嗜酸性粒细胞直接计数

临床检验实验室

DGCPH-CL-SOP-07-06

嗜酸性粒细胞直接计数版序：2005-1

页码：第1 页，共2 页

[原理]

血液中嗜酸性粒细胞在含有伊红的低渗溶液中被染成红色，而红细胞及其他白细胞破裂或溶解。通过人工计数得到血液标本中的嗜酸性粒细胞含量。

[试剂及仪器]

1，器械：

（1）经校准的微量计数板。

（2）一次性20 ul微量吸管。

2，试剂：

嗜酸性粒细胞直接计数的稀释液种类较多，各有一定的优缺点，尚待大家继续实验，找出最佳配方。下列3种稀释液供参考。

1． Hinkelmann液

伊红 0.2g

95％石炭酸 0.5m1

40％甲醛 0.5ml

蒸馏水加到 100m1

2．乙醇—伊红稀释液

90％乙醇 30ml

甘油 10ml

碳酸钾 lg

枸橼酸钠 0.5g

20g/L伊红液 10ml

蒸馏水加至 100m1

本配方背景清晰，嗜酸性粒细胞着色鲜明，缺点是含10％甘油，比较粘稠，细胞不易混匀，故计数前必须充分振摇。

3．伊红—丙酮稀释液

20g/L伊红液 5ml

丙酮 5ml

蒸馏水 90ml

新鲜配制效果好，每周配1次。

[标本的收集与处理]

用EDTA-K2 0 .2ul抗凝静脉血1ml，轻轻摇动抗凝。凝集，溶血，血量小于0.5 ML或抽血时间超过四小时为不合格标本，拒收。

临床检验实验室

DGCPH-CL-SOP-07-06

嗜酸性粒细胞直接计数版序：2005-1

页码：第2 页，共2 页

[操作步骤]

1．小试管中加稀释液0.38ml。

2．常法取末梢血20μl，加入管内混匀，待红细胞溶解后两侧充池。

3．静置3—5min，用低倍镜(必要时用高倍镜)镜下计数10个大方格内嗜酸性粒细胞数。

[结果计算]

10个大方格内嗜酸性粒细胞数×20×lO＝嗜酸性粒细胞/L

[质量控制]

1，必须使经校准的微量吸管和微量计数板。

2，操作工作人员必须能熟练地掌握操作步骤。

3，试剂必需在有效期内使用。

[参考范围]

(50-300)×10E6／L(50-300／μl)

[临床意义]

1．直接计数主要用于观察传染病预后、手术和烧伤病人的预后及测定肾上腺皮质功能。

2．其他变化的临床意义同白细胞分类计数中嗜酸性粒细胞的增减。

嗜酸性粒细胞增多：变态反应、寄生虫病、某些皮肤病、某些血液病、手

术后、烧伤等。

嗜酸性粒细胞减少：伤寒、副伤寒以及应用肾上腺皮质激素后。

[附注]

l. 血液稀释后应于1h内计数完毕，否则嗜酸性粒细胞会逐渐被破坏，使结果偏低或不易辨认。

2. 充池前要充分混匀，但又不宜用力过猛，特别是使用含甘油的稀释液要适

当延长混匀时间。

3. 注意与中性粒细胞区别，以免误认，中性粒细胞一般不着色但也有着浅红

色的，其颗粒较小。

4．住院病人采标本时间力求统一，以免受日间生理变化的影响。

5．用白细胞总数与分类百分率求得的绝对值不如直接计数结果准确。