2.2.1动物细胞培养和核移植技术(第1课时) 导学案
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2.2.1动物细胞培养和核移植技术(第1课时)导学案
【学习目标】
简述动物细胞培养的过程、条件及应用。
【学习重难点】
动物细胞培养的过程及条件
【学习过程】
一.知识链接:
1.植物组织培养的理论基础是什么?主要过程分为哪两步?
2.不进行脱分化处理能否培养成完整的植物体?
3.决定细胞脱分化、再分化的关键因素是什么?
4.植物组织培养所必需的环境条件是什么?
5.人体细胞生活的环境是怎样的?
二.课前预习
(一)动物细胞工程常用技术——、、、、等;其中技术是其他动物细胞工程技术的基础。(二)动物细胞培养:
1.动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的,将它分散成,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞。
2. 动物细胞培养的原理。
3.动物细胞培养的过程
过程:
说明:
(1)动物细胞培养特点:生长时、。
细胞贴壁:在培养瓶中,悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。
接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象叫做接触抑制。
(2)分散成单个细胞的方法:剪碎、用或处理。
(3)原代培养:将动物组织消化后的。(10代以内或分瓶之前)
(4)传代培养:的细胞继续培养。(10代以后或分瓶之后)
(5)两次停止期:①10代左右有些细胞不能传代,有些细胞继续传代。
②50代左右绝大多数细胞死亡,部分细胞发生变化,获得,朝
着等同于的方向发展,无限增殖。
提示:分瓶之前,称原代培养;出现接触抑制用胰蛋白酶处理,再分瓶培养为传代培养。4.动物细胞培养的条件:
5.动物细胞培养技术的应用:
三.课内探究学案
①为什么选用幼龄的动物组织或胚胎?
②为什么要把细胞分散?如何使组织分散为单个细胞?这说明细胞间的物质是什么?能不能用胃蛋白酶?
③制成细胞悬液的主要目的是什么?
④培养细胞的培养瓶或培养皿应具备什么条件?
⑤贴满瓶壁的细胞要如何处理才能继续培养?
⑥哪些细胞失去了接触抑制?
⑦动物细胞培养能否象植物组织培养那样获得克隆个体?需要诱导其脱分化的过程吗?
⑧目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内的,为什么?10~50代,50代以后细胞有什么变化?
⑨动物细胞培养液的主要成分是什么?较植物组培培养基有何独特之处?
⑩动物细胞培养时所需的气体及作用是什么?
动物组织块剪碎
. 单个细胞加培养液
制成
细胞悬液. .
分瓶
四.应用转化
植物组织培养与动物细胞培养的比较:
植物组织培养动物细胞培养原理
培养基固体培养基,需一定营养物质、激素、光照等条件。液体培养基,其中包括营养物质、维生素、动物血清等。
过程
结果获得新个体或细胞产品大量产生细胞或细胞产品
用途①快速繁殖②培养无病毒植物、转基因植物③生产细胞产品①生产生物制品如疫苗、干扰素、单克隆抗体②检测有毒物质③研究药理病理。
相同点都需要人工条件下的无菌操作
五.自我检测
1.有关动物细胞培养的叙述中正确的是()
A.动物细胞培养前要用胃蛋白酶使细胞分散
B.动物细胞培养的主要目的是获得大量的细胞分泌蛋白
C.细胞遗传物质的改变发生于原代培养过程中
D.动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散
2. 动物细胞工程技术的基础是()
A.动物细胞融合 B.胚胎移植 C.动物细胞培养 D.核移植
3.离体的植物组织或细胞在适当培养条件下发育成完整的植株,离体动物体细胞却没有发育成动物的成熟个体,原因是()
A.动物细胞内没有成套的遗传物质
B.动物细胞的全能性随分化程度提高而受到限制,分化潜能变弱
C.动物细胞的细胞核太小
D.动物细胞的全能性低于植物细胞
4.下列与动物细胞培养有关的表述中,不正确的是()A.培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清
B.原代培养的细胞一般传至10代左右便会出现生长停滞
C.动物细胞培养一般能够传到40~50代,但其遗传物质发生了改变
D.动物细胞培养可用于检测有毒物质和获得大量自身健康细胞
5.关于动物细胞培养的叙述错误的是()
A.用于培养的细胞最好取自健康动物体内的组织细胞
B.将所取的组织先用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理其分散成单个细胞,再稀释制成细胞悬液培养
C.在培养瓶中要定期用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理,然后分瓶继续培养,让细胞继续增殖D.传代培养的细胞在传至10~50代左右时,增殖会逐渐减慢,以至于完全停止,所培养的细胞全部衰老死亡6.下列关于植物组织培养与动物细胞培养的叙述正确的是()
A.二者基本原理是相同的 B.二者所需要的培养基是相同的
C
.二者所需要的目的和结果是相同的 D.二者的培养过程中都必须添加有机物
7.用动、植物成体的体细胞进行离体培养,下列叙述正确妁是()
A.都需要用CO2培养箱
B.都需要用液体培养基
C.都要在无菌条件下进行
D.都可体现细胞的全能性
8.右图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答:
(1)容器A中放置的是动物器官或组织。它一般取自。
(2)容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是,然后用
酶处理,这是为了使细胞分散开来,这样做的目的是。
(3)培养首先在B瓶中进行,瓶中的培养基成分有等。
在此瓶中培养一段时间后,有许多细胞衰老死亡,这是培养到第____代,到
这时的培养称为_____
(4)为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中,用____处理,然后配制成___
_,再分装。
(5)在C瓶中正常培养了一段时间后,发现细胞全部死亡,原因是_____
9.回答下列有关动物细胞培养的问题:
(1)在动物细胞培养过程中,当贴壁细胞分裂生长到细胞表面____时,细胞会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的_____。此时,瓶壁上形成的细胞层数是____。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来,需要用酶处理,可用的酶是__________________。
(2)随着细胞传代次数的增多,绝大部分细胞分裂停止,进而出现_______的现象;但极少数细胞可以连续增殖,其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成______细胞,该种细胞的黏着性____,细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量____。
(3)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目,最好选用细胞分裂到____期的细胞用显微镜进行观察。
(4)在细胞培养过程中,通常在____条件下保存细胞。因为在这种条件下,细胞中____的活性降低,细胞______的速率降低。
(5)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后,发生了排斥现象,这是因为机体把移植的皮肤组织当做____进行攻击。
六.课时归纳:
1.动物细胞培养的过程:
2.动物细胞培养的条件:
3.植物组织培养与动物细胞培养的比较:
七.课后反思: