多氯联苯污染土壤的微生物修复

五、实例
--多氯联苯污染土壤好氧降解菌群的分离与鉴定
试验材料： 供试土壤 : 采自长江三角洲某典型PCBs 污染农田的表层土壤 处理方法：捡出植物根系、石砾等残留物， 自然风干，过2mm筛，调节器土壤含水 量为田间持水量的55%左右，以供盆栽试 验用。 供试植物: 紫云英，豆科黄芪属，冬季绿 肥植物。
1.2 实验方案及实施
本研究设计4个处理： 第一：不种植物，仅加灭活的根瘤菌菌剂作为对照（以 CK表示）； 第二：种植物，加灭活的根瘤菌菌剂（P）； 第三:不种植物，仅加活的根瘤菌菌剂（R）； 第四：种植物，加活的根瘤菌菌剂（PR）， 每个处理4次重复，随机区组排列。在同一条件下进 行一系列的培养，然后分析土壤性质，对其土壤微生物 生物量及群落功能多样性测定和计算多氯联苯的去除率 及植物提取修复效率，最后数据分析得到结果
三、PCBs污染土壤的微生物修复
1、微生物修复:是利用天然存在的或人工培养的功能微生 物群,在适宜环境条件下,促进或强化微生物代谢功能,从
而降低有毒污染物活性或将污染物降解成为无毒物质
的生物修复技术 2、被污染土壤中多氯联苯的测定 (1)主要试剂、分析仪器 气象色谱仪、色谱柱、多氯联苯标准品、分析替 代物、色谱分析内标物、土壤样品
苯，是一种环境内分泌干扰物,在自然环境中 难以降解,能够通过水、土壤、空气、生物等 载体转移,在人或动物体内积蓄,对生体具有致 畴、致癌、致突变特性,多氯联苯属于致癌物 质，容易累积在脂肪组织，造成脑部、皮肤 及内脏的疾病，并影响神经、生殖及免疫系 统。
2、结构式
3、理化性质：
• 外观与性状：流动的油状液体或白色结晶固体或非结 晶性树脂。 • 熔点(℃)：PCB3：-19～-15℃；PCB4：-8～-5℃； PCB5：8～12℃； PCB6：29～33℃。1.1.3 供试菌 Nhomakorabea及菌剂制备
供试菌株：根瘤菌 由本课题组从长江三角洲某典型PCBs污染 农田的紫云英植物根瘤菌中经驯化富集后分 离筛选得到。 菌剂制备:现将该菌株接种与YMA固体平 板培养基上28°C活化，然后接入以PCB77 （3,3＇， 4,4＇-四氯联苯，10mg/L）为唯 一碳源的基础盐业培养基中扩大培养，之后 与灭菌泥炭（过20目尼龙筛）混合，制成固 体菌剂（2*109cfu/g菌剂）
探讨这一共生体系对土壤中PCBs降解的机制，并验证器 田间修复效果，为研发PCBs污染土壤共生修复技术提供
科学依据。
参考文献
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四、土壤样品分析
① 5g土样于锥形瓶中，加入 1mol/L ② 提取：称取 净化：向提取液中加入 20m浓硫酸，振动 2min 的 KOH/乙醇溶液50ml，沸腾水浴回流碱解上清液 后静止分层，弃去硫酸相，再重复用硫酸洗涤到硫 转入预先加有 100ml 正乙烷和 500ml纯化水的分液 酸相无色；加入 100ml 纯化水，振动 2min后静置分 漏斗中；再向碱解残渣中加入 的乙醇溶液 层，弃去水相，再重复用水洗1mol/L 2次；将正乙烷提取 50ml ，沸腾水浴回流碱解1h，将碱解上清液也转 液过无水硫酸钠柱脱水，以梨形烧瓶收集；用旋转 入上述分液漏斗中，并将碱解残渣用 20ml乙醇洗 蒸发器浓缩至2ml左右，转入刻度管中，以少量正 涤三次，乙醇洗涤液也转入分液漏斗中；用 1+1硫 乙烷洗涤梨形瓶数次，定容至5ml；讲浓缩液过硅 酸调节溶液 pH为微酸性至中性后，加入10μg/L十 胶柱，并用正乙烷洗脱、梨形瓶收集；再用旋转蒸 氯联苯 2ml。振摇分液漏斗 10min后静置分层，对 发器浓缩至 2ml左右，转入刻度管中，定容至 20ml， 水相再以 50ml正乙烷重复萃取2次，正乙烷提取合 加入内标物六氯苯。 并于分液漏斗中待进一步净化处理。
多氯联苯污染土壤的微生物修复
小组成员
资料查找：张三 内容选定：李四 PPT 制作：王二 PPT 讲解：王小二
目录
1、多氯联苯的概述
2、多氯联苯污染土壤的现状 3、多氯联苯污染土壤的微生物修复 4、土壤样品分析 5、实例透析
6、参考文献
一、多氯联苯的概述
1、定义：多氯联苯，PCBs，别名：氯化联
结论
(1）紫云英作为绿肥植物，对PCBs表现出较强的耐受性，
并且对污染土壤中PCBs的去处起到明显作用，具有较好的
修复潜力。 （2）根瘤菌对紫云英修复PCBs污染土壤具有明显的强化 作用，而且改善了紫云英根际土壤微生物群落结构和功能 多样性。可见，紫云英-根瘤菌共生体系对修复PCBs污染
土壤具有良好的应用前景。今后有待进一步从分子水平上
4、用途：PCB用途很广,可作绝缘油、热载体和润滑油等,
还可作为许多种工业产品（如各种树脂、橡胶、结合剂、 涂料、复写纸、陶釉、防火剂、农药延效剂、染料分散剂） 的添加剂。
5、毒性
急性毒性 亚急性和慢性毒性 致癌性 致突变性
二、多氯联苯污染土壤的现状
多氯联苯，是一类人工合成的环境异 源有机物。近年来，在我国经济发达的长 江、珠江三角洲某些典型地区调查发现， 农田土壤中多氯联苯组分高达数百个 ppb， 其污染面积多达数千亩之多（藤应等， 2008）。由于 PCBs 在土壤中不断累积 的趋势，严重危害着土壤的生产和生态功 能、农产品质量安全和人类健康（Ren et al.，2007; Wu et al.，2011）。修复土 壤PCBs 污染已成为人们普遍关注的问题， 迫切需要寻找一种廉价、永久高效而且环 境友好的修复方法。