实验11-抗生素的抑菌试验
抑菌谱实验报告
一、实验目的1. 了解不同抗生素对细菌的抑菌作用。
2. 探究不同细菌对不同抗生素的敏感性差异。
3. 分析抗生素的抑菌谱，为临床用药提供参考。
二、实验原理抑菌实验是通过观察细菌在含有抗生素的培养基上的生长情况，来评估抗生素对细菌的抑制作用。
实验中，将不同浓度的抗生素分别加入培养基中，然后将接种有细菌的菌种接种于培养基上，观察细菌的生长情况，从而判断抗生素对细菌的抑菌效果。
三、实验材料1. 菌株：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌等。
2. 抗生素：青霉素、头孢菌素、红霉素、庆大霉素、氯霉素等。
3. 培养基：营养肉汤、营养琼脂、麦康凯琼脂等。
4. 仪器：培养箱、移液器、无菌操作台、显微镜等。
四、实验方法1. 将抗生素配制成不同浓度梯度的溶液。
2. 将菌株接种于营养琼脂平板上，37℃培养过夜。
3. 用无菌移液器将不同浓度的抗生素溶液分别滴加于平板中央，用无菌镊子轻轻按压平板，使抗生素溶液渗透到培养基中。
4. 将平板倒置，37℃培养24小时。
5. 观察并记录细菌在不同抗生素溶液中的生长情况，记录抑菌圈直径。
6. 根据抑菌圈直径，判断细菌对不同抗生素的敏感性。
五、实验结果1. 金黄色葡萄球菌对青霉素、头孢菌素、红霉素等抗生素敏感；对庆大霉素、氯霉素等抗生素不敏感。
2. 大肠杆菌对庆大霉素、氯霉素等抗生素敏感；对青霉素、头孢菌素、红霉素等抗生素不敏感。
3. 肺炎克雷伯菌对庆大霉素、氯霉素等抗生素敏感；对青霉素、头孢菌素、红霉素等抗生素不敏感。
4. 铜绿假单胞菌对庆大霉素、氯霉素等抗生素敏感；对青霉素、头孢菌素、红霉素等抗生素不敏感。
六、实验讨论1. 实验结果表明，不同细菌对不同抗生素的敏感性存在差异。
这可能与细菌的耐药性有关。
2. 在临床用药过程中，应根据细菌的药敏试验结果，选择合适的抗生素进行治疗，以提高治疗效果。
3. 抑菌实验是评估抗生素疗效的重要手段，对于临床用药具有重要的指导意义。
七、实验结论通过本次实验，我们了解了不同抗生素对细菌的抑菌作用，以及不同细菌对不同抗生素的敏感性差异。
药物抑菌实验报告
一、实验目的为了探究不同种类抗生素的抑菌效果，本研究采用体外抑菌实验方法，对青霉素、氨苄西林、头孢克洛和氯霉素四种抗生素进行抑菌活性测试，为临床合理用药提供依据。
二、实验材料1. 实验菌株：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌等常见革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
2. 实验试剂：青霉素、氨苄西林、头孢克洛和氯霉素等抗生素粉末，琼脂、牛肉膏、蛋白胨、pH试纸、无菌生理盐水等。
3. 实验仪器：培养箱、恒温培养箱、电子天平、移液器、显微镜、培养皿、锥形瓶、滴管等。
三、实验方法1. 菌株活化：将保存的菌株在适宜的培养基上培养24小时，备用。
2. 制备菌悬液：用无菌生理盐水将菌株稀释至适宜浓度，备用。
3. 制备抗生素溶液：分别将青霉素、氨苄西林、头孢克洛和氯霉素粉末用无菌生理盐水溶解，配制成一定浓度的抗生素溶液。
4. 制备琼脂平板：将牛肉膏、蛋白胨、琼脂和蒸馏水按比例混合，加热溶解，冷却至50℃左右，加入一定量的抗生素溶液，搅拌均匀，倒入培养皿中，待凝固。
5. 涂布菌悬液：用无菌棉签将菌悬液均匀涂布在琼脂平板表面。
6. 抑菌实验：将涂布好菌悬液的琼脂平板放入培养箱中，分别加入青霉素、氨苄西林、头孢克洛和氯霉素纸片，培养24小时。
7. 观察结果：观察平板上的抑菌圈直径，记录数据。
四、实验结果1. 青霉素对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和肺炎克雷伯菌的抑菌圈直径分别为：15mm、10mm和8mm。
2. 氨苄西林对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和肺炎克雷伯菌的抑菌圈直径分别为：10mm、8mm和6mm。
3. 头孢克洛对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和肺炎克雷伯菌的抑菌圈直径分别为：12mm、9mm和7mm。
4. 氯霉素对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和肺炎克雷伯菌的抑菌圈直径分别为：18mm、15mm和13mm。
五、实验结论1. 青霉素、氨苄西林、头孢克洛和氯霉素均具有较好的抑菌效果。
2. 氯霉素对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和肺炎克雷伯菌的抑菌效果最好，其次是青霉素、头孢克洛和氨苄西林。
实验二几种抗生素的抑菌实验
抗生素合理使用建议
根据感染类型和病原体选择合适的抗生素
针对不同的感染类型和病原体，应选择相应的抗生素，避免滥用和误用。
避免长期使用或预防性使用抗生素
长期使用或预防性使用抗生素可能导致耐药性的产生，应严格控制使用。
注意抗生素的剂量和疗程
确保使用足够的剂量和适当的疗程，以提高疗效并减少耐药性的产生。
06
重复实验
为确保结果的准确性，需进行至少3 次重复实验。
数据记录与整理
数据记录
01
详细记录每次实验的抑菌圈大小、抗生素浓度等信息。
数据整理
02
将实验数据进行整理，计算平均值和标准差，并绘制抑菌圈大
小与抗生素浓度的关系图。
结果分析
03
根据实验数据，分析不同抗生素的抑菌效果，并比较其差异。
04
实验结果与分析
氨基糖苷类抗生素对革兰氏阴性菌具有较 强的抑菌效果，但对革兰氏阳性菌的抑菌 效果较弱。
不同抗生素抑菌特点比较
青霉素与头孢菌素
青霉素和头孢菌素均对革兰氏阳性菌有较好的抑菌效果，但头孢菌素的抗菌谱更广，对革兰氏阴性菌也有较强的 抑菌作用。
大环内酯类与氨基糖苷类
大环内酯类主要针对革兰氏阳性菌，而氨基糖苷类则对革兰氏阴性菌具有较强的抑菌效果。
红霉素
大环内酯类抗生素，通过 抑制细菌蛋白质的合成来 杀死细菌。
细菌培养基
培养基是用于培养和繁殖细菌的物质，通常含有必要的营 养物质、生长因子和缓冲剂等。
选择适合实验所需细菌的培养基，以保证细菌的正常生长 和繁殖。
实验器材：培养皿、显微镜、移液器等
培养皿
用于培养细菌的圆形或方 形平皿，具有盖子以保持 无菌环境。
抗生素溶液制备
细菌抑菌实验报告
一、实验目的1. 探究不同抗生素对细菌的抑菌效果。
2. 了解抗生素的抑菌机理。
3. 培养学生的实验操作能力和数据分析能力。
二、实验原理抗生素是一类能够抑制或杀死细菌、真菌等微生物的药物。
本实验通过观察不同抗生素对细菌的抑菌效果，了解抗生素的抑菌机理。
三、实验材料1. 细菌：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌等。
2. 抗生素：青霉素、链霉素、红霉素、庆大霉素等。
3. 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、营养琼脂培养基。
4. 实验器材：培养皿、接种环、移液枪、显微镜等。
四、实验方法1. 将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基上，37℃培养24小时。
2. 将培养好的菌液用无菌生理盐水稀释至一定浓度。
3. 在培养皿中分别加入不同浓度的青霉素、链霉素、红霉素、庆大霉素溶液。
4. 将稀释后的菌液滴加于培养皿中，使菌液均匀分布。
5. 将培养皿置于37℃培养箱中培养24小时。
6. 观察并记录不同抗生素对细菌的抑菌效果。
五、实验结果1. 青霉素对金黄色葡萄球菌有明显的抑制作用，抑菌圈直径约为20mm；对大肠杆菌和肺炎克雷伯菌的抑制作用较弱，抑菌圈直径分别为10mm和5mm。
2. 链霉素对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和肺炎克雷伯菌均有明显的抑制作用，抑菌圈直径分别为25mm、20mm和15mm。
3. 红霉素对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和肺炎克雷伯菌均有抑制作用，抑菌圈直径分别为15mm、10mm和5mm。
4. 庆大霉素对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和肺炎克雷伯菌均有抑制作用，抑菌圈直径分别为30mm、25mm和20mm。
六、实验分析1. 青霉素属于β-内酰胺类抗生素，主要通过抑制细菌细胞壁的合成来发挥抑菌作用。
本实验结果表明，青霉素对金黄色葡萄球菌的抑制作用最强，对其他两种细菌的抑制作用较弱。
2. 链霉素属于氨基糖苷类抗生素，主要通过干扰细菌蛋白质合成来发挥抑菌作用。
本实验结果表明，链霉素对三种细菌均有明显的抑制作用，且抑菌效果最强。
抑菌圈实验实验报告
一、实验目的本实验旨在通过抑菌圈实验，观察不同抗生素对特定细菌的抑菌效果，了解抗生素的抗菌活性，并学习如何通过抑菌圈的大小判断细菌对抗生素的敏感性。
二、实验原理抑菌圈实验是微生物学中常用的方法之一，用于检测抗生素对细菌的抑制作用。
实验原理基于抗生素对细菌生长的抑制作用，当抗生素与细菌接触时，细菌的生长会受到抑制，从而在含有抗生素的培养基上形成一个无细菌生长的区域，即抑菌圈。
抑菌圈的大小可以反映抗生素的抗菌活性，通常抑菌圈越大，说明抗生素的抗菌活性越强。
三、实验材料与仪器1. 材料：- 细菌菌株：金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）- 抗生素：青霉素、红霉素、庆大霉素、链霉素- 琼脂培养基- 牛肉膏蛋白胨培养基- 水浴箱- 滴管- 铅笔- 玻璃板2. 仪器：- 培养箱- 电子天平- 灭菌器四、实验步骤1. 制备培养基：- 称取牛肉膏蛋白胨培养基，加入适量的蒸馏水，溶解后用电子天平称量，使培养基浓度为10g/L。
- 将溶解后的培养基分装至锥形瓶中，每瓶100mL，121℃高压灭菌15分钟。
- 待培养基冷却至50℃左右，加入琼脂粉，充分搅拌均匀。
- 将琼脂培养基倒入培养皿中，待其凝固。
2. 接种细菌：- 将金黄色葡萄球菌接种至牛肉膏蛋白胨培养基中，37℃培养24小时。
3. 制备抗生素纸片：- 将抗生素粉末用生理盐水溶解，配制成一定浓度的溶液。
- 用滴管将溶液滴加到无菌滤纸上，使滤纸充分浸润。
- 将滤纸晾干，制成抗生素纸片。
4. 抑菌圈实验：- 将制备好的琼脂培养基上的细菌菌落刮去，并用无菌镊子将抗生素纸片贴在培养基表面。
- 将培养皿倒置放入培养箱中，37℃培养24小时。
5. 观察与记录：- 观察培养皿中抗生素纸片周围是否形成抑菌圈，并记录抑菌圈的大小。
五、实验结果与分析1. 实验结果：- 青霉素：抑菌圈直径为15mm- 红霉素：抑菌圈直径为10mm- 庆大霉素：抑菌圈直径为20mm- 链霉素：抑菌圈直径为8mm2. 结果分析：- 根据抑菌圈的大小，可以判断金黄色葡萄球菌对不同抗生素的敏感性。
抗生素抑菌现象的观察原理
抗生素抑菌现象的观察原理抗生素是能选择性抑制或杀灭微生物的化学物质,应用于临床可以治疗感染性疾病。
抗生素抑菌现象的观察实验可以直观地展示抗生素的抑菌作用,其原理如下:1. 实验材料需要准备培养皿、细菌液体培养基、抗生素溶液、无菌棉签、不同种类的细菌株等。
培养基一般选择琼脂培养基,可以固化成凝胶状方便操作。
抗生素溶液浓度要适中,一般采用抑菌浓度,不要太高或太低。
细菌株选择对抗生素敏感的菌株。
2. 操作步骤第一步,用焚烧法对培养皿进行灭菌,待其冷却后平铺上一层约4毫米厚的琼脂培养基,待其固化。
第二步,用无菌棉签蘸取含不同细菌的液体菌液,在固化的琼脂平板上划线涂抹,每种菌液涂两条平行线。
线与线间间隔约2-3厘米,不同菌液线间隔更大些。
第三步,待菌液吸收后,用其他无菌棉签蘸取不同浓度的抗生素溶液,在菌液涂抹线之间perpindicularly涂抹,使两条菌液线与抗生素线垂直交叉。
第四步,将划线涂抹好的培养基平板置于恒温培养箱中孵育一夜。
观察交叉区菌落生长情况。
3. 结果分析如果抗生素对对应细菌株有抑菌作用,则交叉区会出现明显的抑菌带,交叉处细菌生长受到不同程度抑制,无法形成菌落。
根据抑菌带的宽度可以推断抗生素的抑菌能力:抑菌带越宽表示抗生素抑菌能力越强。
如果交叉区菌落生长与其他区块相似,则说明该抗生素对该细菌株没有抑菌作用。
通过上述方法,可以明确观察到抗生素对不同细菌的抑制效果,并可以定量测定抗生素的抑菌范围。
这种方法直观而有效,是评价抗生素抗菌特性的常用实验方法。
需要注意的几个要点:1)琼脂培养基的浓度要合适,不能过浓过稀;2)划线要轻柔,防止划破琼脂底层; 3)交叉线要垂直交叉,交叉处要紧密贴合;4)抗生素浓度要选择一个适中的抑菌浓度;5)涂抹时要避免不同菌株之间交叉污染。
综上所述,抗生素抑菌实验的基本原理是在琼脂平板上涂布敏感菌株,与不同浓度抗生素溶液交叉,通过观察交叉区菌落生长情况来评估抗生素的抑菌特性。
探究抗生素抑菌效果试验报告
探究抗生素抑菌效果试验报告抗生素是一类可以杀灭或抑制细菌生长的药物。
它们是治疗细菌感染的重要药物之一。
本次试验旨在探究不同种类的抗生素在抑制不同菌株生长上的差异。
首先，我们选择了三种不同的抗生素，包括青霉素、氨苄西林和红霉素。
这些抗生素在医学上被广泛应用，并且都具有一定的杀菌效果。
接下来，我们选择了三种不同的菌株，包括大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和链球菌。
这些菌株在日常生活中比较常见，并且也是医院感染的主要病原体之一。
试验步骤如下：1. 准备培养基：我们使用了三种不同的培养基，分别是LB培养基、MHA培养基和BHI 培养基。
这三种培养基分别适用于不同的菌株。
2. 培养菌株：我们使用了以上三种菌株，将它们传到不同的培养基中，并在37℃下进行培养。
培养的时间根据不同的菌株而变化，大约为16-24个小时。
3. 制备抗生素：我们根据不同的抗生素要求，在合适的溶液中制备了不同浓度的抗生素。
4. 试验：将不同菌株在培养基中进行生长，并在生长适当阶段加入适量的抗生素。
接着观察这些菌株的生长状态，比较它们在不同抗生素浓度下的生长情况。
通过以上步骤，我们获得了以下结论：1. 不同菌株的敏感性有差异。
我们发现金黄色葡萄球菌对青霉素和氨苄西林的敏感性较高，而对红霉素的敏感性较低。
大肠杆菌对三种抗生素的敏感性都较高，经过较低浓度的抗生素处理之后已经无法再生长。
链球菌在较低浓度的抗生素处理下依然能够正常生长。
2. 不同抗生素的抑菌效果不同。
在相同的浓度下，不同抗生素对同一菌株的抑菌效果不同。
我们发现对于大肠杆菌和金黄色葡萄球菌这两种菌株，红霉素的抑菌效果较好，而对于链球菌，则是氨苄西林的抑菌效果较好。
3. 抗生素浓度对抑菌效果有影响。
增加抗生素的浓度会提高抑菌效果，但是超过一定浓度之后，抑菌效果不再增加，甚至还会影响到正常细胞的生长。
总之，抗生素的抑菌效果存在差异，并且不同菌株的敏感性也有所不同。
在有需要开展抗菌治疗的情况下，应该根据具体情况，选择合适的药物并严格按照医嘱使用。
抗生素体外抑菌实验实验报告
抗生素体外抑菌实验实验报告本实验旨在探究不同类型抗生素对某一细菌菌种的体外抑菌效果。
实验原理：细菌的体外抑菌实验是评估抗菌药物对细菌生长的影响的一种常见方法。
该实验通过在固体培养基上为细菌划线，将抗生素药物涂布在纸片上，再放置于已划好细菌的平板培养基上。
通过比较不同类型药物涂布的纸片与对照的空白纸片对细菌生长的影响，从而评价药物的抑菌作用。
实验步骤：1.选取一种目标细菌，本实验选用金黄色葡萄球菌。
2.准备好含有所需抗生素的培养基。
3.将目标细菌接种在平板培养基上并使其生长至对数生长期。
4.在平板培养基上划线并将贴有不同抗生素药物的纸片置于相应位置。
5.将培养基培养在恰当条件下，通常需要48小时，直到菌落在对照组与不同抗生素组之间的差异变得显著。
6.通过比较不同种类抗生素药物对金黄色葡萄球菌的体外抑菌效果进行分析。
实验结果：利用本实验方法，我们测试了对金黄色葡萄球菌的八种不同类型的抗生素的体外抑菌效果。
实验结果表明不同类型抗生素的抑菌效果明显不同。
其中，抗菌肽和β-内酰胺类抗生素对金黄色葡萄球菌生长的抑制效果最强，其次是氨基糖苷和磺胺类抗生素。
而抗酸菌素类抗生素和大环内酯类抗生素显示出对金黄色葡萄球菌的较弱抑菌能力，而两性霉素B和卡那霉素则没有表现出任何抑菌效果。
实验结论：通过本实验，我们得出了不同类型抗生素对某一细菌（金黄色葡萄球菌）的体外抑菌效果。
不同类型抗生素的抑菌效果明显不同。
抗菌肽和β-内酰胺类抗生素对金黄色葡萄球菌生长的抑制效果最强，其次是氨基糖苷和磺胺类抗生素。
而抗酸菌素类抗生素和大环内酯类抗生素显示出对金黄色葡萄球菌的较弱抑菌能力，而两性霉素B和卡那霉素则没有表现出任何抑菌效果。
这些实验结果对于抗菌药物选择和用药方案的制定具有重要参考意义。
实验11-抗生素的抑菌试验
实验十一抗生素的抑菌试验一目的要求1、掌握纸片法测定抗生素抗菌作用的基本方法2、了解抗生素的抗菌谱二实验原理抗生素是某些植物与微生物生长到对数期前后所产生的次生代谢产物，其在低浓度下可其它微生物生长具抑制作用或杀死作用的物质。
抗生素对敏感微生物的作用机理分为抑制细胞壁的形成、破坏细胞膜的功能、干扰蛋白质合成及阻碍核酸的合成。
由于不同微生物对不同抗生素的敏感性不一样，抗生素的作用对象就有一定的范围，这种作用范围成为抗生素的抗菌谱，作用对象广的抗生素称为广谱抗生素，作用对象少的抗生素称为窄谱抗生素。
而且当某种抗生素长时间用于敏感微生物生长后，即使同一种菌的不同菌株对不同药物的敏感性也常发生改变，甚至出现耐药菌株，亦即产生抗性菌株，则抗生素将失去对抗性菌株生长的抵制，只以采用新的抗生素才可能控制抗性菌株的生长与繁殖，因而不断开发新的抗生素是保健人类身体健康的重要工作。
新抗生素产生菌的分离筛选应通过拮抗菌发酵，然后以发酵产物进行抗菌活性实验，根据实验结果而获得产新抗生素的菌株。
微生物代谢产物的抗菌活性常以管碟法与纸法进行检测，根据透明抑菌圈的有无与大小作为依据。
三实验器材1、菌种枯草杆菌、大肠杆菌。
2、培养基MH（Mueller-Hintion）琼脂。
3、试剂青霉素、链霉素。
四方法步骤1、无菌滤纸片以孔径6mm打孔器将滤纸打为圆形纸片，放入培养皿内，121℃蒸汽湿热灭菌，100℃烘干2h。
2、抗生素溶液制备将取适量青霉素、链霉素，以无菌水溶解。
3、指示菌悬浮液的制备枯草杆菌、大肠杆菌斜面菌种分别以无菌水洗下菌苔细胞，到入无菌三角瓶内，制备适宜浓度的细胞悬浮液。
4、混菌平板制备取批示菌细胞悬浮液1mL加入无菌培养皿内，再加入温度为43~45℃的PDA培养基或牛肉膏蛋白胨琼脂培养基20mL，立即振荡使细胞与培养基混合均匀，静置冷凝。
5、平板加抗生素溶液将滤纸片在抗生素溶液中充分浸泡2min以上，然后将纸片放于混菌平板上，每皿呈三角形放3点，每点贴放纸片2张。
抑菌试验
抑菌试验：用于测定抗菌药物体外抑制细菌生长效力的试验称为抑菌试验。
通过抑菌实验,可以测定一个药物的最低抑菌浓度,用以评价该药物的抑菌性能,这是抗菌药物的最基本的药效学数据。
主要方法有进行定性测定的扩散法（如抑菌斑试验）和进行定量测定的稀释法（如最低抑菌浓度实验）。
1.常量肉汤稀释法抗菌药物贮存液制备1.1.1.抗菌药物贮存液制备抗菌药物贮存液浓度不应低于1000μg/ml(如1280μg/ml)或10倍于最高测定浓度。
溶解度低的抗菌药物可稍低于上述浓度。
抗菌药物直接购自厂商或相关机构。
所需抗菌药物溶液量或粉剂量可公式进行计算。
例如：需配制100 ml浓度为1280μg/ml的抗生素贮存液，所用抗生素为粉剂，其药物的有效力为750μg/mg。
用分析天平精确称取抗生素粉剂的量为182.6 mg。
根据公式计算所需稀释剂用量为：（182.6 mg×750μg/ml）/1280μg/ml=107.0ml，然后将182.6 mg 抗生素粉剂溶解于107.0ml稀释剂中。
制备抗菌药物贮存液所用的溶剂和稀释剂见表5。
配制好的抗菌药物贮存液应贮存于-60℃以下环境，保存期不超过6个月。
药敏试验用抗菌药物浓度范围1.1.2.药敏试验用抗菌药物浓度范围根据NCCLS抗菌药物敏感性试验操作标准，药物浓度范围应包含耐药、中介和敏感分界点值，特殊情况例外。
培养基1.1.3. 培养基NCCLS推荐使用Mueller-Hinton（MH）肉汤，pH7.2~7.4。
需氧菌及兼性厌氧菌在此培养基中生长良好。
在测试葡萄球菌对苯唑西林的敏感性时，应在肉汤中加入2%（W/V）氯化钠，按制造厂家的要求配制需要量的MH肉汤。
嗜血杆菌属菌使用HTM肉汤，肺炎链球菌和其它链球菌使用含2%~5%溶解马血的MH肉汤。
接种物的制备1.1.4.接种物的制备有2种方法配制接种物，一是细菌生长方法，用接种环挑取形态相似待检菌落3-5个，接种于4-5ml的水解酪蛋白（MH）肉汤中，35℃孵育2-6h。
抗生素抑菌实验实验报告
一、实验目的本实验旨在探究不同种类抗生素对细菌的抑菌效果，以及不同抗生素对同一种细菌的抑菌效果差异，为临床合理使用抗生素提供理论依据。
二、实验原理抗生素是具有抗菌作用的药物，通过抑制细菌生长或杀死细菌来达到治疗感染的目的。
本实验采用琼脂扩散法，将抗生素与细菌共同培养在琼脂平板上，观察抗生素对细菌的抑菌效果。
三、实验材料与仪器1. 实验材料（1）细菌：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌（2）抗生素：青霉素、氯霉素、硫酸庆大霉素、红霉素（3）琼脂粉、牛肉膏、蛋白胨、生理盐水2. 实验仪器（1）恒温培养箱（2）无菌操作台（3）无菌试管（4）微量移液器（5）培养皿四、实验方法1. 制备菌悬液将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基，37℃恒温培养18-24小时，用生理盐水洗涤3次，制成菌悬液。
2. 配制抗生素溶液将青霉素、氯霉素、硫酸庆大霉素、红霉素分别用生理盐水配制成不同浓度的溶液。
3. 制备琼脂平板将牛肉膏蛋白胨培养基与琼脂粉混合，加入适量的生理盐水，高压蒸汽灭菌后，倒入培养皿中，待凝固。
4. 琼脂扩散法（1）将菌悬液均匀涂布于琼脂平板表面。
（2）用无菌移液器吸取抗生素溶液，滴加于琼脂平板上，使抗生素溶液在琼脂平板上扩散。
（3）37℃恒温培养24小时，观察并测量抑菌圈直径。
五、实验结果与分析1. 不同抗生素对金黄色葡萄球菌的抑菌效果实验结果显示，青霉素、氯霉素、硫酸庆大霉素、红霉素对金黄色葡萄球菌均具有明显的抑菌效果，其中青霉素的抑菌效果最强，抑菌圈直径为15mm；氯霉素次之，抑菌圈直径为12mm；硫酸庆大霉素和红霉素的抑菌圈直径分别为10mm和8mm。
2. 不同抗生素对大肠杆菌的抑菌效果实验结果显示，青霉素、氯霉素、硫酸庆大霉素对大肠杆菌均具有明显的抑菌效果，其中青霉素的抑菌效果最强，抑菌圈直径为12mm；氯霉素次之，抑菌圈直径为10mm；硫酸庆大霉素的抑菌圈直径为8mm。
抗生素对细菌的抑菌作用实验感想
抗生素对细菌的抑菌作用实验感想抗生素对细菌的抑菌作用实验是一项非常常见和重要的生物实验，通过观察抗生素对细菌的影响，可以研究和了解抗生素的抗菌机制，对于改善抗生素的设计和使用具有重要的指导意义。
在本次实验中，我通过观察和记录细菌在不同条件下的生长情况，深刻体会到了抗生素的抑制作用以及一些实验操作上的注意事项。
首先，在实验中，我所使用的细菌株是大肠杆菌，这是一种广泛存在于环境中和人体肠道内的细菌，具有耐受抗生素的能力。
通过选择这样一种细菌株，可以更好地模拟实际情况下的抗生素应用效果。
同时，实验中使用的抗生素是我们平时临床常用的药物，如青霉素和红霉素等，这些抗生素具有不同的抑菌机制和广谱抗菌作用，可以更好地了解抗生素的多样性和特点。
在实验过程中，我按照实验指导书的步骤进行了抗生素对细菌的抑菌作用实验。
首先，我制备了含有抗生素的琼脂平板，接种了一定数量的细菌菌液，然后将琼脂平板培养在适宜的温度下。
在培养的过程中，我观察到抗生素对细菌的抑制作用非常明显，细菌在抗生素作用下的生长受到了显著的抑制。
特别是在抗生素浓度较高的琼脂平板上，几乎没有细菌生长的迹象。
这说明抗生素具有很强的杀菌或抑菌能力，可以通过破坏细菌细胞壁、抑制蛋白合成或影响细菌的代谢过程等方式来抑制细菌的增殖。
而在抗生素浓度较低的琼脂平板上，虽然细菌生长比较缓慢，但仍然有一些细菌生长形成菌落。
这说明抗生素对于不同细菌株具有不同的抑制效果，也与细菌耐药性有关。
在实验过程中，我还观察到了一些实验操作上的注意事项。
首先，制备含有抗生素的琼脂平板时，需要严格控制抗生素的浓度。
过高的抗生素浓度可能导致琼脂平板中的抗生素溢出，影响实验结果的准确性。
其次，在接种细菌菌液时，需要使用高效的无菌技术，避免细菌菌液污染。
此外，在培养过程中，需要控制培养时间和温度，确保实验的可重复性和可比性。
通过本次实验，我对抗生素对细菌的抑菌作用有了更深刻的认识。
抗生素是一种非常重要的药物，可以有效治疗多种细菌感染疾病。
抗生素抑菌实验实验报告
抗生素抑菌实验实验报告抗生素抑菌实验实验报告一、引言抗生素是一类能够抑制或杀死细菌的药物，对于治疗细菌感染起着至关重要的作用。
然而，近年来，抗生素耐药性的问题日益严重，给人类健康带来了巨大的挑战。
本实验旨在通过抗生素抑菌实验，研究不同抗生素对细菌生长的抑制作用，进一步了解抗生素的作用机制，为合理使用抗生素提供实验依据。
二、实验材料与方法1. 实验材料：- 大肠杆菌培养基- 水平培养皿- 纯化的不同抗生素溶液（包括青霉素、头孢菌素和红霉素）- 细菌培养液2. 实验方法：- 准备细菌培养液：将大肠杆菌接种于含有营养物质的培养基中，培养24小时。
- 制备抗生素溶液：将各种抗生素溶解于适量的溶剂中，制成不同浓度的溶液。
- 进行抗生素抑菌实验：将细菌培养液均匀涂布于水平培养皿中，然后在不同区域加入不同浓度的抗生素溶液。
培养24小时后，观察抗生素对细菌生长的抑制情况。
三、实验结果在本实验中，我们选择了青霉素、头孢菌素和红霉素作为抗生素，分别制备了不同浓度的溶液。
实验结果显示，随着抗生素浓度的增加，对细菌的抑制作用也逐渐增强。
在低浓度下，细菌的生长并未受到明显的抑制，但随着抗生素浓度的增加，细菌的生长逐渐减缓甚至停止。
在高浓度下，细菌的生长完全被抑制，培养皿上观察不到任何细菌生长。
四、讨论与分析通过本实验，我们可以看出抗生素对细菌的抑制作用与其浓度呈正相关关系。
这是因为抗生素能够干扰细菌的生长和繁殖过程，从而达到抑制细菌的效果。
当抗生素浓度较低时，其作用不足以抵消细菌的生长速度，因此细菌仍能够继续繁殖。
但随着抗生素浓度的增加，抗生素对细菌的抑制作用逐渐增强，最终导致细菌生长停止。
同时，不同的抗生素对不同类型的细菌也会产生不同的抑制效果。
一些细菌可能对某种抗生素具有抵抗能力，即产生了抗药性。
这是由于细菌的遗传变异导致的，使其能够产生能够破坏或改变抗生素的作用机制的酶。
因此，在临床使用抗生素时，应根据细菌的抗药性情况选择合适的抗生素。
抗生素抑菌试验的原理
抗生素抑菌试验的原理
1. 试验目的抗生素抑菌试验的目的是测试不同抗生素对特定细菌的抑制或杀灭作用,从而为临床合理选用抗生素提供依据。
2. 试验原理在nutrient agar平板上培养形成细菌肥落,然后在平板表面置入含有不同浓度抗生素的filter paper 片,经一定作用时间后,观察抗生素对细菌生长的抑制情况,判断抗生素的抑菌力。
3. 方法步骤将待测试细菌制成suspension,涂布培养基表面,平板表面置入浸有不同浓度抗生素的filter paper片,37C下培养18-24小时,最后观察抗生素对细菌生长的抑制环大小。
4. 结果判定根据抑菌环直径大小判断抗生素抑菌能力:抑菌环越大,表示抗生素抑菌力越强。
细菌lawn内生长的菌落数量也可以反映抗生素的抑菌效果。
5. 注意事项抗生素活性可能受试验条件影响,需要控制平板含水量,培养基种类,pH值,细菌接种量等条件。
操作需要焕平,防止交叉污染。
6. 结果分析比较不同抗生素在相同浓度下的抑菌环大小,评价其抗菌能力。
绘制抑菌环直径与抗生素浓度关系曲线,确定抗生素的最小抑菌浓度。
7. 应用价值抗生素抑菌试验可以为临床提供依据,指导医生根据细菌的药敏结果选用合适有效的抗生素,提高治疗效果,预防抗药性。
8. 发展趋势抗生素抑菌试验方法在自动化检测和靶向抗菌药物筛选方面得到广泛应用。
抗生素联合用药抑菌试验也成为研究热点。
综上所述,抗生素抑菌试验通过观察不同抗生素对细菌生长的抑制效应,来评价其抗菌活性,为临床合理用药提供实验依据。
这一方法具有重要的临床应用
价值和广阔的发展前景。
抑菌实验
四、抑菌试验1．Optochin敏感试验(1)原理：Optochin(奥普托欣)是盐酸乙基氢化羟基奎宁的商品名。
对肺炎链球菌有特异抑制作用，其作用机制可能是干扰叶酸生物合成作用，而对其它链球菌则无此作用。
(2)方法：用棉拭子将待检菌的肉汤培养物均匀涂布于血琼脂平板上，贴上一张含5μg奥普托欣纸片，置烛缸或二氧化碳孵箱，35℃孵育18~24h，观察结果。
(3)结果：抑菌圈直径大于14mm为敏感，小于或等于14mm为阴性。
(4)应用：主要用于肺炎链球菌（敏感）与其它链球菌（耐药）的鉴别。
2．杆菌肽敏感试验(1)原理：A群链球菌对杆菌肽几乎是100%敏感，而其它群链球菌对杆菌肽通常耐药。
故此试验可对链球菌进行鉴别。
(2)方法：用棉拭子将待检菌的肉汤培养物均匀涂布于血琼脂平板上，稍干后贴一张含0.04U 的杆菌肽纸片，置35℃孵育18~24h，观察结果。
(3) 结果：抑菌圈直径大于10mm为敏感，小于10mm为耐药。
(4)应用：主要用于A群与非A群链球菌的鉴别。
从临床分离的菌株中有5%~15%非A群链球菌也对杆菌肽敏感，如6%的B群链球菌、7.5%的C群链球菌和G群链球菌等。
3．O/129试验(1)原理：O/129（2，4二氨基-6，7-二异丙基喋啶）能抑制弧菌属、发光杆菌属和邻单胞菌属细菌生长，而气单胞菌属和假单胞菌属细菌则耐药。
(2)方法：用棉拭子将待检菌菌悬液均匀涂布于碱性琼脂平板上，将10μg/片及150μg/片的O/129诊断纸片贴于平板上，置35℃孵育18~24h，观察结果。
(3)结果：出现抑菌圈者表示敏感，无抑菌圈者为耐药。
(4)应用：主要用于弧菌属、邻单胞菌属与气单胞菌属的鉴别，弧菌属和邻单胞菌属菌为敏感，气单胞菌属菌为耐药。
其它菌属有发光杆菌属为敏感，假单胞菌属为耐药。
细菌药敏试验2010-12-09 15:40:52| 分类：专业文章 | 标签：高校公共卫生 |字号订阅各种病原菌对抗菌药物的敏感性不同，同种细菌的不同菌株对同一药物的敏感性有差异，检测细菌对抗菌药物的敏感性，可筛选最有疗效的药物，用于临床，对控制细菌性传染病的流行至关重要。
实验11-抗生素的抑菌试验
实验11-抗生素的抑菌试验实验目的：本实验的目的在于了解抗生素的抑菌作用并学习抗生素敏感性试验的方法。
实验原理：抗生素是广泛用于医生领域以及日常生活中的一种药物。
抗生素可以抑制或杀死致病菌，从而治疗疾病。
不同类型的抗生素作用机制不同，但抗生素大部分作用于细菌的生长和繁殖过程中的关键步骤，如细菌细胞壁的合成或DNA复制等。
不同种类的细菌对抗生素的敏感性也不相同，有些细菌对某些抗生素产生了耐药性，因此了解细菌对抗生素的敏感性是非常重要的。
抗生素敏感性试验是一种常见的实验方法，旨在寻找一种特定的抗生素是否能够杀死或抑制正在生长的细菌。
该实验方法可以采用不同的技术，例如扩散法、筛选法、稀释法等。
在该实验中，我们将采用扩散法来测定细菌对抗生素的敏感性。
扩散法试验包括以下几个步骤：1. 准备培养基：将适量的琼脂糖肉汤（TSA）加入试管中，加热至完全融化，然后立即冷却至50℃左右，以避免其蒸发。
2. 种植细菌：将待测试的细菌菌液转移到琼脂糖肉汤中，并搅拌均匀。
然后，将菌液倒入含有琼脂糖的平板培养基中。
让其在室温下凝固，然后将其在温度适当的培养箱中孵育24小时。
3. 准备抗生素滤纸：将抗生素滤纸切成适当大小，并在其中加入一定量的抗生素药物。
4. 将滤纸放在琼脂糖肉汤的表面上，让其均匀地铺在平板表面上。
然后，将詹森器或其他适当的装置用于压缩滤纸，使其与培养基接触。
5. 将培养板放置于适当的环境中孵育，一般是37℃下的恒温箱。
然后，在24小时后，评估抗生素在细菌生长上的作用。
根据细菌在平板上的生长和抗生素滤纸周围的清晰区域，可以得出抗生素对细菌的敏感性结果。
实验材料：1. 感兴趣的抗生素药物2. 琼脂糖肉汤（TSA）3. 需要测试的细菌菌液实验步骤：1. 准备琼脂糖肉汤培养基。
2. 在试管中接种需要测试的细菌，搅拌均匀。
将其倒入含有琼脂糖肉汤的平板培养基中。
在放置室温下使其平板凝固，然后将其置于适当温度的培养箱中孵育24小时。
抗生素体外及体内抑菌效应检测的实验综述报告
抗生素体外及体内抑菌效应检测的实验综述报告1 实验意义本综合实验项目作为微生物学实验的补充和深入，选择抗生素为实验材料，主要内容包括抗生素的体外抑菌实验、抗生素的体内抗菌实验，形成一个整体的综合性实验。
在实验内容上强调系统性、专业性、实用性和趣味性；涉及微生物学专业多项技术原理、复杂流程，将整体实验课程的水平从分散的基础实验提升到综合性、系统性更高的层次，对学生的动手能力、专业水平、科研素质等进行全面的培养和提高，此即本项目设计的意义所在。
2 实验目的（1）了解常用抗菌药物的抗菌作用及抗菌范围，并掌握抗菌药物的某些体外抗菌实验；（2）观察血液、细菌、药物三者相互作用，以加深学生对抗菌药物药理作用的认识；（3）通过理论联系实际的学习和操作训练，训练学生掌握医学微生物学综合实验技能和实验技巧，提高动手能力，有助于学生科学世界观的形成；（4）培养学生独立操作、分析解决问题的能力，提高对微1/ 7生物学的兴趣，为学生独立创业提供一些创业技能思路。
3 实验原理金黄色葡萄球菌是机会致病菌，而抗菌药物在一定浓度下对其有抑制和杀灭作用。
抗菌药物一般是指具有抑菌或杀菌活性的药物，包括各种抗生素、磺胺类、咪唑类、硝基咪唑类、喹诺酮类等化学合成药物。
由细菌、放线菌、真菌等微生物经培养而得到的某些产物，或用化学半合成法制造的相同或类似的物质，也可化学全合成。
药物的体外抑菌实验，是指在体外测定药物抑制或杀灭细菌能力的实验。
它是常用抗菌实验的方法，其中最常用的方法有系列稀释法和琼脂扩散法。
稀释法有液体培养基连续稀释法和固体稀释法（斜面法）两种，这两种方法都可以用来测定药物的最小抑菌浓度（MIC）：是指该药物能抑制细菌生长的最低浓度，通常用？滋g/mL或U/mL 表示。
其结果判断方法为凡无肉眼可见细菌生长的药物最低浓度即为该菌的最小抑菌浓度（MIC）。
琼脂扩散法是将抗菌药物加至接种试验菌的平板表面，抗菌药物在琼脂胶内向四周自由扩散，其浓度随扩散距离增大而降低。
抗生素抑菌实验报告
抗生素抑菌实验报告抗生素抑菌实验报告引言：抗生素是一类能够抑制或杀死细菌生长的药物，广泛应用于医疗领域。
然而，近年来，由于滥用和不当使用抗生素，细菌对抗生素的抵抗性逐渐增强，导致了严重的公共卫生问题。
为了更好地了解抗生素的抑菌效果，本实验旨在研究不同类型的抗生素对细菌生长的影响。
实验设计：1. 实验材料：- 细菌培养基：含有营养物质的培养基，提供细菌生长所需的营养。
- 不同类型的抗生素：如青霉素、头孢菌素等。
- 培养皿：用于培养细菌的容器。
- 细菌培养物：含有特定细菌的培养物，用于实验。
- 培养箱：用于控制实验环境的温度和湿度。
2. 实验步骤：- 步骤一：准备细菌培养基和培养皿，将细菌培养基均匀倒入培养皿中。
- 步骤二：在培养皿上均匀涂抹细菌培养物，使细菌均匀分布。
- 步骤三：在培养皿上分别滴加不同类型的抗生素，形成不同的实验组。
- 步骤四：将培养皿放入预先调节好的培养箱中，控制温度和湿度。
- 步骤五：观察培养皿中细菌的生长情况，记录实验结果。
实验结果与分析：经过一段时间的培养，观察到不同实验组中细菌的生长情况有所不同。
下面将对实验结果进行分析：1. 对照组：对照组中没有加入任何抗生素，细菌在培养基上生长繁殖。
这是因为培养基提供了细菌所需的营养物质，使其能够正常生长。
2. 青霉素组：青霉素是一种广谱抗生素，对多种细菌具有抑制作用。
观察到在青霉素组中，细菌的生长明显受到抑制，数量较对照组明显减少。
这是因为青霉素能够破坏细菌细胞壁的合成，导致细菌无法正常生长和繁殖。
3. 头孢菌素组：头孢菌素是一种β-内酰胺类抗生素，对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均具有抑制作用。
观察到在头孢菌素组中，细菌的生长也受到明显抑制，数量明显减少。
这是因为头孢菌素能够抑制细菌的细胞壁合成，导致细菌无法正常生长和繁殖。
结论：通过本实验的结果可以得出以下结论：1. 抗生素对细菌的生长具有明显的抑制作用。
2. 不同类型的抗生素对细菌的抑制效果有所差异，这与抗生素的作用机制和细菌的耐药性有关。
抑菌实验原理
抑菌实验基本原理抑菌实验是一种常用的实验方法，用于评价物质对细菌的杀菌或抑制作用。
它可以帮助人们了解物质对细菌的作用机制，以及评估其在医药、食品、环境等领域的应用价值。
本文将详细介绍与抑菌实验原理相关的基本原理。
细菌与抗菌物质在了解抑菌实验的原理之前，我们首先需要了解一些基本概念。
细菌细菌是一类单细胞微生物，它们广泛存在于自然界中的各个环境中，包括土壤、水体、空气以及动植物体内。
有些细菌对人类和其他生物有益，如参与食品发酵和分解有机废弃物等；而另一些细菌则具有致病性，可以引起各种感染和疾病。
抗菌物质抗菌物质是指能够杀灭或抑制细菌生长和繁殖的化学物质。
它们可以通过多种途径发挥作用，如破坏细菌的细胞壁、干扰细菌的代谢过程或抑制细菌的DNA合成等。
常见的抗菌物质包括抗生素、消毒剂和防腐剂等。
抑菌实验原理抑菌实验是一种定性或定量评价物质对细菌生长和繁殖的影响的实验方法。
它可以通过观察培养基上的细菌生长情况来判断物质是否具有抗菌活性，并进一步评估其抑制效果的强弱。
实验步骤一般来说，抑菌实验包括以下几个基本步骤：1.培养基准备：将所需培养基按照一定比例配制好，并进行无菌处理，以确保试验过程中不会引入其他微生物。
2.细菌接种：从培养基上选择适当数量的细菌，进行预培养，使其达到合适的生长状态。
然后将预培养液加入到新鲜培养基中，使其浓度适宜。
3.抗菌物质添加：将要测试的抗菌物质加入到含有细菌的培养基中，使其与细菌充分接触。
4.培养：将含有细菌和抗菌物质的培养基置于适宜的环境条件下，如温度、湿度和氧气含量等。
培养一定时间后，观察细菌的生长情况。
5.结果评估：根据实验结果判断抗菌物质对细菌的抑制效果，可以通过观察培养基上是否有细菌生长、细菌数量的变化或测定抑菌圈直径等指标来评估。
抑菌机制抗菌物质对细菌的抑制作用主要通过以下几种机制发挥：1.破坏细胞壁：某些抗菌物质能够破坏细菌的细胞壁结构，导致其内容物外溢而死亡。
这类物质通常作用于革兰氏阳性细菌，因为它们具有较厚的层状结构。
抗生素体外及体内抑菌效应检测的实验综述报告
抗生素体外及体内抑菌效应检测的实验综述报告
抗生素体外及体内抑菌效应检测是抗生素研究中最常用的实验技术，它可以用来评估抗生素抑制菌的程度。
主要包括体外试验和体内试验两部分。
体外实验主要有浓度效应曲线法、磷酸盐抗性测定法、Minimal Inhibitory Concentration（MIC）分析法和Mueller-Hinton法。
这些方法可以确定抗生素对待测菌的最小抑制浓度。
体内抑菌效应实验主要有咪唑类菌的试验室动物模型、抑菌作用的动物试验室模型和免疫功能障碍实验室模型。
这些实验都可以评估抗生素对各种病原微生物的抑制作用。
总而言之，抗生素体外及体内抑菌效应检测是衡量抗生素作用的重要方法，为临床药物的使用提供依据。
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实验十一抗生素的抑菌试验
一目的要求
1、掌握纸片法测定抗生素抗菌作用的基本方法
2、了解抗生素的抗菌谱
二实验原理
抗生素是某些植物与微生物生长到对数期前后所产生的次生代谢产物，其在低浓度下可其它微生物生长具抑制作用或杀死作用的物质。
抗生素对敏感微生物的作用机理分为抑制细胞壁的形成、破坏细胞膜的功能、干扰蛋白质合成及阻碍核酸的合成。
由于不同微生物对不同抗生素的敏感性不一样，抗生素的作用对象就有一定的范围，这种作用范围成为抗生素的抗菌谱，作用对象广的抗生素称为广谱抗生素，作用对象少的抗生素称为窄谱抗生素。
而且当某种抗生素长时间用于敏感微生物生长后，即使同一种菌的不同菌株对不同药物的敏感性也常发生改变，甚至出现耐药菌株，亦即产生抗性菌株，则抗生素将失去对抗性菌株生长的抵制，只以采用新的抗生素才可能控制抗性菌株的生长与繁殖，因而不断开发新的抗生素是保健人类身体健康的重要工作。
新抗生素产生菌的分离筛选应通过拮抗菌发酵，然后以发酵产物进行抗菌活性实验，根据实验结果而获得产新抗生素的菌株。
微生物代谢产物的抗菌活性常以管碟法与纸法进行检测，根据透明抑菌圈的有无与大小作为依据。
三实验器材
1、菌种枯草杆菌、大肠杆菌。
2、培养基MH（Mueller-Hintion）琼脂。
3、试剂青霉素、链霉素。
四方法步骤
1、无菌滤纸片以孔径6mm打孔器将滤纸打为圆形纸片，放入培养皿内，121℃蒸汽湿热灭菌，100℃烘干2h。
2、抗生素溶液制备将取适量青霉素、链霉素，以无菌水溶解。
3、指示菌悬浮液的制备枯草杆菌、大肠杆菌斜面菌种分别以无菌水洗下菌苔细胞，到入无菌三角瓶内，制备适宜浓度的细胞悬浮液。
4、混菌平板制备取批示菌细胞悬浮液1mL加入无菌培养皿内，再加入温度为43~45℃的PDA培养基或牛肉膏蛋白胨琼脂培养基20mL，立即振荡使细胞与培养基混合均匀，静置冷凝。
5、平板加抗生素溶液将滤纸片在抗生素溶液中充分浸泡2min以上，然后将纸片放于混菌平板上，每皿呈三角形放3点，每点贴放纸片2张。
6、培养与观察将平板放于33℃左右的温度培养，每24h测量一次透明抑菌圈直径，共测量3次。
五结果
1、实验结果
测量每个平板3个抑菌圈直径，计算每次测量各平板3个抑菌圈直径的平均值，结果填于表内。
表1 青霉素对供试菌的抑菌效果（抑菌圈直径：mm）
培养时间
菌种名
244896120144168
表2 链霉素对供试菌的抑菌效果（抑菌圈直径：mm）
培养时间
菌种名
244896120144168
2、结果分析
1 菌液制备
1）对数生长法：从琼脂平板上选取至少3~5个形态特征一致的菌落，用接种环转移至含4~5ml的肉汤培养管（如胰酶消化大豆肉汤）中，35℃培养2~6h。
用无菌盐水或肉汤调整菌液浊度相当于麦氏标准。
2）直接菌落法：从培养18-24h的非选择性培养基（如血琼脂）平板上，挑取单个菌落，直接用肉汤或无菌盐水制成麦氏标准浊度的悬液。
2 接种
细菌悬液制备后15min内接种至MH琼脂平板。
用无菌棉拭醮取菌悬液，在管内壁液面上方旋转紧压，将多余菌液挤去，最后沿平板内缘涂抹一周。
3 贴药敏纸片
涂布后的平板在室温下干燥3~5min，用纸片分配器或无菌镊子将纸片贴于琼脂表面并轻压，使纸片与琼脂表面完成接触。
各纸片中心相距应大于24mm，纸片贴上后就不能再移动位置。
4 培养
将平板倒置放入35℃孵箱（厌氧菌敏平板应放置于5%~10%CO2环境中），16~18h读取结果，葡萄球菌和肠球菌必须培养24h以检测对苯唑西林和万古霉素的耐药性。
5 结果判断
抑菌圈的直径（包含纸片的直径），以毫米数报告（取整数）。
根据CLSI判定标准测量抑菌圈直径大小可以判断细菌对该抗生素是敏感、中介还是耐药，如下图。
敏感（S）：表示常规剂量的测定药物在体内所达到的浓度能抑制或杀灭待测菌。
中介（I）：不是敏感性的度量，而是一个“缓冲区”，用以防止因微小的技术因素失控导致的结果偏差，因而其临床意义是不确定的，故不应作临床报告。
耐药（R）：表示常规剂量的测定药物在体内达到有效浓度时不能抑制待测菌生长。
五、结果与思考题
1、记录各菌对不同药物的敏感程度
2、思考题
（1）圆纸片药敏试验操作时应注意什么事项
（2）试述药敏试验的意义
实验十二细菌对抗生素的药物敏感试验
各种微生物对化学药物、抗生素等敏感性各异，即使同一种菌的不同菌株对不同药物的敏感性也常发生改变，甚至出现耐药菌株，亦即产生耐药性变异。
因此，测定细菌对药物的敏感程度，对于临床治疗中选择用药，及时控制感染具有重要意义。
常用方法有纸片弥散法和试管稀释法。
实验目的
一、纸片法
材料
1．菌种：枯草杆菌、大肠杆菌。
2．培养基：普通琼脂平皿培养基。
3．抗菌药物：青霉素、链霉素
、氯霉素、庆大霉素纸片。
4．其他：无菌棉棒、镊子、酒精缸等。
方法
1．用灭菌棉棒分别沾取金黄色葡萄球菌1号和2号及痢疾杆菌肉汤培养物，分别涂布在琼脂表面，每种菌涂一个平皿(沾菌棉棒用后，放入消毒缸中，勿乱丢)。
2．用小镊子沾酒精烧灼消毒，待冷后镊取一种药物纸片，贴在涂有细菌的平皿上，然后将镊子再沾酒精烧灼后，镊取另一种药物纸片，贴布于琼脂平皿另一处，如此将几种药物纸片贴完，各纸片距离要大致相等。
3．将已做好的药敏琼脂平皿，置37℃培养18～24小时，观察各药物纸片的抑菌效果。
即观察药物纸片周围有无抑菌圈，如有，在平皿底面用尺量其直径大小，测定药物敏感程度。
各种抗生素抑菌圈直径与敏感标准见表12-1。