片上形成凝块，又称结合凝固酶；另一种被称为游离凝固酶，可使血浆中液态的纤维蛋白原变成固态的纤维蛋白，导致血浆发生凝固。

[方法]玻片法：取未稀释的兔血浆和生理盐水各一滴分别滴于载玻片上，挑取金黄色葡萄球菌菌落少许分别与它们混合，立即观察结果。

此法用于测定结合型凝固酶。

试管法：取3支10mm×100mm试管，各加0.5ml 1:4稀释的新鲜兔血浆(或人血浆)，在其中一支试管中加0.5ml待检菌的肉汤培养物，另二支试管中分别加0.5ml凝固酶阳性和阴性菌株肉汤培养物作对照，35℃孵育，每30min观察一次，一般观察3h。

此法用于测定游离型凝固酶。

[结果和意义]玻片法：细菌在血浆中聚集成团块，无法混匀则为血浆凝固酶试验阳性；反之，细菌在血浆中呈均匀混浊则为阴性。

试管法：细菌使试管内血浆凝固呈胶冻状，为血浆凝固酶试验阳性，反之，试管内血浆不凝固仍流动的，则为阴性。

血浆凝固酶试验是鉴定致病性葡萄球菌和非致病性葡萄球菌的重要试验之一，前者多为阳性，后者为阴性。

（二）肥达试验[原理]人类感染伤寒或副伤寒沙门菌后，约经l～2周即可在血清中出现抗体(凝集素)，此种抗体与伤寒、副伤寒沙门菌相混合，在适当电解质参与下可出现肉眼可见的凝集现象，根据凝集现象判断凝集效价。

凝固酶试验文章目录*一、凝固酶试验的基本信息1. 定义2. 专科分类3. 检查分类4. 适用性别5. 是否空腹*二、凝固酶试验的正常值和临床意义1. 正常值2. 临床意义*三、凝固酶试验的检查过程及注意事项1. 检查过程2. 注意事项*四、凝固酶试验的相关疾病和症状1. 相关疾病2. 相关症状*五、凝固酶试验的不适宜人群和不良反应1. 不适宜人群2. 不良反应凝固酶试验的基本信息1、定义凝固酶试验是鉴定葡萄球菌致病性的重要试验。

致病性葡萄球菌可产生两种凝固酶,一种是与细胞壁结合的凝聚因子,称结合凝固酶,它直接作用于血浆中纤维蛋白原,使发生沉淀,包围于细菌外面而凝聚成块,玻片法阳性结果是由此凝聚因子所致;另一种凝固酶是分泌至菌体外,称为游离凝固酶,它能使凝血酶原变成凝血酶类产物,使纤维蛋白原变为纤维蛋白,从而使血浆凝固。

试管法可同时测定结合型和游离型凝固酶。

2、专科分类传染病检查3、检查分类病原微生物检查4、适用性别男女均适用5、是否空腹非空腹凝固酶试验的正常值和临床意义1、正常值体内菌群的种类和比例正常,人体处于动态平衡。

2、临床意义本试验仅用于致病性葡萄球的鉴定。

异常结果:侵袭性疾病主要引起化脓性炎症。

葡萄球菌可通过多种途径侵入机体,导致皮肤或器官的多种感染,甚至败血症。

皮肤软组织感染主要有疖、痛、毛囊炎、脓痤疮、甲沟炎、麦粒肿、蜂窝组织炎、伤口化脓等。

内脏器官感染如肺炎、脓胸、中耳炎、脑膜炎、心包炎、心内膜炎等,主要由金葡菌引起。

全身感染如败血症、脓毒血症等,多由金葡菌引起,新生儿或机体防御可能严重受损时表皮葡萄球菌也可引起严重败血症。

毒性疾病由金葡菌产生的有关外毒素引起。

食物中毒进食含肠毒素食物后1-6小时即可出现症状,如恶心、呕吐、腹痛、腹泻,大多数病人于数小时至1日内恢复。

烫伤样皮肤综合征多见于新生儿、幼儿和免疫功能低下的成人,开始有红斑,1-2天有皮起皱,继而形成水疱,至表皮脱落。

由表皮溶解毒素引起。

凝固酶试验操作程序

凝固酶试验操作程序一、试验前准备1.获取试验所需材料：凝固酶试剂、凝血酶原、钙离子溶液、试管、离心管、离心机、吸管等。

2.清洁操作台面和实验器具，确保试验环境的干净和无菌。

3.检查试剂是否过期，确保其有效性和准确性。

4.记录试剂批号和有效期。

二、试验操作1.取一只试管，加入凝血酶原，根据试验目的和要求确定加入的凝血酶原浓度。

2.加入适量的钙离子溶液，并轻轻摇匀试管。

3.加入适量的凝固酶试剂，根据试验目的和要求确定加入的凝固酶试剂浓度。

4.快速反复摇晃试管，使试剂均匀混合。

5.将试管放入37℃恒温水浴中孵育一段时间，通常为15-30分钟。

6.在孵育结束后，观察试管中是否出现凝块。

凝块的形成表示凝血酶原被凝固酶所激活并转变成了凝血酶。

7.用试管夹将试管从37℃恒温水浴中取出，倾斜试管，并观察凝块的物理性质和形状。

8.可以使用离心机对试管进行离心，加速凝块形成和分离。

9.记录试验结果，包括凝块的形状、颜色和强度等，以及凝固酶活性的定量测定结果。

三、结果分析1.凝固酶试验的结果可以通过观察凝块的形态、颜色和强度等进行初步分析。

凝块的形态和颜色通常与凝固酶的活性和浓度相关。

2.如果凝块形成快且较为坚实，说明凝固酶活性较强，凝血过程正常。

3.如果凝块形成时间较长或凝块不坚实，说明凝固酶活性较弱，可能存在凝血异常情况。

4.进一步定量测定凝固酶活性，可以使用专门的凝固酶活性测定方法，如比色法、荧光法等。

5.结果分析时应与正常参考值进行比较，以确定凝固酶活性的正常范围和异常情况。

总结：凝固酶试验是一种简单且常用的实验方法，用于检测和测定血液凝固酶的活性。

通过试验前准备、试验操作和结果分析等步骤，可以得到准确的实验结果，并进一步判断凝血功能的正常与否。

在进行凝固酶试验时，需要注意操作的严谨性和无菌环境的保持，以保证实验结果的准确性和可靠性。

凝固酶试验原理

凝固酶试验：了解血液凝固机制的重要方法凝固酶试验是评估血液凝固机制的一种重要方法。

血液凝固是一
种自然的生理过程，但当凝血机制失调时，可能会导致各种疾病风险
的增加，如血栓形成、心肌梗死和中风等。

凝固酶试验是一种测量血
浆凝固能力的方法，它通常用于诊断凝血障碍和肝脏疾病。

凝固酶试验的原理是在血浆中加入凝血酶原和钙离子（Ca2+），
经过一系列的酶反应后，形成凝血酶，使纤维蛋白原转化为纤维蛋白，进而生成凝血块。

通过测量产生凝块所需的时间或生成凝块的硬度来
评估血液凝固能力。

凝固酶试验的操作流程相对简单，需要血浆样本作为测试材料。

首先，采集血浆，并在样本中添加钙离子和凝血酶原。

通过观察凝固
的时间和完整度，就可以对血液凝固进行初步评估。

在某些情况下，
还可以使用派对凝固酶试验或其他相关测试，以便对凝固机制进行更
深入的鉴定。

凝固酶试验可以为医师提供许多有用的信息，包括是否存在凝血
障碍和肝脏病等问题。

根据测试结果，医师可以制定治疗计划并监测
治疗的功效。

此外，凝固酶试验还可以用于检测遗传性凝血障碍和评
估重度出血或血栓症患者的风险。

总之，凝固酶试验是一种简单、有效的方法，可用于评估血液凝
固机制和识别与凝血有关的疾病。

医师可以根据这些测试结果，更好
地了解病人的状况，并采取适当的医疗措施。

三种鉴定葡萄球菌凝固酶方法的比较

三种鉴定葡萄球菌凝固酶方法的比较目的评价3种鉴定葡萄球菌凝固酶方法的敏感性和特异性。

方法临床分离的110株葡萄球菌，经过革兰染色，显色培养基显色培养，触酶试验，VITEK32鉴定后，用试管法、玻片法、商品乳胶血凝法（slidex staph-kit），鉴定葡萄球菌和评价凝固酶试验方法。

3种方法结果不一致的菌株进行重复试验。

用兔血浆试管法作为标准，比较其它凝固酶方法的敏感性、特异性。

结果兔血浆试管法检测到65株阳性菌株，以此为标准，兔血浆玻片法有3株假阳性，人血浆玻片法和乳胶血凝法的假阳性分别为8株和2株。

人血浆试管法的鉴定符合率为100%，其余各种方法的敏感性均为100%，而特异性（兔血浆和人血浆玻片法，乳胶凝集试验）分别为95.6%，88%，和98.5%。

结论人血浆凝固酶试管法敏感性特异性均较高，是鉴定葡萄球菌凝固酶试验的好方法，适合于各基层临床实验室对葡萄球菌的鉴定。

标签：金黄色葡萄球菌；血浆凝固酶；乳胶试剂耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）是医院内感染的重要病原菌，然而临床标本中金黄色葡萄球菌鉴定中往往困扰者广大检验工作者，血浆凝固酶试验是鉴定金黄色葡萄球菌的重要方法之一。

鉴定的准确性直接关系到进一步上机鉴定及药敏试验判断及MRS纸片法筛选判断。

凝固酶分为两种：游离性凝固酶，结合型凝固酶，游离型凝固酶常用试管法鉴定，结合型凝固酶常用玻片法鉴定。

随着现代微生物技术的不断发展，许多医院开始选用法国梅里埃公司生产的葡萄球菌乳胶凝集试剂作为检出金黄色葡萄球菌的常规筛选试验试剂，虽然乳胶试剂盒简便，快速，但是易出现假阳性且价格昂贵。

为寻找一种适合广大基层医院实验室对葡萄球菌鉴定经济，简便的鉴定方法。

本文以兔血浆试管法为标准[1]，对110株临床分离的葡萄球菌凝固酶分别进行兔血浆，人血浆凝固酶试验和乳胶凝集试验。

评价其敏感性，特异性。

1 材料与方法1.1材料1.1.1菌株来源110株葡萄球菌均来自于我院2011年12月～2013年9月临床分离菌株，保存于-20℃低温冰箱，实验前接种于5%羊血基础平板，取对数生长期菌落进行试验。

A蛋白与凝固酶凝集试验在金黄色葡萄球菌快速鉴定中的应用

维普资讯
国际检验医学杂志２００６年１０月第２卷第１Ｉｔ．ｄ（ｃｂｒ２０’ ｏ．７，ｏ．０７Ｏ期ｎＩｂＭｅ．）ｏｅ０６＿１Ｎ１ＪａｔＶ２
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临床研究
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Ａ蛋白与凝固酶凝集试验在金黄色葡萄球菌快速鉴定中的应用
刘芳张进旋梁莉华张礼昀解晓珍蒲晓允
【要】目的探讨金黄色葡萄球菌快速检测的可能性。方法用凝固酶（Ａ）试管法和玻片摘Ｃ（法）葡萄球菌Ａ蛋白（Ｐ两种方法检测６７株葡萄球菌。结果３８株金黄色葡萄球菌中二者和ＳＡ）６７同时呈阳性的有３３株，０阳性率为８．，异性、确性均为１０；Ａ与ＳＡ试验联合使用的阳Ｏ２特准０ＣＰ性率之和高至９．，其他２９株葡萄球菌Ｃ与ＳＡ试验的阳性率之和仅为１．。结论８９而８ＡＰ２４
ａｄｓｎｉｖｔｒ０．ＴｈｏｉｖａｅｏｔｐｙｏｃｓＳｎｅｓｔｉａｅ１ｉｙ０ｅｐｓｔｅｒｔｆＳａｈｃｃｕ．ａｒｕｎｌｚｄｂｏｈＳｉｕｅｓａａｙｅｙｂｔＰＡｅｔａｄｔｓｎｃａｕａｅｔｓｓ９．９。ｗｈｌｈｏｉｉｅｒｔｆｏｈｒ２９ｓｒｉｓｏｔｐｙｏｃｓａａｙｅｙｏｇｌｓｅｔｗａ８ｉｔｅｐｓｔａｅｏｔｅ８ｔａｎｆＳａｈｃｃｕｎｌｚｄｂｅｖｔｅｗａ４．ＣｏｃｕｉｎＳａｈｃｃｕ．ａｒｕａｅｆｓｌｅｅｔｄｂｏｈＳｈｍｓ１．２ｎｌｓｏｔｐｙｏｃｓＳｕｅｓｃｎｂａｔｙｄｔｃｅｙｂｔＰＡｅｔａｄｔｓｎｃａｕａｅｔｓｎｈｓｓａｓａｅｒｐｄ，ｐｃｆｎｅｓｔｅｏｇｌｓｅｔａｄｔｅｅａｓｙｒａｉｓｅｉｃａｄｓｎｉｖ．ｉｉ

实验课：细菌鉴定技术

方法无菌操作将待测菌接种至糖生化小导管， 35℃培养18-24h。
结果阳性反应为黄色（指示剂为酚红），不分解糖则无变化。
（三）葡萄糖O/F 试验
原理：细菌在分解葡萄糖的过程中，必须有分子氧参加的，称为氧化型；能进行无氧降解的为发酵型；不分解葡萄糖的细菌为产碱型。发酵型细菌无论在有氧或无氧环境中都能分解葡萄糖，而氧化型细菌在无氧环境中则不能分解葡萄糖。
细菌鉴定技术
苏州大学附属第二医院周惠琴
实验目的实验内容实验材料
2 实验步骤实验结果
一、实验目的
掌握鉴别细菌常用生化反应试验的原理、结果判读和应用
了解数字编码鉴定技术（API条）的原理和结果判读以及细菌数字编码技术操作和临床意义
实验内容
（一）凝固酶试验
原理：
结合凝固酶（玻片法）
苯丙酮酸
绿色化合物
方法：无菌操作将被检菌接种于苯丙氨酸培养基斜面，于35℃培养18～ 24h，滴加10％三氯化铁试剂3～4滴，自斜面上方流下。结果：
三氯化铁试剂
出现绿色为阳性
（十一）氨基酸脱羧酶试验
原理：具有氨基酸脱羧酶的细菌，能分解氨基酸使其脱羧生成胺（赖氨酸→尸胺，鸟氨酸→腐胺，精氨酸→精胺）和二氧化碳，使培养基变碱。使指示剂显示出来。培养基：氨基酸脱羧酶培养基和氨基酸对照培养基。方法：无菌操作将被检菌分别接种于赖氨酸（或鸟氨酸或精氨酸）培养基和氨基酸对照培养基中，并加入无菌液体石蜡或矿物油，于35℃培养18-24h。
试剂纸片法：无菌操作用氧化酶试纸直接沾取待测菌。结果：阳性者立刻出现红色（盐酸二甲基对苯二胺）或蓝色（盐酸四甲基对苯二胺）。阴性不变色。
（五）克氏双糖铁（KIA）复合试验

金黄色葡萄球菌

1.血浆凝固酶试验：原理:金黄色葡萄球菌能产生结合型血浆凝固酶，可使血浆中可溶性的纤维蛋白原变为不溶性的纤维蛋白，附着于细菌表面，在玻片上形成凝集颗粒；游离型的血浆凝固酶则可使试管中血浆发生凝固。

大多数致病性葡萄球菌能产生血浆凝固酶，而非致病株一般不产生。

因此，血浆凝固酶试验是鉴别葡萄球菌有无致病性的重要指标之一。

葡萄球菌产生的血浆凝固酶有两种，一种是结合凝固酶（用玻片法测试），另一种是游离凝固酶（用试管法检测）。

方法：（1）玻片法：在1张洁净玻片中央加1滴9g／L氯化钠(生理盐水)溶液，用接种环取待检培养物与其混合（设阳性和阴性对照）制成菌悬液，若经10～20s内无自凝现象发生，则加入兔新鲜血浆1环，与菌悬液混合，观察结果。

（如出现颗粒状凝集现象即为阳性。

如不立即发生凝集，可稍待一，二分钟，并轻轻摇动玻片，加速反应，若无凝集时则为阴性。

）（2）试管法：用生理盐水将新鲜兔血浆4倍稀释，取0．5ml于试管再加0.5ml 待测菌浓菌悬液（需做阳性对照及阴性对照。

），混匀后置37℃水浴中，每30min 观察1次结果。

若3小时内试验管和阳性对照管出现凝固，阴性对照管（即浓菌液管）不凝固，为阳性；若阴性，继续观察到24小时，不凝固者为阴性。

（观察结果，将试管微微倾斜，血浆成冻胶样凝块者为阳性，血浆仍为液状者为阴性。

）【结果判断】（1）玻片法：5～10s内出现凝集者为阳性。

（2）试管法：如有凝块或整管凝集出现为阳性。

4h后无上述现象出现，则放置过夜后再观察。

【注意事项】（1）最好使用EDTA抗凝的兔血浆，因为如果使用枸缘酸盐抗凝血浆会产生假阳性结果（2）玻片法：10秒内观察结果，如超过10 秒可出现假阳性，因此必须用试管法验证凝聚因子试验。

2. 耐热核酸酶试验原理：致病性葡萄球菌能产生一种耐热核酸酶，它能分解DNA，使含甲苯胺蓝核酸琼脂显示粉红色玻片法：取融化好的甲苯胺蓝DNA琼脂3ml均匀浇在载玻片上，待琼脂凝固后打上6-8个孔径为2-5mm的小孔，各孔分别加一滴经沸水浴3分钟处理过的待检葡萄球菌和阳性阴性对照葡萄球菌培养物，35℃大气环境孵育3小时，观察有无粉红色圈及其大小。

葡萄球菌生化鉴定实验报告

葡萄球菌生化鉴定实验报告
实验目的：
通过生化鉴定方法，对给定的葡萄球菌进行鉴定。

实验原理：
葡萄球菌是一种常见的革兰氏阳性球菌，可以通过其生化特性进行鉴定。

常用的生化鉴定方法包括：表面蛋白酶、凝固酶、氧化酶、稀蛋白酶、脱氧核糖核酸( DNA酶)等。

实验步骤：
1. 提取葡萄球菌菌株：从实验室保存的菌株中，选取一株葡萄球菌，进行营养琼脂平板培养，并培养至菌落生长。

2. 制备菌液：用无菌的生理盐水将菌落取下，制备葡萄球菌的菌液。

3. 表面蛋白酶试验：取一份菌液，滴加到表面蛋白酶试验板上，观察是否出现菌落周围的溶解圈。

4. 凝固酶试验：取一份菌液，滴加到凝固酶试验管中，观察是否出现凝结。

5. 氧化酶试验：取一份菌液，滴加到氧化酶试纸上，观察是否出现颜色变化。

6. 稀蛋白酶试验：取一份菌液，滴加到稀蛋白酶试纸上，观察是否出现颜色变化。

7. DNA酶试验：取一份菌液，滴加到DNA酶试纸上，观察是否出现颜色变化。

实验结果：
根据实验步骤中观察到的结果，记录下每个试验的结果。

实验结论：
根据实验结果，判断葡萄球菌是否具有表面蛋白酶、凝固酶、氧化酶、稀蛋白酶、DNA酶等酶活性，从而鉴定葡萄球菌的菌株。

实验总结：
通过生化鉴定实验，可以对葡萄球菌进行简单的鉴定，从而获得其生化特征，为后续的研究和应用奠定基础。

同时，实验中需要注意无菌操作，以避免实验结果的偏差。

细菌常用的几种试验

4
氢氧化钾拉丝试验
“氢氧化钾拉丝试验”快速鉴定革兰氏阳性菌 1、原理：由于革兰阴性细菌的细胞壁肽聚糖层数少于稀碱溶液内易于破裂，而释放出未断裂的DNA螺旋，使 KOH菌悬液呈现粘性，可有搅拌后拉出丝来，而革兰阳性菌在稀碱溶液中仍保持不变。 2、试剂：4%KOH水溶液。应新鲜配制。 3、方法：取1滴4%KOH水溶液于洁净玻片上，用接种环于固体培养基上取新鲜配制菌落少许，于KOH溶液中搅拌混匀，并每隔几秒钟上提接种环，观察能否拉出丝来。 4、结果：能用接种环拉出丝来为阳性，仍为混悬液则为阴性。大多数革兰阴性菌于5到10秒内出现阳性，有的需 30到45秒。革兰阳性菌于60秒以后仍阴性。
7
氧化酶试验
原理：具有氧化酶的细菌，首先使细胞色素C氧化，再由氧化型细胞色素C使对苯二胺氧化，生成有色的醌类化合物。
方法：取一洁净的滤纸一小块，涂抹菌苔少许，加一滴氧化酶试剂（对苯二胺溶液）于菌上，观察颜色变化。
判断：立即呈粉红色并迅速转变为紫红色为阳性，不变色为阴性。
意义：肠杆菌科细菌与气单胞、假单胞菌的鉴别
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2.方法：（1）玻片法：取血浆和生理盐水各一滴分别滴到清
洁玻片上，挑去待检菌落分别与血浆及盐水混合，如血浆中出现明显凝集颗粒而盐水中无自凝现象者为阳性。
（2）试管法：取试管两支，分别加入0.5ml的血浆（经生理盐水1：4稀释）挑去菌落数个加入测定管充分研磨混匀，用一只阳性菌株加入对照管，37℃3-4小时。血浆凝固者为阳性。
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2
革兰氏染色
快速染色法：
1、初染：结晶紫染色10秒，水洗，甩干；

凝固酶试验操作程序

凝固酶试验操作程序
1目的
检测葡萄球菌是否产生凝固酶。

2原理
凝固酶（游离型凝固酶）为类似凝血酶原样物质可被血浆中的协同因子激活为类似凝血酶样物质，使血浆中纤维蛋白原转变为纤维蛋白并附着于细菌表面，凝集成冻胶样。

3试剂：混合人血浆
4操作步骤：
4.1取0.5ml混合人血浆于洁净的试管内，挑取3~5个菌落于血浆中混匀；
4.2置37°C水浴，3~4h后读取结果。

5判读结果：
阳性反应：出现明显纤维蛋白凝胶块
阴性反应：24h后仍不凝固
6注意事项：
6.1试验应同时作阳性、阴性对照。

6.2若出现羊毛状或纤维状沉淀物并非真正凝固，应判为阴性。

6.3中间型葡萄球菌、猪葡萄球菌需要较长时间孵育，才可出现阳性。

6.4某些金葡产生溶纤维蛋白酶，溶解纤维蛋白凝块。

所有血浆缺乏纤维蛋白原。

试验菌珠不纯。

7质量控制
金黄色葡萄球菌ATCC25923 （+）粪肠球菌ATCC29212 （- ）
8失控措施
8.1检查所用菌株是否正确
8.2试剂是否避光冷藏保存
8.3试剂使用是否在有效期内
8.4重复试验，结果合格则继续使用；结果不合格更换试剂。

凝固酶试验的原理及应用

凝固酶试验的原理及应用原理凝固酶试验是一种常用的实验技术，用于测定血液凝固的能力和判断凝血功能是否正常。

它基于血液中的凝血因子在一定条件下发生凝固反应的原理。

凝固酶试验的原理主要涉及到两个相关的凝血因子：凝血因子I和凝血因子II。

当血液受伤时，细胞会释放一种叫做组织因子的物质，它能激活凝血因子VII。

凝血因子VII激活后与组织因子结合，形成一种复合物，被称为凝聚酶复合物。

凝聚酶复合物的形成能够激活凝血因子X，从而引发血液凝固反应。

凝血因子X与凝血因子I形成凝固酶，能够将凝血因子I中的溶解血纤维蛋白原转变为纤维蛋白，进而使血液凝结。

应用凝固酶试验被广泛应用于临床医学，具有以下几个方面的应用：1.评估凝血功能：凝固酶试验能够评估一个人的凝血功能，判断血液是否正常凝固。

凝血功能异常可能导致出血或血栓等疾病，通过凝固酶试验可以帮助医生及时发现并治疗。

2.诊断凝血疾病：凝固酶试验是一项常用的诊断凝血疾病的方法。

例如，凝固酶试验可用于检测血友病患者的凝血能力。

血友病是一种由于凝血因子缺乏或异常而导致的遗传性凝血障碍疾病，通过凝固酶试验可以明确诊断血友病的类型和严重程度。

3.监测抗凝治疗：凝固酶试验常用于监测接受抗凝治疗的患者。

抗凝治疗是指用药物抑制凝血机制，预防血栓形成。

凝固酶试验可以帮助医生确定药物的剂量，以确保患者处于理想的抗凝状态。

4.评估手术风险：凝固酶试验可以用于评估手术前患者的凝血功能，并预测手术风险。

凝血功能异常的患者在进行手术时可能会出现术后出血风险较高的情况，通过凝固酶试验可以帮助医生评估并制定合理的手术方案。

5.研究血栓疾病：凝固酶试验也常用于研究血栓疾病的发生机制和预防治疗。

血栓疾病是由于血栓在血管内形成而导致的疾病，如心脑血管疾病、深静脉血栓等。

凝固酶试验可以帮助研究者了解血栓形成的细胞和分子机制，以及开发新的预防和治疗方法。

综上所述，凝固酶试验是一种重要的实验技术，能够评估凝血功能、诊断凝血疾病、监测抗凝治疗、评估手术风险以及研究血栓疾病。

凝固酶与乳胶凝固试难对金黄色葡萄球菌的检测分析

373土旦匡药指由2Q Q§生S旦墨§鲞差!§塑鱼!i垡!Q￡￡hi ga M四i￡i n!，垒坠g型§垡Q Q8，巡：丛Q：!§可作为二线药物，疗程一周，使H P平均根除率提高到96．4％。

它是目前唯一可能解决M ET耐药并使H P根除率达95％以上的治疗方案。

王吉耀及涂立德采用PPI+B I s+cLA+Fz的四联疗法来根治H P感染，亦取得显著疗效。

奥美拉唑20m gbi d，C LA250m gbi d；B ISl50m gt i d；FZl00m gt i d疗程l O天，H P根除率可达97．92％。

患者不良反应轻，依从性好，值得临床进一步试用。

参考文献[1]王美芬，黄永坤，李海林．H P致病机制的研究进展．医学综述，2006。

12(8)：469．[2]黄明宏．孙晨光．贺士平．H P感染患者血清I L．8T N F-(t的水平变化及临床意义探讨．检验医学，2004，19(2)：106-108．凝固酶与乳胶凝固试难对金黄色葡萄球菌的检测分析王天江【关键浏】金黄色葡萄球菌；乳胶凝固试验中图分类号：R446．5文献标识码：A文章编号：1671-8194(2008)15-0373-03为了提高对金黄色葡萄球菌的鉴定水平，减少耐甲氧西林金药色葡萄球菌(M R SA)与凝固酶孙性葡萄球菌(M SSA)之间的错误鉴定率，我们使用乳胶凝集试验对184株葡萄球菌进行了检测分析，现报道如下：l资料与方法1．1菌株：分离自我院临床标本的184株匍萄球菌，其中包括金黄色葡萄球菌120株(68株M R SA，52SR I M SSA)和非金黄色葡萄球菌“株(表皮葡萄球菌35株，溶血葡萄球菌15株，耳葡萄球菌8株，里昂葡萄球菌3株，施氏葡萄球菌2株，活氏葡萄球菌1株)。

1．2仪器和试剂：V I T ED60型全自动细菌分析仪，A Pl20ST A PH均购于生物梅里埃公司，乳胶血清SL I D E X ST A PH PL U S购自生物梅里埃公司。

凝固酶试验原理范文

凝固酶试验原理范文一、凝固酶试验的原理凝固酶试验是通过观察血液样品的凝块形成时间来评估凝血系统的功能。

凝固酶是由凝血酶生成系统所产生的一系列酶聚合体，它能够通过糖蛋白质的转换作用，形成纤维蛋白凝块。

正常情况下，凝血酶的生成和纤维蛋白形成是血液凝固过程中最重要的环节。

凝固酶试验通过在含有凝血活化剂的试管中加入血液样品，观察血液凝块的形成时间。

凝血活化剂可以通过激活凝血酶生成系统来促进凝血作用的进行。

一般常用的凝血活化剂有凝血酶原时间试剂（PT试剂）和活化部分凝血活酶时间试剂（APTT试剂）等。

二、凝固酶试验的方法1. 取血：在试验开始前，需采集患者3-5ml的外周静脉血。

2.血液处理：将采集的外周静脉血转移到干净无菌的试管中，轻轻颠倒数次，待其凝胶化。

然后离心5分钟，将血浆分离出来。

3.血浆处理：将分离出来的血浆分为两份，分别用于进行PT试验和APTT试验。

4.PT试验：取一分血浆加入到一试管中，同时加入PT试剂，使血浆与试剂充分混合。

然后记录试管中的血浆形成凝块的时间。

5.APTT试验：取一分血浆加入到一试管中，同时加入APTT试剂，使血浆与试剂充分混合。

然后记录试管中的血浆形成凝块的时间。

6.结果判断：根据PT试验和APTT试验的凝块形成时间，与正常人的对照值进行比较，来评价患者的凝血功能状态。

三、凝固酶试验的临床应用1.凝血功能异常的评估：凝固酶试验可以帮助临床医生评估患者的凝血功能是否正常。

例如，凝血酶生成系统的功能缺陷会导致凝血酶的生成受阻，血液凝块形成缓慢，从而延长凝固酶试验的凝块形成时间。

2.凝血疾病的诊断：凝固酶试验对于一些凝血疾病的诊断也具有重要意义。

例如，血友病是一种遗传性凝血障碍，常见的表现是PT试验和APTT试验的凝固时间延长。

3.抗凝治疗的监测：凝固酶试验还可以用于监测抗凝治疗的效果。

例如，华法林是一种常用的抗凝药物，通过抑制维生素K依赖性凝血因子的合成，从而延长PT试验的凝块形成时间。

凝固酶试验

凝固酶试验
（1）原理：致病性葡萄球菌可产生两种凝固酶。

一种是结合凝固酶，结合在细胞壁上，使血浆中的纤维蛋白原变成纤维蛋白而附着于细菌表面，发生凝集：可用玻片法测出。

另一种是分泌至菌体外的游离凝固酶。

作用类似凝血酶原物质，可被血浆中的协同因子激活变为凝血酶样物质，而使纤维蛋白原变成纤维蛋白，从而使血浆凝固，可用试管法测出。

（2）方法：
1）玻片法：取兔血浆和盐水各一滴，分别置于洁净的玻片上，挑取被检菌分别与血浆和盐水混合。

2）试管法：取试管2支，各加0.5ml人或兔血浆，挑取被检菌和阳性对照菌分别加入血浆中并混匀，于37℃水浴3～4h.
（3）结果：玻片法以血浆中有明显的颗粒出现而盐水中无自凝现象判为阳性；试管法以血浆凝固判为阳性。

（4）应用：作为鉴定葡萄球菌致病性的重要指标，也是葡萄球菌鉴别时常用的一个试验。

微生物常用辅助试验及操作

微生物常用辅助试验及操作
目录 01：触酶试验 03：奥普托欣实验 02：氧化酶试验 04：凝固酶实验
05：卫星实验
一、触酶试验
目的：用于鉴别葡萄球菌属和链球菌
属，前者为阳性，后者为阴性。
原理：触酶过氧化氢酶能将过氧化氢分解为水和氧气，出现气泡。
一、触酶试验
取待测单个菌落
调菌悬液
加3%H2O2
五、卫星试验
原理：有溶血性的细菌（如金黄色葡萄球菌和假单胞菌）能破坏红细胞释放血红素（X因子）和维生素B类物质（V因子）。金葡在生长过程中也能合成V因子，在不含血液的琼脂平板（如MH平板）进行卫星实验，其中只含有金黄色葡萄球菌提供的v因子，只有v因子依赖的嗜血杆菌才能生长（如：副流感嗜血杆菌）而同时需要 X和V因子的流感嗜血杆菌则不能生长。
尽量挑取致病菌菌
落的纯单个菌落
质量前控制
严格按照sop操作
结果核对，并记录
质量中控制
质量后检验控制
制作人员名单
脚本：刘能英审核：胡容
录音：罗钜
制作：罗钜
Hale Waihona Puke 监制：刘能英观察结果（出现气泡+）
一、触酶试验
• 注意事项 1、细菌要求新鲜。3％H2O2溶液要新鲜配制。 2、不宜用血琼脂平板上的菌落作触酶试验，因红细胞内含有触酶，可能出现假阳性。 3、需用已知阳性菌和阴性菌作对照。
二、氧化酶试验
目的：用于肠杆菌科细菌与非发
酵菌的鉴别。
原理：氧化酶是细胞色素呼吸酶系统的最终呼吸酶，具有氧化酶的细菌，首先使细胞色素C氧化，再由氧化型细胞色素C 使对苯二胺氧化，生成有色醌类化合物。
四、凝固酶实验

凝固酶实验注意事项

凝固酶实验是一种检测葡萄球菌属细菌是否具有致病性的重要方法。

在进行凝固酶实验时，需要注意以下事项：
1. 实验操作规范：实验操作应严格按照实验方法和注意事项进行，遵循实验室操作规程，确保实验结果的准确性和可靠性。

2. 试验材料选择：试验中使用的实验材料，如血浆、兔血清等，应确保质量合格，避免对实验结果产生影响。

3. 实验环境：实验过程中应保持实验室环境的清洁和无菌，避免实验材料和实验设备受到污染。

4. 实验仪器设备：确保实验设备正常运行，如显微镜、离心机、培养箱等，并在使用前进行常规检修和校准。

5. 实验时间控制：在玻片法实验中，观察结果的时间应控制在10秒内，超过10秒可能出现假阳性。

试管法实验中，应严格按照实验方法进行时间控制。

6. 结果判断：在判断实验结果时，应综合考虑阳性对照和阴性对照，以及实验组的结果，避免误判。

7. 实验记录与报告：做好实验记录，包括实验过程、结果和观察现象等，实验结束后及时报告实验结果，为临床诊断和治疗提供依据。

8. 实验后的样品处理：实验结束后，应对实验样品进行妥善处理，如废弃物、培养皿、实验服等，防止污染扩散。

凝固酶试验原理

凝固酶试验原理
凝固酶试验是一种常用的生物化学实验方法，用于检测凝固酶在特定条件下对底物的催化作用。

凝固酶是一种重要的酶类，在生物体内起着至关重要的作用，能够加速凝血过程并促进伤口愈合。

通过对凝固酶的研究，可以更深入地了解其在生物体内的功能及调控机制。

凝固酶试验的原理主要基于酶与底物之间的特异性相互作用。

在实验中，首先将凝固酶与底物混合，并在一定的温度和pH条件下进行反应。

凝固酶与底物之间的结合会导致底物发生化学反应，产生可观察到的变化，如颜色的变化或沉淀的生成。

凝固酶试验通常分为定性和定量两种方法。

在定性实验中，可以通过观察底物的变化来判断凝固酶的存在与否。

例如，当凝固酶存在时，底物会发生凝固或颜色变化等现象。

而在定量实验中，则可以根据底物的变化程度来确定凝固酶的活性水平，从而对其进行定量分析。

凝固酶试验的原理还涉及到酶的底物特异性。

凝固酶能够与特定的底物结合并发挥催化作用，而对其他底物则不具有相应的反应。

这种特异性是由凝固酶的构象和活性位点决定的，通过对凝固酶底物的特异性研究，可以揭示酶与底物之间的相互作用机制。

在实际应用中，凝固酶试验常被用于检测血液凝固功能。

通过测定
凝固酶在血浆中的活性水平，可以评估患者的凝血功能是否正常。

此外，凝固酶试验还可以用于药物开发和临床诊断，帮助科研人员和医生更好地理解和治疗相关疾病。

总的来说，凝固酶试验是一种重要的生物化学实验方法，通过对凝固酶与底物之间特异性相互作用的研究，可以更深入地了解酶的功能及调控机制。

凝固酶试验在医学和生物科学领域具有广泛的应用前景，有助于推动相关领域的研究和发展。