水产动物疾病学课件 第2章 (下)
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水产动物疾病防治方法106页PPT
66、节制使快乐增加并使享受加强。 ——德 谟克利 特 67、今天应做的事没有做，明天再早也 是耽误 了。——裴斯 泰洛齐 68、决定一个人的一生，以及整个命运 的，只 是一瞬 之间。 ——歌 德 69、懒人无法享受休息之乐。——拉布 克 70、浪费时间是一桩大罪过。——卢梭
水产动物疾病在 我们的 后面。
•
7、心急吃不了热汤圆。
•
8、你可以很有个性，但某些时候请收 敛。
•
9、只为成功找方法，不为失败找借口 (蹩脚 的工人 总是说 工具不 好)。
•
10、只要下定决心克服恐惧，便几乎 能克服 任何恐 惧。因 为，请 记住， 除了在 脑海中 ，恐惧 无处藏 身。-- 戴尔． 卡耐基 。
《水产动物免疫学》课件
淋巴样器官
如胸腺、脾脏等，是T、B淋巴细胞定 居的场所。
细胞免疫
CD4+T细胞分化为Th1和Th2，分别 介导体液免疫和细胞免疫；CD8+T细
胞为CTL，可直接杀伤靶细胞。
抗原识别
T细胞通过TCR识别MHC分子提呈的 抗原肽；B细胞通过BCR识别抗原。
体液免疫
B细胞分化为浆细胞，产生特异性抗 体，与抗原结合形成沉淀或复合物， 被吞噬细胞吞噬。
疫苗接种的方法和程序
方法
注射、口服、喷雾等。
程序
根据疫苗种类和预防疾病的不同，制定相应的接种计划和程序。
疫苗接种的效果评估
评估指标
抗体水平、免疫保护率、疾病发病率等。
评估方法
通过实验室检测、现场观察、流行病学调查等方法进行评估。
05 水产动物免疫学在养殖业 中的应用
提高养殖动物的抗病能力
01
利用生物信息学方法，对水产动物免疫相关基因和蛋白质进行 系统分析和比较，挖掘免疫相关基因和蛋白质的功能和作用机
制。
利用先进的显微成像技术，对水产动物免疫细胞进行实时观察 和追踪，深入了解免疫细胞的活化和迁移机制。
水产动物免疫学研究的前沿和热点问题
免疫应答的调控机制
研究水产动物免疫应答的调控机 制，包括信号转导、转录因子和 细胞因子等在免疫应答中的作用 。
安全性和品质。
促进养殖业的可持续发展，保 障水产动物资源的可持续利用 ，为社会提供优质的水产品。
06 水产动物免疫学的研究进 展与展望
免疫学研究的新技术和新方法
基因组学技术 蛋白质组学技术 生物信息学方法 免疫细胞成像技术
利用基因组学技术，研究水产动物的基因结构和功能，深入了 解其免疫机制。
如胸腺、脾脏等，是T、B淋巴细胞定 居的场所。
细胞免疫
CD4+T细胞分化为Th1和Th2，分别 介导体液免疫和细胞免疫；CD8+T细
胞为CTL，可直接杀伤靶细胞。
抗原识别
T细胞通过TCR识别MHC分子提呈的 抗原肽；B细胞通过BCR识别抗原。
体液免疫
B细胞分化为浆细胞，产生特异性抗 体，与抗原结合形成沉淀或复合物， 被吞噬细胞吞噬。
疫苗接种的方法和程序
方法
注射、口服、喷雾等。
程序
根据疫苗种类和预防疾病的不同，制定相应的接种计划和程序。
疫苗接种的效果评估
评估指标
抗体水平、免疫保护率、疾病发病率等。
评估方法
通过实验室检测、现场观察、流行病学调查等方法进行评估。
05 水产动物免疫学在养殖业 中的应用
提高养殖动物的抗病能力
01
利用生物信息学方法，对水产动物免疫相关基因和蛋白质进行 系统分析和比较，挖掘免疫相关基因和蛋白质的功能和作用机
制。
利用先进的显微成像技术，对水产动物免疫细胞进行实时观察 和追踪，深入了解免疫细胞的活化和迁移机制。
水产动物免疫学研究的前沿和热点问题
免疫应答的调控机制
研究水产动物免疫应答的调控机 制，包括信号转导、转录因子和 细胞因子等在免疫应答中的作用 。
安全性和品质。
促进养殖业的可持续发展，保 障水产动物资源的可持续利用 ，为社会提供优质的水产品。
06 水产动物免疫学的研究进 展与展望
免疫学研究的新技术和新方法
基因组学技术 蛋白质组学技术 生物信息学方法 免疫细胞成像技术
利用基因组学技术，研究水产动物的基因结构和功能，深入了 解其免疫机制。
水生动物疾病ppt课件
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1. 水温：
水温与病害发生直接相关：鱼是冷血动物，体温 随外界环境条件的改变而改变，水温的急剧 升降，鱼体不易适应而发生病理变化，影响 抵抗力，从而导致各种疾病的发生。鱼类在 不同的发育阶段，对水温有一定的要求。
1) T水过低：生物体抵抗力下降； 2) T水过高：易发生缺氧； 3) T水的骤变：引起休克、痉挛乃至死亡
虫和水霉。对病变部位及可疑部分必须
进一步用显微镜检查。
.
36
口腔及鳃检查
先用肉眼检查口腔及鳃有无充血、
发炎、粘液增多、鳃丝肿胀、颜色
变成深浅不一、鳃丝腐烂及大型寄
生虫（如中华鱼蚤、锚头鱼蚤）、
胞囊等；然后再在载玻片上放一滴
清水，刮取病灶部分粘液或剪取少
量鳃丝，盖上盖玻片进行镜检。鱼
苗、鱼种即使肉眼看不到异状、也
国外：
1. 在20世纪初已有海水病害研究报告发表； 2. 在20世纪60年代：有大量的海. 水病害研究文献发表； 13
第二节 疾病发生的原因
一、病因的类别 （一）病原的侵害
1. 病原：又称病原体，是能引起疾病 发生的致病微
生物和 寄生虫的统称。
2. 病原的种类
1）致病微生物：包括病毒、细菌、真菌和单细胞藻 类等
宿主非专一性，如刺激隐核虫可以寄生在
数十种海水鱼，小瓜虫可寄生多种淡水鱼。
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寄生宿主的部位，一般有一定的 器官或组织，有专寄消化道，有 专寄胆囊，有的专寄在鳃上，有 专寄在肌肉，有必须在血液如血 液锥体虫。有内寄生物，寄生在 体内组织器官内，外寄生物，寄 生在皮肤和鳃如指环虫。
.
22
第二节 疾病发生的原因
病因
非正常的环境因素
水产动物疾病药物防治基本的知识PPT课件
因果链论
基本点是把与发病有关的各种事物都看作病因，有果必有因。
果1 A、一因多果，因 果2
果3
例喹乙醇不仅可 引起肝脏病还能引起 肾脏病和体色变异
因1 B、多因一果，因2 果
因3
例除喹乙醇外， 亚硝酸盐、硫化氢、 氨氮、饲料霉变酸 败和爱德华氏菌等 均可起肝病
因1 C、因因协同引起一果， +
因2
如水中氨氮含量高的养 果 殖鱼，摄入喹乙醇后肝
应激原与应激反应
1、物理性应激
●应激原：温度、光照、振动、声音等。
●应激反应：惊跳、窜游、转圈、翻转、下沉或上浮、
颤抖、痉挛、昏迷、体色变化、缠绕、争斗、体表出血 等。
●特点：除了机体对物理因子的生理耐受极限外，大多
为急性变化而致应激。消除不良因子，应激反应即可缓 解。急性应激也可致鱼死亡。
病发病率远高于单纯摄 入喹乙醇的鱼。
D、因因相联引起一果，因１＋因２＋因
３······
果。例机体机
械损伤，损伤部位又被腐生性生物寄生，伤口扩大导
致病原菌感染而引起腐皮病。
E、因果相联引起一果，因1 果1 因2 果2。 如喹乙醇引起肝胆病，拖网运输振动刺激又引起应 激性出血病。
启示：
※引起疾病的病因是复杂的 ※了解病症，探索病因是疾病防治的基础
病害防治咨询; 渔药生产系统：开发提供渔药，养殖咨询，病害
防治技术服务； 渔药经销系统：销售渔药，技术服务。
水产动物疾病 从病因分析可分为两大类
病原性疾病（150种 ）
水产动物疾病 215种
非病原性疾病(65种）
病原性疾病 （150种 ）
微生物性疾病
（传染性疾病） （80种）
病毒病（20种左右） 细菌病（50种左右） 真菌病（10种左右）
《水产动物疾病防治》PPT课件
现不同的颜色,如红、黑、灰白色等,透明度也会随之
大大降低.
水中的溶解氧、硫化氢、pH值、氯化物、硫
化物等与鱼病流行的关系极为密切.
了解周围的环境中是否存在污染源或流行病的
传播源,鱼池周围的环境卫生等.
<三> 了解饲养管理情况 对投饵、施肥、放养密度、放养品
种和规格、各种生产操作记录以及历 年发病情况等都应作详细了解. 另外,对当地气候变化情况,各地敌 害的发生情况也应一并进行了解.
二、病鱼的检查
<一>鱼体的肉眼检查
一些较大的寄生虫和真菌如蠕虫、 甲壳动物、软体动物幼虫、体型较大 的原生动物、水霉等,用肉眼即可识别 出来.
一般病毒性和细菌性鱼病,通常表现 出充血、发炎、腐烂、脓肿、蛀鳍、 竖鳞等.
寄生虫引起的鱼病,常表现出粘液过
1 、体表
将病鱼置白搪瓷盘中,按顺序从嘴、 头部、鳃部、体表、鳍条仔细观察.
4、使用时注意原则
1>必须有足够的剂量和疗程,首剂常用加倍量,使 血中磺胺药迅速达到有效抑菌浓度.
2>内服时,应给予等量碳酸氢钠,使尿液呈碱性, 避免在肾脏内出现磺胺结晶引起肾结石的发生.
5、常用的磺胺药
1>磺胺嘧啶<SD>
用于治疗全身性感染,鱼病防治上用以治疗赤皮 病、肠炎病,鳗鱼弧菌病等.
2．呋喃西林
本品难溶于水,能耐热,对光敏感,容易分解,应遮光 ,密封保存.内服毒性较大,因此主要是外用,治疗细 菌性皮肤病.
3．呋喃那斯
抗菌作用强,对鱼类病原菌如弧菌和产气单胞菌 的抗菌作用比呋喃唑酮或四环素强10-30倍.其用 法为：
1>口服—每100kg鱼每天用药2-4g混于饵料中 投喂,连喂3-5日；
《水产动物病原学》PPT课件
4. 免疫病理作用：抗病毒免疫所致的变态反应和炎症反应 是主要的免疫病理反应。
第一节 病原病毒
（三）病毒的感染类型 隐性病毒感染：表示感染组织未受损害，病毒在到达靶细胞前，感 染已被控制，或轻微组织损伤不影响正常功能。 显性感染：有急性感染和持续性感染，后者包括慢性感染、潜伏感 染和慢发病毒感染。 1．急性感染：一般潜伏期短，发病急，病程数日至数周。恢复后机
第一节 病原病毒
（二）病毒的致病机制 病毒感染细胞： 1．顿挫感染：亦称流产型感染，病毒进入非容纳细胞，由
于该类细胞缺乏病毒复制所需酶或能量等必要条件，致使 病毒不能合成自身成分，或虽合成病毒核酸和蛋白质，但 不能装配成完整的病毒颗粒。 2．溶细胞感染：溶细胞感染指病毒感染容纳细胞后，细胞 提供病毒生物合成的酶、能量等必要条件，支持病毒复制， 从而以下列方式损伤细胞功能：①阻止细胞大分子合成； ②改变细胞膜的结构；③形成包涵体；④产生降解性酶或 毒性蛋白。
第一节 病原病毒
3．非溶细胞感染：被感染的细胞多为半容纳细胞。该类细 胞缺乏足够的物质支持病毒完成复制周期，仅能选择性表 达某些病毒基因，不能产生完整的病毒颗粒，出现细胞转 化或潜伏感染。有些病毒虽能引起持续性、生产性感染， 产生完整的子代病毒，但由于通过出芽或胞吐方式释放病 毒，不引起细胞的溶解，表现为慢性病毒感染。
第一节 病原病毒
二、病毒的致病机理与病毒感染
（一）病毒的传播途径 无包膜病毒：粪—口途径 有包膜病毒：主要通过飞沫、血液、唾液、粘液等传播 病毒的传播方式： • 水平传播：指病毒在群体的个体之间的传播方式。通常是
通过口腔、消化道或皮肤粘膜等途径进入机体。 • 垂直传播：指通过繁殖、直接由亲代传给子代的方式。
• 鲤春病毒血症病毒（SVCV）：二类传染病 • 病毒性出血性败血病病毒（VHSV）：二类传染病 • 传染性造血器官坏死病毒（IHNV）：三类传染病
第一节 病原病毒
（三）病毒的感染类型 隐性病毒感染：表示感染组织未受损害，病毒在到达靶细胞前，感 染已被控制，或轻微组织损伤不影响正常功能。 显性感染：有急性感染和持续性感染，后者包括慢性感染、潜伏感 染和慢发病毒感染。 1．急性感染：一般潜伏期短，发病急，病程数日至数周。恢复后机
第一节 病原病毒
（二）病毒的致病机制 病毒感染细胞： 1．顿挫感染：亦称流产型感染，病毒进入非容纳细胞，由
于该类细胞缺乏病毒复制所需酶或能量等必要条件，致使 病毒不能合成自身成分，或虽合成病毒核酸和蛋白质，但 不能装配成完整的病毒颗粒。 2．溶细胞感染：溶细胞感染指病毒感染容纳细胞后，细胞 提供病毒生物合成的酶、能量等必要条件，支持病毒复制， 从而以下列方式损伤细胞功能：①阻止细胞大分子合成； ②改变细胞膜的结构；③形成包涵体；④产生降解性酶或 毒性蛋白。
第一节 病原病毒
3．非溶细胞感染：被感染的细胞多为半容纳细胞。该类细 胞缺乏足够的物质支持病毒完成复制周期，仅能选择性表 达某些病毒基因，不能产生完整的病毒颗粒，出现细胞转 化或潜伏感染。有些病毒虽能引起持续性、生产性感染， 产生完整的子代病毒，但由于通过出芽或胞吐方式释放病 毒，不引起细胞的溶解，表现为慢性病毒感染。
第一节 病原病毒
二、病毒的致病机理与病毒感染
（一）病毒的传播途径 无包膜病毒：粪—口途径 有包膜病毒：主要通过飞沫、血液、唾液、粘液等传播 病毒的传播方式： • 水平传播：指病毒在群体的个体之间的传播方式。通常是
通过口腔、消化道或皮肤粘膜等途径进入机体。 • 垂直传播：指通过繁殖、直接由亲代传给子代的方式。
• 鲤春病毒血症病毒（SVCV）：二类传染病 • 病毒性出血性败血病病毒（VHSV）：二类传染病 • 传染性造血器官坏死病毒（IHNV）：三类传染病
水产动物疾病学-PPT课件
2）水生动物环境变化响应的分子基础 （生态学） 研究水环境变化时（如温度、盐度、 溶氧、和化学品污染等），水生动物对环 境变化进行响应时，水生动物在形态学， 生理生化和分子水平相应改变。通过对水 生动物免疫和生殖健康的影响，以此预测 环境变化给人类健康带来的影响。
主持和承担的科研项目（1）
1主持项目： (1) 主持 国家自然科学基金项目 ( 30770299)， 尺寸控制基因调控序列在鲤科鱼类中的变异及系统演化 (2) 主持国家863重大专项(2019AA603013)中子课题，项目名 称：“锯缘青蟹低温生物学效应”专题研究” (3) 主持河南省科技攻关项目(0624030022)， 超声波和高渗溶液对草鱼免疫影响及疫苗导入复合技术研 究， (4) 主持中国博士后科学基金(2019037684)， 鲤科鱼类个体尺寸主调控基因确定及进化机制研究 (5) 主持河南省重点科技攻关计划（072102130027）, 水环境中痕量化学品对鱼类免疫过程的干预及疾病预警关 键技术研究 (6) 主持河南省高等学校青年骨干教师资助计划 水环境中痕量化学品对鱼类生殖过程的干预及生殖退化机 制研究 (7) 主持河南师范大学网络课程项目，水产动物疾病学
1.2水产动物疾病特点 ①水产动物发病具有群居性；②传染媒介多，传 播途径广；③水是最终传染媒介；④独特的诊断 方式；⑤发病具有选择性；⑥防治药物的特殊性： 合适的给药浓度，合适的给药方式，水体的理化 生因子对药物有一定的影响。 1.3水产动物疾病学
研究水产经济动物疾病的发病原因、病理机制、 流行规律以及诊断、预防和治疗方法的一门科学， 其理论性和实践性都很强。
锯缘青蟹低温生物学效应专题研究主持河南省科技攻关项目0624030022超声波和高渗溶液对草鱼免疫影响及疫苗导入复合技术研主持中国博士后科学基金2005037684鲤科鱼类个体尺寸主调控基因确定及进化机制研究主持河南省重点科技攻关计划072102130027水环境中痕量化学品对鱼类免疫过程的干预及疾病预警关键技术研究主持河南省高等学校青年骨干教师资助计划水环境中痕量化学品对鱼类生殖过程的干预及生殖退化机制研究主持河南师范大学网络课程项目水产动物疾病学主持和承担的科研项目123232承担项目
水产动物疾病学由微生物引起的疾病第二节 水产动物细菌性疾病
[诊断]
o 与车轮虫病区别—镜检
• 大黄2.5-3.7 mg/kg； • 五倍子2-4 mg/kg;
白头白嘴病
(四)赤皮病
（又名出血性腐败病、赤皮瘟、擦皮瘟等）
［病原］ ▪ 荧光假单胞菌。短杆状、G-
［症状］ ▪体表出血发炎 ▪鳞片脱落（体两侧及腹部尤为明显） ▪蛀鳍； ▪病灶处常有水霉菌寄生； ▪本病病原菌不能侵入健康鱼的皮肤。
鳗红点病
（十三）鳗爱德华氏菌病（又称肝肾病）
[病原] 迟缓、浙江、福建爱德华氏菌。
[症状] 肝脏型：
肝区肿大，充血； 肌肉坏死、穿孔； 肝脏肿大、溃疡； 肾脏型： 肛门区红肿; 肌肉坏死； 脾脏、肾脏肿胀、溃疡； 肝肾混合型： 同时呈现上述两种症状
爱德华氏菌病—鳗--肝脏型
爱德华氏菌病—鳗--肾脏型
［病原］
球病等）
*水型点状假单胞菌。短杆状、G-
［症状］
*竖鳞，鳞囊积有渗出液；轻压鳞片脱落；
*突眼；
*腹胀，腹水；
［诊断］
*与寄生在鳞囊内漂游鱼波豆虫区别——镜检
竖鳞病1
竖鳞病2
竖鳞病3
［流行］ 底层鱼为主： 鲤、鲫、金鱼；乌鳢、月鳢成鱼和亲鱼； 发病季节 鲤、鲫--春季，17-22℃，非流水鱼池(北方) 乌鳢、月鳢--夏季，25-34℃
鲤白云病—灰白色粘液
[诊断方法] 1．依症状和流行情况来初诊；
依镜检结果进一步诊断； 依病原分离与鉴定来确诊。 2．注意与鲤斜管虫病、车轮虫病的区 别—镜检。
［防治］ 1.高锰酸钾10-20mg/kg，15-30min； 食盐1-4%，5-10min鱼种。 2.内外结合： 福尔马林5mg/kg或新洁尔灭3mg/kg遍洒； 同时投喂抗生素（0.5g/kg饲料）或磺胺药物 （1g/kg饲料）,6d。 “鱼康” 1.5mg/kg遍洒，3d。 同时投喂 “鱼用杀菌灵”50g /100kg饮料6d。
水产动物病害学课件大纲
04
水产动物病害诊断与防 治技术
诊断技术
观察症状：观察水产动物的行为、外观、颜色等变化 实验室检测：进行病原体检测、生化检测等 影像学检查：使用X光、超声等设备进行诊断 病理学检查：对病灶进行切片、染色等检查 基因检测：利用基因技术进行病原体鉴定 环境监测：检测水质、水温、pH值等环境因素
防治技术
病原：真菌
传播途径：水、饲料、工具等
添加标题
添加标题
添加标题
添加标题
症状：皮肤溃烂、鳞片脱落、内脏 病变等
防治措施：消毒、隔离、药物治疗 等
寄生虫病
寄生虫种类：包括原生动物、 蠕虫、甲壳类等
感染途径：通过水体、食物、 接触等方式传播
症状：包括食欲不振、生长缓 慢、体色异常等
防治方法：包括药物治疗、改 善水质、加强管理等
添加项标题
近年来，水产动物病害学研究开始关注生物安全、食品安全和公共卫生等方面的问题
研究意义与目的
研究水产动物病害学的目的 是为了保障水产养殖业的健 康发展，提高水产养殖效益
水产动物病害学是研究水产 动物疾病发生、发展、诊断 和防治的科学
研究水产动物病害学有助于 提高水产养殖技术水平，降
低养殖风险
的发生
营养因素
营养不良：缺乏某种营养素，导致 免疫力下降
营养不均衡：营养素比例失调，影 响生理功能
添加标题
添加标题
添加标题
添加标题
营养过剩：摄入过多营养素，导致 代谢紊乱
营养污染：摄入含有有害物质的营 养素，导致中毒
应激因素
环境因素：水温、水质、光照等 生物因素：病原体、寄生虫等 营养因素：饲料质量、营养成分等 管理因素：养殖密度、养殖方式等
水产动物病害的绿色防控技术发展趋势
水产动物疾病学实验幻灯片
• ２：疾病诊断是确定引起疾病发生的主 要原因，疾病过程与发病机理。
疾病诊断
• ３：疾病诊断方法 • 〔１〕根据病症诊断 • 〔２〕根据病原体诊断 • 〔３〕综合诊断
作业一
• １疾病检查的一般程序？ • ２疾病诊断的方法？正确诊断的意义？
实验二：病毒疫苗土法制备
一、实验目的
1.了解土法疫苗免疫的原理，掌握其制备方法和注射 方法〔或了解细菌性灭活疫苗制备的根本过程〕。
• 2.患典型出血病的濒死或刚死不久的草鱼。
• 四、实验药品
• 1.甲醛、生理盐水、70%的酒精；
• 2.青霉素、链霉素、生理盐水、70%的酒精、 50%缓冲甘油、PBS液、Earle培养液。
五、实验内容
• 1.病毒材料收集与保存 • 〔1〕无菌操作收集，病毒不灭活，材料标本不能在太
阳下曝晒，要在阴暗低温处； • 〔2〕用发病早期的鱼〔典型出血病〕，不用已经死亡
2.掌握草鱼出血性病毒疫苗制备〔或组织浆灭活疫苗 制备〕的根本过程。
二、仪器设备
1.解剖工具〔剪刀、镊子〕、台秤〔天平〕、组织打 浆机或匀浆机〔或研钵〕、水浴锅、温度计、注射 器、量筒、三角锥瓶、漏斗、水壶；
2.剪刀、天平、蔡氏过滤器、塑料微型滤器、冰箱、 液氮罐、离心机。
• 三、实验材料
• 1.患草鱼三大病〔赤皮、肠炎、烂鳃病〕的草 鱼，最好是三大病并发的濒死或刚死不久的草 鱼；
的鱼，用水冲洗体表，再用70%的酒精消毒体表，然 后才取出肌肉、内脏，随即放入50%缓冲甘油内保存， 写好标签〔地点、寄主、日期〕，野外收集最好用冰 壶带回，保存在-20℃或5℃冰箱内。
2.活苗的制备
• 无菌操作取出病灶〔肌肉、内脏组织〕， 称重后剪碎，加10倍无菌生理盐水，匀 浆，3000～3500转/分低温离心30分钟， 取上清液，加青霉素1000IU/mL，链霉 素1000μg/mL，混匀，再在4℃下过夜 除菌后即为病毒悬液。
疾病诊断
• ３：疾病诊断方法 • 〔１〕根据病症诊断 • 〔２〕根据病原体诊断 • 〔３〕综合诊断
作业一
• １疾病检查的一般程序？ • ２疾病诊断的方法？正确诊断的意义？
实验二：病毒疫苗土法制备
一、实验目的
1.了解土法疫苗免疫的原理，掌握其制备方法和注射 方法〔或了解细菌性灭活疫苗制备的根本过程〕。
• 2.患典型出血病的濒死或刚死不久的草鱼。
• 四、实验药品
• 1.甲醛、生理盐水、70%的酒精；
• 2.青霉素、链霉素、生理盐水、70%的酒精、 50%缓冲甘油、PBS液、Earle培养液。
五、实验内容
• 1.病毒材料收集与保存 • 〔1〕无菌操作收集，病毒不灭活，材料标本不能在太
阳下曝晒，要在阴暗低温处； • 〔2〕用发病早期的鱼〔典型出血病〕，不用已经死亡
2.掌握草鱼出血性病毒疫苗制备〔或组织浆灭活疫苗 制备〕的根本过程。
二、仪器设备
1.解剖工具〔剪刀、镊子〕、台秤〔天平〕、组织打 浆机或匀浆机〔或研钵〕、水浴锅、温度计、注射 器、量筒、三角锥瓶、漏斗、水壶；
2.剪刀、天平、蔡氏过滤器、塑料微型滤器、冰箱、 液氮罐、离心机。
• 三、实验材料
• 1.患草鱼三大病〔赤皮、肠炎、烂鳃病〕的草 鱼，最好是三大病并发的濒死或刚死不久的草 鱼；
的鱼，用水冲洗体表，再用70%的酒精消毒体表，然 后才取出肌肉、内脏，随即放入50%缓冲甘油内保存， 写好标签〔地点、寄主、日期〕，野外收集最好用冰 壶带回，保存在-20℃或5℃冰箱内。
2.活苗的制备
• 无菌操作取出病灶〔肌肉、内脏组织〕， 称重后剪碎，加10倍无菌生理盐水，匀 浆，3000～3500转/分低温离心30分钟， 取上清液，加青霉素1000IU/mL，链霉 素1000μg/mL，混匀，再在4℃下过夜 除菌后即为病毒悬液。
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2.可通过降低水温（10℃以下）或提高水温 (15℃以上)控制病情发展。
3.刚开始发病时，可用伏碘1.64~1.91g/kg鱼体 重拌食投喂，连喂15d,可控制病情发展。
传染性造血组织坏死病
健康的虹鳟 传染性胰脏坏死病
患病的虹鳟鱼苗。示腹部膨胀， 眼突出，体表发黑
IPNV感染黄尾鰤腹部 膨胀
IPNV感染黄尾鰤肝 脏发红
（二）流行情况 CCVD在自然条件下，仅感染斑点叉尾鮰，且
主要对小于1龄，体长小于的鱼苗、鱼种产生 危害，但成鱼也可发生隐性感染，成为带毒者。
CCVD的流行水温是20~30℃，水温低于15℃， CCVD几乎不会发生。
（三）主要症状 病鱼鳍条基部、腹部和尾柄基部充血、出血， 腹部充出血更为明显；腹部膨大，眼球单侧或双 侧性外突；部分病鱼可见肛门红肿外突 ；腹腔内 有大量腹水，胃肠道充满淡黄色的粘液； 肝、肾、 骨骼肌、胰腺、神经细胞等表现为变性、坏死。
感染VHSV的鳟。 示肌肉出血
感染VHSV的狗鱼。 示肌肉出血
感染VHSV的虹鳟 精巢充血
感染VHSV的大 菱鲆
慢性感染VHSV的 虹鳟眼突出
感染VHSV的白鱼 眼突出
VHSV切片的电 镜照片。示病 毒正在从细胞 膜出芽
VHSV负染电镜照片
（四）诊断方法 根据流行情况、症状及病理变化进行初步
病现象消失。 流行地区：本病上世纪80年代传入我国东北地
区。
（三）主要症状
发病初期，病鱼呈昏睡状，摇晃摆动状游泳， 继而突然狂游，旋即死亡。病鱼体色发黑，眼球 突出，腹部膨大，有时体表充血，肛门处常拖有1 条较粗长的粘液便。刚脱膜的鱼苗其卵黄囊肿胀 并有出血斑。传染性造血组织坏死病（IHN）
（四）诊断（同前） （五）防治方法（同前）四、病毒性出血败血症
（四）诊断方法 1.细胞培养，观察细胞病变(CPE)。 2.确诊可用中和试验。 3.快速确诊可用间接荧光抗体试验和酶联免疫
吸附试验(ELISA)幻灯片 55。
上：患鲤春病的鲤鱼 中：病鲤的肌肉出血 下：病鲤的内脏出血
SVC的典型症状是鳔上布满血斑
SCV电镜照片 健康鲤(右)和病鲤(左) 主要症状
E.加入底物，测定底物的降解量＝ 抗体量。诊断方式
酶染色法
ELISA 显色随抗体 浓度降低逐渐变浅
诊断方式
免疫荧光技术
诊断方式
血凝试验
阴性样品
阳性样品 5、6排是10 倍稀释 7、8排是2倍 稀释诊断方式
空 斑 试 验
空 斑 放 大 照 片
A:IPNV接种RTG-2细胞后出现的空斑；B:IHNV接种RTG-2细 胞后出现的空斑；C:VHS接种RTG-2细胞后出现的空斑； D:CCV接种RTG-2细胞后出现的空斑 RTG-2 —虹鳟性腺诊
ELISA试验
免疫荧光试验
（三）、主要症状
三、传染性造血组织坏死病（IHN）**
（一）病原体 IHNV，弹状病毒， 单链 RNA 120~300×60~100μ 。
（二）流行情况 危害种类：主要危害虹鳟鱼苗鱼种，大多呈急
性暴发，死亡率高达50%~100%。 流行季节：发病水温8~10℃，15℃以上自然发
（三）主要症状
主要症状是出血。根据不同部位的出血程度可分 为：
1、“红鳍红鰓盖”型（ 7~10cm以上鱼种）出血
病
2、“红肌肉”型（7~10cm鱼种）幻灯片 24 3、“肠炎”型（大小均可见）幻灯片 23
根据病程可分为： 1、急性型 常见于草鱼单养池，10d可达发病 高峰，2~3周几乎死光。 2、慢性型 8月下旬的稀养池，每天死鱼不多， 但持续到流行季节结束。幻灯片 23
日光：直射日光下可迅速破坏病毒结构，光谱 中的紫外线杀病毒的力量最强，大剂量照射可杀灭 病毒。中小剂量可使病毒致弱，用于疫苗制造。
化学药剂：最有效的杀灭剂为碱类，如NaOH、 KOH、Ca(OH)2和 NaCO3等，70%酒精、05%石炭酸和 重金属盐类如汞化物，均能杀死病毒。抗菌素对病 毒无影响，但也有抗菌素能抑制病毒的复制。如放 线菌素D。
断方式
合胞体观察
一种杆形病毒在CAR细胞 左和EPC细胞上右形成的 合胞体
CAR—鲫囊胚 EPC—鲤上皮乳头瘤
鲤呼肠孤病毒在EPC细胞 上形成的合胞体
诊断方式
包涵体观察
病毒在鱼红细胞中形 成的细胞质包涵体
病毒在虾胰腺细胞中 形成的细胞核包涵体
诊断方式
循环4～25 DNA至少增加105倍
未扩增的DNA 变性并与引物退火 引物延伸 变性并与引物退火 引物延伸 变性并与引物退火
害最严重。 流行季节：流行于冬末春初，14℃以下容易暴发。 流行地区：流行于欧洲。
（三）主要症状
本病可分为3个时期： 1、急性期 流行早期，死亡率高。患病鱼常 以体色变暗、单眼球突出、贫血及眼和胸鳍基部出 血为特征。 2、慢性期 多发于急性后期，死亡率适中。 双眼球突出、重度贫血、体色显著变暗。 3、神经期 死亡率低，行为改变显著，快速 螺旋式游动。 肉眼可见骨骼肌内和整个内脏组织中，有许多 点状血液外渗。
草鱼出血病
鳍条充血（三）主要症状
（三）主要症状
示腹部充血 示肌肉充血 示内脏充血
透光检查内脏严重出血
腹部鳍条出血
青鱼内脏、肌肉出血
（四）诊断
1.根据症状及流行情况进行初步诊断 2.根据病理变化进一步诊断幻灯片 27 3.免疫学诊断 （五）防治方法
1.预防 清除池底过多淤泥，并用200mg/L生石灰消 毒。腹腔注射草鱼出血病灭活疫苗。
二、传染性胰脏坏死病（IPN）*
（一）病原体 传染性胰脏坏死病病（IPNV） 双RNA病毒，正20面体，无囊膜，大小50×75nm， 最适增殖温度为15~20℃ 。温度慢慢升高，病毒在 30℃下生长。
（二）流行情况 危害种类：此病在我国主要危害14~70日龄的
虹鳟鱼苗和鱼种，发病后死亡率为80%~100%。 流行季节：发病水温10~15℃，10℃以下15℃
第二章(下) 水生动物病原病因学
第一节 病毒的致病机理和感染 第二节 诊断方式 第三节 主要病毒性疾病
鱼类传染性疾病的重点:
1.了解危害大、流行广的传染性疾病的流 行情况
2.掌握传染性疾病的初步诊断和防治方法 3.了解水产动物病原的检测技术 4.进一步理解水产动物疾病防重于治的重 要意义 难点是基本病理过程相似，但病原（因） 不同的疾病的初步诊断。
SVCV接种到 FHM(鲤科鱼类细 胞系)细胞后出现 CPE
在FHM(鲤科鱼类 细胞系)细胞中形 成的空斑
SVCV感染24h后 的免疫荧光检测 结果
（五）防治方法 1.严格执行检疫，实施健康养殖 2.免疫预防
六、鲤痘疮病（Carp pox）
（一）病原体 病原体为鲤疱疹病毒 (Herpesvirus cyprini)，20面体，双链DNA,有囊膜。
诊断。 用RTG-2细胞株分离病毒，观察CPE，可作
进一步诊断。 用免疫学的方法诊断。
（五）防治方法 1、发眼卵用伏碘（PVP-I）浸洗15分钟，
浓度为有效碘50mg/mL。 2、改养对VHS抗病力强的大鳞大马哈鱼、
银大马哈鱼和虹鳟与银大马哈鱼杂交的三倍体 杂交种。
五、鲤春病毒血症（SVC）**
（一）病原体 鲤春病毒血症病毒(Spring viraemia of virus，SVCV)，是一种单链RNA病毒，
（四）诊断 V的分离、鉴定可对本病作出确切的诊断。 2.对分离病毒采用血清中和实验、免疫荧光抗
传染性造血组织坏死病（IHN）
粘液便
卵
黄
囊
肿
胀
腹大充血
充 血
体黑眼突
IHNV感染后鱼肾造血组织坏死，肾 小管降解，血细胞降解 主要症状
四、病毒性出血败血症（VHS）**
（一）病原体 病毒性出血败血症病（VHSV） ， 属弹状病毒科，含单链RNA。
（二）流行情况 危害种类：本病主要危害虹鳟，全长5cm~300g受
（四）诊断 组织切片可见包涵体和病毒粒子。
（五）防治方法 注水、转池或转移网箱。碘液浸泡。六、对虾
病毒病
鲤痘疮病
鲤痘疮病
痘疮切片的电 镜照片。示胞 质中大量有囊 膜的病毒颗粒
局部放大
七、斑点叉尾鮰病毒病（CCVD）*
（一）病原体 疱疹病毒 ，病毒颗粒有囊膜， 呈20面体，颗粒直径175~200nm。
常用50%甘油生理盐水保存含病毒的病料。
第二节 诊断方式
一、酶联免疫吸附（ELISA) 二、酶染色法幻灯片 5 三、免疫荧光技术幻灯片 8 四、血清学试验幻灯片 9 五、空斑试验幻灯片 9 六、合胞体观察幻灯片 10 七、多聚酶链式反应(PCR)幻灯片 14
ELISA测定原理
A.将抗原吸附于固相载体表面， 洗涤除去未吸附的抗原；
引物延伸
PCR反应过程原理
第三节 主要病毒性疾病
一、草鱼出血病（Hemorrhage disease
of grass carp） （一）病原体 水生呼肠孤病毒。幻灯片 17 （二）流行情况 危害种类：体长2.5~15cm的草鱼种。 流行季节：每年6〜9，8月份为流行高峰。水
温在27℃以上最为流行，25℃以下病情随之消失。 流行地区：几乎全国各地，北方较少。（三）
以上发病较少。 流行地区：东北三省、陕西、山东、甘肃以及
台湾均曾发现。
（三）主要症状
病鱼游泳失衡，常做上下回转运动。体色发 黑，眼球突出，腹部膨大充血，肛门处常拖一条 线形粘液便，幽门处和胰脏有点状出血，肝、脾、 肾、心脏贫血苍白。
（四）诊断（同前）幻灯片 34 （五）防治方法
1.发眼卵用伏碘（PVP-I）浸洗15min，浓度 为有效碘50mg/mL。
养殖期内，每半个月全池泼洒 二氯异氰尿酸 钠(优氯净)或三氯异氰尿酸(强氯精)0.3~200mg/L或 漂白粉精0.1‾0.2mg/升。幻灯片 25
3.刚开始发病时，可用伏碘1.64~1.91g/kg鱼体 重拌食投喂，连喂15d,可控制病情发展。
传染性造血组织坏死病
健康的虹鳟 传染性胰脏坏死病
患病的虹鳟鱼苗。示腹部膨胀， 眼突出，体表发黑
IPNV感染黄尾鰤腹部 膨胀
IPNV感染黄尾鰤肝 脏发红
（二）流行情况 CCVD在自然条件下，仅感染斑点叉尾鮰，且
主要对小于1龄，体长小于的鱼苗、鱼种产生 危害，但成鱼也可发生隐性感染，成为带毒者。
CCVD的流行水温是20~30℃，水温低于15℃， CCVD几乎不会发生。
（三）主要症状 病鱼鳍条基部、腹部和尾柄基部充血、出血， 腹部充出血更为明显；腹部膨大，眼球单侧或双 侧性外突；部分病鱼可见肛门红肿外突 ；腹腔内 有大量腹水，胃肠道充满淡黄色的粘液； 肝、肾、 骨骼肌、胰腺、神经细胞等表现为变性、坏死。
感染VHSV的鳟。 示肌肉出血
感染VHSV的狗鱼。 示肌肉出血
感染VHSV的虹鳟 精巢充血
感染VHSV的大 菱鲆
慢性感染VHSV的 虹鳟眼突出
感染VHSV的白鱼 眼突出
VHSV切片的电 镜照片。示病 毒正在从细胞 膜出芽
VHSV负染电镜照片
（四）诊断方法 根据流行情况、症状及病理变化进行初步
病现象消失。 流行地区：本病上世纪80年代传入我国东北地
区。
（三）主要症状
发病初期，病鱼呈昏睡状，摇晃摆动状游泳， 继而突然狂游，旋即死亡。病鱼体色发黑，眼球 突出，腹部膨大，有时体表充血，肛门处常拖有1 条较粗长的粘液便。刚脱膜的鱼苗其卵黄囊肿胀 并有出血斑。传染性造血组织坏死病（IHN）
（四）诊断（同前） （五）防治方法（同前）四、病毒性出血败血症
（四）诊断方法 1.细胞培养，观察细胞病变(CPE)。 2.确诊可用中和试验。 3.快速确诊可用间接荧光抗体试验和酶联免疫
吸附试验(ELISA)幻灯片 55。
上：患鲤春病的鲤鱼 中：病鲤的肌肉出血 下：病鲤的内脏出血
SVC的典型症状是鳔上布满血斑
SCV电镜照片 健康鲤(右)和病鲤(左) 主要症状
E.加入底物，测定底物的降解量＝ 抗体量。诊断方式
酶染色法
ELISA 显色随抗体 浓度降低逐渐变浅
诊断方式
免疫荧光技术
诊断方式
血凝试验
阴性样品
阳性样品 5、6排是10 倍稀释 7、8排是2倍 稀释诊断方式
空 斑 试 验
空 斑 放 大 照 片
A:IPNV接种RTG-2细胞后出现的空斑；B:IHNV接种RTG-2细 胞后出现的空斑；C:VHS接种RTG-2细胞后出现的空斑； D:CCV接种RTG-2细胞后出现的空斑 RTG-2 —虹鳟性腺诊
ELISA试验
免疫荧光试验
（三）、主要症状
三、传染性造血组织坏死病（IHN）**
（一）病原体 IHNV，弹状病毒， 单链 RNA 120~300×60~100μ 。
（二）流行情况 危害种类：主要危害虹鳟鱼苗鱼种，大多呈急
性暴发，死亡率高达50%~100%。 流行季节：发病水温8~10℃，15℃以上自然发
（三）主要症状
主要症状是出血。根据不同部位的出血程度可分 为：
1、“红鳍红鰓盖”型（ 7~10cm以上鱼种）出血
病
2、“红肌肉”型（7~10cm鱼种）幻灯片 24 3、“肠炎”型（大小均可见）幻灯片 23
根据病程可分为： 1、急性型 常见于草鱼单养池，10d可达发病 高峰，2~3周几乎死光。 2、慢性型 8月下旬的稀养池，每天死鱼不多， 但持续到流行季节结束。幻灯片 23
日光：直射日光下可迅速破坏病毒结构，光谱 中的紫外线杀病毒的力量最强，大剂量照射可杀灭 病毒。中小剂量可使病毒致弱，用于疫苗制造。
化学药剂：最有效的杀灭剂为碱类，如NaOH、 KOH、Ca(OH)2和 NaCO3等，70%酒精、05%石炭酸和 重金属盐类如汞化物，均能杀死病毒。抗菌素对病 毒无影响，但也有抗菌素能抑制病毒的复制。如放 线菌素D。
断方式
合胞体观察
一种杆形病毒在CAR细胞 左和EPC细胞上右形成的 合胞体
CAR—鲫囊胚 EPC—鲤上皮乳头瘤
鲤呼肠孤病毒在EPC细胞 上形成的合胞体
诊断方式
包涵体观察
病毒在鱼红细胞中形 成的细胞质包涵体
病毒在虾胰腺细胞中 形成的细胞核包涵体
诊断方式
循环4～25 DNA至少增加105倍
未扩增的DNA 变性并与引物退火 引物延伸 变性并与引物退火 引物延伸 变性并与引物退火
害最严重。 流行季节：流行于冬末春初，14℃以下容易暴发。 流行地区：流行于欧洲。
（三）主要症状
本病可分为3个时期： 1、急性期 流行早期，死亡率高。患病鱼常 以体色变暗、单眼球突出、贫血及眼和胸鳍基部出 血为特征。 2、慢性期 多发于急性后期，死亡率适中。 双眼球突出、重度贫血、体色显著变暗。 3、神经期 死亡率低，行为改变显著，快速 螺旋式游动。 肉眼可见骨骼肌内和整个内脏组织中，有许多 点状血液外渗。
草鱼出血病
鳍条充血（三）主要症状
（三）主要症状
示腹部充血 示肌肉充血 示内脏充血
透光检查内脏严重出血
腹部鳍条出血
青鱼内脏、肌肉出血
（四）诊断
1.根据症状及流行情况进行初步诊断 2.根据病理变化进一步诊断幻灯片 27 3.免疫学诊断 （五）防治方法
1.预防 清除池底过多淤泥，并用200mg/L生石灰消 毒。腹腔注射草鱼出血病灭活疫苗。
二、传染性胰脏坏死病（IPN）*
（一）病原体 传染性胰脏坏死病病（IPNV） 双RNA病毒，正20面体，无囊膜，大小50×75nm， 最适增殖温度为15~20℃ 。温度慢慢升高，病毒在 30℃下生长。
（二）流行情况 危害种类：此病在我国主要危害14~70日龄的
虹鳟鱼苗和鱼种，发病后死亡率为80%~100%。 流行季节：发病水温10~15℃，10℃以下15℃
第二章(下) 水生动物病原病因学
第一节 病毒的致病机理和感染 第二节 诊断方式 第三节 主要病毒性疾病
鱼类传染性疾病的重点:
1.了解危害大、流行广的传染性疾病的流 行情况
2.掌握传染性疾病的初步诊断和防治方法 3.了解水产动物病原的检测技术 4.进一步理解水产动物疾病防重于治的重 要意义 难点是基本病理过程相似，但病原（因） 不同的疾病的初步诊断。
SVCV接种到 FHM(鲤科鱼类细 胞系)细胞后出现 CPE
在FHM(鲤科鱼类 细胞系)细胞中形 成的空斑
SVCV感染24h后 的免疫荧光检测 结果
（五）防治方法 1.严格执行检疫，实施健康养殖 2.免疫预防
六、鲤痘疮病（Carp pox）
（一）病原体 病原体为鲤疱疹病毒 (Herpesvirus cyprini)，20面体，双链DNA,有囊膜。
诊断。 用RTG-2细胞株分离病毒，观察CPE，可作
进一步诊断。 用免疫学的方法诊断。
（五）防治方法 1、发眼卵用伏碘（PVP-I）浸洗15分钟，
浓度为有效碘50mg/mL。 2、改养对VHS抗病力强的大鳞大马哈鱼、
银大马哈鱼和虹鳟与银大马哈鱼杂交的三倍体 杂交种。
五、鲤春病毒血症（SVC）**
（一）病原体 鲤春病毒血症病毒(Spring viraemia of virus，SVCV)，是一种单链RNA病毒，
（四）诊断 V的分离、鉴定可对本病作出确切的诊断。 2.对分离病毒采用血清中和实验、免疫荧光抗
传染性造血组织坏死病（IHN）
粘液便
卵
黄
囊
肿
胀
腹大充血
充 血
体黑眼突
IHNV感染后鱼肾造血组织坏死，肾 小管降解，血细胞降解 主要症状
四、病毒性出血败血症（VHS）**
（一）病原体 病毒性出血败血症病（VHSV） ， 属弹状病毒科，含单链RNA。
（二）流行情况 危害种类：本病主要危害虹鳟，全长5cm~300g受
（四）诊断 组织切片可见包涵体和病毒粒子。
（五）防治方法 注水、转池或转移网箱。碘液浸泡。六、对虾
病毒病
鲤痘疮病
鲤痘疮病
痘疮切片的电 镜照片。示胞 质中大量有囊 膜的病毒颗粒
局部放大
七、斑点叉尾鮰病毒病（CCVD）*
（一）病原体 疱疹病毒 ，病毒颗粒有囊膜， 呈20面体，颗粒直径175~200nm。
常用50%甘油生理盐水保存含病毒的病料。
第二节 诊断方式
一、酶联免疫吸附（ELISA) 二、酶染色法幻灯片 5 三、免疫荧光技术幻灯片 8 四、血清学试验幻灯片 9 五、空斑试验幻灯片 9 六、合胞体观察幻灯片 10 七、多聚酶链式反应(PCR)幻灯片 14
ELISA测定原理
A.将抗原吸附于固相载体表面， 洗涤除去未吸附的抗原；
引物延伸
PCR反应过程原理
第三节 主要病毒性疾病
一、草鱼出血病（Hemorrhage disease
of grass carp） （一）病原体 水生呼肠孤病毒。幻灯片 17 （二）流行情况 危害种类：体长2.5~15cm的草鱼种。 流行季节：每年6〜9，8月份为流行高峰。水
温在27℃以上最为流行，25℃以下病情随之消失。 流行地区：几乎全国各地，北方较少。（三）
以上发病较少。 流行地区：东北三省、陕西、山东、甘肃以及
台湾均曾发现。
（三）主要症状
病鱼游泳失衡，常做上下回转运动。体色发 黑，眼球突出，腹部膨大充血，肛门处常拖一条 线形粘液便，幽门处和胰脏有点状出血，肝、脾、 肾、心脏贫血苍白。
（四）诊断（同前）幻灯片 34 （五）防治方法
1.发眼卵用伏碘（PVP-I）浸洗15min，浓度 为有效碘50mg/mL。
养殖期内，每半个月全池泼洒 二氯异氰尿酸 钠(优氯净)或三氯异氰尿酸(强氯精)0.3~200mg/L或 漂白粉精0.1‾0.2mg/升。幻灯片 25