HPLC_ELD法联用测纯度
elsd—hplc法
elsd—hplc法
ELSD-HPLC法是一种色谱分析方法,结合了ELSD(Evaporative Light Scattering Detection,蒸发光散射检测)和HPLC(High-Performance Liquid Chromatography,高效液相色谱)技术。
这种方法常用于分析那些在紫外可见光谱中不易检测的化合物,如非挥发性、不具有紫外吸收或荧光发射性质的物质。
具体而言,ELSD是一种基于光散射原理的检测技术。
当非挥发性化合物在ELSD检测器中被蒸发并产生微小的颗粒时,这些颗粒会散射光线,ELSD检测器测量这些散射光的强度,进而得到对物质浓度的信息。
ELSD对于化合物的检测不依赖于其在紫外或可见光谱范围的吸收特性,因此适用于更广泛的化合物类型。
将ELSD与HPLC结合,就形成了ELSD-HPLC法。
HPLC用于分离混合物中的不同成分,而ELSD用于检测和定量那些在紫外光谱中难以检测的成分。
ELSD-HPLC法在药物分析、食品分析、天然产物分析等领域得到广泛应用,特别是对于一些低极性、不带有紫外或荧光响应基团的化合物的分析。
HPLC-ELSD法测定注射用阿奇霉素含量及有关物质
阿奇霉素一种半合成的十五元环大环内酯类的抗生素, 呈白色粉末或者晶体,具有吸收效果好,生物利用高、副作 用低、抗菌范围广等效果。在食入时无异味,偏苦,有轻微 的引湿性。在临床上主要用于治疗呼吸道、支气管炎、皮肤 软组织感染以及尿道炎等等。根据相关资料显示:注射阿奇 霉素可以有效抑制细菌的转肽,抑制蛋白质的合成,抗菌效 果好。不同的药物搭配阿奇霉素有不同的治疗效果,若使 用药物超标导致出现不良反应应及时根据患者的病情采取有 效的治疗措施。根据有关注射用阿奇霉素用量分析等相关知 识,按照《国家药品标准》测定其含量等,影响因素较多、
⑵专属性实验 在准确的精密度下选取适量的阿奇霉素对照品,将样品
分为4份。取1份样品加入,5ml稀释液溶解,加入lmol/L的 盐酸,在室内放60min后加入lmol/L的氢氧化钠混合稀释、摇 匀后稀释到25ml,作为酸降解产物;5ml稀释液溶解,加入 lmol/L氢氧化钠,在水浴内放置20min后,取出冷却。后加 入lmol/L的盐酸,稀释到25ml后作为碱降解产物;5ml稀释液 溶解,加入30%的过氧化氢,在室内放60min加入稀释液稀释 到25ml后作为氧化降解产物;在1309的高温破坏60min。液 稀释到25ml后作为高温破坏降解产物。根据实验结果表明:
品储备液中的5ml,将以上放置在与20ml的容器内,使用加
上稀释液溶解、稀释、摇匀均匀即可図。
② 在准确精密度下选取适量的阿奇霉素,放于100ml的
容器内,采用超声进行溶解,选取适当数量稀释液,后使用
HPLC-ELSD法同时测定益肺清化颗粒中的黄芪甲苷、桔梗皂苷D和麦冬皂苷D的含量
HPLC-ELSD同时测定丹参注射液中4种糖类成分的含量
HPLC-ELSD同时测定丹参注射液中4种糖类成分的含量黄利;葛婷;夏蕴琼;杨锦强;郑云枫;朱立静;刘将【摘要】目的:建立丹参注射液中果糖、葡萄糖、甘露三糖和水苏糖4种糖类成分的HPLC-ELSD分析测定方法.方法:采用Prevail Carbohydrate ES(250 mm ×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈-水(67:33)为流动相,体积流量为1.0 mL· min-1;ELSD漂移管温度90℃,载气为空气,载气流量为3.0 L·min-1;柱温为35℃.结果:果糖、葡萄糖、甘露三糖和水苏糖的线性范围分别为375.6 ~ 187 8,233.0~1165,228.4~114 2,300.2~1 501μg·mL-1,平均回收率分别为102.4%,103.9%,103.1%,100.9%,RSD分别为2.18%,3.45%,2.56%,2.71%.结论:该方法具有准确、重现性好、简便等优点,可用于丹参注射液的质量控制.【期刊名称】《中国现代中药》【年(卷),期】2013(015)006【总页数】3页(P500-502)【关键词】HPLC-ELSD;丹参注射液;糖类【作者】黄利;葛婷;夏蕴琼;杨锦强;郑云枫;朱立静;刘将【作者单位】南京中医药大学药学院,江苏南京210029;南京中医药大学药学院,江苏南京210029;上海华源安徽锦辉制药有限公司,安徽阜阳236018;南京中医药大学药学院,江苏南京210029;南京中医药大学药学院,江苏南京210029;南京中医药大学药学院,江苏南京210029;上海华源安徽锦辉制药有限公司,安徽阜阳236018【正文语种】中文丹参注射液是临床常用于治疗冠心病、心绞痛的中药注射剂之一,具有活血化瘀、理气开窍之功效[1]。
已有研究表明,丹参注射液中除了含有酚酸类活性成分外,还含有含量较高的单糖及低聚糖类成分[2-5]。
HPLC—ELSD法同时测定三七药渣中的4种皂苷含量
HPLC—ELSD法同时测定三七药渣中的4种皂苷含量目的用HPLC-ELSD测定三七药渣中的三七皂苷R1及人参皂苷Rg1、Rb1、Rd的含量。
方法色谱柱为Zorbax Extend C18(250mm×4.6mm,5um),流动相为乙腈-水梯度洗脱,柱温35℃,流速为1ml.min-1,ELSD漂移管温度为80℃,雾化气体压力为40psi,喷雾器温度30℃。
结果三七皂苷R1及人参皂苷Rg1、Rb1、Rd分别在0.2052~4.104ug、0.2052~4.104ug、0.2228~4.456ug、0.2152~4.304ug呈良好线性关系;药渣中4种皂苷的平均回收率分别为97.02%,98.26%,97.09%,96.35%;该方法简便、准确,分离效果好,可用于三七药材的质量评价以及三七药渣有效成分的资源化利用。
标签:三七药渣;三七皂苷R1;人参皂苷Rg1;人参皂苷Rb1;人参皂苷Rd;HPLC-ELSD法三七(Panax notoginseng(Burk) F. H. Chen)为五加科(Araliaceae)人参属植物,味甘、微苦,性温,归肝、心、胃、小肠经,具有止血、止痛、散瘀、消肿、补虚、强壮等功效,皂苷类成分是三七主要的生理活性成分[1]。
其中以三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd含量较高,常作为其质量控制指标,笔者在本实验中采用HPLC-ELSD法检测并建立了三七药渣中4种皂苷类成分的测定方法,并对8个批次三七药渣4种皂苷类成分进行含量分析,为三七药渣资源化利用提供了可靠的依据。
1仪器与试药1.1仪器Waters 2695 高效液相色谱仪,Waters2998 二极管阵列检测器,Waters 2424 蒸发光散射检测器,Empower2色谱工作站;电子天平;HH-4型恒温水浴锅;EPED 超纯水系统(南京易普达易科技发展有限公司)。
1.2 试药R1,Rg1,Rb1,Rd对照品(纯度﹥98%,均购自南京泽朗医药科技有限公司),三七药材及药渣均来自山东某药厂,乙腈为色谱纯,水为双蒸水,其余试剂均为分析纯。
hplc - elsd 法
hplc - elsd 法
HPLC-ELSD是液相色谱-蒸发光散射的简称,是一种用于分析无法通过紫外检测器进行测定的半挥发性及非挥发性化合物的技术。
它采用全新的1290 Infinity II ELSD特殊光电倍增管以及激光器件,使其在灵敏度提高的同时,动态范围提高90倍,而且其独特的高精度玻璃喷头设计为峰面积重现性提供了保证。
该技术尤其适用于缺乏紫外吸收基团且不易挥发的药用辅料的分析。
最近安捷伦应用科学家在以往分析方法的基础之上,开发出基于HPLC-ELSD对生物制剂中吐温80和泊洛沙姆188同时进行定量分析的方法。
该方法具有分离度好、灵敏度高等优点,两种物质的定量限LOQ低至10ppm,且具有良好的线性关系、精密度和准确度。
HPLC-ELSD联用技术在药物分析、生物制药等领域具有广泛的应用前景。
HPLC-ELSD法同时测定烟肼丁醇片中盐酸乙胺丁醇和异烟肼的含量
烟肼丁醇片主药成分为盐酸 乙胺丁醇 、 烟肼 , 异 收载于 国 家药品标准化学药 品地 方标 准 上升 国家 标 准第 二册 。盐 酸乙胺 丁醇为抗结 核药 , 具有抑制结 核杆菌蛋 白与核酸合成 的作用。异烟肼对结核杆菌有抑制和杀灭作用 。标准 中盐酸
图 2 对 照 品 溶 液 色 谱 图
图 3 供试品溶液色谱 图
6 74 9 6 6 50 9 2 668 5 3 746 9 1 7 3 . 、7 6 . 、9 9 . 、4 2 . 。计算含量 , 盐酸 乙胺 丁醇和异 烟 肼 的平 均 含量 分别 为 9 .3 和 9 . 2 , 9 0% 8 6% R D分别为 17 %和 18 % , 果表 明方法重复性 良好 。 S .5 .5 结 2 6 稳定性 试 验 . 取 样 品测 定 项 下 的供 试 品溶 液 ( 号 : 批 2 10 1 ) 2 4 6 1 0 09 6 在 , , ,2h分 别进 样测 试 , 录色 谱 图 ( 图 记 见 3 , ) 盐酸 乙胺 丁醇的峰面积分别是 29 0 10 8 30 75 7 2 0 6 . 、 2 0 . 、 3070 7 3 27 49 3 4 异 烟肼 的峰面积分别是 805 8 6 1 2 . 、 2 2 . ; 0 3 . 、 8 42 6 9 8 76 2 3 8 98 7 2 9 0 . 、2 3 . 、4 0 . 。结果 盐酸 乙胺 丁醇片 峰面 积的 R D为 19 % , S .6 异烟肼 峰面积的 R D为 16 % , 明本 S .8 表
HPLC—ELSD法测定不同储存时间党参药材中果糖、葡萄糖和蔗糖的含量
HPLC—ELSD法测定不同储存时间党参药材中果糖、葡萄糖和蔗糖的含量目的建立党参药材中果糖、葡萄糖和蔗糖高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)含量测定的方法,并测定不同储存时间的党参果糖、葡萄糖和蔗糖的含量。
方法采用80%甲醇超声提取,通过HPLC-ELSD法测定不同储存时间的党参中果糖、葡萄糖和蔗糖的含量。
色谱条件:Shodex Asahipak NH2P-50 4E(250 mm ×4.6 mm,5 μm)色譜柱,以乙腈-水(77∶23)为流动相,柱温25 ℃,流速1.0 mL/min,ELSD检测器。
结果通过实验,不同储存时间的党参中果糖、葡萄糖和蔗糖均能很好分离,线性范围和相关系数分别为2.409~24.09 μg(r = 0.9999)、1.456~14.56 μg(r = 0.9995)、1.15~11.50 μg(r = 0.9999),平均回收率分别为103.73%(RSD = 0.26%)、97.85%(RSD = 1.98%)、99.08%(RSD = 1.09%)。
结论表明该方法简便,稳定性、重复性、分离度好,可用于党参中果糖、葡萄糖和蔗糖含量分析,储存0、3、6、12个月的不同时间党参中果糖、葡萄糖和蔗糖含量差异明显。
[Abstract] Objective To establish a HPLC-ELSD determination method of fructose,glucose and sucrose in Codonopsis pilosula,and to determine the content of fructose,glucose and sucrose of Codonopsis pilosula in different storage times. Methods The sample solutions made by ultrasonic extraction of 80% methanol solution were used to determine the contents of fructose,glucose and sucrose of Codonopsis pilosula in different storage times by HPLC-ELSD. The analysis was performed on a Shodex Asahipak NH2P-50 4E column (250 mm × 4.6 mm,5 μm)with a gradient elution of acetonitrile-water (77∶23)at the flow rate of 1.0 mL/min. The column temperature was 25℃. It was determined by ELSD detector. Results The methodological studies showed that fructose,glucose and sucrose of Codonopsis pilosula in different storage times were in good linearity from 2.409 to 24.09 μg (r = 0.9999),1.456 to 14.56 μg(r = 0.9995),1.15 to 11.50 μg (r = 0.9999)respectively. The average recoveries of the three components were 103.73% (RSD = 0.26%),97.85% (RSD = 1.98%)and 99.08% (RSD = 1.09%),respectively. Conclusion The results show that the method is convenient,stable,reproducible and well separated. It can be used to determine fructose,glucose and sucrose in Codonopsis pilosula. The content of fructose,glucose and sucrose in Codonopsis pilosula of different storage times(0,3,6,12 months)are different obviously.[Key words] Codonopsis Radix;Fructose;Glucose;Sucrose;HPLC-ELSD;Assay黨参来源于桔梗科植物党参Codonopsis Pilosula (Franch.)Nannf.、素花党参Codonopsis pilosula Nannf. var. modesta(Nannf.)L. T. Shen 或川党参Codonopsis tangshen Oliv. 的干燥根[1]。
HPLC-ELSD法测定注射用灯盏花素中甘露醇的含量
摘要: 目的 : 立 注射 用 灯 盏 花 素 中甘 露 醇 的 含 量 测 定 方 法 。 方 法 : 用 HP C E S 法 , 用 氨 基 柱 , 动 相 为 乙腈 一 (3 建 采 L — LD 使 流 水 8: 1 )E D漂移管温度(5 5 ℃; 气流速 2 L ri一 柱温 :O 7 ;I S 8± ) 空 . ・ n, 4 a ; 3 ℃。结果 : 甘露醇在进样量为 1 3 4 3 . 2 g时线性 关系良好 , . 2~ 0 7 ̄ 0 9 回 归 方程 为 y 1 1 1+ 1 1 ,- .9 5 平 均 回 收 率 9 . % , S 为 00 %。 结 论 : 法 结 果 准 确 , 于操 作 , 作 为 注射 用 灯 = . 2x 1 . 5 r09 9 ; 3 7 = 92 4 RD . 4 该 便 可 盏 花 素 中辅 料 甘 露 醇 的质 量控 制 方 法之 一 。 关键词 : P C E D 注射 用灯盏花素 甘露醇 H L—I S 中图 分 类号 : 9 72 R 2. 文 献标 识 码 : B 文 章 编 号 :6 2 8 5 ( 0 )8 0 1 — 2 1 7 — 3 1 2 1 0 — 0 0 2 6
o ti e ,ti s i b e frq ai o to fB e ie p n n e t n b an d I s ut l u t c n r l r v s a i e I j ci . a o l y o o
Ke o d H L — I D B e i a ieIjc o n i l y w r : P C E S r s pn net n Ma nt vc i o
D tr n t no n i lnB e i a ieIjc o yHP C L D eemiai f o ma nt rvs pn et nb L S oi c n i Y n u u 。 F i u L iln J n u ( .ega g F o n rg T sn e t ;. stt o hr c n ag X  ̄ n u Lc n h iJ a i g X n 1 nyn od ad D u et g C ne 2 ntue fP amay ad n a H i r Ii P a clg , h n es yo o t C ia H n a g Hu a , h a 4 1 0 ) h r oo y teU i ri f ul hn , e g n , n n C i , 2 0 1 ma v t S l y n
HPLC-ELSD法测定盐酸金刚烷胺片的含量
5 5℃ , 雾化气体 : 空气 ; 流速 2 0L mn . / i。对照 品及 样品色谱图见图 1 2 目录后 ) — ( 。在该色谱条件下 ,
理 论 塔板数 按 金 刚烷胺 峰计算 应 不低 于 400 0 。
1 3 4 方法 学 考察 ..
药 品生物 制 品检定 所 , 号 :04 6— 0 3 1 , 酸 批 102 20 0 ) 盐 金刚烷 胺 片 为 市 售 , 为 纯 化 水 , 腈 、 氟 乙 酸 均 水 乙 三 为分 析纯 。
134 4 重 复性试 验 : 密称 取 同 一批 盐 酸 金刚 烷 .. . 精 胺 片细 粉 , “ .. .” 按 134 1 的方 法制 备 , 录色谱 图 , 记 结
果 R D为 16% . S .
各 3份 , 加水 稀 释 至 刻 度 , 匀 , 摇 即得 加 样 回 收样 品
l , 重复进样 6次 , 记录色谱图。平均峰面积的对数
为 320 ,S .3 3 R D为 0 2% 。 .
1 3 4 6 加 样 回 收 率 试 验 : 密 称 取 已 知 含 量 . .. 精 (55 ) 9 .% 的盐 酸金 刚 烷 胺 片 ( 苏 鹏鹞 药业 有 限 公 江
司 , 号 :9 2 9 ) 批 0 1 1 2 细粉 9份 , 10ml 瓶 中 , 水 置 0 量 加
试 验 方 法
HPLC-ELSD法测定食品中甜蜜素
HPLC-ELSD法测定食品中甜蜜素陈玉波;陈长毅;杨芳;刘洋;苏建国;李歆【摘要】[目的]采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC- ELSD)建立测定食品中甜蜜素的方法.[方法]以C18柱分离,甲醇-0.01 mol/L乙酸铵(20:80,V/V)为流动相,使用蒸发光散射检测器进行检测.[结果]甜蜜素的线性范围为50~1 000 mg/L,相关系数为0.9991,检出限为1.0 mg/kg,相对标准偏差为2.95%,平均回收率为98.48%.[结论]建立了食品中测定甜蜜素的HPLC- ELSD法.该方法准确度高、稳定性与重现性好且操作简单,为食品中甜蜜素含量的测定提供了一种准确、灵敏、快速的分析方法.%[Objective ] The study aimed to establish the method for determining sodium cyclamate in food by high performance liquid chromatography with evaporative light scattering detector (HPLC-ELSD). [Method] The samples were separated by C18 column with methanol and 0. 01 mol/L ammonium acetate(20: 80, V/V) as mobile phase and determined by evaporative light scattering detector. [ Result]The linear ranges of sodium cyclamate were 50-1 000 mg/L, the correlation coefficient was 0.999 1, the lowest of detection was 1.0 mg/kg, the RSD was 2. 95% , the recovery rate was 98.48%. [ Conclusion]The HPLC-ELSD method for sodium cyclamate determining on food was established. The method had the advantages of high accuracy, good stability and reproducibility and simple operation and provided an accurate, rapid, sensitive analysis for determining sodium cyclamate in food.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2011(039)028【总页数】2页(P17562,17576)【关键词】高效液相色谱-蒸发光散射检测器;食品;甜蜜素【作者】陈玉波;陈长毅;杨芳;刘洋;苏建国;李歆【作者单位】淮安市产品质量技术监督局,江苏淮安223001;淮安市产品质量技术监督局,江苏淮安223001;淮安市产品质量技术监督局,江苏淮安223001;淮安市产品质量技术监督局,江苏淮安223001;淮安市产品质量技术监督局,江苏淮安223001;淮安市产品质量技术监督局,江苏淮安223001【正文语种】中文【中图分类】S37甜蜜素,学名环己基氨基磺酸钠,是我国目前广泛使用的甜味剂之一,属于人工合成的磺胺类无营养性食品甜味剂,口感好,价格低廉。
HPLC—ELSD法同时测定桔梗中5种皂苷含量
HPLC—ELSD法同时测定桔梗中5种皂苷含量作者:岳虹陈芙蓉王梦丽谢红英冯亚男徐小平来源:《中国测试》2016年第01期摘要:建立高效液相色谱法同时测定桔梗药材中去芹糖桔梗皂苷E、桔梗皂苷E、桔梗皂苷D3、去芹糖桔梗皂苷D、桔梗皂苷D的方法。
色谱柱为ODS250mmx4.6mmx5μm,流动相A为乙腈-0.2%甲酸,流动相B为水,采用梯度洗脱(0-15min,20%-22%A; 15-60min,22%A;60-65min,22%-30%A;65-70min,30%-20%A)。
供试品经50%甲醇(咖)超声提取30min,过滤蒸干后以50%甲醇(v/v)定容至5mL容量瓶中;漂移管温度为75℃,氮气流量为2.5L/min。
去芹糖桔梗皂苷E、桔梗皂苷E、桔梗皂苷D3、去芹糖桔梗皂苷D、桔梗皂苷D 分别在0.64-6.4μg、1.22-12.2μg、1.08-10.8μg、0.74-7.4μg,1.7-17μg范围内组分浓度与峰面积线性关系良好;药材中5种成分的平均加标回收率分别为101.1%、99.9%、100.4%、100.7%和101.6%:RSD均关键词:桔梗;桔梗皂苷;HPLC-ELSD;梯度洗脱文献标志码:A文章编号:1674-5124(2016)01-0049-040 引言桔梗(Platycodon radix(Jacq.)A.DC.)为桔梗科(Campanulacae)桔梗属(Platycodin)多年生草本植物,广泛分布于东亚地区,我国多地区均有种植。
桔梗的主要活性成分是齐墩果烷型三萜皂苷,药理研究表明桔梗皂苷具有多种活性,包括抗癌、抗氧化、抗丙肝、减肥等功能,而对桔梗药材质量的有效控制是其发挥药效的基础。
我国幅员辽阔,桔梗药材生长环境差异大,导致其质量良莠不齐,有效成分含量变化大,有必要加强其质量控制以保证药效。
桔梗中皂苷成分结构复杂,活性多样,而在《中国药典》2010版中仅对桔梗皂苷D(Platycodin D,PD)设定了含量限度,不能更全面地反映药效和控制桔梗药材质量。
HPLC-ELSD法测定醒脑静注射液中聚山梨酯80的含量
3 批醒脑静注射液聚 山梨酯 8 5 0的检测 , 结果表明该方法可 以 用于对醒脑静注射中聚山梨酯 8 O投料 的控制 。
参考文献 :
[ ] 生 部 药 品标 准一 中药 成 方制 剂 第 十 七 册 . 3 _ 3 5— 1卫 ws 一B - 3 3 9E ̄ 9828 8s .19 :7 . [] 2 赵燕敏 , 夏爱晓, 魏颖慧 , . 等 聚山梨酯 8 修饰 的神经毒素纳米粒 O 跨血脑 屏 障 转 运 及 细 胞 毒 性 [ ] 药 学 学 报 , 0 0 4 1 ) J. 2 1 , 5( 0 :
为 0 0 3 g 10 3 x。 . 1 5 ~ . 1 5/ g 5 讨 论
5 1 色谱 柱 的选择 .
聚山梨酯 8 O为极性化 合物 , 常规 的 在
C8 上 几 乎 无 保 留, 法 测 定 。凝 胶 柱 TS e G2 0 1柱 无 Kg l 0 0
4 3 精密度试 验 .
Z 5
75 .
1 0
1. 25
1 5
1・ 75
2 0
2 ・ tmn 2 /i 5
本身 中的不饱和脂肪酸也十分容 易氧化 降解而产 生多种有 毒
成分口 , ]其产生不 良反 应的风险是较 明确 的, 如果用 量不 当可 能导致 不 良反应 , 须进 行检 测控 制 。为考 察其 产 品投料 情 必 况, 故此次试 验建立了 HP C L E 法测定醒脑静注射液 中 L —E S ) 辅 料 聚 山梨酯 8 0的含 量 , 辅料 的添加 及控 制提 供 了科 学 为
2 4h进样测定并计算峰面积的对数值 。测得 R D为 1 1 。 S .3 表 明供试 品溶液在制备后 2 4h内基本稳定 。
HPLC-ELSD法同时测定乳制品中5种水溶性糖的含量
摘 要 : 立 了 HP — I D 同时检 测乳 制品 中 5种 水溶性 糖 的分析 方 法. 建 I E C S 将奶 粉 样品 用 6 ~7 O O℃ 水 溶 解后超 声波提取 , 亚铁 氰化钾 溶液 和 乙酸锌 溶 液沉 淀蛋 白, 8固相 萃 取 小柱 净化 , 水 化合 物 色谱 柱 分 cl 碳
,
v r iy,Ba d ng 07 0 2, o i 1 0 Chi a) n 2 Colg fQu l y a d Te h o o y S p r iin,H e e . l eo ai n c n lg u ev so b iUni e st e t
Ab ta t A a ia i ea s y f r t e e m i a in o u a , s c sf u t s sr c : qu ntt tv s a o hed t r n to fs g r u h a r c o e,g lc o e, s c o e,m at aa t s urs l— o e a a t s se t b ih d b i e f r a c i u d c o a o r ph ( PLC ) Su a s w e e e t a t d s nd lco e wa sa ls e y hgh p ro m n e l i hr m t g a y H q . g r r x r c e
a d lco ewa l i h a g f ~ 1 / h v r g e o eisi h 3 0 一 1 8 9 n a ts swel nt ern eo 1 0mg mI。t ea ea erc v r nt e9 . e 0 .
trn e e t r wa d p e . T h e u t ho d t a h i a e a in o r c o e gaa t s u r e m at s e i g d t c o sa o t d e r s lss we h tt e l ne r r lto f fu t s l co e s c os lo e
HPLC-ELSD法测定抗感颗粒中绿原酸含量
HPLC-ELSD法测定抗感颗粒中绿原酸含量张亚明【摘要】目的研究抗感颗粒中绿原酸含量的测定方法.方法应用高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)测定抗感颗粒中绿原酸含量.色谱柱为Lichrospher C18,4.6 mm×150 mm,5 μm;流动相为0.5%冰醋酸水溶液-乙腈(75:25);流速为1.0 mL/min;柱温为30℃;检测器为Varian 380-LC型蒸发光散射检测器.结果该方法能很好分离被测组分与其他杂质,在实验浓度范围内峰面积的对数值与浓度的对数值呈良好的线性关系,HPLC-ELSD法测定的线性范围为0.2~1 mg/mL;相关系数r=0.9997;平均回收率为99.5%;RSD=0.35%.结论用高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定抗感颗粒中绿原酸的含量,方法简便,结果准确.【期刊名称】《实用临床医药杂志》【年(卷),期】2011(015)005【总页数】2页(P89-90)【关键词】抗感颗粒;绿原酸;含量测定;HPLC-ELSD【作者】张亚明【作者单位】江苏省盐城市第一人民医院,江苏,盐城,224001【正文语种】中文【中图分类】R917抗感颗粒为金银花、赤芍、绵马贯众经加工制成的颗粒。
具有清热解毒的功能,主治外感风热引起的感冒。
绿原酸被认为是抗菌解毒、消炎利胆的主要有效成分,通常被作为定性定量的指标。
《中国药典》2010年版采用薄层层析法对绿原酸进行定性鉴别,未收载测定含量的方法[1]。
文献有采用薄层扫描法[2],RP-HPLC[3-4],HPLC法[5-8],二阶导数紫外光谱法[9]和分光光度法[10]测定绿原酸含量的报道。
为有效控制抗感颗粒的质量,探索绿原酸含量测定新方法,本文对用高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLCELSD)测定抗感颗粒中绿原酸含量的方法进行了研究。
1 仪器与试药LC-10AT vp型高效液相色谱仪(日本岛津公司),Varian 380-LC型蒸发光散射检测器(美国瓦里安公司),SPD-10A vp型紫外检测器(日本岛津公司)HW-2000色谱工作站,AS230自动进样器,AT330柱温箱,CA-3型静音无油空气泵,BP211D电子天平,6171型pH/mv测试器,CQ-250型超声波清洗器(上海必能信超声有限公司)。
HPLC―ELSD法测定脑络通胶囊中黄芪甲苷的含量精品文档3页
HPLC―ELSD法测定脑络通胶囊中黄芪甲苷的含量脑络通胶囊由丹参浸膏、盐酸托哌酮、川芎浸膏、甲基橙皮苷、黄芪浸膏、维生素B6组成,具有补气活血,通经活络的功效。
本方中的黄芪是补气虚的主药,而黄芪甲苷是黄芪的主要成分。
原标准(《中药成方制剂第19册》)未作黄芪甲苷的含量测定,笔者建立了测定脑络通胶囊中黄芪甲苷含量的高效液相-蒸发光散射检测法[1-3]。
以为进一步完善该制剂的质量控制标准提供依据。
1 仪器和试药LC-20A高效液相色谱仪(日本岛津公司);岛津ELSD-LT II蒸发光散射检测器;Sartorius-ME235S电子天平;黄芪甲苷对照品(中国药品生物制品检定所,批号为110781-200613,供含量测定用,含量100.0%);脑络通胶囊(广西欢宝药业有限公司,批号分别为20130701,20130703,20130801)。
乙腈为色谱纯(经0.45μm滤膜过滤),其余试剂均为分析纯。
2 方法和结果2.1 色谱条件与系统适用性试验:色谱柱:Agilent Eclipse XDB C18;流动相:乙腈-水(32:68);流速1.0mL/min;柱温30℃。
ELSD检测条件:(漂移管温度:40℃,增益:4)。
进样量:10μL。
2.2 溶液制备:对照品溶液的制备:精密称取黄芪甲苷对照品20.46mg,置100mL量瓶中,加甲醇适量,振摇使溶解并稀释至刻度,摇匀,即得。
供试品溶液的制备:取本品10粒的内容物,精密称定,置索氏提取器中,加甲醇100ml,冷浸过夜,加热回流4小时,提取液回收溶剂并浓缩至干,残渣加水10ml,微热使溶解,用水饱和的正丁醇振摇提取4次,每次40ml,合并正丁醇液,用氨试液充分洗涤2次,每次40ml,弃去氨液,正丁醇液蒸干,残渣加水5ml使溶解,放冷,通过D101型大孔吸附树脂柱(内径1.5cm,柱高12cm),以水50ml洗脱,弃去水液,再用40%乙醇30ml洗脱,弃去洗脱液,继用70%乙醇80ml洗脱,收集洗脱液,蒸干,残渣加甲醇溶解,转移至5ml的量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液即得。
HPLC-ELSD同时测定酸枣仁中6种成分的含量
Me d i c a l C o l l e g e , H a i n a n P r o v i n c e , Ha i k o u 5 7 0 1 0 0 , C h i n a ; 2 . I n s t i t u t e o f Me d i c i n a l P l a n t D e v e l o p me n t , C h i n e s e A C a d e —
梯 度 洗脱 , 流速 为 1 . 0 m L / m i n , 柱温 3 5 q C ; E L S D检测 , 载 气流 速为 2 . 9 m L / m i n , 漂 移管温度 为 1 0 0  ̄ C , 测定 酸枣 仁 中
斯皮诺素、 酸 枣仁皂苷 A 、 酸枣仁皂苷 D、 酸枣仁皂苷 B 、 酸枣仁皂苷 B 1 和白桦脂酸 6 种成分的含量。 回收率计算
b y HPLC ̄ ELS D ‘
Z H A 0 X i a n g s h e n f Y A N G M e i h u a ・ 。G O N G B o o C H E N D e l l Z H O U Y a k u i K O N G We i j u n 。
【 关键 词】 酸枣仁 ; 多成 分测 定 ; 高效 液相 色谱 一 蒸发光 检测 器
【 中图分类号】 R 9 1 7 l
I 文献标识码】 A
【 文章编号】 ' 1 6 7 3 - 7 2 1 0 ( 2 0 1 6 ) 1 2 ( c ) 一 0 1 4 9 - 0 5 ,
S i mu l t a n e o u s : , d e t e r mi n a t i o n o f s i x c o mp o n e n t s i n z i z oh i S p i n o s a e S e me n
HPLC—ELSD测定乌贝益胃胶囊中贝母素甲和贝母素乙含量
HPLC—ELSD测定乌贝益胃胶囊中贝母素甲和贝母素乙含量目的建立高效液相色谱-蒸发光散射检测器法(HPLC-ELSD)同时测定乌贝益胃胶囊中贝母素甲和贝母素乙含量的方法,并对10批样品进行考察,制定含量限度。
方法采用HPLC-ELSD,色谱柱为Eclipse XDB C18(150 mm×4.6 mm,5 ?m),流动相为乙腈-水-二乙胺(65∶35∶0.05),柱温为30 ℃,流速为1.0 mL/min。
ELSD参数:漂移管温度为80 ℃,载气流速为2.5 L/min。
结果贝母素甲和贝母素乙进样量分别在0.294~2.944 ?g、0.424~4.240 ?g范围内与各自峰面积的对数值呈线性关系,平均加样回收率分别为98.13%(RSD=1.02%,n=6)、98.38%(RSD=0.92%,n=6)。
结论本方法准确可靠,重复性好,为乌贝益胃胶囊质量标准的制定提供了依据。
标签:高效液相色谱-蒸发光散射检测器;乌贝益胃胶囊;贝母素甲;贝母素乙;含量测定乌贝益胃胶囊是本院在乌贝散的基础上创制而成的医院制剂,由海螵蛸、浙贝母、白及、酒大黄、黄连、三七、吴茱萸7味中药组成,具有抑酸止痛、养胃止血的功效,临床上主要用于胃酸过多、胃及十二指肠溃疡伴出血、糜烂性胃炎以及各种原因所致的胃出血等症。
浙贝母作为君药,其主要活性成分贝母素甲和贝母素乙具有镇痛抗炎、促进溃疡愈合的作用[1-2],与乌贝益胃胶囊的主要药理作用相吻合,所以,有必要对其中的主要生物碱贝母素甲和贝母素乙进行含量控制,从而控制药品质量,保证疗效。
由于贝母素甲和贝母素乙为异甾体生物碱,缺少发色团,用紫外吸收检测器无法检测到,所以,一般采用薄层扫描法[3]、柱前衍生化法[4]、气相色谱法[5]。
也有文献报道采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器法(HPLC-ELSD)测定贝母素甲和贝母素乙的含量[6-7]。
为确保产品质量,本试验采用HPLC-ELSD测定乌贝益胃胶囊中这两种生物碱的含量。
HPLC-ELSD同时测定银迪清胶囊中靛蓝和靛玉红含量
HPLC-ELSD同时测定银迪清胶囊中靛蓝和靛玉红含量殷玥;姜珍【期刊名称】《中医药临床杂志》【年(卷),期】2016(0)6【摘要】目的:建立同时测定银迪清胶囊中靛蓝和靛玉红含量的方法。
方法:采用高效液相色谱—蒸发光散射检测法,色谱柱为KromasilC18柱(150mm×4.6mm,3.5μm),流动相为乙腈-0.1%冰醋酸水溶液(52:48,v/v),流速:1.0m L·min-1;ELSD参数:漂移管温度为110℃,空气流速为2.5L·min-1;进样量:20μL。
结果:靛蓝质量浓度在350~3500μg·m L-1范围内,其自然对数与峰面积的自然对数成良好的线性关系(r=0.999 0),平均回收率为100.3%(RSD=2.1,n=6);靛玉红质量浓度在5~50μg·m L-1范围内,其自然对数与峰面积的自然对数成良好的线性关系(r=0.999 5),平均回收率为99.4%(RSD=2.3,n=6)。
结论:建立的方法简便、准确、重现性好,可用于银迪清胶囊的质量控制。
【总页数】4页(P856-859)【关键词】银迪清胶囊;靛蓝;靛玉红;高效液相色谱—蒸发光散射检测法【作者】殷玥;姜珍【作者单位】长春医学高等专科学校药学系;沈阳药科大学药学系【正文语种】中文【中图分类】R284.2【相关文献】1.HPLC法同时测定复方青黛胶囊中靛蓝、靛玉红的含量 [J], 杨海燕;张成;王卫锋2.HPLC法测定复方板蓝根胶囊中靛蓝、靛玉红的含量 [J], 王小林;颜鲁青3.HPLC测定小儿清咽颗粒中靛蓝和靛玉红的含量 [J], 胡艳红;李志浩4.HPLC测定小儿清咽颗粒中靛蓝和靛玉红的含量 [J], 胡艳红;李志浩;5.清肠栓中没食子酸、靛蓝和靛玉红含量测定 [J], 于天源;周昕;徐俐伟因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
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高效液相色谱分离-蒸发光散射检测法测定海藻糖的纯度魏 泱,丁明玉*(清华大学化学系,北京100084)摘 要:用反相高效液相色谱法分离-蒸发光散射检测法测定了海藻糖的纯度,检测下限为5mg /L 。
在30~1000m g /L 范围内,海藻糖浓度的对数与ELSD 测得的峰面积对数具有良好的线性关系。
关键词:高效液相色谱法;蒸发光散射检测法;海藻糖中图分类号:O 657.7 文献标识码:A 文章编号:1000-0720(2001)01-0005-03 海藻糖(trehalo se )是一种二糖,由两个葡萄糖分子通过T -T-(1→1)糖苷键链接而成。
它是一种非还原性糖,在酵母中含量很高。
可以在干燥的环境中起到保护酶、疫苗等活性物质的作用,目前在化妆品、医药等方面得到了愈来愈广泛的应用。
中国科学院微生物研究所利用生物合成,从酵母中提取出高纯度的海藻糖。
传统定性分析海藻糖的方法主要是纸层析和薄层层析法。
纸层析法也可作为定量分析海藻糖的方法,但其定量的准确度和重现性都无法与高效液相色谱法(HPLC)相比。
HPLC 法通常用糖分析柱[1]、氨基键合柱[2~4]或C18柱[5,6]作固定相,以乙腈和水的混合溶剂或纯水为流动相来分析糖。
糖本身在紫外区无吸收,通常使用示差折光检测器(RID)[1,6],或者通过衍生化[2,5]后再进行检测。
RID灵敏度较低,衍生化法操作繁琐,且不可避免地会引入误差。
蒸发光散射检测器(ELSD )作为一种新型的通用型检测器,目前正得到越来越广泛的应用。
ELSD 利用了流动相与被测物之间的蒸汽压相对差异,柱洗脱液进入雾化器针管,在针的末端,洗脱液和充入的气体(通常为氮气)混合形成均匀的微小液滴;漂移管的作用在于使流动相挥发,蒸汽压较小的被测物颗粒经过漂移管进入光散射池;在光散射池中,被测物颗粒散射光源发出的光,经检测器检测散射光,产生电信号。
ELSD 在检测类酯[7]、表面活性剂[8]等物质中发挥着较大的作用,同样可以直接对糖[3,4]进行检测,且具有较高的灵敏度。
本研究力图通过实验,建立起一种快速、准确、直接测定海藻糖纯度的HPLC /ELSD 法。
1 实验与方法1.1 仪器与试剂HP1100高效液相色谱仪(美国Hew lett Packard 公司):配有四元梯度泵、二极管阵列检测器(DAD )和化学工作站。
另配有Alltech 500ELSD (美国Alltech 公司)。
海藻糖,纯度98.5%(Sigm a 公司);海藻糖样品(中国科学院微生物研究所合成);甲醇为色谱纯,其它试剂均为分析纯。
水为二次重蒸去离子水。
流动相使用前用0.45μm 滤膜过滤。
1.2 色谱条件色谱柱:Zo rbax SB-C18(4.6mm ID ×25cm ,5μm ),Hew lett Packard 公司产品,流动相:甲醇—水(4∶1,V /V ),流速:0.8m L /min;柱温:25℃;进样量:20μL;ELSD 参数:漂移管温度为75℃,氮气流速为 1.75L /min 。
1.3 标准溶液的配制称取101.5mg 海藻糖标样(98.5%)溶于100m L 甲醇中配制成储备液(对应海藻糖浓度为1000mg /L )。
使用前以甲醇稀释成适当浓度的工作溶液。
收稿日期:2000-03-02;修订日期:2000-05-19作者简介:魏 泱(1975-),男,硕士研究生—5—第20卷第1期2001年1月 分析试验室Chinese Jour na l o f Analysis Labo rato ry V ol.20.No.12001-1DOI:10.13595/ k i .i ssn 1000-0720.2001.00022 结果与讨论2.1 分离条件的选择由于海藻糖样品系生物合成,纯度很高。
在实验中,不断改变流动相中甲醇和水的比例,主要目的在于使海藻糖在合适的时间内被洗脱。
当甲醇-水的比例为4∶1时,海藻糖在3min 左右出峰。
见图1。
图1 ELSD 检测海藻糖标样(a )和样品(b )的色谱图Fig .1 C hromatograms of standard (a )and sample (b )detected by ELSD2.2 ELSD 条件优化根据流动相的种类和比例,首先设漂移管温度为70℃,氮气气速为 2.0L /min 。
保持气速不变,改变漂移管温度,观察信号基线水平和噪音,75℃时流动相基本挥发,噪音不是太大。
固定漂移管温度为75℃,观察不同氮气流速时海藻糖的信号强度,1.75L /min 为在较小噪音水平上,产生最大检测响应值的最低气速。
故选定漂移管温度为75℃,氮气气速为 1.75L /min 。
2.3 线性关系考察将海藻糖贮备液稀释配成30,50,100,300,500mg /L 的系列浓度,依次进样20μL,根据ELSD 测得的峰面积对相应的标准溶液浓度进行线性回归,发现线性很差。
以海藻糖浓度的对数对ELSD 测得的峰面积的对数进行线性回归,两者间存在着良好的线性关系,结果见表1与图2。
将最小浓度的标准溶液再逐级稀释,依次进样20μL,计算当信噪比为3时对应的标准溶液浓度以确定检出下限,得到的海藻糖检测下限为5mg /L 。
2.4 海藻糖样品的测定对同一份样品,重复进样5次,用ELSD 测定其峰面积,取5次测定平均值计算样品中海藻糖含表1 EL SD 检测海藻糖线性关系考察Tab .1 Investigat ion on linear relation between concentra -tion of trehalose and peak area detected by ELSD海藻糖浓度(×10-4%)峰面积浓度的对数值峰面积的对数值306116.0 1.477 3.7865013854.6 1.699 4.14210042876.0 2.000 4.632300194692.6 2.477 5.289500353674.5 2.699 5.5491000864179.33.0005.937图2 海藻糖浓度的对数与峰面积的对数线性关系图Fig .2 Linear relation between logarithm of concentrationand logarithm of pea k area—6—量。
在样品溶液中加入已知量的海藻糖标准溶液,测定其回收率,结果见表2。
表2 海藻糖纯度的测定结果Tab.2 Purity determination results of trehalose by ELSD 纯度(%)回收率(%)R SD(%)99.2199.420.932.5 讨论使用反相高效液相色谱法分离糖时,可以采用纯水做流动相。
利用ELSD的操作使全部柱流出物都进入直的漂移管,让流动相在其中蒸发,为了有利于蒸发必须使用较高的操作温度。
如果采用纯水做流动相,相应地,ELSD就必须采用较高的漂移管温度和较大的雾化器载气气速,使得ELSD检测的峰面积减小,降低了灵敏度。
故本文采用沸点较低的甲醇为主作为流动相。
在使用当前的色谱条件时,当海藻糖浓度为30~1000mg/L范围内,其浓度与ELSD测得的峰面积线性关系很差,而将它们取对数后再进行拟合,则可得到良好的线性关系。
采用同一台ELSD 在正相条件下,检测天麻甙(对羟甲基苯U-D-吡喃葡萄糖甙),天麻甙浓度在21.3~890mg/L范围内,其浓度与ELSD测得的峰面积线性关系很好,将它们取对数后再进行拟合,其线性关系不如前者(详情另报)。
可见ELSD的响应值与被测物浓度的关系曲线比较复杂,这与许多文献的报道是一致的,其具体关系尚处于研究中。
RID是检测糖主要的检测器之一,但它对工作环境要求很苛刻,要求恒温,恒流速,且无法采用梯度洗脱,其检测灵敏度也不够高。
ELSD的出现,在一定程度上弥补了HPLC传统检测器的不足,特别是对无紫外或紫外末端吸收的大分子有机化合物的检测,显示出其优越性。
采用高效液相色谱蒸发光散射检测验正海藻糖的纯度,方法可靠,灵敏度较高。
ELSD检测过程中,无溶剂峰干扰,基线平稳。
参考文献[1] 高文元,肖培根.中国中医杂志.1997,22(10):590[2] Steve n R H,Sa lv ato re J T.A nal Biochem.1985,146:143[3] M ac rae R,Dick J.J Ch ro ma tog r,1981,210:138[4] Clement A,Yong D,Br echet C.J Liq Chr oma to g r,1992,15(5):805[5] 丁明玉,小泉均,铃木义仁.色谱.1997,15(4):281[6] 甘宾宾.色谱.1999,17(1):87[7] M a rcato B,Cecchin G.J Chr omato g r A,1996,730:83[8] Kibbey T C G,Yav araski T P,Hay es K F.J Chr o-mato g r A,1996,752:155Purity Examination of Trehalose by HPLC with ELSD W EI Yang and DI N G Ming-yu(De-pa rtm ent o f Chemistry,Tsinghua Univ ersity, Beijing100084),Fenxi Shiyanshi,2001,20(1):5~7Abstract:A rev ersed-phase high performance ch romatog ra phy with evaporativ e light-scattering detecto r(ELSD)using m ethano l-wa ter(4∶1, v/v)as m obile phase was established fo r direct purity exa mination o f trehalo se.An ODS colum n Zo rbax C18w as em ploy ed.Reg ressio n equations rev eal linea r relationship betw een log arithm of trehalo se concentra tion and lo garithm of trehalose peak area detected by ELSD in th e range of30~1000mg/L trehalose.Recoveriy o f trehalose m ea-sured by ELSD is99.42%w ith detection limit of 5mg/L.Keywords:H ig h perfo rmance liquid chrom atog ra-phy;Ev apo ra tiv e light-scattering detector;Purity examination;Trehalose—7—。