纤维蛋白原测试原理

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C3510血浆纤维蛋白原(FIB)磁珠法

C3510血浆纤维蛋白原(FIB)磁珠法

血浆纤维蛋白原(FIB)测定(分析仪器法)1实验原理:光电磁珠法测试杯两侧的有一组驱动线圈,它们产生恒定的交替电磁场,使测试杯内特制的去磁小钢珠保持等幅振荡运动。

凝血激活剂加入后,随着纤维蛋白的产生增多,血浆的粘稠度增加,小钢珠的运动振幅逐渐减弱,仪器根据另一组测量线圈感应到小钢珠运动的变化,当运动幅度衰减到50%时确定凝固终点。

2标本采集2.12.23.831长时间4566.16.2 ,室温保存7.7.17.27.37.4 仪器技术参数:7.4.1 速度:最快检测速度350测试/小时,组合检测约140测试/小时7.4.2 试剂位:24个,具冷藏功能。

7.4.3 样本位:80个,可自动连续添加。

7.5 仪器校准程序:7.5.1 校准频率:当方法改变,试剂厂家或试剂型号改变,仪器维修影响测定结果等情况时,必须进行校准。

7.5.2 校准操作:设置标准曲线分析(由仪器提供商指定工程师执行)8. 操作步骤:8.1 检查前准备:8.1.1 清空废液瓶,清空反应杯抛弃槽。

8.1.2 添加足够反应杯(不能超出警告线)。

8.1.3 添加清洁液试剂,清洗用蒸馏水等。

8.2 开机先开打印机再开主机,开机后仪器自检,约15分钟,屏幕上方“Not Ready”变为“Ready”,8.38.3.1试项目8.48.5 按,→测8.6 每日维护:完成每日的测定后,关机前维护。

8.6.1 用蘸有清洗液的纱布或棉签擦拭加样针和试剂的外表面。

8.6.2 清空废液瓶,和已使用过的反应杯,检查清洗液是否充足。

8.6.3 检查预温及测量通道内是否有掉落的钢珠,如果有请清除。

8.6.4仪器连续工作24小时后需要关机1次。

9 检验结果的判断与分析:9.1 仪器测定FIB的线性范围在5-120秒,测定完成后仪器显示FIB秒数等参数。

若不能对参数进行正确计算,将出现下列信息:﹡﹡﹡.﹡出现错误,不能得到分析数据ˉˉˉ.ˉ不能计算参数+++.+数值超出线性范围.9.2 仪器设定FIB参考范围在2-4g/L,如果得不到一个正常数值,在数据的左侧将出现下列标记:﹡出现错误信息< 数据低于可报告的低限> 数据高于可报告的高限10. 质量控制:每批样本同时测定两个浓度水平(高值和正常值)的质控品,以2S为警告限,3S为失1111.111.1 F11.1.1所致。

纤维蛋白原测定

纤维蛋白原测定
纤维蛋白原测定 Fibrinogen
PT-der与Clausinogen )一种由肝 脏合成的具有凝血功能的蛋白质,是纤维蛋 白的前体。分子量340,000,半衰期4~6日。 血浆中参考值2~4克/升。纤维蛋白原由α、β、 γ三对不同多肽链所组成,多肽链间以二硫键 相连。

我们科室现在使用的SYSMEX-CA1500全自 动凝血仪与贝克曼 ALC-ELITE-PRO全自动 凝血仪都可以同时用Clauss法与PT-Der法对 FIB进行测定。其中贝克曼 的仪器可以在定 标PT的同时自动得到PT-Der法测定FIB的比 浊曲线,而SYSMEX的仪器则必须定标PT后 使用仪器测出标准品各种浓度下的OD值与 Clauss法测出的FIB值,然后自行设定曲线对 应关系。

(2)免疫学测定法:将纯纤维蛋白原作为抗原免疫动物, 制成多克隆或单克隆抗体。然后用免疫胶乳、被动血凝或反 向血凝、单向免疫扩散、火箭电泳以及ELISA等方法测定。 优点是大部分方法简便,但缺点是所测的不仅是可凝固的纤 维蛋白原,可能包括了它的降解产物(因为它们有共同抗 原),也可能包括了障碍性纤维蛋白原(dysfibrinogens即N 端谷氨酸γ位未羧化的无功能的纤维蛋白原,又称缺维生素K 引起的蛋白质,PIVKA)。但免疫法也有一个好处,就是可 用来测定PIVKA。如果一个患者总纤维蛋白原(用免疫学测 定结果)不低,甚至增高,而功能性(即可凝固性)纤维蛋 白原却明显减少,即可判断为存在PIVKA。肝病、维生素K 缺乏等均可导致PIVKA升高,有临床诊断价值。总的说来, 免疫学方法用于临床常规实验室仍存在一定问题。

在凝血酶作用下,α链与β链分别释放出A肽与B肽, 生成纤维蛋白单体。在此过程中,由于释放了酸性 多肽,负电性降低,单体易于聚合成纤维蛋白多聚 体。但此时单体之间借氢键与疏水键相连,尚可溶 于稀酸和尿素溶液中。进一步在Ca+2与活化的ⅩⅢ 因子作用下,单体之间以共价键相连,则变成稳定 的不溶性纤维蛋白凝块,完成凝血过程。肝功能严 重障碍或先天性缺乏,均可使血浆纤维蛋白原浓度 下降,严重时可有出血倾向 。

纤维蛋白实验报告

纤维蛋白实验报告

一、实验目的1. 掌握纤维蛋白原的定量测定原理。

2. 熟悉纤维蛋白原测定方法。

3. 学会使用相关仪器设备,提高实验技能。

二、实验原理纤维蛋白原(Fibrinogen,Fg)是一种丝氨酸蛋白酶原,是凝血系统中的关键成分。

在凝血过程中,纤维蛋白原在凝血酶的作用下转化为纤维蛋白,形成网状结构,从而起到止血作用。

纤维蛋白原的定量测定对于诊断血栓性疾病、血液凝固功能异常等具有重要意义。

本实验采用凝固法测定纤维蛋白原含量。

原理是在一定条件下,纤维蛋白原在凝血酶的作用下转化为纤维蛋白,形成凝胶。

通过测定凝胶的溶解度,计算出纤维蛋白原的含量。

三、实验材料1. 纤维蛋白原标准品2. 凝血酶3. 纤维蛋白原测定试剂4. 水浴箱5. 移液器6. 721型分光光度计7. 实验室用纯水8. 试管四、实验步骤1. 标准曲线的绘制(1)取六支试管,编号为1-6,分别加入不同浓度的纤维蛋白原标准品,加入纯水稀释至100μl。

(2)向每支试管中加入1ml凝血酶,混匀。

(3)将试管放入水浴箱,恒温37℃反应60分钟。

(4)取出试管,向每支试管中加入1ml纤维蛋白原测定试剂,混匀。

(5)在721型分光光度计上,以纯水为空白,测定各试管在540nm处的吸光度值。

(6)以纤维蛋白原浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线。

2. 样品测定(1)取三支试管,分别加入100μl待测样品、100μl纯水和100μl纤维蛋白原测定试剂。

(2)按照步骤1中的方法进行反应、溶解和测定。

(3)根据标准曲线,计算待测样品中纤维蛋白原的含量。

五、实验结果与分析1. 标准曲线的绘制根据实验数据,绘制标准曲线如下:```纤维蛋白原浓度(mg/L)吸光度值0.00 0.0000.50 0.5001.00 1.0001.50 1.5002.00 2.0002.50 2.500```2. 样品测定根据实验数据,计算待测样品中纤维蛋白原的含量为1.20mg/L。

六、实验讨论1. 实验过程中,注意控制实验条件,如温度、反应时间等,以保证实验结果的准确性。

纤维蛋白原(FIB)

纤维蛋白原(FIB)

纤维蛋白原(FIB)一、测定原理:1、仪器自动加样并记录待测血浆在凝血活酶的参与下所需的凝固时间。

2、仪器检测原理(凝固法):检测杯两侧独立的线圈产生相反的磁场,驱动钢珠在杯底沿弯曲的轨道运动。

一旦被测血浆开始凝固(加入少激活试剂),血浆粘度增加,改变了钢珠的运动,使其减慢,并且振减小。

此振幅的变化由数学算法通过计算得到凝固时间。

二、标本要求:1、凝血专用管(CTAD管,枸椽酸钠0.109M,蓝帽)抽取静脉血至刻度线,充分混匀。

2500转离心10分钟后2小时内测定完毕。

2、测定量 5ul血浆1:20稀释三、试剂:1、STAGO公司原装试剂STA®-FIBRINOGEN、OWREN-KOLLER(稀释液)2、保存条件:2-8°C3、使用条件:使用前加蒸馏水5ml混匀,条码扫描后放入仪器试剂柜。

使用时试剂柜内(17±2°C)稳定4天四、仪器和材料:1、STA 全自动血凝仪2、含有磁珠的反应杯五、标准和质控:1、标准:预定标,标准曲线由厂家在试剂中提供。

2、质控品为原装STA-COAG CONTROL N+P两批号定值血浆干粉,保存条件2-8℃。

使用前加蒸馏水1ml,混匀,开启后试剂柜内稳定8小时。

编写:伍海波制定日期:2011.12.1六、操作程序:1、装卸试剂:F2键打开试剂柜,条码扫描后确认试剂量,放入合适孔即可。

2、定标与室内质控:更换试剂批号时仪器自动定标,24小时室内质控自动测定一次,未通过仪器有提示报警。

3、标本测定:F1键打开标本柜,输入号码后随机插入标本孔,选择测定项目后关闭标本柜。

仪器1:20稀释血浆加100ul入反应杯,预温240秒后加入50ul试剂并开始计时,根据曲线自动得出含量。

4、传送并核收结果。

七、注意事项:1、血量与抗凝剂比例适宜,离心时间充分以确保血浆中无血小板干扰测定结果。

2、标本无凝固。

七、计算和参考值计算由仪器自动完成,正常参考值:2-4g/L八、方法学特性1、分析范围:1.5-9g/L,低于1.5g/L仪器可自动减少稀释倍数重测2、不精密度:CV 3.85% (批内)CV3.57%(批间)3、干扰实验编写:伍海波制定日期:2011.12.1。

血浆纤维蛋白原测定

血浆纤维蛋白原测定

血浆纤维蛋白原(Fbg)测定1. 实验原理将试剂加入稀释的抗凝血浆中,试剂中过量的牛凝血酶可直接作用血浆中的纤维蛋白原转化为纤维蛋白,此反应过程的速率即反映了纤维蛋白原的浓度和功能。

通过660nm光照射血浆,测定其凝固反应的散射浊度变化。

2. 标本采集2.1 早晨空腹采血(空腹12小时左右),静脉采血。

2.23.8%(w/v)枸椽酸钠0.2ml+静脉血1.8ml,混匀。

3. 标本存放全血贮存在4~10oC不超过2小时,最好1小时内(3000r/min×15min)分离血浆,此血浆在室温22~24oC 下可存放2小时,在2~4oC可存放4小时,在-20oC可存放2周,长时间保存需在冰冻条件下,在-70oC可存放6个月。

冷冻血浆融化时,应将盛血浆的容器置37oC水浴中,并轻轻摇动,使其迅速融化,以免凝血因子消耗,解冻后立即测试。

冷冻过的标本不能再次冷冻,否则结果不准确。

4. 标本运输:低温条件下运输。

5. 标本拒收的标准:抗凝剂不符合,采血量不准确,凝固,溶血,脂血标本不能作测定。

6. 实验材料:6.1每个试剂均购自德国Dade Behring Marburg公司。

1)FIB-C测定试剂盒(代号P/N:8469110)冻干牛凝血酶(>35uNIH/ml)8瓶异常质控血浆2瓶2)定标血浆Calibration Plasma(代号P/N: 20003700)3)正常质控血浆Normal control plasma(代号P/N: 20003110)4)低纤维蛋白原质控血浆 Low fibrinogen control(代号P/N:20004200)5)因子稀释液(代号P/N:9757600)6)清洗液A Cleaning solution(代号P/N:9831700)7)清洗液B Cleaning agent(代号P/N:9832700)6.2试剂准备牛凝血酶:用2mL NCCLS II型或相同质量的蒸馏水溶解1瓶牛凝血酶,盖上盖子,轻摇至完全溶解,置15~25oC 30分钟,用前摇匀,勿用力振摇。

血浆纤维蛋白原测定方法

血浆纤维蛋白原测定方法

血浆纤维蛋白原测定方法血浆纤维蛋白原是一种重要的凝血因子,它参与了机体的止血过程。

因此,准确测定血浆纤维蛋白原的含量对于诊断和评估血液病变具有重要意义。

本文将介绍一种常用的血浆纤维蛋白原测定方法。

一、测定原理血浆纤维蛋白原的测定方法主要基于血浆纤维蛋白原与特定试剂的反应原理。

常用的测定方法包括免疫比浊法、免疫电泳法、免疫荧光法、酶联免疫吸附法等。

二、免疫比浊法免疫比浊法是一种常用的血浆纤维蛋白原测定方法。

其原理是利用特异性抗体与血浆中的纤维蛋白原结合形成免疫复合物,进而使溶液的浊度增加。

通过测量溶液的光密度变化,可以计算出血浆纤维蛋白原的含量。

三、免疫电泳法免疫电泳法是一种常用的血浆纤维蛋白原测定方法。

其原理是利用电泳的原理,将血浆中的纤维蛋白原与特异性抗体结合,然后通过电泳分离。

根据纤维蛋白原在电泳中的迁移距离,可以确定其含量。

四、免疫荧光法免疫荧光法是一种常用的血浆纤维蛋白原测定方法。

其原理是利用特异性抗体与血浆中的纤维蛋白原结合,并标记荧光物质。

通过荧光显微镜观察样品中荧光信号的强度,可以确定血浆纤维蛋白原的含量。

五、酶联免疫吸附法酶联免疫吸附法是一种常用的血浆纤维蛋白原测定方法。

其原理是利用特异性抗体与血浆中的纤维蛋白原结合,并标记酶类物质。

通过测量酶的活性或底物的反应产物,可以确定血浆纤维蛋白原的含量。

六、测定结果的解读血浆纤维蛋白原的正常浓度范围在2-4 g/L之间。

如果测定结果低于正常范围,可能表示机体合成纤维蛋白原的能力减弱,或者存在纤维蛋白原消耗过多的情况。

而高于正常范围的测定结果,则可能意味着机体正在经历炎症、肿瘤、肝脏疾病等情况。

七、测定方法的优缺点不同的血浆纤维蛋白原测定方法具有不同的优缺点。

免疫比浊法操作简便、成本低廉,但对样品的干扰较大;免疫电泳法分离效果好,但操作复杂、耗时较长;免疫荧光法灵敏度高,但设备要求较高;酶联免疫吸附法操作简便,但对样品的处理要求较高。

八、总结血浆纤维蛋白原的测定方法有多种,每种方法都有其适用的场景和优缺点。

纤维蛋白原(FIB)

纤维蛋白原(FIB)

纤维蛋白原(FIB)含量测定方法操作规程一.【产品名称】纤维蛋白原(FIB)含量测定试剂盒(凝固法)二.【预期用途】用于体外人血浆中纤维蛋白原含量测定,用于辅助诊断。

三.【临床意义】FIB含量增高:见于糖尿病及其酸中毒,动脉粥样硬化,急性传染病,急性肾炎尿毒症,休克,外科术后及轻度肝炎等。

FIB含量减低:见于DIC,原发性纤溶症,重症肝炎,肝硬化等。

四.【检验原理】采用Clauss凝固法原理,高浓度凝血酶存在时,待测稀释血浆的凝固时间与其纤维蛋白原(FIB)含量成反比关系。

五.【主要组成成分】1.FIB凝血酶:5瓶/6瓶(内含凝血酶、缓冲液、高岭土、稳定剂、防腐剂)2. FIB定值血浆:1瓶,定值见瓶标FIB定值血浆经HBsAg、HIV抗体、HCV抗体检测,结果为阴性,但仍需如病人样本一样小心处理。

3.FIB缓冲液:2瓶(内含缓冲液、防腐剂)4.说明书:1份注:不同批号试剂盒中各组份不可互换。

六.【储存条件及有效期】未开启试剂于+2℃~+8℃保存可稳定至标签所示失效日期。

FIB凝血酶试剂复溶后于+2℃~+8℃可保存7天;4小时内-20℃冻存,可稳定20天,使用时37℃迅速解冻,勿反复冻融。

FIB定值血浆复溶后于+2℃~+8℃可保存8小时。

七.【适用仪器】血凝分析仪。

八.【样本要求】1. 静脉采血,置于含有1/10体积0.109mol/L枸橼酸酸钠抗凝液(1份抗凝液+9份全血)的塑料管或硅化玻璃管中,轻轻颠倒混匀,3000rpm(或2500g)离心15分钟,收集上层液(血浆,黄色)。

2.不宜使用EDTA●Na2、肝素、草酸盐作为抗凝剂。

3.红细胞比容超过55%或小于20%时,应调整抗凝剂用量。

抗凝剂体积(ml)=0.00185x血液体积(ml)x(100 - 比容)。

4.样本采集避免溶血及组织液污染。

5.样本保存时间如下:+2℃~+8℃保存,不宜超过8小时。

九.【检验方法】1. 试剂重建与保存每瓶FIB凝血酶加入瓶标标示体积的蒸馏水,轻摇溶解。

纤维蛋白原测定(FIB)标准操作规程(SOP)

纤维蛋白原测定(FIB)标准操作规程(SOP)

纤维蛋白原测定(FIB)标准操作规程(SOP)原理:在确定量的血浆样本经过一定时间的加温后,加入试剂。

加入试剂后,采用波长为660nm的光照射样本。

凝血过程(纤维蛋白原转化为纤维蛋白)中血的浑浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定。

从散射光光强度的测定,可以做出凝血曲线,通过Percentage Detect ion Method方法求得凝血时间。

一、仪器:(一)型号:Sysmex CA—1500自动血液凝血分析仪(二)分析和计算参数:1.处理量:约120个测试/小时2.所需样本量:10μl3.检验时间:在最长检验时间之内测出结果,典型最长检验时间:100秒4.重复性:CV≤4%5. 计算参数:纤维蛋白原浓度(Fbg)二、试剂及配套品:(一)试剂:1. 凝血酶试剂(Thrombin Reagent)(1)商标:德灵(DADE BEHRING)(2)包装规格:Pack for 10×1ml(3)代码:B4233 G25 E0533 (961) W(4)成分:牛凝血酶冻干粉(lyophilized preparation of bovine thrombin)(近似100 NIH units/ml)(3)代码:B4234-25(4)成分:1)2.84×10²M的巴比妥钠 (sodium barbital)2)1.25×10¹M 的氯化钠 (sodium chloride)3) PH 7.35±0.13. 清洗液(Cleaning)2%次氯酸钠溶液(自配)(二)配套品:1.标准血浆(Standard Human Plasma)(1) 商标:德灵(DADE BEHRING)(2) 代码:No. ORKL2.校准质控血浆(Ci-Trol®)(1) 商标:德灵(DADE BEHRING)(2) 代码:Level 1, B4244-10Level 2, B4244-20Level 3, B4244-303.质控血浆(Control Plasma)(1) 商标:太平洋(Pacific Hemostasis)(2) 代码及规格:Level 1 (Normal), 100595 10×1mlLevel 2 (Abnormal), 100596 10×1mlLevel 3 (Abnormal), 100597 10×1ml三、操作步骤:(一)开机:开机前,先打开连机的打印机。

纤维蛋白原(fibrirlogerl,Fg)含量测定

纤维蛋白原(fibrirlogerl,Fg)含量测定

纤维蛋白原(fibrirlogerl,Fg)含量测定摘要】直接测定血浆中纤维蛋白原含量,可反映纤维蛋白原增高或减低的实际状态。

血浆纤维蛋白原 (Fg)是参与血液凝固的一种血浆蛋白质 ,称为凝血因子 ,在止血与血栓方面的临床诊疗具有重要意义。

【关键词】纤维蛋白原测定方法1 测定方法分类Fg的测定方法众多,大体上分五大类:①基于加入凝血酶后形成纤维蛋白的方法,即功能测定法或可凝固蛋白法;②物理测定法如热沉淀法;③化学测定法如双缩脲法;④免疫学测定法;⑤纤维蛋白原含量直接推算法等。

(1)功能测定法:即凝血酶法,系在被检血浆中加入凝血酶,血浆即凝固,其所需的时间长短与纤维蛋白原含量成负相关如 Clauss法。

所形成的纤维蛋白又可再分为测重法,酚试剂比色法和紫外光度法、测氮法、浊度法和凝血酶凝固时间法等。

被检血浆的纤维蛋白原实际含量可从国际标准品参比血浆测定的校正曲线中获得。

这类方法中的冯-克劳斯法(Clauss法)方法简便、准确,适用于日常测定,是纤维蛋白原测定的推荐方法,并被WHO推荐为纤维蛋白原常规测定的参考方法;改良Jacobsson法结果准确可靠,被WHO推荐为纤维蛋白原测定的定值方法。

(2)物理、化学测定法:这类方法又可分为盐析法(包括加亚硫酸钠、硫酸铵或氯化钠盐析后,沉淀用蛋白质显色剂显色或用比浊法测定)、热变性沉淀法、双缩脲比色法和电泳法等几种。

这类方法多数比较简单、快速,特别适用于急诊检验。

缺点是特异性不强,所测的不是可凝固的纤维蛋白原,可能包括部分的降解产物和(或)其他蛋白,有的方法精密度较差。

(3)免疫学方法:是将纤维蛋白原作为抗原免疫动物,制成多克隆或单克隆抗体。

然后用免疫胶乳、反向血凝、免疫比浊、单向免疫扩散、火箭电泳以及ELISA等方法测定。

优点是大部分方法比较简便,但缺点是所测的不仅是可凝固的纤维蛋白原,可能包括了它的降解产物(因为它们有共同抗原),也可能包括了异常纤维蛋白原(dyfibrinogens,由于基因突变所产生的一类无功能的纤维蛋白原)。

纤维蛋白原clauss法检测原理

纤维蛋白原clauss法检测原理

标题:纤维蛋白原Clauss法检测原理解析
纤维蛋白原Clauss法是一种常用的纤维蛋白原定量检测方法,其基本原理是基于纤维蛋白原与凝血酶发生交联反应,通过测定交联物的量来反映纤维蛋白原的浓度。

首先,将血液样本加入特定的凝血酶溶液中,血液中的纤维蛋白原会与凝血酶发生特异性结合,形成纤维蛋白单体。

这些单体随后会聚集形成纤维蛋白网络,这个过程被称为纤维蛋白聚合。

随着聚合过程的进行,纤维蛋白网络会逐渐增大并沉积在反应管底部,形成纤维蛋白凝块。

接下来,通过与已知浓度的纤维蛋白原标准品进行比较,可以确定纤维蛋白原的浓度。

这个过程被称为Clauss定量分析,它是基于纤维蛋白凝块的质量或体积来进行的。

具体来说,通过测量凝块截面积和长度,可以计算出凝块的表面积和体积,从而得到纤维蛋白原的浓度。

此外,Clauss法还使用了一种特殊的技术,称为电阻抗法,来精确测量凝块的长度和宽度。

这种方法利用了血液中红细胞在管中流动时的电阻抗变化,从而可以准确地测量凝块的形状和大小。

总的来说,纤维蛋白原Clauss法检测原理基于纤维蛋白原与凝血酶发生交联反应,通过测量凝块的质量、体积和长度来确定纤维蛋白原的浓度。

这种方法具有较高的准确性和可靠性,是临床上常用的纤维蛋白原定量检测方法。

谈谈纤维蛋白原演算法(FIB-RP)的推导过程—基于ACLTOP反应曲线原理

谈谈纤维蛋白原演算法(FIB-RP)的推导过程—基于ACLTOP反应曲线原理

谈谈纤维蛋白原演算法(FIB-RP)的推导过程—基于ACLTOP反应曲线原理实验室常用的纤维蛋白原(FIB)检测方法有两种,一是凝血酶法,又叫clauss法,它是指在待测样本中加入凝血酶试剂,使反应发生凝固,所用的时间与FIB的含量呈负相关,将时间与定标曲线比较可以算出FIB结果。

这里不详述,我们要谈的是第二种:演算法(FIB-RP)。

这是一种基于PT反应过程推导得到FIB结果的方法。

这种方法的优点是简单、快速、不消耗试剂,但也有显而易见的缺点,它仅适合于健康人群普查,当结果异常时,往往不准确,应改用clauss法确认。

下面通过反应曲线和定标曲线对该方法的演算过程进行推导演示。

一、基于PT的原理首先我们了解一下PT的反应曲线,如图1所示,蓝色的曲线是PT的反应原始曲线,它包括有三个分期:基线期、加速期、平台期。

基线期表示从反应加入试剂开始,凝血因子激活,但纤维蛋白原仍未凝固;一直到曲线拐点上升,进入加速期,说明纤维蛋白凝块开始生成,并不断加速凝固,因此血浆的浊度增加,吸光度增大;一直到最后纤维蛋白原消耗殆尽,吸光度不再发生变化,提示此时纤维蛋白原已经凝固完全,即进入平台期。

值得一提的是,如果样本缺乏XIII因子,无法形成交联纤维蛋白,纤维蛋白单体(FM)自行聚合也是可以形成混浊而被检测到吸光度变化的,因此单纯XIII因子缺乏患者,凝血四项结果可以正常,但因未能形成牢固的交联纤维蛋白凝块,患者可有出血症状。

关于FM自行聚合的说法,可以从硫酸鱼精蛋白副凝固试验(3p试验)的原理得到印证。

红色的曲线是对蓝色的原始反应曲线进行一阶求导获得的,它有一个波峰,波峰与横轴的交点表示此时反应凝固的速度最大。

绿色的曲线是对红色曲线进行二阶求导获得的,它有一个波峰和一个波谷,波峰与横轴的交点表示此时反应凝固的加速度最大。

这里我们要引入一个关键数值的获得方法:反应的吸光度变化值差值,即图1中的80.6 DmAbs。

这个差值是用二阶求导曲线的波峰和波谷对应的两条垂直线与原始曲线交叉得到的那一段吸光度差值。

纤维蛋白原(FIB)的检测及临床意义

纤维蛋白原(FIB)的检测及临床意义

纤维蛋白原(FIB)的检测及临床意义一、FIB的检测原理(Clauss检测原理)以过量的凝血酶作用于待测血浆中的纤维蛋白原,使其全部转变为纤维蛋白,血浆凝固,血浆中的纤维蛋白原含量与凝固时间呈负相关,检测结果与参比血浆制成的标准曲线对比可得出纤维蛋白原的含量。

二、FIB的检测试剂1、FIB测定中的试剂用的是凝血酶,其含量约100IU/mL,首先是凝血酶引起的凝血反应,其反应过程与TT是“一致”的,也就是说其使用的过程也是“共同途径”的过程。

2、凝血酶的含量,FIB用的凝血酶的含量约为100IU/mL(足量的,但在实际工作中也会出现FIB过高导致凝血酶不足的情况),而TT使用的凝血酶的含量为1.5IU/mL,其选择不同浓度的意义说明在FIB的反应过程中,凝血酶是过量的,其测定的结果可以将所有的FIB都给反映出来,而TT中的凝血酶是标准量的,其反应的不是所有FIB的含量,更多的是反映实际真实状态下对TT检测的影响因素。

因此,在临床实践工作中可以认为,FIB代表其纤维蛋白原的真实含量,而TT可以代表所有对纤维蛋白形成或者纤维蛋白铰链过程的影响因素(如肝素、达比加群酯等药物,如高FDP血症,如异常纤维蛋白原,如抗凝血酶的抗体),如果出现延长说明存在对纤维蛋白原的影响因素。

在实践工作中需要相辅相成的去辩证的看这两个项目。

三、FIB检测的临床意义1、纤维蛋白原是凝血过程中的主要蛋白质,是一个影响因素非常多的一个物质,其生理性增高主要见于应激反应和妊娠晚期。

2、纤维蛋白原减少:(<1.5g/l) 见于弥散性血管内凝血(DIC)和原发性纤溶症、重症肝炎和肝硬化。

也见于蛇毒治疗(如抗栓酶、去纤酶)和溶栓治疗(UK、T-PA),故是它们的监测指标。

3、纤维蛋白原增加:纤维蛋白原是一种急性时相蛋白,其增加往往是机体的一种非特异反应,常见于下列疾病:感染(毒血症、肺炎、轻型肝炎、胆囊炎、肺结核及长期的局部炎症)、无菌炎症(肾病综合症、风湿热、风湿性关节炎、恶性肿瘤等)等,此外在外科手术、放射治疗、月经期及妊娠期也可见轻度增高。

fib试剂检测原理

fib试剂检测原理

fib试剂检测原理
Fib试剂检测原理
Fib试剂是一种常用的生化试剂,用于检测血液中的纤维蛋白原水平。

纤维蛋白原是一种血浆蛋白,它在血液凝固过程中发挥着重要的作用。

当血管受到损伤时,纤维蛋白原会被激活,转化为纤维蛋白,形成血栓,防止血液过多流失。

因此,纤维蛋白原水平的检测对于评估血液凝固功能具有重要意义。

Fib试剂检测原理基于纤维蛋白原与试剂中的凝血酶原相互作用的原理。

凝血酶原是一种血浆蛋白,它可以被凝血酶水解为凝血酶。

凝血酶是一种酶,它可以将纤维蛋白原转化为纤维蛋白,从而促进血液凝固。

Fib试剂中含有凝血酶原和钙离子。

当Fib试剂与血液样本混合时,凝血酶原会被激活,转化为凝血酶。

凝血酶会将纤维蛋白原转化为纤维蛋白,形成凝块。

凝块的形成速度与纤维蛋白原的浓度成正比。

因此,通过测量凝块的形成速度,可以确定血液中纤维蛋白原的浓度。

Fib试剂检测方法简单、快速、准确,是一种常用的血液凝固功能检测方法。

它可以用于评估血液凝固功能的异常,如血栓形成、出血倾向等。

在临床实践中,Fib试剂检测常用于心血管疾病、肝病、肾病等疾病的诊断和治疗过程中。

Fib试剂检测原理基于纤维蛋白原与凝血酶原的相互作用,通过测量凝块的形成速度来确定血液中纤维蛋白原的浓度。

它是一种简单、快速、准确的血液凝固功能检测方法,具有广泛的临床应用价值。

纤维蛋白原检测方法

纤维蛋白原检测方法

纤维蛋白原检测方法引言:纤维蛋白原是一种血液凝块形成的关键物质,它参与了止血过程中的凝块形成。

纤维蛋白原的检测对于评估血液凝块形成的功能和疾病诊断具有重要意义。

本文将介绍几种常用的纤维蛋白原检测方法。

一、传统凝血法传统凝血法是最常用的纤维蛋白原检测方法之一。

它利用凝血酶原激活纤维蛋白原,并观察形成的凝块时间来评估纤维蛋白原的水平。

这种方法简单易行,成本低廉,广泛应用于临床实践中。

然而,传统凝血法存在一些局限性,如操作复杂、结果受到干扰等。

二、免疫测定法免疫测定法是一种常用的纤维蛋白原检测方法,它利用免疫学原理检测纤维蛋白原的水平。

目前常用的免疫测定方法包括酶联免疫吸附试验(ELISA)、放射免疫测定法(RIA)等。

这些方法具有灵敏度高、特异性强、结果稳定等优点,能够准确测定纤维蛋白原的水平。

然而,免疫测定法也存在一些问题,如操作复杂、耗时较长等。

三、凝集试验凝集试验是一种常用的纤维蛋白原检测方法之一。

它通过将纤维蛋白原与特定试剂发生凝集反应,从而评估纤维蛋白原的水平。

常用的凝集试验包括免疫凝集试验(IA)和免疫电泳凝集试验(IEP)。

这些方法具有操作简便、结果可靠的优点,适用于大规模筛查和快速诊断。

然而,凝集试验也存在一些限制,如对试剂的依赖性较强、结果受到干扰等。

四、荧光法荧光法是一种新兴的纤维蛋白原检测方法,它利用荧光染料标记的抗体与纤维蛋白原结合,并通过荧光信号来评估纤维蛋白原的水平。

荧光法具有高灵敏度、高特异性、操作简便等优点,能够准确测定纤维蛋白原的水平。

然而,荧光法在临床应用中还存在一些挑战,如设备成本高、操作技术要求高等。

总结:纤维蛋白原检测是评估血液凝块形成功能和疾病诊断的重要手段。

传统凝血法、免疫测定法、凝集试验和荧光法是常用的纤维蛋白原检测方法。

传统凝血法简单易行,免疫测定法灵敏特异,凝集试验操作简便,荧光法具有高灵敏度。

在选择纤维蛋白原检测方法时,应根据具体情况综合考虑各种因素,选择最适合的方法。

纤维蛋白原(FIB)含量测定标准操作规程

纤维蛋白原(FIB)含量测定标准操作规程

纤维蛋白原(FIB)含量测定标准操作规程1.检验原理:采用Clauss凝固法原理,在过量凝血酶作用下,待测稀释血浆的凝固时间与其纤维蛋白原(FIB)含量呈双对数负相关。

在光学比浊法仪器上测定凝固时间,从标准曲线得出纤维蛋白原含量。

2.试剂主要组成成分:R1:FIB试剂:牛凝血酶、稳定剂R2:咪唑缓冲液:咪唑;R3:FIB定值血浆:纤维蛋白原、稳定剂。

3.样本要求:3.1.采集静脉血,立即按9份血:1份抗凝剂比例与0.109mol/L枸橼酸钠充分混合均匀。

室温3000rpm离心12分钟,上层淡黄色液体为待检的乏血小板血浆。

3.2血浆室温放置,宜在2小时内检测。

3.3血浆若不能及时检测,用塑料吸管分离,-20℃可保存2周。

测定前37℃快速融化,轻微混匀后立即检测。

4.检验方法:全自动血凝分析仪测定(详见雷杜RAC-1830标准操作规程)5.参考区间:2—4g/L6.检验结果的解释:报告FIB含量,单位为g/L,检验结果与各实验室的参考值范围相关。

7.检验方法的局限性7.1凝血过程中从因子激活到纤维蛋白激活到纤维蛋白形成的一系列反应。

因此,检验结果可能受到治疗药物(干扰物)、检验操作、检验系统等因素的影响,应考虑这些因素。

7.2试剂被污染,或者样品杯、吸管等被凝血试剂污染,会导致凝血异常,需严格控制。

7.3纤维蛋白原降解产物(FDP)含量过高会延长凝固时间,产生假性纤维蛋白原低水平。

8产品性能指标8.1重复性:用质控血浆重复测试所得结果的变异系数(CV),正常值应不超过5.0%,异常值应不超过8.0%8.2瓶间差:用质控血浆测试,瓶间差应不超过6.0%。

8.3线性:FIB试剂在测试范围内,线性相关系数r应大于0.98.9临床意义FIB含量增高:见于糖尿病及其酸中毒,动脉粥样硬化,急性传染病,急性肾炎尿毒症,休克,外科术后及轻度肝炎等。

FIB含量减低:见于DIC,原发性纤溶症,重症肝炎,肝硬化等。

纤维蛋白原含量凝血酶法测定

纤维蛋白原含量凝血酶法测定
实验四 纤维蛋白原含量凝血酶法测定
【目的】 掌握纤维蛋白原含量测定的凝血酶法。 【原理】 纤维蛋白原与凝血酶作用形成不溶性纤 维蛋白,因而血浆在加入凝血酶后即逐渐凝固, 凝固时间与血浆中纤维蛋白原的浓度呈负相关。 以国际标准品为参比血浆制作“凝固时间(s)纤维蛋白原浓度(g/L)”标准曲线。测定被检血 浆的凝固时间,被检血浆的纤维蛋白原含量即可 从标准曲线上查得。
【操作】 1.分离乏血小板血浆 2.制备标准曲线 3.检测待检血浆 4.报告方式 XX g/L
【注意事项】 1.凝血酶法对参考品的要求高,故必须保证参比 血浆的质量。 2.凝血酶复溶后,置于4~6℃环境中可保存2天。 3.稀释参比血浆稀释倍数必须准确。 4.每换一批号凝血酶,都应重新制备标准曲线。 5.纤维蛋白原浓度降低时应进一步用其它方法如 ELISA或RIA 等证实或测定纤维蛋白原的抗原浓 度。
பைடு நூலகம்

纤维蛋白原FIB(免疫比浊法)SOP

纤维蛋白原FIB(免疫比浊法)SOP
[标准品] STA 试剂配置的标准液
[试剂稳定性与贮存]
试剂自生产之日起避光贮存 2-8℃可稳定 18 个月。
[标本的收集与处理]
用血凝试验专用 1:9 枸橼酸钠抗凝真空采血管抽取静脉血,轻摇抗凝。3000r/m 离心 10 min,获乏血小板血浆。如样本不能及时测定应置于 2-8℃保存。
[质量控制品] STA 血凝质控物两种
[操作步骤] 1,将标本离心吸取血浆。 2,编码后上机检测。
[意义]
纤维蛋白原主要功能为参与凝血。增高时常见于感染症、恶 性肿瘤、手术后、脑血栓、 心肌梗塞、糖尿病;低值则见于低纤维蛋白原症、肝硬化大出血、大剂量使用尿激酶后。
xxxx 医院 临床检验实验室
纤维蛋白原 Fg
文件编号: XXXX
版序:xxxx 页码:第 1 页,共 1 页
[测定原理]
人血浆中的纤维蛋白原与其相应抗体在液相中相遇,立即形成 抗原-抗体复合物,形成一 定浊度。该浊度的高低在一定量抗体存在时与抗原的含量成正比。
[试剂组成]
纤维蛋白原抗体:羊抗人纤维蛋白原血清,表面活性剂,电解质,防腐剂,动物蛋白等。

医院纤维蛋白原测定(FIB)凝固法操作规程

医院纤维蛋白原测定(FIB)凝固法操作规程

****医院纤维蛋白原测定(FIB)凝固法操作规程一、检验目的二、工作原理三、方法学溯源四、标本采集及处理五、参考范围与危急值处理六、报告审核制度七、临床意义一、检验目的:纤维蛋白原测定(FIB)二、工作原理:被测血浆加入带不锈钢球的检测杯内温育后,加入激活试剂血浆开始凝固,被测血浆粘度不断增加,不锈钢球在检测杯底沿弯曲的轨道运动逐渐减慢,并且振幅减小,此振幅的变化由数学算法通过计算得到凝固时间。

三、方法学溯源:纤维蛋白原测定(Clauss法)原理:凝血酶将可溶性的血浆蛋白纤维蛋白原转化为不溶性的多聚体,纤维蛋白。

当凝血酶浓度较高(约为100NIH/ml)且纤维蛋白原浓度较低(0.05—0.8g/L)时该反应决定于纤维蛋白原浓度。

如在双对数坐标纸上画点,凝血酶凝块时间与纤维蛋白原浓度相比较呈线形关系。

线性范围:6-12g/L四、标本采集及处理:试剂准备:按照试剂瓶标签上标明的量,用蒸偏水复溶Fg试剂,使用前预温到室温(20—25°C)。

1、采血步骤(1)登记:登记的内容包括病人的姓名、病历号、采血时间、登记编号、送检部门等。

(2)识别病人:问清病人并识别病人是至关重要的。

了解近期用药情况和特殊生理状况,并记录。

例如阿斯匹林、潘生丁等药物能抑制血小板聚集;口服避孕药会使血小板粘附、聚集功能、纤维蛋白原及多种凝血因子活性明显增高;当剧烈运动或输注肾上腺素时VD因子活性会快速上升。

应注明。

(3)病人的体位:坐位采血;卧位采血;采血时病人的口中不准含食物、口香糖或口表等,以防意外。

(4)选择适当的静脉,最宜采血的肘窝静脉,也可在腕,手,踝静脉采血。

2、注意事项:(1)病人宜处于休息状态,并在早餐前采血(乳糜血影响检测结果)。

(2)针头不应小于21GAVGE。

国际推荐用21G1.5或20G1.5号针头,确保针头与空针联接牢固,以免产生泡沫。

如果采血时产生泡沫,可能导致纤维蛋白原和vin因子变性。

clauss法检测原理

clauss法检测原理

clauss法检测原理宝子们,今天咱们来唠唠这个Clauss法检测原理呀。

这Clauss法呢,可是在凝血检测方面相当重要的一种方法呢。

咱先来说说这个检测到底是在干啥哈。

简单来讲呢,它主要是用来检测纤维蛋白原的含量的。

纤维蛋白原这个东西啊,就像是咱们身体里凝血系统的小工匠。

想象一下,咱们身体要是哪里不小心破了个小口子,就像房子墙上有个小缝儿似的,这纤维蛋白原就得赶紧工作,把这个小缝儿给补上,不让血一直流个不停。

那Clauss法是怎么知道纤维蛋白原到底有多少呢?这里面就有很有趣的小机制啦。

这个方法呀,它是利用了凝血酶的特殊能力。

凝血酶就像是一个超级指挥官,它能指挥纤维蛋白原发生变化。

当把凝血酶加到含有纤维蛋白原的样本里的时候,哇塞,就像魔法开始施展了一样。

凝血酶会把纤维蛋白原切割成纤维蛋白单体,这些纤维蛋白单体就像一个个小砖头,它们会很快地聚集在一起,形成纤维蛋白凝块。

这个凝块的形成速度和纤维蛋白原的含量可是有着超级密切的关系呢。

如果纤维蛋白原很多,那就像盖房子的时候砖头特别多一样,凝块形成得就快。

要是纤维蛋白原比较少呢,那凝块形成就慢腾腾的。

就好比盖房子,砖头少了,工人想快也快不起来呀。

咱再从微观角度来看看这个过程哈。

纤维蛋白原呢,它的分子结构就像是一个精心设计的小零件组合。

凝血酶就像一把精准的小剪刀,咔嚓咔嚓地把纤维蛋白原剪成合适的形状,让那些纤维蛋白单体能够顺利地手拉手,抱成团。

这个过程中,还有好多小细节呢。

比如说,周围的环境因素,像温度、pH值之类的,也会影响这个反应。

就像咱们人干活的时候,环境舒不舒服也很重要呀。

如果温度不合适,就像大冬天在外面干活,手都冻僵了,肯定干不快。

pH值要是不对,那就像是在一个乱糟糟的场地里干活,也会影响效率。

从仪器检测的角度来说呢,现在的仪器可聪明啦。

它们能够很精确地检测到凝块形成的时间。

然后根据这个时间,再通过一些已经设定好的算法,就能算出纤维蛋白原的含量啦。

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纤维蛋白原测试原理
纤维蛋白原测试原理
什么是纤维蛋白原?
纤维蛋白原(Fibrinogen)是一种在血浆中存在的蛋白质。

它是
凝血过程中的关键因子,可以转变为血凝块,起到止血和修复组织的
作用。

为什么需要测试纤维蛋白原?
纤维蛋白原测试被用于评估血液系统的凝血功能。

高或低的纤维
蛋白原水平可能与出血或血栓相关。

通过准确测量纤维蛋白原浓度,
可以帮助医生诊断和监测与凝血有关的疾病,如深静脉血栓形成(DVT)、肺栓塞等。

纤维蛋白原测试的原理是什么?
纤维蛋白原测试基于凝血酶原时间(PT)和活化部分凝血活酶时
间(APTT)两种常用的方法。

凝血酶原时间(PT)法
1.准备血浆样本。

2.在一定条件下,将血浆加入试剂盒中。

3.添加凝血酶原激活剂和钙离子,观察血浆的凝聚情况。

4.计时,记录血浆的凝聚时间。

5.根据一个标准曲线,可以推算出纤维蛋白原浓度。

活化部分凝血活酶时间(APTT)法
1.准备血浆样本。

2.在一定条件下,将血浆加入试剂盒中。

3.添加活化部分凝血活酶激活剂和钙离子,观察血浆的
凝聚情况。

4.计时,记录血浆的凝聚时间。

5.根据一个标准曲线,可以推算出纤维蛋白原浓度。

纤维蛋白原测试的注意事项
•这些测试通常在实验室中进行,需要专业人员进行操作和解读结果。

•在进行纤维蛋白原测试前,需要遵循设备和试剂盒的操作规范。

•准确测量纤维蛋白原的浓度有助于医生诊断和监测相关疾病,但仍需结合临床症状和其他实验室数据进行判断。

结论
纤维蛋白原测试是评估血液凝聚能力的重要方法之一。

通过了解
纤维蛋白原的测试原理,我们能更好地理解其在临床中的应用和意义。

然而,这项测试还需要进一步的研究和临床验证,以便为临床医生提
供更准确、可靠的诊断结果。

纤维蛋白原测试的潜在问题和未来发展
纤维蛋白原测试虽然在临床实践中起到了重要的作用,但仍然存
在一些潜在问题需要解决。

首先,纤维蛋白原测试的结果受到一些生
理因素的影响,例如年龄、性别、药物使用等,这可能导致结果的误差。

因此,为了提高测试的准确性,需要建立更准确的参考值范围,
并结合其他临床数据进行综合判断。

其次,纤维蛋白原测试在血栓疾病的诊断和治疗过程中的指导作
用有待深入研究。

虽然纤维蛋白原是相关疾病的标志物之一,但如何
根据测试结果来制定治疗方案仍然是一个挑战。

未来的研究可以结合
其他指标和影像学检查,建立更完善的评估体系,以便更好地指导临
床决策。

另外,随着科技的不断发展,纤维蛋白原测试也在逐渐改进和演进。

一些新的检测技术,如质谱法、流式细胞术等,已经被用于纤维
蛋白原的测定,具有更高的灵敏度和精确性。

这些新技术的应用将使
纤维蛋白原测试更加便捷和可靠。

综上所述,纤维蛋白原测试在临床实践中具有重要的意义。

了解
其测试原理和潜在问题,能够更好地理解其在诊断和治疗中的应用。

随着科技的进步和研究的不断深入,纤维蛋白原测试将逐渐发展壮大,为临床医生提供更准确可靠的诊断结果。

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