蔬菜农药残留的快速检测方法原理及检验标准
蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
实验十三、蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测（GB/T 5009.199-2003 蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测）方法一快速卡法一、目的要求：学习快速卡法测定有机磷农残快速检验法及熟悉检验结果评定。
二、实验原理：胆碱脂酶可催化靛酚乙酸脂（红色）水解为乙酸与靛酚（蓝色），有机磷或氨基甲酸脂类农药对胆碱脂酶有抑制作用，使催化、水解、变色的过程发生改变，由此可判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸脂类农药的存在。
三、实验试剂：1、固化有胆碱脂酶和靛酚乙酸脂试纸卡片；2、pH 7.5 磷酸盐缓冲液：分别称取15.0g磷酸氢二钠[Na2HPO4•12H2O]与1.59g无水磷酸二氢钾[KH2PO4]，用500 mL蒸馏水溶解。
四、实验步骤：1、整体测定法（1）选取具有代表性的蔬菜样品，擦去表面泥土，剪成1cm左右方形碎片,取5g防入带盖瓶中，加入10 mL缓冲溶液，振摇50次，静置2min以上.(2) 取一片快速卡，用白色药片沾取提取液，放置10min以上进行预反应，有条件时在37 ℃恒温装置中放置10min。
预反应后的药片表面必须保持湿润。
（3）将快速卡对折，用手捏3min或用恒温装置恒温3min，使红色药片与白色药片叠合发生反应。
注意：每批测定应设一个缓冲液的空白对照。
2、表面测定法（粗筛法）（1）擦去蔬菜表面泥土，滴2~3滴缓冲液在蔬菜表面，用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。
（2）取一速片测卡，将蔬菜上的液滴滴在白色药片上。
（3）放置10 min以上进行预反应，有条件时在37 ℃恒温装置中放置10 min。
预反应10 min，预反应后的药片表面必须保持湿润。
（4）将快速卡对折，用手捏3min或用恒温装置恒温3min，使红色药片与白色药片叠合发生反应。
注意：每批测定应设一个缓冲液的空白对照。
五、检测结果判断：1、结果判断结果以酶被有机磷或氨基甲酸脂类农药抑制（为阳性）、未抑制（阴性）表示。
蔬菜农药残留的快速检测方法原理及检验标准
蔬菜农药残留的快速检测方法原理及检验标
准
蔬菜农药残留的快速检测方法原理及检验标准主要有以下几种：
1. 高效液相色谱法（HPLC）：该方法利用高效液相色谱仪对蔬菜样品中的农
药进行分离和定量分析。
原理是将样品中的农药化合物通过柱子分离，并通过检测器进行检测，最后根据峰面积或峰高来定量分析。
检验标准通常是根据国家相关法规或标准设定的农药残留限量。
2. 气相色谱法（GC）：该方法利用气相色谱仪对蔬菜样品中的农药进行分离
和定量分析。
原理是将样品中的农药化合物通过柱子分离，并通过检测器进行检测，最后根据峰面积或峰高来定量分析。
检验标准通常是根据国家相关法规或标准设定的农药残留限量。
3. 免疫分析法：该方法利用特定的抗体与农药残留结合，通过免疫反应来检测
和定量分析蔬菜样品中的农药残留。
原理是将样品中的农药残留与特定抗体结合，形成抗原-抗体复合物，然后通过染色或荧光等标记物来检测和定量分析。
检验标
准通常是根据国家相关法规或标准设定的农药残留限量。
4. 质谱法：该方法利用质谱仪对蔬菜样品中的农药进行分析和定量。
原理是将
样品中的农药化合物通过质谱仪进行分析，根据质谱图谱来鉴定和定量分析。
检验标准通常是根据国家相关法规或标准设定的农药残留限量。
蔬菜农药残留的检验标准通常根据国家相关法规或标准来设定。
不同国家和地
区的标准可能有所不同，但一般都会设定农药残留的最大限量，以确保蔬菜的安全性。
这些标准通常会根据农药的毒性、使用频率、蔬菜种类等因素来设定。
蔬菜农药残留快速检测技术介绍及注意事项
蔬菜农药残留快速检测技术介绍及注意事项蔬菜农药残留是现代农业生产中的一个重要问题。
农药残留不仅对人体健康造成潜在威胁，还对环境产生负面影响。
因此，快速有效地检测蔬菜中的农药残留已成为一个迫切需要解决的问题。
本文将介绍目前主流的蔬菜农药残留快速检测技术及其注意事项。
一、光谱技术光谱技术是一种无损检测手段，可以通过光散射、吸收、荧光等特性来确定蔬菜中的农药残留。
常用的光谱技术包括紫外-可见光谱、红外光谱和拉曼光谱。
与传统的分析方法相比，光谱技术具有快速、准确且无损伤的优点。
紫外-可见光谱适用于分析化学键的特征吸收峰。
红外光谱可以分析化学物质的结构和化学键类型。
拉曼光谱则能够提供关于分子振动信息的详细数据，从而实现农药残留的快速检测。
二、色谱技术色谱技术是一种分离和定量分析的方法，常用于农药残留检测。
高效液相色谱（HPLC）和气相色谱（GC）是两种常用的色谱技术，它们可以有效地分离和检测蔬菜中的农药残留。
色谱技术检测蔬菜农药残留的过程中需要注意以下几点：1.样品的准备：样品制备过程中应避免与其他物质接触，尽量保持样品的原始状态。
2.内标物的选择：内标物的选择应准确可靠，能够相互配合，提高检测的准确性与稳定性。
3.校准曲线的建立：建立标准曲线时，应选择适当的浓度范围，准确测量并绘制样品的响应与浓度之间的关系。
4.色谱柱的选择：根据样品的特性选择合适的色谱柱，以确保分离效果和分析速度。
三、质谱技术质谱技术是一种基于分子质量和结构的分析方法，广泛应用于农药残留的快速检测。
常用的质谱技术包括气相质谱（GC-MS）和液相质谱（LC-MS）。
质谱技术能够提供高灵敏度和高选择性的检测结果，能够对蔬菜中的农药残留进行定性和定量分析。
质谱技术检测蔬菜农药残留需要注意以下几点：1.样品制备：样品制备过程中应遵循标准操作规程，确保样品的准确性和可重复性。
2.设定合适的离子扫描模式：根据目标农药的特性选择恰当的离子扫描模式，以提高检测的敏感性和准确性。
农药速测卡检测蔬菜水果的农残方法
农药速测卡检测蔬菜水果的农残方法1适用范围：本方法适用于蔬菜、水果、相应食物、水及中毒残留物中有机磷类和氨基甲酸酯类农药及鼠药的快速检测。
本方法引自国家标准快速检测方法GB/。
2检测原理：胆碱酯酶可催化靛酚乙酸酯水解为乙酸与靛酚，有机磷或氨基甲酸脂类农药对胆碱酯酶有抑制作用，使催化、水解、变色的过程发生改变，由此判断样品中是否含有过量有机磷或氨基甲酸酯类农药的残留。
3检测试材固化有胆碱酯酶和靛酚乙酸酯试剂的农药速测卡。
乙酸乙酯磷酸盐浸提溶液：分别取磷酸氢二钠[Na2HPO4·12H2O]与磷酸二氢钾[KH2PO4]，用500mL蒸馏水溶解。
称量天平有条件时配备专为农药速测卡而设计的“农药残留速测仪”和超声波提取器。
4蔬菜、水果中农药残留量的检测、结果判断与注意事项表面测定法：擦去蔬菜表面泥土，滴2～3滴浸提液在蔬菜表面，用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。
取一片速测卡，将蔬菜上的液滴滴在白色药片上。
放置10min进行预反应，将速测卡对折后，用手捏3min时，打开与空白对照实验卡比较，白色药片不变色或略有浅蓝色均为阳性结果。
白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同为阴性结果。
有条件时，将纸片插入“农药残留速测仪”自动恒温、定时检测。
整体测定法：选取有代表性的蔬菜样品，擦去表面泥土，剪成1cm左右见方碎片，取5g放入带盖瓶中，加入10mL 浸提液，震摇50次，静置2min以上。
取一片速测卡，在白色药片上滴上2～3滴提取液，放置10min进行预反应，将速测卡对折后，用手捏3min时，打开与空白对照实验卡比较，白色药片不变色或略有浅蓝色均为阳性结果。
白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同为阴性结果。
有条件时，将纸片插入“农药残留速测仪”自动恒温、定时观察。
注意事项：目前国内外所使用的农药残留测定方法的检验原理基本相同，测定中的干扰物质也基本相同。
葱、蒜、萝卜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中含有对酶有影响的植物次生物质，容易产生假阳性。
蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量快速检测—酶抑制率法(分光光度法)资料
➢ 样品溶液测试：先于试管中加入2.5mL样品提取液，其它操 作与对照溶液测试相同，记录反应3min的吸光度变化值ΔAt
透射光 It
原理
在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱 酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度 呈正比。正常情况下，酶催化神经传导代谢产物 （乙酰胆碱）水解，其水解产物与显色剂反应，产 生黄色物质，用分光光度计在412nm处测定吸光度 随时间的变化值，计算出抑制率，通过抑制率可以 判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类 农药的存在。
酶抑制率法对部分农药的检出限
农药名称
敌敌畏 对硫磷 辛硫磷 甲胺磷 马拉硫磷
乐果
检出限 mg/kg
0.1 1
0.3
2
4 3
农药名称
氧化乐果 甲基异柳磷 灭多威 丁硫克百威 敌百虫 呋南丹
检出限 mg/kg
0.8 5
0.1Байду номын сангаас
0.05
0.2 0.05
说明
葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液 中，含有对酶有影响的植物次生物质，容易产生假阳性。处 理这类样品时，可采取整株（体）蔬菜浸提。对一些含叶绿 素较高的蔬菜，也可采取整株（体）蔬菜浸提的方法，减少 色素的干扰。
当温度条件低于37° C，酶反应的速度随之放慢，加入酶液 和显色剂后放置反应的时间应相对延长，延长时间的确定， 应以胆碱酯酶空白对照测试3min的吸光度变化D A0值在0.3 以上，即可往下操作。注意样品放置时间应与空白对照溶液 放置时间一致才有可比性。胆碱酯酶空白对照溶液3min的吸 光度变化D A0值＜0.3 的原因：一是酶的活性不够，二是温 度太低。
浅析蔬菜农药残留原因及检测方法
浅析蔬菜农药残留原因及检测方法蔬菜农药残留是指在种植蔬菜过程中，使用的农药留下的残留物。
蔬菜农药残留的存在是由于农药在蔬菜生长过程中被施用，并且难以完全被分解和去除。
以下是浅析蔬菜农药残留的原因及检测方法。
蔬菜农药残留的原因主要有以下几点：1. 农药的使用不规范：农民在种植蔬菜时可能使用了过量的农药，或者使用了禁用的农药。
这会导致农药在蔬菜中的残留量超过标准。
2. 农药的残留期限未到：农药通常具有一定的持效期限，即便遵守了使用标准，也可能在蔬菜收获前仍有残留量。
3. 土壤和水源的污染：由于农业生产过程中农药的应用，可能导致土壤和水源的污染。
这些污染物可能会通过植物的根系吸收到蔬菜中，造成农药残留。
蔬菜农药残留的检测方法包括化学分析和生物学分析两种主要方法。
化学分析是指通过化学手段来分离、提取和检测农药残留。
常用的方法包括高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）等。
这些方法能够对蔬菜中的农药进行定量和定性分析，快速准确地检测出残留物的种类和含量。
生物学分析是指利用生物学方法来检测蔬菜中的农药残留。
常用的方法包括酶活性检测法、细胞毒性检测法等。
这些方法通过检测生物体对农药的反应和损伤程度，判断蔬菜中是否存在农药残留。
目前还有一些新兴的农药残留检测技术，如基于光学传感器、电化学传感器、生物传感器等的检测方法。
这些新技术具有灵敏度高、快速、简便等优点，未来有望在蔬菜农药残留检测中得到更广泛的应用。
蔬菜农药残留的原因主要包括农药使用不规范、农药残留期限和土壤水源污染。
检测方法包括化学分析和生物学分析两种主要方法，其中化学分析是目前主流的检测方法，而生物学分析和新兴的检测技术则为蔬菜农药残留的检测提供了更多的选择。
蔬菜农药残留的快速检测方法原理及检验标准
蔬菜农药残留的快速检测方法原理及检验标准1、目前农药在蔬菜中残留的问题1.1、农药是把“双刃剑”，对促进农业增产有极其重要的作用。
但由于农药本身固有的化学属性和对其使用不当，导致农产品农药残留严重超标，严重危害到广大人民群众的健康。
1.2、在我国农药中，70%为有机磷农药，而在我国生产使用的有机磷农药中，70%为剧毒、高毒类，而且较多是禁止在蔬菜作物上使用的。
2、农药中毒事件常有报道，究其原因2.1、农产品不按规定的用药量、次数、方法或安全间隔期施药，或施用不允许在蔬菜上使用剧毒、高毒类农药；2.2、现在标准施行的农药残留测定需要通过有机溶剂提取、净化和用大型分析仪器进行，无法对廉价的蔬菜进行随时随地或快速检测而形成的监管不到位。
3、农药分类：3.1、矿物源农药3.1.1、有效成分起源于矿产无机物和石油的农药。
3.1.2、代表有硫酸铜、硫磺、石硫合剂、磷化铝、磷化锌和石油乳剂等。
3.2、生物源农药3.2.1、包括植物源农药和动物源农药及微生物源农药。
3.2.2、植物类别有植物毒素、植物内源激素、植物源昆虫激素、拒食剂、引诱剂、驱避剂、绝育剂、增效剂、植物防卫素、易株克生物质等。
3.2.3、动物资源开发的农药包括动物毒素、昆虫激素、昆虫信息素和天敌等。
3.3、按作用方式分类3.3.1、胃毒素农药（敌百虫、敌敌畏、甲胺磷、马拉硫磷）3.3.2、触杀性农药（对硫磷、敌敌畏、甲胺磷、马拉硫磷）3.3.3、内吸性农药（乐果、甲胺磷、氧乐果、久效磷）3.3.4、熏蒸性农药（溴甲烷、磷化铝、敌敌畏）3.3.5、特异性农药（乙烯利、毒霉素、灭幼脲）4、目前所使用的农药按其化学结构大致可以分为以下几类：有机氯类、有机磷类、氨基甲酸酯类、拟除虫菊酯类、杂环类化合物、其他（苯氧羧酸类、脲类化合物）等。
A、有机磷类敌敌畏、甲拌磷、乐果、对氧磷、对硫磷、喹硫磷、优杀硫磷、敌百虫、氧化乐果、磷胺、甲基嘧啶磷、马拉硫磷、辛硫磷、亚胺硫磷、甲胺磷、地亚农、甲基毒死蜱、毒死蜱、倍硫酸、杀扑磷、乙酰甲胺磷、巴胺磷、甲基对硫磷、杀螟硫磷、异柳磷、异柳磷等。
蔬菜中农药残留量的测定方法
蔬菜中农药多残留检测方法一、有机磷分析1 试剂和材料除非另有说明，在分析中仅使用分析纯和GB/T 6682中规定的至少二级的水。
1.1 乙腈。
1.2 丙酮。
1.3 正己烷。
1.4 氯化钠，检测不含干扰物质，120 ℃烘过夜。
2样品处理蔬菜或水果样品不洗涤，用四分法取样后，切碎，混匀，放入食品加工机中加工后，装入聚乙烯瓶或玻璃瓶中。
3提取准确称取25.0 g加工好的样品放入匀浆机中，加入50.0 mL乙腈（1.1），匀浆2 min 后过滤，滤液收集到装有5 g~7 g氯化钠的100 mL具塞量筒中，收集滤液40 mL~50 mL，盖上塞子，剧烈震荡1 min，在室温下静止10 min，乙腈相和水相分层。
4净化准确吸取10.00 mL乙腈溶液，加到100 mL烧杯中，将烧杯放在80 ℃的水浴锅上加热，杯内缓缓通入氮气或空气，蒸发近干。
或将乙腈溶液加入到100 mL浓缩瓶中，在40 ℃下用旋转蒸发仪浓缩近干。
烧杯或浓缩瓶中加入2 mL丙酮（1.2），盖上铝箔。
将烧杯中溶解的样品溶液完全转移到15 mL离心试管中，再用3 mL丙酮（1.2）分多次洗烧杯，并转移到离心试管中，准确定容至5 mL，在旋涡混合器上混匀试管中的溶液，用于气相色谱分析。
如样品过于混浊，可用0.2 m滤膜，放在5 mL注射器顶端，将丙酮溶液过滤，再用于气相色谱分析。
5测定5.1 气相色谱参考条件5.1.1色谱柱：预柱，0.25 mm或0.53 mm⨯1.0 m。
分析柱：HP –1或DB-1 0.53 mm⨯30 m⨯1.5 μm。
5.1.2 气流速度：氮气，10 mL/min。
氢气，75 mL/min。
空气，100 mL/min。
5.1.3 温度：进样口，220 ℃。
检测器，250 ℃。
柱温采用程序升温方式，150 ℃恒温2min 8 ℃/min 250 ℃恒温12min 。
5.2色谱分析吸取1μL标准混合溶液及净化后的样品溶液注入色谱仪中，以保留时间定性，以样品溶液峰面积与标准溶液峰面积比较定量。
蔬菜农药残留速测方法及注意事项
蔬菜农药残留速测方法及注意事项摘要介绍了蔬菜农药残留速测原理、方法及注意事项,以期为蔬菜农药残留的检测提供参考。
关键词蔬菜;农药残留;速测原理;方法;注意事项根据有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制酰胆碱酯酶的活性原理,如果蔬菜提取液中不含有机磷或氨基甲酸酯类农药残留或残留量低,酶的活性就不被抑制,试验中加入的底物就能被酶水解,水解产物与加入的显色剂反应产生颜色或水解产物本身有颜色。
如果蔬菜提取液含有农药残留量较高时,酶的活性被抑制,基质就不被水解,当加入显色剂时就不显色或颜色变化很小。
用分光光度计测定吸光值随时间的变化,计算出抑制率,即可判断蔬菜中含有机磷或氨基甲酸酯类农药残留量的情况。
目前,沈阳市农业检测中心已在该市各大蔬菜批发市场建立检测站,对蔬菜中的农药残留进行快速检测[1-2]。
现将其方法及注意事面总结如下。
1蔬菜农药残留速测方法1.1试剂的配置及保存一是提取试剂,即缓冲溶液,每小袋用1 000 mL蒸馏水溶解。
二是胆碱酯酶,用10 mL缓冲溶液溶解,贮存在0~5 ℃冰箱内。
三是底物(碘化乙酰硫代胆碱),用10 mL蒸馏水溶解,贮存在0~5 ℃冰箱内。
四是显色剂(二硫二硝基苯甲酸),用10 mL缓冲溶液溶解,贮存在0~5 ℃冰箱内。
1.2空白样处理于平底小试管中加入50 μL酶、3 mL提取液即缓冲溶液、50 μL显色剂。
常温下放置15 min,加入50 μL底物,立即倒入比色皿中,再放入仪器比色池中,按“空白”键,3 min后得空白吸光度值。
1.3样品处理从田间采摘2.0~2.5 kg可食用菜样,分成3份,1份备案,1份用于复检,1份用于检测。
取表面干净的蔬菜,用天平准确称取,叶菜类取2 g,非叶菜类取4 g,叶菜取叶片部分,果菜如番茄、黄瓜等横截削下1片。
将叶片、瓜肉等切成1 cm见方,置于小玻璃瓶内,加入20 mL提取试剂,振荡1～2 min,倒出上清液于大试管中,静置3～5 min。
蔬菜农药残留的快速检测方法
农业科技现代农业2019年6期蔬菜农药残留的快速检测方法王松(辽宁省北票市农产1质量安全检验检测站，辽宁北票122100)［摘要］在当今社会，人们的生活水平不断提高，对健康饮食的要求也越来越高。
蔬菜中的农药残留在很大程度上影响到人们的饮食质量，对人们的身体健康造成危害#因此，开展农药残留的快速检测意义重大。
文章详细的介绍了蔬菜农药残留的快速检测方法。
［关键词］农药残留；快速检测；蔬菜中图分类号：S481.8文献标识码:B文章编号：1008-0708(2019)06-068-01农药残留是指在农业生产中施用农药后,一部分农药直接或间接残存于谷物、蔬菜、果品、畜产品%水产品以及土壤和水体中的现象。
食用含有大量高毒、剧毒农药残留引起的食物会导致人、畜急性中毒事故&长期食用农药残留超标的农副产品，虽然不会导致急性中毒，但可能引起人和动物的慢性中毒,导致疾病的发生，甚至影响到下一代。
由于农药残留对人和生物危害很大，我对农药的施用的,对食品中农药残留量，有机磷和氨基甲酸酯类农药的速&1农药残留快速检测原理有磷或氨基甲酸酯类农药能中和中酯的性，导的，影响正常传导，中毒致&一毒，用在对农药残留的中。
的性的可品中含有农药的残留&，农残速有：标准和农业行业标&用的是农业业&2农药残留快速检测方法2.1蔬品⑴，有性。
⑵所采样品符合农药间期的，是品。
2.2农药残留快速及⑴：用1000mL水，常温下保存用；(2)酯：性用10mL(酯酶的<70%不超标，！40%残留量可能超标)；(3)物:用1。
mL缓冲；(4):用 10mL&:必存放于2~4&冷藏柜中&2.3仪器用仪器为波长410±3nm专用农药残留速测仪&2.42.4.1空白对照液：取缓冲液3ml，酶50ul，加入专用反应瓶中，再加入50ul，于37~38&恒温培养箱中放置30min后再加入50ul底物，倒入比色皿中，摇匀后即用农残速仪器&空白吸光值控制在0.4~0.8之间。
蔬菜农药残留的快速检测原理和检测标准
14
大家好
C、氨基甲酸酯类 涕灭威砜、涕灭威亚砜、灭多威、 3-羟基呋喃丹、涕灭威、呋喃丹、甲
4
大家好
14户村民饮用 了村里一口水 井里的水，井 水确实有些异 味，下午4时 许，已有村民 出现身体不适 症状。根据警 方调查，中毒 与井水有关
5
大家好
春蚕不吐丝，蚕农 受到很大损失（花
农中流行着一种叫 "可汗"的农药,毒低 效高.其中主要含 有防治害虫的"保 幼激素" ）
6
大家好
事发当天，在自家 种的蔬菜上喷洒了 农药杀虫，后来有 事外出忘记了叮嘱 子女，结果下午三 姐弟准备晚餐时， 摘了些蔬菜几人炒 着吃，不料就发生 了中毒，上吐下泻
37
大家好
速测卡法（纸片法）
3.2.3放置10min以上进行预反应，有条件时在37 ℃ 恒温装置中放置10min。预反应后的药片表面 必须保持湿润。
3.2.4将速测卡对折，用手捏3min或用恒温装置恒 温3min，使红色药片与白色药片叠合反应。
3.2.5每批测定应设一个缓冲液的空白对照卡。
Байду номын сангаас
38
7
大家好
3、农药分类：
按来源分类 矿物源农药
无机化合物
化学合成农药 生物源农药
8
有机合成化合物 天然有机物
抗生素 生物农药
* 按化合物结构分类
蔬菜农药残留快速检测
蔬菜农药残留快速检测河南省安阳市455000摘要：蔬菜是人民日常生活中不可或缺的食品，随着人民生活水平日益提高，蔬菜消费量已超过口粮成为第一大消费食物，蔬菜质量安全水平成为全社会关注的焦点。
然而，作为现代农业主要安全隐患之一的农药残留问题，决定着蔬菜等农产品质量安全水平，更影响着现代蔬菜产业健康持续发展。
关键词：蔬菜；农药残留；快速检测引言该年来，蔬菜中农药残留问题已成为人们生活中的一个中心问题，引起了各国政府、公众和媒体的高度关注。
我国最常见的农药检测方法主要是气相色谱、液相色谱、气相色谱-质谱联用以及液相色谱-质谱联用等检测手段。
这些检测方法均需使用高端设备，且仪器设备操作人员必须为专业的检验人员，需要经授权持证上岗。
同时，仪器设备的后期维护和保养成本也较高。
速测卡法能在较短的时间内快速、准确地检测蔬菜中的农药残留含量。
1快速检测方法及原理方法:GB/ T5009. 199-2003酶发酵率。
在某些情况下有机磷和氨物质可以降低与农药浓度有关的加仑的正常功能。
通常，酶会释放神经递质物质(乙酰胆碱)，其水溶性证明和染料反应产生黄色物质。
透过使用光度测定计测量一段时间内的吸收量来计算抑制率。
采用抑制率可以确定样品中是否含有磷或氨物质。
2蔬菜样品中农药残留检测标准中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会、中华人民共和国农业部和国家食品药品监督管理总局3个部门联合发布的《食品安全国家标准水果和蔬菜中500种农药及相关化学品残留量的测定气相色谱-质谱法》（GB23200.8—2016）、《食品安全国家标准蔬菜中非草隆等15种取代脲类除草剂残留量的测定液相色谱法》（GB23200.18—2016）、《食品安全国家标准水果和蔬菜中噻菌灵残留量的测定液相色谱法》（GB23200.17—2016）、《食品安全国家标准水果和蔬菜中阿维菌素残留量的测定液相色谱法》（GB23200.19—2016）、《食品安全国家标准水果和蔬菜中唑螨酯残留量的测定液相色谱法》（GB23200.29—2016）等。
蔬菜农药残留检测技术
蔬菜农药残留检测技术蔬菜农药残留是当前社会普遍关注的一个问题。
农药残留对人体健康造成了潜在的威胁，因此蔬菜农药残留检测技术的研究和应用显得尤为重要。
本文将介绍蔬菜农药残留检测技术的相关知识，包括检测原理、方法、标准以及市场现状等内容。
蔬菜农药残留检测技术的原理主要包括样品前处理、农药提取和分析检测三个步骤。
1. 样品前处理样品前处理是农药残留检测的第一步，也是整个检测过程中最为关键的一环。
蔬菜样品通常含有大量的水分和杂质，如果不经过前处理，将会对后续的农药提取和分析造成严重影响。
常见的样品前处理方法包括洗涤、研磨、气相萃取、液液萃取等。
2. 农药提取农药提取是将农药从蔬菜样品中有效地提取出来的过程。
常见的提取方法包括溶剂提取、固相微萃取、超声波提取等。
在提取过程中，需要注意选择合适的提取剂和提取条件，以保证提取率和提取的选择性。
3. 分析检测分析检测是将提取得到的农药进行分析检测，确定其含量和种类。
主要的分析检测方法包括气相色谱-质谱联用（GC-MS）、高效液相色谱-质谱联用（HPLC-MS）、光谱法等。
这些方法能够准确、灵敏地检测出蔬菜样品中农药的残留情况。
蔬菜农药残留检测技术的方法包括常规检测方法和新型检测方法两种。
1. 常规检测方法新型检测方法是指近年来新出现的一些蔬菜农药残留检测技术，主要包括分子印迹技术、生物传感器技术等。
这些新型检测方法具有快速、高效、环保等特点，正在逐渐成为蔬菜农药残留检测的发展方向。
蔬菜农药残留检测技术的标准主要包括国家标准、行业标准以及国际标准等。
1. 国家标准国家标准是由国家质量监督检验检疫总局和国家标准化管理委员会组织编制并颁布的，是规定农产品农药残留检测技术的强制性标准。
国家标准的实施对于保障农产品质量、保障人民健康和促进农产品贸易等具有重要意义。
2. 行业标准行业标准是由农产品加工和质量监测领域的专业技术机构和企业组织制定的，是规定农产品农药残留检测技术的非强制性标准。
蔬菜农药残留快速检测技术及常见问题与对策
蔬菜农药残留快速检测技术及常见问题与对策蔬菜是人们日常饮食中必不可少的一部分，它能够为人体提供丰富的维生素和矿物质，对于保持健康具有重要作用。
在蔬菜的生产过程中，为了防治虫害和病害，农民常常会使用农药。
虽然农药能够提高蔬菜的产量和质量，但其在蔬菜中残留过量会对人体健康产生危害。
蔬菜农药残留快速检测技术的研究和应用显得尤为重要。
一、蔬菜农药残留快速检测技术蔬菜农药残留快速检测技术是指通过一系列的物理或化学手段，快速、准确地检测蔬菜中农药残留的方法和技术。
目前，国内外对于蔬菜农药残留快速检测技术的研究主要集中在以下几个方面：1. 气相色谱-质谱联用技术：该技术具有高效、准确、灵敏的特点，能够对蔬菜中的农药残留进行快速检测和分析。
以上技术都为蔬菜农药残留快速检测提供了重要的支持，为保障蔬菜质量和人体健康提供了重要的技术手段。
在蔬菜农药残留快速检测技术的研究和应用中，也存在一些常见问题，需要我们采取相应的对策来解决。
1. 检测成本高：传统的蔬菜农药残留检测技术需要昂贵的仪器和设备，而且检测周期较长，导致检测成本高昂。
对策：采用新型的蔬菜农药残留快速检测技术，如表面增强拉曼光谱技术，具有快速、高效、低成本的特点，可有效降低检测成本。
2. 检测准确性低：有些蔬菜农药残留检测技术在检测准确性方面存在一定的不足，可能会导致误判。
对策：加强研究重点，提高蔬菜农药残留检测技术的准确性和可靠性，建立完善的检测标准和方法。
3. 检测速度慢：部分蔬菜农药残留检测技术时间较长，无法满足市场需求和监管要求。
4. 检测认证标准不统一：不同地区、不同机构的蔬菜农药残留检测标准不统一，导致检测结果的可比性较差。
蔬菜农药残留快速检测技术的研究和应用是当前的重要工作之一，其对于蔬菜质量和人体健康都具有十分重要的影响。
我们需要加强技术创新，解决常见问题，促进蔬菜农药残留快速检测技术的提高和完善，为蔬菜质量安全保驾护航。
蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量快速检测—酶抑制率法(分光光度法)
结果计算
抑制率(%)=[(ΔA0-ΔAt)/ ΔA0]×100 式中： ΔA0对照溶液反应3min吸光度的变化值； ΔAt样品溶液反应3min吸光度的变化值；
结果判定
结果以酶被抑制的程度（抑制率）表示。 当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50%时,表 示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农 药存在，样品为阳性结果。 阳性结果的样品需要重复检验2次以上。
It
原理
在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱 酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度 呈正比。正常情况下，酶催化神经传导代谢产物 （乙酰胆碱）水解，其水解产物与显色剂反应，产 生黄色物质，用分光光度计在412nm处测定吸光度 随时间的变化值，计算出抑制率，通过抑制率可以 判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类 农药的存在。
原理
试剂 pH8.0缓冲溶液 分别取 11.9g无水磷酸氢二钾与３. ２g磷酸二氢钾，用1000mL 蒸馏水溶解。
显色剂 分别取160mg二 硫代二硝基苯甲酸（DTNB） 和15.6mg碳酸氢钠，用20mL 缓冲溶液溶解，4℃冰箱中 保存。
试剂 底物：取25.0mg硫代乙酰 胆碱，加3.0mL蒸馏水溶解， 摇匀后置4℃冰箱中保存备 用。
乙酰胆碱酯酶 根据酶的 活性情况，用缓冲溶液溶 解，3min的吸光度变化ΔA0 值应控制在0.3以上。摇匀 后置4℃冰箱中保存备用。
分析步骤
样品处理：选取有代表性的蔬菜样品，冲洗掉表面泥土，剪 成1cm左右见方碎片，取样品1g，放入烧杯或提取瓶中，加 入5mL缓冲溶液，振荡1~2min，倒出提取液,静置3~5min,待 用。 对照溶液测试： 先于试管中加入2.5mL缓冲溶液，再加入 0.lmL酶液、0.1mL显色剂，摇匀后于37℃放置15min以上 （每批样品的控制时间应一致）。加入0.lmL底物摇匀，此 时检液开始显色反应，应立即放入仪器比色池中，记录反应 3 min的吸光度变化值Δ A0 样品溶液测试：先于试管中加入2.5mL样品提取液，其它操 作与对照溶液测试相同，记录反应3min的吸光度变化值Δ At
农药残留快速检测方法与标准（国家标准）
农药残留快速检测方法与标准（国家标准）中华人民共和国国家标准蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量快速检测Rapid determination for organophosphatecarbamate pesticide residues in vegetables2003-08-11发布 2004-01-01实施1 范围本标准规定了由酶抑制法测定蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检验方法。
本标准适用于蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速筛选测定。
速测卡法（纸片法）2 原理胆碱酯酶可催化靛酚乙酸酯（红色）水解为乙酸与靛酚（蓝色），有机磷或氨基甲酸脂类农药对胆碱酯酶有抑制作用，使催化、水解、变色的过程发生改变，由此可判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。
3 试剂3.1 固化有胆碱酯酶和靛酚乙酸酯试剂的纸片（速测卡）。
3.2 pH7.5缓冲溶液：分别取15.0g磷酸氢二钠[Na2HPO4·12H2O]与1.59g无水磷酸二氢钾[KH2 PO4 ]，用500mL 蒸馏水溶解。
4 仪器4.1 常量天平4.2 有条件时配备37℃±2℃恒温装置。
5 分析步骤5.1 整体测定法5.1.1 选取有代表性的蔬菜样品，擦去表面泥土，剪成1cm左右见方碎片，取5g放入带盖瓶中，加入10mL缓冲溶液，振摇50次，静置2min以上。
5.1.2 取一片速测卡，用白色药片沾取提取液，放置10min以上进行预反应，有条件时在37℃恒温装置中放置10min。
预反应后的药片表面必须保持湿润。
5.1.3 将速测卡对折，用手捏3min或用恒温装置恒温3min，使红色药片与白色药片叠合发生反应。
5.1.4 每批测定应设一个缓冲液的空白对照卡。
5.2 表面测定法（粗筛法）5.2.1 擦去蔬菜表面泥土，滴2滴～3滴缓冲溶液在蔬菜表面，用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。
5.2.2 取一片速测卡，将蔬菜上的液滴滴在白色药片上。
蔬菜农药残留的快速检测方法原理及检验标准
蔬菜农药残留的快速检测方法原理及检验标准蔬菜是人们日常饮食中重要的营养来源之一，但由于农药的广泛使用，蔬菜农药残留问题引起了人们的关注。
为了确保蔬菜的质量和安全，快速、准确地检测蔬菜中的农药残留成为了重要的任务。
本文将介绍蔬菜农药残留的快速检测方法原理及相关的检验标准。
一、快速检测方法原理1. 色谱法色谱法是一种常用的蔬菜农药残留检测方法，其原理是利用色谱柱对样品中的农药进行分离和定量分析。
常见的色谱方法包括气相色谱法（GC）和液相色谱法（LC）。
气相色谱法通过将样品中的农药化合物蒸发成气体，然后经过色谱柱的分离，最后通过检测器进行定量分析。
液相色谱法则是将样品中的农药溶解在溶剂中，然后通过色谱柱的分离，最后通过检测器进行定量分析。
2. 免疫分析法免疫分析法是一种基于抗体和抗原相互作用的检测方法，其原理是利用特异性抗体与目标农药结合形成免疫复合物，通过测量免疫复合物的信号来定量分析样品中的农药残留。
常见的免疫分析法包括酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫层析法。
ELISA方法通过将样品中的农药与酶标记的抗体结合，然后通过酶的催化反应产生信号，最后通过测量信号的强度来定量分析样品中的农药残留。
免疫层析法则是将样品与特异性抗体结合，通过毛细管作用或重力作用使样品在试纸上流动，最后通过观察试纸上的颜色变化来判断农药残留的含量。
3. 质谱法质谱法是一种基于化学分析原理的检测方法，其原理是通过测量样品中农药分子的质量和质荷比来定量分析样品中的农药残留。
常见的质谱法包括气相质谱法（GC-MS）和液相质谱法（LC-MS）。
GC-MS方法通过将样品中的农药化合物蒸发成气体，然后通过气相色谱的分离，最后通过质谱仪进行定量分析。
LC-MS方法则是将样品中的农药溶解在溶剂中，然后通过液相色谱的分离，最后通过质谱仪进行定量分析。
二、检验标准为了确保蔬菜农药残留的安全性，各国制定了相应的检验标准。
以下是一些常见的蔬菜农药残留检验标准：1. 欧盟标准欧盟对农药残留的限量标准由欧洲食品安全局（EFSA）制定，根据不同蔬菜的特点和使用情况，制定了相应的最大残留限量（MRLs）。
蔬菜农药残留快速检测方法原理及检测标准概述(PPT146页)
2.现在标准施行的农药残留测定需要通过有机 溶剂提取、净化和用大型分析仪器进行，无法 对廉价的蔬菜进行随时随地或快速的检测而形 成的监管不到位。
蔬菜农药残留快速检测方法原理及检 测标准 概述(PP T146 页)
安康16村民农药中毒
14户村民饮用 了村里一口水 井里的水，井 水确实有些异 味，下午4时 许，已有村民 出现身体不适 症状。根据警 方调查，中毒 与井水有关
蔬菜农药残留快速检测方法原理及检 测标准 概述(PP T146 页)
蔬菜农药残留快速检测方法原理及检 测标准 概述(PP T146 页)
春蚕间接农药中毒事件
在我国农药中，70％为有机磷农药，而在我国 生产使用的有机磷农药中，70％为剧毒、高毒 类，而且较多是禁止在蔬菜作物上使用的。
蔬菜农药残留快速检测方法原理及检 测标准 概述(PP T146 页)
蔬菜农药残留快速检测方法原理及检 测标准 概述(PP T146 页)
2、农药中毒事件常有报道 ，究其原因
蔬菜农药残留快速检测方法原理及检 测标准 概述(PP T146 页)
蔬菜农药残留快速检测方法原理及检 测标准 概述(PP T146 页)
按作用方式分类
胃毒性农药 （敌百虫、敌敌畏、甲胺磷、马拉硫磷） 触杀性农药 （对硫磷、敌敌畏、甲胺磷、马拉硫磷） 内吸性农药 （乐果、甲胺磷、氧乐果、久效磷） 薰蒸性农药 （溴甲烷、磷化铝、敌敌畏） 特异性农药 （乙烯利、赤霉素、灭幼脲）
抗生素 生物农药
* 按化合物结构分类
有机氯化合物 有机磷化合物 拟除虫菊酯 氨基甲酸酯 杂环类化合物 其它（ 测标准 概述(PP T146 页)
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蔬菜农药残留的快速检测方法原理及检验标准、目前农药在蔬菜中残留的问题1、农药是把“双刃剑”，对促进农业增产有极其重要的作用。
但由于农药本身固有的化学属性和对其1.1 使用不当，导致农产品农药残留严重超标，严重危害到广大人民群众的健康。
为剧毒、高毒类，而70%1.2、在我国农药中，70%为有机磷农药，而在我国生产使用的有机磷农药中，且较多是禁止在蔬菜作物上使用的。
、农药中毒事件常有报道，究其原因2、农产品不按规定的用药量、次数、方法或安全间隔期施药，或施用不允许在蔬菜上使用剧毒、高毒2.1 类农药；、现在标准施行的农药残留测定需要通过有机溶剂提取、净化和用大型分析仪器进行，无法对廉价的2.2 蔬菜进行随时随地或快速检测而形成的监管不到位。
、农药分类：3、矿物源农药3.1 3.2、生物源农药 3.3、按作用方式分类目前所使用的农药按其化学结构大致可以分为以下几类：4、有机氯类、有机磷类、氨基甲酸酯类、拟除虫菊酯类、杂环类化合物、其他（苯氧羧酸类、脲类化合物）等。
A、有机磷类敌敌畏、甲拌磷、乐果、对氧磷、对硫磷、喹硫磷、优杀硫磷、敌百虫、氧化乐果、磷胺、甲基嘧啶磷、马拉硫磷、辛硫磷、亚胺硫磷、甲胺磷、地亚农、甲基毒死蜱、毒死蜱、倍硫酸、杀扑磷、乙酰甲胺磷、巴胺磷、甲基对硫磷、杀螟硫磷、异柳磷、异柳磷等。
B、有机氯类、异菌脲、op'-DDT、op'-DDD、pp'-DDT、、δ、-666α、β-666γ-666、-666、op -DDEpp'-DDE五氯硝基苯、林丹、乙烯菌核利、三氯杀螨醇、功夫、氯硝胺、百菌清、粉锈宁、甲氯菊酯、氯菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯等。
C、氨基甲酸酯类仲丁威、速灭威等。
呋喃丹、甲萘威、3-羟基呋喃丹、涕灭威、叶蝉散、灭多威、涕灭威砜、涕灭威亚砜、、拟除虫菌酯类d联苯菊酯、二氧苯醚菊酯、功夫菊酯、溴氰菊酯、氰戊菊酯、氟氰菊酯、氟氯氰菊酯，戊菊酯、甲氰菊酯、氯氟氰菊酯、呋喃菊酯、苄呋菊酯、右旋丙烯菊等。
5、最大残留限量标准最大残留限量（Maximum Residue Limit，MRL）在农畜产品中农药残留的法定最高允许浓度，又称最高残留限量，以每千克农畜产品中农药残留的毫克数（毫克/千克）表示。
目的：控制食品中过量农药残留以保障食用者安全，对超标的产品采取措施，即禁止食用。
执行和指导合理用药，农产品监测超标时，表明未按规定用药。
减少国际贸易纠纷，各国均制订本国的MRL。
《食品中农药最大残留限量》标准．A、GB2763-2014，规定了387种农药最高残留限量。
国家标准作为一项加强农药管理的措施。
B、其中，针对蔬菜、水果、茶叶等鲜食农产品农药残留超标多发、易发问题，新标准重点增了蔬菜、水果等鲜食农产品的限量标准。
水果农药残留限量增加473项，蔬菜（包括食用菌）农药最大残留限量增加431项。
6、高毒农药禁限用管理措施6.1、农业部、工业和信息化部、环境保护部、国家工商行政管理总局和国家质量监督检验检疫总局与2011年6月15日发布第1586号公告，决定对高毒农药采取进一步禁限用管理措施。
6.2、停止受理苯线磷、地虫硫磷、甲基硫环磷、磷化钙、磷化镁、磷化锌、硫线磷、蝇毒磷、治螟磷、特丁硫磷、杀扑磷、甲拌磷、甲基异柳磷、克百威、灭多威、灭线磷、涕灭威、磷化铝、氧乐果、水胺硫磷、溴甲烷、硫丹等22种农药新增田间试验申请、登记申请及生产许可证申请；停止批准含有上述农药的新增登记证和农药生产许可证（生产批准文件）。
6.3、撤销氧乐果、水胺硫磷早柑橘树，灭多威在柑橘树、苹果树、茶树、十字花科蔬菜，硫线磷在柑橘树、黄瓜，硫丹在苹果树、茶树，溴甲烷在草莓、黄瓜上的登记。
6.4、本公告发布前已生产产品的标签可以不再更改，但不得继续在已撤销登记的作物上使用。
6.5、自2011年10月31日起，撤销（撤回）苯线磷、地虫硫磷、甲基硫环磷、磷化钙、磷化镁、磷化锌、硫线磷、蝇毒磷、治螟磷、特丁硫磷等10种农药的登记证、生产许可证（生产批准文件），停止生产。
6.6、自2013年10月31日起，停止销售和使用。
根据以上情况，制定出有机磷和氨基甲酸酯类农药的快速检测方法，加强对农药残留的快速检测一成为十分必要的监管措施。
7、农药残留主要检测方法有两种：7.1、色谱检测法：色谱检测法用作农残定量分析，可为农药残留执法提供依据。
色谱法（包括气相色谱、液相色谱、气质联用等）。
优点：灵敏度高、准确、定性定量；缺点：成本高、操作复杂、时间较长。
7.2、速测仪法：速测仪法只能作为农残定性分析，易于在基层推广等特点，是目前我国控制高毒农药残留的一种有效方法，也是目前国内和我省应用最广泛的农药残留快速检测方法。
A、速测仪法的主要优点：1、该方法具有快速方便、前处理简便、成本较低等优点，适用于现场定性测定，特别适合在蔬菜生产基地、批发市场及农产品检测部门开展快速检测工作。
2、该方法可对有农药残留的蔬菜进行粗筛，将一部分农药残留含量较高的蔬菜控制在市场之外，避免因农药残留发生中毒事件。
B、速测仪法的主要缺点：1、酶试剂易失活，导致反应不稳定，检测结果误差较大，重复性不好，实际应用中的确认率大约为60%~70%左右；2、存在检测盲区，只能检测有机磷和氨基甲酸酯两类农药，不能检测有机氯类、菊酯和其它类别的剧毒农药；3、不适合检测葱蒜类、香菜、韭菜、番茄、胡萝卜、茭白、蘑菇、花椒等14种容易出现假阳性的农产品。
8、速测仪的检测方法有两种：1、速测卡法（纸片法）、酶抑制率法（分光光度法）2．9、两种快速检测方法的技术原理9.1、根据有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制昆虫中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酶的活性造成神经传导介质乙酰胆碱的积累，影响正常传导，导致昆虫中毒致死的原理而设计。
9.2、如果蔬菜中不含有机磷和氨基甲酸酯类农药，乙酰胆碱酶水解后，水解产物可与显色剂反应产生颜色。
9.3、如果蔬菜中含有可以抑制乙酰胆碱的活性的有机磷和氨基甲酸酯类农药，这种酶就不能被水解，从而无显色反应。
9.4、在溶液中加入乙酰胆碱酶和显色剂，用此判断有机磷和氨基甲酸酯类农药残留是否存在。
10、速测卡法（纸片法）1、试剂1.1、固有胆碱酯酶和靛酚乙酸酯试剂的纸片（速测卡）。
1.2、pH7.5缓冲液溶液：分别取15.0g磷酸氢二钠与1.59g无水磷酸二氢钾用500mL蒸馏水溶解。
2、仪器2.1、常量天平有条件配备37℃±2℃恒温装置。
3、分析步骤3.1、整体测定法3.2、表面测定法（粗筛法）结果判定：1、结果以酶被有机磷或氨基甲酸酯类农药抑制（为阳性）、未抑制（为阴性）表示。
2、与空白对照卡比较，白色药片不变色或略浅蓝色均为阳性结果。
白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同，为阴性结果。
3、对阳性结果的样品，可用其他分析方法进一步确定具体农药品种和含量。
速测卡法（纸片法）注意事项1、有些蔬菜如生姜、葱、蒜、辣椒和番茄等汁液中含有破坏酶活性或者使蓝色产物褪色的物质，处理这类蔬菜时，不要让其汁液太多释放出来，不要剪得太碎，浸提时间不易过长，必要时可采用整枝蔬菜浸提或采用表面测定法进行测定。
对一些含叶绿素较高的蔬菜，也可以采取整株（体）蔬菜浸提的方法，减少色素的干扰。
2、试纸上的提取液不可太多而溢出试纸，亦不可太少而使反应不完全。
3、最好将每一批样品处理好后一起加样，一面时间过长蒸干。
4、当温度条件低于37℃，酶反应的速度随之放慢，药片加液后放置反应的时间相对延长，延长时间的确定，应以空白对照卡用（体温）手指捏3分钟时可以变蓝，即可往下操作。
注意样品放置的时间应与空白对照卡放置的时间一致才有可比性。
5、空白对照卡不变色的原因：一是药片表面缓冲溶液加的少，预反应后的药片表面不够湿润，二是温度太低。
6、如有条件，将农药速测卡放在10℃以下保存效果会更好，每小包产品开封后最好在三天内用完，如用不完，可放入将有变色硅胶吸潮剂的瓶中密封保存，如发现农药测速卡的红色药片由鲜红橙色变为暗淡的褐红色，说明纸片已吸潮失效。
PR-3便携式农药残毒快速检测仪操作步骤：1、接通电源，右侧开关拨至“开”，打开上盖按“START”键预热；等待倒计时；预热结束，，”TEMP1“屏幕显示一声，“哗”听到时，TEMP、当预热达到设置反应温度2．3、去试纸外模，插入试纸（白片在下端），在白片上分别加1-2滴提取液；4、再次按'“START”键，单片电脑开始“TEMP1”倒计时；5、当听到连续“哗、哗、哗”声，屏幕显示“CLOS”，提示合上前盖，进入“TEMP2”倒计时；6、当听到六声“哗。
哗、哗”音，本次操作结束，打开上盖观察试纸颜色变化；7、试纸显示蓝色为阴性，浅蓝色为弱阳性，白色为阳性；8、测试完毕，向上取下试纸进行下一次的检测。
酶抑制率法（分光光度法）1、试剂1.1、pH8.0缓冲溶液：分别取11.9g无水磷酸氢二钾与3.2g磷酸二氢钾，用1000mL蒸馏水溶解。
1.2、显色剂：分别取160mg二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）和15.6mg碳酸氢钠，用20m了缓冲溶液溶解，4℃冰箱中保存。
1.3、底物：取25.0mg硫代乙酰胆碱，加3.0mL蒸馏水溶解，摇匀后置4℃冰箱中保存备用。
保存期不超过两周。
1.4乙酰胆碱酯酶：根据酶的活性情况，用缓冲溶液溶解，3min的吸光度变化ΔAo值应控制在0.3以上。
摇匀后置4℃冰箱中保存备用，保存期不超过四天。
1.5、可选用由以上试剂制备的试剂盒。
乙酰胆碱酯酶的ΔAo值应控制在0.3以上。
2、仪器2.1、分光光度计或相应测定仪及常量天平。
3、分析步骤3.1、样品处理：选取有代表性的蔬菜样品，冲洗掉表面泥土，剪成1cm左右见方碎片，取样品1g，放入烧杯或提取液瓶中，加入5mL缓冲溶液，振荡1-2min，倒出提取液，静置3~5min，待用。
3.2、对照溶液测试：先于试管中加入2。
5mL缓冲溶液，再加入0.1mL酶液、0.1mL显色剂，摇匀后于37℃放置15min以上（每批样品的控制时间应一致）。
加入0.1mL底物摇匀，此时检液开始显色反应，应立即放入仪器比色池中，记录反应3min的吸光度变化值ΔAo。
3.3、样品溶液测试：先于试管中加入2.5mL样品提取液，其他操作与对照溶液测试相同，记录反应3min的吸光度变化值ΔAt。
结果的表述计算1、检测结果按公式计算：2、抑制率（%）=[（ΔAo-ΔAt）/ΔAo]×1003、式中：ΔAo…对照溶液反应3min吸光度的变化值：4、ΔAt…样品溶液反应3min吸光度的变化值：结果判定1、结果以酶被抑制的程度（抑制率）表示。
当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50%时，表示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药存在，样品为阳性结果。
阴性结果的样品需要重复检验2次以上。