温度PH激活剂和抑制剂对酶活性的影响
温度、pH、激活剂与抑制剂对酶促作用的影响
温度、pH、激活剂与抑制剂对酶促作用的影响【目的】通过本实验，观察影响酶促作用的一些因素。
【原理】唾液淀粉酶可催化淀粉逐步水解，生成分子大小不同的糊精及最后水解成麦芽糖。
淀粉及糊精遇碘各呈不同的颜色反应。
直链淀粉(即可溶性淀粉)遇碘呈蓝色，糊精按分子的大小遇碘可呈蓝色、紫色，睛褐色和红色。
最小的糊精和麦芽糖遇碘不显色。
根据颜色反应，可以了解淀粉被水解的程度。
由于在不同温度、不同酸碱度下，唾液淀粉酶的活性高低不同，所以淀粉被水解的程度也不一样。
另外，有些物质可作为激活剂，能提高酶活性，有些物质可作为抑制剂，能降低酶活性，也能影响淀粉被水解的程度。
因此、通过与碘产生的颜色反应判断淀粉被水解的程度，了解温度、pH，激活剂和抑制剂对酶促作用的影响。
【试剂】1、1％淀粉溶液配制取可溶性淀粉1克，加5毫升蒸馏水，调成糊状，再加蒸馏水80毫升，加热，使其溶解，最后用蒸馏水稀释至100毫升。
2、稀释唾液制备将痰咳尽，用水漱口，再含蒸馏水30毫升，作咀嚼运动，2分钟后吐入烧杯中，再用滤纸过滤后待用。
3、不同PH缓冲液（1）PH6.8缓冲液用0.2M磷酸二氢钠溶液772毫升，0.1M柠檬酸溶液485亳升，混合即得。
（2）pH5.0缓冲液取0.2M磷酸氢二钠溶液515毫升，0.1M柠檬酸溶液485毫升，混合即成。
（3）pH8.0缓冲液取0.2M磷酸氢二钠溶液972毫升，0.1M柠檬酸溶液28毫升，混合即成。
4、0.9％NaCl溶液。
5、0.1％CuSO4溶液。
6、0.1％Na2SO4溶液。
【器材】10×100毫米试管、恒温水浴、沸水浴、水浴、蜡笔。
【操作】一、温度对酶促作用的影响1、取试管三支，用蜡笔编号，每管各加入pH6.8缓冲液20滴，1％淀粉10滴。
2、将第一管放入37℃恒温水浴，将第二管放入沸水浴，将第三管放入冰浴。
3、放置5分钟后，分别向各管加入稀唾液5滴，再放回原处。
4、10分钟后，分别向各管滴加碘液1滴，观察三管中颜色的区别，说明温度对酶促作用的影响。
激活剂和抑制剂对酶活性影响实验报告
激活剂和抑制剂对酶活性影响实验报告
影响酶作用的因素：影响酶促反应的因素常有酶的浓度、底物浓度、pH值、温度、抑制剂、激活剂等。
其变化规律有以下特点：
1、酶浓度对酶促反应的影响：在底物足够，其它条件固定的条件下，反应系统中不含有抑制酶活性的物质及其它不利于酶发挥作用的因素时，酶促反应的速度与酶浓度成正比。
2、底物浓度对酶促反应的影响：在底物浓度较低时，反应速度随底物浓度增加而加快，反应速度与底物浓度近乎成正比，在底物浓度较高时，底物浓度增加，反应速度也随之加快，但不显著，当底物浓度很大且达到一定限度时，反应速度就达到一个最大值，此时即使再增加底物浓度，反应也几乎不再改变。
3、酶的活性受激活剂或抑制剂的影响。
氯离子为唾液淀粉酶的激活剂，铜离子为其抑制剂，激活剂使酶的活性升高，抑制剂使酶活性降低。
注意事项：
激活剂和抑制剂对于酶活性的影响，常常分不清激活剂，因为加入蒸馏水、NaCl、Na2SO4这3支试管的颜色一致，都是黄色。
出现这种现象的原因是酶活性太高了，需要稀释唾液，唾液稀释至加入蒸馏水的试管呈浅红色即可。
这样一来，这3支试管的颜色分别是浅红、黄、浅红，就可以断定Cl-是激活剂。
偶尔也有分不清抑制剂的就是加入蒸馏水、CuSO4、
Na2SO4这三支试管的颜色一致，都是蓝色。
因为酶活性太低，需要提高酶活性，只要重新制备唾液淀粉酶就行（但是新酶的活性不可太高，否则又分不清激活剂）。
最后3支试管的颜色应该是浅红、蓝、浅红，可以断定Cu2+是抑制剂。
生化实验四影响酶活性的因素
在不同的温度、pH、及添加激活剂和抑 制剂的条件下，将唾液淀粉酶加入到淀粉溶 液中，作用一定时间以后，取出反应液，加 入碘指示剂，比较各种条件下，反应液与碘 反应后颜色的差异，由此说明淀粉酶活力的 变化。
三、实验试剂及器材
1.试剂
1%淀粉溶液：1g淀粉和0.3g NaCl，用5ml蒸馏水悬浮，
4.激活剂和抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响
取试管3支，按下表操作
操作
管号
1
2
3
1% NaCl(ml)
1
0
0
1% CuSO4(ml)
0
1
0
蒸馏水(ml)
0
0
1
唾液淀粉酶溶液(ml)
1
பைடு நூலகம்
1
1
1%淀粉溶液(ml)
1
1
1
摇匀，37℃水浴反应1min左右即可用碘液检查1号试管淀粉水 解程度，待1号试管的反应液不再变色时取出所有试管。分别向各 管滴加1滴碘液，观察比较各管颜色深浅，并解释。
四、实验操作
1. 唾液淀粉酶的制备
取干净的水杯，盛上蒸馏水。 用蒸馏水漱口。 口含约20ml蒸馏水，1-2分钟后，吐入一干净烧 杯中，棉花过滤。
2. 温度对唾液淀粉酶活力的影响
取3支试管，按下表操作：
操作项目
1%淀粉溶液(ml) pH6.8磷酸缓冲液(ml) 唾液淀粉酶溶液(ml)
温度处理（℃）
管号
1
2
1
1
0.5
0.5
1
1
0
37
3 1 0.5 1 沸水
各管在相应温度中水浴，每隔1分钟从第2号管吸取1滴反应液于白 瓷板上，用碘液检查反应进行情况，直至反应液不再变色（只有碘液的 颜色），立即取出所有试管，流水冷却2min，各加1滴碘液，混匀。观 察并记录各管反应现象，解释之。
影响酶活性的条件
影响酶活性的条件
影响酶活性的条件有：
pH、温度、紫外线、重金属盐、抑制剂、激活剂的条件影响。
影响酶活性的因素，一定会影响酶促反应的速率，但影响酶促反应的速率的因素不一定影响酶的活性，这是易忽略点也是易错点。
pH、温度、紫外线、重金属盐、抑制剂、激活剂等通过影响酶的活性来影响酶促反应的速率。
酶的浓度、底物的浓度等不会影响酶活性，但可以影响酶促反应的速率。
酶活性的简介：
酶活性也称酶活力，是指酶催化一定化学反应的能力。
酶活力的大小可以用在一定条件下，它所催化的某一化学反应的转化速率来表示，即酶催化的转化速率越快，酶的活力就越高。
反之，速率越慢，酶的活力就越低。
所以，测定酶的活力就是测定酶促转化速率。
酶转化速率可以用单位时间内单位体积中底物的减少量或产物的增加量来表示。
酶活力的测定既可以通过定量测定酶反应的产物或底物数量随反应时间的变化，也可以通过定量测定酶反应底物中某一性质的变化，如黏度变化来测定。
通常是在酶的最适pH值和离子强度以及指定的温度下测定酶活力。
影响酶促反应的因素——温度,ph,激活剂及抑制剂,生化实验报告(共8篇)
影响酶促反应的因素——温度,ph,激活剂及抑制剂,生化实验报告(共8篇) 影响酶促反应速度的因素生化实验实验二影响酶促反应速度的因素【目的】观察温度、PH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响。
【原理】唾液淀粉酶催化淀粉水解，生成一系列水解产物，即糊精、麦芽糖和葡萄糖等。
淀粉及其水解产物遇碘会呈现不同的颜色。
在不同温度，不同PH值下，唾液淀粉酶活性不同，催化淀粉水解程度不一，生成的产物也就不同。
此外，激活剂、抑制剂也能影响淀粉酶活性，影响淀粉的水解。
因此可根据在不同反应条件下，溶液加碘呈现的不同颜色来判断淀粉的水解程度，从而验证了温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响。
淀粉I2 【操作】1. 温度对酶促反应速度的影响取3支试管，编号，按下表操作：2. PH对酶促反应速度的影响取3支试管，编号，按下表操作：3．激活剂与抑制剂对酶促反应速度的影响取4支试管，编号，按下表操作：【结果及分析】观察各管颜色变化，说明温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应的影响。
【实验注意事项】篇二：生化实验思考题参考答案生化实验讲义思考题参考答案实验一淀粉的提取和水解1、实验材料的选择依据是什么？答：生化实验的材料选择原则是含量高、来源丰富、制备工艺简单、成本低。
从科研工作的角度选材，还应当注意具体的情况，如植物的季节性、地理位置和生长环境等，动物材料要注意其年龄、性别、营养状况、遗传素质和生理状态等，微生物材料要注意菌种的代数和培养基成分的差异等。
2、材料的破碎方法有哪些？答：(1) 机械的方法：包括研磨法、组织捣碎法；(2) 物理法：包括冻融法、超声波处理法、压榨法、冷然交替法等；(3) 化学与生物化学方法：包括溶胀法、酶解法、有机溶剂处理法等。
实验二总糖与还原糖的测定1、碱性铜试剂法测定还原糖是直接滴定还是间接滴定？两种滴定方法各有何优缺点？答: 我们采用的是碱性铜试剂法中的间接法测定还原糖的含量。
间接法的优点是操作简便、反应条件温和，缺点是在生成单质碘和转移反应产物的过程中容易引入误差；直接法的优点是反应原理直观易懂，缺点是操作较复杂，条件剧烈，不易控制。
温度、pH、激活剂和抑制剂对酶活性的影响
[目的] 1.掌握温度、pH、激活剂和抑制剂对酶活性影响 的基本原理； 2.熟悉唾液淀粉酶所催化的酶促反应过程；
[原理] 1. 温度：对酶的活性的影响为双效性，当酶促反应 的温度为最适温度时，最有利于酶促反应的进行。 温度过低，酶的活性减弱，温度太高，会使酶变性、 失活； 2.pH ：酶活性最大时的环境 pH 为最适 pH 。 pH 不仅 会影响酶的活性，还会影响底物的解离状态，从而 影响酶与底物的结合。过酸或过碱性的环境可使酶 变性、失活。
3、激活剂和抑制剂对酶活性的影响
C．激活剂、 抑制剂组 1%淀粉 试剂 （2滴） 唾液
C1管
1ml 1%NaCl 10d
C2管
1ml 1%CuSO4 10d
C3管
1ml
C4管
1ml
1%Na2SO4 蒸馏水 10d 10d
摇匀， 37℃保温,每隔30秒从1号管中吸取溶液1d加到白瓷 盘小池中（小池预先加好0.1%碘液） 。当碘液不变色时， 分别向4管中加入1%碘液2滴，观察颜色变化。
收集唾液 ( 自来水漱口、收集唾液约 2-3ml 于小烧杯 中，蒸馏水稀释10倍,备用) 1、温度对酶活性的影响 A．温度组 唾液 （2ml） 1%淀粉 （1ml） 1%碘液 A1管 冰水浴 5分钟 冰水浴 15分钟 2d A2管 37 ℃水 浴5分钟 37℃水浴 15分钟 2d A3管 沸水浴 5分钟 沸水浴 15分钟 2d
2、pH对酶活性的影响 B．PH值组 B1管 PH5.0 2ml 10d B2管 PH6.8 2ml 10d B3管 PH8.6 2ml 10d
磷酸盐缓冲液 （2ml） 1%淀粉 唾液
摇匀，立即置37℃保温，每隔30秒从2号管中吸取溶液1滴 加到白瓷盘小池中（小池预先加好0.1%碘液）。当碘液不 变色时，分别向3管中加入1%碘液2滴，观察颜色变化。
生物化学实验
温度、pH及酶的激活剂、抑制剂对酶活性的影响一、实验目的酶是生物催化剂，生物体内化学反应基本上都是在酶的催化下进行的。
通过本实验了解酶催化的特异性以及pH、温度、抑制剂和激活剂对酶活力的影响，对于进一步掌握代谢反应及其调控机理具有十分重要的意义。
二、实验原理酶的化学本质是蛋白质。
凡是能够引起蛋白质变性的因素，都可以使酶丧失活性。
此外，温度、pH和抑制剂、激活剂对酶的活性都有显著的影响。
酶的活性通常是用测定酶作用基质在酶作用前后的变化来进行观察的。
本实验用唾液淀粉酶作用的基质—淀粉，被唾液淀粉酶分解成各种糊精、麦芽糖等水解产物的变化来观察该酶在各种环境条件下的活性。
淀粉被酶水解的变化，可以借遇碘呈不同颜色来观察。
淀粉遇碘呈蓝色;糊精按分子从大到小的顺序，遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色和红色;最小的糊精和麦芽糖遇碘不呈现颜色反应。
三、试剂1.0.5%淀粉溶液称取可溶性淀粉0.5g加蒸馏水少许搅拌成糊状，然后用煮沸的;1%氯化钠溶液稀释至1Ooml。
2.碘化钾一碘溶液取碘化钾2g及碘1.27g溶解于2OOml蒸馏水中，使用前用蒸馏水稀释5倍。
3.1%尿素溶液。
4.奈斯勒试剂(见实验二十二)5.1%CuSO4溶液台秤称取CuSO4•5H2O， 1g用蒸馏水溶解至1OOml。
6.磷酸氢二钠一柠檬酸缓冲液pH5.0-8.0:A. 0.2mol/L磷酸氢二钠溶液称35.62gNa2HPO4·2H2O用蒸馏水溶解后，定容至10OOml。
B. O.lmol/L柠檬酸溶液称取19.21g无水柠檬酸，用蒸馏水溶解后定容10OOml。
用A、B两液，按附录五，配制pH5.O、pH6.2、pH6.8、pH7.4、pH8.0各lOml。
7.0.5%NaCl溶液。
8.唾液淀粉酶制备每人用自来水漱口3次，然后取20m1蒸馏水含于口中，半分钟后吐入烧杯中，纱布过滤，取滤液lOml，稀释至2Oml为稀释唾液，供实验用。
9.脲酶提取液取黄豆粉6g，加30%乙醇250ml，振摇lOmin，过滤，滤液供实验用。
实验六 淀粉酶的专一性和温度pH激动剂抑制剂对酶活性的影响
实验六淀粉酶的专一性和温度、pH、激活剂及抑制剂对酶活性的影响实验类型：验证型目的和要求1.通过本实验观察、验证酶的专一性和温度、pH、激动剂及抑制剂对酶活性的影响。
2.熟悉淀粉及其酶解产物的特殊显色方法；电热恒温水浴的使用。
3.了解唾液淀粉酶的收集与预处理。
原理酶具有高度专一性，一种酶只能催化一种或一类底物发生反应，如淀粉酶只能水解淀粉，不能水解蔗糖。
当淀粉被淀粉酶彻底水解为还原性麦芽糖和葡萄糖时，能使班氏试剂的Cu2+还原成Cu1+，生成砖红色Cu2O沉淀。
淀粉酶的活性受温度、pH、激动剂及抑制剂、酶浓度以及作用时间等多种因素影响，因而水解淀粉生成一系列分子大小不同的糊精。
不同程度的水解糊精可与碘反应生成紫色、棕色或红色络合物。
通过上述特征性反应，并以蔗糖等作对照，便可观察、验证淀粉酶是否具有专一性以及它的催化活性是否受到影响。
操作方法一、唾液淀粉酶的收集与处理1.制备唾液实验者先将痰咳尽，用自来水漱口，以清除口腔内食物残渣，再在口腔内含蒸馏水约15ml，并作咀嚼咕漱运动，3分钟后吐入垫有两层经润湿处理的脱脂纱布的漏斗内，过滤于小烧杯中备用，为与下面稀释唾液相区别，此称制备唾液。
2.煮沸唾液取上述唾液约2ml，盛入1中号试管中,置沸水浴煮沸5分钟备用。
3.稀释唾液调整唾液淀粉酶活性，使之在pH6.8、37℃和既无激动剂又无抑制剂条件下，作用5min，水解淀粉至红色糊精为宜。
具体做法是取12凹白瓷反应板一块，按下列步骤操作：①第1排每凹各加1滴制备唾液，12、13、14凹分别加生理盐水1、2、3滴，用滴管采用抽吸法，由稀到浓（14→12）小心混匀各凹，勿使溅入相邻凹中。
每混匀一凹便取其1滴放入同列的2排凹中，剩余稀释唾液应全部放回原凹中。
②在盛有不同稀释度唾液的第2排各凹中，均加入4滴缓冲液（pH6.8），2滴1%的淀粉液和2滴蒸馏水，用①混匀法充分混匀，置37℃下5min。
③在第2排各凹中加I液一滴，混匀，观察比较各凹颜色，以浅棕-红色对应的稀释倍数，用生理盐水稀释3ml制备唾液备用。
实验二影响酶促反应的因素
（三）激活剂与抑制剂对酶促反应速度的影响
管号 1%淀粉溶液
1 10滴
2 10滴
3 10滴
4 10滴
pH6.8缓冲液
10滴 10滴 10滴 10滴
蒸馏水
2滴
—
—
—
氯化钠溶液
—
2滴
—
—
CuSO4溶液
—
—
2滴
—
Na2SO4溶液
—
—
—
2滴
稀释唾液
5滴
5滴
5滴
5滴
把三支管摇匀，然后放至 37℃水浴10分钟，加碘2滴摇匀
【注意事项】 1.注意实验器材的干净，避免杂质影响反应
结果 2.各管反应时间应严格控制，保证一致。
四、实验方法
• 稀释唾液制备 用水漱口，含蒸馏水咀嚼2分钟 后，把唾液吐进烧杯中备用。（注：唾液淀粉酶 活性具有个体差异，按下述各实验方法进行实验， 有部分同学可能失败，可重新操作，但在重做过 程中，要根据第一次实验结果改变稀释唾液的用 量，反应太慢，则增加稀释唾液用量，如果反应 太快，则减少稀释唾液的用量）
• 煮沸唾液的制备 取上述唾液约5ml，放入沸水中 煮沸5分钟，取出备用。
（一）温度对酶促反应速度的影响
管号
1
2
3
缓冲液（pH6.8） 20滴
20滴
20滴
1%淀粉溶液
10滴
10滴
10滴
把三支管溶液摇匀，然后分别放至相应的温度中水浴预温
预温温度
0℃
37℃
37℃
预温5分钟后取出，继续向各管加入相应唾液
稀释唾液
10滴
10滴
—
煮沸唾液
—
—
实验三抑制剂和激动剂对酶活性的影响
2、取试管6支，按照下列表格操作：
加入物（滴） 0.2mol/L琥珀酸 0.02mol/L琥珀酸 0.2mol/L 丙二酸 0.02mol/L 丙二酸 蒸馏水 0.02%甲烯蓝 酶的提取液 1 10 10 3 15 2 10 10 3 15 3 10 10 3 15 4 10 10 3 15 5 10 25 3 6 10 10 3 15
COOH CH2 CH2
琥珀酸脱氢酶
琥珀酸
FAD
COOH CH2 COOH
丙二酸
延胡索酸
FADH2
COOH
无 氧
甲烯蓝（MB）
甲烯白（MBH2）+FAD
三、实验材料、主要仪器和试剂 （Equipments , Materials and Agents）
• • • • • • • • • （一）主要仪器：离心机、恒温水箱。 （二）主要试剂： 1．0.2mol/L 琥珀酸 2．0.02mol/L 琥珀酸 3．0.2mol/L 丙二酸 4．0.02mol/L 丙二酸 上述四中溶液调节pH值为7.4。 5．0.02%甲烯蓝 6．1/15mol/L的Na2 HPO4
二、实验原理(Experimental Principles)：
影响酶活性的因素：
温度 pH值 激活剂 抑制剂
对酶活性的抑制作用分类
不可逆性抑制作用
竞争性抑制作用 可逆性抑制作用 非竞争行抑制作用 反竞争性抑制作用
抑制剂(I)与底物(S)的结构相似，能与底 物竞争酶的活性中心，从而阻碍酶底物复 合物的形成，使酶的活性降低。这种抑制 作用称为竞争性抑制作用。 E+S ES E+P
煮后的酶 提取液
3、各管混匀后，沿试管的内壁加入 15滴石蜡油（隔绝空气），放置到 37℃水浴中保温，观察各管甲烯蓝 的褪色情况，并记录褪色的所需要 的时间，解释其现象。
实验四 温度、激活剂和抑制剂对酶活力的影响
1、实验器材： (1)恒温水浴锅 (2)试管 (3)烧杯 (4)量筒 (5)玻璃棒 (6)白磁板 三、试剂和器材 (7)铁三角架 (8)酒精灯 (10 )试管夹 (11)试管架 (12)秒表 2、实验试剂 (1) 0.2%淀粉的0.3%氯化钠溶液 (2) KI-I2 (4) 1%NaCl 6) 1%Na2SO4 (7) 0.1%淀粉溶 (8) 唾液淀粉酶
（二）激活剂对酶反应的影响 激活剂大部分是一些无机离子和小分子有机物。这些物质可与酶 分子上的氨基酸侧链基团结合，可能是酶活性部位的组成部分， 也可能作为辅酶或辅基的一个组成部分起作用。 一般情况下，一种激活剂对某种酶是激活剂，而对另一种酶则起 剂 抑制作用； i ] 对于同一种酶，不同激活剂浓度会产生不同的作用。
实验四 温度、激活剂和抑制剂对酶活 力的影响
一、实验目的 1、了解温度对酶活性的影响，学会检测酶 最适温度的方法。 2、了解激活剂和抑制剂对酶活性的影响。 3、学习检测激活剂和抑制剂影响酶促反应 速度的原理和方法。
二、实验原理 （一）温度对酶活性的影响
一方面是温度升高,酶促反 应速度加快。 另一方面,温度升高,也将导 致酶活性降低甚至丧失。 因此大多数酶都有一个最 适温度(即 酶促反应速度最 快时的环境温度) 酶的最适温度不是一个常 数，它与作用时间长短有 关。
— 1.5 1.0
1-2滴
1.0 1.5 1.0
1-2滴
— 1.5 1.0
温度、pH、活化剂和抑制剂对酶活性的影响
实验题目：温度、pH、激活剂和抑制剂对酶活性的影响实验原理：1.唾液淀粉酶作用的底物--淀粉，可以被分解成各种糊精、麦芽糖等水解产物。
2.淀粉被酶水解速度的变化，可以利用其产物遇碘呈不同颜色来观察。
3.淀粉遇碘呈蓝色；糊精按分子从大到小的顺序，遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色和红色；最小的糊精和麦芽糖遇碘不呈颜色反应（棕黄色）。
实验步骤：⒈收集唾液：用少量蒸馏水漱口。
取小漏斗一支，垫以小块脱脂棉，过滤唾液，收集约2毫升，用蒸馏水稀释 10 倍左右，混合后备用。
⒉取试管2支，各加稀释唾液约3毫升，一管直接加热煮沸，另一管置冷浴中预冷10分钟。
⒊另取试管4支编号按下表操作：步骤、编号 1 2 3 4一1%淀粉20滴1%淀粉20滴1%淀粉20滴1%淀粉20滴二置于0-4℃冰浴5分钟置于0-4℃冰浴5分钟置于37℃水浴5分钟置于37℃水浴5分钟三遇冷唾液10滴，混匀遇冷唾液10滴，混匀唾液10滴，混匀煮沸唾液10滴，混匀四置于0-4℃冰浴10分钟置于0-4℃冰浴5分钟移至37℃水浴5分钟置于37℃水浴10分钟置于37℃水浴10分钟五碘液2滴摇匀碘液2滴摇匀碘液2滴摇匀碘液2滴摇匀比较各管溶液的颜色，判断淀粉被唾液淀粉酶水解的程度，并说明温度对唾液淀粉酶活性的影响。
4.取试管3支编号，按下表操作：编号 1 2 3磷酸盐缓冲液(ml)2（pH5.0）2(pH6.8) 2(pH8.0)1%淀粉液(ml)2 2 2稀释的唾液(滴)10 10 105. 将各管混合，取瓷比色皿一个，预先在各比色池分别加入1-2滴碘液，每隔 30 秒从第二管吸取水解液一滴加到已有碘液的比色皿小池中，检验淀粉的水解程度，直至此管不与碘液呈色（即只显碘液本身的浅棕色）时，立即向各管加碘液2滴摇匀观察。
比较各管溶液颜色，说明 pH 对唾液淀粉酶活性的影响。
6. 取清洁试管4支，编号，按下表操作：编号 1 2 3 41%淀粉液（滴）20 20 20 201%NaCl（滴） 2 0 0 01%CuSO4（滴）0 2 0 01%Na2SO4（滴）0 0 2 0蒸馏水（滴）0 0 0 2稀释唾液（滴）10 10 10 107. 将各管混合，取瓷比色皿一个，预先在各比色池分别加入1-2滴碘液，每隔 30秒从第一管吸取水解液一滴加到比色皿中，检验淀粉的水解程度，直至第一管不与碘液呈色（即只显碘的浅棕色）时，立即向各管加碘液2滴摇匀观察。
实验五影响酶活性的因素
一、目的
影响酶活性的因素
1.了解温度、pH对酶活性的影响； 2.了解激活剂和抑制剂对酶活性的影响。
二、原理
酶的催化活性受温度的影响很大。酶促 反应在低温时进行较慢，随着温度升高而加 快，当达到其最适温度时，酶促反应速度最 快，以后又随着温度升高而减慢，以至完全
停止反应。当酶促反应速度达到最大值时的 温度，称为酶作用的最适温度。唾液淀粉酶 的最适温度为37℃。 酶的活性受环境pH的影响极为显著。通 常，各种酶只有在一定的pH范围内才表现它 的活性。一种酶表现其活性最高时的pH值， 称为该酶的最适pH。低于或高于最适pH时， 酶的活性逐渐降低。唾液淀粉酶的最适pH值 约为6.8。
附: pH 5.0、6.8、8.0三种缓冲液的配制
锥形瓶号 pH值 1 2 5.0 6.8 0.2mol/LNa2HPO4 （mL） 10.30 15.45 0.1mol/L柠檬酸 （mL） 9.70 4.55
3
8.0
19.45
0.55
2. 器材 ：
(1) 试管与试管架 （4）沸水浴 （6）烧杯 （8）滴管 （2）恒温水浴锅 （3）冰浴 （5）吸管 （7）锥形瓶 （9）白瓷板等。
酶的活性常常受某些物质的影响，有 些物质能使酶的活性增加，称为酶的激活剂； 有些物质能使酶的活性降低，称为酶的抑制 剂。Cl-是唾液淀粉酶的激活剂，而Cu2+为其 抑制剂。 本实验以唾液淀粉酶为例，此酶只能催 化淀粉的水解，最终产物为麦芽糖和少量的 葡萄糖 ；淀粉水解程度不同，遇碘呈色反应 不同。因此，可以通过呈色反应，了解淀粉 水解的程度，从而间接判断唾液淀粉酶活力
试剂和器材 1. 试剂：
（1）0.2%淀粉溶液（含0.3%氯化钠） 称取0.2g淀粉溶于100mL0.3%氯化钠溶液中，煮沸 2～3min。 （2）碘液 将碘化钾20g及碘10g溶于100mL水中，使用前稀释 10倍。 （3）0.2 mol/L磷酸氢二钠溶液 （4）0.1 mol/L 柠檬酸溶液 （5）0.1％淀粉溶液 (不含NaCl) （6）0.9％氯化钠溶液 （7）1％硫酸铜溶液
温度、PH、激活剂和抑制剂对酶活性的影响
（一）、温度、PH对酶活性的影响【1】一、实验目的了解温度对酶活性的影响。
了解酶活性的最适PH及掌握一种检测最适PH的方法。
二、实验原理三、实验步骤1、温度对酶活性的影响取3支试管，编号后按下表加入试剂试剂试管编号1 2 30.2%淀粉溶液 1.5 1.5 1.5稀释唾液/ml 1 1 无煮沸过的稀释唾液/ml 无无 1摇匀后，将1、3号两试管放入37摄氏度恒温水浴中，2号试管放入冰水中。
10min后取出，将2号试管内的液体分为两半，用碘化钾-碘溶液来检验1、2、3号试管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。
将2号试管剩下的一半溶液放入37摄氏度水浴中继续保温10min 后，再用碘液检验，结果如何？记录并解释结果。
注意事项：1、唾液制备时，先用蒸馏水漱口，以清除食物残渣，再含一小口蒸馏水，0.5~1min后，使其流入量筒，并稀释到50ml。
2、PH对酶活性的影响取4个标有号码的20ml试管。
用吸管按下表添加0.2mol/L磷酸氢二钠溶液和0.1mol/L柠檬酸溶液以制备PH=5.0~8.0的4种缓冲液。
试剂试管编号1 2 3 40.2mol/L磷酸氢二钠/ml 5.15 6.05 7.72 9.720.1mol/L柠檬酸/ml 4.85 3.95 2.28 0.28PH 5 5.8 6.8 8 从4个试管中各取缓冲液3ml，分别注入到4支带有号码的试管中，随后于每个试管中添加0.5%淀粉溶液2ml和稀释唾液2ml。
向各试管中加入稀释唾液的时间间隔分别为1min。
将各试管内容物混匀，并依次置于37摄氏度恒温水浴中保温。
第四管加入唾液2min后，每隔1min由第二管取出一滴混合液，置于白瓷板上，加1滴碘化钾-碘溶液，检验淀粉的水解程度。
待混合液变为棕黄色时，向所有试管中依次添加1或2滴碘化钾-碘溶液。
添加碘化钾-碘溶液的时间间隔从第一管起，均为1min。
观察各试管内容物呈现的颜色，分析PH对唾液淀粉酶活性的影响。
影响酶活性的条件实验报告
一、实验目的本实验旨在探究影响酶活性的条件，包括温度、pH值、底物浓度、酶浓度以及抑制剂和激活剂等因素，并通过实验验证这些因素对酶活性的影响。
二、实验原理酶是一种生物催化剂，其活性受多种因素影响。
温度、pH值、底物浓度、酶浓度、抑制剂和激活剂等都是影响酶活性的重要因素。
本实验主要探究这些因素对酶活性的影响，并通过观察实验现象，分析实验结果。
三、实验材料与仪器材料：1. 酶制剂（如淀粉酶、蛋白酶等）2. 底物（如淀粉、蛋白质等）3. 抑制剂（如重金属盐、酸、碱等）4. 激活剂（如某些金属离子等）5. pH试纸、pH计6. 温度计7. 移液器8. 试管9. 水浴锅仪器：1. 紫外可见分光光度计2. 热水浴锅3. 冷水浴锅4. pH计四、实验方法与步骤1. 温度对酶活性的影响- 将酶制剂和底物分别置于不同温度的水浴锅中预热。
- 将预热好的酶制剂和底物按一定比例混合，记录混合时间。
- 使用紫外可见分光光度计测定反应体系中底物的浓度变化，计算酶活性。
2. pH值对酶活性的影响- 使用pH试纸或pH计测定不同pH值下酶的活性。
- 将酶制剂和底物分别置于不同pH值的溶液中，记录混合时间。
- 使用紫外可见分光光度计测定反应体系中底物的浓度变化，计算酶活性。
3. 底物浓度对酶活性的影响- 将酶制剂和不同浓度的底物按一定比例混合，记录混合时间。
- 使用紫外可见分光光度计测定反应体系中底物的浓度变化，计算酶活性。
4. 酶浓度对酶活性的影响- 将不同浓度的酶制剂与底物按一定比例混合，记录混合时间。
- 使用紫外可见分光光度计测定反应体系中底物的浓度变化，计算酶活性。
5. 抑制剂和激活剂对酶活性的影响- 将抑制剂和激活剂分别加入酶制剂和底物中，观察酶活性的变化。
五、实验结果与分析1. 温度对酶活性的影响- 随着温度升高，酶活性逐渐增强，在一定温度范围内达到最大值，随后逐渐下降。
2. pH值对酶活性的影响- 酶活性在不同pH值下表现出不同的活性，存在一个最适pH值，酶活性在此pH值下达到最大值。
激活剂及抑制剂对酶活性的影响实验
２ ． 实验 讲 解 实验讲解主要包括 目的 、 原理 、 试剂 、 器 材、 操作等 。
２ ． １目的
目 的是学生实验的总指导 ． 也是 我们教 师让学 生掌握的主要知识 点， 目的解析好 了， 学生做实验的思路就清晰了。本实验的 目的是 ： 掌 握激 活剂及抑制 剂对酶活性 的影响 ， 培养学生 耐心 、 观察分 析和思考 的能力 。 根据激活剂及抑制剂的概念 ， 我们知 道在某一种酶促反应 中， 如果 我们加 入了这种酶 的激 活剂后 ， 会提 高此 化学反应 的速 率 ． 如果 加入 了这种酶 的抑制剂 ． 会降低化学反应的速率。 通 过本次实验 ， 我们 可 以用实验来验证 出激活剂和抑制剂对酶活性 的影响
大 多数激酶 的必需激活剂 。而有些激活剂是即使不存在时 ． 酶仍有一
不管经验多么丰富 的教师 ． 任何一次的实验课都要认真书写教案 讲 稿。首先要对酶这一章 的理论知识认真把握 ． 对本次实验 内容 的重 点、 难 点要做 到了如指掌 。 本次实验的重点是 ： 通过实验掌握激活剂及 抑制剂对 酶活性 的影响 ． 难点是 ： 实验终点的判断。 另外对 实验过程 中 学生可能出现的问题及解决方法都要一一设计好 所以教案讲稿要尽 量写 的详细认真 、 条理清晰． 要 突出实验 目的和实验重点。 １ ． ２试剂 药品的配制 本次实验需用试剂 ： 蒸馏水 ， １ ％Ｎ ａ Ｃ Ｉ ， Ｉ ％Ｃ ｕ Ｓ Ｏ ， １ ％Ｎ ａ ２ ｓ Ｏ ， １ ％淀 粉液 ， 唾液（ 需过滤 ） ， 碘液 。① １ ％淀粉液的配制 ： 配制时尽量用沸水 ， 这样配出的溶液较 为清澈 ．否则淀粉会有部分不溶解而呈乳状浑浊 。 在配制过程中 ． 先加水再缓慢 的加入淀粉粉末 ， 并且边加边搅拌 。 如果 先倒入淀粉再加热 水 ． 因淀粉遇水 迅速糊化结成糊 团 ． 造成淀粉不易 溶解 ， 如果加水过猛 ． 会造成烧杯壁下层有部分淀粉没有溶解 ， 而使烧 杯受热不均 ． 造成烧杯炸裂 。 另外淀粉溶液要现配现用 ． 否则淀粉易从 溶液中析出 ． 影响浓度 。 ②１ ％Ｎ ａ Ｃ Ｉ ， Ｉ ％ Ｃ ｕ Ｓ Ｏ ， Ｉ ％Ｎ ａ ２ Ｓ Ｏ 溶 液配制 时 ， 注意保证药 品与仪器 的洁净 ． 使所 配制 出的溶液较纯 ． 以免影响实验
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
（一）、温度、PH对酶活性的影响
一、实验目的
了解温度对酶活性的影响。
了解酶活性的最适PH及掌握一种检测最适PH的方法。
二、实验原理
三、实验步骤
1、温度对酶活性的影响
取3支试管，编号后按下表加入试剂
试管编号
试剂
1 2 3
0.2%淀粉溶液
1.5 1.5 1.5
无
稀释唾液/ml
1 1
煮沸过的稀释唾液/ml 无无
1
摇匀后，将1、3号两试管放入37摄氏度恒温水浴中，2号试管放入冰水中。
10min后取出，将2号试管内的液体分为两半，用碘化钾-碘溶液来检验1、2、3号试管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。
将2号试管剩下的一半溶液放入37摄氏度水浴中继续保温10min后，再用碘液检验，结果如何？记录并解释结果。
注意事项：
1、唾液制备时，先用蒸馏水漱口，以清除食物残渣，再含一小口蒸馏水，0.5~1min
后，使其流入量筒，并稀释到50ml。
2、PH对酶活性的影响
取4个标有号码的20ml试管。
用吸管按下表添加0.2mol/L磷酸氢二钠溶液和
0.1mol/L柠檬酸溶液以制备PH=5.0~8.0的4种缓冲液。
试管编号
试剂
1 2 3 4
0.2mol/L磷酸氢二钠/ml
5.15
6.05
7.72 9.72
0.1mol/L柠檬酸/ml
4.85 3.95 2.28 0.28
PH 5 5.8 6.8 8 从4个试管中各取缓冲液3ml，分别注入到4支带有号码的试管中，随后于每个试管中添加0.5%淀粉溶液2ml和稀释唾液2ml。
向各试管中加入稀释唾液的时间间隔分别为1min。
将各试管内容物混匀，并依次置于37摄氏度恒温水浴中保温。
第四管加入唾液2min后，每隔1min由第二管取出一滴混合液，置于白瓷板上，加1滴碘化钾-碘溶液，检验淀粉的水解程度。
待混合液变为棕黄色时，向所有试管中依次添加1或2滴碘化钾-碘溶液。
添加碘化钾-碘溶液的时间间隔从第一管起，均为1min。
观察各试管内容物呈现的颜色，分析PH对唾液淀粉酶活性的影响。
注意事项：
1、从第三管中取混合液，是因为它的PH接近唾液淀粉酶的最适PH。
2、间隔1min，是为了有足够的时间去加稀释唾液和足够时间观察颜色，保证各
试管反应时间相同。
四、实验结果
1、温度
1 2 3
浅蓝一半暗
褐
一半浅
蓝深蓝
2、PH
1 2 3 4
深蓝浅蓝浅紫深紫
分析：
酶的催化作用受温度的影响，在最适温度下，酶的反应速度最高。
唾液淀粉酶的最适温度为37摄氏度。
低温抑制酶的活性，高温使酶失活。
淀粉遇碘显蓝色，按其分解程度由低到高会依次出现蓝色、紫色、暗褐色、无色。
所以可用碘来检验其水解程度。
PH也能影响酶的活性，在最适PH下，酶的活性最大，偏酸、偏碱都降低酶的活性，唾液淀粉酶的最适PH为6.8。
（二）、激活剂和抑制剂对酶活性的影响
一、实验目的
了解激活剂和抑制剂对酶活性的影响。
二、实验原理
三、实验步骤
取4支试管按下表加入试剂，观察现象并记录。
试剂
试管编号
1 2 3 4
0.1%淀粉溶液/ml
1.5 1.5 1.5 1.5
1%CuSO4溶液/ml
0.5
无无无
1%Nacl溶液/ml 无
0.5
无无
1%Na2SO4溶液/ml 无无
0.5
无
蒸馏水/ml 无无无
0.5
稀释唾液/ml
0.5 0.5 0.5 0.5
37摄氏度恒温水浴5min
碘化钾-碘溶液/滴
2 2 2 2
四、实验结果
1 2 3 4
深蓝浅蓝中蓝中蓝
分析：
酶的活性受激活剂或抑制剂的影响。
氯离子为唾液淀粉酶的激活剂，铜离子为其抑制剂。
激活剂使酶的活性升高，抑制剂使酶活性降低。
加入Na2SO4是为了消除Na+和SO42-对酶活性的影响。