薄层色谱法TLC—最为常用的鉴别方法
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马钱子散中马钱子鉴定 “取本品10g,加浓氨试液数滴及氯仿10ml,浸泡数小时,滤过,取 滤液1ml蒸干,残渣加稀盐酸1ml使溶解,加碘化铋钾试液1-2滴, 即生成黄棕色沉淀。” 大黄流浸膏中大黄的鉴定 “取本品1ml,加1%氢氧化钠溶液1ml,煮沸,放冷,滤过.取滤液2ml, 加稀盐酸数滴使呈酸性,加乙醚10ml,振摇,乙醚层显黄色,分取 乙醚液,加氨试液5ml,振摇,乙醚层仍显黄色,氨液层显持久的樱 红色.”
§3 理化鉴别
二、升华法—专属性强，但使用具有一定的局限性 鉴定具有升华性质的化学成分
（如冰片，大黄蒽醌类等）
观察升华物的形状、颜色、荧光、化学反应等
例1：牛黄解毒片中冰片的微量升华鉴别 取本品1片，研细，进行微量升华，得到白色的升华物，加新制的 1%香草醛硫酸溶液1-2滴，液滴边缘显玫红色 例2：大黄流浸膏中升华物的鉴别 取本品1ml，进行微量升华，升华物置显微镜下观察，有菱形针状 结晶、羽状和不规则状结晶，滴加氢氧化钠试液，溶液显紫红色
§3 理化鉴别
四、色谱法（专属性强） （一）纸色谱法PC 固定相：水 流动相：BAW系统 载 体：纤维素 鉴别范围：氨基酸、动物类药物、多糖等极性组分 鉴别依据：供试品色谱中，在与对照品或对照药材 相应的位置显相同颜色的斑点，Rf值来表示
§3 理化鉴别
四、色谱法（专属性强） （二）薄层色谱法TLC—最为常用的鉴别方法
比例旋：度薄荷油
α为测得的旋光度
“ 旋折光光度率取本应品为，1.[4依5]tDld法6为-为测1测l液d.定4定体6（管6的（附长相附度录对d录V密mIVI度IEI）F，）旋光度应
为区-分1或7°检至查-2药4 °品” 的纯杂程度，或测定含量
§1 性状鉴别
三、物理常数测定—鉴别药物，反映药物的纯净程度
第二章 中药制剂的鉴别
【目的要求】
❖掌握如何建立中药制剂的薄层色谱定性鉴别方法 ❖熟悉中药制剂的显微鉴别、荧光鉴别、可见紫外 光谱鉴别方法 ❖了解中药制剂的GC、HPLC定性鉴别方法
§1 性状鉴别
一、性状鉴别的内容 颜色、形态、形状、气、味、其他(水试，火试) 二、各种剂型的性状描述
左金丸： 本品为黄褐色的水丸；气特异，味苦、辛。 伤湿止痛膏：本品为淡黄绿色至淡黄色的片状橡胶膏；气芳香。 甘草浸膏： 本品为棕褐色的固体，有微弱的特殊臭气和持久
药物分析学科
§3 理化鉴别
三、光谱法 ❖荧光法 ❖可见-紫外分光光度法 最大吸收波长法 （规定吸收波长法） 对复照方品丹对参比滴法丸中丹参的鉴别 规“定取吸本收品波15长丸和，吸加收少度量法水，搅拌使溶解后用水稀释至100ml， 规摇定匀吸，收取波2m长l和，吸加收水度至比25值m法l，摇匀，照分光光度法测定， 多在溶28剂3光nm谱的法波长处有最大吸收。” ❖红外分光光度法（贵重原料的鉴别） 优点：取样量少、快速、准确
➢相对密度
比重瓶法和韦氏比重秤法 ➢熔点
wk.baidu.com
毛细管法 测定熔点
毛细管测定法
➢凝点
§2 显微鉴别
✓适用于：由药材粉末直接制成的制剂或添加有部 分药材粉末的制剂
✓显微定性鉴别的特点—复杂 ✓制片方法：
散剂、胶囊剂—直接制片 片剂—刮取或研磨后制片 水丸—研磨后制片 蜜丸—解离组织片
氢氧化钾法 硝铬酸法 氯酸钾法
的特殊甜味；遇热软化，易吸潮。
§1 性状鉴别
三、物理常数--鉴别药物，反映药物的纯净程度
➢折光率：20℃，用钠光谱的D线(589.3nm)测定供试
品相对于空气的折光率。
区分不同的油类或检查药品的纯杂程度
➢旋光度和比旋度：20℃，用钠光谱的D线(589.3nm)
测定旋光度，除另有规定外，测定管长度为1dm。
麦味地不黄加丸试粉剂末法显微特征图
§3 理化鉴别
定义：用物理的、化学的或物理化学的方法对制剂 中所含化学成分进行定性鉴别。 常用鉴别方法： ❖一般化学反应法 ❖升华法 ❖光谱法 ❖色谱法
§3 理化鉴别
一、化学反应法 要求反应的专属性强、简单易行 分析前对样品进行分离精制 用阴性对照和阳性对照进行验证
§3 理化鉴别
四、色谱法（专属性强） （三）薄层色谱扫描法TLCS
例如：冠心苏合丸的薄层扫描鉴别
苏
合
阴性对照
香
鉴
别
薄
阳性对照
层
扫
描
图
1 2 3 4 5 供6试品
乳 香 鉴 别 薄 层 扫 描 图
§3 理化鉴别
四、色谱法（专属性强） （四）气相色谱法
利用保留值进行定性鉴别，适用于含有挥发油或挥发性成分 的制剂（如含樟脑、薄荷脑、冰片、水杨酸甲酯、麝香酮等 的制剂） ❖气质联用 （五）高效液相色谱法 应用范围广，很少单独用作鉴别，多与含量测定结合进行 ❖液质联用 五、其他鉴别方法 高效毛细管电泳法（HPCE）、X-射线衍射法、导数光谱法、 指纹图谱、分子生物学技术
习题
1、试述薄层色谱法使用的吸附剂或载体有哪些。 2、薄层色谱鉴别法中为何有时采用对照药材和对 照品同时对照？ 3、为何红外光谱法在中药制剂的鉴别应用比合成 药物少得多？ 4、中药制剂性状鉴别的内容主要有哪些？ 5、试述利用可见-紫外分光光度法对中药制剂进行鉴别
的方法。
5、对照物的选择
（1）对照品对照 （2）阴阳对照 （3）采用对照品和对照药材同时对照
§3 理化鉴别
四、色谱法（专属性强） （二）薄层色谱法TLC—最为常用的鉴别方法
12 3456
首乌丸薄层色谱鉴别 提取方法：甲醇提取 薄层板：硅胶
G+0.5%NaOH 展开剂：甲苯-乙酸乙酯甲酸（15:2:1） 检测波长：365nm 1、大黄素 2大黄素甲醚 3、4对照药材 5、6样品
1、供试品溶液的制备及净化 2、薄层色谱法使用的材料 薄层板 、涂铺器、点样器材、展开槽、显色装置 3、操作方法 薄层板的制备→点样→展开→检测→薄层板的记录和保存
§3 理化鉴别
四、色谱法（专属性强） （二）薄层色谱法TLC—最为常用的鉴别方法 4、影响薄层色谱分析的主要因素
（1）样品的预处理和供试品溶液的制备 （2）薄层色谱的点样技术 （3）吸附剂的活性和相对湿度的影响 （4）温度的影响
§3 理化鉴别
二、升华法—专属性强，但使用具有一定的局限性 鉴定具有升华性质的化学成分
（如冰片，大黄蒽醌类等）
观察升华物的形状、颜色、荧光、化学反应等
例1：牛黄解毒片中冰片的微量升华鉴别 取本品1片，研细，进行微量升华，得到白色的升华物，加新制的 1%香草醛硫酸溶液1-2滴，液滴边缘显玫红色 例2：大黄流浸膏中升华物的鉴别 取本品1ml，进行微量升华，升华物置显微镜下观察，有菱形针状 结晶、羽状和不规则状结晶，滴加氢氧化钠试液，溶液显紫红色
§3 理化鉴别
四、色谱法（专属性强） （一）纸色谱法PC 固定相：水 流动相：BAW系统 载 体：纤维素 鉴别范围：氨基酸、动物类药物、多糖等极性组分 鉴别依据：供试品色谱中，在与对照品或对照药材 相应的位置显相同颜色的斑点，Rf值来表示
§3 理化鉴别
四、色谱法（专属性强） （二）薄层色谱法TLC—最为常用的鉴别方法
比例旋：度薄荷油
α为测得的旋光度
“ 旋折光光度率取本应品为，1.[4依5]tDld法6为-为测1测l液d.定4定体6（管6的（附长相附度录对d录V密mIVI度IEI）F，）旋光度应
为区-分1或7°检至查-2药4 °品” 的纯杂程度，或测定含量
§1 性状鉴别
三、物理常数测定—鉴别药物，反映药物的纯净程度
第二章 中药制剂的鉴别
【目的要求】
❖掌握如何建立中药制剂的薄层色谱定性鉴别方法 ❖熟悉中药制剂的显微鉴别、荧光鉴别、可见紫外 光谱鉴别方法 ❖了解中药制剂的GC、HPLC定性鉴别方法
§1 性状鉴别
一、性状鉴别的内容 颜色、形态、形状、气、味、其他(水试，火试) 二、各种剂型的性状描述
左金丸： 本品为黄褐色的水丸；气特异，味苦、辛。 伤湿止痛膏：本品为淡黄绿色至淡黄色的片状橡胶膏；气芳香。 甘草浸膏： 本品为棕褐色的固体，有微弱的特殊臭气和持久
药物分析学科
§3 理化鉴别
三、光谱法 ❖荧光法 ❖可见-紫外分光光度法 最大吸收波长法 （规定吸收波长法） 对复照方品丹对参比滴法丸中丹参的鉴别 规“定取吸本收品波15长丸和，吸加收少度量法水，搅拌使溶解后用水稀释至100ml， 规摇定匀吸，收取波2m长l和，吸加收水度至比25值m法l，摇匀，照分光光度法测定， 多在溶28剂3光nm谱的法波长处有最大吸收。” ❖红外分光光度法（贵重原料的鉴别） 优点：取样量少、快速、准确
➢相对密度
比重瓶法和韦氏比重秤法 ➢熔点
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毛细管法 测定熔点
毛细管测定法
➢凝点
§2 显微鉴别
✓适用于：由药材粉末直接制成的制剂或添加有部 分药材粉末的制剂
✓显微定性鉴别的特点—复杂 ✓制片方法：
散剂、胶囊剂—直接制片 片剂—刮取或研磨后制片 水丸—研磨后制片 蜜丸—解离组织片
氢氧化钾法 硝铬酸法 氯酸钾法
的特殊甜味；遇热软化，易吸潮。
§1 性状鉴别
三、物理常数--鉴别药物，反映药物的纯净程度
➢折光率：20℃，用钠光谱的D线(589.3nm)测定供试
品相对于空气的折光率。
区分不同的油类或检查药品的纯杂程度
➢旋光度和比旋度：20℃，用钠光谱的D线(589.3nm)
测定旋光度，除另有规定外，测定管长度为1dm。
麦味地不黄加丸试粉剂末法显微特征图
§3 理化鉴别
定义：用物理的、化学的或物理化学的方法对制剂 中所含化学成分进行定性鉴别。 常用鉴别方法： ❖一般化学反应法 ❖升华法 ❖光谱法 ❖色谱法
§3 理化鉴别
一、化学反应法 要求反应的专属性强、简单易行 分析前对样品进行分离精制 用阴性对照和阳性对照进行验证
§3 理化鉴别
四、色谱法（专属性强） （三）薄层色谱扫描法TLCS
例如：冠心苏合丸的薄层扫描鉴别
苏
合
阴性对照
香
鉴
别
薄
阳性对照
层
扫
描
图
1 2 3 4 5 供6试品
乳 香 鉴 别 薄 层 扫 描 图
§3 理化鉴别
四、色谱法（专属性强） （四）气相色谱法
利用保留值进行定性鉴别，适用于含有挥发油或挥发性成分 的制剂（如含樟脑、薄荷脑、冰片、水杨酸甲酯、麝香酮等 的制剂） ❖气质联用 （五）高效液相色谱法 应用范围广，很少单独用作鉴别，多与含量测定结合进行 ❖液质联用 五、其他鉴别方法 高效毛细管电泳法（HPCE）、X-射线衍射法、导数光谱法、 指纹图谱、分子生物学技术
习题
1、试述薄层色谱法使用的吸附剂或载体有哪些。 2、薄层色谱鉴别法中为何有时采用对照药材和对 照品同时对照？ 3、为何红外光谱法在中药制剂的鉴别应用比合成 药物少得多？ 4、中药制剂性状鉴别的内容主要有哪些？ 5、试述利用可见-紫外分光光度法对中药制剂进行鉴别
的方法。
5、对照物的选择
（1）对照品对照 （2）阴阳对照 （3）采用对照品和对照药材同时对照
§3 理化鉴别
四、色谱法（专属性强） （二）薄层色谱法TLC—最为常用的鉴别方法
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首乌丸薄层色谱鉴别 提取方法：甲醇提取 薄层板：硅胶
G+0.5%NaOH 展开剂：甲苯-乙酸乙酯甲酸（15:2:1） 检测波长：365nm 1、大黄素 2大黄素甲醚 3、4对照药材 5、6样品
1、供试品溶液的制备及净化 2、薄层色谱法使用的材料 薄层板 、涂铺器、点样器材、展开槽、显色装置 3、操作方法 薄层板的制备→点样→展开→检测→薄层板的记录和保存
§3 理化鉴别
四、色谱法（专属性强） （二）薄层色谱法TLC—最为常用的鉴别方法 4、影响薄层色谱分析的主要因素
（1）样品的预处理和供试品溶液的制备 （2）薄层色谱的点样技术 （3）吸附剂的活性和相对湿度的影响 （4）温度的影响