血清免疫球蛋白测定.docx
体液免疫球蛋白测定
体液免疫球蛋白测定第一节血清IgG、IgA、IgM测定血清免疫球蛋白IgG、IgA、IgM定量测定方法一般有单向环状免疫扩散法、火箭免疫电泳法、ELlSA、免疫比浊法、放射免疫分析法等。
临床常用单向环状免疫扩散法和免疫比浊法来测定血清免疫球蛋白含量。
一、血清IgG、IgA、lgM测定（一）单向环状免疫扩散法该法的原理是将抗血清均匀地分散于琼脂或琼脂糖凝胶内，胶板上打孔，孔内注入抗原或待测血清，抗原在含有抗血清的胶内呈放射状（环状）扩散，在抗原抗体达到一定比例时形成可见的沉淀环。
在一定条件下，抗原含量越高，沉淀环越大。
（二）免疫比浊法该法具有检测范围宽、测定结果准确、精密度高、检测时间短（一般在几分钟内即可完成测试）、敏感度高、稳定性好等优点。
二、血清IgG、IgA、IgM测定的临床意义（一）年龄新生儿可由母体获得通过胎盘转移来的IgG，故血液中含量较高，接近成人水平。
（二）免疫球蛋白IgG、IgA、IgM均升高慢性肝脏疾病如慢性活动性肝炎、原发性胆汁性肝硬化、隐匿性肝硬化患者血清中可见3种Ig均升高。
慢性细菌感染如慢性支气管炎、肺结核，血IgG可升高。
宫内感染时脐血或出生后的新生儿血清中IgM含量可增高。
SLE患者以IgG、IgA升高较多见。
类风湿关节炎患者以IgM增高为主。
（三）单一免疫球蛋白升高主要是指患者血清中某一类免疫球蛋白含量显著增多，大多在30g／L以上，这种异常增多的免疫球蛋白其理化性质十分一致，称为单克隆蛋白（MP）即M蛋白。
此类异常增多的免疫球蛋白多无免疫活性，故又称副蛋白。
由它所致的疾病称为免疫增殖病如多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、恶性淋巴瘤、重链病、轻链病等。
（四）免疫球蛋白降低先天性低Ig血症，主要见于体液免疫缺陷病和联合免疫缺陷病。
IgA缺乏患者，易发生反复呼吸道感染。
IgG缺乏患者，易发生化脓性感染。
IgM缺乏患者，易发生革兰阴性细菌败血症。
第二节血清IgD和IgE测定正常人血清中IgD含量很低，仅占血清免疫球蛋白总量的0.2%。
体液免疫球蛋白测定
体液免疫球蛋白测定免疫球蛋白（Ig）是由浆细胞合成和分泌的一组具有抗体活性的蛋白质，按其重链性质共分IgG、IgA、IgM、IgD和IgE五类。
Ig主要存在于血液中，约占血浆蛋白总量的20%，IgG、IgA、IgM的含量为g/L水平，而IgD、IgE含量仅为mg/L水平。
血清IgG、IgA、IgM测定血液中最主要的免疫球蛋白，在机体的体液免疫效应和抗病原生物侵入机体的免疫功能中发挥重要作用。
临床常用单向环状免疫扩散法和免疫比浊法来测定血清免疫球蛋白含量。
一、血清IgG、IgA、lgM测定1.单向环状免疫扩散法该法的原理是将抗血清均匀地分散于琼脂或琼脂糖凝胶内，胶板上打孔，孔内注入抗原或待测血清，抗原在含有抗血清的胶内呈放射状（环状）扩散，在抗原抗体达到一定比例时形成可见的沉淀环。
在一定条件下，抗原含量越高，沉淀环越大。
本法出现误差的原因有：①抗原或标准液溢出加样孔；②因抗体或抗原过量而致沉淀环过小或过大；③加样量不足或过多，或混有气泡；④加样孔破损，使沉淀环呈不规则状；⑤板浇注后保存时间长，引起板内水分蒸发或变形；⑥浇注琼脂时不在水平台面，使胶板厚薄不匀；⑦打孔后挑取琼脂时将胶板挑起，与玻璃板剥离，以致待测血清在孔底流溢；⑧扩散时湿盒不平，导致沉淀环不圆。
2.免疫比浊法检测范围宽、测定结果准确、精密度高、检测时间短（一般在几分钟内即可完成测试）、敏感度高、稳定性好。
二、血清IgG、IgA、IgM测定的临床意义1.年龄新生儿可由母体获得通过胎盘转移来的IgG，故血液中含量较高，接近成人水平。
婴幼儿其体液免疫功能尚不成熟，Ig含量低于成人。
2.免疫球蛋白IgG、IgA、IgM均升高慢性肝脏疾病如慢性活动性肝炎、原发性胆汁性肝硬化、隐匿性肝硬化患者血清中可见3种Ig均升高。
慢性细菌感染如慢性支气管炎、肺结核，血IgG可升高。
宫内感染时脐血或出生后的新生儿血清中IgM含量可增高。
各种结缔组织性疾病中常见各型Ig升高，SLE患者以IgG、IgA升高较多见，类风湿关节炎患者以IgM增高为主。
血清免疫球蛋白M测定
血清免疫球蛋白M测定【基本信息】[简要描述]·免疫球蛋白M(Immunoglobulin M, IgM)是初次免疫应答反应中的免疫球蛋白(Ig)，也是相对分子质量最大的Ig，约占血清总Ig的5%-10%。
·IgM测定用于体液免疫活性、子宫感染可能性或急性感染评价，IgM型多发性骨髓瘤和华氏巨球蛋白血症诊断和治疗检测。
[其他名称]IgM【测定方法及参考值范围】可通过单向免疫扩散法、免疫散射比浊法、免疫透射比浊法测定。
参考值范围：成人血清IgM为0.5-2.6g/L；新生儿为0.01-0.06g/L。
【结果及临床意义】[增高]◇疾病因素·华氏巨球蛋白血症注释：IgM呈单克隆性明显增高。
·IgM型多发性骨髓瘤·初期病毒性肝炎(A型病毒性肝炎急性早期等)·类风湿关节炎·系统性红斑狼疮·宫内感染注释：宫内感染可能引起IgM浓度急剧升高，若脐血中IgM＞0.2g/L时，表示有宫内感染。
·慢性感染·淋巴瘤·肝硬化(原发性胆汁性肝硬化的早期等)·B型肝炎急性期注释：IgM升高不明显。
·C型肝炎急性期注释：IgM升高不明显。
·慢性肝病·类狼疮性肝炎注释：抗原的持续刺激和血浆白蛋白减少的代偿作用，IgG、IgA和IgM均明显升高，增高程度与细胞浸润和纤维化程度呈正相关。
·肝细胞癌注释：抗原的持续刺激和血浆白蛋白减少的代偿作用，IgG、IgA和IgM均明显升高，增高程度与细胞浸润和纤维化程度呈正相关。
·链球菌感染·传染性单核细胞增多症·肾病综合征微小病变型恶化时·浆细胞骨髓瘤·施尼茨勒综合征注释：表现为慢性荨麻疹、不明原因发热、骨关节痛、骨硬化X线像。
·伴性IgM增高免疫球蛋白缺乏症·先天性高IgM综合征[降低]◇疾病因素·IgG型重链病·IgA型多发性骨髓瘤·先天性免疫缺陷症(原发性无丙种球蛋白血症、网状细胞异常形成症等)注释：网状细胞异常形成症属于复合性免疫缺陷症的一种类型，T、B和NK细胞显著减少，免疫球蛋白减少以至IgA和IgM多有测不出的程度。
免疫球蛋白的检测与临床应用
。
慢性肝脏疾病如慢性活动性肝炎，原发性胆汁性肝 硬化，隐匿性肝硬化患者血清中可见三种免疫球蛋 白均升高。慢性细菌感染如慢性支气管炎，肺结核， 血 IgG可升高，宫内感染时脐血或出生的新生儿血 清中IgM含量可增高。
有先天性和获得性两类，先天性低免疫球蛋白血症，主要 见于体液免疫缺陷病和联合免疫缺陷病。另一种情况是3 种Ig中缺1种或2种，如IgA缺乏患者，易发生反复呼吸道 感染；IgG缺乏患者，易发生化脓性感染；IgM缺乏患者， 易发生革兰阴性菌败血症。获得性低Ig血症，血清中IgG 常小于5 g/ L，引起原因较多，如大量蛋白流失的疾病 （剥脱性皮炎、肠淋巴管扩张症和肾病综合征）、淋巴系 统肿瘤（淋巴肉瘤、霍奇金淋巴瘤）、中毒性骨髓疾病、 长期使用免疫抑制剂等。
作为血清中最主要的抗体成分，约占人体血清中总 免疫球蛋白含量的75%。是唯一能通过胎盘的Ig， IgG是血液和细胞外液中的主要抗体，也是机体再 次免疫应答的主要抗体，大多数抗感染抗体与自身 抗体都为IgG 类。
16岁以上成年人IgG临床参考范围为：6.0~16.0g/L
在正常人血清中的含量仅次于IgG，占血清免疫球蛋白 含量的10～20%。新生儿血清中无IgA抗体，但可从母乳 中获得分泌型IgA。分为血清型IgA和分泌型IgA：
与重链结合成免疫球蛋白的轻链称为结合轻链，未 与重链结合的轻链称为游离轻链。
游离轻链的量最终取决于B细胞的合成分泌与肾脏 清除的动态平衡结果，临床上多种疾病都可导致血 清中游离轻链浓度异常，例如：免疫抑制，自身免 疫，肾脏清除率降低及浆细胞病等。
游离轻链通过肾小球滤过而从血液中快速清除，然 后被近端肾小管重吸收和分解，因此游离轻链的检 测可以实时评估病情进展，研究表明大量的游离轻 链可以被肾脏吸收，所以只有非常少的游离轻链逃 过近端肾小管的重吸收，在正常的尿中含有极少量 的游离轻链。
免疫球蛋白检验方法
免疫球蛋白检验方法
一、适用范围
适用于检测人血清、血浆中免疫球蛋白（IgA、IgG、IgM、IgE）水平。
二、原理
免疫球蛋白的检测利用免疫沉淀反应，配制特异性抗血清与病人标本混合，当IgG、IgA、IgM、IgE抗体形成沉淀时，以比色检测，检测抗体浓度的变化，从而检测血清中免疫球蛋白含量。
三、试剂盒选择
抗体用于免疫球蛋白检测的试剂盒应选择经认证的、适用于检测人免疫球蛋白（IgA、IgG、IgM、IgE）水平的试剂盒（如ELISA试剂）。
四、仪器使用
根据使用的试剂盒类型，选择适当的仪器，如ELISA仪、比色检测仪等，以便进行免疫球蛋白检测。
五、样本收集
根据使用的试剂盒，收集血清或血浆样本，每次检测取0.5ml样本，如果多次检测，可放置在4℃保存，4℃以下冷冻保存不超过一个月。
六、试剂配制
1．将用于 ELISA 检测的准备好的抗体、病人标本等试剂放置室温，将其涂层板中；
2．按照试剂盒的使用说明，准备其他试剂，并用抗体标本反应
液调整到稀释抗体的浓度；
3．将抗体标本反应液和病人标本混合涂洒到涂层板的检测格中，放置室温反应15分钟；
4．用洗涤液洗涤检测格，然后用抗体反应液复活格中的抗体，放置室温反应10分钟；
5．用洗涤液洗涤检测格，然后用检测液检测抗体，放置室温反应1小时；
6．用洗涤液洗涤检测格，然后用终止液终止反应，放置室温反应30分钟；
7．将涂层板置于比色检测仪中，检测抗体浓度的变化，从而检测血清中免疫球蛋白的含量。
七、报告
根据比色检测仪结果，判定血清中IgA、IgG、IgM、IgE含量，并根据参考值报告免疫球蛋白水平。
免疫球蛋白定量测定
免疫球蛋白定量测定
免疫球蛋白定量测定较常用的方法有单向扩散法与免疫浊度法，前者
较为简便，后者更为准确迅速。
恶性单克隆丙种球蛋白病常呈现某一
类丙种球蛋白的显着增高，大多在30mg/ml以上；而正常的免疫球蛋白，包括与M蛋白同类的丙种球蛋白的含量则显着降低。
在良性丙种球蛋白
病的血清标本中，M蛋白的升高幅度一般不象恶性丙种球蛋白病那么高，多在20mg/ml以下；M蛋白以外的免疫球蛋白含量一般仍在正常范围之内。
如在单向扩散试验中出现双圈状沉淀环，则标本中可能存在某种
免疫球蛋白片段的M蛋白。
多克隆丙种球蛋白病患者的血清中常有多种
类型的免疫球蛋白水平同时升高，每类上升的幅度不太大，但总的丙
种球蛋白水平增主比较明显。
免疫球蛋白的定量检测，有时会由于不同实验室所用抗血清特异
性的差异，而造成M蛋白定量结果的不同，特别在使用某一株M蛋白制
备的抗血清检测其他患者的M蛋白时。
如能配合作用区带电泳光密度扫描，常可纠正这种误差。
进行免疫球蛋白的定量检测，不仅有助于丙种球蛋白病的诊断，
并对丙种球蛋白病的良、恶性鉴别具有一定的帮助。
如做动态观察，
对丙种球蛋白病的病情和疗效的判断有一定的价值。
M蛋白含量的多少
常可反映病情的轻重，尤其对同一患者，M蛋白含量明显增高常提示病
情恶化；经有效治疗后，M蛋白含量逐渐下降，而正常免疫球蛋白的含
量则由降低趋向正常。
血清免疫球蛋白测定
免疫球蛋白（Ig）是一组具有抗体活性的球蛋白，由B淋巴细胞受抗原刺激后增殖分化形成的浆细胞合成和分泌，存在于人体的血液、体液、外分泌液及某些细胞（如淋巴细胞）膜上。
应用免疫电泳和超速离心分析，可将其分为IgA、IgG、IgM、IgD和IgE五类。
1.Ig减低见于各类先天性和获得性体液免疫缺陷、联合免疫缺陷的病人及长期使用免疫抑制剂的患者。
此时五种Ig均有降低。
2.Ig增高（1）单克隆性增高表现为五种Ig中仅有某一种Ig增高而其他Ig不增高或可降低，主要见于免疫增殖性疾病。
如：①原发性巨球蛋白血症时，表现为IgM单独明显增高；②多发性骨髓瘤时可分别见到IgG、IgA、IgD、IgE 增高，并据此分为IgG、IgA、IgD和IgE型多发性骨髓瘤；③过敏性皮炎、外源性哮喘及某些寄生虫感染可表现为IgE增高。
（2）多克隆性增高表现为IgG、IgA、IgM均增高。
常见于各种慢性感染、慢性肝病、肝癌、淋巴瘤以及系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等自身免疫性疾病。
球蛋白测定实验报告
一、实验目的1. 理解球蛋白在血清蛋白中的组成及其在生物体中的作用。
2. 掌握使用醋酸纤维薄膜电泳技术分离和定量血清中球蛋白的方法。
3. 通过实验了解球蛋白的等电点、分子量及其在电场中的迁移行为。
二、实验原理血清中的蛋白质主要包括清蛋白、球蛋白、β-球蛋白和γ-球蛋白等。
球蛋白是血清中含量较高的蛋白质之一，主要由多种免疫球蛋白组成，对于机体的免疫功能至关重要。
醋酸纤维薄膜电泳是一种常用的蛋白质分离技术，基于蛋白质分子大小、电荷和形状的差异，在电场中实现分离。
在醋酸纤维薄膜电泳中，血清蛋白质在pH8.6的缓冲液中带负电荷，向正极移动。
由于不同蛋白质的分子量、形状和电荷量不同，它们在电场中的迁移速度不同，从而在薄膜上形成不同的区带。
通过比较已知标准蛋白质的迁移距离和待测样品的迁移距离，可以定量分析血清中球蛋白的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 血清样品- 醋酸纤维薄膜- 标准蛋白质溶液- 电泳缓冲液- 染色剂（如氨基黑10B）- 洗脱剂- 显微镜2. 实验仪器：- 电泳仪- 电泳槽- 显微镜四、实验步骤1. 制备样品：将血清样品与适当比例的缓冲液混合，制成均匀的蛋白质溶液。
2. 准备电泳槽：在电泳槽中注入电泳缓冲液，确保槽内液面平稳。
3. 准备醋酸纤维薄膜：将薄膜浸泡在缓冲液中，使其充分湿润。
4. 加样：将样品和标准蛋白质溶液点样于薄膜上，注意样品点的均匀性。
5. 电泳：将薄膜放入电泳槽中，接通电源，进行电泳。
6. 染色：电泳结束后，将薄膜取出，放入染色剂中染色。
7. 洗脱：将染色后的薄膜放入洗脱剂中，去除非蛋白质成分。
8. 观察与记录：将薄膜置于显微镜下观察，记录各蛋白质区带的迁移距离和宽度。
五、实验结果与分析1. 通过电泳，观察到血清样品在醋酸纤维薄膜上形成了清晰的蛋白质区带，包括清蛋白、α-球蛋白、β-球蛋白和γ-球蛋白等。
2. 通过比较样品和标准蛋白质的迁移距离，计算出各蛋白质区带的分子量。
实验报告 - 医学免疫学
实验报告 - 医学免疫学
实验名称：人类血清免疫球蛋白含量测定实验
一、实验目的：
本实验旨在通过学习单因素比较法测定人类血清免疫球蛋白的含量。
二、实验原理：
本实验采用单因素比较法，利用已知浓度标准品与待测样品进行比较，从而测定待测样品中免疫球蛋白的含量。
在本实验中，用样品与标准品混合后进行免疫共沉淀，得到的沉淀物可以用BCA法或者Bradford法定量，从而测定待测样品中免疫球蛋白的含量。
三、实验步骤：
1. 准备标准品和待测样品，标准品为人类免疫球蛋白。
2. 将标准品和待测样品分别加入试管中，每个试管加入1 ml。
3. 加入NaCl溶液至试管至5 ml。
4. 加入100 μl的兔抗人IgG抗血清，覆盖瓶口，置于4℃静置过夜。
5. 旋转离心，取上清液并分别定量。
四、实验结果：
本实验得到的结果如下表所示：
样品编号 | 试剂盒编号 | 每1 ml含IgG量（mg）
--------- |----------| ---------------------
样品1 | 001 | 10.2
样品2 | 002 | 9.6
样品3 | 003 | 12.0
样品4 | 004 | 11.5
标准品 | 005 | 13.0
根据实验结果可以看出，样品中免疫球蛋白的含量相对于标准品略有差异，但整体来说，差异并不明显，说明本实验所使用的测定方法准确可靠。
本实验结果为进一步的医学研究提供了重要数据，可为医生提供更准确的诊断结果，为医学研究提供了有力支持。
血清免疫球蛋白的提取分离、纯化及鉴定
I 血液及组织样品的制备分析组织中某种物质的含量、探索物质代谢的过程和规律，经常使用动物的肝、肾、脑、粘膜和肌肉等组织，也选用全血、血浆、血清或者无蛋白血滤液等血液样品，有时也采用尿液、胃液等完成各种生化实验。
掌握以上各种实验样品的正确处理和制备方法是保证生化实验顺利进行的关键。
一、血液样品(一）采血测定用的血液，多由静脉采集。
一般在饲喂前空腹采取，因此时血液中化学成分含量比较稳定，采血时所用的针头、注射器，盛血容器要清洁干净；接血时应让血液沿着容器壁慢慢注入，以防溶血和产生泡沫。
(二）血清、全血及血浆的制备1.血清的制备血清是全血不加抗凝剂自然凝固后析出的淡黄清亮液体。
制备方法是：将刚采集的血液直接注入试管或离心管中。
将试管放成斜面，让其自然凝固，一般经3h 血块自然收缩而析出血清；也可将血样放入37 ℃恒温箱内，促使血块收缩，能较快约析出血清。
为了缩短时间，也可用离心机分离（未凝或凝固的均可离心），分离出的血青，用吸管吸出置于另一试管中，若不清亮或带有血细胞，应重离心，加盖冷藏备用。
2.全血及血浆的制备取清洁干燥的试管或其它容器，收集动物的新鲜血液，立即与适量的抗凝剂充分混合，所得到的抗凝血为全血。
每毫升血液中加入抗凝剂的种类可以根据实验的需要进行选择，但是用量不宜过大，否则将影响实验的结果。
将已抗凝的全二于2，000r / min 离心10min ，沉降血细胞，取上层清液即为血浆。
血浆比血清分离得快而且量多：两者的差别，主要是血浆比血清多含一种纤维蛋白原，其它成分基本相同。
3.抗凝剂凡能够抑制血液凝固反应进行的化合物称为抗凝剂。
抗凝剂种类甚多，实验室常用的有如下几种，可根据情况选择使用。
（1）草酸钾（钠）优点是溶解度大，可迅速与血中钙离子结合，形成不溶性草酸钙，使血液不凝固。
每毫升血液用1-2mg 即可。
配制方法：配制10％草酸钾水溶液二吸取此液0.1ml 放入一试管中，慢慢转动试管，泛草酸钾尽量铺散在试管壁上，置80 ℃烘箱烤干（若超过150 ℃则分解），管壁即呈一薄层三色粉末，加塞备用。
血清免疫球蛋白M的测定及其医学意义
血清免疫球蛋白M的测定及其医学意义
Ting Bao was revised on January 6, 20021
血清免疫球蛋白A、G、M的测定及其医学意义
免疫球蛋白G（IgG）
【正常参考值】6～16g/L
【临床意义】
免疫球蛋白的血清含量与年龄有一定关系，儿童偏低，随着年龄的增长其含量逐渐升高。
增高：见于IgG型多发性骨髓瘤、慢性肝病、慢性感染、结缔组织病、过敏性紫癜、恶性淋巴瘤、牛皮癣、麻风病、疟疾、肾炎。
减低：先天性免疫缺陷病、肾病综合征、病毒感染、蛋白丢失性疾病、免疫抑制治疗。
免疫球蛋白A（IgA）
【正常参考值】0.76～3.9g/L
【临床意义】
增高：肝脏疾病、结缔组织疾病、IgA型多发性骨髓瘤、肺结核、急性肾炎等。
减低：免疫缺陷病、选择性IgA缺陷病、后天性低丙种球蛋白血症、肾病综合征、慢性淋巴细胞性白血病、何杰金病。
免疫球蛋白M（IgM）
【正常参考值】0.4～3.45g/L
【临床意义】
增高：巨球蛋白血症、病毒性肝炎急性期、结缔组织疾病、恶性肿瘤、传染性单核细胞增多症、伤寒、梅毒、黑热病、疟疾、丝虫病、支原体肺炎、风疹等。
减低：免疫缺陷病、IgA、IgG型的多发性骨髓瘤、何杰金病、慢性淋巴细胞性白血病、先天愚型、蛋白丢失性胃病、网状内皮细胞增生性疾病、尿毒症。
医学检验·检查项目：血清免疫球蛋白测定_课件模板
医学检验·各论：血清免疫球蛋白测定 >>>
相关症状： 扁桃体小或缺如、网状青斑。
医学检验·各论：血清免疫球蛋白测定 >>>
相关疾病：
原发性单克隆免疫球蛋白病、继发性单克 隆免疫球蛋白病、脊柱裂和有关畸形、冷 球蛋白血症、小儿白细胞黏附分子缺陷Ⅰ 型、先天性性联无γ-球蛋白血症、特发 性迟发性免疫球蛋白缺乏症、婴儿期短暂 性低丙球蛋白血症、异常γ-球蛋白血症、 重症联合免疫缺陷。
医学检验·各论 血清免疫球蛋白测定
内容课件模板
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
医学检验·各论：血清免疫球蛋白测定 >>>
简介： 免疫球蛋白（Ig）具有抗体活性，能
与相应抗原专一结合，是体内普遍存在的 一类蛋白质。
医学检验·各论：血清免疫球蛋白测定 >>>
临床意义：
Ig显著减低 ①见于先天性低丙种球 蛋白血症，如 IgG、IgA、IgM三种全缺的 Bruton病（仅限于男性），三种Ig缺某一 或二种（减少或无能）的丙种球蛋白异常 血症，后者最多见的是IgA缺乏症（隐性 遗传）。 ②见于获得性低丙种球蛋白血 症（如肾病综合征、蛋白质丢失性肠病、 先天性
医学检验·各论：血清免疫球蛋白测定 >>>
临床意义：
风疹病等）以及瑞（Swiss）氏胸腺发育 不全伴无丙种球蛋白血症。Ig 明显增高 ①见于免疫性疾病，如系统性红斑狼疮急 性期、慢性活动性肝炎、类风湿性关节炎 活动期等。 ③见于多发性骨髓瘤，可按 其所产生Ig不同而有G型（IgG增多）、A 型（IgA增高）、D型、E型（后两型极少 见）等。 ④
医学检验·各论：血清免疫球蛋白测定 >>>
免疫球蛋白测定
2、变应原特异性IgE检测：放射变应原吸附 变应原特异性IgE检测 检测： 试验（ 试验（radioallergosorbent test,RAST) 步骤： 步骤：变应原交联载体 加待检血清或正常 抗人IgE 对照血清 加 125I-抗人IgE 洗去未结合 125I-抗人IgE 抗人IgE γ计数器测放射值 结果判定：以大于正常人3.5倍为阳性 结果判定：以大于正常人3.பைடு நூலகம்倍为阳性 临床意义： 临床意义： (1) 参见血清总IgE测定 参见血清总IgE测定 (2) 确定变应原
第一部分 免疫球蛋白测定 一、IgG、IgA、IgM的测定 IgG、IgA、IgM的测定 1、单向免疫扩散法（RID） 单向免疫扩散法（RID） 步骤： Ig血清按效价与融化的琼脂混合 步骤：抗Ig血清按效价与融化的琼脂混合 浇板 凝固后打孔 加样 扩散 测沉淀 环做标准曲线，根据标准曲线得相应Ig含 环做标准曲线，根据标准曲线得相应Ig含 量。
2、免疫比浊法： 免疫比浊法：
原理：当抗原与抗体在稀释系统中反应，而比例合适 原理：当抗原与抗体在稀释系统中反应， 时，形成的免疫复合物在聚乙二醇等作用下自液相 析出，使检样的浊度或光散射程度发生改变， 析出，使检样的浊度或光散射程度发生改变，分为 透射比浊和散射比浊。 透射比浊和散射比浊。 步骤： 步骤： Ig＋标准血清中（ PEG） OD值 抗Ig＋标准血清中（含PEG） 孵育 测OD值 制 标准曲线 Ig＋待检血清中（ PEG） OD值 抗Ig＋待检血清中（含PEG） 孵育 测OD值 根 据标准曲线求值
三、M蛋白测定：——免疫电泳 蛋白测定：——免疫电泳 M蛋白： 蛋白： 浆细胞或B 浆细胞或B淋巴细胞单克隆增殖产生的结构均 一的多无活性的单克隆免疫球蛋白。 一的多无活性的单克隆免疫球蛋白。 方法步骤： 方法步骤：血清蛋白电泳 加抗体于琼脂槽内 扩 散、沉淀 结果判断： α2结果判断：在α2-γ区附近形成致密弓形沉淀弧 临床意义：主要见于多发性骨髓瘤(multiple 临床意义：主要见于多发性骨髓瘤(multiple myeloma)， myeloma)，也可见于巨球蛋白血症 mactoglobulinemia)、恶性淋巴瘤(malignant mactoglobulinemia)、恶性淋巴瘤(malignant lymphoma)和重链病 lymphoma)和重链病
免疫球蛋白检测
临床免疫学检验技术免疫球蛋白第一章第二章第三章第四章INTRODUCTION免疫球蛋白指具有抗体活性或化学结构，与抗体分子相似的球蛋白。
简称Ig 。
人体免疫球蛋白主要存在于血液中，约占血浆蛋白总量的20%。
也可存在于其他体液中。
免疫球蛋白检测基本结构第一章第三章第四章INTRODUCTION4肽链：2条L 链（214aa ）2条H 链（450~550aa ）—s-s —相连，单体基本结构第一章第二章第三章第四章INTRODUCTIONV 区：氨基酸的种类和序列多变HVR （超变区/高变区）CDR （互补决定区）（CDR 的结构差异决定了Ig 与抗原结合的特异性，也是Ig 分子独特型存在的部位）FR （骨架区）基本结构第一章第二章第三章第四章INTRODUCTIONC 区：氨基酸的种类和序列恒定CL 区免疫原性不同：κ、λ两型CH 区免疫原性不同：IgG 、IgM 、IgA 、IgD 、IgE 五类相应重链：γ μ α δ ε目录CONTENTS第一节第二节第三节第四节体液中IgG、IgM、IgA 测定的临床应用血液IgE和IgD测定及临床应用血液IgG亚类测定及临床应用血液IgG亚类测定及临床应用体液中IgG、IgM、IgA 测定的临床应用血清中IgG、IgA、IgM的正常参考值区间尿液血液脑脊液010302体液免疫球蛋白检测及临床应用血液中免疫球蛋白测定的临床意义年龄的差异①年龄不同其血液中的免疫球蛋白的含量有一定变化。
②新生儿可由母体获得通过胎盘转移来的IgG，故血液中含量较高，接近成人水平③婴幼儿体液免疫功能尚不成熟，免疫球蛋白含量低于成人。
④血液免疫球蛋白随年龄、性别、血型、种族及测定方法不同而有所差别多克隆高免疫球蛋白血症①肝脏疾病如慢性活动性肝炎、原发性胆汁性肝硬化、隐匿性肝硬化等患者血清中三类免疫球蛋白均可升高。
②慢性细菌感染如肺结核、麻风、慢性支气管炎等血中IgG可升高。
宫内感染时脐血或出生后的新生儿血清中IgM含量可增高③自身免疫病时免疫球蛋白均可升高，如系统性红斑狼疮患者以IgG、IgA升高较多见，类风湿关节炎患者以IgM升高为主。
血清球蛋白_实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解血清球蛋白的组成和功能。
2. 掌握血清球蛋白测定的原理和方法。
3. 学习使用醋酸纤维薄膜电泳技术分离血清蛋白质。
4. 分析血清球蛋白含量与疾病的关系。
二、实验原理血清球蛋白是血清中的一种重要蛋白质，主要由五种球蛋白组成，包括α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白和M-球蛋白。
它们在生理和病理过程中具有不同的功能，如免疫、运输、调节等。
血清球蛋白的测定通常采用醋酸纤维薄膜电泳技术，该技术利用蛋白质分子在电场中的迁移速度差异进行分离。
根据蛋白质分子大小、电荷和等电点的不同，可以将血清球蛋白分离成不同的区带。
三、实验材料1. 血清样品2. 醋酸纤维薄膜3. 巴比妥-巴比妥钠缓冲液4. 氨基黑染料5. 显微镜6. 电泳槽7. 直流稳压电泳仪四、实验步骤1. 准备醋酸纤维薄膜：将薄膜浸泡在巴比妥-巴比妥钠缓冲液中，使其充分湿润。
2. 点样：将血清样品点在薄膜上，注意控制点样量，避免过多或过少。
3. 电泳：将薄膜放入电泳槽中，加入巴比妥-巴比妥钠缓冲液，连接电源，进行电泳。
4. 染色：电泳完成后，将薄膜取出，浸泡在氨基黑染料中，使其充分染色。
5. 漂洗：将染色后的薄膜取出，用漂洗液进行漂洗，去除未结合的染料。
6. 观察和分析：将薄膜放入显微镜下观察，分析血清球蛋白的分布和含量。
五、实验结果1. 血清球蛋白在醋酸纤维薄膜上分离成五个区带，分别为α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白和M-球蛋白。
2. 每个区带的颜色深浅与球蛋白含量呈正相关。
3. 通过与标准曲线比较，可以计算出血清中各球蛋白的含量。
六、实验讨论1. 血清球蛋白含量与疾病的关系：血清球蛋白含量异常可能与多种疾病有关，如感染、炎症、肿瘤、自身免疫性疾病等。
例如，γ-球蛋白升高可能与慢性感染、自身免疫性疾病和肿瘤等疾病有关；α2-球蛋白升高可能与炎症、感染和肝脏疾病等疾病有关。
2. 影响血清球蛋白测定的因素：实验过程中，应严格控制操作条件，如点样量、电泳时间、染色时间等，以减少误差。
《诊断学》 第一节 血清免疫球蛋白检测
第一节血清免疫球蛋白检测免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）是由浆细胞合成分泌的一组具有抗体活性的球蛋白，存在于机体的血液、体液、外分泌液和部分细胞的膜上。
Ig有着极为重要的生理功能，血清及体液Ig含量可因疾病而发生变化。
Ig的异常变化可反映机体的体液免疫功能状态，与临床表现相结合，有助于感染性疾病、免疫增生性疾病和免疫缺陷病等的鉴别诊断、疾病监控和预后。
免疫球蛋白因其功能和理化性质不同分为IgG、IgA、IgM、IgD和IgE五大类。
Ig的检测都是利用特异性的抗原抗体反应进行的。
血清中的IgG、lgM、IgA的含量较高，可采用单向免疫扩散法、免疫透射比浊法、免疫散射比浊法进行测定。
IgD、IgE的含量较低，常用ELISA、放射免疫（RIA）、荧光偏振技术、化学发光法进行测定。
一、免疫球蛋白G检测免疫球蛋白G（immunoglobulin G，IgG）为人体含量最多和最主要的Ig，占总免疫球蛋白的70％～80％，属再次免疫应答抗体，即机体再次感染的重要抗体。
它对病毒、细菌和寄生虫等都有抗体活性，也是唯一能够通过胎盘的Ig，通过自然被动免疫使新生儿获得免疫抗体。
【参考值】IgG：7.0～16．6g／L。
【临床意义】1．生理性变化胎儿出生前可从母体获得IgG，在孕期22～28周间，胎儿血IgG浓度与母体血IgG浓度相等，出生后母体IgG逐渐减少，到第3、4月胎儿血IgG降至最低，随后胎儿逐渐开始合成IgG，血清IgG逐渐增加，到16岁前达到成人水平。
2．病理性变化（1）IgG增高：IgG增高是再次免疫应答的标志。
常见于各种慢性感染、慢性肝病、胶原血管病、淋巴瘤以及自身免疫性疾病如系统性红斑狼疮（system lupus erythemato-sus，SLE）、类风湿关节炎等；单纯性IgG增高主要见于免疫增殖性疾病，如IgG型分泌型多发性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）等。
免疫球蛋白检测
精选ppt
31
第二节 IgG、IgA、IgM测定方法及临床意义
一、血液IgG、IgA、IgM测定方法及临床意义 二、血液IgG亚类测定方法及临床意义 三 、尿液免疫球蛋白测定方法及临床意义 四、脑脊液免疫球蛋白测定方法及临床意义
第十七章
免疫球蛋白检测
精选ppt
1
概念
❖ 免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）：是由浆细胞合成和 分泌的一组具有抗体活性、化学结构与抗体相似的蛋白质
❖ Ig主要存在于血液中，约占血浆蛋白总量的20%，也可存 在于尿液，脑脊液等体液及外分泌液中
❖ Ig含量：血清 IgG、IgA、IgM：g/L， IgD、IgE：mg/L 体液 IgG、IgA、IgM：mg/L
14
免疫球蛋白的双重身份
精选ppt
15
同种型（isotype） 指同一种属所有个体的免疫球蛋白分子共有的抗 原特异性标志，位于免疫球蛋白C区。为种属标志
（颜色不一样）
精选ppt
16
同种异型（allotype） 指同一种属但不同个体来源的免疫球蛋白C区分子 所具有的不同的抗原特异性标志。为个体标志
➢ Ig亚类：IgG1、IgG2、IgG3、IgG4，其含量依次下降
（一）、测定方法：
➢ 单向免疫扩散试验 ：灵敏度低、检测时间长 ➢ 酶联免疫吸附试验 ：抗原特异性较差、检测时间长 ➢ 免疫散射比浊试验：检测速度快、灵敏度高、准确性好、
自动化程度高、应用广泛
精选ppt
39
（二）临床意义： 1、 IgG亚类的含量随年龄的不同而变化（下表）
血清免疫球蛋白的检测方法
血清免疫球蛋白的检测方法1.什么是血清免疫球蛋白？血清免疫球蛋白，又称为抗体，是一种由免疫系统产生的蛋白质。
它们可以识别、结合并清除入侵人体的外来病原体，如细菌、病毒和真菌等，从而保护人体免受疾病侵害。
2.为什么需要检测血清免疫球蛋白？对于一些疾病的治疗和预防，了解患者免疫状态的情况是非常重要的。
因此，检测血清免疫球蛋白的水平可以帮助医生判断患者的免疫功能是否正常。
此外，免疫球蛋白特异性检测还常用于诊断某些特定的免疫系统异常或疾病。
3.血清免疫球蛋白的检测方法血清免疫球蛋白的检测方法包括以下几种：3.1ELISA法ELISA是一种高通量、灵敏度高的检测方法。
它可以测量血清中特定的抗原和抗体之间的交互作用。
通过对试样中免疫球蛋白的捕获和检测，在几个小时内可以获取结果。
3.2免疫印迹法免疫印迹法是一种检测特异性免疫球蛋白的方法。
该方法可以通过对蛋白质样品的电泳分离，将特异性反应进行定量分析。
免疫印迹法也常用于检测多肽和蛋白质的适应性免疫应答。
3.3免疫荧光法免疫荧光法是一种快速检测免疫球蛋白的方法。
该方法利用荧光标记将某些特定蛋白质结合的抗体与待检样品结合。
通过观察样品的荧光亮度变化，可以测量免疫球蛋白的水平。
3.4纸片免疫层析法纸片免疫层析法是一种便携式的检测方法。
可以使用简单设备快速检测血清免疫球蛋白。
该方法基于特异性抗体与对应抗原之间的结合，利用纸片上的蛋白质检测线检测样品。
4.总结通过各种不同的检测方法，我们可以快速、简单地检测血清免疫球蛋白的水平。
这些方法可以协助医生快速进行免疫疾病的诊断，提高治疗效果。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
血清免疫球蛋白测定
B-淋巴细胞受抗原刺激后，引起一系列细胞形态与生化特性变化，转化为淋巴母细胞并增生繁殖，最后演化为浆细胞，合成免疫球蛋白。
免疫球蛋白普遍存在于生物体的血液、体液、外分泌液及某些细胞（如淋巴细胞）的细胞膜上。
免疫球蛋白是一组具有抗体特性的球蛋白，其分子量很大，含有1000个以上的氨基酸分子，均由其共同抗原的两个相同的轻链（L链）和具有特异性抗原的两个不同的重链（H链）组成。
1分类
根据重链的氨基酸组成不同，免疫球蛋白可分为分五类：免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白D（IgD）和免疫球蛋白E（IgE）。
1.1IgG
IgG是人体的主要免疫球蛋白，也是唯一能通达胎盘的免疫球蛋白。
根据IgG的重链氨基酸顺序的差别，可分为IgG1，IgG2，IgG3，IgG4各亚类。
IgG是主要抗感染抗体，对各种细菌、病DU有抗体活性，并有激活补体的作用。
1.2IgA
IgA是分泌液中主要抗体，可分为IgA1和IgA2两个亚类。
存在于血清中的称血清型IgA，存在于泪液、乳汁、胃肠道、呼吸道和泌尿生殖道分泌液中的称分泌型IgA，对局部粘膜有抗菌和抗病DU作用。
1.3IgM
IgM可分为IgM1和IgM2两个亚类。
是抗原刺激最先产生的免疫球蛋白，有较强的固定补体、溶解细菌及细胞的能力。
IgM是抗革兰氏阴性菌和异体红细胞的主要抗体，也是存在于B淋巴细胞表面的主要免疫球蛋白。
1.4IgD
其作用与过敏反应有关。
据报道，IgD可对某些抗原起反应，如青霉素、胰岛素、核抗原、甲状腺抗原等。
它存在于B淋巴细胞表面，构成早期的膜受体，具有识别抗原，制动B淋巴细胞的分化作用。
1.5IgE
与I型变态反应有关，具有亲细胞特性。
IgE通过Fc段与肥大细胞、嗜碱粒细胞上的Fc受体结合，故属亲同种细胞性抗体。
当机体再次接触同种抗原后，过敏原即与结合在细胞表面的IgE作用，使细胞释放介质，引起平滑肌痉挛，血管通透性增加等过敏反应，还具有抗寄生虫感染作用。
2正常参考值
IgG：8～16g/L，IgA：1～4g/L，IgM：0.5～1.9g/L，IgD：0.01～0.4g/L，IgE：0.001～0.009g/L。
3临床意义
3.1血清免疫球蛋白降低
血清免疫球蛋白水平取决于免疫球蛋白合成和分解代谢的速率以及由体内丢失的程度。
血清免疫球蛋白降低可由于合成不足，丢失
增多和分解加快引起。
合成不足：血清免疫球蛋白降低可由于原发性或继发性合成缺陷所致。
原发性免疫缺陷病有性联先天性丙种球蛋白缺乏症、婴儿暂时性丙种球蛋白低下症、伴IgM升高的性联低丙种球蛋白血症、选择性IgA缺乏症、选择性IgM缺乏症、选择性IgG亚类缺乏症等。
继发性免疫缺陷病有慢性淋巴细胞性白血病、多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症和恶性肿瘤等。
丢失增多：从胃肠道丢失的见于溃疡性结肠炎、消化道癌肿、吸收不良综合征、淋巴瘤、肠淋巴管扩张症。
从皮肤丢失的有急性灼伤、特异反应性皮炎。
从浆膜腔丢失的有胸膜炎、腹膜炎、反复抽胸腹水。
从肾脏丢失的有肾小球肾炎（微小病变型、膜性、增殖性）、肾静脉血栓形成、SLE和淋巴瘤。
主要是由于蛋白从尿中丢失或DU素抑制免疫球蛋白合成，后者首先影响IgM，其次影响IgA，然后再影响IgG。
分解加快：见于湿疹-血小板减少-反复感染综合征、肌强直性营养不良和共济失调毛细血管扩张症。
此外，DU性甲状腺肿和库兴氏综合征的免疫球蛋白降低，可能与分解加快有关。
3.2血清免疫球蛋白增加
多种疾病可发现免疫球蛋白增加，常表现为各种免疫球蛋白均增加，但也可能以某种免疫球蛋白增加为主。
IgG增高见于各种感染性疾病和自身免疫性疾病，如慢性活动性肝炎、传染性单核细胞增多症、麻疹、结核病、麻风病、全身念珠菌病、血吸虫病、黑热病、SLE、类风湿性关节炎、亚急性甲状腺炎、多发性肌炎及原发性肾上腺皮质机能减退症等。
某些恶性肿瘤亦可见IgG增高。
IgA增高：主要是粘膜炎症和皮肤病变，见于溃疡性结肠炎、酒精性肝炎、类风湿脊椎炎、。