黄山学院毕业论文资源植物扶芳藤叶中总黄酮提取物的抗氧化性研究
薄荷叶中黄酮类物质的提取及其抗氧化活性研究综述
安徽农业科学,JournalofAnhuiAgr.iSc.i2010,38(34):19335-19337,19340责任编辑姜丽责任校对傅真治薄荷叶中黄酮类物质的提取及其抗氧化活性研究邱贺媛,章宋洁(韩山师范学院化学系,广东潮州521041)摘要 [目的]优化薄荷(MenthahaplocalyxBriq.)叶总黄酮提取工艺,并研究其抗氧化活性,为薄荷叶总黄酮的提取利用提供依据。
4[方法]在单因素试验基础上,以黄酮提取率为指标,采用L9(3)正交试验,对超声波辅助提取,薄荷叶中的黄酮类物质的工艺进行优选。
并研究薄荷叶水提液和乙醇提取液对 OH的清除作用。
[结果]薄荷叶中总黄酮的最佳工艺为:以体积分数40%乙醇为溶剂,料液比1 30(W/V),超声波功率400W,提取温度50!,提取时间40min,此优化条件下,薄荷叶总黄酮得率达6.58%。
薄荷叶水提液对 OH有较强的清除作用,且随着总黄酮含量的增加逐渐增大,最高消除率达到44.23%;薄荷叶乙醇提液对 OH的清除作用随着黄酮含量的增加先缓慢上升后持续快速下降,总体上低于薄荷叶水提液对 OH的清除作用。
[结论]利用超声波协同乙醇提取薄荷叶中黄酮类物质的方法简单,可操作性强。
薄荷叶中黄酮类物质对 OH有较强的清除作用,可以开发利用。
关键词薄荷叶;总黄酮;超声波辅助提取法; OH;清除作用+中图分类号 S367.235 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2010)34-19335-03StudyonExtractingandAntioxidantActivityofFlavonoidsfromMenthahaplocalyxBriq. QIUHe yuanetal(DepartmentofChemistry,HanshanNormalUniversity,Chaozhou,Guangdong521041)Abs tract[Objective]TheresearchamiedtooptmiizetheextractionprocessofflavonoidsfromMenthaha plocalyxBriq.leavesandstudyitsan tioxidantactivitysoastoprovidethebasisforextractionandutilizationofflavonoidsfromMent hahaplocalyxBriq.leaves.[Method]Takingex4tractionratioofthetotalflavonoidsasindex,L9(3)orthogonaltestwasusedtooptmiizetheextra ctionprocessofflavonoidsfromMenthahaplo calyxBriq.leavesbyultrasound assistedextraction.AndtheclearingrateofwaterandethonalextractofMenthahaplocalyxBriq .leavestoOHwasstudied.[Result]Theresultsshowedthattheoptmialprocessofextractingflavonoidsfr omMenthahaplocalyxBriq.leaveswasasfollow:etha nolconcentration40%,solidliquidratioof130,ultrasonicpower400W,extractiontemperature50!,andextractiontmie40min.Undertheo ptmialconditions,theyieldofflavonoidsfromMenthahaplocalyxBriq.leaveswas6.58%.Thew aterextractofMenthahaplocalyxBriq.leaveshadstrongclearingeffecttoOH,andgraduallyincreasedwiththeraisingofflavonoidsconten;tThebiggestclearingratewa s44.23%.TheclearingeffectofethonalextractofMenthahaplocalyxBriq.leavesto OHincreasedslowlyfirs,tthendecreasedquicklyandcontinuouslywiththeraisingofflavonoi dsconten,tbutlessthantheeffectofitswaterextractinwhole.[Conclusion]Themethodofextrac tingflavonoidsfromleavesofMenthahaplocalyxBriq.byusingethanolandultrasonicwassmi ple,andhadstrongmaneuverability.TheflavonoidsfromleavesofMenthahaplocalyxBriq.ha dstrongclearingeffectto OH,andcouldbedevelopedandused.Keywords MenthahaplocalyxBriq.leaves;Flavonoids;Ultrasound assistedextraction;OH;Clearingeffect薄荷(MenthahaplocalyxBriq.)又称夜息香、鱼香菜、狗肉香、水益母和鱼香草等,为唇形科(Labiatae)薄荷属(Men tha)1年或多年生宿根性草本植物,是一种生长在低地、路边、河滩、湖边以及园地等处可以药食兼用的野菜,且是一种具有特种经济价值的芳香作物。
藤茶中抗氧化活性物质的提取及其二氢杨梅素生理活性分析
藤茶中抗氧化活性物质的提取及其二氢杨梅素生理活性分析藤茶系我国南方特有茶、药两用植物, 富含二氢杨梅素等黄酮类化合物, 具有显著的抗氧化、抗肿瘤和降血脂活性, 值得深入研究。
本文建立五个抗氧化活性评价指标, 用以评价响应面设计法优化的藤茶中抗氧化活性物质的超声强化提取工艺, 并采用超声辅助双水相提取方法优化藤茶中指标性成分——二氢杨梅素的提取工艺; 系统分析了二氢杨梅素体内外抗氧化及抑制肿瘤细胞增殖活性, 并探讨了过渡金属Cu2+在二氢杨梅素抑制肝癌细胞HepG2增殖中的作用:二氢杨梅素-Cu2+体系的促氧化活性是诱导HepG2细胞凋亡的主要机制。
研究结果为藤茶在食品、医药领域中的应用提供了理论依据。
主要研究内容如下:(1)藤茶中抗氧化活性物质的提取以总多酚、二氢杨梅素得率,Fe2 + 、Trolox 当量为指标, 通过单因素及响应面设计法, 确定了对抗氧化活性指标影响显著的三个因素(乙醇质量分数、超声提取温度和提取时间), 建立了抗氧化指标与三个因素间的数学模型,并得出藤茶中抗氧化活性物质的最佳提取工艺参数为:乙醇质量分数67%-68%,超声提取温度45〜48 °C ,时间27〜28 min,料液比25 mL-g-1在此优化工艺下藤茶多酚得率为358.4 ± 4.9 mg • g-1,二氢杨梅素得率315.6 ± 6.2 mg・g-1,Fe2+ 当量为570.6 ± 7.8 卩mol ・g-1,Trolox 当量为14.9 ± 0.55 mmol • g-1 (ABTS 法)和12.1 ±0.68 mmol • g-1 (DPPH 法)。
(2)藤茶中二氢杨梅素的双水相提取及富集建立硫酸铵-乙醇双水相超声辅助提取体系用于藤茶中二氢杨梅素的提取。
通过单因素试验及响应面分析法, 得出二氢杨梅素的最佳提取工艺参数为:硫酸铵质量分数26.96%,乙醇质量分数21.84%,提取温度51 C ,二氢杨梅素得率为360.4 ± 5.8 mg • g-1;硫酸铵质量分数27.30 %,乙醇质量分数23.08%,提取温度50°°C ,二氢杨梅素在两相间的分配系数为18.9 ± 1.1首次尝试制备富氮多孔磁性纳米材料N-g-C3N4-M nFe204用于双水相下相残留二氢杨梅素的富集,获得了初步富集工艺:在初始二氢杨梅素浓度20卩g • g-1, pH 5.5,硫酸铵质量分数4.0 %,萃取温度为25 C条件下,N-g-C3N4-MnFe2O4对二氢杨梅素吸附量可达到5.36mg • g-1,通过一次萃取,可富集75.4 %勺二氢杨梅素, 显现了一定的应用价值。
拟覆盆子叶总黄酮提取及抗氧化活性
拟覆盆子叶总黄酮提取及抗氧化活性
蒋华梅;石登红
【期刊名称】《贵州农业科学》
【年(卷),期】2015(043)011
【摘要】为充分发掘和综合利用贵州拟覆盆子资源,采用正交试验法优化回流提取拟覆盆子叶总黄酮的条件,以VC、BHT为对照,通过清除DPPH、ABTS+·自由基试验来评价总黄酮体外抗氧化能力.结果表明:拟覆盆子叶总黄酮最佳提取条件为体积分数70%乙醇、料液比1∶60(g/mL)、80℃提取2次、每次4h该条件下的总黄酮含量最高,达38.540 mg/g;总黄酮对DPPH、ABTS+·自由基有较强的清除能力,在试验所选浓度范围内(10.32~19.28 μg/mL),其清除能力均高于VC和BHT.拟覆盆子叶总黄酮含量较丰富,且抗氧化能力强,可作为天然抗氧化剂进行开发利用.【总页数】5页(P169-173)
【作者】蒋华梅;石登红
【作者单位】贵阳学院化学与材料工程学院,贵州贵阳550005;贵阳学院生物与环境工程学院,贵州贵阳550005
【正文语种】中文
【中图分类】O623.54;S567
【相关文献】
1.山荆子叶总黄酮体外抗氧化活性研究 [J], 杨秀东;郭永真;张嫔妹;周鸿立
2.湖北掌叶覆盆子叶水提取物降血糖作用动物实验和人群研究 [J], 樊柏林;刘家发;
龚晨睿;孙凡中;田辉;田洁;王玉娥;张启嫒;李新兰;曹可俊
3.覆盆子多酚的提取工艺及体外抗氧化活性研究 [J], 王蘇音;金清
4.覆盆子多酚的提取工艺及体外抗氧化活性研究 [J], 王苏音;金清;
5.王枣子叶总黄酮纤维素酶-超声辅助提取工艺的优化及其抗氧化活性 [J], 曹稳根;李梅梅;王晴;段红;翟科峰
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两种药用植物总黄酮体外抗氧化活性比较
两种药用植物总黄酮体外抗氧化活性比较黄秋洁;叶勇;欧贤红;刘华钢;宋云飞【期刊名称】《医药导报》【年(卷),期】2013(32)5【摘要】目的研究藤茶总黄酮和铁包金总黄酮的体外抗氧化活性.方法建立体外二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)、氧自由基(O-2·)和羟自由基(·OH)发生体系,检测藤茶总黄酮和铁包金总黄酮对DPPH·、O-2·和·OH的清除作用.结果藤茶总黄酮对DPPH·、O-2·、·OH的清除作用比铁包金总黄酮和维生素C强,其三种体系的半数抑制浓度(IC50)分别为(3.32±0.18),(227.41±184.45),(5.22±3.75) mg·L-1.铁包金总黄酮对DPPH·、O-2·、·OH的清除作用弱于维生素C,其DPPH·体系的IC50为(36.41±9.68) mg·L-1.结论藤茶总黄酮具有抗氧化活性,但铁包金总黄酮不能单独作抗氧化剂.%Objective Antioxidation of total flavonoids from Ampelopsis grossedntata and Berchemia lineata(L.) DC was studied in vitro.Methods Scavenging effects of total flavonoids from Ampelopsis grossedntata and Berchemia lineata(L.) DC on DPPH free radical, hydroxyl free radical, and superoxide free radical were determined by ELISA.Results The activity of total flavonoids from Ampelopsis grossedntata was the strongest,with the IC50 of three systems being (3.32±0.18) , (227.41± 184.45) ,(5.22±3.75) mg·L-1 ,respectively, while the activity of total flavonoids from Berchemia lineata(L.) DC was the lowest, with the IC50 of DPPH·system being (36.41 ±9.68) mg ·L-1.Conclusion The total flavonoids from Ampelopsisgrossedntata have strong antioxidant activity ,but the total flavonoids from Berchemia lineata(L.) DC could not be employed as antioxidant alone.【总页数】3页(P576-578)【作者】黄秋洁;叶勇;欧贤红;刘华钢;宋云飞【作者单位】桂林莱茵生物科技股份有限公司博士后工作站,广西桂林,541100【正文语种】中文【中图分类】R286;R965【相关文献】1.大孔树脂纯化红腰豆总黄酮的工艺优化及其体外抗氧化活性比较 [J], 黎英;曾珍清;张薇;郑兰香;李子月;陈雪梅2.11种铁线莲属药用植物地上部分总黄酮含量比较研究 [J], 冯玲枫;翁美娅;田富饶;陈建华3.凹叶景天不同部位醇提物总黄酮含量测定及其体外抗氧化活性比较 [J], 程琳茗;李炳伦;严爱娟;徐义云;陈京4.两种丹酚酸的体外抗氧化活性比较研究 [J], 柴媛媛;王芳;李艳丽;许卉5.两种姜科药用植物叶面积测定方法比较 [J], 荣海;范海兰;李茜;李键;洪伟;吴承祯因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
园艺植物扶芳藤叶总黄酮的体外抗氧化活性
园艺植物扶芳藤叶总黄酮的体外抗氧化活性邵菁菁;王恒;胡晓倩【摘要】通过总黄酮的提取及其对自由基的清除能力研究,可为园艺植物扶芳藤提供新的深层次开发和利用方向.将扶芳藤叶片洗净烘干至恒质量,粉碎后分别采用石油醚、75%乙醇在索式提取器里回流浸提,然后减压浓缩提取液,得到扶芳藤叶总黄酮提取物,以芦丁和Vc为阳性对照,进行体外抗氧化试验研究.结果显示,扶芳藤叶总黄酮提取物具有较强的体外抗氧化活性,清除超氧阴离子自由基能力远远优于芦丁和Vc,清除羟基自由基和DPPH·自由基的能力与芦丁和Vc相当,且在试验浓度范围内,清除能力随扶芳藤叶中总黄酮提取物浓度的增加而呈上升趋势.研究认为扶芳藤叶可加强作为天然抗氧化剂来源的应用,同时,该研究可为园艺植物扶芳藤具有的药用保健作用提供机理阐释的参考.【期刊名称】《天津农业科学》【年(卷),期】2016(022)001【总页数】5页(P37-41)【关键词】扶芳藤;总黄酮;自由基;抗氧化【作者】邵菁菁;王恒;胡晓倩【作者单位】黄山学院生命与环境科学学院,安徽黄山245041;黄山学院生命与环境科学学院,安徽黄山245041;黄山学院生命与环境科学学院,安徽黄山245041【正文语种】中文【中图分类】Q945扶芳藤(Euonymus fortunei (Turcz.)Hand.-Mzt.),属卫矛科(Celastraceae)卫矛属(Euonymus L.),其叶夏季黄绿相间、冬季颜色鲜红,且能抗SO2、SO3等有害气体,是优良的彩化绿化园艺植物;其根、茎、叶、果、种子等均可入药,具降压、镇痛抗风湿、改善微循环、抗衰老及提高机体非特异性免疫等药用和保健功能[1]。
摘其茎叶制成茶饮,不仅可以生津止渴,还具保健和药用价值[2]。
动物药理实验研究表明,扶芳藤的粗提物及其复合制剂具有明显的降压、防治风湿、抗应激、抗心肌缺氧、抗衰老和改善微循环等作用[3-6]。
因此,扶芳藤是一种既具观赏绿化园艺价值,又具药用、茶饮和保健价值的资源植物。
定心藤总黄酮的提取及抗氧化活性的研究
定心藤总黄酮的提取及抗氧化活性的研究
黄琼;田玉红;蒲香
【期刊名称】《中成药》
【年(卷),期】2012(034)011
【摘要】目的研究微波辅助提取定心藤总黄酮的提取工艺及其抗氧化活性.方法通过正交试验设计确定了定心藤总黄酮微波辅助提取的最佳条件,用DPPH·法研究定心藤总黄酮对自由基的清除作用.结果微波辅助提取定心藤总黄酮的最佳提取条件为微波功率处于中高火、含乙醇量65%、微波作用时间2 min、固液比1:40;抗氧化实验表明定心藤总黄酮对DPPH·有较好的清除作用,且清除能力随浓度的增加而增强,IC50值为0.000 663 (mg/mL),优于合成抗氧化剂BHA的抗氧化活性.结论微波辅助提取定心藤总黄酮的工艺便捷、效率高;定心藤总黄酮对DPPH·有较强的清除能力,具有明显的抗氧化活性.
【总页数】3页(P2242-2244)
【作者】黄琼;田玉红;蒲香
【作者单位】广西工学院生物与化学工程系,广西柳州545006
【正文语种】中文
【中图分类】R284.2
【相关文献】
1.双水相体系协同超声提取法分离定心藤总黄酮 [J], 李维峰;王娅玲;苏志龙;罗银玲
2.定心藤挥发油抗氧化活性研究 [J], 曾立;尹文清;朱琪;欧阳恩鸿
3.定心藤总黄酮对高脂血症大鼠降血脂的作用研究 [J], 杨光;杜云龙;朱开梅;顾生玖
4.糯米藤总黄酮的提取及其抗氧化活性 [J], 叶春;葛娜;朱秋劲;李秋萍;宋杰
5.定心藤中总黄酮的超声波提取工艺研究 [J], 柯永建;乐仁昌
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荷叶中黄酮类化合物的浸提、分离及其抗氧化性研究
荷叶中黄酮类化合物的浸提、分离及其抗氧化性研究荷叶是一种药食两用的天然植物原料。
植物黄酮类化合物具有抗氧化、抗衰老、治疗心血管疾病、降血脂等保健功能。
本文主要对荷叶中黄酮类化合物的提取、分离、纯化进行研究,同时对荷叶乙醇提取物的抗氧化性进行考察鉴定。
论文取得如下主要结果: 1.使用三种方法(自然凉干、烘干、低温冻干)对新鲜荷叶进行干燥,结果表明:低温冻干后的荷叶颜色浅绿、味清香、口感纯正、荷叶中黄酮类化合物含量最高,烘干的荷叶效果(色香味和荷叶黄酮含量)次之,自然凉干的荷叶效果最差。
2.通过单因素试验对影响荷叶中黄酮类化合物提取效率的主要因素进行考察,得到荷叶中黄酮类化合物的最佳浸提工艺是:浸提温度80℃,料液比1:30,乙醇溶液浓度70%,浸提时间2h。
在最佳浸提条件下对荷叶浸提三次,荷叶中黄酮类化和物可以基本溶出,荷叶黄酮含量达到36.19mg/g。
3.分别用三种方法分离纯化荷叶乙醇提取物,高速逆流色谱(HSCCC)分离效果最好,Sephdex LH-20柱层析分离效果次之,硅胶柱层析分离效果最差。
结合TLC 分析、颜色反应鉴定可知,荷叶乙醇提取物经HSCCC分离纯化,可以得到纯度很高的黄酮类化合物。
4.通过对荷叶乙醇提取物的定性鉴定,得出荷叶乙醇提取物中主要含有黄酮类化合物,生物碱含量很少,说明荷叶乙醇提取物中的主要功能成分(抗氧化)是黄酮类化合物。
荷叶乙醇提取物具有较强的抗氧化生理活性,为荷叶的保健功效提供理论基础。
5.对荷叶乙醇提取物进行抗氧化研究,试验表明荷叶乙醇提取物表现较强的抗氧化性。
可以显著地消除体外过氧化氢自由基;可以明显地延缓油脂的自动氧化过程;而且随着荷叶提取物浓度的增加,提取物的抗氧化性会随之增强。
毕业论文:黄酮类提取物抗氧化研究进展
本科生毕业设计题目:黄酮类提取物抗氧化研究进展年月日黄酮类提取物抗氧化研究进展摘要黄酮类化合物(Flavonoid)是广泛存在于植物界的一大类多酚类化合物,多以甙类形式存在,也有一部分以游离形式存在。
这类化合物在食物中有广泛的来源,具有极多的生物学作用。
据统计,目前已分离出的黄酮类类化合物已超过4000 种,为天然酚类化合物之首[1]。
关键词:黄酮类;抗氧化;进展Research progress of flavonoid antioxidantAbstractFlavonoids (Flavonoid) are a class of polyphenolic compounds widely existing in plants, mostly exist in glycoside form, there is also a part of present in a free form. The compounds have a wide range of sources in the food, has a biological effect. According to statistics, flavonoid compounds have been isolated has more than 4000 species, is a natural phenolic compounds of the first [1].Keywords: flavonoids; antioxidant; progress1黄酮类化合物的结构黄酮类化合物主要是指基本母核为2-苯基色原酮(2-pheny l-chromone)类化合物,目前泛指两个具有酚羟基的芳香环(A环和B环)通过中央三碳链相互作用连接而成的一系列化合物, 其基本骨架具有C6-C3-C6。
其中C3部分可以是脂链,或与C6部分形成六元或五元环,泛指2个苯环(A环与B环)通过中央三碳链相互连接而成的一系列化合物[2]。
红薯叶黄酮类化合物提取及其抗氧化作用研究
同时采用烘箱贮存法测定红薯叶黄酮类化合物在猪油中抗氧化活性 , 实验结果表明, 红薯叶黄酮类 化合物具有明显抗氧化效果 , 且抗氧化活性随加入量增加而增强 , 其抗氧化效果强于抗坏血酸和柠
檬酸。
关键 词 : 红薯 叶 ; 酮类化 合物 ; 黄 抗氧化 性
S u V 0 x r c i n 0 a 0 0 d l m we tD t t t d n e t a t0 fn v n i s r f0 s e 0 a 0
la e nd isa i x da te f c e v sa t nt0 i n fl t e
W ANG a 一 u DE Xi0 h a 。 NG n. Z Bi , HANG a _u L 一 Xio j n , oNG h— o g S ih n
( . a g a ie s y, e z 0 2 0 0, ia; . ie s yo ce c n e h o0 y0 ia, 1 Xin n nUnv ri Ch n h u4 3 O Chn 2 Unv ri f in ea dT c n 1g f t t S Chn
a d cti a i . n i c c d r
Ke 0 ds we t O a O la e ; V nO d; n i x d n c i t yW r :s e t t e V s na O i a tO i a t t y p a vi
中图分类号 : S2 2 T O . 3
H fi3 0 6 C ia3 Y n z0 oai a T c n lg Ii t, n z0 2 o 0 C ia ee2 O 2 , hn ;. o g h uV ct n l eh o0 y Itue Yo gh u4 5 o , hn ) o Is t
黄皮叶黄酮类化合物的抗氧化性研究
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D e v e l o p me n t C o mp a n y L i mi t e d , C h a o z h o u , G u a n g d o n g 5 1 5 6 3 2 , C h i n a )
Ab s t r a c t : 【 O b j e c t i v e ] T h e a n t i o x i d a n t a c t i v i t y o f l f a v o n o i d e x t r a c t s f r o m C l a u s e n a I a n s i u m l e a v e s w a s s t u d i e d S O a s t o p r o v i d e r e f e r e n c e s f o r f u t r h e r d e v e l o p m e n t a n d u t i l i z a t i o n .【 Me t h o d 】 T h e c l e a r a n c e e f f e c t s o n s u p e r o x i d e a n i o n f r e e r a d i —
扶芳藤总黄酮提取条件及其对衰老小鼠血清和心肌组织CAT、T-AOC、GSH-
-基础研究-扶芳藤总黄酮提取条件及其对衰老小鼠血清和心肌组织CAT、T-AOC、GSH-Px活性的影响张明,温奇龙,汪琴,蔡丹昭(广西医科大学,南宁530021)摘要:目的筛选扶芳藤总黄酮的最适提取条件,观察扶芳藤总黄酮提取物对衰老小鼠血清及心肌组织中抗氧化指标过氧化氢酶(CAT)、总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的影响。
方法通过正交试验L9(33)法确定扶芳藤总黄酮提取的最适温度、最适料液比以及最适提取时间。
取50只健康雄性昆明小鼠,随机分为正常组、模型组及扶芳藤总黄酮低、中、高剂量组各10只。
模型组及扶芳藤总黄酮组给予D-半乳糖0.2 mL/d颈背部皮下注射诱导衰老,正常组注射等量生理盐水,连续1周。
从第3周开始,扶芳藤总黄酮低、中、高剂量组分别给予0.2、0.4、0.8g/mL扶芳藤总黄酮提取液灌胃,正常对照组给予等量蒸憎水灌胃,连续4周。
最后一次给药后,取小鼠眼球血和心脏,检测血清、心肌组织中的CAT、T-AOC、GSH-Px活性。
结果当提取条件为温度60C、料液比1:50,时间30min时,总黄酮提取率为3.57%,高于其他条件下的总黄酮提取率(P均<0.01)。
与正常组比较,模型组血清及心肌组织中CAT、T-AOC、GSH-Px活性下降(PE<0.05);与模型组比较,扶芳藤高、中、低剂量组血清及心肌组织中CAT、T-AOC、GSH-Px活性均升高(PE<0.05),其中高剂量组各指标高于中、低剂量组(P均<0.05)o结论扶芳藤总黄酮提取的最适条件是:温度60C、料液比1:50,时间30mm;扶芳藤总黄酮提取物可以提高衰老小鼠血清和心肌组织中CAT、T-AOC、GSH-Px的活性,其可能通过提高抗氧化能力而发挥抗衰老作用。
关键词:扶芳藤总黄酮;衰老;过氧化氢酶;总抗氧化能力;谷胱甘肽过氧化物酶;小鼠doi:10.3969/j.issn.1002-266X.2019.17.009中图分类号:R978文献标志码:A文章编号:1002-266X(2019)7-0032-04Extraction of total flavonoids from Euonymus fortunei and its effects on CAT,T-AOC,and GSH-Px in serum and myocardium tissues of aging miceZHANG Ming,WEN Qilong,WANG Qin,CAI Danzhao(Guangxi Medical University,Nanning530021,China/Abstract:Objective To screen the optimal conditions for the extraction of total flavonoids from Euonymus fortunei,and to observe the effects of total flavonoids extract of Euonymus fortunei on the catalase(CAT),total antioxidant capacity (T-AOC),and glutathione peroxidase(GSH-Px)activities in the serum and myocardial tissues of aging mice.Methods The optimum temperature,optimum ratio of material to liquid and optimum extraction time of total flavonoids extracted from Euonymus fortunei were determined by orthogonal test L9(33).Fifty clean Kunming mice were randomly divided into5 groups:the normal group,model group,low-dose,medium-dose,and high-dose groups of total flavonoid extract of Euony-mus fortunei,with10mice in each group.The mice in the model group and the total flavonoids of Euonymus fortunei groups were given subcutaneous injection of D-galactose0.2mL/d to induce the aging models,and the mice in the normal group were injected with the same amount of normal saline for1week.From the third week on,the low-dose,medium-dose,and high-dose groups of total flavonoids of Euonymus fortunei were given0.2,0. 4,and0.8g/mL total flavonoid extract of Euonymus fortunei,and the normal control group was given the same amount of distilled water for administration,for4consecutive weeks.After the last administration,the CAT,T-AOC and GSH-Px activities in the serum and myocardial tissues of each group were examined.Results When the extraction temperature was60C with extraction ratio of1:50 and extraction time of30min,the extraction rate of total flavonoids was3.57%,which was higher than that at other extrac-基金项目:国家自然科学基金资助项目(81360688)。
赪桐叶中黄酮的提取及抗氧化活性的研究
瘀消肿的功效ꎬ 用于治疗风湿骨痛ꎬ 腰肌劳损ꎬ 跌打
损伤ꎬ 肺 结 核 咳 嗽、 咯 血 等ꎻ 叶 具 有 解 毒 排 脓 的 功
效ꎬ 可外用治疗疮疖肿
[2]
ꎮ 赪桐根含有鞣质、 皂苷、
黄酮类、 酚类、 香豆素与内酯、 三萜类和挥发油等化
学成分
[3]
50min) 各因素对黄酮含量提取的影响ꎮ
1 2 3 正交试验 [7]
在单因素试验基础上ꎬ 选取乙醇体积浓度、 料液
比、 提取时间 3 个因素采用 L 9 (3 4 ) 正交试验法优化
总黄酮提取的工艺ꎬ 并根据优化条件进行验证试验ꎮ
1 2 4 赪桐总黄酮含量的测定
总黄酮含量采用 NaNO 2 - Al ( NO 3 ) 3 - NaOH 显色
在维持其它条件不变的条件下ꎬ 分别测定不同浸
取 液 浓 度 ( 40%、 50%、 60%、 70%、 80%) 乙 醇、
料液比 (1 ∶ 25、 1 ∶ 30、 1 ∶ 35、 1 ∶ 40、 1 ∶ 35ꎬ 单位
为 g / mL)、 提 取 时 间 ( 10min、 20min、 30min、 40min、
围内ꎬ 黄酮总还原能力随着浓度的升高而增强ꎬ 当黄酮浓度为 1mg / mL 时ꎬ 黄酮对 DPPH和OH 的最大清除
率分别为 87 2%和 86 5%ꎬ 具有较强的抗氧化活性ꎮ
关键词: 赪桐叶ꎻ 黄酮ꎻ 提取工艺ꎻ 抗氧化活性
中图分类号: S-3 文献标识码: A
置 6minꎮ 在 510nm 波长下测定吸光度ꎮ 以吸 光 度 A
芦丁、 无水乙Leabharlann 、 氢氧化钠、 亚硝酸钠、 亚硝酸
赶黄草花、叶、杆中总黄酮含量及其抗氧化性比较研究
第52卷第12期 辽 宁 化 工 Vol.52,No.12 2023年12月 Liaoning Chemical Industry December,2023基金项目:四川省大学生创新创业训练项目(S202114389068),烹饪科学四川省高等学校重点实验室(NO.PRKX201811)。
收稿日期: 2022-12-16赶黄草花、叶、杆中总黄酮含量及其抗氧化性比较研究陈诗琪,黄恬,蒲泠伶,王雪颖,叶峻*(成都师范学院 化学与生命科学学院,四川 成都 611130)摘 要:运用超声辅助-分光光度法优化了赶黄草花、叶、杆中总黄酮提取的料液比、超声时间、超声温度及超声功率等工艺条件及其含量测定。
结果表明:赶黄草花、叶、杆中总黄酮平均得率分别为:11.09%、9.27%、4.06%。
且样品的总黄酮提取液对DPPH ·、OH ·自由基均有良好的清除率,均超过66%。
结果表明:赶黄草花、叶、杆均有良好的抗氧化活性,具有明显的抗病毒、抗衰老等药效作用。
关 键 词:赶黄草;超声辅助;总黄酮;抗氧化活性中图分类号:X787 文献标识码: A 文章编号: 1004-0935(2023)12-1771-04赶黄草为虎耳草科扯根菜属多年生草本植物,其所含黄酮类生物活性成分,可通过清除自由基,提高体内活性酶水平,降低受肝损模型动物血清中转氨酶水平等,具有治疗黄疸、胆囊炎、肝损伤和传染性肝炎等药效作用[1-2],并具有减肥、神经保护、抗癌等生物功能[3-5]。
同时,超声波具有强烈的振动、空化效应和搅拌作用,有利于提高提取效率,且方法简单、提取物纯度高,并可避免高温对提取成分的影响[6-8]。
本研究采用超声辅助提取法优化赶黄草花、叶、杆中黄酮类物质的提取工艺,并比较赶黄草的花、叶、杆黄酮类物质的含量及其对DPPH ·和OH ·自由基的清除率,为探究赶黄草的药效作用及综合开发提供参考。
响应面法优化相思藤黄酮提取工艺及其体外抗氧化活性分析
龚受基,覃媚,戴梓茹,等. 响应面法优化相思藤黄酮提取工艺及其体外抗氧化活性分析[J]. 食品工业科技,2024,45(6):178−185.doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2023040026GONG Shouji, QIN Mei, DAI Ziru, et al. Optimization of Extraction Process by Response Surface Method and Analysis of Antioxidant Activity in Vitro of Total Flavonoids from Abrus precatorius Linn[J]. Science and Technology of Food Industry, 2024, 45(6): 178−185.(in Chinese with English abstract). doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2023040026· 工艺技术 ·响应面法优化相思藤黄酮提取工艺及其体外抗氧化活性分析龚受基1,2,3,覃 媚1,2,戴梓茹1,2,蒋红明1,3,郭德军1,3, *(1.北部湾大学食品工程学院,广西钦州 535011;2.广西高校北部湾海产品高值化利用与预制食品重点实验室,广西钦州 535011;3.钦州市特色果蔬发酵重点实验室,广西钦州 535011)摘 要:为优化相思藤黄酮的提取工艺,探讨其抗氧化活性,以乙醇浓度、料液比、超声能量、超声时间为影响因素,以黄酮得率为考核指标,采用单因素和Box-Behnken 法优化相思藤黄酮提取工艺,并通过检测相思藤黄酮对DPPH 、ABTS +自由基的清除能力和对亚铁离子的还原力探讨其抗氧化能力。
结果表明,在料液比(W/V )为1:50时,相思藤黄酮的最佳提取工艺为乙醇浓度82%、超声能量507 J 、超声时间42 min ,此时相思藤黄酮得率为0.696%。
葛花总黄酮的抗氧化作用研究
葛花总黄酮的抗氧化作用研究彭常安;李媛媛【摘要】In order to evaluate the anti-oxidant activities of total flavonoids from Flos Puerariae in vitro, taking 70% ethanol as solvents, the flavonoids was extracted by microwave treatment from Flos Puerariae. The content of the total flavonoids determined by colorimetry is 4. 72%; The anti-oxidant activities of total flavonoids from Flos Puerariae was evaluated by means of the reducing power assay, hydroxyl radicals scavenging activity assay, DPPH assay, superoxide anion free radicals. The results show that the flavonoids from Flos Puerariae has different anti-oxidant activities in reducing power assay and scavenging three free radicals. The effects on scavenging O2-, DPPH- and OH are significant. The EC50 is respectively: 0.095mg/ ml(O2-), 0.114mg/rril(DPPH), 0.700mg/ml( OH). It indicates that the reducing power of the flavonoids from Flos Puerariae is relatively high, and the clearance rates to free radicals are positive proportional to the concentration.%为研究葛花总黄酮的体外抗氧化作用,以70%乙醇为溶剂,微波方法提取葛花中的总黄酮,用比色法测定其含量为4.72%;通过还原能力的测定、Fenton反应体系、DPPH法以及邻苯酚自氧化体系等评价葛花总黄酮体外抗氧化能力.结果显示,葛花总黄酮在还原力测定以及对三种自由基的清除上,表现出了不同程度的抗氧化能力.对O2-·和DPPH·及·OH 3种自由基具有明显的的清除作用,其EC50分别为:0.095mg/ml、0.114mg/ml、0.700mg/ml.葛花总黄酮具有较强的还原力,在清除自由基方面其清除率与其浓度存在着明显的量效关系.【期刊名称】《安徽师范大学学报(自然科学版)》【年(卷),期】2012(035)002【总页数】4页(P163-166)【关键词】黄酮;葛花;抗氧化能力【作者】彭常安;李媛媛【作者单位】芜湖职业技术学院生物工程系,安徽芜湖241006;安徽省中药日化产品工程技术研究中心,安徽芜湖241000;安徽省中药日化产品工程技术研究中心,安徽芜湖241000【正文语种】中文【中图分类】R282.6葛花(Flos Puerariae)为豆科植物葛(Pueraria lobata (Willd) Ohwi)或甘葛藤(P. thomsoii Beeth)的花,始载于《名医别录》,性味干凉,其功用为解酒醒脾,治伤酒发热烦渴,不思饮食,呕逆吐酸,吐血,肠风下血[1]. 在我国葛花用于解酒已有近几千年的历史,《神农本草经》、《本草纲目》等书籍均有记载.葛花的主要有效成分为异黄酮类化合物,现代研究认为是葛花中含有的皂角苷和异黄酮分别对免疫系统和内分泌系统起到了协调作用,改善了酒精引起的新陈代谢异常症状[2-3],黄酮类化合物越来越受到人们的关注.但是关于葛花黄酮抗氧化的研究应用还很少.本研究从对铁离子还原能力以及对3种不同自由基的清除能力方面对葛花黄酮进行了较为全面、系统的研究,从而探讨葛花黄酮的抗氧化作用,为进一步将葛花应用到保健食品以及日化产品的开发中提供科学依据.1 材料与试剂葛花由安徽省南陵县皖南野生葛研究所提供,样品经作者鉴定为豆科植物葛的花(Flos Puerariae);二苯代苦味肼基(DPPH)(Sigma公司);葛根素(购于中国药检所,纯度大于99.6%,YY90068-201112);其余试剂均为国产分析纯.2 仪器与设备仪器:UV-3802型紫外可见分光光度计,尤尼柯(上海)仪器有限公司;FA1104型电子天平,上海精密天平;微波萃取器由家用微波系统产品改造而成;旋转蒸发器RE-52AA:上海振捷实验设备有限公司.3 实验方法3.1 样品的提取和制备取葛花在40-50℃干燥至恒重,粉碎,过60目筛.称取粗粉2g,置于烧瓶中,加入70%乙醇250ml,放入微波炉中(微波功率500W,时间8min),过滤得滤液,减压回收至干,备用[4-5].3.2 总黄酮含量测定方法3.2.1 标准曲线的建立准确称取3.0mg 葛根素对照品,用蒸馏水溶解并定容至25ml,充分摇匀,即得葛根素对照品溶液,浓度为0.12mg·m l-1.分别精密吸取葛根素对照液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml于10ml容量瓶中,用70%乙醇稀释至刻度,摇匀.以70%乙醇为空白,在250nm用紫外-可见分光光度计测吸光度.得标准曲线为浓度C和吸光度A的关系A=69.417C+0.0176 R2=0.9994.3.2.2 样品测定精密称取浓缩干燥得到的葛花提取物,置于25ml的容量瓶中加入70%乙醇溶解定容.按照上述方法测定吸光度A,计算总黄酮含量为4.72%.3.2.3 样液配制用70%乙醇分别配制葛花黄酮的系列质量浓度(0.05、0.10、0.15、0.20、0.25mg/ml和0.5、0.75、1.0、1.25mg/ml),冰箱保存,供实验使用.3.3 还原力测定[6]还原能力的强弱,可以反映药物的潜在抗氧化性能,是体外抗氧化的一个重要指标.本实验用的是铁氰化钾法,分别取2ml的不同浓度的样品,加入2ml的磷酸缓冲液(pH为6.6)和1%铁氰化钾溶液2ml,混匀,在50℃下保温20min,加入10%的三氯乙酸溶液2ml,振荡混匀后取2ml的混合液,加入2ml去离子水和0.1%的三氯化铁溶液0.4ml,静置10min,用去离子水为空白,在700nm下进行比色A1;以蒸馏水代替样液,在700nm处测A0;以Vc质量浓度为0.25mg/ml 下的A为基准,实验重复3次,求其平均值.按照相对还原力=(A1-A0)/(A-A0)×100%计算相对还原力,并且计算葛花黄酮还原力的EC50.3.4 羟自由基清除能力[7]清除羟自由基的能力的测定用水杨酸捕获法,利用Fenton体系产生羟自由基,加入水杨酸来捕获,能在510nm产生强吸收的有色物质,通过测定其吸光度来判定.取2mmol/L的硫酸亚铁溶液1ml,6mmol/L过氧化氢1ml, 6mmol/L水杨酸1ml,以蒸馏水为参比,在510nm处测定吸光度,实验重复3次,求其平均值.按公式计算羟自由基的清除率,并且计算样液清除羟自由基的半数有效浓度值EC50.并用维生素C做为对照,进行平行实验.清除率%=[1-(Ax-Ay)]/Ao×100式中:Ao为溶剂代替药液的试剂空白管的吸光度;Ax为加了药液的吸光度;Ay为不加显色剂的药液的本底光密度,是为了减去药液本身颜色对于实验的影响.3.5 DPPH法[8]2ml DPPH乙醇溶液(2×10-4mol/L ),加入2ml 样品溶液,混匀,室温静置30min,于517nm处测吸光度值,实验重复3次,求其平均值.DPPH·清除率按公式计算:清除率%=(Ao-A1)/Ao×100(式中:Ao是不加样品而加入去离子水的空白对照吸光度值;A1是加入样品的吸光度值),计算样液清除DPPH自由基的半数有效浓度值EC50.用维生素C做为对照.3.6 清除超氧阴离子自由基能力测定采用邻苯三酚自氧化法测定葛花提取物的清除活性,邻苯三酚在碱性条件下自氧化形成生成有色中间产物,当有抑制剂存在时,可清除从而阻止中间产物的积累,由此可以通过比色法检测物质清除的能力.本实验参照MORIDANI[9]方法略有改进,具体方法为:精密量取0.05mol/L Tris-HCl缓冲液(pH 8.2,含2mmol/L EDTA)4.5ml和2ml蒸馏水于试管中,混匀后室温下平衡4min,向其中加入7 mmol/ L邻苯三酚溶液(以10mmol/L的HCl溶液配制,空白管用10mmol/L HCl溶液代替邻苯三酚溶液)0.4ml,迅速摇匀后倒入比色皿,在325nm处每隔30s测定吸光度(Ao),计算线形范围内每分钟吸光度的增加(ΔAo);按照上述方法,精密量取4.5mlTris-HCl缓冲液和2ml药液,混匀后再室温下放置4min,立即加入0.4ml邻苯三酚,测定加入样品后线性范围内每分钟吸光度的增加ΔA,实验重复3次,求其平均值,按公式:抑制率%=(ΔAo-ΔA)/ΔAo×100%计算抑制率;并计算样液清除羟自由基的半数有效浓度值EC50.4 结果与分析4.1 葛花总黄酮的还原能力从图中可以看出,葛花总黄酮的还原能力较强,其EC50为0.194mg/ml, 维生素C的EC50为0.086mg/ml.4.2 葛花总黄酮清除·OH能力羟自由基是人体中最活泼,对人体危害最大的自由基[10].由图2所知在实验浓度范围内,葛花总黄酮对于羟自由基的清除作用始终表现为浓度依赖性的清除作用,计算得出葛花总黄酮的EC50为0.700mg/ml,Vc的EC50为0.629 mg/ml.图1 葛花总黄酮的相对还原力图2 葛花总黄酮对羟自由基的清除作用Fig 1 Reducing activity of total flavonoids in Flos Puerariae Fig 2 Scavenging effects of total flavonoids in Flos Puerariae and vitamin C on hydroxyl freeradicals4.3 葛花总黄酮清除DPPH自由基能力DPPH自由基方法操作简便且灵敏度高,在天然抗氧化物研究中应用较为普遍.由图3可知,在实验浓度范围内,葛花黄酮具有清除DPPH自由基的能力,清除率随着剂量的增加,具有一定量效关系.从图中可以看出,浓度在0.15-0.25mg/ml 时,葛花黄酮和Vc对于DPPH自由基的清除能力基本相当;经过计算得出,葛花黄酮的EC50为0.114mg/ml,Vc的EC50为0.0677 mg/ml.4.4 葛花黄酮清除能力是生物体内的一种氧自由基,具有重要的生物功能,还与多种疾病有密切关系,同时它还是生物体生成的第一个自由基,是所有自由基的前身[10].由图4可知,在实验浓度范围内,葛花黄酮对超氧阴离子的清除作用很强,远高于同浓度的Vc;在对的清除作用实验中,葛花黄酮的EC50为0.095mg/ml,Vc的EC50为0.227mg/ml.图3 葛花总黄酮对DPPH自由基的清除作用图4 葛花总黄酮对超氧阴离子自由基的清除作用Fig 3 Scavenging effects of total flavonoids in Flos Puerariae and vitamin C on DPPH free radicals Fig 4 Scavenging effects of total flavonoids in Flos Puerariae and vitamin C for scavenging superoxide ion free radicals5 讨论本实验从对铁离子还原能力和清除羟自由基、清除DPPH自由基以及清除超氧阴离子自由基的能力几方面对葛花黄酮分别进行了体外抗氧化实验,并且以Vc作为对照,实验结果表明,葛花黄酮在还原力以及对三种自由基的清除作用时,均表现出了不同程度的抗氧化能力.葛花黄酮对和DPPH·的清除作用,随着黄酮提取液的浓度增加而增强.葛花是一种纯天然的野生植物,因此可以开发其作为日常生活中常用的饮品,这对于预防和治疗衰老性疾病有一定的作用;而且葛花总黄酮提取液对于多种自由基均具有很强的清除能力,因此葛花是具有潜力的天然抗氧化剂资源,可以作为一种有效的自由基清除剂,是理想的天然抗氧化剂之一,其在食品、化妆品以及药品方面有广泛的开发应用前景.参考文献:[1] 江苏新医学院.中药大辞典[S].上海:上海科学技术出版社,1986:2307-2308.[2] JUNEI K, JUNICHI F, JUNKO B, et al. Study on t he constitutes of Pueraria Lobata[J]. Chem Pharm Bull, 1987,35(40):4846-4850.[3] PARK HJ . Isoflavone glycosides from the flowers of Pueraria Thurbeana[J]. Phytochemis ry , 1999,51(1) :147-151.[4] 胡虹,许雅娟.微波助溶提取云台山野葛花总黄酮的研究[J].化工时刊,2006,20(11):37-39.[5] 姚美村,廖礻韦婷,袁月梅,等.葛花不同工艺提取物的异黄酮成分含量比较研究[J].中国野生植物资源,2010,29(6):33-37.[6] 向志军,赵广荣,元英进,等.复方丹参的体外抗氧化活性研究[J].中草药,2006,37(2):211-213.[7] 何钊,冯颖,徐珑峰,等.云南种植玛咖乙醇提取物的体外抗氧化活性分析[J].食品科学,2010,31(15):39-42.[8] MOON J K, SHIBAMOTO T. Antioxidant assays for plant and food components[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry,2009,57(5):1655-1666.[9] MORIDANI M Y, POURAHMAD J, BUI H, et al. Dietary flavonoid iron complexes as cytoprotective super oxide radical scavengers[J]. Free RadicalBiology & Medicine, 2003,34(2):243-253.[10] 王建英,任引哲,王迎新.氧自由基与人体健康[J].化学世界,2006,47(1):61-63.。
植物抗氧化性的主要活性成分研究
植物抗氧化性的主要活性成分研究作者:陶笑徐媛江解增来源:《安徽农业科学》2017年第25期摘要介绍了与抗氧化活性相关的植物体内黄酮类及酚类化合物,并归纳了常见的抗氧化能力测定方法(清除羟自由基能力的测定、抑制超氧阴离子自由基的测定和FRAP法),为植物抗氧化物质的进一步研究提供了参考。
关键词抗氧化;抗氧化物质;测定方法中图分类号 S-3 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2017)25-0008-03Abstract In order to provide reference for research on plant antioxidation, we introduced flavonoids and phenolic compounds related to antioxidant activity, and summarized the methods for determination of antioxidant properties, like the determination of the ability of removing hydroxyl radicals, the determination of inhibiting superoxide anion radical and FRAP method.Key words Antioxidant;Antioxidants;Determination method随着人类生活质量的提高,追求高质量的饮食已经成为一个趋势。
许多研究表明,药用植物[1]、水果[2]、疏菜[3]和花卉[4]都有抗氧化性。
植物体内含有抗氧化物质,对活性氧自由基具有清除作用[5],从而能延缓人体衰老,促进身体健康。
植物体内有很多物质具有抗氧化性,这些物质除了维生素E(生育酚)、维生素C(抗坏血酸)、β-胡萝卜素、类胡萝卜素基础物质外,学者们研究较多的抗氧化物质是黄酮类物质和酚类物质。
藤茶抗氧化活性研究
藤茶抗氧化活性研究欧贤红;叶勇;黄秋洁;刘华钢;宋云飞【摘要】In this study, the scavenging effect of total flavonoid, dihydromyricetin and myricetin of Ampelopsis grossedntata on DPPH·,·OH,and O-2 were investigated using ELISA Reader. The superoxide free radical (O-2) was generated with auto-oxidation in alkalcsent solution with the help of pyrogallol and the hydroxyl free radical (·OH) was produced with 1,10-phenathroline-Fe2+/H2O2. The results showed that the activity of myricetin was the strongest in DPPH·system ( DPPH·IC50 2.91 ± 0. 28 mg/L) , and the activity of dihydromyricetin was the strongest in O-2 system (IC50 3. 88 ±0.99 mg/L). In·OH system,myricetin displayed the strongest activity,followed by dihydromyricetin and the total flavonoid. Hence, dihydromyricetin and myricetin may be the main antioxidant components of A. grossedntata.%本文建立体外二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)体系,并采用连苯三酚法在碱性溶液中自氧化反应产生超氧阴离子自由基(O2-+)和邻二氮菲-Fe2+/H2 O2体系产生羟自由基(·OH)法,在酶标仪上检测藤茶总黄酮、二氢杨梅素和杨梅素对DPPH·、O2-+和·OH的清除作用.结果表明:藤茶各提取物均有不同程度的体外抗氧化效果,杨梅素对DPPH·的清除作用最强DPPH·IC50 (2.91±0.28) mg/L,二氢杨梅素对O2-+的清除作用最强IC50 (3.88±0.99) mg/L,对·OH的清除效果是杨梅素>二氢杨梅素>藤茶总黄酮.确定杨梅素和二氢杨梅素为藤茶的主要抗氧化相关活性成分.【期刊名称】《天然产物研究与开发》【年(卷),期】2013(025)002【总页数】4页(P245-248)【关键词】藤茶;二氢杨梅素;杨梅素;抗氧化【作者】欧贤红;叶勇;黄秋洁;刘华钢;宋云飞【作者单位】桂林莱茵生物科技股份有限公司博士后工作站,桂林541100【正文语种】中文【中图分类】TS202.3藤茶系葡萄科蛇葡萄植物显齿蛇葡萄[Ampelopsis grossedntata(Hand-Mazz)W.T.Wang]的茎叶,该植物总黄酮含量丰富[1]。
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本科毕业论文(设计)(2013届)题目:资源植物扶芳藤叶中总黄酮提取物的抗氧化性研究、学院:生命与环境科学学院专业:生物技术学生姓名:邵菁菁学号:20909051042指导教师:胡晓倩职称(学位):副教授合作导师:职称(学位):完成时间:2013年5月25日成绩:综合成绩:等级:黄山学院教务处制学位论文原创性声明兹呈交的学位论文,是本人在指导老师指导下独立完成的研究成果。
本人在论文写作中参考的其他个人或集体的研究成果,均在文中以明确方式标明。
本人依法享有和承担由此论文而产生的权利和责任。
声明人(签名):年月日目录摘要 (Ⅳ)英文摘要 (Ⅳ)1引言 (1)2材料与方法 (3)2.1材料与设备 (3)2.1.1实验材料 (3)2.1.2实验试剂 (4)2.13实验仪器 (4)2.2实验方法 (4)2.2.1扶芳藤叶中总黄酮化合物的提取工艺 (4)2.2.2扶芳藤叶中总黄酮提取物含量的测定 (4)2.2.3扶芳藤叶中总黄酮提取物的总抗氧化能力的测定………2.2.4扶芳藤叶中总黄酮提取物超氧阴离子自由基清除能力的测定测定…………………………………………………………2.2.5扶芳藤中总黄酮提取物羟基清除能力的测定……………2.2.6扶芳藤中总黄酮提取物清除DPPH·自由基清除能力的测定…………………………………………………………3结果与分析 (5)3.1扶芳藤叶中总黄酮提取物的含量 (5)3.2扶芳藤叶中总黄酮提取物的总抗氧化能力 (5)3.3扶芳藤叶中总黄酮提取物对超氧阴离子自由基的清除能力 (5)3.4扶芳藤叶中总黄酮提取物羟基清除能力…………………………3.5扶芳藤叶中总黄酮提取物对DPPH.自由基的清除能力............4结论与讨论 (7)参考文献 (7)致谢………………………………………………………………………………………………………………………………………………………8资源植物扶芳藤叶中总黄酮提取物的抗氧化性研究学生姓名:邵菁菁(209090510)指导老师:胡晓倩(副教授)(黄山学院生命与环境科学学院,黄山,安徽245041)摘要:扶芳藤叶片洗净烘干至恒重,粉碎后分别采用石油醚、75%乙醇在索式提取器里回流浸提,然后减压浓缩提取液,得到扶芳藤叶中总黄酮提取物,并分别对其抗氧化总还原能力、对羟自由基,超氧阴离子自由基,脂过氧自由基清除能力进行了实验研究。
结果表明:扶芳藤叶总黄酮提取物具有较强的体外抗氧化活性,能有效地清除羟自由基、超氧阴离子自由基和DPPH·自由基,且在实验浓度范围内,清除能力随扶芳藤叶中总黄酮提取物浓度的增加而呈上升趋势。
扶芳藤叶可加强作为天然抗氧化剂来源的应用。
关键词:扶芳藤;总黄酮;自由基;抗氧化性Study on antioxidant of the total flavonoids fromEuonymus fortunei leavesJing–Jing SHAO(20909051042)Supervisor:Xiao-Qian HU(Associate Professor)(College of Life and Environment sciences,Huangshan University,Huangshan,,245041,China) Abstract:The extraction of flavonoids in Euonymus fortunei was studied and the antioxidant effects of the extract were evaluated as well.Method:Euonymus fortunei leaves were extracted in Soxhlet extractor with petroleum ether and75%ethanol,and then the extract was concentrated by vacuum, the total flavonoids were gotten from Euonymus fortunei leaves.The reduction capacity and the scavenging capacity to hydroxyl radicals,superoxide anion radicals,DPPH·radicals of total flavonoids extracted from the leaves of Euonymus fortunei were studied.Result:The results showed that total flavonoids extracted from the leaves of Euonymus fortunei had a good anti-oxidant properties,and could effectively scaveng hydroxyl radicals,superoxide anion radicals and DPPH radicals.In the experimental concentration range,its scavenging capacity rised with the increase of the concentration of the total flavonoids.The leaves of Euonymus fortunei would be enhanced development as natural antioxidants to improve economic value of deep processing.Conclusion:The flavonoids from leaves of Euonymus fortunei was found have strong antioxidative activity.Key words:Euonymus fortunei;Total flavonoids;Free radical;Antioxidantion1引言扶芳藤(Euonymus fortunei(Turcz.)Hand-Mazz)属卫矛科(Celastraceae)卫矛属(Euonymus L.)。
扶芳藤四季常绿,耐荫性强且具良好的抗寒能力,在园林绿化方面具有广泛的应用;扶芳藤是民间药材,全株均可入药,性味辛,具有行气活血、舒筋散瘀、止血、补肝肾等功效;摘其茎叶制成茶饮,不仅可以生津止渴,还具保健和药用价值(江苏新医学院,2006);动物药理实验研究表明:扶芳藤的粗提物具有明显的降压作用(陈一,1993)。
因此,扶芳藤是一种集观赏、绿化、饮用、保健和药用价值的资源植物。
目前,扶芳藤的开发利用尚处于起步阶段,近年来,对于扶芳藤叶中化学成分及其各种制剂在临床上的应用,已有了一些报道(黄莹娟,1997)(袁晓等,1994),但目前对扶芳藤中总黄酮的提取及其抗氧化性能的研究,却还未见报道。
本实验重点研究了从扶芳藤叶中提取的总黄酮的总还原能力、对羟自由基、超氧阴离子自由基和DPPH·自由基的清除能力,为扶芳藤作为资源植物的保健药用价值的深入开发提供参考数据。
2材料与方法2.1材料与设备2.1.1实验材料扶芳藤(Euonymus fortunei)植株采自安徽省黄山市黄山学院南区,由黄山学院生命与环境科学学院张慧冲副教授鉴定。
2.1.2实验试剂芦丁(纯度99.99%,中国药品及生物制品检定所),乙醇,亚硝酸钠,硝酸铝,氢氧化钠,PBS(磷酸缓冲盐溶液),硫酸亚铁,DPPH(二苯代苦味酰基自由基)等均为国产分析纯。
实验用水为二次蒸馏水。
2.1.3实验仪器RE-52D旋转蒸发器(上海青浦沪西仪器厂)、HH-S数显恒温水浴锅(江苏省金坛市医疗仪器有限公司)、PL203电子天平(0.001g)(上海梅特勒-托利多仪器有限公司)、WFZ UV-2100型紫外可见分光光度计(上海尤尼柯仪器有限公司)、SXT-02索式提取器(上海洪纪仪器设备有限公司)及各种实验用玻璃仪器等。
2.2实验方法2.2.1扶芳藤叶中总黄酮化合物的提取工艺(叶文峰等,2002)(杨新建等,2012)新鲜扶芳藤叶洗净,置于60℃烘箱中烘干至恒重→粉碎成粉末,称取2.500g 扶芳藤叶干粉,用滤纸包装捆扎好置于索氏提取器中→加入125ml石油醚回流浸提脱脂大约4h至无色→取滤纸里滤渣→用75%乙醇回流浸提约7h至无色→收集提取液→用旋转蒸发器减压浓缩→浓缩液→加水煮沸,过滤→得总黄酮化合物提取液(加水定容至250.0ml)→待用。
2.2.2扶芳藤叶中总黄酮提取物含量的测定(1)标准曲线的制备(陈飞彪等,2005)(杨俊等,2002):称取10.000mg 芦丁(芸香叶苷•三水,烘干至恒重无水),用75%的乙醇定容至100.0ml,制成0.1mg/ml的标准溶液,转移至试剂瓶中保存备用。
取上述标准溶液1.0ml、3.0ml、5.0ml、7.0ml、9.0ml、11.0ml分别于6支25.0ml容量瓶中,加5%亚硝酸钠1.0ml 摇匀,放置6min;再加10%硝酸铝1.0ml摇匀,放置6min;最后加4%氢氧化钠10.0ml,用75%乙醇定容至25.0ml充分摇匀,放置10min(郭亚健,2006)。
6支容量瓶所对应的芦丁溶液浓度分别为0.001mg/ml、0.003mg/ml、0.005mg/ml、0.007mg/ml、0.009mg/ml、0.011mg/ml。
以试剂空白做对照,于分光光度计502nm 波长下测定吸光值。
每组平行测定三次,取平均值。
以吸光值A(X)为横坐标,浓度C(Y)为纵坐标绘制A-C标准曲线。
得标准曲线的线性回归方程方程为:Y(C)=0.1251X(A)+0.0013(公式2-1),相关系数R2=0.9995,线性范围0.001~0.011mg/ml,线性关系良好(图1)。
图1芦丁标准及线性回归曲线(2)扶芳藤叶中总黄酮提取物含量的计算:分别精密移取3.0ml、4.0ml、5.0ml 提取液,按照“标准曲线制备”下的操作,测定吸光度,由芦丁标准曲线回归方程换算成浓度。
总黄酮含量C(mg/ml)=Y*稀释倍数(公式2-2)总黄酮提取率(%)=[Y*稀释倍数*V*100%]/1000W(公式2-3)式中,Y:所测定溶液吸光度带入标准曲线方程算出黄酮类物质的浓度(mg/ml);V:原浸提液体积(ml);W:所称量的样品的质量(g)。