花粉活力测定的种方法优选稿
花粉生活力测定方法
花粉生活力测定方法花粉是植物生殖过程中非常重要的一环,其生活力的测定对于植物繁殖和生长具有重要意义。
花粉生活力测定方法是通过一系列的实验和观察,来评估花粉的生长和发育能力,从而为植物的繁殖提供科学依据。
本文将介绍几种常见的花粉生活力测定方法,希望能够对相关领域的研究者和爱好者有所帮助。
首先,传统的花粉生活力测定方法是通过染色观察花粉管的生长情况。
首先,将采集到的花粉悬浮在含有营养液的培养基中,然后观察花粉管在一定时间内的生长情况,通过显微镜观察花粉管的长度和形态,从而评估花粉的生活力。
这种方法简单直观,但需要显微镜等设备,且操作较为繁琐。
其次,现代的花粉生活力测定方法中,常用的是荧光显微镜观察法。
通过将花粉与特定的荧光染料结合,使花粉在荧光显微镜下呈现出特定的荧光信号,从而可以清晰地观察花粉管的生长情况。
这种方法操作简便,观察效果明显,对于大规模的花粉生活力测定具有很大的优势。
另外,还有一种常见的花粉生活力测定方法是通过花粉萌发率来评估花粉的生活力。
这种方法是将采集到的花粉悬浮在含有营养液的培养基中,然后观察一定时间内花粉的萌发情况,通过统计萌发的花粉数量来评估花粉的生活力。
这种方法简单易行,可以在较短的时间内获取较为准确的结果。
除了上述几种方法外,还有一些新兴的花粉生活力测定方法,如分子生物学技术的应用、电子显微镜的观察等,这些方法在花粉生活力测定领域也取得了一些重要的进展。
综上所述,花粉生活力测定是植物繁殖和生长研究中的重要内容,而花粉生活力的准确测定则需要科学、准确的方法。
不同的方法各有优劣,研究者可以根据具体的实验目的和条件选择适合的方法进行花粉生活力的测定,从而为植物繁殖和生长研究提供可靠的数据支持。
希望本文介绍的几种常见的花粉生活力测定方法对相关领域的研究者和爱好者有所帮助,也希望在未来的研究中能够有更多更准确的花粉生活力测定方法被发展和应用。
花粉生活力测定方法研究进展
花粉生活力测定方法研究进展摘要:总结了花粉活力测定的染色法、离体萌发法以及田间授粉法等的原理和应用并分析了各种方法的优缺点。
关键词:花粉花粉活力测定方法花粉是高等植物的雄性配子体,在有性繁殖过程中起到传递雄性亲本的遗传信息。
花粉不仅是植物遗传、育种、进化、生殖的重要研究对象,也是孢粉分析、蜂群培育、药物制造、医疗及生理实验的重要材料。
花粉活力是花粉具有生长、萌发、或发育的能力。
在农业生产及农业常规杂交育种的中,研究花粉的生活力和育性是不可缺少的基础性工作。
农业生产和育种工作通常会遇到花期不一致带来的困难,为解决这一难题,保存花粉的活力成为重要手段,而在贮藏花粉之前必须先检测花粉的活力。
不同种类植物花粉的自然寿命、适宜的贮藏方式及花粉活力适宜的测定方法不同。
因此,掌握花粉活力的检测方法对提高育种效率有较高的作用和意义。
综合前人的研究结果,花粉生活力的检测方法可以分为四大类:①染色法;②萌发测定法;③田间授粉检测法;④形态测定法、无机酸检测法。
1染色法1.1TTC染色法TTC即2,3,5-氯代三苯基四氮唑,它是一种氧化还原染料,水溶液无色。
基本原理是[1]:当TTC渗入细胞后,遇到活细胞里的脱氢酶接受氢离子,由无色的氧化型变成红色还原型不溶于水的化合物,由此来判断花粉的生活力。
具体操作步骤:①配制PH为7.17的磷酸缓冲液。
称取0.832克磷酸氢二钠和0.273克的磷酸二氢钾溶于100ml的蒸馏水中,调整pH为7.17。
②TTC溶液配制。
依据不同植物称取0.02~1.0g的TTC溶于100ml的磷酸缓冲液中,于棕色瓶中黑暗处保存。
③染色。
取少量花粉置于载玻片上,加上一滴TTC溶液,用镊子搅拌均匀,盖上盖玻片,然后放置于35℃的恒温箱中染色15~20min。
④镜检。
于10×10倍镜下观察,凡具有活力的花粉被染成红色,部分丧失活力的呈现粉红色,无色的是的或不育的花粉粒。
凌春英,肖恩等的研究[2]得出常温、黑暗条件下用TTC染色12h可达到较好的观察效果,并认为TTC法是大花蕙兰和墨兰花粉活力测定便捷、有效的方法。
花粉活力测定的3种办法
精心整理实验16?花粉活力的测定在作物杂交育种、作物结实机理和花粉生理的研究中,常涉及花粉活力的鉴定。
掌握花粉活力快速测定的方法,是进行雄性不育株的选育、杂交技术的改良以及揭示内外因素对花粉育性和结实率影响的基础。
一、花粉萌发测定法【原理】水放???????1.用。
2.20℃条???????1.不同种类植物的花粉萌发所需温度、蔗糖和硼酸浓度不同,应依植物种类而改变培养条件。
???2.此法也可用于观察花粉管在培养基上的生长速度以及不同蔗糖浓度,离体时间,环境条件等因素对花粉活力的影响。
3.不是所有植物的花粉都能在此培养基上萌发,本法适用于易于萌发的葫芦科等植物花粉活力的测定。
二、碘-碘化钾染色测定法多数植物正常的成熟花粉粒呈球形,积累较多的淀粉,I2-KI溶液可将其染成蓝色。
发育不良的花粉常呈畸形,往往不含淀粉或积累淀粉较少,I2-KI溶液染色呈黄褐色。
因此,可用I2-KI溶液染色来测定花粉活力。
【器材与用具】???显微镜;载玻片与盖玻片;镊子;棕色试剂瓶;烧杯;量筒;天平。
???【试剂】-KI300ml。
???I2~3张片??基四氮唑)还原成红色的TTF(三苯基甲??)而使其本身着色,无活力的花粉呼吸作用较弱,TTC 的颜色变化不明显,故可根据花粉吸收TTC后的颜色变化判断花粉的生活力。
【器材与用具】显微镜;载玻片与盖玻片;镊子;恒温箱;棕色试剂瓶;烧杯;量筒;天平。
【试剂】0.5%TTC溶液:称取0.5gTTC放入烧杯中,加入少许95%酒精使其溶解,然后用蒸馏水稀释至100ml。
溶液避光保存,若发红时,则不能再用。
采集任何植物的花粉,取少许放在干洁的载玻片上,加1~2滴0.5%TTC溶液,搅匀后盖上盖玻片,置35℃恒温箱中,10~15min后镜检,凡被染为红色的花粉活力强,淡红次之,无色者为没有活力或不育花粉。
观察2~3张片子,每片取5个视野,统计花粉的染色率,以染色率表示花粉的活力百分率。
花粉生活力测定方法
花粉生活力测定方法花粉生活力测定方法是一种评估人们对花粉过敏的程度和生活质量的指标。
它通过采用定量和定性的方法来测定人体对花粉的反应和影响,以便为患者提供相应的治疗和干预措施。
下面我将详细介绍花粉生活力测定方法的原理和步骤。
首先,花粉生活力测定方法需要进行花粉源的采集和制备。
花粉源可以是空气中的自然环境采集或人工培养的花粉。
采集后,需要将花粉样本进行处理和制备,包括去除杂质和保持花粉的活力。
其次,花粉生活力测定方法中常用的技术是皮试和血清学检测。
皮试是一种常用的检测方法,主要通过在患者皮肤表面划一道小口,然后将一定浓度的花粉溶液滴在皮肤上,观察皮肤是否出现过敏反应,如红肿、瘙痒等。
这种方法简单快捷,可以初步筛查患者的过敏反应。
血清学检测是通过采集患者的血液样本,检测血清中花粉特异性IgE抗体水平来评估过敏反应的程度。
常用的检测方法有酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫荧光试验(IFA),这些方法可以检测到血液中特定花粉过敏原的抗体水平,并根据抗体浓度的高低来评估患者的过敏程度。
除了皮试和血清学检测,还可以进行生活质量评估。
这是一种主观的方法,通常通过问卷调查的方式,询问患者对花粉过敏的影响程度和日常生活质量的变化。
问卷通常包括患者的症状、疾病活动、工作和学习能力、社交活动和睡眠质量等方面的评估,以便评估花粉过敏对患者生活的影响。
最后,花粉生活力测定方法可以通过统计分析和数据处理来得出评估结果。
根据皮试和血清学检测的结果、生活质量评估和患者的症状表现等,可以综合评估花粉过敏的程度和生活质量的变化。
这些评估结果可以帮助医生为患者制定个性化的治疗方案,包括药物治疗、免疫疗法和生活调整等。
综上所述,花粉生活力测定方法是评估人们对花粉过敏的程度和生活质量的一种指标。
通过采用皮试和血清学检测、生活质量评估等方法,可以全面分析患者的过敏反应和生活质量的变化,为患者提供针对性的治疗和干预措施。
这种方法对于花粉过敏的预防和管理具有重要的临床意义。
2实验二、花粉生活力测定
前 言
花粉生活力测定在育种 力 2.雄性不育系的鉴定
实验目的:
学习并初步掌握作物花粉生 活力测定的常用方法
测定方法:
(一)I-KI染色鉴定
(二)TTC染色鉴定
(三)花粉粒发芽鉴定
实验方法 I-KI染色鉴定:
正常的成熟花粉粒体积较大, 并含有大量的淀粉粒,遇I-KI 呈紫黑色,不正常的花粉粒体 系较小、有时畸形、染色浅或 不染色。
实验方法 TTC染色鉴定:
具有生活力的花粉中含有 脱氢酶,它能催化引物使脱下 的氢与TTC结合,生成红色化 合物甲替。凡有生活力的花粉 呈红色,生活力弱的呈浅红色, 无生活力的不显色或成黄色。
实验方法
花粉粒发芽鉴定:
在人工培养基上进 行发芽试验,可以比较 准确地判断花粉的生活 力。
实验步骤
I-KI染色鉴定:
2 .准备 TTC 染色和发芽试验的材料, 置培养箱保温; 3.调试显微镜,I-KI染色鉴定; 4.TTC染色鉴定、发芽率调查。
作业
实验三、作物花粉生活力测定 1.测定方法和原理: (一)I-KI染色鉴定:正常的成熟花粉粒体积较大,并含有大量的淀粉 粒,遇I-KI呈紫黑色,不正常的花粉粒体系较小、有时畸形、染色浅或 不染色。 (二)TTC染色鉴定:具有生活力的花粉中含有脱氢酶,它能催化底物 使脱下的氢与TTC(氯化三苯基四氮唑)结合,生成红色化合物甲替。 凡有生活力的花粉呈红色,生活力弱的呈浅红色,无生活力的不显色或 成黄色。 (三)花粉粒发芽鉴定:在人工培养基上进行发芽试验,可以比较准确 地判断花粉的生活力。 2.实验结果: 材料 I-IK染色率% TTC染色率% 发芽率%
用镊子夹一个花药于载玻片 上滴上一滴1%I-KI溶液 用镊子将花药夹碎并把碎片 去干净盖上盖玻片置显微 镜下观察。
花粉生活力测定方法
花粉生活力测定方法
花粉是植物生殖的重要组成部分,其生活力的测定对于植物繁殖和种子生产具有重要意义。
本文将介绍几种常用的花粉生活力测定方法,希望能够对相关领域的研究者和生产者有所帮助。
首先,最常见的花粉生活力测定方法是离体培养法。
这种方法首先需要收集新鲜的花药,然后在适当的培养基上进行培养,观察花粉的萌发情况来判断其生活力。
离体培养法的优点是操作简单,结果可靠,因此被广泛应用于植物育种和种子生产中。
其次,荧光显微镜法也是一种常用的花粉生活力测定方法。
这种方法利用荧光显微镜观察花粉颗粒的形态和结构,通过判断其内部结构的完整性来评估花粉的生活力。
荧光显微镜法对花粉的观察更加直观,能够提供更多的信息,但需要专业的设备和操作技能。
另外,还有一种叫做染色法的花粉生活力测定方法。
这种方法通过在花粉颗粒上涂抹特定的染料,然后观察染色情况来判断花粉的生活力。
染色法简单易行,可以快速得到结果,但对染料的选择和浓度有一定要求。
除了上述方法,还有一些新兴的花粉生活力测定方法,比如电子显微镜法、流式细胞仪法等。
这些方法在技术上更加先进,能够提供更为精细的数据,但也需要更高的成本和专业的操作技能。
综上所述,花粉生活力的测定对于植物育种和种子生产具有重要意义,而不同的方法各有优劣。
在选择具体的测定方法时,需要根据实际情况和研究目的进行综合考虑,以便选择最适合的方法。
希望本文介绍的内容能够对相关领域的研究者和生产者有所启发,推动相关领域的科研工作和生产实践取得更好的成果。
花粉生活力测定方法
花粉生活力测定方法
花粉生活力是指花粉颗粒的活力和生长能力,是衡量植物繁殖成功的重要指标。
花粉生活力测定方法是一种用来评估花粉质量和活力的技术手段,对于植物繁殖和种子生产具有重要意义。
传统的花粉生活力测定方法主要包括花粉染色观察法、花粉萌发率测定法和花
粉活力染色法。
花粉染色观察法是将花粉染色后在显微镜下观察其形态和数量,从而评估花粉的活力和质量。
花粉萌发率测定法则是将花粉培养在适宜的培养基上,观察其萌发情况以评估花粉的活力。
花粉活力染色法则是利用染色技术来观察花粉内部的活力指标,如线粒体和细胞核的活跃程度。
随着科学技术的发展,现代的花粉生活力测定方法也在不断完善和创新。
比如,利用生物技术手段对花粉进行基因测序和分析,可以更准确地评估花粉的生活力和遗传信息。
同时,利用先进的显微镜和成像技术,可以对花粉的微观结构和形态进行更精细的观察和分析。
花粉生活力测定方法的发展不仅有助于科学家和植物育种者更好地了解植物的
繁殖机制和生长规律,也为农业生产和生态保护提供了重要的技术支持。
通过准确评估花粉的生活力,可以选择出高质量的花粉进行人工授粉或者种子生产,从而提高植物的繁殖成功率和产量。
此外,对花粉生活力的准确测定也有助于保护植物遗传资源,促进植物多样性的保护和利用。
总之,花粉生活力测定方法是一项重要的植物科学技术,它为我们深入了解植
物繁殖机制和提高农业生产效率提供了重要的技术手段和支持。
随着科学技术的不断进步,相信花粉生活力测定方法将会在未来发挥更加重要的作用。
花粉活力测定的3种方法
欢迎阅读实验16?花粉活力的测定在作物杂交育种、作物结实机理和花粉生理的研究中,常涉及花粉活力的鉴定。
掌握花粉活力快速测定的方法,是进行雄性不育株的选育、杂交技术的改良以及揭示内外因素对花粉育性和结实率影响的基础。
一、花粉萌发测定法90ml 水放???????1.用。
2.采集丝瓜、南瓜或其他葫芦科植物刚开放或将要开放的成熟花朵,将花粉洒落在涂有培养基的载玻片上,然后将载玻片放置于垫有湿滤纸的培养皿中,在25℃左右的恒温箱(或室温20℃条件下)中孵育,5~10min 后在显微镜下检查5个视野,统计其萌发率。
????【注意事项】???1.不同种类植物的花粉萌发所需温度、蔗糖和硼酸浓度不同,应依植物种类而改变培养条件。
???2.此法也可用于观察花粉管在培养基上的生长速度以及不同蔗糖浓度,离体时间,环境条件等因素对花粉活力的影响。
3.不是所有植物的花粉都能在此培养基上萌发,本法适用于易于萌发的葫芦科等植物花粉活力的测定。
-KI溶I2??????【试剂】-KI溶液:取300ml。
???I2贮于棕色瓶中备用。
【方法】采集水稻、小麦或玉米可育和不育植株的成熟花药,取一花药于载玻片上,加一滴蒸馏水,用镊子将花药捣碎,使花粉粒释放,再加1~2滴I2-KI溶液,盖上盖玻片,在显微镜下观察。
凡是被染成蓝色的为含有淀粉的活力较强的花粉粒,呈黄褐色的为发育不良的花粉粒。
观察2~3张片子,每片取5个视野,统计花粉的染色率,以染色率表示花粉的育性。
??【注意事项】此法不能准确表示花粉的活力,也不适用于研究某一处理对花粉活力的影响。
因为三核期退化的花粉已有淀粉积累,遇碘呈蓝色反应。
另外,含有淀粉而被杀死的花粉粒遇I2-KI也呈蓝色。
氯化三苯100ml【方法】?采集任何植物的花粉,取少许放在干洁的载玻片上,加1~2滴0.5%TTC溶液,搅匀后盖上盖玻片,置35℃恒温箱中,10~15min后镜检,凡被染为红色的花粉活力强,淡红次之,无色者为没有活力或不育花粉。
实验二花粉生活力的测定
实验二花粉生活力的测定一实验目的掌握花粉生活力鉴定的方法和原理二实验材料羽衣甘蓝、矮牵牛、三色堇等植物的花粉三仪器及药品载玻片、盖玻片、解剖针、镊子、标签、记号笔、显微镜、天平、烧杯、培养皿、玻璃棒、滴管、量筒、电炉、石棉网、烘箱蔗糖、琼脂、蒸馏水、磷酸二氢钾、磷酸二钠、TTC四实验原理花粉的形态、花粉中酶的活性以及积累淀粉的多少通常与其生活力密切相关,因此可利用花粉的形态观察过氧化物酶、脱氢酶活性的高低、淀粉的含量以及在人工培养基上花粉管萌发的情况作为鉴定花粉生活力高低的标准。
鉴定花粉生活力的方法很多,主要有1 直接鉴定法2 形态观察法3 染色观察法4 培养基发芽法五实验步骤花粉生活力的测定染色观察法——TTC染色1 配置TTC染色液,称取0.5gTTC溶于100ml磷酸盐缓冲液中,装入棕色瓶2 制片:取少量花粉于载玻片上,滴入1~2滴0.5%TTC染色液,用镊子搅拌均匀,盖上盖玻片,于35~40°C条件静置15~20min。
3 观察统计:在显微镜下观察三个不同视野。
凡被染成红色或玫瑰色都是有生活力的花粉.培养基发芽法——固体培养基1 配制培养法:取1g琼脂,5g蔗糖,量94ml蒸馏水,装入烧杯,加热使琼脂溶化,配成5%浓度培养基。
同法配置10%、15%、20%浓度的培养基。
2 制片:用滴管吸取少量培养基,趁热滴在载玻片上,使放置凝固。
3播种花粉:少量的花粉均匀撒播4培养与观察:将制好的片子放在垫有湿润滤纸的培养皿内,于20—22℃温箱中培养。
待花粉萌发后于显微镜下观察,并统计发芽率,观察是每片随机取三个视野,统计花粉总数,计算平均发芽率。
六作业及思考题同种植物材料培养基法测得的花粉生活力较低染色法测得的花粉生活力较高原因:因为用染色法时,只要是有活力的花粉粒就会被染上颜色,而有活力的花粉粒却不一定会萌发。
花粉生活力测定方法
花粉生活力测定方法
花粉生活力是指花粉颗粒在一定条件下能够完成受精和发育的能力。
花粉生活力的测定对于植物的研究和育种具有重要意义。
下面将介绍几种常用的花粉生活力测定方法。
首先,最常用的方法是离体花粉萌发法。
这种方法是将收集到的花粉在一定的培养基上进行培养,观察花粉颗粒是否萌发。
通过观察花粉管的生长情况和数量,可以初步判断花粉的生活力。
这种方法简单易行,可以在实验室条件下进行。
其次,还有花粉染色法。
这种方法是将花粉颗粒染色后观察其形态和结构,从而判断花粉的生活力。
通过观察染色后的花粉颗粒的形态、颜色和内部结构,可以初步判断花粉的生活力。
这种方法需要借助显微镜进行观察,对实验条件要求较高。
另外,还有花粉活力染色法。
这种方法是利用活性染料对花粉颗粒进行染色,观察染色后的花粉颗粒的颜色和形态,从而判断其生活力。
这种方法对于花粉的活力有较高的敏感性,可以较准确地判断花粉的生活力。
最后,还有花粉酶活性法。
这种方法是通过检测花粉中的酶活性来判断其生活力。
通过测定花粉中的酶活性,可以间接地反映出花粉的生活力。
这种方法需要借助生化实验室进行,对实验条件和仪器设备要求较高。
综上所述,花粉生活力的测定方法有多种,每种方法都有其特点和适用范围。
在实际应用中,可以根据具体的研究目的和实验条件选择合适的方法进行花粉生活力的测定。
通过准确测定花粉的生活力,可以为植物的研究和育种提供重要的参考依据。
植物花粉生活力测定技术
1.测定花粉生活力的意义有哪些? 2.分析在实验中出现的问题,并找出原因所在。 3.将四种方法的结果分别记载于表中,并比较结果是否一致,如不一致,分析其原因。Fra bibliotek表 1-6
供试 花粉收集 测定 第一视野
品种 日期 日期
第二视野
具有生活力 第三视野
的花粉%
备注
直接鉴定法
TTC 染色法
发芽测定法 形态鉴定法
1.外地采集来的花粉或杂交时父本花期早于母本时都要将花粉进行短暂贮藏; 2.自交或远缘杂交时,为了分析结实率或不结实原因时; 3.为了鉴定雄性不育系时; 4.了解某些杂交技术时,如测定花粉的刺激等作用,测定受精选择性等。 因此,要根据各种植物花粉的特点,采取适当的保存方法。花粉生活力的测定方法很多, 其中发芽试验手续较复杂,设备要求较高,需时也较长。为了简易而迅速的测定花粉生活力, 也常采用化学染色的方法,但是此法也有缺点,就是染上色的花粉不一定都具有生活力,因 为染上色的花粉中也包括了那些生活力弱不能正常发芽的花粉,所以一般常用而且较为可靠 的方法仍然是采用花粉发芽实验。要是要求不严格对新采集的花粉还有一个较简便的鉴定方 法——形态鉴定法。 本实验目的是学习花粉生活力测定的方法,进而研究花粉寿命长短与环境条件的关系, 以探求保存花粉的合适方法。
(2)TTC 溶液:称取 0.02~0.05 克(不同植物所用的量是不同的)的 TTC 溶解在 10ml 的磷酸缓冲液中,溶液配好后装入棕色滴瓶内,置入暗处,因氯化三苯基四唑有毒,操作时 要注意安全。
2.操作步骤: (1)取少量花粉放在载玻片上,并在花粉上滴上 1~2 滴配制液,用玻璃棒混合后盖上 盖玻片。 (2)将载玻片置于恒温箱中(35~40℃)约 15~20min。 (3)在显微镜(10×10)下观察:凡具有生活力的花粉呈红色,部分丧失生活力的呈 淡红色,无色的是死的和不育的花粉粒。 3.观察和测定结果:每片观察 3 个视野,并统计具有生活力花粉的百分率,填入表 1 -6。 (三)发芽测定法(培养基培养法) 1.培养基的配制 常用的花粉发芽培养基有液体和固体两种。以前者最为简便。本实验选用前者。其有效 成分主要有:蔗糖、硼酸、柠檬酸、赤霉素等。不同的植物所用的蔗糖培养液的浓度是不同 的,配制 3~30%的蔗糖培养液:在 100ml 水中,加糖 3~30g,加热溶解后,再加 0.1%硼 酸数滴。 2.制片 取双凹载玻片,滴 2 滴培养液于槽中,用解剖针挑少许花粉均匀撒于培养液的表面(注 意不必搅拌,以防花粉混于液体中因缺少空气而影响发芽,又因花粉深浅不一而在显微镜检 查时因光线折射而不易观察。)处理好后,放于一下部添有少量蒸馏水、内有两根玻璃棒的 培养皿中(注意不要使水没过载玻片),放到恒温为 25℃左右的恒温箱中或室内 2h。 3.镜检 将放置 2h 后的载玻片取出,放在显微镜下观察三个视野,统计总花粉数与发芽的花粉 数,然后计算比例,填入下面的表格中。 (四)形态鉴定法 对于新采集的花粉来说,还有一个更为简便的鉴定方法——形态鉴定法。将花粉用解剖 针播于一般载玻片上,然后直接放到显微镜下观察,根据形态特征,判断花粉的生活力状况, 一般来说,畸形、皱缩、小形化等均为无生活力花粉,而有光泽、饱满、具有本品种花粉典 型特征等性状的均为有生活力花粉。将观察的结果统计一下填写下表格。
花粉生活力测定方法
花粉生活力测定方法
花粉是植物繁殖的重要媒介,其生活力的测定对于植物繁殖和生长具有重要意义。
近年来,随着科学技术的不断发展,花粉生活力测定方法也得到了不断的改进和完善。
传统的花粉生活力测定方法主要包括离体花粉萌发试验、花粉染色观察、花粉活力染色观察等。
这些方法虽然可以初步判断花粉的生活力,但存在着操作繁琐、结果不稳定、时间周期长等问题,限制了其在实际应用中的发展。
近年来,随着生物技术和显微镜技术的不断进步,新型的花粉生活力测定方法逐渐被引入。
比如,利用荧光显微镜观察花粉萌发情况,结合数字图像处理技术进行分析,可以快速、准确地测定花粉的生活力。
另外,利用生物标记技术对花粉进行标记,然后观察其在植物受精过程中的行为,也可以对花粉的生活力进行评估。
除了显微镜技术和生物标记技术,分子生物学技术在花粉生活力测定中也发挥了重要作用。
通过分析花粉中的基因表达情况、蛋白质组成等,可以更直观地了解花粉的生活力情况,为植物繁殖提供更准确的数据支持。
综上所述,随着科学技术的不断发展,花粉生活力测定方法也在不断完善和创新。
新型的测定方法不仅提高了测定的准确性和稳定性,同时也为植物繁殖和生长研究提供了更多的可能性。
相信随着科学技术的不断进步,花粉生活力测定方法将会更加完善,为植物繁殖和生长研究带来更多的突破和进展。
烟草花粉活力鉴定方法筛选
烟草花粉活力鉴定方法筛选李宗平,张俊杰*,彭灏,王文明,郭宇龙,徐世平,陈茂胜,李进平(湖北省烟草科研所,中国烟草白肋烟试验站,武汉430030)摘要:以白肋烟B37花粉为试验材料,对花粉活力鉴定方法进行了分析比较,并设计了培养配方、培养温度、培养时间等15种花粉活力鉴定方法。
结果表明,花粉离体培养萌发测定花粉活力是较为理想的烟草花粉活力鉴定方法,其中葡萄糖(3%)+硼酸(50 mg/L)+CaCL2(20 mg/L)、蔗糖(10%)+硼酸(50 mg/L)+CaCL2(20 mg/L)25 ℃恒温暗箱保湿培养3 h,花粉萌发率最高,新鲜花粉活力分别为86.8%和91.3%。
关键词:花粉;萌发;花粉管中图分类号:Screening for Optimum Method of Tobacco Pollen Vigor EvaluationLI Zongping, ZHANG Junjie*, PENG Hao, WANG Menming,GUO Yulong, XU Shiping, CHEN Maoshen, LI Jinping(Burley Tobacco Experimental Station of CNTC, Tobacco Research Institute of Hubei Province, Wuhan 430030, China)Abstract: With the experimental material of Burley B37 pollen, various tobacco pollen vigor evaluation methods were compared. The results indicated that pollen germination was the best method for identifying pollen vigor. With the formula of 3% glucose, 50 mg/l boric acid, 20 mg/l CaCl2 and 10% sucrose, 50 mg/l boric acid, 20 mg/l CaCl2, cultivating 3 h under 25℃ constant temperature, the percentage of pollen germination was the highest. The pollen vigor was 86.8% and 91.3% respectively.Key words: pollen; germination; pollen tube植物花粉活力即花粉萌发力(germinability)是指花粉在适宜条件下萌发的能力[1]。
花粉活力测定的3种方法
真验16 花粉活力的测定之阳早格格创做正在做物纯接育种、做物结真机理战花粉死理的钻研中,常波及花粉活力的审定.掌握花粉活力赶快测定的要领,是举止雄性不育株的选育、纯接技能的改良以及掀穿内中果素对于花粉育性战结真率效率的前提.一、花粉萌收测定法【本理】仄常的老练花粉粒具备较强的活力,正在相宜的培植条件下便能萌收战死少,正在隐微镜下可间接瞅察估计其萌收率,以决定其活力.【器材与东西】载玻片;隐微镜;玻棒;恒温箱;培植皿;滤纸.【试剂】培植基:10%蔗糖,10mg/L硼酸,0.5%的琼脂.称10g蔗糖、1mg硼酸、琼脂与90ml火搁进烧杯中,正在100℃火浴中熔化,热却后加火至100ml备用.【圆法】1.将培植基熔化后,用玻棒蘸少许,涂布正在载玻片上,搁进垫有干润试纸的培植皿中,保干备用.2.支集丝瓜、北瓜或者其余葫芦科动物刚刚启搁或者将要启搁的老练花朵,将花粉洒降正在涂有培植基的载玻片上,而后将载玻片搁置于垫有干滤纸的培植皿中,正在25℃安排的恒温箱(或者室温20℃条件下)中孵育,5~10min后正在隐微镜下查看5个视线,统计其萌收率.【注意事项】1.分歧种类动物的花粉萌收所需温度、蔗糖战硼酸浓度分歧,应依动物种类而改变培植条件.2.此法也可用于瞅察花粉管正在培植基上的死少速度以及分歧蔗糖浓度,离体时间,环境条件等果素对于花粉活力的效率.3.不是所有动物的花粉皆能正在此培植基上萌收,本法适用于易于萌收的葫芦科等动物花粉活力的测定.两、碘- 碘化钾染色测定法【本理】普遍动物仄常的老练花粉粒呈球形,聚集较多的淀粉,I2-KI溶液可将其染成蓝色.收育不良的花粉常呈畸形,往往不含淀粉或者聚集淀粉较少,I2-KI溶液染色呈黄褐色.果此,可用I2-KI溶液染色去测定花粉活力.【器材与东西】隐微镜;载玻片与盖玻片;镊子;棕色试剂瓶;烧杯;量筒;天仄.【试剂】I2-KI溶液:与2g KI溶于5~10ml蒸馏火中,加进1g I2,待真足溶解后,再加蒸镏火300ml.贮于棕色瓶中备用.【要领】支集火稻、小麦或者玉米可育战不育植株的老练花药,与一花药于载玻片上,加一滴蒸馏火,用镊子将花药捣碎,使花粉粒释搁,再加1~2滴I2-KI溶液,盖上盖玻片,正在隐微镜下瞅察.通常是被染成蓝色的为含有淀粉的活力较强的花粉粒,呈黄褐色的为收育不良的花粉粒.瞅察2~3弛片子,每片与5个视线,统计花粉的染色率,以染色率表示花粉的育性.【注意事项】此法不克不迭准确表示花粉的活力,也不适用于钻研某一处理对于花粉活力的效率.果为三核期退化的花粉已有淀粉聚集,逢碘呈蓝色反应.其余,含有淀粉而被杀死的花粉粒逢I2-KI也呈蓝色.三、氯化三苯基四氮唑(TTC)法【本理】具备活力的花粉呼吸效率较强,其爆收的NADH2或者NADPH2可将无色的TTC(2,3,5-氯化三苯基四氮唑)还本成白色的TTF(三苯基甲)而使其自己着色,无活力的花粉呼吸效率较强,TTC的颜色变更不明隐,故可根据花粉吸支TTC后的颜色变更推断花粉的死计力.【器材与东西】隐微镜;载玻片与盖玻片;镊子;恒温箱;棕色试剂瓶;烧杯;量筒;天仄.【试剂】0.5%TTC溶液:称与0.5g TTC搁进烧杯中,加进少许95%酒粗使其溶解,而后用蒸馏火密释至100ml.溶液躲光保存,若收白时,则不能再用.【要领】支集所有动物的花粉,与少许搁正在搞净的载玻片上,加1~2滴0.5%TTC溶液,搅匀后盖上盖玻片,置35℃恒温箱中,10~15min后镜检,通常被染为白色的花粉活力强,浓白次之,无色者为不活力或者不育花粉.瞅察2~3弛片子,每片与5个视线,统计花粉的染色率,以染色率表示花粉的活力百分率.。
花粉活力测定实验报告
花粉活力测定实验报告
实验目的:
本实验旨在测定花粉活力,探究花粉活力与种子萌发率的相关性,并为进一步了解植物繁殖提供基础数据。
实验材料:
需要用到的材料有:钟形筛、山梨酸钠、花粉液、蒸馏水、苏木素、石蜡、显微镜、玻片、载玻片等。
实验步骤:
1.取50个种子,分别放置在两个装有10mL山梨酸钠液的钟形筛中,浸泡12小时,使其吸满山梨酸钠液,为后续实验做准备。
2.将钟形筛里的山梨酸钠液倒出,并加入2mL的花粉液,然后用提供的细铁丝轻轻将花粉液和种子混合均匀,将盖在钟形筛口上的细网状皮纸去掉,取下筛分别晾干。
3.取约4g石蜡,烧入沸水,制成石蜡板。
4.取刚才的花粉和种子混合物,用丙酮水溶液进行固定处理,将处理后待测物制成薄层切片,厚度约为5µm,并在普通显微镜下以40倍目镜下进行测定。
5.在测定器上,取一端已蒸发完的种子粘贴于载玻上,于另一角上滴几滴蒸馏水,将另一玻片压上,以便能观察到花粉在萌发过程中对种子萌发的影响。
实验结果:
通过实验,我们发现在花粉液与山梨酸钠液比例为1:10时,花粉萌发的能力较高。
实验结果表明,萌发率与花粉活力呈正比关系。
同时,我们还观察到花粉对萌发过程产生了显著的影响,使种子萌发率提高了约20%。
结论:
通过本次实验,我们深入了解了花粉活力测定的方法和实验步骤,比较水平地掌握了实验操作技术,得到了可靠的实验结果。
我们还发现花粉具有显著的萌发促进作用,为深入探究植物繁殖乃至生物学领域提供了重要参考数据,对于加深我们对植物学的认识也具有一定意义。
花粉生活力测定
2.2.3花粉生活力测定
对不同猕猴桃雄株的花粉生活力测定:先对新鲜花粉进行生活力测定,之后每三天间用染色观察法对猕猴桃花粉进行生活力测定(当生活力持续稳定的时候半个月测定一次,直至一年)。
三次重复,每个重复观察三个视野,计算其生活力,记录结果。
2.2.
3.1 染色法测定:采用TTC法[13]测定花粉生活力
原理:凡具有生活力的花粉,其呼吸作用过程中都有氧化还原作用,而无生活力的花粉则无此反应,因此,当TTC渗入有生活力的花粉时,其脱氢酶在催化去氢过程中与TTC结合,使无色的TTC变成TTF而呈红色。
方法:取少量花粉于载玻片上,滴0.5%TTC溶液1~2滴,用镊子搅拌均匀,盖上盖玻片,将此片置于35~40℃的条件下15-20min,在显微镜下观察不同的三个视野,凡被染成红色的均为有生活力的花粉粒。
观察三张片子,每片统计3个视野中花粉粒总数与着红色的花粉粒数。
不同处理花粉生活力观察记录表见表2。
花粉活力测定实验报告
一、实验目的1. 了解花粉活力测定的原理和方法。
2. 掌握花粉采集、处理和观察的基本技能。
3. 通过实验,了解不同条件下花粉活力的变化规律。
二、实验原理花粉活力是指花粉在正常条件下萌发的能力,是植物杂交、育种和生产的重要指标。
花粉活力测定方法主要有染色法和萌发法。
本实验采用萌发法测定花粉活力。
三、实验材料1. 植物材料:番茄、小麦、玉米等。
2. 试剂:TTC染色液、盐酸、蒸馏水等。
3. 仪器:显微镜、培养皿、移液器、酒精灯等。
四、实验步骤1. 花粉采集在植物开花期,选择花药饱满、颜色鲜亮的植株,用镊子轻轻取出花药,放入培养皿中。
2. 花粉处理将花药置于酒精灯火焰附近,用镊子轻轻敲打花药,使花粉散落。
用移液器将花粉收集到盛有盐酸的试管中,置于酒精灯上加热,使花粉与盐酸混合均匀。
3. 花粉染色将处理好的花粉溶液滴加到载玻片上,用移液器滴加TTC染色液,使花粉染色。
将载玻片置于显微镜下观察。
4. 花粉萌发将染色后的花粉载玻片置于适宜温度和湿度的培养箱中,观察花粉萌发情况。
以花粉管长度超过花粉粒直径为标准,记录萌发花粉的数量。
5. 数据处理计算萌发花粉的百分比,分析不同条件下花粉活力的变化规律。
五、实验结果与分析1. 不同植物花粉活力比较实验结果表明,不同植物花粉活力存在差异。
例如,番茄花粉活力较高,小麦花粉活力较低。
2. 不同处理方法对花粉活力的影响实验结果表明,加热处理、盐酸处理等对花粉活力有一定影响。
加热处理可以使花粉活力降低,盐酸处理可以使花粉活力提高。
3. 不同条件下花粉活力的变化规律实验结果表明,温度、湿度等因素对花粉活力有显著影响。
在一定范围内,温度升高,花粉活力降低;湿度增加,花粉活力提高。
六、实验结论1. 本实验通过萌发法测定了不同植物花粉的活力,了解了不同条件下花粉活力的变化规律。
2. 实验结果表明,不同植物花粉活力存在差异,加热处理、盐酸处理等对花粉活力有显著影响。
3. 温度、湿度等因素对花粉活力有显著影响,在一定范围内,温度升高,花粉活力降低;湿度增加,花粉活力提高。
胡萝卜花粉活力检测方法的筛选及优化(1)
胡萝⼘花粉活⼒检测⽅法的筛选及优化(1)⽬录引⾔ (1)1材料与⽅法 (4)1.1试验材料 (4)1.2 试验⽅法 (4)1.2.1花粉的采集 (4)1.2.2染⾊观察法 (5)1.2.3⽆机酸法 (6)1.2.4离体萌发法 (6)2结果与分析 (7)2.1 染⾊法检测花粉⽣活⼒ (7)2.2⽆机酸法检测花粉⽣活⼒ (8)2.3离体萌发法检测花粉⽣活⼒ (8)2.3.1 不同配⽅培养基的筛选 (8)2.3.2 筛选出配⽅的优化 (8)2.3.2.1 PEG对花粉萌发的影响 (9)2.3.2.2 硼酸对花粉萌发的影响 (9)2.3.2.3 Ca(NO3)2.4H2O对花粉萌发的影响 (10)3结论与讨论 (11)【参考⽂献】 (11)附图 (14)致谢...................................................................................... 错误!未定义书签。
ContentsIntroduction (1)1.Materials and methods (4)1.1Test materials (4)1.2Test Method (4)1.2.1 Pollen collection (4)1.2.2 Dyeing observation (4)1.2.3 Inorganic acid (5)1.2.4 In vitro germination (6)2 .Results and Analysis (7)2.1 Staining pollen viability (7)2.2 Inorganic acid assay pollen viability (7)2.3 In vitro germination assay pollen viability (8)2.3.1 Of the different formulations medium screening (8)2.3.2 Screening the optimization of the formula (8)2.3.2.1 PEG on pollen germination of (8)2.3.2.2 Boric acid on pollen germination (9)2.3.2.3 Ca (NO3) 2 ? 4H2O on pollen germination (10)3.Conclusion and Discussion (11)[Reference] (11)Figure (14)Acknowledgements (16)胡萝⼘花粉活⼒检测⽅法的筛选及优化作者:赵春刚指导教师:杨建平(⼭东农业⼤学园艺科学与⼯程学院泰安271018)摘要:本试验采⽤染⾊法、⽆机酸法和离体萌发法对胡萝⼘“京红五⼨”和“春红⼀号”花粉活⼒进⾏测定。
实验四、花粉生活力的测定之欧阳地创编
实验四、花粉生活力的测定一、实验目的:通过实验掌握花粉生活力测定的具体技术和方法。
二、实验原理:花粉生活力是指在正常条件下花粉在雌蕊上萌发的能力。
花粉生活力测定在杂交工作中很重要,尤其亲本花期不相同需要从外地采集花粉作父本时,花粉要经过一段较长时间的贮藏运输过程,因此在杂交前应检验花粉的生活力,以免应用无生活力的花粉而造成杂交工作的失败。
三、实验材料:苹果花粉四、实验用具与试剂:指形管、显微镜、载玻片、盖玻片、凹式载玻片、滴瓶、培养皿、天平、烧杯、玻璃棒、微波炉、滤纸、水浴锅、计数器、镊子;碘化钾(KI)、碘、蓝墨水、蒸馏水、蔗糖、琼脂、硼酸等。
五、实验步骤常用的测定花粉生活力的方法:形态观察法、碘-碘化钾染色法、蓝墨水染色法和培养基发芽法。
1. 形态观察法直接在显微镜下观察花粉的形态,根据花粉的典型性(如具有正常的大小、形状、色泽等)判断花粉的生活力,即形态正常的花粉有生活力,而一些小的、皱缩的、畸形的花粉不具有生活力。
具体方法:将花粉置于载玻片上,在显微镜下观察3个不同视野,要求被检查的花粉粒总数达到100粒以上,计算正常花粉粒占总数的比率。
此法简便易行但准确性差,一般只用于测定新鲜花粉的生活力。
2. 染色法(1) 碘-碘化钾染色法①原理:正常的花粉积累淀粉较多,而不正常的花粉则少。
据此,可用化学物质染色,根据呈色反应来间接测定花粉的正常与否和花粉生活力的差别。
通常正常花粉用I-KI染色后呈蓝色,而发育不良畸形花粉则不积累淀粉,当I-KI染色时呈黄褐色。
②I-KI溶液:取2.0 g KI溶于5~10mL蒸馏水中,然后加入1.0 g I2待全部溶解后,再加蒸馏水至200mL,贮于棕色瓶中备用。
③具体方法:取少量花粉撒于载玻片上,加一滴蒸馏水,用镊子使花粉散开,再加一滴I-KI溶液,盖上盖玻片置于显微镜下观察。
凡被染色呈蓝色表示具有生活力,呈黄褐色者为发育不良生活力弱的花粉。
为了保证实验的准确性,要求观察不同的3个视野,求其平均值,统计花粉生活力。
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花粉活力测定的种方法集团文件版本号:(M928-T898-M248-WU2669-I2896-DQ586-M1988)
实验16 花粉活力的测定
在作物杂交育种、作物结实机理和花粉生理的研究中,常涉及花粉活力的鉴定。
掌握花粉活力快速测定的方法,是进行雄性不育株的选育、杂交技术的改良以及揭示内外因素对花粉育性和结实率影响的基础。
一、花粉萌发测定法
【原理】
正常的成熟花粉粒具有较强的活力,在适宜的培养条件下便能萌发和生长,在显微镜下可直接观察计算其萌发率,以确定其活力。
【器材与用具】
载玻片;显微镜;玻棒;恒温箱;培养皿;滤纸。
【试剂】
培养基:10%蔗糖,10mg/L硼酸,0.5%的琼脂。
称10g蔗糖、1mg硼酸、0.5g琼脂与90ml水放入烧杯中,在100℃水浴中熔化,冷却后加水至100ml备用。
【方法】
1.将培养基熔化后,用玻棒蘸少许,涂布在载玻片上,放入垫有湿润试纸的培养皿中,保湿备用。
2.采集丝瓜、南瓜或其他葫芦科植物刚开放或将要开放的成熟花朵,将花粉洒落在涂有培养基的载玻片上,然后将载玻片放置于垫有湿滤纸的培养皿中,在25℃左右的恒温箱(或室温20℃条件下)中孵育,5~10min后在显微镜下检查5个视野,统计其萌发率。
【注意事项】
1.不同种类植物的花粉萌发所需温度、蔗糖和硼酸浓度不同,应依植物种类而改变培养条件。
2.此法也可用于观察花粉管在培养基上的生长速度以及不同蔗糖浓度,离体时间,环境条件等因素对花粉活力的影响。
3.不是所有植物的花粉都能在此培养基上萌发,本法适用于易于萌发的葫芦科等植物花粉活力的测定。
二、碘- 碘化钾染色测定法
【原理】
多数植物正常的成熟花粉粒呈球形,积累较多的淀粉,I
2
-KI溶液可将其染成蓝色。
发育不良的花粉常呈畸形,往往不含淀粉或积累淀粉较
少,I
2-KI溶液染色呈黄褐色。
因此,可用I
2
-KI溶液染色来测定花粉活
力。
【器材与用具】
显微镜;载玻片与盖玻片;镊子;棕色试剂瓶;烧杯;量筒;天平。
【试剂】
I 2-KI 溶液:取2g KI 溶于5~10ml 蒸馏水中,加入1g I 2,待完全溶解
后,再加蒸镏水300ml 。
贮于棕色瓶中备用。
【方法】
采集水稻、小麦或玉米可育和不育植株的成熟花药,取一花药于载玻片上,加一滴蒸馏水,用镊子将花药捣碎,使花粉粒释放,再加1~2滴I 2-KI 溶液,盖上 盖玻片,在显微镜下观察。
凡是被染成蓝色的为含有
淀粉的活力较强的花粉粒,呈黄褐色的为发育不良的花粉粒。
观察2~3张片子,每片取5个视野,统计花粉的染色率,以染色率表示花 粉的育性。
【注意事项】
此法不能准确表示花粉的活力,也不适用于研究某一处理对花粉活力的影响。
因为三核期退化的花粉已有淀粉积累,遇碘呈蓝色反应。
另外,含有淀粉而被杀死的花 粉粒遇I 2-KI 也呈蓝色。
三、氯化三苯基四氮唑(TTC )法
【原理】
具有活力的花粉呼吸作用较强,其产生的NADH 2或NADPH 2可将无色
的TTC (2,3,5-氯化三苯基四氮唑)还原成红色的TTF (三苯基甲 )而
使其本身着色,无活力的花粉呼吸作用较弱,TTC的颜色变化不明显,故可根据花粉吸收TTC后的颜色变化判断花粉的生活力。
【器材与用具】
显微镜;载玻片与盖玻片;镊子;恒温箱;棕色试剂瓶;烧杯;量筒;天平。
【试剂】
0.5%TTC溶液:称取0.5g TTC放入烧杯中,加入少许95%酒精使其溶解,然后用蒸馏水稀释至100ml。
溶液避光保存,若发红时,则不能再用。
【方法】
采集任何植物的花粉,取少许放在干洁的载玻片上,加1~2滴
0.5%TTC溶液,搅匀后盖上盖玻片,置35℃恒温箱中,10~15min后镜检,凡被染为红色的花粉活力强,淡红次之,无色者为没有活力或不育花粉。
观察2~3张片子,每片取5个视野,统计花粉的染色率,以染色率表示花粉的活力百分率。