实验九 测定细菌生长曲线
微生物实验报告：测定细菌生长曲线
测定细菌生长曲线一、实验目的1．了解细菌生长曲线特征，测定细菌繁殖的代时；2．学习液体培养基的配制以及接种方法；3．反复练习无菌操作技术；4．了解不同细菌，不同接种方法在同一培养基上生长速度的不同；5．掌握利用细菌悬液混浊度间接测定细菌生长的方法；二、实验原理将一定量的菌种接种在液体培养基内，在一定的条件下培养，可观察到细菌的生长繁殖有一定规律性，如以细菌活菌数的对数做纵坐标，以培养时间做横坐标，可绘成一条曲线，称为生长曲线。
单细胞微生物发酵具有4个阶段，即调整期（迟滞期）、对数期（生长旺盛期）、平衡期（稳定期）、死亡期（衰亡期）。
生长曲线可表示细菌从开始生长到死亡的的全过程动态。
不同微生物有不同的生长曲线，同一种微生物在不同的培养条件下，其生长曲线也不一样。
因此，测定微生物的生长曲线对于了解和掌握微生物的生长规律是很有帮助的。
测定微生物生长曲线的方法很多，有血细胞计数法，平板菌落计数法，称重法和比浊法。
本实验才用比浊法，由于细胞悬液的浓度与混浊度成正比，因此，可以利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液的菌液的浓度。
将所测得的光密度值（OD600）与对应的培养时间做图，即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线。
注意，由于光密度表示的是培养液中的总菌数，包括活菌和死菌，因此所测生长曲线的衰亡期不明显。
从生长曲线我们可以算出细胞每分裂一次所需要的时间，即代时，以G表示，其计算公式为：G＝（t2-t1）/[(lgW1-lgW2)/lg2]式中t2和t1为所取对数期两点的时间，W1和W2分别为对应时间测得的细胞含量或OD。
三、实验器材大肠杆菌，枯草杆菌菌液及平板；培养基(100mL/250mL三角瓶×10瓶/大组):牛肉膏蛋白胨葡萄糖培养基；取液器(5000ul, 1000ul 各一支)，无菌1000ul吸头若干，无菌5000ul吸头若干，比色皿10个及共用参比杯一个，培养箱3台，722s分光光度计；四、实验步骤1．活化菌种将细菌接种到牛肉膏蛋白胨葡萄糖三角瓶培养基中，37℃振荡培养18h，另外准备单菌落平板各1块；2．接种6人大组分为3个小组，按表1接种。
细菌生长曲线
如大肠杆菌在对数期的代时是20min
细胞形态一致，细胞生理和生化特征稳定 适合作为生化材料 适合作为“种子”
细胞群体生长机制
用数学方法研究细菌生长的对数期
代数
0
细胞数或分裂结果
1，20
1
2
2，21
4，22
3
n Y=X2n
8，23
2n lg Y=lgX+nlg2， n=lgy-lgx/lg2
2. 生长曲线（Growth） Curve） 描述微生物特别是单细胞微生物生长规律的 曲线
在液体培养中，将微生物细胞接种到新鲜培养基中 在特定条件下培养 细胞以二分分裂繁殖 以培养时间为横坐，以细胞数量的对数为纵坐标作图 所得到的曲线即是微生物生长曲线
微生物生长曲线制作原理示意图
细菌生长曲线可分为延滞期（lag phase），对数期（log phase），稳定期（stationary phase）和死亡期（death phase）
生长曲线计算应用举例
某处于对数期的大肠杆菌培养物的细胞浓度为 100个/ml，经过400分钟培养，细胞的浓度增加 到10亿个/ml 求大肠杆菌的代时和繁殖代数 n=lgy-lgx/lg2=lg109-102/0.3010=23.1 代时G=17.3 结果：代时是17.3分钟，400分钟内繁殖了23.1代
细菌生长曲线（growth curve）
1. 微生物群体生长 （Population Growth）
生长：微生物生长包括个体体积的增加及细胞数量 的增多 生长速率（Growth rate）是指单位时间内细胞数量或 质量增加的量 从一个细胞变成两个细胞的时间间隔称代时 （generation time）
对数期的细胞生长， 红色表示直接的细 胞数量，蓝色表示 细胞的对数生长
细菌生长曲线之测定
實驗六細菌生長曲線之測定◎ Exp 11. Turbidity of bacteria一、目的：在進行細菌生長曲線之測定前，必須先了解 U-2001 Spectropho-tometer 操作方法，才能將細菌的數量以吸光值的方式表示出來。
二、原理：請詳讀整理 p. 90-92，學會調整 Optical density (O.D.) 【Exp 13.會用到】。
三、器材：1. culture：(每組)24 hr Escherichia coli (broth)2. medium： (每組)Nutrient broth3. equipment ：1 ml pipette，pipette aid，cuvette，拭鏡紙，廢菌液杯，裝蒸餾水的洗瓶，滅菌空試管，U-2001 Spectrophotometer，振盪器。
四、實驗步驟※由助教先示範操作方法，再由學生自行操作與測量待測液之吸光值。
1. 了解 U-2001 Spectrophotometer 操作方法：a. 溫機約 15 分鐘。
b. MENU → (主目錄) 選 1. Photometer →輸入波長 600 nm 及 ABS →Forward →c. Nutrient broth 歸零 autozero → (前、後二支 cuvette) ※1d. 取出後面之 cuvette ，倒入待測液※2，等到右上方數據穩定後，按下 Start →記錄。
※1 cuvette 有石英管 (測波長 340 nm 以下)、玻璃管、塑膠管等材質，本實驗使用塑膠材質之比色管。
※2 每次測定前需先用蒸餾水滴洗cuvette，再以待測液潤濕，倒掉，再裝入待測液，測完倒掉，用蒸餾水滴洗。
測定之前cuvette 須用拭鏡紙擦乾，手握管的非透明處；廢菌液請滴洗入廢菌液杯中，集中處理) 。
2. 每組取一管助教所準備之E. coli當待測液，實際演練U-2001Spectrophotometer 操作，測出其原液 O.D. 【Exp 13. 將會利用到此操作，故須熟悉其操作步驟】。
实验报告微生物的生长曲线实验
实验报告微生物的生长曲线实验实验报告
实验目的：
本实验旨在通过监测微生物的生长曲线，研究微生物的生长规律，并探讨其对环境因素的响应。
实验材料及方法：
1. 材料：
- 微生物培养基
- 无菌培养瓶或试管
- 微量移液器或移液管
- 无菌平板
- 培养箱或恒温摇床
- 显微镜
2. 方法：
（这里使用编号列表来列出具体的实验步骤）
实验步骤：
1. 实验前准备：
（这里写明实验前的准备工作，如准备培养基、灭菌操作等）
2. 微生物获取：
（这里描述如何获取微生物样品，如从环境中采样、有选择地分离微生物菌落等）
3. 微生物培养：
（这里阐述微生物的培养过程，包括制备培养基、接种微生物样品等步骤）
4. 生长曲线检测：
（这一部分是实验的重点，需要详细记录实验过程和结果。
可以使用表格、图表等方式展示数据）
5. 结果分析：
（根据实验结果，对微生物生长曲线进行分析和解读，可结合图表进行说明）
6. 讨论与结论：
（根据实验结果的分析，进行讨论并得出结论，可以对实验中可能存在的问题进行分析，提出进一步改进的建议）
实验结论：
通过本实验对微生物的生长曲线进行监测，我们得出了如下结论：
（这里简洁地总结实验结果得出的结论，为了增加字数可以进一步展开阐述，如讨论生长曲线的不同阶段、影响微生物生长的环境因素等等）
实验报告结束。
注意：本实验报告以“实验报告”的格式为基础，根据实验内容进行适当的调整。
其中，具体的实验步骤和结果可以根据实际情况进行修改和补充，以确保文章的准确性和完整性。
09大肠杆菌生长曲线的测定
第九次课大肠杆菌生长曲线的测定（2学时）一、基本原理大多数细菌的繁殖速率很快，在合适的条件下，一定时期的大肠杆菌细胞每20min分裂一次．将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中，在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数期、稳定期和衰亡期四个阶段。
以培养时间为横坐标，以细菌数日的对数或生长速率为纵坐标作图所绘制的曲线称为该细菌的生长曲线。
不同的细菌在相同的培养条件下其生长曲线不同，同样的细菌在不同的培养条件下所绘制的生长曲线也不相同。
测定细菌的生长曲线，了解其生长繁殖规律，这对人们根据不同的需要，有效地利用和控制细菌的生长具有重要意义。
本实验用分光光度计进行光电比浊测定不同培养时间细菌悬浮液的OD值，绘制生长曲线．也可以直接用试管或带有测定管的三角瓶测定“klett units”值的光度计。
只要接种1支试管或1个带测定管的三角瓶，在不同的培养时间(横坐标)取样测定，以测得的klett units为纵坐标，便可很方便地绘制出细菌的生长曲线。
如果需要，可根据公式1klett units=OD／0.002换算出所测菌悬液的OD值。
二、实验器材1．菌种大肠杆菌。
2．培养基LB液体培养基70m1，分装2支大试管(5ml／支)，剩余60ml装入250ml的三角瓶．3．仪器或其他用具722型分光光度计，水浴振荡摇床，无菌试管，无菌吸管等。
三、实验步骤1.标记取11支无菌大试管，用记号笔分别标明培养时间，即0、1.5、3、4、6、8、10、12、14、16和20h。
2．接种分别用5m1无菌吸管吸取2．5m1大肠杆菌过夜培养液(培养10—12h)转人盛有50m1 LB液的三角瓶内，混合均匀后分别取5m1混合液放人上述标记的11支无菌大试管中。
3．培养将已接种的试管置摇床37℃振荡培养(振荡频率250r／min)，分别培养0、1.5、3、4、6、8、10、12、14、16和20h，将标有相应时间的试管取出，立即放冰箱中贮存，最后一同比浊测定其光密度值。
细菌生长曲线的测定实验报告
竭诚为您提供优质文档/双击可除细菌生长曲线的测定实验报告篇一：细菌生长曲线实验九测定细菌生长曲线[实验目的]1．了解细菌生长曲线特征：2．学习液体培养基的配制以及注意事项。
3．学习液体种子和固体种子的不同接种方法和注意事项。
4．利用细菌悬液浑浊度间接测定细菌生长。
[仪器和材料]1．实验材料(1)大肠杆曲，枯草杆曲培养液及大肠杆菌平板。
(2)牛肉膏蛋门胨葡萄糖培养基(150ml／250ml三角瓶x4瓶／大组)，配方：牛肉膏5g，蛋白胨10g，nacl5g，葡萄糖10g，加水至1000ml，ph7．5。
2．实验仪器取液器(5000μl，1000μl，200tμl各一支)；培养箱．摇床，722s分光光度汁；1000μl无菌吸头100个；5000μl 无菌吸头2(:细菌生长曲线的测定实验报告)个；1ml或4ml 玻璃或塑料比色皿4个，共用参比杯一个。
[实验原理]将一定量的细菌接种在液体培养基内．在一定的条件下培养，可观察到细菌的生长繁殖有一定规律性，如以细菌活菌数的对数作纵坐标，以培养时间作横坐标，可绘成一条曲线，称为生长曲线(图91)。
单细胞微生物发酵具有4个阶段，即调整(迟滞期)、对数期(生长旺盛期)、平衡期(稳定期)、死亡期(衰亡期)。
生长曲线可表示细菌从开始生长到死亡的全过程动态。
不同微生物有不同的生长曲线，同一种微生物在不同的培养条件下，其生长曲线也不一样。
因此，测定微生物的生长曲线对于了解和掌握微生物的生长规律是很有帮助的．测定微生物生长曲线的方法很多，有血细胞计数法，平板菌落计数法，称重法和比浊法等。
本实验采用比浊法测定，由于细菌悬液的浓度与浑浊度成正比，因此，可以利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液的浓度。
将所测得的光密度值(测oD550或oD620或oD600或oD420，可任选一波长)与对应的培养时间作图，即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线。
注意，由于光密度表示的是培养液中的总菌数，包括活菌与死菌，因此所测生长曲线的衰亡期不明显。
测定细菌生长曲线(整理版)
一原理:
将少量细菌接种到一定体积的、适合的新鲜培养基中，在适宜的条件下进行培养，定时测定培养液中的菌量，以菌量的对数作纵坐标，生长时间作横坐标，绘制的曲线叫生长曲线。
它反映了单细胞微生物在一定环境条件下于液体培养时所表现出的群体生长规律。
依据其生长速率的不同，一般可把生长曲线分为延缓期、对数期、稳定期和衰亡期。
这四个时期的长短因菌种的遗传性、接种量和培养条件的不同而有所改变。
因此通过测定微生物的生长曲线，可了解各菌的生长规律，对于科研和生产都具有重要的指导意义。
测定微生物的数量有多种不同的方法，可根据要求和实验室条件选用。
本实验采用比浊法测定，由于细菌悬液的浓度与光密度（OD值）成正比，因此可利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液的浓度，并将所测的OD值与其对应的培养时间作图，即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线，此法快捷、简便。
二实验仪器、材料和用具
2.1种子液制备
取菌斜面菌种各1支，以无菌操作挑取1环菌苔，接入LB培养液中，静止培养18h作种子培养液。
2.2接种培养
用1mL无菌吸管分别准确吸取1mL种子液加入已编号的N个三角瓶中，于37℃下振荡培养。
2.3 生长量测定
以蒸馏水作为参比，开始培养前测定每组培养液的OD600值作为起始点。
开始培养后，每小时吸取测定一次OD600值。
（注：对浓度大的菌悬液用未接种的液体培养基适当稀释后测定，使其OD600值在0.10～0.65以内，经稀释后测得的OD600值要乘以稀释倍数，才是培养液实际的OD600值。
）
三结果
将测定的OD值填入下表：。
[精品]细菌生长曲线的测定
![[精品]细菌生长曲线的测定](https://img.taocdn.com/s3/m/26b67aef5122aaea998fcc22bcd126fff7055d68.png)
[精品]细菌生长曲线的测定细菌生长曲线的测定是细菌学中的一项重要实验。
它可以帮助我们了解细菌的生长繁殖规律及其影响因素，为控制细菌繁殖提供理论依据。
本次实验将介绍如何通过外观观察、菌落计数及测定细菌生物量的方法，获得细菌在液体培养基中的生长曲线。
实验步骤：一、准备实验材料和试剂1、选取一种细菌菌株，本次实验选择了大肠杆菌（Escherichia coli）；2、配置好液体培养基，一般为普通营养琼脂培养基、肉汤培养基等；3、消毒好实验室的工作台面及实验仪器；4、准备好移液管、试管、比色管和加热消毒的线圈镊子等实验用具。
二、制备不同浓度的菌液1、挑选一根菌棒，从培养基上接入一些带有细菌的菌落，将菌落均匀涂抹于培养基表面；2、将含有细菌的培养基放置在恒温摇床中，在适宜的温度下进行培养；3、当细菌生长至一定程度（一般在对数生长期）时，用无菌的移液管，在培养基中取出一定量的菌液；4、分别将不同体积的菌液加入到含有培养基的试管中，制备成不同浓度的菌液。
三、测定不同浓度菌液对应的OD600值1、将制备好的不同浓度菌液放入洗涤过的比色管中；2、由于细菌太小，肉眼观察不能得出其数量的增多或减少，因此需要使用分光光度计在600nm处测量各个浓度的菌液的吸光度（OD）值；3、重复测量3次，取平均值计算OD600；4、根据OD600值和菌液中细胞数量的线性关系，可通过OD600值推算出细胞数。
2、每隔2-3个小时，取出一定量的菌液，测量其OD600值，记录下菌液对应时间的值；3、采用计数培养法，每隔一定时间取出一定体积的菌液，进行菌落数的计数；4、利用OD600值曲线和菌落数曲线绘制出细菌生长曲线。
实验注意事项：1、实验期间需在无菌条件下操作，防止细菌的外界感染对实验结果的影响；2、实验者需佩戴适当的防护手套及实验服，以免对人体造成伤害；3、制备好菌液后需要及时放置在摇床中，防止菌落外的细菌感染进去；4、测量OD600值时比色管必须清洗干净，用甲醇或无菌去离子水。
细菌的生化实验报告
细菌的生化实验报告细菌的生化实验报告细菌是微生物界中最为常见的一类生物，它们以其微小的身躯和巨大的生物活动而闻名。
在本次实验中，我们旨在探索细菌的生化特性和其在环境中的作用。
通过实验，我们对细菌的生长、代谢和适应能力有了更深入的了解。
实验一：细菌的生长曲线在这个实验中，我们选择了大肠杆菌作为研究对象。
我们将大肠杆菌接种在培养基上，并在一定时间间隔内记录细菌的生长情况。
通过测量培养液中的细菌数量，我们绘制了细菌的生长曲线。
结果显示，细菌的生长曲线呈现出典型的“S”形曲线。
在实验初期，细菌数量增长较为缓慢，这是由于适应期的存在。
随着时间的推移，细菌进入了指数增长期，细菌数量迅速增加。
然而，随着培养基中营养物质的消耗和代谢产物的积累，细菌的生长速率逐渐减缓，进入了平台期。
这是由于细菌的生长受到了环境条件的限制。
实验二：细菌的代谢特性在这个实验中，我们研究了细菌的代谢特性，特别是其对碳源的利用能力。
我们选择了葡萄糖、乳糖和蔗糖作为碳源，通过测量细菌在不同碳源下的生长情况，评估了细菌对不同碳源的利用能力。
结果显示，大肠杆菌对葡萄糖的利用能力最强，其次是乳糖，而对蔗糖的利用能力较弱。
这表明细菌对碳源的利用能力存在差异，可能与其代谢途径和酶的分布有关。
此外，我们还观察到在不同碳源条件下，细菌的生长速率和产生的代谢产物也有所不同。
这提示我们，在实际应用中，选择合适的碳源可以促进细菌的生长和代谢活性。
实验三：细菌的适应能力在这个实验中，我们研究了细菌的适应能力，特别是其对环境压力的响应。
我们将大肠杆菌分别接种在不同的培养基中，其中一组培养基中添加了抗生素，另一组培养基中添加了高温。
结果显示，添加抗生素的培养基中，细菌的生长受到了明显的抑制。
抗生素通过抑制细菌的代谢活性和细胞分裂，从而阻碍了细菌的生长。
而在高温条件下，细菌的生长速率明显减慢，部分细菌甚至无法生存。
这表明细菌对环境压力的适应能力有限，过高的温度和抗生素的存在可能对细菌产生不可逆的影响。
细菌生长特点及生长曲线的测定
实验原理（分光光度计与比浊法）
朗伯-比尔定律 A=-lg(I/I。)=-lgT=kLc
比浊法虽只能测相对数量，但便捷。某些情况 下，我们重在数量的变化而不在数量本身
三、实验内容
1、分光光度计的使用
2、大肠杆菌生长曲线的测定与绘制
四、实验材料
1. 试剂
蛋白胨、氯化钠、酵母浸粉等。 2. 仪器 托盘天平、高压蒸汽灭菌锅、分光光度计、恒温箱、恒温振荡 器。 3. 玻璃器皿 试管、烧杯、量筒、锥形瓶、培养皿、移液管等。 4. 其它物品
药匙、称量纸、pH试纸、记号笔、棉花、纱布、耐高温皮筋、 报纸等。
恒温振荡器（摇床）
五、实验流程
接种→培养→取样→比浊
★实验安排（4人一组） 第一组：LB 培养基，1:100
第二组： LB 培养基，1:50
第三组： LB 培养基，1:20 第四组： LB 培养基，1:100 第五组： LB 培养基，1:10 第六组： LB 培养基，1:5
二、实验原理
理想中生长曲线
1.4 1.2 1 0.8 0.6
0.4
数 量
n y=2
0.2 0 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 时间
理想中生长曲线
1.4 1.2 1 0.8 0.6
0.4 0.2 0 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 时间
八、讨论
1.接种龄如何影响大肠杆菌生长？
2.培养基营养成分/浓度如何影响大肠杆菌生长？ 3.实验为何观察不到稳定期和衰退期？ （请3选1，作答在实验报告上）
★实验安排（4人一组） 第一组：LB 培养基，1:100
第二组： LB 培养基，1:20
(完整版)生长曲线的测定
实验日期：2017.11.1 实验班级：生物技术指导教师：张建丽姓名：高熹学号：1120152430测定细菌生长曲线一．实验目的1.通过对大肠杆菌生长曲线的测定，了解细菌生长的特点，综合训练微生物实验的基本实验技能。
2.巩固培养基的配制、灭菌、仪器的包扎、倒平板。
3.掌握用比浊法测定细菌的生长曲线。
二．实验原理将少量细菌接种到一定体积的、适合的新鲜培养基中，在适宜的条件下进行培养，一定时间测定培养液中的菌量，以菌量的数量作纵坐标，生长时间作横坐标，绘制的曲线叫生长曲线。
它反映了单细胞微生物在一定环境条件下于液体培养时所表现出的群体生长规律。
依据其生长速率的不同，一般可把生长曲线分为延缓期、生长期、稳定期和衰亡期。
将每一种一定量的细菌转入新鲜液体培养基中，在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段。
延迟期：又叫调整期。
细菌接种至培养基后，对新环境有一个短暂适应过程（不适应者可因转种而死亡）。
此期曲线平坦稳定，因为细菌繁殖极少延迟期长短因素种、接种菌量、菌龄以及营养物质等不同而异，一般为1～4小时。
此期中细菌体积增大，代谢活跃，为细菌的分裂增殖合成、储备充足的酶、能量及中间代谢产物。
对数生长期：又称指数期。
此期生长曲线上活菌数直线上升。
细菌以稳定的几何级数极快增长，可持续几小时至几天不等（视培养条件及细菌代时而异）。
此期细菌形态、染色、生物活性都很典型，对外界环境因素的作用敏感，因此研究细菌性状以此期细菌最好。
抗生素作用，对该时期的细菌效果最佳。
稳定期：该期的生长菌群总数处于平坦阶段，但细菌群体活力变化较大细菌浓度达到最大即环境最大容纳量。
由于培养基中营养物质消耗、毒性产物（有机酸、过氧化物等）积累PH下降等不利因素的影响，细菌繁殖速度渐趋下降，相对细菌死亡数开始逐渐增加，此期细菌增殖数与死亡数渐趋平衡。
细菌形态、染色、生物活性可出现改变，并产生相应的代谢产物如外毒素、内毒素、抗生素、以及芽孢等。
细菌生长曲线的测定的实验步骤
细菌生长曲线的测定的实验步骤一、实验目的1. 了解细菌生长曲线特征，测定细菌繁殖的代时；2. 学习液体培养基的配制以及接种方法；3. 反复练习无菌操作技术；4. 了解不同细菌，不同接种方法在同一培养基上生长速度的不同；5. 掌握利用细菌悬液混浊度间接测定细菌生长的方法二、 实验原理将一定量的细菌接种在液体培养基内，在一定条件下培养，可观察到细菌的生长繁殖有一定的规律性，如以细菌的活菌数的对数作纵坐标，以培养时间作横坐标，可绘成一条曲线，成为生长曲线（如图一）。
图一 微生物生长曲线示意图单细胞微生物的发酵具有四个阶段，即Ⅰ调整期（延滞期）、Ⅱ对数期（生长旺盛期）、Ⅲ平衡期（稳定期）、Ⅳ死亡期（衰亡期）。
生长曲线可表示细菌从开始生长到死亡的全过程的动态。
不同的微生物有不同的生长曲线，同一种微生物在不同的培养条件下，其生长曲线也不一样。
因此，测定微生物的生长曲线对于了解和掌握微生物的生长规律是很有帮助的。
测定微生物生长曲线的方法很多，有血球计数板法、平板菌落计数法、称重法和比浊法等。
本实验采用比浊法测定，由于细菌悬液的浓度与混浊度成正比，因此，可利用分光光度计测定细菌悬液的光密度来推知菌液的浓度。
将所测得的光密度值（OD600）与其对应的培养时间作图，即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线。
注意，由于光密度表示的是培养液中的总菌数，包括活菌与死菌，因此所测定的生长曲线的衰亡期不明显。
从生长曲线我们可以算出细胞每分裂一次所需要的时间，即代时，以G 表示。
其计算公式为：2lg /)lg (lg 1212W W t t G --=式中t1和t2为所取对数期两点的时间；W1和W2分别为相应时间测得的细胞含量（g/L ）或OD 。
三、 实验仪器、材料和用具1.实验材料:大肠杆菌，枯草杆菌菌液及平板；2.培养基:牛肉膏蛋白胨葡萄糖培养基3.实验仪器:取液器(5000ul, 1000ul 各一支);培养箱, 摇床，722s分光光度计；4.实验用具:无菌1000ul吸头80个;无菌5000ul吸头2个;比色皿9个+共用参比杯一个.四、实验步骤1.准备菌种：将细菌接种到牛肉膏蛋白胨葡萄糖三角瓶培养基中，37℃振荡培养18h，另外准备单菌落平板各1块2.分为三个小组：第（1）小组取1.0ml大肠杆菌菌液接种到100ml培养基, 37 ℃ 200rpm取3.0ml大肠杆菌菌液接种到100ml培养基，37 ℃ 200rpm取5.0ml大肠杆菌菌液接种到100ml培养基，37 ℃ 200rpm第（2）小组取一个大肠杆菌菌落接种到100ml培养基， 37 ℃ 200rpm取1.0ml大肠杆菌菌液接种到100ml培养基，37 ℃ 110rpm取1.0ml大肠杆菌接种到100ml培养基， 30 ℃ 200rpm第（3）小组取1.0ml枯草杆菌接种到100ml培养基， 37 ℃ 200rpm取1.0ml枯草杆菌接种到100ml培养基， 30 ℃ 200rpm取1.0ml枯草杆菌接种到100ml培养基， 37 ℃ 110rpm每培养一小时取样一次(2.5h,3.5h加测1次). 对照组测量起始pH,所有瓶子测量发酵9h结束测pH.3.测量：选用600nm波长，以蒸馏水作为参比，开始培养前测定每组培养液的OD值作为起始点。
细菌生长曲线测定实验方法的研究
细菌生长曲线测定实验方法的研究一、本文概述细菌生长曲线测定实验方法的研究对于深入了解细菌的生长规律、生长环境、生长条件以及生长过程中的代谢变化等方面具有重要意义。
本文旨在探讨细菌生长曲线测定的实验方法，包括实验原理、实验步骤、实验条件的选择与优化等方面，以期为提高细菌生长曲线测定的准确性和可靠性提供理论支持和实践指导。
本文将介绍细菌生长曲线测定的基本原理，包括细菌生长曲线的定义、特点以及影响因素等。
在此基础上，本文将详细阐述细菌生长曲线测定的实验步骤，包括实验材料的准备、实验条件的设置、实验过程的操作以及实验结果的记录与分析等。
本文将重点讨论实验条件的选择与优化。
实验条件是影响细菌生长曲线测定结果的关键因素，包括培养基的成分、温度、pH值、接种量等。
本文将通过对比实验和数据分析，探讨不同实验条件对细菌生长曲线的影响，从而确定最佳的实验条件组合。
本文将总结细菌生长曲线测定实验方法的优缺点，并提出改进意见和建议。
通过本文的研究，将为细菌生长曲线测定的实验方法提供更为准确、可靠的理论支持和实践指导，有助于推动细菌学研究的深入发展。
二、细菌生长曲线的理论基础细菌生长曲线测定实验方法的理论基础主要源自微生物生长动力学。
微生物生长动力学描述了微生物在特定环境下的生长规律，其中包括细菌生长曲线的形成机制。
细菌生长曲线是反映细菌群体生长状态的重要指标，通过对细菌生长曲线的分析，可以了解细菌生长的不同阶段，以及影响细菌生长的各种因素。
细菌生长曲线通常可分为四个主要阶段：延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期。
在延迟期，细菌适应新的生长环境，进行必要的代谢准备，此阶段细菌数量增长缓慢。
进入对数生长期后，细菌以指数方式迅速增长，这是细菌生长最为旺盛的阶段。
稳定期时，由于营养物质的消耗和代谢产物的积累，细菌增长速率逐渐减缓，细菌数量趋于稳定。
进入衰亡期，细菌由于营养物质的耗尽和代谢产物的毒性作用，生长速率急剧下降，细菌大量死亡。
细菌生长曲线的测定
细菌生长曲线的测定细菌生长曲线的测定是研究细菌生长过程中数量的变化规律的重要实验方法。
通过测定不同时间点上细菌的数量，我们可以了解细菌的繁殖速度、生命周期以及适宜生长环境等信息。
本文将介绍细菌生长曲线的测定步骤，并探讨其在科学研究和实际应用中的指导意义。
首先，测定细菌生长曲线的实验需要准备培养基、平板、试管等实验器材，以及待测的细菌样品。
将培养基倒入平板中，使其均匀地附着在平板表面上。
取一定量的细菌样品，接种在试管中的培养基中，然后将试管放入恒温培养箱中。
在不同时间点上，分别取出试管，通过将样品进行稀释后在平板上接种细菌来测定其数量。
通过计数细菌在平板上形成的菌落数，我们可以得到细菌数量随时间的变化规律。
细菌生长曲线通常可以分为四个阶段：潜伏期、指数期、平稳期和衰亡期。
在潜伏期，细菌数量较低，适生环境适宜时，细菌开始繁殖。
进入指数期后，细菌数量呈指数增长，繁殖速度较快。
在平稳期，细菌数量达到平衡，新生细菌数量与死亡细菌数量相等。
最后，在衰亡期中，细菌数量逐渐减少。
细菌生长曲线的测定对于科学研究和实际应用中有着重要意义。
在科学研究中，通过测定细菌生长曲线可以获得细菌的生命周期信息，了解其生长特性和繁殖机制。
这对于研究细菌的生物学特性、药物敏感性以及探索新的治疗方法具有指导意义。
此外，测定细菌生长曲线还可用于评估食品、水源等环境中的细菌污染情况，为公共卫生和食品安全提供重要依据。
在实际应用中，细菌生长曲线的测定可用于制定细菌培养条件和控制措施。
通过了解细菌的繁殖速度和繁殖条件，我们可以优化培养条件以提高细菌产量，或者通过调节环境因素来控制细菌的滋生。
此外，在药物研发和微生物工程中，测定细菌生长曲线可以评估抗生素对细菌的杀菌效果、药物毒性及其机制，为药物设计和微生物工程提供重要参考。
综上所述，细菌生长曲线的测定是一项生动、全面且具有指导意义的实验方法。
通过测定细菌数量随时间的变化规律，我们可以了解细菌的生长特性、繁殖机制和生命周期等信息。
微生物学实验报告
微生物学实验报告实验名称：微生物生长曲线测定实验目的：通过测定微生物的生长曲线，了解微生物的生长规律和生长速率。
实验步骤：1. 准备培养基：根据实验需要选择合适的培养基，如大肠杆菌的培养基为LB培养基。
按照要求加入适量的培养基粉末到烧杯中，加入适量的蒸馏水溶解均匀。
2. 灭菌处理：将培养基倒入试管中，用塞子盖紧试管口，放入高压锅中进行高压灭菌处理，时间和温度根据不同的菌种和培养基选择。
3. 填充试管：将灭菌好的试管取出，用火焰燃烧灭菌的酒精灯瓶口；将培养基倒入试管中，约填充1/3试管高度。
4. 接种菌液：将待测菌种培养物挑捞一部分，移入培养基中，以避免杂菌的污染。
5. 标记试管：在试管上标明菌种名称和接种时间。
6. 培养条件：将接种好的试管放入恒温摇床中，控制温度和摇床的摇动速率，以提供合适的培养条件。
7. 观察记录：每隔一定时间间隔，取出试管，观察并记录微生物的生长情况，如菌落的大小、菌液的浑浊度等。
8. 绘制生长曲线：根据实际观察记录，绘制微生物的生长曲线图。
实验结果和讨论：根据观察和实际测定，可以得到微生物的生长曲线。
典型的微生物生长曲线包括潜伏期、指数期、平稳期和衰退期。
在潜伏期，微生物适应环境，准备生长，菌落数量和菌液浑浊度变化不大。
潜伏期的长度取决于微生物的生长速率和菌种类型。
在指数期，微生物开始快速增长，菌落数量呈指数增长，菌液浑浊度明显上升。
在平稳期，微生物的生长速率逐渐减缓，菌液浑浊度趋于稳定。
在衰退期，微生物的生长速率减缓，菌落数量开始减少，菌液逐渐变清。
通过绘制微生物的生长曲线，可以了解微生物的生长规律和生长速率。
这对于微生物学的研究和应用具有重要的指导意义。
实验结论：通过测定微生物的生长曲线，我们可以得到微生物的生长规律和生长速率。
不同微生物在不同的培养条件下生长曲线可能会有所差异，因此在实际应用中需要根据具体的情况进行调整和优化。
微生物的生长规律可以为微生物学的研究和应用提供理论依据。
生长曲线的测定
实验日期：2017.11.1 实验班级：生物技术指导教师：张建丽姓名：高熹学号：1120152430测定细菌生长曲线一．实验目的1.通过对大肠杆菌生长曲线的测定，了解细菌生长的特点，综合训练微生物实验的基本实验技能。
2.巩固培养基的配制、灭菌、仪器的包扎、倒平板。
3.掌握用比浊法测定细菌的生长曲线。
二．实验原理将少量细菌接种到一定体积的、适合的新鲜培养基中，在适宜的条件下进行培养，一定时间测定培养液中的菌量，以菌量的数量作纵坐标，生长时间作横坐标，绘制的曲线叫生长曲线。
它反映了单细胞微生物在一定环境条件下于液体培养时所表现出的群体生长规律。
依据其生长速率的不同，一般可把生长曲线分为延缓期、生长期、稳定期和衰亡期。
将每一种一定量的细菌转入新鲜液体培养基中，在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段。
延迟期：又叫调整期。
细菌接种至培养基后，对新环境有一个短暂适应过程（不适应者可因转种而死亡）。
此期曲线平坦稳定，因为细菌繁殖极少延迟期长短因素种、接种菌量、菌龄以及营养物质等不同而异，一般为1～4小时。
此期中细菌体积增大，代谢活跃，为细菌的分裂增殖合成、储备充足的酶、能量及中间代谢产物。
对数生长期：又称指数期。
此期生长曲线上活菌数直线上升。
细菌以稳定的几何级数极快增长，可持续几小时至几天不等（视培养条件及细菌代时而异）。
此期细菌形态、染色、生物活性都很典型，对外界环境因素的作用敏感，因此研究细菌性状以此期细菌最好。
抗生素作用，对该时期的细菌效果最佳。
稳定期：该期的生长菌群总数处于平坦阶段，但细菌群体活力变化较大细菌浓度达到最大即环境最大容纳量。
由于培养基中营养物质消耗、毒性产物（有机酸、过氧化物等）积累PH下降等不利因素的影响，细菌繁殖速度渐趋下降，相对细菌死亡数开始逐渐增加，此期细菌增殖数与死亡数渐趋平衡。
细菌形态、染色、生物活性可出现改变，并产生相应的代谢产物如外毒素、内毒素、抗生素、以及芽孢等。
简述细菌的生长曲线及其实际意义
简述细菌的生长曲线及其实际意义试验一，细菌的生长曲线实验目的：通过生长曲线测量、培养细菌，获得在不同时间的实际菌数，从而了解细菌的繁殖特性。
方法与步骤：一、选取适当大小的烧杯三只(直径30cm，高20cm)。
分别注入75%的酒精10ml，然后分别加入3、 5ml、 1ml的不同浓度的葡萄糖溶液，再分别加入等量的接种培养液，每只容器的液面高度约为容器的1/2。
另取3mL无菌蒸馏水分别加入到第三只烧杯中。
二、用弯曲的玻璃棒轻轻搅拌，使葡萄糖充分溶解。
取出一只稍冷却的烧杯，迅速将此烧杯倒扣于平皿上。
另取一只稍冷却的烧杯，迅速将此烧杯倒扣于平皿上，这样依次重复三次。
三、平板打开后，待其自然冷却至37 ℃左右时，制成细菌平板。
并计算各菌种在不同培养条件下，该菌种生长的曲线。
四、将各菌种稀释液均匀地分成相等的两组，分别设置5个对照组，每个对照组不变。
各组之间按照表1的比例配成含不同浓度葡萄糖的对照培养基，即对照组1、对照组2、对照组3、对照组4、对照组5。
把一支大烧杯中加满酒精，分别加入2。
0mL、 2ml、 1。
5ml、0。
8ml不同浓度的葡萄糖溶液。
并分别加入等量的接种培养液，每只容器的液面高度约为容器的1/2。
另取3mL无菌蒸馏水分别加入到第三只烧杯中。
二、用弯曲的玻璃棒轻轻搅拌，使葡萄糖充分溶解。
取出一只稍冷却的烧杯，迅速将此烧杯倒扣于平皿上。
另取一只稍冷却的烧杯，迅速将此烧杯倒扣于平皿上，这样依次重复三次。
三、平板打开后，待其自然冷却至37 ℃左右时，制成细菌平板。
并计算各菌种在不同培养条件下，该菌种生长的曲线。
四、将各菌种稀释液均匀地分成相等的两组，分别设置5个对照组，每个对照组不变。
各组之间按照表1的比例配成含不同浓度葡萄糖的对照培养基，即对照组1、对照组2、对照组3、对照组4、对照组5。
每过10天，记录一次菌落数，同时调查第二只烧杯中液体的颜色和气味，判断有无污染。
五、观察统计结果。
六、记录结果，绘制如下图示。
细菌生长曲线
细菌生长曲线细菌生长曲线是指将单细胞微生物接种到一定体积的液体培养基后，在适宜的条件下培养，定时取样测定细胞数量。
以细胞增长数目的对数做纵坐标，以培养时间做横坐标，这条曲线就是细菌的生长曲线。
在封闭系统中对微生物进行的培养，即培养过程中既不补充营养物质也不移去培养物质，保持整个培养液体积不变的培养方式成为分批培养。
一条典型的分批培养的生长曲线可以分为迟缓期、对数期、稳定期和衰亡期4个生长时期。
迟缓期微生物接种到新鲜培养基后处于一个新的生长环境，在一段时间里并不马上分裂，微生物的数量维持恒定，或增加很少，这一时期即迟缓期。
此时胞内的RNA、蛋白质等物质含量有所增加，细胞体积相对最大，说明微生物并不是处于完全静止的状态。
产生迟缓期的原因，是由于微生物接种到一个新的环境，暂时缺乏足够的能量和必需的生长因子，“种子”老化或未充分活化，接种时造成损伤等。
在工业发酵和科研中迟缓期会增加生产周期而产生不利的影响，但是迟缓期无疑也是必需的，因为细胞分裂之前，细胞各成分的复制与装配等也需要时间。
对数期对数期又称指数期。
细菌经过迟缓期进入对数期，并以最大速率生长和分裂，由于细菌繁殖方式是二分裂，因此细菌数量2的指数增加，此时细菌生长呈平衡生长，即胞内各成分按比例有规律地增加，所有细胞组分呈彼此相对稳定速率合成。
对数期细菌的代谢活性及酶活性高而稳定，细胞大小比较一致，生活力强，因而在生产上常被用作“种子”。
稳定期由于营养物质消耗，代谢产物积累和pH等环境的变化，环境条件逐步不适宜于细菌生长，导致细菌生长速率降低直至零，即细菌分裂增加的数量等于细菌死亡数量，对数期结束，进入稳定期。
稳定期的活细菌数最高并维持稳定。
如果及时采取措施，补充营养物质或取走代谢产物或改善培养条件，如对好氧进行通气、搅拌或振荡等可以延长稳定期，获得更多的菌体物质或代谢产物。
衰亡期营养物质耗尽和有毒代谢产物的大量积累，细菌死亡速率逐步增加和活细菌逐步减少标志细菌的生长进入衰亡期。
实验九光电比浊法测定大肠埃希菌的生长曲线
实验八光电比浊法测定大肠埃希菌的生长曲线实验目的：1．了解光电比浊计数法的原理。
2．了解细菌生长曲线的特点，掌握光电比浊计数法测定大肠埃希菌生长曲线的方法。
3. 掌握菌种保藏的基本原理和几种菌种保藏的常规方法。
实验材料：1．菌种大肠埃希菌（E.coli）16~18h液体培养物。
待保藏的各种菌种。
2．培养基牛肉膏蛋白胨培养基。
3．其它721型光电比色计、1ml无菌移液管、摇床等。
实验原理：细菌的生长一般指群体的生长，常常具有一定的规律性。
描述细菌在液体培养基中的生长规律的曲线叫做生长曲线（growth curve），即将一定量的细菌接种到一定容积的液体培养基中，在适宜的条件下进行培养，以培养时间为横坐标，以菌数的对数为纵坐标进行作图得到的曲线。
典型的生长曲线可分为延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个时期。
细菌培养物在生长过程中，由于原生质含量的增加，会引起培养物混浊度的增高。
细菌悬液的混浊度和透光度成反比、与光密度成正比，透光度或光密度可借助光电比浊计精确测出，因此可用光电比浊计测定细胞悬液的光密度（OD值），表示该菌在特定实验条件下的细菌相对数目，进而反映出其相对生长量。
菌种保藏是为了把从自然界分离到的野生型、或者经过人工选育得到的变异型纯种，采用多种方法，使菌种存活，不丢失、不污染杂菌，不发生或少发生变异，保持菌种原有的各种优良培养特征和生理活性，有利于生产、科研的正常进行，是一项重要的微生物学基础工作。
微生物菌种保藏的基本原理，是使微生物的生命活动处于半永久性的休眠状态，也就是使微生物的新陈代谢作用限制在最低的范围内。
干燥、低温和隔绝空气是保证获得这种状态的主要措施。
有针对性地创造干燥、低温和隔绝空气的外界条件，是微生物菌种保藏的基本技术。
尽管菌种保藏方法很多，但基本都是根据这三种主要措施设计的。
实验内容：(一)光电比浊法测定大肠埃希菌的生长曲线1．接种、培养取预先编号的17支分别装有10ml牛肉膏蛋白胨液体培养基的大试管中，采用无菌操作技术用移液管向每个试管准确加入大肠埃希菌悬液0.2ml，轻轻振荡混匀，另设一空白对照组（不加大肠埃希菌悬液）。
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实验九测定细菌生长曲线
实验九测定细菌生长曲线
[实验目的] 1(了解细菌生长曲线特征:2(学习液体培养基的配制以及注意事项。
3(学习液体种子和固体种子的不同接种方法和注意事项。
4(利用细菌悬液浑浊度间接测定细菌生长。
[仪器和材料]
1(实验材料
(1)大肠杆曲，枯草杆曲培养液及大肠杆菌平板。
(2)牛肉膏蛋门胨葡萄糖培养基(150ml,250ml 三角瓶X 4瓶,大组)，配方:牛肉膏5g，蛋白胨10g，NaCl 5g，葡萄糖10g，加水至1000ml，pH7(5。
2(实验仪器
取液器(5000μl，1000μl，200tμl 各一支); 培养箱(摇床，722s分光光度汁; 1000μl 无菌吸头100个;5000μl 无菌吸头2个;1ml或4ml玻璃或塑料比色皿4个，共用参比杯一个。
[实验原理]
将一定量的细菌接种在液体培养基内(在一定的条件下培养，可观察到细菌的生长繁殖有一定规律性，如以细菌活菌数的对数作纵坐标，以培养时间作横坐标，可绘成一条曲线，称为生长曲线(图9 1)。
单细胞微生物发酵具有4个阶段，即调整(迟滞期)、对数期(生长旺盛期)、平衡期(稳定期)、死亡期(衰亡期)。
生长曲线可表示细菌从开始生长到死亡的全过程动态。
不同微生物有不同的生长曲线，同一种微生物在不同的培养条件下，其生长曲线也不一样。
因此，测定微生物的生长曲线对于了解和掌握微生物的生长规律是很有帮助的(
测定微生物生长曲线的方法很多，有血细胞计数法，平板菌落计数法，称重法和比浊法等。
本实验采用比浊法测定，由于细菌悬液的浓度与浑浊度成正比，因此，可以利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液的浓度。
将所测得的光密度值(测OD550或 OD620或OD600或OD420，可任选一波长)与对应的培养时间作图，即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线。
注意，由于光密度表示的是培养液中的总菌数，包括活菌与死菌，因此所测生长曲线的衰亡期不明显。
从生长曲线我们可以算出细胞每分裂一次所需要的时间，即代时，以G表示。
其计算公式为;
G=(t-t)/[(1gW—lgW),lg2] 2112
式中tl和t2为所取对数期两点的时间;w1和w2分别为相应时间测得的细胞含量(g/L)或 OD。
[实验步骤]
1(准备菌种:将大肠杆菌，枯草杆菌分别接种到装有牛肉膏蛋白胨葡萄糖培养基的三角瓶中，37?，200r,min振荡培养14-18h(另外准备大肠杆菌单菌落平板l 块(37'C培养24h)。
2(接种:分别将1(5ml(1,接种量)和4-5ml(3,接种量)大肠杆菌菌液和一个大肠杆菌单菌落接人含150ml培养液的三角瓶中(37?，200r,min振荡培养;把4(5ml枯草杆菌(3%接种量)接入含150ml培养液的三角瓶中，37?，200r,min振荡培养。
3(测量;每培养1h取样一次(净培养(不包括取样时间)10h结束培养，测量培养液pH值。
零小时也要测。
如果选用4ml比色皿取500μl培养液到2000μl蒸馏水中(稀释5倍)，以蒸馏水为对照，测OD650。
或OD620或OD600或OD420任选一波长)，如果选用lml 比色皿，可以取1000μl培养液，以蒸馏水为对照，直接测OD620 、OD600或
OD420(任选一波长)，当OD值大于0.6时，下一样品要稀释1倍测量(
[实验结果](
OD值测量记录
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 时间(h)
0.23 0.325 0.904 1.192 1.364 1.505 1.574 1.635 1.651 1.669 1.678
E.coli1%
0.350 0.405 1.403 1.268 1.358 1.50 1.520 1.581 1.625 1.65 1.69
E.coli3%
0.207 10.184 0.276 0.361 0.601 1.179 1.411 1.562 1.59 1.62 1.631
B.subtilis3%
0.137 0.134 0.138 0.172 0.389 1.01 1.121 1.389 1.54 1.581 1.591
E.coli(plate)
注:?OD值为600nm比色所得。
其代时(min)分别为:E.coli1% 40.65; E.coli3% 43.92; B.subtilis3% 61.72; E.coli(plate) 35.61 。
?液体种子比较均匀，用相同的液体培养基转接后条件变化小，因此迟缓期几乎没有出现;实验结果代时长于理论值，主要是实验条件的影响，培养基、接种量、培养容器、温度条件等均影响到理论值。
E.coli/B.subtilis生长曲线比较 1.8 1.6 1.4 1.2E.coli1% 1E.coli3% 0.8
OD(600nm)0.6B.subtilis3% 0.4E.coli(plate)0.2
1234567891011 时间(h)
[试验讨论]
(1)全班同时取样，时间以教室挂钟为准，取样时间越短越好，要求在
10~15min内完成)，同时开始振荡，取样期间假定细菌暂停生长(取样时间从发酵
总时间中扣除( (2)为减少误差，须固定参比杯，不要旋动波长旋钮;每组固定同一台分光光度计，固定同一取液器。