活化部分凝血酶时间(APTT)测定

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活化部分凝血酶时间(APTT)检测的临床意义

活化部分凝血酶时间(APTT)检测的临床意义

活化部分凝血酶时间(APTT)检测的临床意义一、概述1、血浆活化部分凝血活酶时间(APTT)是一个基础的内源性凝血途径筛查试验(凝血因子XII、XI、IX、VIII、X、V、II和I)。

2、APTT 主要用于发现先天或后天获得的这些因子缺乏,以及肝素疗法的监测。

APTT 比其它的基础筛查试验(如复钙时间,部分凝血活酶时间)具有更高的灵敏度和更好的重复性。

二、APTT检测的原理使用仪器为全自动凝血分析仪。

原理为待测血浆加入APTT 试剂(鞣花酸),37℃混匀预温一定时间,在钙离子参与下,激活内源性凝血系统,使纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白,测定凝固所需的时间,即为待测血浆的活化部分凝血活酶时间(APTT)。

三、标本要求1、标本量:2ml2、标本种类:使用0.109mmol/L枸橼酸钠溶液作为抗凝剂,全血与抗凝剂比例为9:1。

3、如果红细胞压积<20%或>55%,则需调整抗凝剂用量或者抽血量,计算公式如下:0.00185x血液毫升数x(100-压积)=抗凝剂毫升数。

比如红细胞压积(HCT)为19%时,抗凝剂量为0.2ml,则抽血量为 1.3 ml左右;红细胞压积(HCT)为57%时,抗凝剂量为0.2ml,则抽血量为2.5 ml左右。

4、采集样本必须使用一次性塑料试管或硅化玻璃管,使用真空采血后应及时去真空。

样本不宜采用草酸盐、EDTA和肝素作抗凝剂。

5、样本处理:室温下3000rpm离心15分钟或3000g 离心10分钟。

6、标本应及时检测,最迟不超过2h。

四、参考区间APTT参考区间:21-37 S五、临床意义1、APTT延长:见于凝血因子II、V、VIII、IX、XI、XII减低,纤维蛋白原缺乏症,纤溶活力增强,抗凝物质存在(如血内肝素含量增高及口服抗凝剂),是监控肝素治疗的重要指标。

2、APTT缩短:①高凝状态,如弥散性血管内凝血的高凝血期、促凝物质进入血流以及凝血因子的活性增强等;②血栓性疾病,如心肌梗死、不稳定性心绞痛、脑血管病变、糖尿病伴血管病变、肺梗死、深静脉血栓形成、妊娠高血压综合征和肾病综合征以及严重灼伤等。

C3510活化部分凝血活酶时间(APTT)磁珠法

C3510活化部分凝血活酶时间(APTT)磁珠法

活化部分凝血活酶时间(APTT)测定(分析仪器法)1实验原理:光电磁珠法测试杯两侧的有一组驱动线圈,它们产生恒定的交替电磁场,使测试杯内特制的去磁小钢珠保持等幅振荡运动。

凝血激活剂加入后,随着纤维蛋白的产生增多,血浆的粘稠度增加,小钢珠的运动振幅逐渐减弱,仪器根据另一组测量线圈感应到小钢珠运动的变化,当运动幅度衰减到50%时确定凝固终点。

2标本采集2.12.23.831小时,236.6.16.2 ,室温保存7.7.17.27.37.4 仪器技术参数:7.4.1 速度:最快检测速度350测试/小时,组合检测约140测试/小时7.4.2 试剂位:28个,具冷藏功能。

7.4.3 样本位:80个,可自动连续添加。

7.5 仪器校准程序:7.5.1 校准频率:当方法改变,试剂厂家或试剂型号改变,仪器维修影响测定结果等情况时,必须进行校准。

7.5.2 校准操作:设置标准曲线分析(由仪器提供商指定工程师执行)8. 操作步骤:8.1 检查前准备:8.1.1 清空废液瓶,清空反应杯抛弃槽。

8.1.2 添加足够反应杯(不能超出警告线)。

8.1.3 添加清洁液试剂,清洗用蒸馏水等。

8.2 开机先开打印机再开主机,开机后仪器自检,约15分钟,屏幕上方“Not Ready”变为“Ready”,表示仪器预热完成,进入系统准备工作状态,可进行测定。

8.31.2.目345.8.4按8.38.5 按“8.68.6.1 用蘸有清洗液的纱布或棉签擦拭加样针和试剂的外表面。

8.6.2 清空废液瓶,和已使用过的反应杯,检查清洗液是否充足。

8.6.3 检查预温及测量通道内是否有掉落的钢珠,如果有请清除。

8.6.4 仪器连续工作24小时后需要关机1次。

9.检验结果的判断与分析:9.1 仪器测定APTT的线性范围在5-300秒,测定完成后仪器显示APTT秒数值等参数。

若不能对参数进行正确计算,将出现下列信息:﹡﹡﹡.﹡出现错误,不能得到分析数据ˉˉˉ.ˉ不能计算参数+++.+数值超出线性范围.9.2 仪器设定APTT参考范围在23-40秒,如果得不到一个正常数值,在数据的左侧将出现下列标记:﹡出现错误信息< 数据低于可报告的低限> 数据高于可报告的高限10. 质量控制:每批样本同时测定两个浓度水平(高值和正常值)的质控品,以2S为警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。

活化部分凝血活酶时间(APTT)检测试剂盒(凝固法)

活化部分凝血活酶时间(APTT)检测试剂盒(凝固法)

活化部分凝血活酶时间()检测试剂盒(凝固法)
产品简介:
静脉血离体后至完全凝固所需的时间即为凝血时间,它是反映内源性凝血系统各凝血因子活性的筛选实验。

活化部分凝血活酶时间()是利用在℃以白陶土激活因子Ⅻ,以部分凝血活酶代替血小板提供凝血的催化表面,在参与下,使纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白,计算缺乏血小板的血浆凝固所需的时间。

活化部分凝血活酶时间()检测试剂盒(凝固法)用于人、动物血液的活化凝血时间的测定,是反映内源性凝血系统较敏感和常用的筛选实验。

该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

产品组成:
自备材料:
、离心机
、计时器
、水浴锅
操作步骤(仅供参考):
制备待测血浆:取新鲜待测静脉血,与柠檬酸钠抗凝剂()按混合,轻轻混匀。

离心,收集上层液(缺乏血小板的血浆),转移至塑料试管或离心管,以防止血小板被激活。

同时应设正常对照血浆。

将白陶土脑磷脂平衡至室温,颠倒混匀。

取待测血浆(包括正常对照血浆)、白陶土脑磷脂溶液各,混匀。

置于℃水浴,期间轻轻混匀数次。

加入经温育至℃的(),立刻计时,置于水浴中不断震荡,约时取出,观察出现纤维蛋白丝的时间,重复次取平均值。

参考区间:男性:~;女性:~,待测者的测量值较正常值对照值延长以上具有临床意义。

以上值仅供参考,由于试剂、人群、仪器等不同,会导致参考值不同,建议各实验室建立自己的参考范围。

注意事项:
、以上操作,应同时测定正常对照。

、获得样本后,应及时检测,一般不应超过,℃孵育时间不应少于。

活化的部分凝血活酶时间(APTT)检测介绍

活化的部分凝血活酶时间(APTT)检测介绍

活化的部分凝血活酶时间(APTT)检测介绍用途液体试剂,提纯的大豆和兔脑磷脂,以及血浆激活物。

是一种活化的部分凝血活酶试剂,对狼疮样抑制剂的敏感性升高,用于测定活化部分凝血活酶时间和其它需要使用活化部分凝血活酶试剂的凝固方法。

概要和原理活化的部分凝血活酶时间(APTT),是一种全球通用的筛查方法,主要用于内源性凝血途径异常的评价,也用来检测因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅹ或者纤维蛋白原等严重的功能障碍。

APTT还广泛用于普通肝素疗效的监测方法中,血液凝固时间延长与肝素的水平成正比。

在口服抗凝剂的患者中,血液循环中因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ和Ⅹ的水平受到抑制,导致APTT延长。

非特异性抑制剂,如狼疮样抗凝剂,能使APTT延长,但是,此类影响是可变的,而且通常认为与所采用的APTT试剂的性能有关。

总之,APTT是一种重要的临床筛查试验,广泛应用于诊断凝血障碍性疾病、出血和血栓性疾病的治疗监测。

方法原理孵育血浆、适当量的磷脂和表面激活剂能够激活内源凝血系统因子。

添加的钙离子能触发凝血过程,然后测定凝固时间。

标本采集及准备将9份新鲜病人血液和1份0.11或0.13mol/L的枸橼酸钠(3.2或3.8%)混合。

商品化真空采血管含有指定抗凝剂,按血凝研究注意事项使用。

对于特殊的研究,采集技术必须很好。

采集后,立即于室温下按1500转/分,至少离心15分钟离心血液标本。

保存于室温下密封试管中。

若立即进行检测,则血浆可以不分离。

否则,需将血浆与血细胞分离。

分离血浆时,需使用塑料移液器,将其移至塑料试管中。

请勿冰冻。

非肝素化血浆应在采血后4小时内检测。

含有普通肝素的血浆应在采血后1小时内离心,室温下保存,4小时内检测。

乏血小板血浆可在≤-20℃冷冻条件下保存2周。

冰冻血浆应在37℃快速融解,轻柔混匀,立即检测。

样本在37℃下不得超过5分钟。

关于样本准备与保存的详细信息请参考CLSI文件H21-A5。

操作方法每个实验室必须测定其自身测试系统的最佳加热-活化时间。

凝血酶原时间和活化部分凝血活酶时间测定的问题

凝血酶原时间和活化部分凝血活酶时间测定的问题

凝血酶原时间和活化部分凝血活酶时间测定的问题【摘要】就目前玻片法凝血时间和Duke 氏出血时间测定已淘汰,迄今凝血试验中的凝血酶原时间 (PT) 和活化部分凝血活酶时间( APTT) 测定已有公认的标准化方案,简要介绍此两种时间测定的方法、标本采集、注意事项、临床意义等。

【关键词】凝血酶;时间测定;凝血活酶血栓与止血实验室检查的临床重要性与日俱增,检验内容不断扩大,工作量也日益增多,不断出现方法更新和试剂商品化、操作自动化,改变了以往靠手工操作、自配试剂、工作效率低的局面。

过去的玻片法凝血时间和Duke 氏出血时间测定已淘汰,迄今凝血试验中的凝血酶原时间 (PT) 和活化部分凝血活酶时间(APTT)测定已有公认的标准化方案[1],并成为实验室检查的常规项目。

1 玻片法凝血时间和 Duke 氏出血时间测定已淘汰1.1 凝血时间凝血时间是检测“内源”凝血系统相关因子缺陷的简易过筛试验。

目前国内广泛使用的玻片法很不敏感,国外早在60年代即已淘汰。

即使是被认为是较好的试管法,对第Ⅷ、第Ⅸ因子缺乏病例的阳性率也不高,而且操作繁琐。

某些出血性疾病需要查凝血时间时,现已改用 APTT 代替[1]。

1.2 出血时间出血时间是一种检测血小板数量、功能和毛细血管功能的过筛试验。

目前我国临床常规实验室普遍采用的 Duke 氏法,甚不敏感。

少数出血性疾病,例如血小板减少及功能异常及血管性血友病(vWD)等需要作BT时,应采用出血时间测定器法 ( 改良的 Ivy法 );后者要求患者在上臂缚压脉带,充气并维持一定压力,再用特制的刺血刀具 ( 目前这种刀具主要靠进口 ),切一标准切口,记录出血时间。

操作繁琐、费时,不能列为常规。

该法影响因素很多,Crowl ey等列举的主要因素有 : 技术操作、切口的方向和部位、皮肤的温度和 Hct,特别是后者影响较大[2]。

1991年LIND在《BLOOD》杂志上,发表了题为“出血时间不能预测外科出血”的文章[3]。

活化部分凝血活酶时间APTT测定作业指导书

活化部分凝血活酶时间APTT测定作业指导书

活化部分凝血活酶时间APTT测定作业指导书1.实验原理:于37 C下在贫血小板血浆(PPP)中,加入激活剂,激活FXD和FX I,以脑磷脂替代血小板提供凝血的催化表面,在Ca 离子的参与下,观察血浆凝固所需时间,即为待测血浆活化部分凝血活酶时间(APTT)。

2.标本采集:2.1早晨空腹采血(空腹12 小时左右),静脉采血。

2.23. 8%(w/v)枸椽酸钠0.2ml+ 静脉血1.8ml ,混匀。

3.标本存放:1小时内(3000r/min x 10min)分离血浆,室温放置不超过2小时,2〜8 C保存不超过4小时,长时间保存需在冰冻条件下,(-70 C不超过6个月),只能冻融1次,在37 C 迅速解冻,以减低凝血因子的消耗,解冻后立即测试。

4.标本运输:低温条件下运输。

5.标本拒收的标准:抗凝剂不符合,采血量不准确,凝固,溶血,脂血标本不能作该项目检测。

6.实验材料:北京世帝科学仪器公司活化部分凝血酶原时间测定试剂盒,主要成分由APTT试剂和氯化钙溶液组成,APTT 试剂的主要成分为鞣花酸和脑磷脂。

7.仪器设备:7.1仪器名称:M200全自动凝血因子分析仪。

7.2仪器厂家:北京世帝科学仪器有限责任公司。

7.3仪器型号:Coagulation analyzer M2007.4仪器技术参数:7.4.1试剂位:16 个,可放置不同规格大小的试剂瓶。

7.4.2样品位:60 个,可放置原试管。

7.5仪器校准程序:7.5.1校准频率:当方法改变,试剂厂家或试剂型号改变,仪器维修影响测定结果等情况时,必须进行校准。

7.5.2校准操作:设置标准曲线分析(由仪器提供商指定工程师执行)。

8.操作步骤:8.1开机前应先检查清洗液、废液、测试杯、试剂量是否足够。

8.2打开血凝仪电源开关,打开电脑双击图标,输入密码。

8.3试剂按照图形显示的位置摆放。

8.4联机完成后,预温1 0-1 5min 。

8.5点击“输入”选择“项目”再选择单孔或批量,完毕后点击“新增”后,再点击退出。

活化部分凝血活酶时间测定

活化部分凝血活酶时间测定

活化部分凝血活酶时间测定(APTT)活化部分凝血活酶时间测定(APTT)是一种评估凝血系统功能的常用的检测方法。

这种方法可以用来检测在整个凝血过程中的多种因子,如凝血因子II、V、VIII、IX、X、XI和XII。

在本文中,我们将介绍APTT测试的原理、方法、结果和临床应用。

原理APTT测定基于凝血的内在通道。

它的原理是,在一种包含了活化剂(如凝血酶原激活物、磷脂、钙)的试剂中,将患者的血浆加入其中,然后通过计时,观察血浆在凝血过程中的变化。

在正常人的血液中,有一系列凝血因子,它们按照一定的顺序、一定的速度激活,最终形成纤维蛋白氧化还原酶,使纤维蛋白原转变为纤维蛋白。

在APTT测试中,血浆中的活化剂通过促进凝血反应和促进血浆的pH值降低来促进凝血,这导致患者血浆中的凝血酶原转化为凝血酶,从而加速凝固过程。

方法APTT测试需要用到一些特殊的试剂和设备。

这些试剂通常以套件的形式提供。

常见的试剂有APTT试剂盒、酶促试剂和钙试剂。

在进行该测试之前,操作者需要仔细查看说明书来确保测试过程正确,包括时间控制、加水量、温度、使用英寸管和计时方法等。

进行APTT测试时,操作者要首先收集新鲜血浆。

如果使用病人血浆,可以通过离心把红细胞和白细胞分离出来,得到新鲜的血浆。

然后,将APTT试剂加入血浆,搅拌后使其相互混合。

最后,加入一定量的钙离子。

在添加钙离子的同时,开始计时。

当血浆发生凝固时,停止计时并记录时间。

通过比较患者血浆的凝固时间和标准血浆的凝固时间,可以确定患者血浆中凝血因子的活性水平。

结果的解释APTT测试中,通常在30-60秒之间,血浆会开始凝固,绝大多数情况下,正常人的凝固时间为28-38秒。

如果患者的APTT时间超过正常范围,这可能意味着存在凝血因子缺陷或异常。

例如,低血小板症、因子VIII缺乏、因子IX或XI缺乏和因子II、V、X或VII缺陷等。

临床应用APTT测试广泛应用于疾病的诊断和治疗监测中。

活化部分凝血活酶时间(APTT)测定标准操作规程

活化部分凝血活酶时间(APTT)测定标准操作规程

活化部分凝血活酶时间(APTT)测定标准操作规程1.检验原理:待测血浆加入糅花酸激活剂及脑磷脂(部分凝血活酶),37℃温育一定时间,激活内源凝血因子刈,XI等,在Ca?+参与下,最终使纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白。

在光学比浊法仪器上测定加入CaCl2凝固所需的时间,即为待测血浆的APn.2.试剂主要组成成分RI:APTT试剂:糅花酸、兔脑磷脂;R2:CacI2溶液:25mmol∕L氯化钙。

3.样本要求3.1.采集静脉血,立即按9份血:1份抗凝剂比例与0.109mol∕L枸檬酸钠充分混合均匀。

室温300OrPm离心12分钟,上层淡黄色液体为待检的乏血小板血浆。

3.2血浆室温放置,宜在2小时内检测。

3.3血浆若不能及时检测,用塑料吸管分离,-20℃可保存2周。

测定前37℃快速融化,轻微混匀后立即检测。

4.检验方法:全自动血凝分析仪测定(详见雷杜RACT830标准操作规程)5.参考区间:24—36秒6.检验结果的解释6.1报告APTT秒数(三)和/或比值,检验结果与各实验室的参考值范围相关。

7.2口服肝素、香豆素类药物会使APTT延长。

8.检验方法的局限性8.1凝血过程包括从因子激活到纤维蛋白形成的一系列反应。

因此,检验结果可能受到治疗药物(干扰物)、检验操作、检验系统等因素的影响,应考虑这些因素。

8.2试剂被污染,或者样品杯、吸管等被凝血剂/抗凝剂污染,会导致凝血异常,需严格控制。

9.产品性能指标重复性:用质控血浆重复测试所得结果的变异系数(CV)应不超过3.8%。

10临床意义APTT测定是内源性凝血系统较敏感和常用的筛选试验,也可作为内源性途径凝血因子的定量试验,可检测除Vil因子外的其他血浆凝血因子,特别是用于因子VIIIIXXII和前激肽释放酶的测定。

同时,APTT测定可用于肝素治疗监控。

APTT延长:见于凝血因子IIVVfflIXXIXII减低,纤维蛋白原缺乏症,纤溶活力增强,抗凝物质存在,是监控肝素治疗的重要指标。

活化部分凝血活酶时间检测狼疮抗凝物的灵敏度及其相关性

活化部分凝血活酶时间检测狼疮抗凝物的灵敏度及其相关性

·502·活化部分凝血活酶时间 (activated partial thrombo -plastin time,APTT ) 凝血试验是将待测血浆和接触凝血因子激活剂、磷脂、氯化钙混合,记录血浆凝固的时间,通常用于筛查内源性和共同凝血途径的凝血障碍。

狼疮抗凝物 (lupus anticoagulant,LA ) 是一种能与带负电荷的磷脂或磷脂蛋白复合物结合的免疫球蛋白,属于抗磷脂抗体 (antiphospholipid antibody,APL ),可干扰依赖磷脂的体外凝血反应[1],其机制为· 论著 ·活化部分凝血活酶时间检测狼疮抗凝物的灵敏度及其相关性张家红,王金行,夏楠,李花 (中国医科大学附属第一医院检验科,沈阳 110001) 摘要 目的 评估常规活化部分凝血活酶时间 (APTT ) 对改良的稀释蝰蛇毒时间 (DRVVT ) 法及硅凝固时间 (SCT ) 法检测狼疮抗凝物 (LA ) 的灵敏度及相关性。

方法 回顾性分析2018年12月至2020年9月于我院检测LA 阳性且同时检测了APTT 的386例样本的检测结果。

根据APTT 参考区间上限分为APTT 正常组 (APTT≤43.0 s ) 和APTT 异常组 (APTT>43.0 s )。

2组数据非正态分布以M (P 25~P 75) 表示,组间数据比较采用非参数检验,采用受试者工作特征 (ROC ) 曲线分析LA 预测APTT 异常时的临界值和灵敏度,采用Spearman 秩相关分析APTT 与LA 的相关性。

结果 386例LA 阳性样本中,APTT 正常177例 (45.9%),APTT 异常209例 (54.1%)。

 APTT 异常组的DRVVT 标准化比值 (NR ) 及SCT -NR 显著高于APTT 正常组 (P < 0.01)。

APTT 对LA 的灵敏度:DRVVT -NR、SCT -NR 分别为1.39和1.83。

试验三活化部分凝血活酶时间测定

试验三活化部分凝血活酶时间测定

二、血凝仪法
【目的】 掌握活化分凝血活酶时间的血凝仪测 定法。 【原理】 APPT 是在体外满足内源性凝血全部条 件后的血浆凝固所需的时间。在37℃条件下,以 白陶土(激活剂)激活因子Ⅻ,以脑磷脂(部分 凝血活酶)代替血小板提供凝血的催化表面,再 加入适量的Ca2+即可满足内源性凝血的全部条件。 测定从加入Ca2+到血浆凝固所需的时间即为APTT。
【操作】 1.分离乏血小板血浆 2.平衡温度 3.温浴氯化钙溶液 4.测定正常人参比血浆的APTT 5.测定待检血浆的APTT 6.报告方式
【注意事项】 1.试剂质量对APTT测定结果影响很大,不同的部 分凝血活酶试剂,其质量也不同。一般选用对因子 Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ在血浆浓度为200~250U/L时灵敏的试 剂。激活剂因规格不一,其致活能力不同,因此 参比值有差异。如果正常人参比血浆APTT明显延 长,则提示APTT试剂质量不佳。 2.采血后应尽快检测,最迟不应超过2h。被检血 浆放置过久,凝固时间有缩短的倾向。 3 .血浆加APTT试剂后的温浴时间不得少于3min 。 时间过短,APTT延长。 4.其它同血浆凝血酶原时间测定。
实验三
活化部分凝血活酶时间测定
一、试管法
【目的】 掌握活化部分凝血活酶时间(APTT) 测 定的试管法。 【原理】 APPT是在体外满足内源性凝血全部条件 后的血浆凝固所需的时间。在37℃条件下,以白 陶土(激活剂)激活因子Ⅻ,以脑磷脂(部分凝 血活酶)代替血小板提供凝血的催化表面,再加 入适量的Ca2+即可满足内源性凝血的全部条件。 测定从加入Ca2+到血浆凝固所需的时间即为APTT。
【操作】 1.分离乏血小板血浆 同试管法。 2.平衡温度 同试管法。 3.温浴氯化钙溶液 同试管法。 4 .测定正常人参比血浆的APTT。 5.测定待测血浆的APTT。 6.报告方式 同试管法。

活化部分凝血活酶时间(APTT)测定试剂盒(凝固法)产品技术要求beikenhengye

活化部分凝血活酶时间(APTT)测定试剂盒(凝固法)产品技术要求beikenhengye

活化部分凝血活酶时间(APTT)测定试剂盒(凝固法)
适用范围:临床上主要用于体外测定人血浆的活化部分凝血活酶时间(APTT)。

1. 产品型号/规格及其划分说明
本试剂盒由液体试剂1和液体试剂2组成,具体规格见表1。

表1 试剂组成及规格
2.1外观
试剂1为淡黄色液体,试剂2 为无色透明溶液,试剂盒外观应整洁,文字符号标识
清晰。

2.2净含量
试剂的净含量应不小于标示量。

2.3准确性
用正常质控血浆和异常质控血浆测试试剂盒,其结果应在给定的靶值范围内。

2.4重复性
用正常值质控血浆和异常值质控血浆测试试剂盒,重复测试10次,所得结果的
变异系数(CV)应不大于5.0%。

2.5批间差
用质控血浆重复测试不同批号试剂,所得结果变异系数(CV)应不超过10%。

2.6开瓶稳定性
开瓶后的试剂在2℃-8℃时保存 30天,在12℃-16℃保存20天,应满足2.3的要
求。

2.7稳定性
试剂贮存在2℃-8℃条件下,有效期18个月。

取到效期后试剂检测应符合2.1、
2.4和2.8的要求。

2.8正常血浆测量值
用正常血浆测试,凝固时间应不大于35s。

活化部分凝血活酶时间APTT

活化部分凝血活酶时间APTT

活化部分凝血活酶时间(APTT)测定方法操作规程一.【产品名称】活化部分凝血活酶时间(APTT)测定试剂盒(鞣花酸)(凝固法)二.【预期用途】供医疗机构用于体外人血浆中活化部分凝血活酶时间测定,用于辅助诊断。

三.【临床意义】APTT测定是内源性凝血系统较敏感和常用的筛选试验,也可作为内源性途径凝血因子的定量试验,可检测除Ⅶ因子外的其他血浆凝血因子,特别是用于因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ和前激肽释放酶的测定。

同事,APTT测定可用于肝素治疗监控。

APTT延长:见于凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ减低,纤维蛋白原缺乏症,纤溶活力增强,抗凝物质存在(如血内肝素含量增加及口服抗凝剂),是监控肝素治疗的重要指标。

APTT缩短:见于高凝状态,血栓性疾病,如心肌梗塞、不稳定性心绞痛、脑血管病变、肺梗死、深静脉血栓形成、妊娠高血压综合症和肾病综合征等。

四.【检验原理】待测血浆加入部分凝血活酶溶液,在Ca艹参与下纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白,测定凝固所需的时间,即为待测血浆活化部分凝血活酶时间。

五.【主要组成成分】1.APTT(鞣花酸)试剂:10瓶(含脑磷脂、鞣花酸、稳定剂、防腐剂)2. 0.025mol/L CaCl2:1瓶(含氯化钙、防腐剂)3.说明书:1份注:不同批号试剂盒中0.025mol/L CaCl2可以互换。

六.【储存条件及有效期】未开启试剂于+2℃~+8℃保存可稳定至标签所示失效日期; 2.试剂开启后于+2℃~+8℃可保存4天。

试剂保存应防止冷冻。

七.【适用仪器】血凝分析仪。

八.【样本要求】1. 静脉采血,置于含有1/10体积0.109mol/L枸橼酸酸钠抗凝液(1份抗凝液+9份全血)的塑料管或硅化玻璃管中,轻轻颠倒混匀,3000rpm(或2500g)离心15分钟,收集上层液(血浆,黄色)。

2.采血必须使用一次性塑料注射器或硅化玻璃注射器,贮血必须使用塑料试管或硅化玻璃管。

不宜使用普通玻璃器,避免凝血因子活化。

活化部分凝血活酶时间测定

活化部分凝血活酶时间测定

活化部分凝血活酶时间(APTT)测定1. 实验原理将试剂加入抗凝血浆中,试剂中的微粒硅胶是血小板因子3的表面活性剂,与牛脑磷脂一同作用于内源凝血系统,当加入CaCl2后,开始凝集,产生纤维蛋白血凝块,通过660nm 光照射血浆,凝血过程中血浆的混浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定,然后通过标准曲线求出活化部分凝血活酶时间。

2. 标本采集2.1 早晨空腹采血(空腹12小时左右),静脉采血。

2.23.8%(w/v)枸椽酸钠0.2ml+静脉血1.8ml,混匀。

3. 标本存放:全血贮存在4~10oC不超过2小时,最好1小时内(3000r/min×15min)分离血浆,此血浆在室温22~24oC下可存放2小时,在2~4oC可存放4小时,在-20oC 可存放2周,长时间保存需在冰冻条件下,在-70oC可存放6个月。

冷冻血浆融化时,应将盛血浆的容器置37oC水浴中,并轻轻摇动,使其迅速融化,以免凝血因子消耗,解冻后立即测试。

冷冻过的标本不能再次冷冻,否则结果不准确。

4. 标本运输:低温条件下运输。

5. 标本拒收的标准:抗凝剂不符合,采血量不准确,凝固,溶血,脂血标本不能作该项目检测。

6. 实验材料:6.1每个试剂均购自德国Dade Behring Marburg公司。

1)APTT测定试剂盒(代号P/N: 8468710)冻干脑磷脂 5瓶CaCl2 5瓶(25mmol/L)2)定标血浆Calibration Plasma(代号P/N: 20003700)3)正常质控血浆Normal control plasma(代号P/N: 20003110)4)低水平质控血浆Abnormal control plasma level I/Low(代号P/N: 20003210)5)高水平质控血浆Abnormal control plasma level II/High (代号P/N: 20003310)6)因子稀释液(代号P/N:9757600)6.2试剂准备用9mL NCCLS II型或相同质量的蒸馏水溶解1瓶冻干脑磷脂,盖上盖子,轻摇至完全溶解,置15~25oC30分钟,用前摇匀,勿用力振摇。

活化部分凝血活酶时间测定

活化部分凝血活酶时间测定

活化部分凝血活酶时间测定活化部分凝血活酶时间(activate partial thromboplastin time,APTT)测定是内源性凝血系统常用的筛选试验之一,它可反映凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ及Ⅴ、Ⅹ的活性。

(一)检验原理凝固法:在37℃条件下,以白陶土、硅化土或鞣花酸为激活剂,活化凝血因子Ⅻ和Ⅺ,以脑磷脂(部分凝血活酶)代替血小板提供凝血的催化表面,在钙离子的参与下,观察乏血小板血浆凝固所需的时间。

(二)检验方法学1.试剂(1)4%白陶土-脑磷脂混悬液。

(2)0.025mol/L CaCl2。

2.标本采集受检全血与0.1mol/L草酸钠溶液或0.109mol/L枸橼酸钠溶液作1∶9抗凝,充分混匀,1500r/ min离心10分钟,以此制备乏血小板血浆。

3.标本检验取玻璃小试管1支,加入受检血浆、白陶土-脑磷脂混悬液各0.1ml,充分混匀,置37℃水浴3分钟,其间轻轻摇动数次。

加入0.025mol/L氯化钙溶液0.1ml,立即启动秒表,将受检标本在37℃水浴中不断轻轻摇动,约30秒时取出,记录受检标本出现纤维蛋白丝的时间,重复上述检测,取平均值。

(三)方法学评价离心时间及特殊的标本类型均会对检测构成影响(详见凝血酶原时间测定)。

(四)质量保证1.正常对照为保证白陶土(对凝血因子缺乏较为敏感)、硅化土(对狼疮抗凝物较为敏感)或鞣化酸(对肝素较为敏感)的质量,每天应以正常人混合血浆做正常对照。

2.检验温度水浴温度应恒定在36~38℃,受检血浆温浴时间不得短于3分钟。

3.检验周期应在采血后4小时内完成检测,否则可使结果假性延长。

4.调整抗凝剂比例同凝血酶原时间测定。

(五)参考范围男性:(37±3.3)秒;女性:(37.5±2.8)秒。

受检者的测定值较正常对照延长超过10秒才有病理意义。

(六)临床意义1.APTT延长主要见于凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ、激肽释放酶原(PK)和高分子量激肽原(HMWK)缺乏症,也可见于凝血因子Ⅴ、Ⅹ、Ⅱ和纤维蛋白原缺乏症及血液循环中存在抗凝物质等。

活化部分凝血活酶时间(APTT)测定结果建议用比率报告

活化部分凝血活酶时间(APTT)测定结果建议用比率报告

活化部分凝血活酶时间(APTT)测定结果建议用比率报告卢其明
【期刊名称】《现代检验医学杂志》
【年(卷),期】2006(021)001
【摘要】APTT是凝血功能检查的重要项目之一,反映了患者内源性凝血因子功能的重要指标.由于APTT试剂不统一,各医院检测试剂来源不同,有的使用进口试剂,有的使用国产试剂,而且不同生产厂家APTT参考值范围也不同。

许多医院仍然用秒数报告,这样,临床APTT测定结果可比性较差。

据笔者所知,DADE公司的人PTT参考值范围为24~36s,上海太阳生物技术有限公司的APTT参考值范围为23~35s,四川迈克生物科技工程有限公司的APTT参考值范围为30~44s,天津瑞美科学仪器有限公司的APTT参考值范围为24~33s,
【总页数】1页(P54-54)
【作者】卢其明
【作者单位】江苏省宝应县人民医院检验科,江苏,宝应,225800
【正文语种】中文
【中图分类】R446.11+2
【相关文献】
1.标本离心时间对凝血酶原时间(PT)和活化部分凝血活酶时间(APTT)的影响 [J], 许慧
2.关于用活化部分凝血活酶时间(APTT)替代传统玻片法凝血时间(C … [J], 张
辉;王永才
3.凝血检验活化部分凝血活酶时间(APTT)异常结果的价值 [J], 顾正航
4.标本离心时间对凝血酶原时间(PT)和活化部分凝血活酶时间(APTT)的影响[J], 许慧
5.临床实验室APTT ACTIN FSL试剂建立活化部分凝血活酶时间参考范围 [J], 程霞;王卓;杨丹;王玉明;胡莹;马润;路明亮
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出凝血3.1活化部分凝血酶时间(APTT)测定(第四版)
出凝血3.2 原理:
在37℃条件下用激活剂(糅花酸)激活因子XII和XI,以脑磷脂替代血小板提供凝血的催化表面,在因子IX的参与下,测定贫血小板血浆的凝固时间。

部分活化凝血酶时间测定(APTT)是内源性凝血系统的筛选实验。

标本处理:
患者处于休息状态下,采空腹静脉血(急诊病人除外)。

采血者应技术熟练,“一针见血”,以防止组织损伤,使外源性凝血因子进入标本。

最好不与其它实验一起采集而使血液停留在针管的时间延长。

采完血后,将血液沿管壁缓缓注入试管,避免产生气泡;然后迅速将血液和抗凝剂轻轻颠倒混匀,避免用力震荡。

全血要在1小时内分离血浆。

分离乏血小板血浆时,要在室温下3000rpm离心10分钟,室温下可存放4小时。

全部试验不能在4小时内完成,应将乏血小板血浆分装在0.5~1.0ml的小试管中快速冷冻,储存于-20℃冰箱中。

冷冻过的标本不能再次冷冻,否则结果会不准确。

冷冻血浆融化时,应将盛冷冻血浆的容器置于37℃水浴中,并轻轻摇动,使其迅速融化。

出凝血3.4 试剂:
APTT试剂:试剂购于天津威士达公司。

德灵Actin试剂(试剂盒代号B4218-1)。

每瓶试剂内含磷脂(从兔脑中提取),1.0×104mol/L糅花酸,稳定剂共2ml。

0.025M氯化钙:实验室自制。

试剂从冰箱中取出,室温平衡15min后上机分析。

出凝血3.5 仪器:使用Sysmex公司的CA-7000型全自动血液凝固仪。

出凝血3.6 操作:按仪器操作步骤执行标准操作。

出凝血3.6.1开机:按下机器侧面的POWER 按钮。

开机后机器进行自检,当屏幕上边显示“Ready:”时可以进行试验。

出凝血3.6.2检查消耗品:
1、准备反应杯:打开仪器上盖装反应杯的盖子查看反应杯是否够量,不足时,需及时添加。

(一次性最多可放1000 个杯子)
2、准备试剂:按照仪器对试剂的要求,把试剂准备好,放到仪器内相应位置,注意查看试剂的量和有效期。

如还不熟悉试剂位置时,可在主屏幕上选Reagent Setting,按屏幕显示放置试剂。

3、查看仪器的洗液瓶和废液瓶
出凝血3.6.3准备标本:将样本放入样本架,再将样本架放到仪器进样器上。

出凝血3.6.4输入检测项目:主菜单上按下Work List 键,进入工作菜单,输入APPT项目。

出凝血3.6.5输入样本号:按屏幕下菜单的ID No.键,按顺序输入样本的序号。

出凝血 3.6.6开始检测:录入完所有测试信息,按下屏幕右上角START 键,开始检测。

出凝血3.7质量控制:使用德灵公司的leve11质控品做质量控制。

每批质控品的值不超过2SD。

(详见出凝血1质量控制)
出凝血3.8 计算:仪器自动计算出结果。

出凝血3.9 参考值:23s~33s,由DADE BEHRING公司推荐。

出凝血3.10 临床意义:APTT是内源性凝血系统的筛选实验。

APTT延长:见于凝血因子VIII、IX、XI、XII、V、II减低或缺乏,纤维蛋白原缺乏症,抗凝物质存在等。

APTT缩短:见于高凝状态、血栓性疾病等。

出凝血3.11 参考文献:
1)主编王鸿利.止血与血栓检验技术.(第一版1992.6)上海科学技术出版社.
2)主编李家增王鸿利韩忠朝.血液实验学.(第一版1997.10)上海科学技术出版社.
3)主编邓家栋杨崇礼杨天楹.临床血液学.(第一版1985)上海科学技术出版社.
4)主编邓家栋杨天楹杨崇礼.血液学实验诊断.(第一版1985)天津出版社.
5)中华人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程(第一版 1991).东南大学出版社.。

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