(外标两点法对数方程)桔梗含量为例
桔梗多糖的含量测定
量 由果 糖 组成 的桔 梗 聚糖 ， 外 ， 此 桔梗 中还 含 有 大量
的菊糖 』 。现代 药 理学 研究 发 现桔 梗 多糖 具 有 很好
称取 ０ １ ． ｇ蒽 酮 ， 加入 ５ ｍ 浓 硫 酸搅 拌 溶解 ， ０ｌ 放 置 暗处 ， 此试 剂需 临用新 配 。
２３ １２ 蒽酮硫酸法测总糖的标准曲线制作 ．．．
称取 １５ ０ ℃干燥 至 恒重 的葡 萄糖 １ｍ ， １０ ｌ ０ ｇ于 ０ ｍ 容量瓶 中溶解并定 容至刻度 ， 即得 到浓度为 ０ １ ／ ．ｍｇｍｌ
式 中 ： 为 称 取 多 糖 的质 量 （ ｇ ， ｗ ｍ ） Ｃ为 精 制 桔 梗 多糖 贮 备液 中葡 萄糖质 量浓 度 （ ／ １ ， ｍｇｍ ） Ｄ为多糖 的稀 释倍 数 。测得 ｆ ．１７ ＝１３２ 。
２ ３ 桔梗 多糖 含量 测定 ．
２ ３ １ 总糖 的含量 测定 ．． ２ ３ １ Ｉ 蒽酮 试剂 的配制 ． ．．
０ １ ｏ Ｌ的 Ｎ ２ ３ 定 至浅 黄色 ， ．ｍ ｌ ／ ａＳ Ｏ 滴 加入 ０ ５ 的淀 ．％ 粉 指示剂 ， 续滴 至黄 色 消失 。记 录消耗 的 Ｎ ： ， ａＳＯ 体
测定 ３次 ， 按下式 计算 总糖含 量 （ 并 以葡 萄糖 计 ） 总 ：
积。 以空 白与样 品所 耗 硫 代硫 酸 钠 溶液 毫 升 数 之差 为纵坐标 ， 萄糖 毫 克数 为横坐 标作线 性 回归 。得到 葡
器 厂 ） 分析 天平 Ａ １４ （ 特 勒 一托利 多仪 器上 海 ， Ｒ １０ 梅 有 限公 司 ） Ｓ Ｚ—Ｄ（ ） 环水 式 真 空 泵 （ 义 市 ，Ｈ Ⅲ 循 巩
外标两点法对数方程
外标两点法对数方程是在应用高效液相色谱-蒸发光散射检测器（HPLC-ELSD）进行药物分析时的含量计算方法。
我们用蒸发光散射检测器时，由于散射光的信号为非线性的，根据ELSD的工作原理，进样质量（ug）和ELSD检测响应值（峰面积A）一般不呈现良好的线性。
因为信号相应值与物质质量的对数呈线性关系，如果对进样质量和峰面积分别取常用对数后，两者呈现良好的线性关系，但是它是一条不经过原点的直线，所以在含量测定时必须使用外标两点法，通常称作外标两点法对数方程。
进两个不同量的对照品（ul）, 将进样质量（ug）和对应的峰面积（A）取对数后，由两点确定方程，方法是将两组数值代入对数方程：lgA=KlgC+b，即可求出式中的K和b。
公式为：lgA=KlgC+b，
A：峰面积
K：为公式中参量
C：进样质量（ug）
b：为公式中参量
计算时将样品峰面积（A）代入方程lgA=KlgC+b，计算出IgC后，再取反对数就可以计算出C了。
HPLC—ELSD法测定桔梗中桔梗皂苷D的含量
HPLC—ELSD法测定桔梗中桔梗皂苷D的含量植物资源与环境2001,10(4):11—13JoMofP/antResourcesandEr~vlronmentHPLC—ELSD法测定桔梗中桔梗皂苷D的含量朱丹妮,舒娈,郅慧,高山林(中国药科大学,江苏南京210038)摘要:首次采用高效液相一蒸发光散射检测器色谱法测定桔梗[P/atycodonl朋卿1帅(Jacq.)A.Dcj中桔梗皂苷D吉量,c.a(5.um,46哪×250哪)为色谱拄,(乙腈):"水)=28:72为流动相,流速O7mI3min,ELSD-5~为检测器,外标法定量.结果表明:桔梗皂营D在O.3～2.4腭范厨内呈线性,回收率为99.57%(n=5),RSD为110%.对8种不同来源的桔梗材料和加个四倍体株系桔梗皂甙D含量的测定说明,此法是测定桔梗皂苷D的较佳方法,可作为我国桔梗质量控制和评价的一种可靠的技术.关键词:桔梗;桔梗皂甙D;高效液相一蒸发光散射中国分类号:$657.72;S:~i7.239;o946.83文献标识码:A文章编号:l0(2∞1)04-001I-03I)e~fionofpla留0曲D.m用哟m峨肋nⅢby珈PIⅡI地山0dZttUDan-ni,sHuh锄,丑ⅡHui,GAOshan—bn(ChinaPharmaceuticalUniversity,Naniing210o38,cna),J.P/o~aRe∞Ⅳ.&Er~ron.2cl01.10(4):11—13A晌ct:1kSp4perestabliBhedanHPLc-E|Dmeth0dtodeterminethe~,nlentofplatye0dinDin differentsampofPlacycodon曲%Ⅲ(Jaeq.)A.Dc.Allt~hC18Ilr|lrI(5,4.6mmX250mm) w鹊used,mobilepIIasew鹊(aeetonimle):(water)=28:72at0.7m[/n~,l即eed.Ⅱs】)-500deteemrwasUSedforqualitativeandqu~ltitativeanalysisinextemalstandardⅡIetll0d.Obrainedresultsindie~tedthatwithin0.3— 2.4pl0ayeodinDhadago0dlinearity.1heaveragerecoveryw舾99.57%(n=5)wi由RSD1.10%.Inordertoevaluatetllereliabilltyoftllisnewmethod.thecontentofplatye~linDin8eV elldifferent疵lals~np]esand20inducedtetraploidlinesintissuecultureweredetermined.11leobtainedres ultsindie~tedthatthisiSfirsttimetoreportanadvancedandeffectivem柚0dfortlleqltv~ntm]andevaluatiOnforrawmaterialsofP..Key删rds:Placycodo~姗回z叭m(J.)A.IX1.;p【a|yo0djnD;l~yploid;}删一ELsD 中药桔梗为桔梗科植物桔梗(im耐‰m(Jacq.)A.IX:.]的干燥根.在我国药用历史悠久,有宣肺,利咽,祛痰和排脓之教….桔梗皂苷为桔梗中主要有效成分,桔梗皂苷D是桔梗皂苷中的主要皂苷.中国药典中对桔梗总皂苷含量的测定用重量法…,无桔梗皂苷D含量测定方法的记录.韩国学者采用反相ttPLC测定桔梗皂苷D.测得韩国国内桔梗根中的皂苷D含量为0.050%～0.090%."l.日本学者用ttPLC法以'INK-GEL酰胺.8o为分析柱,以(乙腈):V(水):82:18为洗脱液,检测波长203nm,定量或定性分析桔梗皂苷D;我国学者许传莲等采用I/P-IfPLC法测定不同产地桔梗中皂苷D的含量,选择C,.柱为色谱分析柱,检测波长为210nm.由于桔梗皂苷D无C=C双键和共轭结构,无强的发色基团,末端吸收(203n/in,210nm)检测干扰较大.作者首次采用ttPLC.E1SD法测定桔梗皂苷D含量,旨在为控制桔梗药材质量提供科学的分析方法.l材料和方法1.1材料来源供试的桔梗药材购白安徽省毫州药材公司.经余伯阳教授鉴定;桔梗四倍体株系由中国药科大学遗传育种教研室经组织培养人工诱导培育;对照品桔梗皂苷D由吉林农业大学刘墨祥教授惠赠.1.2仪器与试剂Shin~lzu10A高效液相色谱仪(配备Shama~C—R6A数据处理机,NlteehELSD.500型蒸发光散射收藕日期:20Ol-O7—23作者简介:朱丹妮(1946一).女,上海市人.学士.副研究员,长期从事中药复方化学和物质基础研究.2植物资源与环境第1O卷检测器)乙腈(色谱纯1,水为二次重蒸水.1.3色谱条件色谱柱为c8柱(5,4.6mm×250ram):流动相:(乙腈):V(水)=28:72;流速0.7mLhnin;柱温为室温;进样量:2(】;ELSD检测器检测参数:漂移管温度l11;载气()流速2.75Um_ml_理论塔板数据按桔梗皂苷D峰计算,应不低于30C0.1.4供试品提取方法比较1.4.1回流提取精密称取干燥粉碎过5O日筛的桔梗药材200mg,加入5OrIlL甲醇于索氏提取器中四流提取4h,过滤,滤液回收至干,残渣加入25mL水溶解,以乙醚萃取3次.水液以水饱和正丁醇萃取5次,合并正丁醇液,LHj收至干,残渣以甲醇溶解并定容5mL作为供试品.1.42超声提取精密称取干燥粉碎过5O目筛的桔梗药材2OOmg,加入25mL甲醇超声提取30min, 过滤,滤渣再加入25mL甲醇超声提取30mln,过滤,用少量甲醇洗涤滤渣,合并2次滤液,回收甲醇至于,将残渣以甲醇溶解并定容于5mL容量瓶中. 以上2种供试液按上述色谱条件注入液相色谱仪,测定峰面积,试验表明两种方法制备的供试品中桔梗皂苷D的含量无显着性差异,因此以下供试品溶液的制备采用操作简便的超声提取法.l_5对照品溶液的制备精密称取桔梗皂苷D对照品1.2mg,置10mL容量瓶中加适量甲醇溶解,用流动相稀释至刻度,摇匀,即得对照品溶液(O.12rrrIlL).l_6测定方法按超声提取法制备供试品溶液精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20uL,注入液相色谱仪,按以上色谱条件测定峰面积,峰面积及浓度均取自然对数后用标准曲线计算桔梗皂苷D含量.1.7不同产地及桔梗多倍体样品桔梗皂苷D含■测定取河南,广西,安徽,山西,湖南,湖北和江苏产桔梗药材及2o个四倍体株系试管苗,依上法测定桔梗皂苷D含量2实验结果2.1桔梗皂苷D浓度和峰面积线性关系的考察分别取上述对照品溶液2.5,5,lO,l5和2ouL进样,按上述色谱条件测定峰面积,以色谱峰峰面积的自然对数为纵坐标,以桔梗皂苷D对照品进样量的自然对数为横坐标,绘制标准曲线,计算回归方程:l,=1.7858X+4.8797,r=0.9991,线性范围为0.3～2.4tzg表明线性关系良好2.2精密度试验精密吸取桔梗皂苷D对照品溶液2OuL,重复进样5次,测定其峰面积积分值分别为44191, 44980,44O69,44784和43806,平均44366,RSD为1.12%(n=5),表明进样精密度良好2.3稳定性试验将同一供试品溶液分别在0,2,4,6和8h进样.测得桔梗皂苷D的峰面积分别为24384,24775, 248o3,24773和24468,均值24641,ItSD为0.81%,表明样品溶液在8h内稳定2.4重现性试验取同一产地桔梗药材5份,按1.4.2项下制得供试品,按以上色谱条件测得桔梗皂苷D的含量分别为0.2470%,02442%,0.2475%,0.2427%和0.2447%,平均0.2452%,RSD=0.82%,表明用此方法测定桔梗皂苷D重现性较好.2.5回收率试验采取加样回收测定方法,精密称取已知含量同批药材粉末(其中含桔梗皂苷D0245%)5份,每份约100mg,加入对照品溶液2mL(含桔梗皂苷D 0.24mg),按1.4.2项下制备,进样2o止,测定桔梗皂苷D峰面积,计算回收率,结果见表l.可以看出5份样品的平均回收率为99.57%,表明此法的回收率较高.2.6不同产地桔梗药材中桔梗皂苷D含■采自河南,广西,安徽,山西,湖南,湖北和江苏的桔梗药材中桔梗皂苷D的含量(ng)分别为2.65,2.68,2.49,2_86,2.8o,2.68和2.78,变动于2.49Ⅱg～2.86mug(0.249%～0.286%)之间,但均显着高于采用反相HPLC法测得的韩国产桔梗根中的桔梗皂苷D含量(O050%～0.090%)3J.2.7桔梗多倍体样品桔梗皂苷D含■根据本研究建立的方法,以桔梗二倍体为对照测定了20个多倍体株系(称样量均为200mg)桔梗皂苷D含量,结果见表2.第4期朱丹妮等:HPLC—ELSD法测定桔梗中桔梗皂苷D的含量13 表1桔梗皂苷D加样回收覃试验结果Table1R咧惦0f呻叫哪r0fp咖_mD襄2桔梗四倍体株系殛亲奉二倍体试管苗桔梗皂苷Ⅱ音量2Tk蛳t0f曲哪∞d-ⅢD-mtet瑚p10柚删曲,l.id0f∞出嘞mⅢIJ日蚺.)A.Dc.表2表明:20个四倍体株系的桔梗皂苷D含量在2.02~ng/g～306IIg之问,有8个株系高于=:倍体,c.5株系含量最高达3.06lg,比二倍体高176%,余均与二倍体接近,桔梗四倍体,二倍体株系测得的桔梗皂苷D含量大多在2.5mg(0.25%)以上,与7省区采集的桔梗根的桔梗皂苷D含量相近四倍体的田问农艺性状及根部产量优于二倍体,因此为进一步选育产量高及皂甙含量高的优良桔梗品种展示了较好的前景3讨论蒸发光散射检测器ELSD是一种通用质量型检测器,流动相由热气流使之气化喷雾.再进人加热管,溶剂在此挥发,所得分析检测的物质颗粒通过狭窄光束散射,由光电倍增管收集,ELSD的响应取决于被分析物质颗粒的数量和大小,不受溶剂的干扰,已成功用于皂苷,生物碱,萜类内酯,氨基酸和糖类等分析,是分析无紫外吸收和紫外吸收弱成分的有力工具本实验的条件是经过反复实验后,综台评价而得出的.作者首次采用HPLC—ELSD法测定桔梗皂苷D的含量.并通过对7个不同来源的桔梗材料和20个四倍体株系桔梗皂苷D的含量测定,验证此方法用于桔梗皂苷D含量测定是可行的.供试样品溶液的制备采用2种方法.一种为超声提取法;另一种为传统提取法经过测定,得出两种方法制备的供试品中桔梗皂苷D的含量无显着性差异.因此选择采用步骤少,操作简便的超声提取法作为供试品的制备方法.2OOO年版中华人民共和国药典未收载桔梗皂苷D的含量测定方法,仅用重量法测定正丁醇部位的量,比较粗糙,HPLC—ELSD法的建立,为控制桔梗的质量和试管苗的早期筛选提供了新的方法.参考文献:[1]中华^民共和国药典委员会.中华^民共和国药典2∞0年版(一部)[M]北京:化学工业出版社.2∞02252]肖祟厚中药化学[川上海:上海科学技术出版社.1997,419—421.【3jKimTJ,LeeSjlsolati~anddetemfimai~ofplaty,zodlnD platyc,od~【J.~malSeiTedmol,1990.3(3):339～341.[4]小木曾弘尚桔梗皂苷的I-IPLC定量分析J].国外医学中医中药分册,1995.17(5):33[5]原田正敏繁用生药成分定量M],京:东京广JIJ书店,j989j20一j33[6]许传莲.杨睹虎,郁毅男,等应用RP.I-IPLC法测定不同产地中桔梗皂苷DJ].吉林农业大学.1999.21(4):35—38.7]舒娈.高山林.桔梗蛆鲤培养技术的研究[J]植物资掉与环境,2.00110(3):63—64(责任编辑:宗世贤)。
外标两点法
外标两点法对数方程是在应用高效液相色谱-蒸发光散射检测器（HPLC-ELS D）进行药物分析时的含量计算方法。
大家都知道在用高效液相色谱-蒸发光散射检测器（HPLC-ELSD）的定量用外标两点法对数方程，并且药典也要求如此！比如银杏叶、知母、黄芪、人参、署预、（中药含有皂苷的），化药也有一些。
但对数方程的列法却各不相同，有很多人是3楼的列法：峰面积和进样量同时去对数。
但就药典的文字理解：“对数方程”是指在方程里有一个对数，而同时取对数列出来的方程叫双对数方程。
根据最小二乘法应该是进样量(ug)与峰面积的对数的线性方程。
我们用蒸发光散射检测器时，由于散射光的信号为非线性的，根据ELSd的工作原理，进样质量和ELSD检测响应值（峰面积）一般不呈现良好的线性。
因为信号相应值与物质质量的对数呈线性关系，如果对进样质量和峰面积分别取常用对数后，两者呈现良好的线性关系，但是它是一条不经过原点的直线，所以在含量测定时必须使用外标两点法，通常称作外标两点法对数方程，在中国药典20 00版2002增补本以及2005版、2010版中，凡采用HPLC-ELSD方法进行含量测定时，均有“采用外标两点法对数方程计算含量”一句。
进两个不同浓度的对照品, 将进样量和对应的峰面积取对数后，由两点确定方程，方法是将两组数值代入直线方程：y=Kx+b，即可求出式中的K和b。
再将求出的K和b代入公式：InA=KInC+b ，即可求出对数方程。
公式为：InA=KInC+bA：峰面积K：为公式y=Kx+b中的KC：进样量b：为公式y=Kx+b中的b计算时将样品峰面积（A）代入方程InA=KInC+b，计算出InC后，再取反对数就可以计算出C了．再电子表格计算较为方便．在Excel中进行直线回归，可得出该方程，最后求出带入计算，就OK了！解析外标两点对数方程计算黄芪药材含量方法：照高效液相色谱法，ODS柱，以乙腈-水（32：68）为流动相，流速1ml/min，经蒸发光检测器检测，用外标两点对数方程计算黄芪药材中黄芪甲苷的含量。
外标两点法对数方程
外标两点法对数方程是在应用高效液相色谱-蒸发光散射检测器（HPLC-ELSD）进行药物分析时的含量计算方法。
大家都知道在用高效液相色谱-蒸发光散射检测器（HPLC-ELSD）的定量用外标两点法对数方程，并且药典也要求如此！比如银杏叶、知母、黄芪、人参、署预、（中药含有皂苷的），化药也有一些。
但对数方程的列法却各不相同，有很多人是3楼的列法：峰面积和进样量同时去对数。
但就药典的文字理解：“对数方程”是指在方程里有一个对数，而同时取对数列出来的方程叫双对数方程。
根据最小二乘法应该是进样量(ug)与峰面积的对数的线性方程。
我们用蒸发光散射检测器时，由于散射光的信号为非线性的，根据ELSd的工作原理，进样质量和ELSD检测响应值（峰面积）一般不呈现良好的线性。
因为信号相应值与物质质量的对数呈线性关系，如果对进样质量和峰面积分别取常用对数后，两者呈现良好的线性关系，但是它是一条不经过原点的直线，所以在含量测定时必须使用外标两点法，通常称作外标两点法对数方程，在中国药典2000版2002增补本以及2005版、2010版中，凡采用HPLC-ELSD方法进行含量测定时，均有“采用外标两点法对数方程计算含量”一句。
进两个不同浓度的对照品, 将进样量和对应的峰面积取对数后，由两点确定方程，方法是将两组数值代入直线方程：y=Kx+b，即可求出式中的K和b。
再将求出的K和b代入公式：InA=KInC+b ，即可求出对数方程。
公式为：InA=KInC+bA：峰面积K：为公式y=Kx+b中的KC：进样量b：为公式y=Kx+b中的b计算时将样品峰面积（A）代入方程InA=KInC+b，计算出InC后，再取反对数就可以计算出C了．再电子表格计算较为方便．在Excel中进行直线回归，可得出该方程，最后求出带入计算，就OK了！。
HPLC-ELSD法测定复方桔梗止咳片中桔梗皂苷D的含量
HPLC-ELSD法测定复方桔梗止咳片中桔梗皂苷D的含量张秀丽;郑琰;崔岩【摘要】Objective To determine the compound Platycodon cough of platycodin D establish a method. Method Using the method of HPLC-ELSD, The column was KromasilC18(4.6 mm ×250 mm,5 μm), mobile phase acetonitrile water (28∶72), The lfow rate was 0.9 mL/min, the ELSD drift tube temperature of 70 ℃, and the gas lfow rate is 3.0 SLPM/ min.Results The linear range of Platycodin D was 0.1950~4.8750 μg(r=0.9996), The average recovery was 99.44%, RSD=1.2% (n=6). Conclusion The method is accurate with a good reproducibility ,and suitable for quality control of compound Platycodon cough.%目的：建立一方法来测定复方桔梗止咳片中的桔梗皂苷D。
方法采用HPLC-ELSD法，色谱柱为KromasilC18（4.6mm×250mm，5μm），流动相为乙腈-水（28∶72），流速为0.9mL/min，ELSD漂移管温度为70℃，气体流速为3.0SLPM/min。
结果在0.513～10.26μg线性范围内桔梗皂苷D进样量与峰面积呈良好的线性关系良好（r=0.9996），平均回收率99.44%，RSD=1.2%（n=6）。
武汉大学天然产物的提取桔梗
食品价值
桔梗不仅是一种传统中药,还是一种食品,其根 可制成美味的菜肴,在我国东北地区及日、韩、等 东亚国家,桔梗都被用作常用蔬菜之一。桔梗营养 丰富含有大量亚油酸等不饱和脂肪酸,具有降压降 脂、抗动脉粥样硬化等多种作用。因此桔梗是种 很好的功能性食品。
近年来,日本学者将桔梗的提取物用于化妆品 和浴液中。经研究,桔梗等植物的提取物可抑制粘 多糖的降解,消除氧自由基,具有抗氧化作用,可用 于抗衰老化妆品的研制。同时报导用酸液电解用 制备香味及色素物质用于化妆品生产。此外,桔梗 浸液还可作为农作物的杀虫杀菌剂。因此,桔梗除 药用外,尚有很高的经济价值。
在本制备方法中,采用提取液直接通过大 孔吸附树脂柱进行富集,既可简化操作,又 可节省能耗,降低成本。 4) 本法操作简单、快速、安全,使用溶剂 单纯且可回收套用,适于工业化大量制备
醇提大孔吸附树脂柱色谱法
提取:取生药桔梗干品715 kg ,粉碎过 840μm 孔径筛(20 目) ,室温下用70 %乙 醇浸提5 次,每次36 h (第1 次用乙醇15 L , 后4 次为10 L/ 次) ,每4～6 h 充分搅拌1 次。合并浸提物,浓缩至有油状物产生时, 将其于冰箱中放置48 h ,分离油状物和浓 缩提取液,分别用氯仿脱脂。油状物脱脂 后再用正丁醇萃取,回收至干 分离:前处理后的桔梗提取液浓缩物6 400 mL 分3 份:2 100 mL 、2 200 mL 、 2 100 mL ,于11 cm ×115 m的玻璃柱中 装入大孔吸附树脂6 kg ,蒸馏水平衡24 h 后上样,用水和20 %、30 %、40 %、50 %、95 %乙醇洗脱.
水提取法
取4kg桔梗粉末，以4倍量水常温浸提5次， 每次24h，合并提取液减压浓缩至2L，以5 倍量的乙醇沉淀菊糖，减压过滤，浓缩上 清液至无醇味，上大孔吸附树脂，水洗脱 糖脱色，酒精洗脱至无色，酒精洗脱液浓 缩至无醇味，水溶冷冻干燥，得总皂苷冻 干粉49.12g，产率为1.2%
桔梗质量标准及检验操作规程
XXXXXXXXX有限公司成品质量标准及检验操作规程1 品名：1.1中文名：桔梗1.2 汉语拼音：Jiegeng2 代码：3 取样文件编号：4 检验方法文件编号：5 依据：《中国药典》（2020年版第一部）。
6 质量标准：7.净药材质量标准：8 检验操作规程：8.1 试药与试剂：甘油、硫酸、乙醇、水、三氯甲烷、无水硫酸钠、甲醇、桔梗对照药材、乙醚、乙腈、桔梗皂苷D对照品、正丁醇、氨水、硅胶。
8.2 仪器与用具：显微镜、水浴锅、烘箱、硅胶G薄层板、高效液相色谱仪、二氧化硫测定仪。
8.3 性状：取本品适量，自然光下目测色泽，嗅闻气味。
8.4 鉴别：8.4.1取本品，切片，用稀甘油装片，置显微镜下观察。
8.4.2取本品粉末1g，加7%硫酸乙醇-水（1:3）混合液20ml，加热回流3小时，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，每次20ml，合并三氯甲烷液，加水洗涤2次，每次30ml，弃去洗液，三氯甲烷液用无水硫酸钠脱水，滤过，滤液回收溶剂至干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
另取桔梗对照药材1g，同法制成对照药材溶液。
照薄层色谱法（附录7）试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙醚（2:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。
供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
8.5 检查：8.5.1 水分：不得过11.0%（附录15第二法）。
8.5.2 总灰分：不得过5.0%（附录17）。
8.5.3二氧化硫残留量照二氧化硫残留量测定法（附录58）测定，不得过150mg/kg。
8.6 浸出物：照醇溶性浸出物测定法（附录19）项下的热浸法测定，用乙醇作溶剂，不得少于17.0％8.6 含量测定：照高效液相色谱法（附录8）测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，YMC-Pack ODS-A色谱柱（柱长为25cm，内径为4.6mm，粒径为5μm）；以乙腈-水（25：75）为流动相；蒸发光散射检测器检测；理论板数按桔梗皂苷D峰计算应不低于3000。
桔 梗2010版药典
桔梗JiegengPLATYCODONIS RADIX本品为桔梗科植物桔梗Platycodon grandiflorum(Jacq.)A.Dc.的干燥根。
春、秋二季采挖，洗净，除去须根，趁鲜剥去外皮或不去外皮，干燥。
【性状】本品呈圆柱形或略呈纺锤形，下部渐细，有的有分枝，略扭曲，长7～20cm，直径O.7～2cm。
表面白色或淡黄白色，不去外皮者表面黄棕色至灰棕色，具纵扭皱沟，并有横长的皮孔样斑痕及支根痕，上部有横纹。
有的顶端有较短的根茎或不明显，其上有数个半月形茎痕。
质脆，断面不平坦，形成层环棕色，皮部类白色，有裂隙，木部淡黄白色。
气微，味微甜后苦。
【鉴别】 (1)本品横切面：木栓细胞有时残存，不去外皮者有木栓层，细胞中含草酸钙小棱晶。
栓内层窄。
韧皮部乳管群散在，乳管壁略厚，内含微细颗粒状黄棕色物。
形成层成环。
木质部导管单个散在或数个相聚，呈放射状排列。
薄壁细胞含菊糖。
(2)取本品，切片，用稀甘油装片，置显微镜下观察，可见扇形或类圆形的菊糖结晶。
(3)取本品粉末1g，加7％硫酸乙醇-水(1：3)混合溶液20ml，加热回流3小时，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，每次20m1，合并三氯甲烷液，加水洗涤2次，每次30ml，弃去洗液，三氯甲烷液用无水硫酸钠脱水，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
另取桔梗对照药材1g，同法制成对照药材溶液。
照薄层色谱法(附录ⅥB)试验，吸取上述两种溶液各10,ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙醚(2：1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。
供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
【检查】水分不得过15.O％(ⅨH第一法)。
总灰分不得过6.O％(附录ⅨK)。
【浸出物】照醇溶性浸出物测定法(附录X A)项下的热浸法测定，用乙醇作溶剂，不得少于17.O％。
【含量测定】照高效液相色谱法(附录Ⅵ B)测定。
成品药材桔梗质量标准
本品按干燥品计算，含桔梗皂苷D（C57H92O28）不得少于0.10%。
【性味与归经】苦、辛，平。归肺经。
【功能与主治】宣肺，利咽，祛痰，排脓。用于咳嗽痰多，胸闷不畅，咽痛音哑，肺痈吐脓。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水（25∶75）为流动相；蒸发光散射检测器检测。理论板数按桔梗皂苷D峰计算应不低于3000。
对照品溶液的制备取桔梗皂苷D对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得。
供试品溶液的制备取本品粉末（过二号筛）约2g，精密称定，精密加入50%甲醇50ml，称定重量, 超声处理（功率250W，频率40KHz）30分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml，置水浴蒸干，残渣加水20ml，微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨试液50ml洗涤，弃去氨液，再用正丁醇饱和的水50ml洗涤，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇3ml，加硅胶0.5g拌匀，置水浴蒸干，加于硅胶柱［100～120目，10g，内径为2cm，用三氯甲烷-甲醇（9:1）混合溶液湿法装柱］上，以三氯甲烷-甲醇（9:1）混合溶液50ml洗脱，弃去洗脱液，再用三氯甲烷-甲醇-水(60:20:3）混合溶液100ml洗脱，弃去洗脱液，继用三氯甲烷-甲醇-水(60:29:6）混合溶液100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，即得。
【检查】水分不得过11.0%（附录Ⅸ H第一法）。
杂质、灰屑检查不得过3.0%。
HPLC-ELSD法测定痰咳净片中桔梗皂苷D含量-刘爱明,周文君
53第17卷 第3期 2015 年 3 月辽宁中医药大学学报JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCMVol. 17 No. 3 Mar .，2015痰咳净片收载于卫生部药品标准中药成方制剂第二十册，是桔梗、咖啡因、远志、冰片、苦杏仁、五倍子和甘草7味药制备而成的复方制剂，具有通窍顺气、消炎镇咳、促进排痰等作用。
用于急慢性支气管炎、胸闷、咽喉炎、肺气肿等引起的咳嗽痰多、气促、气喘等症。
在其原标准中，只有咖啡因的含量HPLC-ELSD法测定痰咳净片中桔梗皂苷D含量刘爱明，周文君（朝阳市食品药品检验所，辽宁 朝阳 122000）摘 要：目的：建立痰咳净片中桔梗皂苷D的含量测定方法。
方法：采用高效液相色谱法-蒸发光散射检测器（HPLC-ELSD），色谱柱为Kromasil C 18（4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相为乙腈-水（26∶74），流速为1.0 mL/min，ELSD 漂移管温度为80 ℃，气体流速为2.6 SLPM/min。
结果：桔梗皂苷D 进样量在0.499 4~12.485 4 μg 线性范围内峰面积线性关系良好（r =0.999 7），平均回收率98.51%，RSD=0.8%（n =6）。
结论：该方法准确、可靠，重复性好，灵敏度高，可用于痰咳净片的质量控制标准。
关键词：痰咳净片；桔梗皂苷D；高效液相色谱法-蒸发光散射检测器中图分类号：R284 文献标志码：A 文章编号：1673-842X (2015) 03- 0053- 03收稿日期：2014-08-15作者简介：刘爱明（1982-），女，辽宁朝阳人，主管药师，硕士，研究方向：抗生素药品的化学检验及中药微生物限度、无菌药品的检验。
Determination of Platycodin D in Compound TankejingTablets by HPLC-ELSD MethodLIU Aiming，ZHOU Wenjun（Chaoyang Institute for Food and Drug Control，Chaoyang 122000，Liaoning，China）Abstract：Objective ：To establish a method for determination the content of platycodin D in Compound Tankejing Tablets. Method ：High performance liquid chromatography with evaporative light scattering detector（HPLC-ELSD）method was used. The column was Kromasil C 18（4.6 mm×250 mm，5 μ m）and the mobile phase acetonitrile water was 26∶74. The flow rate was 1.0 mL/min and the ELSD drift tube temperature was 80 ℃ and the gas flow rate was 2.6 SLPM/min. Results ：The linear range of Platycodin D was 0.499 4~12.485 4 μg（r =0.999 9）. The average recovery was 98.51%，RSD=0.8%（n =6）. Conclusion ：The method is accurate and reliable with good reproducibility and high sensitivity and can be used for the quality control of Compound Tankejing Tablets.Key words：Tankejing tablet；platycodin D；HPLC-ELSD质量标准评价体系提出了新的思路和新的方向，对于揭示中药的本质及现代中药的研究方向具有重大意义。
桔梗检验标准操作规程
原药材检验标准操作规程目的：建立一个中药饮片原药材检验标准操作程序，确保检验结果准确可靠。
适用范围：中药原药材。
责任人：质量保证部主任、质量控制部主任、化验员。
标准来源：《中华人民共和国药典》2010年版一部、《安徽省中药饮片炮制规范》。
内容：1、性状取本品适量，放入白瓷盘中，用眼观察，可见以下性状特征：本品呈圆柱形或略呈纺锤形，下部渐细，有的有分枝，略扭曲，长7~20cm，直径0.7~2cm。
表面白色或淡黄白色，不去外皮者表面黄棕色至灰棕色，具纵扭皱沟，并有横长的皮孔样斑痕及支根痕，上部有横纹。
有的顶端有较短的根茎或不明显，其上有数个半月形茎痕。
质脆，断面不平坦，形成层环棕色，皮部类白色，有裂隙，本部淡黄白色。
气微，味微甜后苦。
2、鉴别主要使用仪器：电子分析天平、电子显微镜等。
2.1显微鉴别：2.1.1 试液配制2.1.1.1 水合氯醛试液：取水合氯醛50克，加水15毫升与甘油10毫升使溶解，即得。
2.1.1.2 甘油醋酸试液：取甘油、醋酸及水各等份混匀，即得。
2.1.1.3 稀甘油：取甘油33毫升，加水稀释至100毫升，再加樟脑一小块或液化苯酚1滴，即得。
2.1.2 供试品制备横切面制备：取供试品欲观察部位，经软化处理后，用徒手切片法切成10~20μm的薄片，选取平整的薄片置载玻片上，滴加水合氯醛试液后，在酒精灯上加热透化，并滴加稀甘油，盖上盖玻片。
2.1.3 置显微镜下观察可见本品横切面：木栓细胞有时残存，不去外皮者有栓皮层，细胞中含草酸钙小棱晶。
栓内层窄，常见裂隙。
韧皮部乳管群散在，壁略厚，内含微细颗粒状黄棕色物。
形成层成环。
木质部导管单个散在或数个相聚，呈放射状排列。
薄壁细胞含菊糖。
2.2理化鉴别取本品，切片，用稀甘油装片，置显微镜下观察，可见扇形或类圆形的菊糖结晶。
2.3薄层鉴别取本品粉末1g，加7%硫酸乙醇-水（1：3）混合液20ml，加热回流3小时，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，每次20ml，合并三氯甲烷液，加水30ml洗涤，弃去洗液，三氯甲烷液用无水硫酸钠脱水，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml 使溶解，作为供试品溶液。
一种桔梗含量的测定方法
一种桔梗含量的测定方法
桔梗含量的测定是一种重要的分析方法，它可以用来测定桔梗中的有效成分含量。
桔梗是一种常见的中药，具有清热解毒、润肺止咳、消炎止痛等功效，因此，测定桔梗中有效成分的含量对于确定桔梗的质量和安全性至关重要。
桔梗含量的测定方法主要有薄层色谱法、高效液相色谱法和气相色谱法等。
薄层色谱法是一种简单、快速、准确的测定方法，它可以用来测定桔梗中的有效成分含量。
高效液相色谱法是一种更加精确的测定方法，它可以用来测定桔梗中的有效成分的组成和含量。
气相色谱法是一种更加精确的测定方法，它可以用来测定桔梗中的有效成分的组成和含量，并且可以用来测定桔梗中的有效成分的结构。
桔梗含量的测定方法可以用来测定桔梗中的有效成分的含量，从而确定桔梗的质量和安全性。
此外，这些测定方法还可以用来测定桔梗中的有效成分的组成和结构，从而更好地了解桔梗的药理作用。
因此，桔梗含量的测定方法对于确定桔梗的质量和安全性具有重要意义。
桔梗茎叶总皂苷的提取工艺
桔梗茎叶总皂苷的提取工艺蒋征奎;李晓;王学方【摘要】目的:优选桔梗茎叶总皂苷的最佳提取和纯化工艺,为桔梗非药用部位的综合开发利用提供参考.方法:以桔梗茎叶总皂苷收率、桔梗皂苷D的含量与转移率为指标,采用正交试验考察溶剂用量、提取温度、提取时间与提取次数对桔梗茎叶皂苷提取工艺的影响,再进一步通过大孔吸附树脂富集纯化总皂苷.结果:最佳提取工艺参数为在100 ℃条件下,加12倍量的水,提取2次,每次1.5h.优化纯化工艺参数为最佳工艺提取药液离心后浓缩至1.0g生药/mL,通过AB-8型大孔吸附树脂,上样量为桔梗茎叶提取物量∶树脂量=0.8∶1,上样流速为1.0 mL· min-,用5 BV的75％乙醇洗脱.结论:优选的提取和纯化工艺稳定可行,可用于桔梗茎叶皂苷的提取.【期刊名称】《中国现代中药》【年(卷),期】2019(021)003【总页数】7页(P347-352,374)【关键词】桔梗茎叶;桔梗皂苷D;提取工艺【作者】蒋征奎;李晓;王学方【作者单位】郑州大学附属肿瘤医院(河南省肿瘤医院),河南郑州 450000;河南省植物天然产物开发工程技术研究中心,河南郑州 450002;河南省植物天然产物开发工程技术研究中心,河南郑州 450002【正文语种】中文【中图分类】R282.71;R284.2桔梗为桔梗科植物桔梗Platycodon grandiflorum(Jacq.)A.DC.的干燥根，是我国传统的四十种大宗中药材之一，最早载于《神农本草经》。
其性平，味苦、辛，归肺经，具有宣肺利咽、祛痰排脓之功效，临床常用于咳嗽痰多、咽痛、音哑、胸闷不畅等[1]。
桔梗中含有大量的三萜皂苷，生物活性研究表明，桔梗皂苷具有祛痰、抗氧化、保肝、降糖、抑制脂肪吸收、抗菌、抗炎、抗肿瘤等作用[2-4]。
桔梗为多年生草本植物，一般种植2～3年后收获地下根，而桔梗茎叶作为非入药部位多废弃不用，造成资源浪费。
有研究表明，桔梗茎叶中总皂苷含量高于桔梗根中总皂苷的含量[5]，与桔梗根相比，桔梗茎叶的祛痰作用在一定范围内随着浓度的增加明显增强[6]；桔梗茎叶总皂苷具有明显的抗肿瘤作用，对免疫器官也有一定的保护作用[7]；另外，桔梗茎叶还具有一定的抗炎活性[8]。
桔梗不同部位多糖含量比较
桔梗不同部位多糖含量比较华芳;王举涛;桂双英【期刊名称】《安徽中医学院学报》【年(卷),期】2012(031)002【摘要】目的比较桔梗不同部位的多糖含量.方法以葡萄糖为对照品,采用苯酚-浓硫酸比色法测定桔梗不同部位多糖含量.结果葡萄糖在3.60～14.40 μg/ml范围内浓度与吸收度呈良好线性关系,平均加样回收率为97.63%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为0.59%,桔梗根、须根、茎、叶中多糖含量分别为11.41%、9.24%、2.35%、2.21%.结论桔梗须根中多糖含量比茎、叶中高.%Objective To compare the contents of polysaccharides in different vegetative organs of Platycodon grandiflorum. Methods The contents of polysaccharide, expressed as glucose equivalents, were measured by using the phenol-concentrated sulfuric acid chromatometry. Results The good linearity between concentrations and absorbance of glucose was found within the range of 3. 60 to 14. 40 μg/ml, the average recovery was 97. 63 % and relative standard deviation was 0. 59% , the contents of polysaccharide in roots,fibrous roots ,stems, and leaves of Platycodon grandiflorum were 11. 41% ,9. 24 % ,2. 35 % ,and 2. 21% ,respectively. Conclusion The contents of polysaccharides in fibrous roots of Platycodon grandiflorum. Are higher than those in stems and leaves.【总页数】3页(P67-69)【作者】华芳;王举涛;桂双英【作者单位】安徽中医学院药学院,安徽,合肥,230031;安徽中医学院药学院,安徽,合肥,230031;安徽中医学院药学院,安徽,合肥,230031;安徽省中药制剂工程技术研究中心,安徽合肥,230031;现代中药安徽省重点实验室,安徽,合肥,230031【正文语种】中文【中图分类】R927.2【相关文献】1.不同采收时期及不同部位绿凤藤茶中多糖含量比较与分析 [J], 向东山;郑小江;翟琨2.不同产地桔梗中桔梗皂苷D及总多糖的含量比较 [J], 金传山;张伟;桂双英;彭代银;吴德玲;黄力;李保明3.白桦茸不同部位多糖含量比较分析及抗疲劳作用研究 [J], 刘吉爽;张雅蓉;徐犇;李纳;陈新;邱智东4.白桦茸不同部位多糖含量比较分析及抗疲劳作用研究 [J], 刘吉爽;张雅蓉;徐犇;李纳;陈新;邱智东;5.茯苓不同产地、不同药用部位多糖含量比较 [J], 宋潇;谢昭明;黄丹;钟灿;周海燕因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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如有需要表格计算：联系QQ1174347749. 对照计算a与b公式：Log(A)=a*Log(V*C)+b，即Y=aX+b ；有的也表示Log(A)=a*Log(C)+b，其中实际C为（进样体积V与对照浓度C的积）。 样品计算（c样）公式：Log（c样*V）=（Log(A样)-b）/a ，V为样品进样体积。 C含量%=c样*样品总体积/称样量/（1-水分）*100 ，单位换算与水分应按具体实验要求决定。
进样（微升） 进样V1 进样V2 5 10
峰面积A 911213 2981235 峰面积A 1032117 1072612
对照品溶液 C:ug/uL Log(A)为Y 0.5003 5.959619907 6.474396211
Log(V*C)为X 0.699230503
a
b
0.398200507 1.71005 5.278677
Log(峰面积)与进样量的总质量浓度对数 Log(进样体积乘对照浓度)的线性
关系，（进样量的总质量浓度指主成分质量，常以ug为单位）。
称样量：g 样① 2.0032 样② 2.0079
供试品溶液 C样:ug/uL 稀释倍数（总体积mL） 进样V（微升） 0.269055757 10 10 0.27517952 10 10
水分 0.122
C含量% 0.152976 0.156092
POWER(number,power):返回给定数字的乘幂。 Number:底数，可以为任意实数。 Pቤተ መጻሕፍቲ ባይዱwer:指数，底数按该指数次幂乘方。 LOG(number,base):按所指定的底数，返回一个数的对数。 Number:为用于计算对数的正实数。 Base:为对数的底数。如果省略底数，一般通常假定其值为10。外标两点法对数方程是以底数为10的对数来计算。 区别 LN(number):返回一个数的自然对数。自然对数以常数项 e (2.71828182845904) 为底。 Number:是用于计算其自然对数的正实数。 外标两点法对数方程:通常指峰面积的对数